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解读:血清融化三步法背后的秘密原理!

解读:血清融化三步法背后的秘密原理!

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

提起细胞培养中,牛血清的融化,大家首先想到的就是4℃过夜法。   今天小威把上流行多年的『血清融化三步法』介绍给大家,让你知道怎样让你的血清,通过合适的融化,事半功倍!   与4℃过夜法相比   三步法为什么对血清更好呢?   重点有二!   其一:关系到沉淀出现的几率!   记得吗?血清在融化过程中,瓶子里冰块的底部你会看见亮亮的蛋白丝在下沉,如同蜂蜜溶于水时的亮线,这就是血清中大量的蛋白在快速融化,而水的熔点高于蛋白,融化的速度是比蛋白慢的。(回想一下冰淇淋和大棒冰的区别,你懂得!)   试想,如果采用4℃过夜的方法,1瓶500毫升的血清融化好,大约需要10小时左右,蛋白先融化,沉降在瓶子的底部,水融化的速度比蛋白慢,于是造成大量蛋白溶于少量的水,此时就很容易有一些蛋白饱和析出,(大多是脂蛋白和纤连蛋白),这就是血清融化中产生沉淀的重要原因之一。   采用三步法,只要2.5个小时,温和有效地加快了水融化的速度,另一方面,融化过程中可以间断轻轻摇摆瓶子,让蛋白在瓶中混匀。   此方法不但节约了时间,而且zui大限度减少了血清沉淀出现的几率。      其二:血清在培养细胞中,zui重要的是利用它的活性的因子,因此,融化过程中zui大限度地保留因子的活性,就变得非常重要。     回忆一下,细胞复苏时,要保持细胞的活性,我们是要遵循“快融”原则还是“慢融”原则呢?   快融!   血清同样如此!   三步法需要两个半小时,   4℃过夜需要大约10个小时(冰箱一般设2-8℃,所以各实验室融化时间会稍有出入)。   哪个速度对保留活性更好?不言而喻!     三步法详细解读   下面,我们详细解读『血清的三步融化法』的步骤:   图:刚从-28℃拿出的血清,是这个样子的     融化血清*步   温度:室温   时间:100ml - 35分钟   500ml - 90分钟   1000ml - 100分钟   或   温度:15-20℃水浴(新接的自来水2

支原体是什么?

支原体是什么?

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

支原体是一种大小介于细菌和病毒之间(0.1-0.3µm),并独立生活的原核细胞型微生物,无细胞壁,多呈不规则球状、长丝状,可分枝。分布广,种类多,80余种。具有以下特点:●可以通过0.22µm 和0.45 µm 孔径的滤膜●可以自我复制●无细胞壁,有简单的质膜●有潜在的致病性:如人呼吸道疾病●有很强的适应环境的能力,但对环境的化学变化敏感●有青霉素、头孢菌素、链霉素抗性(由于青霉素、头孢的作用位点是细胞壁)。对四环素、大环内酯类、喹诺酮类敏感 。

植物 BDPG ELISA检测试剂盒

植物 BDPG ELISA检测试剂盒

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

中文名称:植物胆色素原脱氨酶(BDPG)ELISA试剂盒 英文简称:Plant BDPG ELISA Kit 规格:48T/96T 检测范围:0.5 U/L – 16 U/L zui低检测限:0.1 U/L 检测样本:血清、血浆、细胞上清液、组织匀浆及相关生物液体   名称 96孔 48孔 备注 微孔酶标板 8孔×12条 8孔×12条 2-8℃ 标准品 6支 6支 -20℃(用不完) 样本稀释液 6mL 3mL 按说明书进行稀释 检测抗体-HRP 10mL 5mL 2-8℃ 底物A 6mL 3mL 2-8℃ 底物B 6mL 3mL 2-8℃ 终止液 6mL 3mL 2-8℃ 20×浓洗涤缓冲液 25ml 15ml 无 说明书 1份 1份 无 自封袋 1个 1个 无 封板膜 2张 2张 无   需自备的设备及试剂:                                1.450±10nm滤光片酶标仪(建议仪器使用前预热) 2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL. 3.Eppendorf 移液器. 4.蒸馏水或去离子水. 5.脱脂棉吸水纸. 6.37℃恒温箱. 7.100ml和1000ml量筒. 8.准备若干个标准品稀释管.   试剂盒的储存及有效期:                               未开封的试剂盒:所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。请注意,收到试剂盒后请尽快将TMB 洗涤液,终止液保存于4℃,其他试剂保存于-20℃。 使用后的试剂盒:剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存,开封后的酶标板要加干燥剂后密封保存于-20℃,避免潮湿。     实验原理:                                      将目标抗体包被于96孔微孔板中,制成固相载体,向微孔中分别加入标准品或标本,其中的目标连接于固相载体上的抗体结合,然后加入微生物化的目标抗体,将未结合的生物素抗体洗净后,加入HRP标记和亲和素,再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值),计算样品浓度。   精密度:                                        精密度用样品测定值的变异系数CV表示

间充质干细胞培养,无血清培养基与血清培养基相比,有什么不同?

间充质干细胞培养,无血清培养基与血清培养基相比,有什么不同?

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

间充质干细胞培养,无血清培养基与血清培养基相比,有什么不同?  ​近来,国家的干细胞的政策是一个接一个。对应的,来自用户的咨询也是一个接一个。大多数的问题是:现在都在说无血清培养基,无血清培养基和血清培养基到底有什么差别?差别很大,从用途方面简单说下你感受的可能更具体。 如果你是提供间充质干细胞(MSC)药物的,差别在于: 1. 你拿到产品注册证的可能性更大、需要提供的资料更少、花的时间更少。 2.你的干细胞产品更安全。 3.你的干细胞产品性能更优越。 4.你的干细胞产品质量更稳定。 5.你的细胞产品干性更好。  如果你是做间充质干细胞(MSC)存储与应用的,差别在于: 1.你有更好的产品卖点。 2.你收获的细胞活率会更高。 3.你的操作步骤会更少。 4.你的细胞会更好消化。 5.你不需要担心不同批号的问题。  如果你是做间充质干细胞(MSC)研究的,差别在于: 1. 你更容易得到你要的蛋白。 2. 你更容易得到无干扰的药物评价结果。  要说到血清与无血清的差别,还真是得先回头看看历史。 动物血清是动物全血的一部分,有已知的组分150多种,未知组分多种。血清与培养基基础结合,可以培养多种细胞,比如悬浮的T淋巴细胞、小鼠骨髓瘤细胞、杂交瘤细胞等,贴壁的MSC细胞、MDCK细胞、VERO细胞、Hela细胞等。人们选用动物血清来培养细胞,也很自然,因为动物细胞本来就是在血液中或者是体液中生活的,加上动物血清取材方便,所以一直选用血清来培养动物细胞。 那后来怎么又出现了无血清了呢? 主要是在疫苗与制药领域,在安全性、有效性、合规性的这些要求下,自然出现的。 因为血清毕竟取自动物体内,由于存在多种人畜共感染的病毒比如疯牛病等,对疫苗与制药企业来讲,如何自证清白就很重要了。在这种情况下,选择不用血清,而用其他一些成分明确的、没有动物来源的组分,就成为了一个自然的选择了。所以,无血清培养基首先出现在疫苗、生物制药领域。比如MDCK无血清培养基(流感疫苗)、VERO

生理盐溶液制作方法

生理盐溶液制作方法

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

菌种生理性溶液为代体液,用于维持离体的组织、器官及细胞的正常生命活动。它必须具备下列条件:⑴渗透压与组织也相等;⑵应含有组织、器官维持正常机能所必需的比例适宜的各种盐类离子;⑶酸碱度应与血浆相同,并具有充分的缓冲能力;⑷应含有氧气和营养物质。常用生理溶液的配制方法动物实验中常用的生理盐溶液有生理盐水、任氏(Ringer)溶液、乐氏(Locke)溶液和台氏(Tyrode)溶液四种,其成分各异,如下表所示。几种常用生理盐溶液中的固体成分(g)的含量注意:CaCl2和MgCl2不能先加,必须在其他基础溶液混合并加蒸馏 水稀释之后,方可边搅拌边滴加CaCl2和MgCl2,否则溶液将产生沉淀。葡萄糖应在使用时加入,加入葡萄糖的溶液不能久置。几种生理溶液的用途生理盐水:即与血清 等渗之氯化钠溶液,冷血动物采用0.6%~0.65%,温血动物采用0.85%~0.9%。任氏溶液:用于青蛙及其他冷血动物。乐氏溶液:用于温血动物之心脏、子宫及其他离体脏器。用作灌流时,在使用前需通入氧气泡15min。低钙乐氏液(含无水氯化钙0.05g)用于离体小肠及豚鼠的离体器官灌注。台氏溶液:用于温血动物之离体小肠。

怎么选择价格实惠质量好的微生物净水剂mznyfcjy

怎么选择价格实惠质量好的微生物净水剂mznyfcjy

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

水变混是正常的反映,硝化系统和过滤不给力,就会使水质中的微生物、异营性细菌快速繁殖,就会看到水变的浑浊。而如果藻类繁多,不仅会导致锦鲤缺氧还会使锦鲤氨中毒或其他的鱼病。藻类的滋生会抢了锦鲤的氧气,氨氮的大量堆积会抑制硝化细菌的繁殖。那么我们改善水质浑浊,就可以选择微生物净水剂。 微生物净水剂说明书 品名:邦恒微生物净水剂;mznyfcjy 适用范围:虾蟹、鱼类、海参、贝类、龟鳖、蛙类等各种水产动物; 产品性状:粉末状; 主要成分:7种复合芽孢杆菌,有效活菌数≥400亿 CFU/克; 微生物净水剂的使用方法mznyfcjy 1、本品30-40克/亩·米; 2、本品使用1天后,隔2天会看到效果,3天内达到理想效果。效果可保持7-10天以上,建议每隔7天用1次,用量减半,可保持水色靓爽; 3、本品微好氧,建议开增氧机; 4、本品雨天使用,效果不明显; 5、本品可直接泼洒,也可浸泡6-12小时,浸泡可减少1/5用量; 6、本品一般单独使用,效果非常显著。也可配合其他活菌使用(乳酸菌、光合菌),也可配合腐植酸钠或糖蜜(红糖)效果更好,但成本需考虑! 微生物净水剂的主要功效和特点mznyfcjy 1、所含菌株具有降解有机废物的能力。彻底分解水体有机物和底部的粪便、残饵,减少底泥淤积; 2、有效解决养殖过程中出现的老浓水、老绿水、黑水等现象(老浓水、老绿水本品单独可解决。解决黑水:本品配合底改菌,连用2天,*)。清爽水质,稳定藻相,间接增加底部溶氧; 3、改善饵料系数,提高成活率,提高质量。为养殖动物提供安全、稳定的生长环境; 4、纯度高,火力强,增殖速度快。广盐性,从0度淡水到45度高盐度海水均可繁殖; 5、产酶均衡:蛋白酶、脂肪酶、脂酶、淀粉酶、纤维素酶和木聚糖酶等; 6、低于0.5ppm溶解氧环境下也可以繁殖; 7、低水温环境下也可繁殖; 8、晴雨两用。mznyfcjy   mznyfcjy

超声波物位计和雷达物位计的应用考虑

超声波物位计和雷达物位计的应用考虑

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

在物位计的应用过程中需要考虑的细节非常多,特别是超声波物位计和雷达物位计,它们的应用应该考虑哪些呢?下面仪器仪表世界网的专家来给大家介绍一下超声波物位计和雷达物位计的应用考虑事项。 超声波物位计的应用主要是考虑换能器(探头)的选择。不用于固体物位测量。 雷达物位计的应用是考虑天线和频率的选择。频率有6GHz和26GHz两种,由于6GHz属于淘汰产品,应尽量选用26GHz雷达物位计。 26GHz天线的各种种类的特点: GDRD55天线,全四氟(PTFE)密封天线,适合工况较好(测距短,液面稳定)的液体,腐蚀性液体。少量的挥发物对天线只造成轻微污染。 GDRD56,58天线:1,不绣钢喇叭天线,适合较干净没有挥发物的工况。2,不绣钢喇叭加PTFE罩天线,适合有挥发物,粉尘的工况。3,全朔料天线带PTFE罩天线,适合有挥发物,粉尘,凝结的工况。4,不绣钢喇叭带吹扫天线,经压缩空气做吹扫风,适合对天线污染严重工况。5,加天线延长管和散热管,可用于超高温工况(如钢水)。 GDRD57,全四氟(PTFE)密封自滴型平面天线,适合食品卫生工况。 导波雷达物位计发射脉冲电磁场,以导波缆为中心100mm为半径,沿缆向前传播,遇介质返回。除有非接触雷达的特点以外,导波雷达方向性好,频率低(500M-1GHz)穿透性好。缺点是显然的,尤其在固体测量中,调试维修都不方便,经常会磨损,甚至断缆。可利用导波雷达物位计低频的穿透性实现某些特殊应用。 在高温、高压工况条件下,导波雷达物位计与脉冲(非接触)雷达物位计相比更具优势。脉冲雷达天线由不锈钢和PTFE构成,而PTFEzui高使用温度200°,zui高压力4MP。当导波雷达用不锈钢和陶瓷构成时,zui高使用温度400°,zui高压力40MP。 导波雷达物位计的导波缆绳就是导波雷达的天线。 以上就是超声波物位计和雷达物位计在应用过程中应该考虑的天线问题,其他的问题大家可以进行总结哦。

费氏弧菌发光杆菌鉴定遇到的问题

费氏弧菌发光杆菌鉴定遇到的问题

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

1.费氏弧菌发光杆菌鉴定的方法和步骤是什么? 菌种鉴定一般就只要提取基因组DNA,然后PCR扩增16srDNA上GeneBank或者Eztaxon对比即可。一般序列相似度在97%以上就可以认为是同种细菌(当然也有例外,DNA序列仅仅是一个参考指标)。 2. 微生物的菌种鉴定可以鉴定到“株”一级吗? 如果你的菌株是自然界中分离得到,就只能鉴定到种,不能鉴定到株,因为多多少少和其他株系的细菌有区别,即便你做了一些特征的鉴定,发现和某一株细菌一模一样,你也没有理由说你的细菌就是那一株细菌,因为你不可能把所有的特征都做完,株和株之间的关系就相当于不同的人之间的关系,世界上不可能有完全相同的两个人。除非你知道你的细菌本来就是某一株细菌扩增出来的(而且要保证没有变异,否则就是一个新株),可是这样就没必要鉴定了。 3.为什么鉴定出来的菌种跟我想象的相差太大? 答:我们菌种鉴定使用PCR直接扩增的方法,即以客户提供的菌株为模版直接进行PCR扩增,中间不经过传代培养,因此不会引入新的污染,如果出现结果不一致的情况,一般有以下原因导致:      1、您提供的样品未经过三次分离纯化,含有其他杂菌;      2、您提供样品的情况确认如此。 建议您提供三次纯化的菌株重新进行鉴定。 4.为什么有时会出现PCR扩增不出的现象; 答:扩增不出的原因主要有以下几种:      1、您提供的菌种从严格意义上讲不是细菌或者真菌,或者是信息有误;      2、您提供的菌种为革兰氏阳性菌,由于细胞壁较厚,采用常规方法不能有效地破壁;      3、培养基或菌体中表达产物含有抑制PCR产物的组份。对于第二种或第三种情况需要提供基因组DNA。      5.PCR扩增直接测序为什么会出现套峰的现象; 答:1、测序结果个别碱基出现N,是由细菌rDNA多态性造成,对菌种鉴定没有无影响;      2、所有测序反应均出现大面积套峰,是由于您提供的样品模版不纯造成的。 费氏弧菌发光杆菌这种情况需要重新纯化菌种。 6.PCR产物克隆

elisa酶联免疫试剂盒价格分析弯曲杆菌的培养和保存方法

elisa酶联免疫试剂盒价格分析弯曲杆菌的培养和保存方法

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

一、elisa酶联免疫试剂盒价格基本原理 弯曲杆菌(Campylobacter spp.)是一种重要的食源性病原菌。弯曲杆菌属(Campylobacter genus)包括6个种及若干亚种。其中空肠弯曲杆菌(C. jejuni)、结肠弯曲杆菌(C. coli)和胎儿弯曲杆菌(C. fetus)占所有从人体分离的99%(空肠弯曲杆菌占90%)。空肠弯曲杆菌为革兰氏阴性微需氧细菌。其培养条件苛刻,在空气中不能生长,在普通培养基上也难以培养。在微需氧条件下(85 % N2, 5% O2 和10% CO2)在凝固血清和血琼脂培养基上培养48小时可见无色半透明的小菌落,zui适生长温度为42°C,在37°C下也能培养,但生长速度较慢。弯曲杆菌增菌用布氏肉汤液体培养基。常用的生长培养基为Skirrow固体培养基和Camp-BAP固体培养基。弯曲杆菌耐药实验所用培养基为MH固体培养基。为了保证弯曲杆菌的生长,通常需要在固体培养基中加入5%(v/v)的脱纤维裂解羊血。本实验简述弯曲杆菌所用培养基、培养条件、菌株分离注意事项和菌株保存方法。 二、弯曲杆菌的培养 1、培养基的配制 1)、Camp-BAP固体培养基的配制: 称取8.92g培养基,溶于200ml蒸馏水中高压灭菌,待冷却至55°C左右加入200ul添加剂A、200ul添加剂B和10ml脱纤维裂解羊血,充分摇匀后倒平板。(添加剂A和B为购买附带)。 2)、Skirrow固体培养基的配制:称取8.5g培养基,溶于200ml蒸馏水中高压灭菌,待冷却至55°C左右加入2ml FBP原液和10ml脱纤维裂解羊血,充分摇匀后倒平板。 FBP原液配置:分别称取0.5g焦亚硫酸钠、0.5g丙酮酸钠和0.5g硫酸亚铁,溶于20ml蒸馏水中,滤膜过滤除菌,放置4°C冰箱可保存一周。 3)、布氏肉汤增菌液的配制: 称取28.1g布氏肉汤粉末,溶解于1000ml蒸馏水中高压灭菌,冷却后备用。 2、增菌培养 将新鲜食品,如鸡肉,减碎,取5g置于50ml离心管中,加入布氏肉汤至液面覆盖鸡肉样品,拧紧离心管,先在37°C下预增菌4小时,在加入100 ul头孢哌酮(30mg/ml),并颠倒混匀,放置在微需氧培养箱中42°C培养48小时。

颗粒培养基为何难以凝固?

颗粒培养基为何难以凝固?

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

在微生物培养时经常会用到颗粒培养基,但是,在配制培养基过程中偶尔会出现不凝固、半凝固或者一摇晃培养基就破碎的现象,这是什么原因? 大量文献指出,琼脂的凝固程度主要受到PH值和琼脂含量的影响,PH值较低(≤4.0)时,PH值是影响凝固等级的主要因素;PH值较高(5.0~8.0)时,琼脂浓度是影响凝固等级的主要因素。药典上培养基配方中明确规定了PH值和琼脂含量,如配制操作正常,凝固应是不会出现问题的。为此,我们针对培养基出现的凝固异常进行了分析及试验: 一、培养基PH值问题:培养基灭菌前后PH值有何变化?经查阅大量相关学术研究,不同培养基灭菌前后PH普遍有这样的变化超势:高压灭菌前pH值4.5-8.0的培养基灭菌后pH值变化较小,偏酸性的略上升,偏碱性的略下降。但酸性或碱性较强的培养基灭菌前后PH值变化较大。因我们常使用的培养基pH值均在4.5-8.0范围内,所以偶尔出现的培养基凝固不好应不是PH值影响的。 二、琼脂问题:琼脂是培养基zui常用的凝固剂,是一种海藻多糖,PH在4-10之间才会形成凝胶,且其凝胶强度和琼脂糖的浓度有关。目前我们实验室使用的均是成熟配方的培养基,为什么会偶尔出现凝固不好的现象呢? 琼脂 在仔细核查了琼脂粉的生产厂家、批号、保质期及配制时的称量、溶解、定容和转移等过程。排除了琼脂粉质量问题,但发现培养基分装准备高温灭菌时,有部分经开水溶解的琼脂呈细小颗粒状沉在瓶底,即未完全溶解,后查阅资料发现,琼脂加热至95℃时才开始溶解,说明我们用热水溶解琼脂时,琼脂未能完全溶解,这可能是导致培养基难凝固的原因。于是我们在配制颗粒培养基时,先将琼脂煮沸5分钟后再分装、灭菌,zui后培养基冷却至40℃时能完全凝固。自琼脂溶解方式改变后,便未再出现培养基不凝固、半凝固或者一摇晃培养基就破碎的现象。 YSRIBIO512    Pancuronium Bromide     泮库溴铵标准品    15500-66-0     200mg     YSRIBIO513    Pancreatin Amylase and Protease (COLD SHIPMENT REQUI

离体人正常组织来源细胞培养需要的生理条件

离体人正常组织来源细胞培养需要的生理条件

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

简言之,即人正常组织来源细胞需要什么就提供什么,道理是如此,真正能做到这点尚需时日,人们至今对细胞的生命周期控制机理认识不足,癌细胞虽然也来自正常细胞,但至今不知道究竟为什么癌细胞很难停止已经启动的有害分裂,尽管如此,人们长期的研究结果表明,离体细胞培养需要的基本条件就是下列细胞生理条件。 1.温度 温度过低时细胞生长缓慢甚至不生长。利用冷冻保藏细胞可保持细胞的原有分裂分化能力。温度过高导致细胞死亡。这主要是由酶和蛋白质所需要的zui适温度决定的。多数生物大分子遇到高温后容易导致空间结构改变或者丧失(变性)。细胞膜遇到高温后容易变化。在自然界,既有耐高温的恒温培养箱恒温培养箱细胞,也有耐低温的细胞。在情况下生长的生物对付环境的机制研究在生物进化和农业、环保、发酵工业中意义重大。 2.pH 过酸或过碱可导致细胞死亡。这主要与蛋白质的变性和细胞膜的结构受损有关。 3.透压 细胞内外可溶于水的物质比例和种类决定细胞的膨胀与收缩程度,因为细胞膜是半透膜,只允许对自己有利的物质通过。同一物质在细胞内外的分布的数量不同,当某一种极溶于水的物质在细胞外浓度过大时,有可能导致细胞干瘪死亡,这些物质在细胞内过多时导致细胞过量吸水膨胀。细胞膜调节渗透压的能力是有限的。 4.养物 营养物和水一起,又叫细胞培养液,培养液中含有细胞增殖和生长所需要的各种物质。营养物包括:N 源、C源,这些物质与提供能量有关;无机盐、维生素、激素,这些物质与代谢调节控制有关。细胞培养液的设计一直是细胞离体培养技术的关键。理想的细胞培养液可以同时解决细胞离体培养所需要的pH、渗透压、营养物、调节物质的全部需要。在干细胞分化研究与应用中,关键是找到一种使干细胞分化成为所需细胞和组织的营养液。相同的人干细胞,放在不同的营养液中分化培养出人的各种脏器,这个昔日的梦想已经开始成为现实。植物细胞的组织培养技术已经基本完善配套。名贵花卉、中草药、脱

原代细胞的基本结构及作用?

原代细胞的基本结构及作用?

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

与其他系统一样,原代细胞同样有边界,有分工合作的若干组分,有信息中心对细胞的代谢和遗传进行调控。细胞的结构复杂而精巧,各种结构组分配合协调,使生命活动能够在变化的环境中自我调控、高度有序地进行。 1.细胞壁(Cell Wall) 【动物细胞没有】 位于植物细胞的zui外层,是一层透明的薄壁。它主要是由纤维素和果胶组成的,孔隙较大,物质分子可以自由透过。细胞壁对细胞起着支持和保护的作用。 2.细胞膜(Cell Membrane) 细胞壁的内侧紧贴着一层极薄的膜,叫做细胞膜。这层由蛋白质分子和磷脂双层分子组成的薄膜,水和氧气等小分子物质能够自由通过,而某些离子和大分子物质则不能自由通过,因此,它除了起着保护细胞内部的作用以外,还具有控制物质进出细胞的作用:既不让有用物质任意地渗出细胞,也不让有害物质轻易地进入细胞。   3.细胞质(Cytoplasm) 细胞膜包着的黏稠透明的物质,叫做细胞质。在细胞质中还可看到一些带折光性的颗粒,这些颗粒多数具有一定的结构和功能,类似生物体的各种器官,因此叫做细胞器。例如,在绿色植物的叶肉细胞中,能看到许多绿色的颗粒,这就是一种细胞器,叫做叶绿体。绿色植物的光合作用就是在叶绿体中进行的。 4.细胞核 原代细胞质里含有一个近似球形的细胞核(nucleolus),是由更加黏稠的物质构成的。细胞核通常位于细胞的中央,成熟的植物细胞的细胞核,往往被中央液泡推挤到细胞的边缘。细胞核中有一种物质,易被洋红、苏木精、甲基绿等碱性染料染成深色,叫做染色质(chromatin)。生物体用于传种接代的物质即遗传物质,就在染色质上。 细胞核的机能是保存遗传物质,控制生化合成和细胞代谢,决定细胞或机体的性状表现,把遗传物质从细胞(或个体)一代一代传下去。但细胞核不是孤立的起作用,而是和细胞质相互作用、相互依存而表现出细胞统一的生命过程。细胞核控制细胞质;细胞质对细胞的分化、发育和遗传也有重要的作用。 YSRIBIO806    Lorazepam Related Comp

免费代测:植物赤霉素(GA)酶联免疫分析试剂盒

免费代测:植物赤霉素(GA)酶联免疫分析试剂盒

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

免费代测:植物赤霉素(GA)酶联免疫分析试剂盒 本试剂盒仅供研究使用。 检测范围:96T 20pg/ml-480pg/ml 使用目的: 本试剂盒用于测定植物组织、细胞及相关液体样本中赤霉素(GA)含量。 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中植物赤霉素(GA)水平。用纯化的植物赤霉素(GA) 抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入赤霉素(GA),再与HRP标 记的赤霉素(GA)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深 浅和样品中的赤霉素(GA)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过 标准曲线计算样品中植物赤霉素(GA)浓度。 试剂盒组成 130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶 2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(960pg/mL)0.5ml×1瓶 3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶 4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份 5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张 6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个 标本要求 1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能 马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融 2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。 植物赤霉素(GA)酶联免疫分析试剂盒操作步骤 1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀 释。 480pg/mL5号标准品150µl的原倍标准品加入150µl标准品稀释液 240pg/mL4号标准品150µl的5号标准品加入150µl标准品稀释液 120pg/mL3号标准品150µl的4号标准品加入150µl标准品稀释液 60pg/mL2号标准品150µl的3号标准品加入150µl标准品稀释液 30pg/mL1号标准品150µl的2号标准品加入150µl标准品稀释液 2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、 待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50µl,待测

干细胞“转行” 推进器官组织再生

干细胞“转行” 推进器官组织再生

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

干细胞是尚未分化成熟的细胞,除胚胎干细胞外,多数干细胞常常“命中注定”只能成长为某一种特定的细胞。但研究成果显示,只要改变成长环境,来自胸腺的干细胞也可以“转行”变为毛囊细胞。这对于研究器官组织再生具有重要意义。    据研究人员进行的这项研究成功改变了实验鼠胸腺干细胞的“命运”。胸腺是存在于人和许多动物胸*的一个器官,它是免疫细胞T细胞的生成地,在免疫系统中发挥着重要作用。    据介绍,大部分动物的胚胎分为外胚层、中胚层和内胚层三个胚层,外胚层成长为皮肤和神经等,中胚层成长为肌肉、骨骼和血液等,内胚层成长为肠道、肝脏和胸腺等器官。过去一直认为这三个胚层的细胞间存在无法逾越的鸿沟,但本次研究证明来自内胚层的胸腺干细胞也可以变为本应属于外胚层的皮肤毛囊细胞,显示不同胚层细胞间的区分并不。    研究人员首先培养出实验鼠胸腺干细胞,然后将它转移到适宜皮肤毛囊细胞生长的环境中培养,结果发现这些胸腺干细胞在新环境中逐渐改变了自己的基因特征,越来越像皮肤毛囊的干细胞。    在这种环境中培育一段时间后,这些细胞被移植到正在生长的皮肤中,结果它们拥有了像毛囊细胞一样供养和修复毛发的能力,且表现出色。天然毛囊干细胞成长后只有三个星期的修复毛发能力,而这些胸腺干细胞“转行”后拥有长达一年的修复毛发能力。    这些胸腺干细胞在适宜毛囊干细胞成长的环境里完全改变了原定的成长轨道,从而启发研究人员使用适宜其他器官干细胞成长的环境,探索能否培育出所需的器官细胞,这对研究器官组织再生具有重要意义。

蛋白柱常见问题和日常维护

蛋白柱常见问题和日常维护

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

在蛋白分离时选择了合适的蛋白柱,有时往往不能成功地完成蛋白的分离,同一根蛋白分离柱在不同的使用者手中可能会有不同的柱寿命及分离效果,正确的使用蛋白柱和正确的日常维护是保证成功分离蛋白及延长柱寿命的关键。     不论使用什么类型的蛋白柱,首先必须对其填料的性能有基本了解。如该柱适用什么样的溶剂,什么类型的样品,流速及耐压范围等,GAT提供的各种类型的蛋白柱,在柱箱内均有详细的说明书,使用柱子前,务必要仔细阅读,以保证正确使用这些柱子。下面就蛋白分离中常出现的问题进行讨论。 1.样品不保留: 在用离子交换柱分离蛋白时,流动相的pH值对保留值影响很大,当选用阴离子型蛋白分析柱时,如#####若流动相的pH值小于蛋白的pI值时,蛋白分子阳离子状态,则在柱上没有保留,只有当流动相的pH值大于蛋白的pI值时,蛋白分子呈阴离子,才能在阴离子交换柱上得到保留。另外,当流动相或样品中的离子强度过大时,也会造成蛋白在离子交换柱上不保留。   此外,上样量过大,亦会使蛋白样品保留变弱,一般样品的上样量不应超过该填料结合蛋白量的20%,在选用GPC柱时,应特别注意填料的孔径及相应的可分离蛋白的分子量范围,若蛋白的分子量超过填料的孔径极限则蛋白样品也不保留。   在用反相色谱分离蛋白时,流动相中有机溶剂的比例会影响蛋白的保留值。有机溶剂比例过高,会使蛋白的样品与填料的作用变弱而过早地洗脱。 2.柱压过高   柱压过高的原因在于柱入口的堵塞及填料间的缝隙的减小或堵死,这些原因有:非硅胶填料的颗粒膨胀(主要是由于使用过高比例有机溶剂引起);来自样品,流动相的颗粒堵塞、细菌生长,流速过高等,为防止柱压过高,应使用符合要求的流动相组成。样品,流动相使用前严格过滤。为了保存时防止细菌生长。以硅胶为基质的柱子可使用20%有机水溶液保存。其它柱子在保存液中加入0。02%的叠氨钠。 3.性能改变   蛋白柱在使用一段时间后,其性能会有所改变(保留值变化,