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Wnt1蛋白与健康和疾病的关系
作者：德尔塔 日期：2022-04-12
的首个基因int-1发现于1984年，后被证明是黑腹果蝇无翅基因的同源基因。专有名词“Wnt-1”来源于int-1与wingless (无翅基因)的组合。后续证明Wnt家族基因具有信号通路的特性 (即学者熟知的wnt通路)。 Wnt家族的在多个物种和器官的胚胎发育和组织稳态维持中发挥重要作用，其参与引导细胞增殖，细胞极性，细胞命运决定等最基本的发育过程。Wnt通路突变通常与人类出生缺陷，癌症和其他疾病密切相关。 是由343个氨基酸组成分泌型糖蛋白，多数通过细胞表面Frizzled家族受体发挥作用，在胚胎正常发育过程中是必不可少。Wnt-1的激活会引起复杂的级联信号反应，最终导致多个基因表达上调。Wnt-1参与了人体多种细胞进程，并影响某些系统的正常功能。 当sFRP蛋白抑制Wnt或者Dkk蛋白与LRP5/6结合时，Wnt通路受抑。Axin、APC、CK1、 GSK3β和β-catenin组装成降解复合体。β-catenin蛋白被CK1和GSK3β共同磷酸化后，被βBTrCP识别并泛素化，最终被蛋白酶体降解。Wnt应答基因的转录当HDAC和GRG结合在TCF上时被抑制。 当Wnt1蛋白结合到Frizzled受体上时，Wnt1通路被激活。Axin1和Dvl被招募至细胞膜，解散胞浆β-catenin的聚积。非磷酸化的β-catenin转位至细胞核，代替GRG蛋白结合到TCF上并激活转录。 Wnt1通路与凋亡细胞的损伤控制有很大关系。Wnt1的缺失表达导致细胞凋亡，而 Wnt1在多种细胞中的表达却能发挥促进细胞存活并抑制凋亡的作用。 癌症 通路在癌症演变中发挥要作用。在前列腺癌，肺癌，乳腺癌，肝癌和结肠癌中都检测到了Wnt-1的异常激活。此外，Wnt1在人前列腺癌组织的浸润缘异常高表达，该现象也存在于转移到淋巴结和骨骼的肿瘤中。在多种肿瘤中都检测到Wnt信号通路的异常激活。例如，Wnt1的高表达与患者的晚期肿瘤转移相关。Wnt1阳性的肿瘤表现出高增殖活性，患有Wnt1阳性肿瘤的病人存活率也相对较低。此外，Wnt1信号通路的抑制能够阻碍癌细胞的迁移和浸润，这说明Wnt1信号通路可能成为癌症**的靶点。 心血管疾病 心血管
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白酒的气相色谱检测方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-12
概念： 1.酒精性饮料：含酒精成分以容量计算超过0.5%的饮料称为酒精性饮料。 2.白酒：白酒是以高粱等粮谷为主要原料，以大曲、小曲等为糖化发酵剂，经蒸煮、糖化、发酵、蒸馏、陈酿、勾兑而制成的蒸馏酒。是供人们直接饮用的食品，适量饮用不会对人体健康产生危害。 按香型分类主要为以下5种： ①浓香型白酒（以粮谷为原料，经固态发酵、贮存、勾兑而成，具有以己酸乙酯为主体的复合香气的蒸馏酒）、 ②清香型白酒（以粮谷等为主要原料，经糖化、发酵、贮存、勾兑而酿制成，具有以乙酸乙酯为主体的复合香气的蒸馏酒）、 ③米香型白酒（以大米为原料，经半固态发酵、蒸馏、贮存、勾兑而制成的，具有小曲米香特点的蒸馏酒、） ④酱香型白酒（以高粱、小麦为原料，经发酵、蒸馏、贮存、勾兑而制成的，具有酱香特点的蒸馏酒）、 ⑤兼香型白酒（以谷物为主要原料，经发酵、贮存、勾兑而酿制成，具有浓香兼酱香独特风格的蒸馏酒）。 而按生产工艺分类则为以下2种： ①固态法白酒（以粮谷为原料，经酒醅固态发酵、贮存、勾兑而成，固态法白酒大都香气浓郁，口感柔和，绵甜爽净，余味悠长） ②液态法白酒（以谷物、薯类、糖蜜等为主要原料，经液态法发酵蒸馏而得的食用酒精为酒基，再经串香、勾兑而成的白酒。液态法白酒一般没有固态法白酒那么好的香气和口感）。 无论任何类别的白酒，不论原料、工艺、香型如何不同，也不论执行国标、行标或企业标准，只要是白酒，都必须符合强制性国家标准GB2757-1981《蒸馏酒及配制酒卫生标准》的要求。 3、白酒的检测项目一般主要为：酒精度、总酸、总酯、己酸乙酯或乙酸乙酯（根据香型和标准）、固形物、甲醇、杂醇油、铅、锰、糖精钠等指标。 其中酒精度又称酒度，是白酒的重要理化指标之一，是指在20℃时，100毫升白酒中含有乙醇（酒精）的毫升数，即体积（容量）的百分数。通常以40°作为分界线，40°以下的称为低度白酒。 各种白酒检测、检查依据： GB 10781
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医用离心机校准的方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-12
医用离心机是通过高速旋转产生的离心力对不同沉淀系数混合物质进行快速分离、浓缩和提纯的专门设备，被广泛应用于医疗卫生、血站、制药厂、生物医学工程、动植物研究等领域。但是，至今在计量检测方向上没有合适的技术手段和校准方法，因此，实验室仪器--湖南吉尔森提出了医用离心机校准方法的研究，将对计量领域医用离心机技术的发展起到巨大的推动作用。 1 概述 医用离心机是产生恒加速度的一种装置，在医学、生物学和药理学等领域广泛使用的一种仪器，用于分离混悬在溶液中的颗粒和分离两种不同密度互不相溶的液体。它通常由台体、控制系统、试验参数测量显示系统及其附属设备组成。按台体结构可分为转盘式、转臂式两种类型。 2 计量特性 (1)转速示值误差：高速离心机转速相对误差不超过±1%，低速离心机转速相对误差不超过±2.5%。 (2)转速稳定性：不超过±1%。 (3)整机噪声：(A计权)应不大于90dB。 (4)定时相对偏差：数字定时装置相对偏差应不大于±1%;机械定时器相对偏差应不大于±5%。 (5)升降速时间：离心机升速时间应≤10s，降速时间应≤10s。 3 校准条件 3.1 环境条件 (1)温度：(10～40)℃; (2)相对湿度：(30～85)%; (3)电压变化范围：额定电压的10%; (4)离心机环境周围应无腐蚀性气、液体;无强电磁干扰;无振动干扰。 4 校准方法 4.1 外观 (1)离心机应有铭牌，表明型号、规格、制造厂、制造计量器具许可证标志及编号、出厂编号和日期等。 (2)离心机控制、测量现实部分应配套齐全，各插接件应连接可靠;各开关、旋钮、按键应功能正常，操作灵活可靠，并应有明显的文字或符号说明;显示部分，字符应清晰完整。 4.2 转速示值误差 离心机空载，在离心机最大转速范围内均匀选取3个转速设定值，各进行3次测量，记录离心机转速示值和校准用转速表的示值，转速示值误差按公式(1)计算，应符合4.1的规定。 [δ=n-nini×100%] (1) 式中：[
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离心机电机种类和主要区别
作者：德尔塔 日期：2022-04-12
目前市场上离心机电机主要有两种，分别是有刷电机和无刷电机。这两种电机各有特点，下面为大家介绍一下，希望对你们的选购有帮助。 1、无刷电机离心机的优点以及缺点介绍 优点：无刷电机离心机的优点在于离心机空载阻力主要来自转子与定子的旋转接触点，因此设备会在转子两端使用滚珠轴承来减小摩擦，以减少热量的发生，具有较高的效率以及转速，且用户可以自主控制转速的多少，可控性强。 缺点：无刷电机离心机的转速控制系统的造价比有刷高速电机的转速控制系统要高，而且离心机的控制器在使用中容易发生故障。现在见得比较多的就是直流无刷电动机。 2、有刷电机离心机的优点以及缺点介绍 优点：离心机设备选用有刷电机作为自身的电机形式就是在电机的内部构造电极处使用了碳刷，电机内部的2个刷(铜刷或者碳刷)是通过绝缘座固定在电动机后盖上直接将电源的正负极引入到转子的换相器上，而换相器连通了转子上的线圈，3个线圈极性不断的交替变换与外壳上固定的2块磁铁形成作用力而转动起来。这种形式的离心机具有制造简单、生产成本低等优势。 缺点：有刷电机离心机在运行中转速是不变的，因此使用者如果想调速是不容易的，又因为其换相器与其内部的转子是固定在一起的，而刷与外壳(定子)固定在一起，电动机转动时刷与换相器不断的发生摩擦产生大量的阻力与热量，所以有刷电机的效率低下损耗非常大。 以上两种电机都是常见的电机，适用不同的场合。离心机有刷电机制造成本低，所以市场价格也比较实惠，启动后工作转速恒定。适合一般实验室、科研单位使用，目前来说有刷电机一直占主导地位，但是随着技术要求越来越高，有刷电机在离心机方面的应用慢慢的在减少。而无刷电机可控性强，功率损耗小，具有噪音小，无粉尘环保等特点，虽然说价格高，却得到了大型实验室、科研单位的青睐，特别是环保、使用寿命长、节能方面的特点，使得它在离心机方面的应用越来越广。 此文章由实验室仪器--湖南吉尔森科技发展有限公司
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免疫检查点阻断疗法，原来依赖于这些细胞
作者：德尔塔 日期：2022-04-12
在与病毒或癌症的长期对抗中，精疲力竭的T细胞会逐渐丧失功能，这种状态被称为T细胞耗竭。在当今大热的免疫**中，检查点阻断会促进肿瘤浸润CD8+ T淋巴细胞的增殖。不过，这种现象背后的机理仍不清楚。 瑞士洛桑大学Werner Held领导的研究团队近日鉴定出肿瘤内Tcf1+PD-1+CD8+ T细胞，这些细胞表现出干细胞样特征，并响应**性疫苗接种和免疫检查点阻断免疫疗法，促进肿瘤控制。 这篇题为“Intratumoral Tcf1+PD-1+CD8+ T Cells with Stem-like Properties Promote Tumor Control in Response to Vaccination and Checkpoint Blockade Immunotherapy”的文章于1月15日发表在《Immunity》杂志上。 检查点阻断介导了肿瘤浸润CD8+ T淋巴细胞（TIL）的增殖反应。这种反应的来源仍不清楚，因为慢性活化促进了T细胞的终末分化，也就是T细胞耗竭。研究人员此次鉴定出肿瘤反应性TIL的亚群，它们表现出耗竭细胞和中枢记忆细胞的标志，也就是表达检查点蛋白PD-1和转录因子Tcf1。 他们发现，Tcf1+PD-1+ TIL介导了免疫**时的增殖反应，产生了Tcf1+PD-1+细胞和分化的Tcf1−PD-1+细胞。Tcf1+PD-1+ TIL的消融限制了对免疫**的响应。Tcf1不是产生Tcf1+PD-1+ TIL所必需的，但对于维持这些细胞的干细胞样功能是必需的。 他们在黑色素瘤患者血液的肿瘤反应性CD8+ T细胞和原发性黑色素瘤的TIL中检测到人Tcf1+PD-1+细胞。因此，免疫检查点的阻断不依赖于T细胞耗竭程序的逆转，而是依赖于干细胞样TIL亚群的增殖。 背景 CD8+ T细胞在某些肿瘤中的浸润程度可以预测患者的总生存率，表明淋巴细胞可限制肿瘤生长。尽管如此，大多数浸润的肿瘤仍有进展，表明这种自发的抗肿瘤免疫反应通常不足以控制肿瘤。免疫**旨在增强抗肿瘤的免疫应答，以诱导持久的肿瘤控制。目前的方法包括过继性T细胞**以及抑制性受体（免疫检查点）的阻断。 在与病毒或肿瘤的长期对抗中，T细胞的功能会逐渐丧失（称为T细胞耗竭）。它们失去效应功能，并诱导T细胞功能的
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金黄色葡萄球菌快速检测方法的研究进展
作者：德尔塔 日期：2022-04-12
金黄色葡萄球菌属革兰氏阳性球菌，广泛分布于空气、水、土壤、饲料中，也存在于人、动物的体表、鼻咽喉及肠道,属于人兽共患病原菌。其中，金黄色葡萄球菌致病力最强，除引起皮肤组织及器官化脓炎症外，所产生的毒素污染食物，导致食物中毒。近年来，由金黄色葡萄球菌引起的食物中毒事件颇多。据美国疾控中心报道，由金黄色葡萄球菌引起的食物中毒位居第2位，仅次于大肠杆菌，占整个细菌性食物中毒病例的33%，加拿大则高达45%。同时，金黄色葡萄球菌也是引起奶牛乳房炎的主要致病因子之一，给养殖业造成巨大的经济损失。 目前，金黄色葡萄球菌的快速检测方法大致可分为3种：一是快速检测培养基法；二是免疫学方法；三是以核酸为基础的分子生物学方法等[1]。 中国微生物菌种查询网 1快速检测培养基法 1.1显色培养基检测 显色培养基（Chromogenic/Fluorogenic Culture Media）是一类利用微生物自身代谢产生的酶与相应显色底物反应显色的原理来检测微生物的新型培养基，减少了对菌株进行纯培养和进一步生化鉴定的步骤[2]。 1974年Dr.Alain研制的CHROMagar Staph aureus（CSA）是以金黄色葡萄球菌的DNA酶和凝固酶为主要标志酶，以甲苯胺蓝、甲基绿、吖啶橙和5-溴-4-氯-3吲哚-胸苷-3磷酸等为显色底物来鉴定该菌的显色培养基。法国梅里埃公司研制的Baird Parker+Rabbit Plasma Fibrinogen(RPF)培养基，通过培养，生长出的灰色到黑色的且不透明的菌落即为金黄色葡萄球菌，因该培养基中含有兔血浆，所以无需作血浆凝固酶试验做进一步确认[3]。黄吉城等[4]人曾用该培养基和国标法相比较，总相符率达98%，且检测时间大大缩短。另外，我国青岛海博生物公司也研制出类似产品，现已被广泛使用。 1.2纸片法 利用金黄色葡萄球菌在培养过程中产生的热稳定核酸酶与显色剂反应形成粉红色环来检测该菌的存在。 美国3M公司生产的PetrifilmTM金黄色葡萄球菌测试片，该测试片有两部分组成，一部分是经改良的Baird-Parker培养基，对金黄色
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大鼠C-反应蛋白(CRP)酶联免疫检测
作者：德尔塔 日期：2022-04-12
大鼠C-反应蛋白(CRP)酶联免疫 检测试剂盒使用说明书 AE90989Ra 使用前仔细阅读本说明书。本酶联免疫试剂盒是基于双抗体夹心技术原理，来检测大鼠C-反应蛋白(CRP)，只能用于研究用途，不得用于医学诊断。 用 途：用于大鼠血清、血浆及相关液体样本中C-反应蛋白(CRP)测定。 工作原理: 本试剂盒采用的是生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）测定样品中大鼠C-反应蛋白(CRP)水平。向预先包被了大鼠C-反应蛋白(CRP)单克隆抗体的酶标孔中加入大鼠C-反应蛋白(CRP)，温育；温育后，加入生物素标记的抗C-反应蛋白(CRP)抗体。再与链霉亲和素-HRP结合，形成免疫复合物，再经过温育和洗涤，去除未结合的酶，然后加入底物A、B，产生蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅与样品中大鼠C-反应蛋白(CRP)的浓度呈正相关。 试剂盒组成: 试剂盒组成 48孔配置 96孔配置 保存 说明书 1份 1份 封板膜 2片（48） 2片（96） 密封袋 1个 1个 酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存 标准品4800μg/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存 标准品稀释液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存 链霉亲和素-HRP 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 生物素标记的抗CRP抗体 0.5ml×1瓶 1 ml×1瓶 2-8℃保存 显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 终止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存 浓缩洗涤液 （20ml×20倍）×1瓶 （20ml×30倍）×1瓶 2-8℃保存 需要而未提供的试剂和器材: 37℃恒温箱。 标准规格酶标仪。 精密移液器及一次性吸头 蒸馏水， 一次性试管 吸水纸 注意事项: 从2-8℃取出的试剂盒，在开启试剂盒之前要室温平衡至
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观赏向日葵的花色多样性及其与花青苷的关系
作者：德尔塔 日期：2022-04-12
摘 要 : 利用英国皇家园艺学会比色卡 (RHSCC) 和分光色差仪测定法将 36份观赏向日葵的花色分为两大类 , 即黄色系和红色系。 红色系向日葵的花色变异较小 ; 黄色系向日葵的花色变异较大 。 黄色系向日葵又可分为柠檬黄色和橙黄色两个亚类 。 高效液相色谱法 (HPLC) 的分析结果表明 , 试验材料中含有的花青苷共有 9种 , 但这 9种花青苷中只有其中的一种在所有样品中均能检测到 。 对红色向日葵花瓣的花青苷提取液进行多级质谱分析发现 , 花青苷元类型主要是矢车菊素 , 其糖苷类型主要是和葡萄糖、 鼠李糖和 /或阿拉伯糖结合的配糖体 ; 而在纯黄色的向日葵中未检测到这些花青苷 , 说明矢车菊类花青苷是红色向日葵舌状花显现红色的化学基础 。 关键词 : 向日葵 ; 观赏向日葵 ; 舌状花 ; 花色 ; 多态性 ; 花青素 1 材料和取样 试验材料种植于中国科学院植物研究所北京市大兴区向日葵种植实验基地 , 于 2006年 6—7月向 日葵盛花期 , 选择健康生长植株的花盘 , 用 OLYMPUS C730UZ照相机记录其花形等性状 , 摘取该花盘的所有舌状花 , 具有明显双色的花瓣用剪刀将两部分剪开 , 分别存于保鲜袋内 , 共得到试验材料172份 。 存于保鲜袋内的花瓣在测定其花色之后用液氮研磨 , 保存于 - 40 ℃的冰箱中备用 。 2 方法 使用英国皇家园艺学会比色卡 (Royal Horticultural Society Colour Chart, 简称 RHSCC) 进行颜色初步测量 。 RHSCC将花色从黄绿色到紫褐色分为若干个数量级 (1、 2、 …、 80、 81、 82) , 并将每个数量级又分为 4个等级 (A、 B、 C、 D ) 。 花朵采集后取其新鲜花瓣 , 在自然光下将舌状花中间部分和 RHSCC卡进行对比 , 用比色卡上最接近花色的代码来表示这个花瓣的 RHSCC值 (Voss, 1992;W ang et al. , 2004) 。 用分光色差仪 ( Spectrophotometer, NF333型 , 日本电色工业株式会社生产 , 光源 C /2°) 按国际照明委员会 ( International Comm ission on Illum ination, C IE) 表色系统进行测定。 花色的 C IE L
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GABA能神经元和谷氨酸能神经元在电针镇痛效应中的新机制
作者：德尔塔 日期：2022-04-12
研究背景： 电针镇痛效应目前已经在世界范围内得到了广泛认可，但其在中枢神经系统的确切靶点和细胞特异性的镇痛机制仍然没有得到充分的认识。［1-3］。已有研究证实，电针可以诱导c-fos在中脑导水管周围灰质（periaqueductal gray, PAG）中特异性表达［4］，腹外侧中脑导水管周围灰质(ventrolateral periaqueductal gray, vlPAG)是介导疼痛调节的神经通路的重要组成部分［5］。 内源性镇痛物质阿片肽和大麻素通过间接抑制局部GABA能中间神经元的抑制效应来激活下行通路，因此使输出神经元对脊髓的痛觉信息传递产生去抑制作用［6］。内源性大麻素系统是中枢神经系统中控制疼痛传导和针刺镇痛的重要神经调节系统，其介导的抗伤害作用在下行抑制性镇痛通路的激活中起到重要作用［7-8］。 vlPAG中的GABA能神经元和谷氨酸能神经元在伤害性信息处理中起着重要而又复杂的作用。在vlPAG中微量注射谷氨酸激动剂或GABA拮抗剂可以产生显著的抗伤害性刺激效应［9,10］。大麻素受体1(Cannabinoid receptor 1, CB1)在PAG中GABA能神经元和谷氨酸能神经元的神经末梢均有表达，CB1受体的激活可能调节GABA能和谷氨酸能神经元的传递［11-12］。之前的研究结果表明，CB1受体参与电针镇痛［13］。那么vlPAG中GABA能神经元和谷氨酸能神经元是否参与CB1受体介导的电针镇痛呢？ 2019年5月17日，华中科技大学同济医学院神经生物学系李熳团队在《Frontiers in Neuroscience》上在线发表了题为“Inhibition of GABAergic Neurons and Excitation of Glutamatergic Neurons in the Ventrolateral Periaqueductal Gray Participate in Electroacupuncture Analgesia Mediated by Cannabinoid Receptor”的文章。该研究发现了电针通过CB1受体激活vIPAG中GABA能神经元和抑制谷氨酸能神经元而发挥镇痛作用，vIPAG中GABA能神经元上的CB1受体是电针镇痛的重要靶点。该研究为电针能够通过CB1受体双向调控vIPAG中的GABA能神经元和谷氨酸能神经元而产生镇痛
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关于口腔拭子的用途及使用原理
作者：德尔塔 日期：2022-04-12
关于口腔拭子这款产品介绍 ● 采用专利的尼龙植绒技术，样本吸收更加快速 ● 新颖的折点设计，让拭子轻松折断并进入管中，更加便于操作 ● 最大限度的样本洗脱及转移，对微量DNA样本采集尤为出色 ● 经过抗菌剂的特殊处理，防止微生物污染 ● GMP标准生产，封闭式包装，无菌、无酶、无抑制剂，保证结果可靠 ● 不再需要样品干燥，由于较强的抗菌作用，样本无需干燥，即可直接转移至管中，可承受更潮湿的条件 ● 根据解剖学和人体工程学原理设计，对不同形状物体表面的微量DNA采集更加有效 l ScitheraR 拭子特点 1.超级便捷：专利一体化设计，更容易操作。 2.出众的灵活性：专利水样采集器和棉签拭子设计，能采集不同量的水样，提高了拭子的检测范围和灵活性。 3.卓越的准确性和重复性：试剂采用专利的热稳定性酶，灵敏度更高，保存稳定性更好！2-8 ℃保存条件下能保证15个月之内稳定。室温（20-25 ℃）可保存40天。 4.兼容性最广：能与市面上大多数荧光检测仪（如Hygiena plus/Ensure, 3M CleanTrace等）兼容，并提供能替代进口品牌的检测棒，无需调整现有的限值。 1.口腔拭子产品用途： 细菌ATP生物发光检测拭子是武汉赛思锐微生物技术有限公司自主研发和生产的，能对物体表面上或水样中的细菌总数进行快速检测，灵敏性高、重复性好、简便，在食品卫生、环保检测等行业有广泛的用途。 2.口腔拭子检测原理： 通过拭子自带的水样采集器或者棉签对于样本进行采集后，与拭子内的细菌裂解液作用释放出ATP,荧光素酶催化ATP和荧光素反应发光，通过检测发光体系中的发光值来定量ATP浓度。对于活体微生物，因均含有较恒定水平的ATP,使得发光值与活体微生物含量之间有较好的线性关系。 3.检测灵敏度：与便携式ATP生物发光检测仪配套，检测最低限可达到1x10-15mol ATP. 4.储存环境及有效期： 检测拭子在2～8 ℃避光保存，可稳定15个月。 5.口腔拭子规格： 分为表面检测拭子和水质检测拭子两大类和6种检测拭子，各检测棒之间的差别和特点请
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敲降斑马鱼基因的方法学比较
作者：德尔塔 日期：2022-04-12
一、基因敲降的前期准备工作相同 1.1 生物信息学分析目标基因在斑马鱼早期胚胎发送过程中是否有表达。 1.2 收集斑马鱼早期发育胚胎（通常为48 hpf前的胚胎），提取总RNA，然后进行体外转录（RT）。 1.3 设计检测目标基因表达的PCR引物，以1.2获得的cDNA为模板，进行PCR扩增，确认目标基因在早期有表达。 二、MO法与CRISPRi法的敲降原理不同 2.1 MO是在转录后水平上敲降基因的功能（MO-Spl阻遏原始转录本的剪接，MO-Atg阻遏成熟转录本的翻译）（基因转录后调控） 2.2 CRISPRi 是在转录水平上敲降基因的功能（抑制基因的转录）(基因转录水平的调控）。 敲降工具有效性验证的方法不同 3.1 吗啡啉敲降法（确认有效性）的技术路线 抑制翻译的MO（MO-Atg）和抑制剪接的MO（MO-Spl）二者敲降基因的有效性评价方法不同。抑制剪接的MO（MO-Spl）的有效性评价方法是通过RT-PCR直接检测原始mRNA转录本的正常剪接是否被改变；抑制翻译的MO（MO-Atg）的有效性评价通常需要通过蛋白质印迹法进行检测。但是，由于适用于斑马鱼的抗体很少，过去一般通过报告基因法来进行有效性评价（参见我们发表的论文Dong et al., 2017. J Biol Chem. 292(31):13045-13055 )，但后来斑马鱼领域给出的MO使用指南（见已发表的研究论文：Stainier et al., 2017. Plos Genetics, 13(10): e1007000）指出这种报告基因评价法缺乏特异性，因而不再推荐该报告基因评价方法。也正是由于没有相应比较方便的评价方法，一般不推荐此种抑制翻译（MO-Atg）的MO敲降法。确认抑制剪接的MO（MO-Spl）敲降基因有效性的技术路线如下： 3.1.1 分析斑马鱼目标基因的基因组组成（外显子-内含子结构），然后针对该基因，设计阻遏原始转录本剪接的吗啡啉（morpholino）（MO-Spl）。 注：MO-spl不能阻止母源转录本的翻译，如果要阻止母源转录本的翻译，需要设计阻遏原始转录本翻译的吗啡啉（MO-Atg）。 3.1.2 订购吗啡啉MO-Spl或MO-Atg和标准对照MO。 3.1.3 将不同浓度的MO
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实验动物的第二位挑大梁能手-大鼠
作者：德尔塔 日期：2022-04-12
学者在Open Access里随机挑选了276 篇有关模式动物的学术论文，除去小鼠（Mouse）比例，其中有16 篇使用大鼠（Rat）作为了实验动物，大鼠无疑成为了实验动物的第二主角。而很多接触实验动物的同学们，对大鼠的了解却少之又少，可能对其还仅仅停留于它体型庞大，性格凶残等表象，其实，这样的理解不仅仅存在错误并且远远不够。 大鼠（Rat）属于野生褐家鼠的变种，在动物学分类上属于哺乳纲、啮齿目、鼠科、大鼠属。在这16篇大鼠文章中，有8篇用到Sprague-Dawley（SD）大鼠，7篇用到Wistar大鼠，也就是说它们是最常用的的两种大鼠品系。 下面以最常用到SD大鼠为例，首先看一组她们从出生到老去的照片，萌萌的非常可爱！ 刚出生10天的SD仔鼠：约15 g，咋一看有点像一只小宠物猪，此时全身已经覆盖毛发，但眼睛和耳朵都还未睁开，依偎在母亲身边，找安全感呢。 2周左右，开始了它的童年生活了，约重50g，毛发浓密了，眼睛和耳朵都长开了，俨然像一只小大鼠啦！ 大鼠与人类相比，可怜的几乎没有童年，它的童年是非常短暂并加速成长的，约在6周龄时，就达到性成熟，体重约为150g。雄鼠比雌鼠重几十克。 一般6-8周（2个月）的大鼠用于实验，体重大概达到200g左右，其体长不小于18～20 cm。 6个月大鼠达到体成熟，即各器官生长发育基本结束。雄性大鼠体重300～500g，雌性大鼠250～500 g。 上图我们看到大鼠几个关键阶段的写照，由于在不同阶段的大鼠，其解剖学，生理学及生物行为存在较大差异，并且研究发现大鼠的成长和衰老过程并非和人类一致，即它三年的寿命并非是人类衰老的缩影。 为了更准确反映人类疾病发展情况，我们还必须需要了解大鼠每个阶段与人类对应关系。 大鼠与人类年龄对比关系 我们通常会把一个人分为幼儿期、童年期、青春期、成年期、中年期及老年期等，同样有文献报道大鼠与人类的年龄也有某种联系，它们的对应关系并非线性，属于离散量。 大鼠一般寿命2-3年，在1.5个月就达到性成熟，
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基因型鉴定试剂盒使用说明书
作者：德尔塔 日期：2022-04-12
试剂盒成分 1、 YSY Buffer 2、2*PCR Master Mix（使用实验室常用的酶即可，由客户自备） 储藏条件：4oC 实验步骤 1、细胞与动物组织的准备： 1.1 培养细胞准备： 以培养密度为 1´106 个/ml 为例，在超净台内取 1ml（内含 300-1000 个细胞）；对于某些类贴壁细 胞，可直接刮取侧壁细胞，植入已编号的 PCR 管内。 血液准备： 取适当部位，采集血液 1 ml。 注意：如果样品在 10 分钟内处理，则无需抗凝处理；在高通量采样情况下，如果样品在塑料PCR管内需存放 10 分钟以上，需采用抗凝处理。 1.3 哺乳动物组织准备： 采集相应部位，剪取 1mm3（1 ml）左右组织放入已编号的 PCR 管内。 1.4 斑马鱼尾鳍、果蝇等其他模式动物组织准备： 选取尾鳍、翅膀等无损害部位，可通过剪取、穿孔或针刺等方法制备少量新鲜组织，体积约 1mm3 即 1 ml。 2、基因组 DNA 模板的制备 加样 10ml 的 YSYBuffer 液分别逐一加入装有组织或细胞的 PCR 管壁（注意勿将枪头碰到组织 YSY Biotech 基因的故事 让斑马鱼来为您讲述 样品，防止污染）；加样完毕后，将 PCR 管快速离心，确保溶液和组织或细胞均位于 PCR 管 底部； 制备基因组模板 PCR 管放入 PCR 仪中，启动 PCR 程序：65℃×30min、95℃×5min、16℃×1min。基因组 模板若不立即使用，请放入-20℃保存。 3、目标基因的 PCR 扩增（以下试剂请自备） 3.1 取用新的 PCR 管，按下列顺序组装 PCR 反应体系： 20 ml 反应体系（产物直接凝胶电泳进行基因型鉴定用） 基因组 DNA 模板（步骤 2.2 所得）：1 ml 2 × PCR Master Mix：10 ml（自备） 正向引物（5mM）： 1ml （自备） 反向引物（5mM）： 1ml （自备） 超纯水： 7 ml（自备） 组装完毕后，将 PCR 管快速离心，确保所有溶液均位于 PCR 管底部； 将 PCR 管放入 PCR 仪中，启动客户自行设计的 PCR 程序完成 PCR 扩增。 4、PCR 产物验证 取
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点将科技助力森林水文过程研究
作者：德尔塔 日期：2022-04-12
2019年3月至7月，点将科技多次派遣工程师赴南岭北江源森林生态系统国家定位观测研究站进行森林水文过程研究设备安装、调试，项目实施期间多次冒着暴雨、冰雹、酷暑等恶劣天气条件进行户外作业，只为助力森林水文过程研究。 森林水文过程研究项目是中国林业科学研究院热带林业研究所提出的研究课题，点将科技作为项目设计协助方以及设备供应商，在整个项目过程中提供专业的技术支持、专业的仪器设备，并且派遣专业的仪器应用团队赴现场安装调试仪器。 水是森林生态系统物质循环的重要物质，同时也作为系统物质和能量循环以及森林生态水文过程的主要载体参与森林生态系统调控过程。从水量平衡看，不同植物种以及其按一定的空间结构组成的林分对大气降水具有不同的分配特征。因此，正确观测和分析森林对降雨的分配规律，对分析认识森林制备对水调节和分配作用，以及由此产生的空间格局和过程有着重要的意义。 森林水文项目使用仪器包括GRWS100研究级自动气象站、PE-SF08 植物插针茎流系统、SS-MP09 土壤多参数观测系统、径流监测系统、WS-EV蒸发站、HOBO H21小型自动气象站、激光雨滴谱监测系统、小流域流量监测系统、林间穿透雨监测系统、SS-ES30 大型野外全自动称重式土壤蒸渗系统等等。该项目从各个角度观测森林水文情况，现场部署9个全国首创的全封闭式径流场。通过气象站、蒸发站、大型蒸渗系统监测降雨以及蒸发情况；利用土壤观测系统中的多层土壤传感器监测水分在土壤中的分布、运动情况；再加上径流监测系统监测地表径流、壤中流等；另外部署小流域流量监测系统，监测森林环境中各小流域的流量；再配合植物茎流系统，监测植物对水分的利用情况。 森林水文过程研究项目全方位的监测森林中的水文过程，将水从来源到去向整个过程都使用仪器进行监测，利用监测数据全方位的分析森林水文过程，对森林水循环、森林对水的调节和分配等研究提供全面的数据。 树干液流监测数据 南岭北江源森林
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人Toll样受体7(TLR7)ELISA试剂盒说明书
作者：德尔塔 日期：2022-04-12
人Toll样受体7(TLR7)ELISA试剂盒正常值范围上海仁捷生物科技有限公司专业经营生产ELISA试剂盒，科研化试剂、分析试剂 ，代理许多先进水平的高科技产品，包括分子生物学、细胞生物学、免疫学、诊断等多个研究及应用领域。我们努力将欧美专业生产厂家的具有先进水平的产品推荐给各类研究人员；另一方面也非常重视自主产品研究和开发，推出了一系列具有竞争力的产品和服务。 人Toll样受体7(TLR7)ELISA试剂盒正常值范围品牌： RENJIBIO 检测方法： ELISA酶联免疫法 说明书：说明书随货发送，也可直接联系在线销售索取 测试种属：人、大小鼠、豚鼠、兔子、牛、羊、猪、鸡、鸭elisa试剂盒等种属 保存条件：2~8℃，温度6摄氏度，有效期6个月。 产地：进口/国产 库存：现货供应。 性状：48T/96T，盒装液体 品牌：仁捷生物/进口原装 检测波长：450nm 研究领域：炎症研究、神经生物学、新陈代谢、信号通路、免疫学。 注意要点：仅供科研实验，不得用于其他用途；请仔细阅读使用说明书,严格遵照规定操作,必能得出准确的结果. 可同时检测天然或重组的，且与其他相关蛋白无交叉反应。 适用范围：此试剂盒仅用于科研实验，禁用于临床 预期应用：ELISA法定量测定、、细胞上清或其它相关生物中的含量. 运输方面：现货供应，一般为快递运输，江浙沪隔天到，外地及偏远地方三至五天时间到货。 免费代测，从标本收集、保存、预试验、实验、数据分析等全实验提供完整的技术指导 人Toll样受体7(TLR7)ELISA试剂盒正常值范围组成及试剂配制 1：预包被板: 96T/48T 2：酶标记: (30倍浓缩)HRPIgG,亲合纯化 0.4mL x 1 3：品: -6 0.5mL x 2 4：EIA缓冲液: 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 30mL x 1 5：标记稀释液: 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 12mL x 1 6：显色剂: TMB底物液 15mL x 1 7：终止液: 1N 12mL x 1 8：浓缩洗涤液: (40倍浓缩) 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 50mL x 1 人Toll样受体7(TLR7)ELISA试剂盒正常值范围用户评价： 张：销售服务态度
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