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如何实现药品稳定性试验箱等机械设备的全面清理
作者：德尔塔 日期：2022-04-27
目前这个社会，大多家庭家里或多或少都有一些金属设备，譬如药品稳定性试验箱，这些金属制品在冬季还好，但一到了梅雨盛行的南方夏季，就极为容易生锈，影响机器的工作性能，而如何去清理却是个难题。 在清洗历程中将可以完美是可以避免零部件表面干净程度不够的情况，比方进步干净剂的浓度或经由改换槽液施来以消弭表面措置工艺流程的缺陷的表面措置工艺。经由核算气泡内部的最小和最大压力差以及校正系数，即可取得表面张力值。 跟着清洗历程可靠性的添加，优化后的清洗历程可以增添干净剂的运用量，降低本钱，避免增添在后续工序中后面清洗槽中历程所含的干净剂组分浓度干净成分，增添消耗水量，降低废水措置水的本钱。 最适合优化的干净剂浓度是进步经济效益的历程的基础，。为了确保清洗的高可靠性，浴槽中的水性清洗液中需求对峙相对不乱的状况和的形状。因此，经由工艺节制就可以运用起码的水、干净剂动力便能抵达高质量的清洗目的，而且增添产品的废品率、返工率可以运用起码水、干净剂和动力，能过节制流程以抵达高质量的清洗目的。 所以最优化清洗就以持续监测干净剂浓度和根据理论消耗情况公平配备，运用量为基础优化的基础是连续监测干净剂浓度和根据消耗量可靠地添加剂量。而表面活性剂浓度的监测与及其根据消耗的配量，则需求测出归因于表面张力的数据。这种测试方法的长处在于，只需自由和生动的表面活性因子介入测量，这些表面活性剂会附着在新自然生成的气泡表面，还影响动态表面张力的测量。 表面清洗缺乏会惹起产品质量题目。而清洗的结果是把油污油脂和粉尘颗粒从零配件的表面肃清。 零部件在进行高质量的表面措置或表面喷涂前需求充分清洗零件的表面。 表面活性剂的浓度可以经由一张在执行室验证过的参照表来配备，以求更好的进行恒温恒湿箱的整体清理。然后，确定干净剂最优浓度值，并经由测量值维持与进行自动配量。部件表面清洗剂的浓度干净剂成份、自然生成器促净
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欧菲姆过氧化氢干雾灭菌设备对洁净区厂房彩钢板的影响研究
作者：德尔塔 日期：2022-04-27
【综述】几乎所有制药洁净区的厂房都是采用彩钢板构成，彩钢板的质量会直接影响到洁净区空气洁净度，光滑、易清洁，致密度好的彩钢板自然可以带来好的空间环境管理。总所周知，洁净区是要经常进行消毒的，以保证区域内相对到达“无菌”状态。消毒剂直接与彩钢板接触是否会造成腐蚀、加速老化等现象呢？本文通过欧菲姆过氧化氢干雾对彩钢板做了极限挑战测试，继而分析其腐蚀的原因及影响因素，最后为用户能放心使用欧菲姆提出了几点建议，确保在预期的一段时间内对彩钢板并没有产生腐蚀的影响。 【关键词】欧菲姆，过氧化氢，干雾灭菌，彩钢板，腐蚀彩钢板 【测试概况】欧菲姆干雾灭菌一般采用130ppm的杀孢子剂使用量对洁净区进行空间灭菌。为了更好的见证此次的测试的效果，本次测试均采用了增倍挑战，也就是测试的浓度与时间都比平常的高出几倍或几百倍的量。 本次测试由两个部分组成： 1、欧菲姆干雾灭菌设备现场挑战实验。采用欧菲姆干雾设备模拟现场灭菌，空间中放置洁净区结构的彩钢板，增倍使用量多次灭菌后，观察彩钢板的变化。 2、诺福杀孢子剂表面擦拭实验。为了证明诺福杀孢子剂是否具有腐蚀完好致密性彩钢板的性质，对其采取了极限挑战实验，直接擦拭法。 【测试材料与场所】 1、欧菲姆OXY-25000型干雾设备一台 2、诺福易验证空间杀孢子剂（过氧化氢5.5%） 3、紫光提供的彩钢板诺干 4、约60立方米大的空间，温度22摄氏度，湿度为60% 【测试方法】 1.将彩钢板均匀分布在相对密闭的空间里，采用750ppm的使用量，暴露接触时间延长平常的四倍，反复进行多次试验，每天记录彩钢板的变化情况。持续5天。 2.使用40000ppm（增加了385倍）的杀孢子剂对完好彩钢板进行表面擦拭，浸泡4小时，持续3天，同时也对有划痕的彩钢板进行了擦拭。每天观察彩钢板的变化（包括颜色、光泽、起泡、粉末等） 【试验结果】 致密性完好的彩钢板经过试验均没有出现腐蚀，与正常的彩钢板对比没有任何异常。但是，
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万深AlgaeC藻类计数及辅助鉴定系统来快速测定浮游植物生物量
作者：德尔塔 日期：2022-04-27
万深AlgaeC藻类计数及辅助鉴定系统快速测定浮游生物的生物量 浮游植物是水中悬浮生活的若干种藻类的总称。浮游植物作为水生态系统的重要成员，是鱼类天然饵料的重要组成。因浮游植物对环境变化十分敏感，在环境监测中也很重要。不同类型的水体或同一水体的不同季节，藻类组成是不相同的，各种藻类的相对量在不断地变化，此变化有一定的趋势。水中浮游植物组成和存量是养殖鱼类合理投放的重要科学依据，可服务于水生态研究及利用。 浮游植物现存量是指某一瞬间单位水体中所存在的浮游植物量。其有两种表示方法：用数目单位表示成密度（一般用个/L为单位），用质量单位mg/L表示的现存量则为生物量。以往调查中，通常仅注重浮游植物的种类或数量，而对其生物量不够重视。因不同水体、不同种类的藻类在个体上的差异很大，仅仅用数量就很难评价不同水体中饵料生物的丰歉，故浮游植物的定量得以测算生物量为目标，才更科学。 浮游植物生物量的经典研究方法有两类。一类是生物量“状态”测量（测干重，细胞数量和种群体积），其在理论上是将整个浮游植物作为代表生物量的指标，此方法偏差较、，可靠性不高。另一类是浮游植物生物量“集团”测量（测浮游植物细胞组份）。其包括浮游植物细胞三大组份颗粒态有机碳(POC)，颗粒态有机氮(PON)，颗粒态有机磷的测定和细胞其它组份的测定，如叶绿素a，ATP，蛋白质以及其它色素的测量。此方法测的是活细胞有效组份，且能精确地反映种群的生物量，但其难以反映生态系统中不同浮游植物物种对物质和能量传递的贡献。 国外有些学者在测定了不同浮游植物细胞的碳含量、细胞体积、细胞表面积后，发现细胞体积与细胞碳含量的相关性要比与细胞表面积的更强，并建立了浮游植物细胞体积和细胞碳含量的回归方程。从而将各种浮游植物细胞计数结果，通过细胞体积与碳含量等生物量测量的关系转换为生物量，以便在物种水平上合理估算对浮游植物群落生物量。该生物量估算法用途很广泛：可了解浮游植物群落
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压力变送器的类型和原理介绍
作者：德尔塔 日期：2022-04-27
压力变送器变阻器按原理分有电容式、谐振式、压阻式、力平衡式、电感式、应变式等几类，目前常用的压力变阻器有扩散硅压力变送器、压电压力变送器、电容式压力变送器、陶瓷压力变送器几种。不同的压力变送器有着不同的特点．其区别主要集中在压力传感器上．不过总的来说其工作原理都基本相同。当压力信号作用于传感器时，传感器将压力信号转换为电信号．通过差分放大和输出放大．再由V／A电压电流转换成和被测介质液位压力成线性对应关系的4-20mA标准电流输出信号，从而供其它器件如数子压力表、电子电位差计、智能调节仪、计算机等使用。 压力变送器是是压力变量转换中的重要输出信号仪表，在油田、电厂、冶金等行业中被广泛应用。对压力变送器进行栓定以分析其测量不确定度，是保证安全生产的必要手段。本文以压力变送器测量不确定度作为研究对象进行了分析，有一定的实际应用价值。 压力变送器是一种能将气体、液体等称物理压力参数转变为标准化可传递输出的电信号的信号仪表，主要由测压元件传感器、测量电路、过程连接件三部分组成，多与指示报警仪、记录仪、调节器等二次仪表搭配使用，进行测量、指示和过程调节工作。同传统直读式压力表相比，压力变送器似能远距离传输信号，拥有更高的智能度。 随着工业测控技术的发展和自动化水平的提高，压力变送仪器被越来越多的应用于油田、电厂、冶金等行业中，用来测量压力、差压、流量、液位等信号。确保压力变送器测量的可靠性，对压力变送器进行测量不确定度分析，对确保安全生产和系统稳定运行有重要意义。
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双室体描仪测定豚鼠气道阻力和气道反应性
作者：德尔塔 日期：2022-04-27
摘要：目的 建立应用双室体描仪测定豚鼠气道阻力和气道反应性的方法，为哮喘的研究提供有效手段。方法 应用双室体描仪分别测定乙酰甲胆碱(Mch)激发后豚鼠气道阻力的回复时间；于实验的第1、15天分别测定正常对照组豚鼠气道阻力和气道反应性2次，每次间隔2h，验证测定结果的重复性；观察OVA致敏豚鼠OVA激发前后气道阻力和气道反应性的变化情况。结果 PC100浓度的Mch雾化后，豚鼠在1h内气道阻力回到基线水平。正常对照组豚鼠在第1、15天分别测量两次的基础气道阻力sRaw为(3.25±0.67) cmH2O·s、(3.33±0.58)cmH2O·s、(3.30±0.56) cmH2O·s、(3.32±0.75) cmH2O·s，气道反应性(log2PC100)值分别为8.48±0.94、8.64±1.04、8.56±0.67、8.64±0.60，气道阻力和气道反应性两两比较，差异无统计学意义(P>0.05)。致敏豚鼠OVA激发后气道阻力和气道反应性均较激发前显著提高，sRaw分别为(7.08±1.82) cmH2O·s和(2.87±0.53) cmH2O·s(P
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蛋白质技术专题：细胞凋亡的几种检测方法介绍
作者：德尔塔 日期：2022-04-27
一、形态学观察方法 1、HE染色、光镜观察：凋亡细胞呈圆形，胞核深染，胞质浓缩，染色质成团块状，细胞表面有“出芽”现象。 2、丫啶橙(AO)染色，荧光显微镜观察：活 呈黄绿色荧光，胞质呈红色荧光。凋亡细胞核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧，可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体。 3、台盼蓝染色：如果 不完整、破裂，台盼蓝染料进入细胞，细胞变蓝，即为坏死。如果细胞膜完整，细胞不为台盼蓝染色，则为正常细胞或凋亡细胞。此方法对反映细胞膜的完整性，区别坏死细胞有一定的帮助。 4、透射电镜观察：可见凋亡细胞表面微绒毛消失，核染色质固缩、边集，常呈新月形，核膜皱褶，胞质紧实， 集中，胞膜起泡或出“芽”及凋亡小体和凋亡小体被临近巨噬细胞吞噬现象。 二、DNA凝胶电泳 (一)、检测原理 细胞发生凋亡或坏死，其细胞DNA均发生断裂，细胞内小分子量DNA片断增加，高分子DNA减少，胞质内出现DNA片断。但凋亡细胞DNA断裂点均有规律的发生在核小体之间，出现180-200bpDNA片断，而坏死细胞的DNA断裂点为无特征的杂乱片断，利用此特征可以确定群体细胞的死亡，并可与坏死细胞区别。 (二)结果判断 正常活细胞DNA 电泳出现阶梯状(LADDER)条带;坏死细胞DNA电泳类似血抹片时的连续性条带。 三、酶联免疫吸附法(ELISA)核小体测定 凋亡细胞的DNA断裂使细胞质内出现核小体。核小体由组蛋白及其伴随的DNA片断组成，可由ELISA法检测。 (一)检测步骤 1、将凋亡细胞裂解后高速离心，其上清液中含有核小体; 2、在微定量板上吸附组蛋白体’ 3、加上清夜使抗组蛋白抗体与核小体上的组蛋白结合‘ 4、加辣过氧化物酶标记的抗DNA抗体使之与核小体上的DNA结合’ 4、加酶的底物，测光吸收制。 (二)用途 该法敏感性高，可检测5*100/ml个凋亡细胞。可用于人、大鼠、小鼠的凋亡检测。该法不需要特殊仪器，适合基层工作，但是不能精确测定凋亡细胞发生的绝多对量。 四、流式细胞仪定量分析 (一)检测原理 细胞发生凋亡时，其细胞膜
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生物化学技术专题：微生物的糖发酵试验
作者：德尔塔 日期：2022-04-27
一、单糖发酵试验 (一)、实验原理 单糖发酵是将葡萄糖，乳糖或麦芽糖等分别加入蛋白胨水培养基内，使其最终浓度为 0.75~1％。并加入一定量酚红指示剂及小倒管，制成单糖发酵管，接种细菌经37℃培养18~24小时，若能分解糖产酸则酚红指示剂由红变黄，若能分解 甲酸有CO2和H2等气体形成，小倒管内则聚集有气泡；不分解，则指示剂不变色。 (二)、实验材料 1．菌种：大肠杆菌，伤寒杆菌18~24小时琼脂斜面培养物。 2．培养基：葡萄糖发酵管，乳糖发酵管等。 (三)实验方法 1．将伤寒杆菌，大肠杆菌按照液体接种方法分别接种于葡萄糖及乳糖发酵管内。 2．置37℃孵箱培养18~24小时。 3． 观察结果：由于一些细菌能分解某种糖类产酸，所以培养基中PH下降到7.0以下，在酚红指示剂的显示下，培养基颜色由红变黄。产酸者以“+”表示，如果同 时产生气体，则培养基中小倒管内有气泡出现，此乃产酸又产气，以“⊕”表示，不分解，则指示剂不变色，用“-” 表示。 (四)、实验结果 伤寒杆菌 大肠杆菌 葡萄糖 + ⊕ 乳 糖 - ⊕ 二、V-P(Voges-Proskauer)试验 (一)、实验原理 有些细菌如产气杆菌，分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸脱羧，生成乙酰甲基甲醇，在碱性环境中被氧化为二乙酰，再与培养基内胍基结合，生成红色化合物，V—P试验阳性。 (二)、实验材料 1．菌种：大肠杆菌，产气杆菌18~24小时琼脂斜面培养物。 2．培养基：葡萄糖蛋白胨水培养基。 3．试剂：V-P试剂[40％氢氧化钾水溶液(内含0.3％肌酸)和6%α-奈酚酒精溶液]。 (三)实验方法 1. 分别接种大肠杆菌，产气杆菌于两支葡萄糖蛋白胨水中。 2. 置37℃培养48小时后，取出分别加入KOH1ml和α-奈酚溶液1ml ,摇匀，静置试管架上5~15分钟。 (四)、实验结果 培养液变为红色为阳性，不变色为阴性。 三、甲基红试验 (一)、实验原理 某 些细菌如大肠杆菌等分解葡萄糖产生丙酮酸，继而分解为甲酸、乙酸、乳酸等，使培养基PH值降至4.5以下，加入甲基红指示剂呈红色，此为阳性反应
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生物化学技术专题：掌叶防己碱的提取与分离及延胡索乙素制备
作者：德尔塔 日期：2022-04-27
掌叶防已碱又称巴马汀（palmatine），硫酸延胡索乙素又称消旋四氢巴马汀硫酸盐（dltetrahydro palmatine sulphate）。 延胡索乙素（Corydalis B）为镇静安定药，用于缓解胃系统的疾病所引起的疼痛，临产阵痛、头痛、失眠等。 中药延胡索（元胡，Corydalis yanhusuo W.T. Wang的块根）中含延胡索乙素的量很少，而其脱氢化合物巴马汀在某些植物中含量却很高。在中国华南一带的防已科植物黄藤（Fibreursa recisa paerre）的根茎中含巴马汀，再经氢化反应，制备延胡索乙素。 黄藤曾列入《本草纲目》，李时珍谓“藤生生岭南，状若防已，但人常服此藤，纵饮食有毒，亦自然不发”。现代民间作为清热消炎药。常用于外伤感染、扁桃体炎、咽喉炎、结膜炎、热痢及黄疸等。 实验的目的要求： 1．掌握季铵生物碱的一种提取方法。 2．掌握生物碱的一般理化性质及其结构与性质的关系。 3．了解黄藤生物碱的结构与性质的关系。 4．熟悉生物碱沉淀反应的条件和方法。 5．掌握制备生物碱结晶性盐的方法和精制。 6．掌握四氢巴马汀的制备方法。 黄藤中已知成分的理化性质： 黄藤根茎及根中所含成分主为巴马汀。尚含少量药根碱、黄藤素甲、黄藤素乙、内脂及甾醇。又谓在根茎、根及树皮中含小檗碱。 1． 掌叶防已碱（巴马汀，Palmatine） 本品系季铵生物碱，溶于水、乙醇，几乎不溶于氯仿、乙醚、苯等溶剂，掌叶防已碱盐酸盐即氯化巴马汀（palmation Chloride）C21H22O4N ·Cl·3H2O为黄色针状结晶，熔点205℃（分解）。其理化性质与盐酸小檗碱类似。巴马汀氢碘酸盐（palmatine icdide）C21H22O4N·I·2H2O为橙黄色针状结晶，熔点241℃（分解）。 2．药根碱（雅托碱·Jatrorrhizine） 本品系具酚羟基季铵盐，其理化性质与巴马汀类似，但较易溶于苛性碱液中，其盐酸在水中的溶解度亦比盐酸巴马汀为大，可籍此性质予以分离。药根碱盐酸盐（Jatrorrhizine Chloride）C20H20O4N·Cl·H2O为铜色针状结晶，溶点204~206℃，其苦味酸盐（Jatrorr
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生物化学技术专题：虎杖中游离羟基蒽醌成分的提取和分离
作者：德尔塔 日期：2022-04-27
虎杖为蓼科植物虎杖（Polygonumcus pidatum siedet Zucc）的根及根茎。别名阴阳莲，花斑竹。味苦、性微寒。能清热解毒、祛风利湿、利尿通淋、祛痰、止咳、通经等。主要用于湿热黄疸、风湿痹痛、淋浊带下、经闭、烫伤。 虎杖中含有较多的羟基蒽醌类成分及二苯乙烯类成分。其中主要有大黄素、大黄、大黄素-6-甲醚、大黄素3-D-葡萄糖苷及β-谷甾醇、鞣质等。虎杖得主要药理作用有抗菌、抗病毒及镇咳平喘、常用来**急性炎症、烧烫伤、肝炎、气管炎等。 虎杖中主要成分的结构与性质 1．大黄素（Emodin）：橙黄色长针晶（丙酮中结晶为橙色，甲醇中结晶为黄色），mp256-257℃。几不溶于水，对于下列溶剂的溶介度分别为：四氯化碳0.01%，氯仿0.0718%，二硫化碳0.009%，乙醚0.14%，苯0.0415。易溶于乙醇，可溶于氨水，碳酸钠和氢氧化钠水溶液。 2．大黄酚（Chrysophanol）:金黄色六角型片状结晶（丙酮中结晶）或针状结晶（乙醇中结晶）。mp 196℃，能升华。易溶于乙醚、氯仿、苯、冰乙酸、乙醇, 稍溶于甲醇，难溶于石油醚，不溶于水、碳酸氢钠和碳酸钠水溶液。可溶氢氧化钠水溶液及热碳酸钠水溶液。 3．大黄素6-甲醚，（Emodinmonomethl ether）:金黄色针晶，mp207℃，能升华。可溶于氢氧化钠水溶液，溶解度与大黄酚相似。 4．大黄素6-甲醚6-D-葡萄糖苷（Anthraglycosibe A）：黄色针晶（稀甲醇中结晶）mp230-232℃。 5．大黄素3-D-葡萄糖苷（Anthraglycoside B）:浅黄色针晶（稀乙醇中结晶含1分子水mp190-191℃。 6．白藜芦醇（Resveratrol）：无色针状结晶，mp256-257℃，216℃升华，易溶于乙醚、氯仿、甲醇、乙醇、丙酮等。 7．白藜芦醇葡萄糖苷（polydotinpeceid）：无色颗粒状结晶，双熔点分别为130-140℃225～226℃，易溶于甲醇、乙醇、丙酮、热水，可溶于乙酸乙酯、可溶于碳酸钠和氢氧化钠水溶液中，稍溶于冷水，难溶于乙醚。 8．β-谷甾醇 9．鞣质：属缩合鞣质，可溶于醇及水，不溶于苯、乙醚、氯仿等
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生物化学技术专题：PPO活性测定
作者：德尔塔 日期：2022-04-27
一、原理与方法 PPO催化各种酚与O2氧化为醌。本实验是采用邻苯二酚为底物，在0.2M磷酸氢二钠－0.1M柠檬酸缓冲液PH5.8的反应体系中，PPO催化邻苯二酚形成褐色的醌，在分光光度计410nm处使反应体系的OD值产生变化，通过OD值上升的读数变化确定PPO的酶活大小。 其方法是：在含有4mlPH5.8的0.2M磷酸氢二钠－0.1M柠檬酸缓冲液试管中加入0.05ml0.05M邻苯二酚溶液，在30℃恒温水浴中预热后加入0.05ml酶液，反应5分钟，在分光光度计410nm处读取吸光值。在上述条件下，以A410读数，以每分钟增加0.01O.D.值定义为一个酶活性单位（U）。 二、仪器与试剂 （1）样品： 多酚氧化酶粗酶液 硫酸铵沉淀组分 DE-52洗脱组分 葡聚糖凝胶洗脱组分 （2）底物： 邻苯二酚：O.01M邻苯二酚溶液 （3）反应体系： 0.2M邻酸二氢钠－0.1M柠檬酸缓冲液PH5.8 （4）器皿与仪器： 试管、恒温水浴等 分光光度计 三、酶蛋白的比活性 比活性＝酶活单位（U）/mg蛋白质 四、实验结果与分析 1. Sephadex G-200的洗脱组分的相对浓度（OD590）和相对酶活（OD410） 结果列表 试管号 蛋白质浓度 PPO酶活 试管号 蛋白质浓度 PPO酶活 空白 0 0 3 0.16 0.09 粗酶液 0.20 0.14 4 0.03 0.03 1 0.00 0.01 5 0.03 0.01 2 0.13 0.09 6 0.02 0.02 分析:2和3试管中含绝大部分所需蛋白,保存进行下一步纯化。 2. DE-52的洗脱组分的相对浓度（OD590）和相对酶活（OD410） 结果列表 试管号 蛋白质浓度 PPO酶活 试管号 蛋白质浓度 PPO酶活 空白 0 0 3 0.03 0.05 粗酶液 0.22 0.16 4 0.09 0.05 1 0.00 0.00 5 0.07 0.02 2 0.03 0.02 6 0.03 0.00 分析:酶活性高低不一定与蛋白含量高低成正比,3和4试管中含较多所需蛋白
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生物化学技术专题：氨基转移反应的定性鉴定
作者：德尔塔 日期：2022-04-27
一、实验目的 （1）学习一种鉴定氨基转移作用的简便方法及其原理； （2）进一步掌握纸层析的原理和操作技术； （3）了解氨基转移作用在中间代谢中的意义。 二、实验原理 氨基移换酶也称转氨酶，它能催化α-氨基酸的氨基与α-酮酸的α-酮基互换，这种作用称为氨基移换作用。它在生物体内蛋白质的合成与分解等中间代谢中，在糖、脂肪、蛋白质三类物质代谢的相互联系、相互转化上，都起着很重要的作用。任何一种氨基酸进行转氨作用时，都由其专一的转氨酶催化。它们的最适pH接近7.4。在各种转氨酶中，以谷氨酸-草酰乙酸转氨酶（简称谷草转氨酶、GOT）及谷氨酸-丙酮酸转氨酶（简称谷丙转氨酶、GPT）活力最强。 三、试剂与器材 解剖器具、离心机、恒温水浴、干燥箱、台秤、层析系统等。 1/15mol/L磷酸缓冲液（pH=7.4）、1%谷氨酸溶液（用KOH中和至中性）、1%丙酮酸溶液（用KOH中和至中性）、0.1%碳酸氢钾溶液、0.05%碘乙酸溶液、15%三氯醋酸溶液、标准丙氨酸溶液（0.1%）、标准谷氨酸溶液（0.1%）、0.1%水合茚三酮乙醇溶液、酚溶剂。 四、操作方法 将兔击晕，迅速解剖，取出肝脏，在低温条件下剪碎。称取匀浆后，离心取上清液，即为制备的酶液。体外氨基移换反应。纸上层析法检查每人4个点（标准丙氨酸溶液、标准谷氨酸溶液、对照上清液、样品上清液）。点样放入层析罩内。用被酚所饱和的水溶液，平衡后，用带小漏斗的玻璃管从层析罩上加饱合酚试剂25ml于层析缸内。然后，立即盖紧塞子，当溶剂前沿达到距滤纸上端约2.5cm处，取出滤纸，晾干或吹干，以除去酚溶剂，喷洒0.1%茚三酮乙醇溶液，放入烘箱中显色氨基酸与茚三酮反应，在滤纸上呈现紫红色斑点。 五、关键步骤与注意事项 ①取动物新鲜组织制备酶液，防止酶失活。 ② 加碘乙酸抑制酶解作用。
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单层玻璃反应釜工作原理
作者：德尔塔 日期：2022-04-27
单层玻璃反应釜工作原理 主要是利用其双层的玻璃特点，我们可以再中间的夹层放置反应物料（有点叫反应溶媒），通过在常压或者负压的情况下进行搅拌反应。这样玻璃反应釜夹层里面的介质（比如：冷冻液、加热水或者加热油之类的）通过搅拌来做循环反应实现加热或者冷却作用。在现代的生化新材料合成实验中作为理想的设备而广泛采用。 选用材料及技术特点 1、由于玻璃反应釜采用的材料（G3.3硼硅玻璃)是拥有优良物料和化学性能。在变频调速的搅拌过程运转中会比较平稳，即使力矩大也不会产生火花。 2、另外，组件采用四氟密封，在市场同类产品中可保持较好的真空度（一般在-0.095mpa左右），保持在工作状态下的高精度密封。而且还有磨屑收集槽。 3、合金钢机械密封，聚四氟乙烯连接口，保持在工作状态下的高精度密封。 4、Pt100传感器探头，测温精度高，误差小，有效提高工作效率。 5、聚四氟乙烯放料阀，可活动接口，出料彻底快捷。 6、玻璃反应釜夹层的制冷或加热溶液在反应完毕后，能彻底排积，不积液。 7、整体不锈钢立柱移动式框架结构，五口反应釜盖，具回流、加液、测温等全套玻璃。 8、强扭力，无噪声。采用的日本技术交流齿轮减速电机。 9、玻璃反应釜的双聚四氟乙烯搅拌桨，适用于低至高黏度液体的搅拌与混合。 的保养须知 1、用前仔细检查仪器，玻璃瓶是否有破损，各接口是否吻合，注意轻拿轻放。 2、用软布（可用餐巾纸替代）擦拭各接口，然后涂抹少许真空脂。（真空脂用后一定要盖好，防止灰砂进入。） 3、玻璃反应釜各接口不可拧得太紧，要定期松动活络，避免长期紧锁导致连接器咬死。 4、先开电源开关，然后让机器由慢到快运转，停机时要使机器处于停止状态，再关开关。 5、各处的聚四氟开关不能过力拧紧，容易损坏玻璃。 6、每次使用完毕必须用软布擦净留在机器表面的各种油迹，污渍，溶剂剩留，保持清洁。 7、停机后拧松各聚四氟开关，长期静止在工作状态会使聚四氟活塞变形。 8、定期对密封圈进行清洁，方
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病毒去除技术在生物制药下游生产工艺中的重要性
作者：德尔塔 日期：2022-04-27
病毒去除步骤对于保障生物制药产品的安全性与完整性而言必不可少。ICH Q5A法规指南要求**性生物制品制造商在他们的生产工艺中实施关键技术，即基于工艺特定病毒去除策略，对已知或未知的病毒污染物进行去除或灭活。此类病毒去除步骤必须经过验证，表明所用的技术能够有效去除工艺过程中的各种已知的与不可预测的病。在ICH Q5A中提到”well designed separation steps, such as chromatographic procedures, filtration steps and extractions, can be effective virus removal steps provided that they are performed under appropriately controlled conditions. An effective virus removal step should give reproducible reduction of virus load shown by at least two independent studies” 目前市场上常见的单克隆抗体药物病毒去除技术有纳滤除病毒技术、pH孵放以及膜层析技术等，其中应用较为广泛的是截留率为20nm 的除病毒过滤器，该方法是从蛋白料液中除去病毒的有效方法，它是以大小排阻的机制实现的，可去除带包膜或不带包膜的病毒，但是需要进行病毒挑战试验，以验证该步骤的病毒去除效果，病毒验证时通常使用缩小规模设备以生产过程中的参数进行病毒截留实验。例如采用专用的细小病毒过滤器 Virosart CPV 和HF（20nm病毒过滤器）进行病毒进行截留和去除，达到法规要求的大于4 log 的截留目标，甚至超过此目标。 20nm除病毒过滤是一种相对成熟安全有效且被广泛应用的方法，理想的除病毒过滤器应该能够截留环境中潜在的病毒，并允许高的蛋白通过率，同时保持高流速且不会发生显著的病毒流穿现象。当然过滤过程中，过滤器被逐渐堵塞而造成病毒流传也是普遍现象。所以选择合适的除病毒过滤器应该在保证安全性的前提下在流速、通量和成本之间达到一个平衡。如果一类过滤器有相应的数据证明在流速降低的情况下依然能稳定的保证病毒不流穿，首先就表明这个滤器拥有最高的安全性，其次就需要考核它的过滤通量和价
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生物化学技术专题：芦丁的提取及鉴定
作者：德尔塔 日期：2022-04-27
概述 芦丁（Rutin）广泛存在于植物界中，现已发现含芦丁的植物至少在70种以上，如烟叶、槐花、荞麦和蒲公英中均含有。尤以槐花米（为植物Sophorajaponica的未开放的花蕾）和荞麦中含量最高，可作为大量提取芦丁的原料。芦丁是由斛皮素（Quercetin）3位上的羟基与芸香糖（Rutinose）〔为葡萄糖（Glucose）与鼠李糖（Rhamnose）组成的双糖〕脱水合成的苷。 芦丁为浅黄色粉末或极细的针状结晶，含有三分子的结晶水，熔点为174~178℃，无水物188~190℃。溶解度：冷水中为1:10000；热水中1:200；冷乙醇1:650；热乙醇1:60；冷吡啶1:12。微溶于丙酮、乙酸乙酯，不溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚，溶于碱而呈黄色。 芦丁具有维生素P样作用。有助于保持及恢复毛细血管的正常弹性，主要用作防治高血压病的辅助**剂，亦可用于防治因缺乏芦丁所致的其他出血症。 实验目的和要求 1．实验目的 ①通过芦丁的提取与精制掌握碱-酸法提取黄酮类化合物的原理及操作。 ②通过芦丁结构的检识，了解苷类结构研究的一般程序和方法。 ③了解UV及NMR在黄酮类化合物结构鉴定中的应用。 2．要求 ①要拿到以下三个化合物：芦丁、槲皮素、芦丁的全乙酰化合物。 ②能够拿根据化学试验及UV、NMR数据初步推断出芦丁的结构。并对黄酮类化合物的结构测定有一般性的了解。 试验方法 1．芦丁的提取与分离（见下图） 2．芦丁的鉴定 1）芦丁的定性反应 取芦丁3~4mg，加乙醇5~6ml使其溶解，分成三份作下述试验： A.取上述溶液1~2ml，加2滴浓盐酸，在酌加少许镁粉，注意观察颜色变化情况。 B.取上述溶液1~2ml，然后滴加2%柠檬酸的甲醇溶液，注意观察颜色变化情况，在继续向试管中加入2%ZrOCl2的甲醇溶液，并详细记录颜色变化情况。 C.取上述溶液1~2ml，然后再加入10%α-等体积的萘酚乙醇溶液，摇匀，沿管壁滴加浓硫酸，注意观察两液面产生的颜色变化。 2）芦丁的紫外光谱解析 取芦丁溶于色谱纯甲醇中，加入规定的
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生物化学技术专题：大黄中蒽醌类成分的提取分离和鉴定
作者：德尔塔 日期：2022-04-27
概述 大黄记载于《神农本草经》等许多文献中，用于泄下、健胃、清热、解毒等。 自古以来，大黄在植物性泻下药中占有重要位置，是一位很早就被各国药典所收载的世界性生药。大黄的种类繁多，优质大黄是蓼科植物掌叶大黄（Rheum palmatclm L），大黄（R. officinale Baill）及唐古特大黄（R. tangutium Maxim.et Regll）的根茎及根，大黄中含有多种游离的羟基蒽醌类化合物以及它们与糖所形成的苷。已经知道的羟基蒽醌主要有下列五种： 大黄中蒽醌苷元，其结构不同，因而酸性强弱也不同。大黄酸连有-COOH，酸性最强；大黄素连有β-OH，酸性第二；芦荟大黄素连有苄醇-OH，酸性第三；大黄素甲醚和大黄酚均具有1,8-二酚羟基，前者连有-OCH3和-CH3，后者只连有-CH3，因而后者酸性排在第四位。 实验目的和要求 1．学习缓冲纸色谱的基本操作技术，并能根据色谱结果，设计液液萃取法分离混合物的实验方案。 2．掌握PH梯度法的原理及操作技术。 3．通过磷酸氢钙柱色谱分离大黄酚及大黄素甲醚的试验，进一步熟悉柱色谱操作技术。 4．学习蒽醌类化合物鉴定方法。 实验方法 1．大黄总蒽醌苷元的提取 注意：①大黄中的蒽醌类成分大部分与糖结合，以蒽醌的形式存在于植物组织中。所以要用酸水解使其生成苷元。蒽醌苷元可溶于氯仿、苯及乙醚等有机溶剂，用苯时应注意苯蒸气的挥发，严防中毒；②所得的氯仿液中如带有酸水液，应该用分液漏斗分出弃去，并用蒸馏水回洗一次除去酸性以免影响梯度萃取。氯仿提取液放置中如有沉淀析出，可滤取之，该沉淀多为大黄素，余液进行下一步分离试验用。 2．总蒽醌苷元分离方案的设计 1)大黄总蒽醌苷元的纸色谱 2) 蒽醌类成分的缓冲纸色谱试验 3)最佳萃取剂及其用量的确定 4)蒽醌类成分各种萃取剂用量的确定 5)新分离方法的设计 3．蒽醌类成分的分离与精制 ①大黄酸的分离与精制 将含有总游离蒽醌的氯仿液450ml移至1000ml的大分液漏斗中，加PH8缓冲液275ml振摇萃取，静置至彻底分层，放出
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