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磁珠法分离小鼠T细胞和B细胞
作者:德尔塔 日期:2022-04-30
PriCells: 磁珠法分离小鼠T细胞和B细胞 基本方案 用AUTOMACS系统进行总T细胞、CD4+细胞或CD8+T细胞的自动分离 实验材料 1、小鼠 2、HBSS洗涤缓冲液 3、MACS缓冲液 4、磁珠 5、RPMI-10完全培养基 6、AUTOMACS系统和分选柱 7、30μm尼龙网或40μm预分离滤膜 实验方法 1、用5只小鼠的淋巴结或2只小鼠的脾脏制备单细胞悬液并去除红细胞。 2、细胞在10mlHBSS洗涤缓冲液中混悬后用血细胞计数器计数。 3、细胞悬液在4℃,200g离心10min。弃上清后将沉淀按每108个细胞0.9ml MACS缓冲液的比例混悬。每108个细胞加入0.1ml适当的磁珠后在4℃孵育15min。 4、在孵育的时间里,打开AUTOMACS系统电源。按产品说明书中操作规程运行清洁程序。 5、细胞悬液在4℃,200g离心10min。弃上清,在沉淀中加入足量的MACS缓冲液使细胞浓度达到108个细胞/ml,充分混悬。将细胞通过30μm尼龙网或40μm预分离滤膜。用0.1~0.4mlMACS缓冲液冲洗滤网。 6、细胞放到AUTOMACS的上样通道。选择possel程序,这样标记的细胞将从阳性通道洗脱。 7、细胞悬液在4℃,200g离心10min。弃上清后将沉淀用2~5ml RPMI-10完全培养基混悬。计数。 附录: RPMI完全培养基: RPMI1640培养基含有: 2%、5%、10%、15%或20%FBS,56℃热灭活1h 2μmmol/L L-谷氨酰胺 50μmol/ml 2-ME 100U/ml 青霉素 100μg/ml 硫酸链霉素 RPMI-10完全培养基: 配制RPMI完全培养基加入: 10%(V/V)FBS 1mmol/L 丙酮酸钠 50μg/ml庆大霉素 10mmol/L HEPES 4℃可保存2周 过滤除菌 HBSS洗涤缓冲液: HBSS,含有: 5%(V/V)FBS 20mmol/L HEPES,pH7.0 100U/ml 青霉素 100μg/ml 链霉素 4℃可保存1个月 MACS缓冲液: PBS,pH7.2 0.5%(m/V)BSA 2mmol/L EDTA 过滤除菌 用于自动MACS系统,室温储存1个月
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小鼠单个核细胞分离一步梯度法去除死细胞
作者:德尔塔 日期:2022-04-30
PriCells-小鼠单个核细胞分离一步梯度法去除死细胞 基本原理 活细胞(密度较小)和死细胞(密度较大)密度不同,从而有助于将活的淋巴细胞和红细胞分离。 附加材料 高密度溶液:Ficoll-Paque(Ficoll和泛影酸钠;Pharmacia LKB)或Lympholyte-M(Cedarlane) 12ml或50ml聚丙烯离心管(比聚苯乙烯离心管好) 注:Ficoll-Paque和Lympholyte-M的密度与温度有关;该方法中所采用的以及其他商品化的高密度溶液适合在室温中使用。因此应注意使细胞悬液、离心和高密度溶液控制在室温。否则会因活细胞沉入离心管底导致在密度界面上损失活细胞。 实验方案 1、用RPMI-5完全培养基混悬细胞,分装到离心管中使其细胞数达到0.5×108~1×108个细胞/2ml(12ml离心管)或1×108~5×108个细胞/5ml(50ml离心管)。 2、用移液器吸取3ml(使用12ml离心管时)或5ml(使用50ml离心管时)高密度溶液,将枪头伸到离心管底,缓慢将高密度溶液加入细胞悬液下方。 3、室温,800g离心15min。为了取得好的分离效果,**将离心机的“brake”开关关掉。 4、使用5ml移液器,沿高密度层表面缓慢移动移液器枪头,吸入漂浮在高密度层上方的活细胞,尽量少收集高密度溶液。将活细胞移入另一管中。 5、加入RPMI-5完全培养基(少量细胞加入10ml,细胞量较多时加入40ml),室温,200g离心10min。重复一次。 6、以适量培养基混悬细胞以便进行下一步操作。
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AUTOMACS系统自动分选体系分选小鼠CD4+ CD25+抑制性细胞
作者:德尔塔 日期:2022-04-30
PriCells-AUTOMACS系统自动分选体系分选小鼠CD4+ CD25+抑制性细胞 由此方法得到的阴性细胞(CD4+ CD25-)可用作反应细胞或对照细胞 实验材料: 1. 小鼠 2. HBSS洗涤缓冲液 3. MACS缓冲液 4. CD8a(Ly-2)磁珠 5. 结合缓冲液 6. biotin-抗CD25(7D4) 7. Streptavidin-PE 8. 抗PE磁珠 9. 完全RPMI培养基 10. 小鼠CD3+T细胞富集柱和1×纯化柱缓冲液 11. 15ml离心管,无菌 12. autoMACS系统和分选柱 13. 30mm尼龙网或40mm预分离滤膜 实验方法: 1. 用20只小鼠的淋巴结制备单细胞悬液并去除红细胞。 2. 将细胞在20mlHBSS洗涤缓冲液中混悬后用血细胞计数器计数。 3. 将细胞悬液在4℃,200g离心10min。离心过程中,准备3支小鼠CD3+T细胞纯化柱,按说明书的指导用1×纯化柱缓冲液洗3遍。弃洗脱液,在每支纯化柱下方放置一支15ml离心管。 4. 用3ml 1×纯化柱缓冲液和3ml HBSS洗涤缓冲液混悬细胞。将细胞通过30mm尼龙网或40mm预分离滤膜后,每支纯化柱中加入2ml细胞。室温孵育15min。 5. 用2ml 1×纯化柱缓冲液洗涤纯化柱4或5遍以洗脱T细胞。用血细胞计数器计数后,将细胞悬液在4℃,200g离心10min。 6. 将沉淀按每108个细胞加0.9ml MACS缓冲液的比例混悬。每108个细胞加入0.1ml CD8a(Ly-2)磁珠后4℃孵育15min。 7. 4℃,200g离心10min。 8. 以MACS缓冲液混悬细胞,使细胞浓度达到108个细胞/ml。将细胞通过30mm尼龙网或40mm预分离滤膜。将细胞放到autoMACS的上样通道。选择depletes程序(CD4+ T细胞将从阴性通道洗脱。 9. 回收细胞计数,在4℃,200g离心10min。 10. 用结合缓冲液混悬细胞使其浓度达到108个细胞/ml。每108个细胞加入15mg biotin-抗CD25(7D4)。4℃孵育15min。4℃,200g离心10min。 11. 用结合缓冲液混悬细胞使其浓度达到108个细胞/ml。每108个细胞加入7.5mg Streptavidin-PE。4℃孵育15min。 12. 4℃,200g离心10min. 13. 用MACS缓冲
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小鼠脾脏树突细胞的分离-胶原酶消化制备脾脏细胞悬液
作者:德尔塔 日期:2022-04-30
PriCells-小鼠脾脏树突细胞的分离-胶原酶消化制备脾脏细胞悬液 辅助方案: 胶原酶消化制备脾脏细胞悬液 实验材料: 1. 4000U/ml胶原酶D,融化后置于冰上 2. HBSS,已灭菌,含Ca+、Mg2+(购置于Life Technologies) 3. 小鼠脾脏 4. 皮下注射针,22G×11/2in内径(Becton Dickinson) 5. 10ml、5ml一次性注射器(如Becton Dickinson) 6. 100mm直径培养皿(如Falcon) 7. 2个高压灭菌锅的锯齿状解剖镊(如Roboz) 8. 高压灭菌的不锈钢网:将40目的不锈钢网剪成5cm×5cm的小方格,向下折叠边缘,然后将四边弯成浅的矩形碗;锡箔纸包裹后高压灭菌。 实验方法: 1. 将2管1ml的4000U/ml胶原酶D稀释(足够用于20个脾脏):1ml加入9ml HBSS(稀释至4000U/ml,步骤8使用),1ml加入39ml的HBSS(稀释至100 U/ml)。置于冰上。 2. 将22G针头连接在10ml的注射器上,充满100 U/ml的胶原酶。将10ml的100 U/ml溶液加入100mm的培养皿中。 3. 取另外一个直径100mm的培养皿进行操作。一只手拿镊子,另一只手拿注射器,拇指放在活塞上。用镊子夹住小鼠脾脏,用针头刺入脾脏被膜的狭窄边缘,注入100 U/ml胶原酶100ml。用镊子将脾脏推向针头,使针头前进几毫米。重复注射胶原酶,继续直到1ml胶原酶都注射入脾脏,针头从另一端刺穿脾脏。 4. 用针头撕开脾脏,将其转移至含胶原酶的培养皿中(步骤2)。重复操作,直到所有脾脏都注射和撕开。 5. 从第二个培养皿中收集细胞悬液加入到置于冰上的50ml离心管中。用3ml 100 U/ml的胶原酶漂洗培养皿后加到上述50ml离心管中。 6. 加入3ml 100 U/ml胶原酶至培养皿中。将撕碎的脾脏依次转移至培养皿。用2个镊子将它们撕成边长1mm的小碎块,使其能通过5ml吸管的内径。当所有的脾脏都撕碎后,将先前放置脾脏碎块的培养皿中的胶原酶溶液加入进来,用5ml吸管猛烈吹打多次。 7. 倾斜培养皿,将大块碎片除开,将细胞悬液转移至第5步的置于冰上的50ml离心管
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气相色谱中的衍生试剂
作者:德尔塔 日期:2022-04-30
气相色谱中的衍生试剂 气相色谱中化学衍生的作用主要是:1改善样品挥发性,2改善样品的峰形,3改善样品的分离,4提高化合物的检测灵敏度。 硅烷化衍生试剂 硅烷化试剂与样品化合物的衍生反应是通过硅烷基取代羟基,羧基,巯基,氨基及亚氨基的活性氢而进行的。衍生反应的产物是硅醚或硅酯。几乎所有含这些活性氢的化合物都能与硅烷化试剂发生衍生反应,其反应活性顺序:醇〉酚〉羧酸〉胺〉酰胺。 硅烷化衍生试剂包括三甲硅烷化衍生试剂,如六甲基二硅氮烷、三甲基氯硅烷、N-甲基-N-三甲硅基乙酰胺、N-甲基-N-三甲硅基三氟乙酰胺、N,O-双(三甲硅基)乙酰胺、N,O-双(三甲硅基)三氟乙酰胺、N-三甲硅基咪唑等;卤代硅烷基衍生试剂,如氯甲基二甲硅基氯硅烷、碘甲基二甲硅基氯硅烷、氯甲基二甲硅基二硅氮烷、碘甲基二甲硅基二硅氮烷、五氟苯基二甲硅基氯硅烷、特丁基五氟苯基甲硅氯硅烷、五氟苯基异丙基甲硅基氯硅烷等。 烷基化衍生试剂 制备烷基化衍生物的反应是亲核取代反应,衍生试剂的烷基取代化合物的酸性氢。衍生反应得到的产物是醚、酯、硫醚、硫酯、N-烷基胺、N-烷基酰胺。 烷基化衍生试剂包括重氮烷烃类,如重氮甲烷等;烷基卤化物类,如五氟苄基溴、碘乙腈等;季胺盐类,如氟化二甲基苯基苄基胺,氢氧化三甲基苯基胺;醇类,如1,1,1,3,3,3-六氟异丙醇等;烷基氯甲酸酯,如三氯乙基氯甲酸酯等。 酰基化衍生试剂 酰基化衍生反应的实质是衍生试剂的酰基取代极性化合物中的活性氢。该类试剂可用于醇、酚、硫醇、胺、酰胺、磺酰胺等化合物的衍生。 酰基化试剂主要有酰卤, 如4-乙酯基六氟丁酰氯、全氟辛酰氯等;酸酐,如乙酸酐等;酰基咪唑与酰胺,如全氟乙酰咪唑、N-甲基双三氟乙酰胺。 其他衍生试剂 形成环状衍生物试剂,如硼酸和顺式1,2-二醇反应生成的环状硼酸酯、含羰基的化合物与合适的二胺生成的杂环衍生物等;手性衍生试剂,如S-(-)-七氟丁酰脯氨酰氯、R-(+)-2-甲氧基-2-苯基-3,3,3-三氟丙酰氯等
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各种真空泵的工作原理
作者:德尔塔 日期:2022-04-30
真空泵是用各种方法在某一封闭空间中产生、改善和维持真空的装置。真空泵可以定义为:利用机械、物理、化学或物理化学的方法对被抽容器进行抽气而获得真空的器件或设备。随着真空应用的发展,真空泵的种类已发展了很多种,其抽速从每秒零点几升到每秒几十万、数百万升。按真空泵的工作原理,真空泵基本上可以分为两种类型,即气体传输泵和气体捕集泵。随着真空应用技术在生产和科学研究领域中对其应用压强范围的要求越来越宽,大多需要由几种真空泵组成真空抽气系统共同抽气后才能满足生产和科学研究过程的要求,由于真空应用部门所涉及的工作压力的范围很宽,因此任何一种类型的真空泵都不可能完全适用于所有的工作压力范围,只能根据不同的工作压力范围和不同的工作要求,使用不同类型的真空泵。为了使用方便和各种真空工艺过程的需要,有时将各种真空泵按其性能要求组合起来,以机组型式应用。 各种真空泵的工作原理 水环式真空泵/液环真空泵工作原理 水环真空泵(简称水环泵)是一种粗真空泵,它所能获得的极限真空为2000~4000Pa,串联大气喷射器可达270~670Pa。水环泵也可用作压缩机,称为水环式压缩机,是属于低压的压缩机,其压力范围为1~2×105Pa表压力。 水环泵最初用作自吸水泵,而后逐渐用于石油、化工、机械、矿山、轻工、医药及食品等许多工业部门。在工业生产的许多工艺过程中,如真空过滤、真空引水、真空送料、真空蒸发、真空浓缩、真空回潮和真空脱气等,水环泵得到广泛的应用。由于真空应用技术的飞跃发展,水环泵在粗真空获得方面一直被人们所重视。由于水环泵中气体压缩是等温的,故可抽除易燃、易爆的气体,此外还可抽除含尘、含水的气体,因此,水环泵应用日益增多。 在泵体中装有适量的水作为工作液。当叶轮按图中顺时针方向旋转时,水被叶轮抛向四周,由于离心力的作用,水形成了一个决定于泵腔形状的近似于等厚度的封闭圆环。水环的下部分内表面恰好与叶轮轮毂相切,水环的上部
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密度高度以及其与温度、湿度、大气压力的关系
作者:德尔塔 日期:2022-04-30
密度高度 和非标准大气条件下的空气动力学性能有关的更合适的术语是密度高度- 对应于特定空气密度时的标准大气条件下的高度。 密度高度是经非标准温度修正后的压力高度。当空气的密度增加(较低的密度高度)时,飞机性能增加,相反地,随着空气密度降低(较高的密度高度)时,空气性能降低。空气密度的下降意味着高密度高度;空气密度增加意味着较低的密度高度。密度高度用于计算性能。在标准大气条件下,大气中每个高度上的空气都有特定的密度,且在标准条件下,压力高度和密度高度表示的高度相同。因而,密度高度是标准大气条件下给定密度位置在海平面上的垂直距离。 密度高度的计算必须要考虑压力(压力高度)和温度。因为任何高度上飞机性能是基于标准白天条件下的空气密度,应用到空气密度高度的这个性能数据可能和高度计指示不一致。在高于或者低于标准的条件下,这些高度不能直接从高度计来计算。 密度高度先通过首次测得的压力高度来计算,然后为非标准温度的变化而修正这个高度。由于密度直接随压力而变化,随温度相反地变化,允许密度变化的时候一个给定的压力高度可能存在于很大范围的温度 内。然而,一个已知的密度会在任何一个温度和压力高度下发生。当然,空气的密度对飞机和发动机性能有明显的影响。不管飞机运行的实际高度是多少,它会表现出好像它运行在一个等于当前密度高度的高度上。 例如,当设定为29.92时,高度计可能指示压力高度为5000英尺。根据飞机飞行手册/飞行员操作手册,在标准温度条件下 起飞时的地面滑跑可能要求距离为790英尺。然而,如果温度是标准之上的20摄氏度,空气的膨胀提高了密度高度。使用表格或者图表中的温度修正数据或者用计算机得出密度高度,可能发现密度高度是7000英尺,需要的地面滑跑距离可能会接近1000英尺。 空气密度受高度,温度和湿度变化的影响。高密度高度指的是稀薄空气而低密度高度指的是稠密的空气。导致高密度高度的条件是高海拔高度,低大气压力,高温,高
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色谱室应该如何设计
作者:德尔塔 日期:2022-04-30
色谱室色谱台高0.75米,宽0.80米,台面离墙0.5米,,TCD检测器的尾气要用管线连接到室外。色谱用助燃气可用空气压缩泵,氢气可用氢气发生器,也有用三气发生器的,色谱室要配备样品 处理间,样品处理间要有通风橱,上下水,药品柜。 电路:单相三线(火、零、地),仪器多的色谱室三相五线。 气路:一般设三种气路管线,氮气、氢气、空气,有条件的可加氦气。气路由室外钢瓶间进入室内,气路上要加过滤器进入室内 后总管线通过稳压阀分向每一台色谱仪,在连接每一台色谱仪前加针型阀。 通风:色谱室有氢气和燃烧放出的二氧化碳,因此要有良好的通风,一般在房间靠走廊侧墙的下边离地面200mm高设400×400mm 的百叶通风口。 室温:色谱室温度一般要求在22-27度,大的化验室都采用整体空调,空调出风口要设在房间的上部,风不能直吹色谱仪。 液相色谱是用于分离和分析蛋白质、肽、氨基酸、复杂有机物等的一种经典和有效的方法。绝大部分低挥发性有机物均可使用液相色谱进行分离和检测。由于各组份具有不同的物理或化学性质,当它们通过不同的分离介质或改变分离条件时,利用在保留时间上的差异,就可以有效地分离出所需的组份。按压力大小液相色谱可分为:高压液相色谱、中压液相色谱和常规液相色谱。液相色谱还可以使用一种或多种检测器来检测样品,常用有:紫外、电导、pH、荧光、电化学、红外联用、圆二色谱仪、折光率检测仪、质谱和生物反应器等。目前液相色谱在分子生物学、药理学、有机化学等研究中起到相当重要的作用。 液相色谱室色谱台高0.75米,宽0.80米,台面离墙0.5米,液相色谱不易和气相色谱放在一个房间,液相色谱室要配备样品处理间,样品处理间要有通风橱,上下水,药品柜。 电路:单相三线(火、零、地),仪器多的色谱室三相五线。 通风:液相色谱室有有机气体,因此要有良好的通风,在仪器上方安装排风罩(如图所示),采用屋顶风机,一般在房间靠走廊侧墙的下边离地面2
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正常人脐静脉内皮细胞的培养
作者:德尔塔 日期:2022-04-30
正常人脐静脉内皮细胞的培养 实验材料: 1. 婴儿脐带; 2. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2; 3. 培养用液:M199培养液(含20%小牛血清);0.125%胰蛋白酶-0.01%EDTA(1:1,V:V)混合消化液;D-Hanks液、100IU/ml青霉素和100μg/ml链霉素; 4. 培养器具:玻璃插管与输液胶管,培养瓶或皿、白内障、眼科剪、镊子等; 培养方法: 1. 在无菌条件下,取健康产妇分娩后新鲜的婴儿脐带(长20cm以上,不宜超过6h),选择无夹痕、无扭曲、无凝血阻塞的部分; 2. 在脐静脉两端开口处,分别用丝线扎紧并固定在50ml注射器和带输液胶管的玻璃插管上,注入D-Hanks液冲洗脐静脉,至无血迹; 3. 用止血钳夹住玻璃插管上的输液胶管,从另一端的注射器向脐静脉徐徐注入0.1%胶原酶溶液,至血管充盈。注意两端封闭,以防液体返流。立即放入37℃的无菌D-Hanks液内,15min后取出; 4. 通过注射器吸取收集酶液,同时注入含20%小牛血清的M199培养液冲洗静脉,合并于同一离心管内,以1000r/min离心7—10min; 5. 弃去离心沉淀后的上清液。加入20%小牛血清的M199培养液(pH7.2),重新悬浮细胞。并调整至细胞密度为1.5×105—2.0×105个/ml,接种于培养瓶或培养皿中。置37℃,5%CO2培养箱培养; 6. 第二天弃培养液,用D-Hanks液轻轻洗1次,以去除不贴壁的细胞或死细胞。换入新鲜含20%小牛血清、100IU/ml青霉素和100μg/ml链霉素的M199培养液(pH7.2)。继续置37℃,5%CO2培养箱培养; 7. 每2—3d换培养液1次。换液时将原培养液弃掉1/2—2/3,然后加入新鲜的上述培养液至原来的量。待细胞长至融合状态后,即可行传代培养;
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中国科学家为植物在有氧条件下释放甲烷提供新的证据
作者:德尔塔 日期:2022-04-30
日前,中国科学院西北高原生物研究所曹广民研究员及中国科学院地理科学与资源研究所徐兴良副研究员带领研究小组,在青藏高原生态系统甲烷排放研究方面取得重要成果。其研究论文“Methane Emissions by Alpine Plant Communities in the Qinghai–Tibet Plateau”已在著名生物学刊物Biology Letters上正式发表。这是首次关于青藏高原高寒生态系统植物群落甲烷排放相关研究成果的报道。该项成果一经发表,即得到了国际学术界的和媒体广泛关注,世界著名的学术刊物《自然》(Nature)对该项目的参与完成人、中国科学院西北高原生物研究所所长赵新博士进行了专访,并在“NATURE NEWS”上发表了重要评论,英国皇家化学会(RSC —Royal Society of Chemistry)也在其网站刊登了相关报道。 该项研究采用密闭箱式法,选择青藏高原两种主要高寒草甸群落类型,对高寒草甸生态系统甲烷排放进行了长达三年的监测,取得了重要的研究数据。研究结果表明,高寒草甸植物在地球甲烷循环中具有重要的作用,同时,在进行高寒草甸生态系统对大气甲烷的贡献作用研究中须将植物类群和生长环境的不同纳入考虑因素。 世界著名学术杂志《自然》(Nature)就这一研究成果对中国科学院西北高原生物研究所所长赵新全博士进行了专访,并在2008年8月20日的NATURE NEWS 中刊登了题为“Tibetan Meadows Emit Methane-Field Survey Confirms That Plants Can Boost Levels of the Greenhouse Gas.”(青藏高原草甸释放甲烷——野外监测证实植物可能增加温室气体的排放)的评论文章。文章指出,早在2006年,德国科学家Frank Keppler就揭示出植物可能在大量地释放甲烷,而甲烷正是众所周知的造成地球表面温室效应的罪魁祸首之一。这一发现与过去人们一直以来认为植物可以吸收二氧化碳从而有效抵制大气变暖的理论正好相反。根据Frank Keppler的实验结果,全球范围内,植物每年约释放23,600万吨甲烷,约占甲烷总释放量的30%。然而,针对这一理论,不同的研究组得出的
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大型中央纯水分质供应系统解析
作者:德尔塔 日期:2022-04-30
根据我们的市场调研,大型实验中心现目前用水存在着以下问题:取用纯水点多,各点取用水量不均,制纯水耗材成本高,用水极为不便等现象,本公司根据用户实际需求, 结合纯水处理技术应用发展新趋势,特别开发了中央超纯水系统.有效解决上述用水难题. 集中制水,循环输送,分质取用,大型实验室用超纯水机综合优势体现在:取用水简便高效,使用成本较低,更符合现代化大型实验中心用水需求及发展需要. 系统采用了市政自来自动进水, 可出水水质:(以下三种水质可选一种或一种以上) (1)纯水水质符合实验室用水规格GB6682-2008三级水标准,电阻率0.2 MΩ.cm@25℃; (2)纯水水质符合实验室用水规格GB6682-2008二级水标准,电阻率≥1MΩ.cm@25℃; (3)超纯水水质优于实验室用水规格GB6682-2008一级水标准,电阻率≥18 .25MΩ.cm@25℃; 工作示意图: 中央超纯水系统主要配置优质增压泵 多介质过滤装置 活性碳过滤器 软化处理器 保安过滤器 RO反渗透处理单元 纯水专用液位自动控制水箱 进口芯片控制处理器 大屏幕液晶触摸显示监控装置。 制水设备主机集中制水,设备产出的纯水通过输送管道输送到各用水点方便用户取用;超纯水实行终端再深度纯水处理以实现用户对水质超纯的需要。 系统采用“蛇形循环”供水方式,即管道采取循环布置,回水经水质自动监测后,合格水进入储存系统,不合格水进入主机在处理。使用点阀门处的“盲管”段长度,不得大于6倍管径,无“死水”现象产生,这样才能可防止超纯水不受第二次污染,保证在任用水点取出的水都符合使用要求。
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实验室超纯水机解决方案
作者:德尔塔 日期:2022-04-30
由于实验过程中对纯水的水质有严格的要求。国之源推出了实验室中央纯水机解决方案,其中包括 实验室超纯水机-B系列 G系列 T系列 P系列 和 现代化实验楼超纯水分质供应系统 本系统更适用于大型实验中心: 根据我们的市场调研,大型实验中心现目前用水存在着以下问题:取用纯水点多,各点取用水量不均,制纯水耗材成本高,用水极为不便等现象,本公司根据用户实际需求, 结合纯水处理技术应用发展新趋势,特别开发了SZ中央纯水系统.有效解决上述用水难题. 集中制水,循环输送,分质取用,中央纯水分质供应系统综合优势体现在:取用水简便高效,使用成本较低,更符合现代化大型实验中心用水需求及发展需要.另外还可以可根据用户的需要输入或修改多组参数,满足个性化自动运行要求,可兼顾各种执行器和流程运行模式。大大提高了用户的需求。 示意图: 功能介绍: 1、控制功能:全自动触摸屏显示控制器、动画式流程图,实时显示并监控各水处理单元工艺运行状态; 2、运行状态及参数在线显示:流量在线显示、压力在线显示、源水水质和产水水质在线监测及数字显示等,实时了解设备运行情况,方便对系统运行状态进行监控和分析; 3、具备自动保护和报警功能:开机自检、缺水保护报警、停电自动复位、高低压自动停机保护并处理、系统实现联动,如果系统局部出现问题,系统自动停机等; 4、反渗透主机具有RO膜防垢程序设计功能,定时循环冲洗RO膜表面,有效保护RO膜运行; 5、所有水箱液位全自动控制:中间水箱、纯水箱、水箱之间的设备连接不仅实现联动,同时保护每台泵不至空转而损坏; 6、产品水质在线监测与不合格水循环处理:为保证用水点水质符合要求,主机产水水质实时在线监测,并设有水质反馈装置,不合格水质循环再处理; 7、具备自动冲洗管网功能,定期对管路进行清洗,以保持管道内部洁净,管路冲洗时,可直接排放,也可回流到制水设备主机重新利用,以节约水源 输送使用: 制水设备主机集中制水,设备产出
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在YSI 6系列、556和5200仪器上安装可在野外更换的传感器的注意事项
作者:德尔塔 日期:2022-04-30
安装6系列仪器(多参数仪器)的温度/电导率探头、溶解氧探头、pH或pH/ORP复合探头有一定的难度。对于556和5200系统,需要考虑的是安装温度/电导率探头、pH或pH/ORP复合探头。如果没有正确地遵循安装技术要求,可能会破坏探头端口底座上的螺纹。 为了避免出现这种破坏,确保正确地安装这些可在野外更换的传感器,请遵循以下程序: ●轻轻地、均匀地在探头上的O型密封圈涂上少许密封油脂(注:请用干净的纸巾擦去O型密封圈外的多余密封脂,以免沾染灰尘和泥沙) 。 ● 把探头插入正确的端口,轻轻转动探头,直到使两者啮合。 ●把探头推向探头接口底座,直到密封圈就位。当你向内推探头时,会感觉到有些阻力,这是正常的。 ● 一旦感觉O型密封圈就位,用手顺时针轻旋探头上的不锈钢螺帽(注:不能用工具)。 ●螺帽必须用手固定,如果旋转螺帽有困难,请马上停止,后退,重复上面的步骤。如果旋转螺帽有困难,这可能是螺纹交叉。如果此时强制性地旋紧,可能会破坏你的仪器。 ●当探头插入正确时,螺帽将很容易地被旋紧并固定探头到接口底座上。此时借用工具稍微旋紧螺帽,使其不易松散。注意千万不要过度收紧。 注意:一旦用手固定螺帽,O型密封圈就起作用,整个装置就处于水密状态了,除非螺帽受到外力才无法保持最佳的密封状态。
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甲基化检测——MS-HRM技术
作者:德尔塔 日期:2022-04-30
HRM技术服务之甲基化检测(MS-HRM技术) DNA甲基化是发生在DNA碱基序列上的一种共价修饰。在哺乳动物中,DNA甲基化主要发生在5'-CpG-3'双核苷酸序列的胞嘧啶上。在人类基因组中,大约有60%~70%的CpG胞嘧啶是甲基化的,其程度因不同的物种和细胞类型而异。DNA甲基化状态在基因组中呈现出一定的分布模式,90%的甲基胞嘧啶位于重复序列上。DNA甲基化可以遗传,并改变了DNA的结构特性与基因活动方式。 DNA甲基化意义: 靶序列上甲基基团的存在可以影响转录因子的结合,引起转录抑制,从而使该基因表达受到抑制。启动子区CPG岛的甲基化常常可以抑制该基因的转录,尤其是对于抑癌基因,凋亡相关基因,DNA修复基因等,启动子区域发生甲基化会影响功能的发挥。不同的肿瘤组织基因甲基化状态不一样,可以作为早期检测,监测肿瘤形成的重要标志物。对于某些特异基因的甲基化,更加重要,如DNA修复基因,可以引起对化疗药物的敏感,从而作为药物**疗效的评价指标,指导临床用药。 检测方法: 甲基化特异性PCR、Northern印迹法、Western印迹法、免疫细胞化学等,这些检测方法需要花费大量时间,成本高,在临床推广应用时均存在一定的困难。 高分辨率熔解(High Resolution Melt,HRM)是一种最新的在表观遗传学中检测 CpG 位点的一种新技术,主要是根据DNA序列的长度、GC含量、碱基互补性差异和特定饱和染料可以插入DNA双链中的特性,应用高分辨率的熔解曲线对样品进行分析,其分辨精度可以达到对单个碱基差异的区分。 作为新一代的遗传扫描工具,HRM具有“简、效、快、廉”等其它技术难以比拟的优势: 简:无需序列特异性探针,不受碱基位点局限,同时检出已知或未知突变、SNP和甲基化位点;闭管操作,避免交叉污染。 效:最低检测0.1%-0.01%的突变或异常甲基化,检测SNP灵敏度和特异性均为100%。 快:1次同时检测不多于384个样本,在60-90分钟内完成检测。 廉:简化操作步骤、降低人工和试剂成本,费用
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怎样正确操作倒置显微镜?
作者:德尔塔 日期:2022-04-30
1.倒置显微镜中最常用的观察方法就是相差。由于这种方法不要求染色,是观察活细胞和微生物的理想方法。在此提供各种聚光器来满足需要,这种方法提供带有自然背景色的、高对比度的、高清晰度的图像。 2.开机。接连电源。打开镜体下端的电控开关。 3.使用 (1)准备:将待观察对象置于载物台上。旋转三孔转换器,选择较小的物镜。观察,并调节铰链式双目目镜,舒适为宜。 (2)调节光源:推拉调节镜体下端的亮度调节器至适宜。通过调节聚光镜下面的光栅来调节光源的大小。 (3)调节像距:转三孔转换器,选择合适倍数的物镜;更换并选择合适的目镜;同时调节升降,以消除或减小图像周围的光晕,提高了图像的衬度。 (4)观察:通过目镜进行观察结果;调整载物台,选择观察视野。 4.关机 取下观察对象,推拉光源亮度调节器至最暗。关闭镜体下端的开关,并断开电源。旋转三孔转换器,使物镜镜片置于载物台下侧,防止灰尘的沉降。 日常维护及注意事项 1.所有镜头表面必须保持清洁,落在镜头表面的灰尘,可用吸耳球吹去,也可用软毛刷轻轻的掸去掉。 2.当镜头表面沾有油污或指纹时,可用脱脂棉蘸少许无水乙醇和乙醚的混合液(3:7)轻轻擦拭。 3.不能用有机溶液清擦其它部件表面,特别是塑料零件,可用软布蘸少量中性洗涤剂清擦。 4.在任何情况下操作人员不能用棉团、干布块或干镜头纸擦试镜头表面,否则会刮伤镜头表面,严重损坏镜头,也不要用水擦试镜头,这样会在镜头表面残留一些水迹,因而可能滋生霉菌,严重损坏显微镜。 5.仪器工作的间歇期间,为了防止灰尘进入镜筒或透镜表面,可将目镜留在镜筒上,或盖上防尘塞,或用防尘罩将仪器罩住。 6.微镜尽可能不移动,若需移动应轻拿轻放,避免碰撞。 7.不允许随意拆卸仪器,特别是中间光学系统或重要的机械部件,以免降低仪器的使用性能。