-
活细胞双色动态超高分辨率成像之STED标记方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
随着技术的发展，在超高分辨率显微成像技术的使用上，科学家已经不满足于只观察固定细胞或组织的亚细胞器超微结构，活细胞超微结构的动态超高分辨率追踪由于可以提供常规显微镜下无法观察到的更接近自然状态的微观变化，日益成为研究人员竞相涉足的领域。 STED (Stimulated emission depletion, 受激发射损耗) 超高分辨率成像是纯光学意义上的超高分辨率技术，成像过程只需打开 STED 激光而无需后期计算，就可以快速得到超高分辨率图像。因此在活细胞动态超高分辨成像方面，相比其他的超高分辨率技术，STED 存在先天的优势。 ▲ 图 1. 多色超高分辨率显微成像：3 个 STED通道 + 1 个共聚焦通道。 STED：Alexa 647-波形蛋白 (红色)、Alexa 594 -α 微管蛋白 (绿色)、Alexa 488-微丝 (青绿色)。共聚焦：DAPI-DNA (蓝色)。致谢：Eugene Katrukha，荷兰乌特勒支大学 有机染料的开发 众所周知，超高分辨率成像技术 (包括 STED) 都需要将目标结构标记上荧光比较强且光稳定性好的染料，特别是活细胞超高分辨率成像就更是如此。传统的活细胞成像方法主要是通过在细胞中转染荧光蛋白而实现。相比之下，有机染料比荧光蛋白更有优势，因为它们能产生比荧光蛋白高几个数量级的光子，从而在成像时能达到更好的分辨率。但是，能和 STED 成像匹配的活细胞有机染料并不多，因为大多数的有机染料都不能透过细胞膜和活细胞内的结构特异性结合。 SiR 染料 (硅罗丹明) 的发现使 STED 活细胞成像向前推进了一大步。这种染料可轻松穿透细胞膜进入细胞，并且荧光亮度和稳定性都非常好。SiR的化学结构和光谱性能如图2，激发峰在 650 nm, 使用 775 nm 波长作为损耗光即可做 STED 成像。因为具备近红外染料的特性，SiR染色可以在更低的损耗激光能量之下得到更好的分辨率。目前，市场上已经有商品化的 SiR-Tubulin 和 SiR-actin, 直接加入活细胞中，就可以实时采集到细胞内微丝和微管的超高分辨率图像。 ▲ 图 2. SiR的化学结构和光
-
阿症斑块：厚组织中目标的快速可视化
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
在所有诊断出的痴呆病例中，超过 60% 归因于阿尔茨海默症 (下称阿症)，我国目前的阿症患者约600万，平均每年还有30万老年人加入这一行列。但是，现在的医疗水平还无法治愈阿症，市面上的所有药物都只能延缓疾病的进程，好消息是，众多的神经生物学家正在努力尝试从发病机理上减轻患者症状。 斯坦福大学 Mehrdad Shamloo 教授实验室致力于脑部疾病功能研究以及阿症新疗法的开发，如利用阿症动物模型研究发病机理，其中最重要的研究手段为对厚厚的大脑组织进行成像。 阿症病程发展的一个明显的变化是脑组织 τ 蛋白积累 (神经原纤维缠结) 导致的细胞变性，其次是脑细胞外致密颗粒 ( ”老年斑” ) 的出现。这些斑块由折叠错误的 β-淀粉样蛋白组成，由于对酶活性具有抗性，因此容易在脑组织中积累[1]。 借助徕卡新型 THUNDER Imager 3D Cell Culture 高分辨率宽场显微镜，Shamloo 教授获得 40 μm 厚、未透明化脑组织的大量 Z-stack 图像数据，成像清晰度之高、速度之快让人眼前一亮！ ▲图1：小鼠海马体纵向切片。左，普通宽场显微镜图像；右，THUNDER 成像。 β-淀粉样蛋白斑块 (绿色，6E10) 由小神经胶质细胞/小噬细胞包围 (红色，Anti-Abi1)，蓝色为细胞核 (DAPI)。 图片由斯坦福大学 Mehrdad Shamloo 教授提供 THUNDER Imager 3D Live Cell , 3D Cell Culture 和 3D Assay 为徕卡 THUDNER 高分辨率宽场显微镜家族成员，采用徕卡最新开发的高清宽场成像专利技术，在实现高速、高分辨率的同时具有宽场显微成像一样的极低光毒性与超快速度，特别适合弱荧光活细胞和细胞团 (肿瘤球、类器官…) 样品的长时间高清晰成像和 Z-stack 多层扫描、3D重构。 轻而易举即可观察到如 Mehrdad Shamloo 教授实验中的厚组织、纳米级的阿症淀粉样蛋白斑块和小胶质细胞。 参考 1. Alzheimer A: “Über eine eigenartige Erkrankung der Hirnrinde”. Vortrag (3. November) auf der Versammlung Südwestdeutscher Irrenärzte
-
抗体筛选技术汇总
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
近年来，生物药的市场需求逐年扩容，其中抗体药物因其靶向性好，**效果显著，在生物药中占据着举足轻重的地位，目前已经进入了抗体药物发展的黄金时代。随着抗体药的需求越来越大，抗体筛选技术的发展也是日新月异，目前应用较普遍的有杂交瘤技术、抗体文库筛选技术、纳米抗体技术和转基因小鼠抗体筛选技术。其中抗体文库筛选又分为噬菌体展示筛选技术、酵母表面展示技术、核糖体展示技术和mRNA展示筛选技术。接下来，小编带大家一起来了解一下这些抗体筛选技术。 杂交瘤技术制备单克隆抗体 1975年，Kohler和Milstein发现将小鼠骨髓瘤细胞和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞进行融合，形成的杂交细胞既可产生抗体，又可无限增殖，从而创立了单克隆抗体杂交瘤技术。这一技术上的突破不仅为医学与生物学基础研究开创了新纪元，也为临床疾病的诊断、预防和**提供了新的方法。单克隆抗体，是由单一B细胞产生的高度均一、识别特定抗原表位的抗体。 Fig1 单克隆抗体制备[1] 许多**性单克隆抗体已广泛用于肿瘤、自身免疫和感染等疾病的**[2]，单克隆抗体在临床疾病的诊断和**中发挥重要作用，其主要的作用机理如图2所示[3]，基于单克隆抗体的抗体药是目前**多种疾病的有效方法。 Fig2 单克隆抗体的分类及作用机理 噬菌体展示筛选技术 2018年10月3日George Smith教授因其在噬菌体展示相关研究方面的贡献获得了诺贝尔化学奖，近年来，噬菌体展示技术正被广泛用于抗体药物的研发，已有大量的上市药物被批准使用，其原理为将B淋巴细胞的抗体重链可变区（VH）和轻链可变区（VL）采用PCR方法进行扩增，将扩增的片段插入到噬菌体载体中，抗体分子Fab片段或者单链抗体（scFv）与单链噬菌体外壳蛋白以融合蛋白的形式展示在噬菌体表面，再将噬菌体转染至宿主细胞中进行增殖，待成熟后释放出来，最后利用抗原筛选的方法经过亲和吸附-洗脱-扩增等步骤后即可获得靶抗原特异性的单克隆噬菌体抗体[4]。 Fig3 噬
-
如何正确地离心细胞外泌体
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
免费的离心机小课堂你要不要看一下？ 接下来，开启今天的离心小课堂！ 外泌体是由细胞 (正常细胞和异常细胞均可）分泌的， 大多数外泌体直径分布在30〜lOOnm之间。 外泌体中携带多种蛋白质、脂类、DNA 和RNA等重要信息。 目前普遍认为外泌体是细胞之间沟通交流的纽带。 从胞内生成的信息素都会被 外泌体包裹传送到其他细胞内， 从而控制细胞集落有序生长。 在细胞培养中，以及各种体液中， 如血液、唾液、尿液、脑脊液和乳液中， 均可找到其踪迹。 与国内外泌体研究现状不同，在欧美国家已经有外泌体向商用发展的趋势了。近日，Direct Biologies公司宣布推出临床级ExoFlo外泌体。 该公司是一家致力于再生医学的公司，希望通过开发 创新的组织技术刺激与协调组织天然再生回复。在烧 伤、整形外科领域，有比较多的应用。 本次推出的ExoFlo外泌体，通过释放自身细胞的自愈潜力减少慢性的炎症，从而促进组织再生。该产品的 推出，引起美国业界的极大关注，刺激了更多的外泌 体商用化产品的诞生，推动了美国行业的发展。 同样，对于国内外泌体研究和市场化也有着关键的意 义。在产品的商用化过程中，从实验室走向生产车间 ，其中重点是要符合GMP生产规范，分离纯化需要保证外泌体的纯净，所以，选择合适的分离方法就极具意义。 外泌体属于纳米级颗粒， 想要分离出外泌体进行研究或其他应用 其实并不容易。 想要抓住这淘气的小精灵， 科学家们纷纷研发出了各种分离技术， 市场上百花齐放。 但这些分离技术都在纯度上不尽人意。 得到最纯的外泌体， 超速离心技术是目前市场上**的选择。 卓越的离心性能：最大离心力达802, 000 ^xg，满足外泌体纯化实验需要。 多样的转头选择，可离心从1.5 mL离心管 到250 mL离心瓶的各式离心容器，满足 您实验室离心各种应用的需要，尽显无以 伦比的便捷性。 永不疲劳的FiberliteTM转头，重量轻，硬度大，耐腐蚀，提供15年质保，终身无 需减速使用。
-
硫氧还蛋白-1的作用及反应原理
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
硫氧还蛋白（Thioredoxin，Trx）是一类已知存在于所有生物体中的氧化还原小蛋白。它在许多重要的生物过程中发挥作用，包括氧化还原信号。在人类中，硫氧还蛋白由TXN和TXN2基因编码。两种人类硫氧还蛋白基因中任何一种的功能缺失突变在胚胎发育的四细胞阶段都是致命的。虽然尚未完全了解，硫氧还蛋白在人类中发挥着核心作用，并且通过它们对活性氧(ROS)的反应，越来越多地与药物联系在一起。在植物中，硫氧还蛋白调节一系列关键功能，从光合作用到生长、开花以及种子的发育和萌发。最近还发现它们在细胞间通讯中发挥作用。 硫氧还蛋白是一种通过半胱氨酸硫醇-二硫键交换促进其他蛋白还原而起抗氧化剂作用的蛋白质。硫氧还蛋白是一种含有二硫醇-二硫键活性位点的12kD氧化还原酶。它无处不在，存在于从植物、细菌到哺乳动物的许多生物体中。已经鉴定出多种硫氧还蛋白的体外底物，包括核糖核酸酶、绒毛膜促性腺激素、凝血因子、糖皮质激素受体和胰岛素。 硫氧还蛋白在氨基酸序列水平上的特征是在CXXC基序中存在两个邻近的半胱氨酸。这两种半胱氨酸是硫氧还蛋白还原其他蛋白的关键。硫氧还蛋白还具有一种称为硫氧还蛋白折叠的特征性三级结构。 硫氧还蛋白-1通过其活性中心二硫醇可逆氧化成二硫化物，参与氧化还原反应中的氢供体，伴随着2个电子和2个质子的转移。它涉及许多细胞过程，包括脱氧核糖核苷酸合成，氧化损伤蛋白的修复，蛋白质折叠，硫代谢和氧化还原稳态。硫氧还蛋白依赖性酶包括磷酸腺苷 - 磷酸硫酸还原酶MET16，烷基 - 氢过氧化物还原酶DOT5，硫氧还蛋白过氧化物酶TSA1和TSA2，烷基氢过氧化物还原酶AHP1和过氧化还原酶HYR1。硫氧还蛋白还参与保护免受减轻压力。作为LMA1复合物的一部分，它参与促进囊泡融合，例如同型液泡和ER衍生的COPII囊泡与高尔基体的融合。 硫氧还蛋白-1通过其活性中心二硫醇可逆氧化成二硫化物，并伴随着2个电子和2个质子的转移，作为氢供体参与氧化还原反应。它参与许多细胞过程，
-
犬白细胞介素8ELISA试剂盒说明书
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
犬白细胞介素8ELISA试剂盒实验科研 上海仁捷生物科技有限公司主要经营进口原装及国产科研ELISA试剂盒，价格优惠，质量可靠，灵敏度高，效果稳定。购买我公司产品的新老客户，提供免费ELISA试剂盒代测的服务。如有疑问或者需要，请联系我司销售客服。 检测范围本公司酶联免疫试剂盒只能用于研究用途，不得用于临床诊断。 犬白细胞介素8ELISA试剂盒实验科研 检测范围 特异性：本试剂盒可同时检测天然或重组的，且与其他相关蛋白无交叉反应。 有效期：6个月 预期应用：ELISA法定量测定血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中的含量。 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。 用途：本产品仅供科学研究 规格：48T/96T（可提供免费代测服务） 犬白细胞介素8ELISA试剂盒实验科研 所需试剂和器材： 1.酶标仪（450nm） 2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL 3.37℃恒温箱 4.蒸馏水或去离子水 犬白细胞介素8ELISA试剂盒实验科研 操作时需注意： 1.不同厂家生产的试剂盒因生产工艺和操作方法略有不同，务必按照所用人Opiorphin蛋白(OPI)ELISA试剂盒说明书严格操作，否则容易产生检测结果的不确定性. 2.若不同批号ELISA试剂盒的不同组分(A液或酶工作液)，或不同试剂的不同组分进行交叉使用，有可能出现显色浅或本底高，花板等情形。 3.反应时间的误差，做大量标本时，一孔和最后一孔以及一些特殊标本可能影响较大。 4.临界值附近标本波动为正常现象，任何试剂均不可避免。可以考虑将标本做奇数次复检。 5.加样时样品量误差，对于阴或很阳的标本影响不大，但对阈值附近的标本影响极大，建议校对加样器。 犬白细胞介素8ELISA试剂盒实验科研 优势特点： （1）、原装进口试剂——高效性、灵敏性、特异性 （2）、规范包被操作——吸附均匀、吸附性好、空白值低、空底透明度高 （3）、先进的优化方案——回收利用率高、可靠性强 （4）、适用范围——适用于体液、组织匀浆，细胞
-
锌指蛋白ZFP217通过介导m6A mRNA甲基化导致肥胖的原理
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
过去三十年来，全球肥胖和2型糖尿病的发病率有所上升，而脂肪组织是肥胖相关疾病的重要因素，因此，控制脂肪细胞分化和成熟可能是**肥胖相关疾病的一个有希望的策略（1）。为了阐明转录和表观遗传调控在脂肪形成中的作用，并确定一个主要的关键调控因子和途径（1，2），人们做了大量的努力，然而，转录后调控在脂肪形成中的作用尚不清楚。 锌指蛋白217（Zfp217，人类同源蛋白ZNF217）是一种在多种人类肿瘤（4，5）中上调的已知致癌蛋白，也是胚胎干细胞分化的关键蛋白（3，7，8）。值得注意的是，Zfp217将基因转录与新生RNA上的m6A修饰紧密结合，提示Zfp217在协调表观遗传和表观转录网络中的关键作用（3，9）。虽然我们之前确定了一个新的角色对于脂肪发生中的Zfp217，详细的Zfp217依赖机制尚未得到很好的描述（10，11）。然而，这些研究增加了Zfp217可能通过调节m6A修饰来加速脂肪生成的可能性。 为了阐明Zfp217蛋白在脂肪生成中的作用，华中农业大学动物科学与技术学院动物营养与饲料科学系的彭建教授团队，通过sRNAi、CRISPR/Cas9、Co-IP， OpenSPR LSPR技术等实验方法， 最终确定Zfp217通过介导m6A mRNA甲基化编排转录和转录后调节，促进了脂肪分化并将该结果于2019年4月发表于《Nucleic Acids Research, 2019》（IF 11.5）。 具体实验内容 通过sRNAi、CRISPR/Cas9、流式、Co-IP， LC-MS/Ms、Chip等实验方法，发现Zfp217，YTHDF2 ， FTO， m6A RNA之间在脂肪生成过程中形成了一个调控环路， Zfp217缺失会抑制脂肪生成，并通过OpenSPR的LSPR技术检测确定了不同因子之间相互作用关系： 1）提取总RNA定量PCR分析，对m6A做点杂交及质谱分析发现RNAi及CRISPR/Cas9处理后缺失了Zfp217的细胞中， m6A修饰水平明显增加；LC-MS/Ms 发现 m6Am在Zfp217缺失的细胞中显著增加，m6A是m6Am的10倍，意示m6A可能是主要的关注点；点杂交实验显示，m6A的水平没有变化。但是缺失Zfp217的细胞中，m6A 修饰显著增
-
什么是QCM的灵敏度?
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
什么是QCM的灵敏度? 众所周知，10 MHz QCM晶片的质量灵敏度比5MHz高。一个27MHz晶片的质量灵敏度比10 MHz和5 MHz晶片都高。但是，质量灵敏度真的是决定QCM检测到极小质量的重要参数吗? 答案是否定的。欲知详情，请继续阅读。 质量灵敏度-理论值对比实际测量值 有些描述QCM的文章往往会误导读者。文中提到的参数是正确的，但在实际测量情况中，它们通常是不相关的。一个经典的例子即质量灵敏度，通常称为“灵敏度”。5 MHz晶体的质量灵敏度为17.7 ng/(cm2∙Hz)， 10 MHz晶体的理论质量灵敏度为4.4 ng/(cm2∙Hz)。质量灵敏度是每平方厘米需要多少ng的材料量可以使共振频率改变1MHz。质量灵敏度值越小，意味着移频所需材料越少，质量灵敏度越高。 10 MHz的晶体就比5 MHz的好吗？ 读到这些数字，我们马上就会假设10 MHz的晶片会比5 MHz的晶片更好，即能感觉到更小的变化，基频越高越好。但是，我们必须考虑到噪声水平也会随着基频的增大而增大。这意味着在实际测量情况下，较高的理论灵敏度并不一定与较好的质量检测限(有用的质量灵敏度)相关。因此，一个更具有参考意义的参数是信噪比，它指示出了如何从理论上测量小质量。在这种情况下，即使是信噪比参数也不能说明全部情况。其他重要的参数，如温度稳定性、仪器易操作性、同时进行多倍频测量等，也会影响实验的最终数值和结论。 因此，在选择使用哪种QCM仪器时，不要单纯考虑质量灵敏度参数，而是要综合考虑对测量有影响的因素。 下载我们的使用指南，了解更多关于如何评估QCM灵敏度以及与QCM数据质量相关的其他参数的更多信息。
-
如何巧妙提高外周血培养成功率
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
人体外周血淋巴细胞培养搭配染色体核型分析技术是诊断染色体变异的重要手段。淋巴细胞的培养是染色体标本制备的关键。培养基的选择、秋水仙素的用量及时间、温度、pH，固定、滴片等其中任何一点处理不当，就极有可能导致实验失败。本期专题，我们就聊聊 “外周血淋巴细胞培养，如何简化操作、做好细节、提高细胞培养成功率？” “ 一管到底 ”简化操作，提高效率 外周血培养时间长，过程复杂，因此我们建议采用 “一管到底” 的方法，用离心管代替培养瓶，省去了敲除培养瓶盖的步骤，也无需转移细胞悬液，杜绝了常规法中潜在的交叉风险，简化操作流程，提高了效率。 外周血培养，还要注意这些 1. 接种的血样愈新鲜愈好，**是在采血后24小时内进行培养，若不能立刻培养，应置于4℃存放，避免保存时间过久影响细胞活力。 2. 秋水仙素是使细胞停止在中期的关键，因此使用秋水仙素的质量很重要，勿使用来源不明的厂商产品。 3. 使用的低渗液、固定液需要现用现配，避免低渗作用，细胞固定效果不佳，无法收获完美染色体。 4. 收获细胞时，吸取上清液时动作要轻， 临近底部要注意吸取的动作，否则易把培养的细胞吸出。每次吸取上清液都要在管的底部留上大约1mL的上清 , 以确保培养细胞的数量 。当最后一次加入固定液后， 要用力充分混匀 ，防止细胞粘连在一起而影响下面步骤的顺利进行 。 5. 滴片是染色体制备中影响染色体形态的关键一步，首先是滴片用的玻片要非常干净，冰冻4h以上，即为冰片，滴片时现用现拿，如果冷冻不够，细胞难以贴附在玻片上，会影响染色体的分散和分带效果。滴片时也要注意保持滴管与玻片距离，一般控制在20 ～30cm ,而且滴的顺序要呈S型，让其尽可能滴匀 。然后用嘴或吸耳球轻轻混匀，最后在酒精灯上快速划过几次，确保细胞确实固定好。 6. 此外，培养基的保存很关键，若不是马上使用，需放入0℃下保存，防止药品失活。 BI外周血淋巴细胞培养基 BI在 ”一管到底“ 方法的基础上，采用带有顶胶塞的
-
肿瘤&骨质疏松**新靶标 —— 组织蛋白酶（Cathepsin）
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
组织蛋白酶（Cathepsin），即溶酶体蛋白水解酶，是存在于大多数动物组织中的细胞内肽键水解酶。目前在在生物界已发现组织蛋白酶20余种，人体中主要存在11种，它们在人的生理和病理中都发挥着重要作用，与人类肿瘤、骨质疏松、关节炎等多种重大疾病密切相关，是近年来备受关注的一类靶标蛋白酶。 1.1 Cathepsin家族的分类 根据蛋白水解机制，组织蛋白酶主要包括半胱氨酸组织蛋白酶、丝氨酸组织蛋白酶（Cathepsin A和Cathepsin G）和天冬氨酸氨酸组织蛋白酶(Cathepsin D和Cathepsin E)。其中半胱氨酸组织蛋白酶是其中最重要的一类，它由11个成员组成（Cathepsin B、C、F、H、K、L、O、S、V、W和X），其中以Cathepsin B研究最多，它们都拥有由半胱氨酸、组氨酸和天冬酰胺组成的保守活性位点。 1.2 Cathepsin的合成 组织蛋白酶是由无活性的前体酶原（preprocathepsin）水解而成，其在体内的合成途径为：首先在核糖体结合膜上以前体酶原的形式合成，经转铁蛋白先进入内质网，然后进入高尔基体，同时通过糖基化及磷酸化作用形成甘露糖-6-磷酸蛋白，最后通过溶酶体上甘露糖-6 -磷酸特异性受体的识别作用，间接转运到溶酶体中。 1.3 Cathepsin与病理过程的关系 组织蛋白酶主要存在于溶酶体中，发挥其生理状态下的蛋白水解作用。但在某些特定情况下，胞外也可以检测到它的存在。胞外酶的存在会导致胞外蛋白的水解，多与恶性疾病有关。近年来研究表明组织蛋白酶越来越被认为是在病变、肿瘤入侵、免疫系统相关疾病以及各种寄生虫感染疾病中起作用的。 肿瘤——肿瘤病人的主要死因就是因为胞外基质、基底膜被降解，使得肿瘤细胞能够离开肿瘤组织进行转移。降解的过程所需的蛋白酶就包括多种组织蛋白酶，它们通过蛋白水解作用以促进肿瘤的空间扩张、肿瘤血管的生成和血管内外肿瘤细胞的转移。目前在多种人类肿瘤中都已经发现组织蛋白酶表达水平上调，尤其是Cathepsin B。 骨质疏松—— 骨质疏松是在骨代谢过程中，骨吸收大于骨形
-
B-hCD137(4-1BB)在不同靶点癌症免疫**的作用
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
各位看官晚上好，欢迎来到百奥赛图知识扩展学院，今天小编带来一种因吹斯汀分子——B-hCD137(4-1BB)，相信各位都不会陌生呢。在目前嵌合抗原工程化T细胞（CAR-T）的开发过程中，4-1BB作为胞内信号共刺激分子具有重要作用，此外其抗肿瘤效用也被应用于不同靶点癌症免疫**研究以及临床。那么接下来，咱们就一起瞧瞧这个有趣的靶点分子吧~ B-h4-1BB基因功能简介 功能简介 4-1BB 即CD137，TNFRSF9（TNF receptor superfamily member 9）为TNF受体超家族成员，主要表达在活化的T细胞、NK细胞、单核细胞表面。通过连接其配体CD137L或利用激活型CD137单克隆抗体激活CD137，既能提供共刺激信号激活T细胞，使T细胞活化增殖并分泌细胞因子，同时它介导的共刺激信号能够诱导抗原提呈细胞增殖并分泌细胞因子。 许多实验表明干预CD137共刺激途经可以调节T细胞和抗原提呈细胞的功能产生抗肿瘤免疫作用，为肿瘤免疫**提供了新的靶点。 Figure 1. Multimerization of CD137 by natural ligand (CD137L) and agonist mAbs. 基本信息 打靶策略 B-h4-1BB蛋白表达分析 图2. B-h4-1BB人源化小鼠脾细胞活化及流式检测 结果显示：在C57BL/6小鼠中可检测到m4-1BB+细胞。在B-h4-1BB纯合鼠中，可检测到h4-1BB+细胞。 B-h4-1BB抗体药效验证 图3 利用B-h4-1BB小鼠进行抗人4-1BB 抗体（Urelumab Analog）药效验证实验 将小鼠结肠癌细胞MC38移植到B-h4-1BB纯合小鼠皮下，待肿瘤体积约150±50mm3时将动物入组至对照组和**组(n=6) 。 结果显示：抗人4-1BB抗体（Urelumab Analog）对肿瘤生长有非常明显的抑制作用。A. 肿瘤平均体积±SEM，B. 小鼠平均体重±SEM。结果证明：B-h4-1BB小鼠是评估人4-1BB抗体体内药效的有力工具。 B-h4-1BB抗体毒性评估 药物有效性和安全性是临床前评价的关键指标，现有实验数据表明靶向4-1BB mAb 在癌症免疫疗法的**潜力，并且在T细胞活化，持久性和记忆中起重要作用
-
Small RNA—从功能研究到基因**
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
在过去的十年里，小RNAs（small RNA）已经成为基因表达和基因组功能的重要调节因子，几乎在生物学的各个方面都发挥着作用。许多小RNAs通过RNA干扰（RNAi）相关机制发挥作用，这些机制通过对RNA诱导沉默复合物（RISC）进行编程以识别和抑制目标。还有一类天然microRNAs（miRNAs），可在体内调节基因表达程序。miRNA功能的改变是导致人类疾病的一个重要因素，而对特定miRNA的调控正成为一种新的**手段。小RNA的用途远不止如此，快来跟小编一起深入了解small RNA—从功能研究到基因**。 （1）小RNA 起源 目前，我们对于通过RISC发挥作用的小RNAs的发生，认识比较全面。在动物中，这种小RNAs主要有三类：小干扰RNA（siRNAs）、PIWI相互作用RNA（piRNAs）和miRNAs。siRNAs是由RNAseⅢ家族酶dicer处理的双链前体衍生而来。在哺乳动物中，内源性siRNA在生殖细胞中较为丰富，但在无脊椎动物中则更为广泛。miRNA前体包含成熟miRNA序列的短发夹片段。这些前体通过两个双链RNA酶（dsRNA酶）Drosha和Dicer的串联作用进行处理。piRNAs主要在生殖细胞中表达，在生殖细胞中它们保护转座子的活性。它们的生物起源仍有待充分了解。 （2）小RNA 发现 下一代测序技术使小RNAs的研究发生了革命性的改变。在将特定的连接子连接到小RNAs之后，可以生成cDNAs，这非常适合使用短读平台进行测序。这些方法扩大了被认为通过RISC起作用的小RNAs的种类，并使人们能够发现新的小RNAs。深度测序也被证明有助于检测特殊小RNA的表达；另一方面，如微阵列和定量pcr（qpcr），也提供了经济的替代方案，目前数据库已经在线提供已知的小RNA库。 （3）小RNA 功能研究 了解小RNAs的功能通常从研究它们的表达模式开始。潜在靶点的识别依赖于小RNA和靶点必须具有一定的序列互补性的假设。计算算法根据miRNA-mRNA相互作用的假定特征及其结合位点的保守性预测miRNA靶点。此外，还发展了几种生物化学方法，如交联免疫沉淀法（CLIP）和串联亲和纯化miRNA靶基因mRNAs（Ta
-
正夯血小板裂解物的科普
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
血小板 长久以来，我们都知道当组织受伤的时候，血小板会很快地聚集在伤口附近形成血液凝块，堵住伤口，发挥止血的功能。然而，近年来许多的研究证实，血小板还具备另一重要功能–帮助我们调节体内的新陈代谢，促进组织的修复与愈合。 血小板：我不只有止血功能噢！ 血小板是一种叫做巨核细胞（Megakaryocyte）的细胞质小碎片彼此黏附在一起所形成的，寿命约7～14天，每天约更新总量的1/10。虽然血小板没有细胞核，但含有来源于巨核细胞的mRNA，能转录并独立进行蛋白合成；在正常的状态下，血小板外形像平滑的小圆盘（下图左）；被激活时，外形就变成了海胆的样子，上面长满了很多突起小刺（下图右），这时候血小板内部的诱导物质会因血小板活化而被释放出来，开始刺激微血管生长、促进伤口愈合，这些物质就是所谓的生长因子（如PDGF，TGF-β，VEGF，EGF和IGF等）。 平滑的小圆盘（未活化） ▲ 海胆状血小板（已活化）▲ 血小板跟间充质干细胞培养有什么关系？ 近年来，许多学者针对干细胞（Stem Cells）做深入的研究，证实了多种干细胞的细胞膜上，有上述生长因子的接受体，当这些生长因子和干细胞的细胞膜上的接受体结合后，会启动细胞内的信号传导途径，引起基因序列的表达，诱导mRNA转录，进而合成各种蛋白，促进干细胞增殖。而间充质干细胞在人体组织中比例较低，若要达到临床**所需细胞数量，就必须要进行体外大规模扩增，而血小板会释放生长因子的特性，能完美的帮助我们完成这个任务。 如何从血液中取到足够的血小板呢？ 想要搜集足够的血小板，最简单的方式就是制备“富血小板血浆（Platelet Rich Plasma，PRP）”，就是将全血通过梯度离心后而得到的血液制品，换句话说就是血小板的浓缩物（血小板浓度由20万颗/ml，提升到100万颗/ml），但其中依然含有大量细胞碎屑，若直接应用在细胞培养中会有较强的免疫原性，因此诞生了PLTGold®人源血小板裂解物（
-
更安全更快更耐用的的锂电池材料新体系
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
实施效果 来源：计算模拟平台 利用Materials Studio分子模拟平台，调用各种模拟方法，如量子力学方法、分子力学和动力学方法、蒙特卡洛方法等，对电极材料的储锂容量、嵌锂电位、电子导电性能、锂离子扩散、脱嵌锂过程中的体积和结构变化、电化学窗口宽度、结构稳定性等指标进行计算，从而帮助研发人员可按预定目标去设计和发现更优的新材料体系，指导实现合成。形成不断深入的研究和开发，最终开发出能量密度更高、安全性能更好、充放电速度快的高性能锂电池材料。 方案详情 研发目标：提高电池的充放电效率 1、MS模拟正负极材料中锂离子的扩散能垒 扩散能垒越低的材料，扩散速率越大，则相应的倍率性能则越高，充电越快 图中(a)-(d)为LiFePO4 及掺杂Mn、 Co、La的扩散能垒研究。 模拟结果表明，掺杂Co和La能降低锂离子的扩散能垒，且掺杂La的效果优于Co。 模拟为实验正极材料合成中选择合适的掺杂元素指明方向 2、MS模拟锂离子的动态扩散过程及扩散系数 扩散系数越高的材料，扩散速率越大，则相应的倍率性能则越高，充电越快 3、MS模拟电子电导 材料的离子电导率和电子电导率共同影响着材料的倍率性能，能带结构的带隙越小，电子由价带被激发到导带越容易，本征载流子浓度就越高，电导率也就越高。 研发目标：提高电池的容量，无“里程焦虑” 1、MS模拟嵌锂电压 提升锂离子电池的工作电压是增大电池能量密度的重要途径之一 2、MS模拟能量密度（质量能量密度和体积能量密度） 3、MS模拟电解质“电化学窗口” 电化学窗口是衡量电解质稳定性的一个重要指标，较宽的电化学窗口可使电解质在较宽的电压范围内保持电化学性能稳定。 MS模拟LiFePO4和LiMnPO4的晶胞参数和嵌锂电压及与实验结果的对比 电化学窗口为LUMO和HOMO轨道能级差。MS支持直接计算得到LUMO和HOMO能级 研发目标：电池无安全隐患，使用寿命长 1、MS模拟正负极材料嵌锂脱锂过程的结构变化 脱锂
-
细胞呼吸RC与RR可预测癌症抑制性药物的敏感性
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
参考文献：Teh JT, Zhu WL, Newgard CB, Casey PJ, Wang M (2019) Respiratory capacity and reserve predict cell sensitivity to mitochondria inhibitors: mechanism-based markers to identify metformin-responsive cancers. Mol Cancer Ther 18:693-705. 二甲双胍已被广泛应用于癌细胞代谢和抗癌潜力的研究。尽管有证据表明服用二甲双胍的糖尿病患者的癌症发生率显着降低，但该药物的II期癌症试验未能达到理想效果，很可能是因为缺乏基于分子机制的实验基础。。为了验证二甲双胍对癌症有抑制作用，新加坡国立大学在基因敲除和药理学抑制电子传递链组分来降低呼吸能力的研究中，发现线粒体呼吸能力和能量储备能力（在癌细胞中差异很大）与体外及体内的二甲双胍抑制癌细胞生长的敏感性密切相关。，研究者将实验研究扩展到22个不同组织来源的癌细胞系，包括肺癌、胰腺癌、结肠癌、肝癌、乳腺癌、皮肤癌和卵巢癌细胞。这些癌症细胞系对二甲双胍抑制增殖表现出广泛的敏感性（35倍），并且它们的敏感性似乎与组织来源无关。这些数据证实了二甲双胍的癌细胞生长抑制作用与癌细胞自身的最大呼吸能力和能量储备能力具有一定的相关性。 实验一：该实验通过测量22种人体癌细胞系发现，细胞最大呼吸能力和细胞储备能力与二甲双胍的癌症抑制作用具有相关性 细胞基础呼吸水平代表了一定条件下细胞的呼吸水平，但是不能表明细胞应对一定压力或者应激的能力。而细胞最大呼吸能力（Max.resp.capacity RC）和细胞储备能力（Respiratory reserve RR）则表现了细胞能够承受刺激和应对外界压力的特性。研究者对22种人体癌细胞系的RR与RC分别进行的监测，并加入二甲双胍观察期间癌细胞的生长情况。结果发现：RR和RC能力较强的癌细胞，其二甲双胍的抑制作用降低；而RR/RC能力较弱的癌细胞，其二甲双胍的抑制作用较强。说明癌细胞RR/RC的能力与二甲双胍的抑制作用有较高的相关性。 图1：细胞最大呼吸能力和细胞储备能力与二甲双胍对
咨询热线
18133906270
德尔塔官方微信