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核内参PCNA抗体-用于细胞核内参的PCNA单抗
作者：德尔塔 日期：2022-04-28
增殖细胞核抗原（Proliferating Cell Nuclear Antigen简称PCNA）由Miyachi等于1978年在 SLE（系统性红斑狼疮）患者的血清中首次发现并命名，因其只存在于正常增殖细胞及肿瘤细胞内而得名。PCNA是一种分子量为36KD的蛋白质，在细胞核内合成，并存在于细胞核内，为DNA聚合酶的辅助蛋白。由于其在细胞核内稳定表达，因此其抗体被广泛应用于细胞核蛋白的内参抗体。 如何选择合适的抗体？ 常用的细胞总蛋白质内参有GAPDH和细胞骨架蛋白β-Actin或β-Tubulin等。对于一些植物的样本，则需要特别的植物Actin蛋白作为内参。当实验样品中只是核蛋白，而不是细胞总蛋白提取液时，可以用组蛋白H（Histone H），或者增殖细胞核抗原（PCNA）等为抗体。除了这些，其它常见的核蛋白内参还有K70, K80, Lamin A和B，在一些文献报道中，Erk2、TATA binding protein（TBP）以及c-Jun、c-Fos等都有使用。但是需要注意的问题是核蛋白内参的选择需要考虑实际的试验环境，比如在涉及细胞增殖相关试验中，c-Jun由于自身表达变化就不适合做内参；而在凋亡实验时，TBP、Lamin等也不适合作为内参。 另外，我们还需要根据目的蛋白的大小选择合适的核内参，我们推荐内参要与检测的目的蛋白的分 子量**相差5KD以上，因此你需要根据你目的检测蛋白的分子量来选择合适的内参。PCNA的检测分子量大约在28kD，而Histone H3的检测条带大约在18kD，因此PCNA比较适合用于检测目标蛋白在较大的WB实验，而Histone H3则不适合用于13kD-23kD大小的目的蛋白内参。另外，虽然PCNA是最合适的核内参抗体之一，但是在某些条件下，一些影响增殖的因素会导致样品间PCNA含量的变化，就不适合作为内参。 一开始购买Abbkine的PCNA抗体是用来做WB的，效价挺高的。后来我们使用了组织块作为样品做共定位，我尝试使用该抗体对PCNA做定位，做免疫组织化学，WB和IHC效果都很不错。——中南民族大学生科院一客户 产品名称及描述 品牌 货号 产品说明 Anti-PCNA Mouse Monoclonal An
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β-Actin抗体推荐—Abbkine高效价的Beta-Actin内参抗体
作者：德尔塔 日期：2022-04-28
Actin即肌动蛋白，是细胞的一种重要骨架蛋白。Actin大致可分为六种，其中四种是不同肌肉组织特异性的，其余两种广泛分布于各种组织中，包括 β-actin和γ-non-muscle actin。β-actin作为内参是得到了公认的，这是针对大多数组织和细胞来说的，它广泛分布于细胞浆内，表达量非常丰富，其含量占所有细胞总蛋白的50%。但是在一些少量特殊的情况下，如脂肪组织或细胞内，β-Actin的表达量就很少。β-actin由375个氨基酸组成，分子量大小为42-43kDa左右。 如何选择合适的β-Actin抗体？ 虽然选择较多，但是也需要遵循一定的原则，并契合实际的应用要求。首先，我们需要考虑目的蛋白的大小，我们推荐内参要与检测的目的蛋白的分 子量**相差5KD以上，因此你需要根据你目的检测蛋白的分子量来选择合适的内参，由于β-Actin的检测分子量大约在42kD，因此该内参抗体不是很适合 用于检测38kD-48kD大小目标蛋白的WB实验中。另外，虽然β-Actin是最合适的内参抗体之一，但是在某些条件下，一些因素也会导致样品间β-Actin含量的变化。特别需要注意的是，在脂肪组织里，β-Actin的表达量非常低，不适合作为内参。 很耐用，质量也很稳定，购买后放了一年了，拿出来用效价还是很高，后来买了他们大包装的，直接定制的5ml，很推荐。——北京工业大学生命科学与生物工程学院一客户 另外，我们还需要考虑自己的需要，特别是实验应用上的需要。一般来说，应用类型越多，在使用过程中的选择余地就越大，而小鼠源的单克隆抗体一般在特 异性、稳定性以及效价都要优于多克隆抗体。 另外，抗体的效价也是考察该抗体性价比的重要方面，也即相当于实际应用时的稀释比率。一个效价高的100μl β-Actin抗体（假如其WB检测的稀释比率是1:5000，最终使用液相当于500ml），要比效价低的1ml的β-Actin抗体（假如 WB检测的稀释比率是 1:200，最终使用液相当于2ml）性价比更高。因此在选择抗体的时候，不但需要考虑抗体的量，还需要考虑抗体的效价，即不同应用的建议稀释比
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GAPDH抗体推荐—Abbkine高性价比GAPDH内参抗体的选择
作者：德尔塔 日期：2022-04-28
在Western Bloting实验中，可能存在总蛋白浓度测定不准确，或者蛋白质样品在电泳前上样时产生的样品间的操作误差；这些误差可以通过测定每个样品中实际转到膜上的内参，比如内参GAPDH的含量来进行校正。GAPDH（甘油醛-3-磷酸脱氢酶）是参与糖酵解的一种关键酶，由4个30-40kDa的亚基组成，分子量146kDa，检测条带大约在36kDa。 GAPDH基因几乎在所有组织中都高水平表达，广泛用作Western blot蛋白质标准化的内参。 如何选择合适的GAPDH抗体？ 内参抗体虽然选择较多，但是也需要遵循一定的原则，并契合实际的应用要求。首先，我们需要考虑目的蛋白的大小，我们推荐内参要与检测的目的蛋白的分 子量**相差5KD以上，因此你需要根据你目的检测蛋白的分子量来选择合适的内参，由于GAPDH的检测分子量大约在36kD，因此该内参抗体不是很适合用于检测30kD-40kD大小目标蛋白的WB实验中。另外，不同的组织来源的样本在选择内参时还有一定的区别。比如某些细胞中，由于组织缺氧、糖尿病等因素会导致GAPDH的表达增高，不适合做内参。 因为检测的目的蛋白分子量在50kD左右，之前的β-Tubulin不是很适合，就购买了一支Abbkine的GAPDH抗体做内参，效价确实有点惊讶，我用1:1000倍起始稀释觉得条带很浓，后来一直到1:8000稀释，同时减少了曝光时间，条带仍然很清晰。——武汉大学生命科学院一客户 产品名称及描述 品牌 货号 产品说明 Anti-GAPDH Monoclonal Antibody (2B5) Abbkine A01020 HRP Conjugated Anti-GAPDH Monoclonal Antibody (2B5) Abbkine A01025 一般来说，内参抗体可检测的种属类型越多，在使用过程中的选择余地就越大；而小鼠源的单克隆抗体一般在特异性、稳定性以及效价都要优于多克隆抗体。 另外，抗体的效价也是考察该抗体性价比的重要方面，也即相当于实际应用时的稀释比率。一个效价高的100μl GAPDH抗体（假如其WB检测的稀释比率是1:5000，最终使用液相当于500ml），要比效价低的1ml的GAPDH抗体（假如 WB检测
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β-Tubulin抗体—做出漂亮WB和IHC图片的内参
作者：德尔塔 日期：2022-04-28
Tubulin即微管蛋白，是细胞的一种骨架蛋白。Tubulin分为α、β、γ、δ、ε等多种tubulin，其中α-Tubulin和β-Tubulin可以形成异源二聚体，是形成微管的最主要的两种Tubulin。α-tubulin和β-tubulin分子量分别为55kDa和50kDa，其实际检测条带均在55kDa左右。作为内参，β-tubulin的蛋白水平通常不会发生改变，因此被广泛用于Western Blotting时上样量是否一致的参照，也常被用于免疫染色观察细胞的微管结构。 如何选择合适的β-Tubulin抗体？ 虽然选择较多，但是也需要遵循一定的原则，并契合实际的应用要求。首先，我们需要考虑目的蛋白的大小，我们推荐内参要与检测的目的蛋白的分子量**相差5KD以上，因此你需要根据你目的检测蛋白的分子量来选择合适的内参，由于β-Tubulin的检测分子量大约在55kD，因此该内参抗体不是很适合用于检测50kD-60kD大小目标蛋白的WB实验中。另外，不同的组织来源的样本在选择内参时还有一定的区别。比如一些少量特殊的情况下，如脂肪组织或细胞内，β-Actin的表达量就很少，不适合做内参。 一开始购买Abbkine的β-Tubulin抗体是用来做细胞免疫荧光的，后来的课题使用了组织块作为样品，需要做共定位，我尝试使用该抗体对细胞骨架β-Tubulin做定位，做免疫组织荧光，效果也还不错，确实有些意外。——北京大学医学部第三医院一客户 产品名称及描述 品牌 货号 产品说明 Anti-β-Tubulin Mouse Monoclonal Antibody (3G6) Abbkine A01030 另外，我们还需要考虑自己的需要，特别是实验应用上的需要。一般来说，应用类型越多，在使用过程中的选择余地就越大，而小鼠源的单克隆抗体一般在特异性、稳定性以及效价都要优于多克隆抗体。 另外，抗体的效价也是考察该抗体性价比的重要方面，也即相当于实际应用时的稀释比率。一个效价高的100μl β-Tubulin抗体（假如其WB检测的稀释比率是1:5000，最终使用液相当于500ml），要比效价低的1ml的（假如WB检测的稀释比率是 1:200，最终使用液相当于2ml）性价比更高
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GFP抗体—绿色荧光蛋白的单克隆和多克隆标签抗体
作者：德尔塔 日期：2022-04-28
GFP（Green Fluorescent Protein，绿色萤光蛋白）是由下村脩等人在1962年在一种学名Aequorea victoria的水母中发现。其基因所产生的蛋白质，在蓝色波长范围的光线激发下，会发出绿色萤光。GFP标签可位于蛋白质的C端或N端，该系统已广泛 应用于各种细胞类型，包括细菌、酵母和哺乳动物细胞等，相应的GFP标签抗体也被广泛应用。一般来说，GFP抗体不仅可以检测GFP或其适当的突变体，也可以检测和GFP或其适当的突变体融合表达蛋白的表达、细胞内定位，以及纯化、定性或定量检测GFP融合表达蛋白等。 如何选择合适和最具性价比的GFP抗体？ 我们在选择一个标签抗体时，主要根据自己实验应用上的需要。这里需要考虑的因素包括，的应用检测类型、GFP抗体的克隆性及制备来源等。 比如 该GFP抗体是否能用于免疫荧光IF的检测？是否可以用于Western Bloting和免疫沉淀IP实验？是否需要特异性更好的单克隆？一般来说，应用类型越多，在使用过程中的选择余地就越大，而小鼠源的单克隆抗体一般在特异性、稳定性以及效价都要优于多克隆抗体。另外，抗体的效价也是考察该抗体性价比的重要方面，也即相当于实际应用时的稀释比率。 之前购买了一次国产的GFP抗体，价格便宜，效果也还一般；后来又买了Abbkine的GFP单抗，买了一支，价格虽然贵了一些，但是效价高了不止一个数量级，关键是能做的实验类型很多，除了WB，我还做了IP实验。最终算下来，性价比还是比国产的那一支要好。 —— 浙江大学医学院附属第一医院 客户 产品名称及描述 品牌 货号 产品说明 Anti-GFP Tag Mouse Monoclonal Antibody (3D3) Abbkine A02020 Anti-GFP Tag Rabbit Polyclonal Antibody Abbkine A02025 为什么选择Abbkine的GFP单克隆抗体（货号A02020）？ 目前市面上能提供的GFP抗体有国产分装或原产的；也有原装进口供应GST抗体的进口品牌有很多，像Abcam、Santa Cruz、Cell Signa
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HA抗体推荐—选择合适HA标签抗体的因素
作者：德尔塔 日期：2022-04-28
HA标签系统利用一个HA (流感病毒血凝素，influenza hemagglutinin epitope: YPYDVPDYA)短肽肽融合到目标蛋白。HA标签可位于蛋白质的C端或N端，该系统已广泛应用于多种细胞类型，相应的HA标签抗体也被广泛应用。HA 能特异识别C末端或N末端带有HA标签(HA-tagged)的融合蛋白，也可以用于检测和HA tag融合表达蛋白的表达、细胞内定位，以及纯化、定性或定量检测HA tag融合表达蛋白等。 HA (流感病毒血凝素表位，YPYDVPDYA)短肽结构 选择合适HA标签抗体需要考虑的因素 我们在选择一个标签抗体时，主要根据自己实验应用上的需要。这里需要考虑的因素包括，的应用检测类型、HA抗体的克隆性及制备来源等。比如该HA抗体是否能用于免疫荧光IF的检测？是否可以用于Western Bloting和免疫沉淀IP实验？是否需要HRP偶联的单克隆HA标签抗体？还是一个兔来源的HA多抗更合适？ 一般来说，应用类型越多，在使用过程中的选择余地就越大，而小鼠源的单克隆抗体一般在特异性、稳定性都要优于多克隆抗体，而多克隆。另外，抗体的效价也是考察该抗体性价比的重要方面，也即相当于实际应用时的稀释比率。一个效价高的100μl HA抗体（假如其WB检测的稀释比率是1:5000，最终使用液相当于500ml），要比效价低的1ml的HA抗体（假如WB检测的稀释比率是 1:200，最终使用液相当于2ml）性价比更高。因此在选择抗体的时候，不但需要考虑抗体的量，还需要考虑抗体的效价，即不同应用的建议稀释比率。 产品名称及描述 品牌 货号 产品说明 Anti-HA Tag Mouse Monoclonal Antibody (4F6) Abbkine A02040 HRP Conjugated Anti-HA Tag Monoclonal Antibody (4F6) Abbkine A02045 Anti-HA Tag Rabbit Polyclonal Antibody Abbkine A02041 为什么选择Abbkine的HA单克隆抗体（货号A02040）？ 目前市面上能提供的HA抗体有国产分装或原产的；也有原装进口，诸如Thermo Pierce、Abcam、Sigma、Millipore等。国产分装的HA抗体在质量稳定性上有不足，并且经
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Myc抗体推荐—高品质Myc标签单克隆抗体
作者：德尔塔 日期：2022-04-28
随着蛋白质组学的迅猛发展，重组蛋白质的使用在近年来大大增加。重组杂合体含有一个亲和标签如GST、Myc、His等，可用于辅助目标蛋白的纯化，这已经被广泛使用。利用融合蛋白有助于重组蛋白纯化和检测的这个有点被广泛认可。Myc标签相当于人的c-Myc 410-419位肽段（序列为：EQKLISEEDL）。Myc标签可放在C端或N端，但Myc重组蛋白的低pH洗脱条件往往会降低蛋白质的活力，因此 Myc标签系统广泛应用于检测但很少用于纯化。Myc标签已成功应用于WB杂交技术、免疫沉淀IP和流式细胞术中。因此可用于检测重组蛋白在细菌、酵母、昆虫细胞和哺乳细胞中的表达情况。 如何选择合适的Myc标签抗体？ 我们在选择一个标签抗体时，主要根据自己实验应用上的需要。这里需要考虑的因素包括，Myc抗体的应用检测类型、Myc抗体的克隆性及制备来源等。比如 该是否能用于免疫荧光IF的检测？是否可以用于Western Bloting和免疫沉淀IP实验？是否需要特异性更好的单克隆Myc标签抗体？ 一般来说，应用类型越多，在使用过程中的选择余地就越大，而小鼠源的单克隆抗体一般在特异性、稳定性以及效价都要优于多克隆抗体，而多克隆抗体则具有亲和性更高的优势。另外，抗体的效价也是考察该抗体性价比的重要方面，也即相当于实际应用时的稀释比率。一个效价高的100μl Myc抗体（假如其WB检测的稀释比率是1:5,000，最终使用液相当于500ml），要比效价低的1ml的Myc抗体（假如WB检测的稀释比率是 1:200，最终使用液相当于2ml）性价比更高。因此在选择抗体的时候，不但需要考虑抗体的量，还需要考虑抗体的效价，即不同应用的建议稀释比率。 Abbkine的这支Myc标签抗体，我是用来做免疫沉淀实验的，效果还不错，与之前用的SSS（另一品牌，名称隐去）相比，效价要高很多，而且稳定性也很不错。因为有一次，半年以后拿出来在用，效果还是很好，因为价格也很便宜（我们当时直接找的Abbkine定制的1mg大包装），后来实验室一直在用。 ——华中农业大学 生科院客户 产品
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His抗体推荐—Abbkine全系列His标签抗体
作者：德尔塔 日期：2022-04-28
His标签是由6个组氨酸(His-His-His-His-His-His)组成的短肽,专门设计用于重组蛋白质的吸附纯化。由于分子量较小，并且较容易分离和纯化，His-tag 融合标签与其他标签相比有很多明显优势, 是目前用于纯化的融合标签中使用最为广泛的一种。His抗体可以用于检测和His标签融合表达蛋白的表达、细胞内定位，以及纯化、定性或定量检测His融合表达蛋白等。然而，目前商品化His-tag的单克隆抗体(mAb)种类不多, 且价格也十分昂贵。 如何选择合适的His标签抗体？ 我们在选择时，主要根据自己的需要，特别是实验应用上的需要。其中需要考虑的因素包括了，His抗体的应用检测类型、His抗体的克隆性及制备来源等。比如该His抗体是否能用于Western Bloting的检测？是否可以用于免疫荧光IF实验？我是否需要特异性更好的单克隆？我是否需要考虑下是选择小鼠来源的还是兔来源的His抗体？ 之前有使用SSS（一家著名品牌的His标签抗体，名称隐去）的His标签抗体，一开始还好，过了半年后，就发现产品质量不稳定，做IF实验不行了，后来试用了下Abbkine的，IF结果很漂亮，顺带还买了他们的DyLight荧光二抗 —— 广州南方医科大学一客户 一般来说，应用类型越多，在使用过程中的选择余地就越大，而小鼠源的单克隆抗体一般在特异性、稳定性以及效价都要优于多克隆抗体。 另外，抗体的效价也是考察该抗体性价比的重要方面，也即相当于实际应用时的稀释比率。一个效价高的100μl His抗体（假如其WB检测的稀释比率是1:5,000，最终使用液相当于500ml），要比效价低的1ml的His抗体（假如WB检测的稀释比率是 1:200，最终使用液相当于2ml）性价比更高。因此在选择抗体的时候，不但需要考虑抗体的量，还需要考虑抗体的效价，即不同应用的建议稀释比率。 产品名称及描述 品牌 货号 产品详情 Anti-His Tag Mouse Monoclonal Antibody (5C3) Abbkine A02050 HRP Conjugated Anti-His Tag Monoclonal Antibody (5C3) Abbkine A02055 Anti-His Tag Rabbi
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DC-2006低温恒温槽使用说明书
作者：德尔塔 日期：2022-04-28
一、 适用范围 低温恒温槽是采用风冷式全封闭压缩机制冷，具有制冷速度快、噪音低等优点。它就是通过间歇的制冷，将反应槽里的反应温度控制在低温的条件下，保证反应的精确控温。这台DC-2006低温恒温槽的温度范围是-20~100℃，温度的波动为±0.05℃。 同时这台仪器有内外两种循环模式，外循环可以将槽内恒温液体外引，可建立第二恒温场，还可以作为冷源（热源）把槽内液体外引，可以降低（升高）槽外部实验容器的温度，扩展使用范围。 二、 产品使用说明 1、 使用前，槽内需要加入液体介质，液体介质液面不能低于工作台板20mm。 液体介质的选用： 工作温度低于5℃时，液体介质一般选用酒精。 工作温度5℃~80℃时，液体介质一般先用纯净水。 工作温度80℃~90℃时，液体介质一般先用水油混合液。 工作温度90℃~100℃时，液体介质一般选用油。 2、 循环泵的连接： 内循环，只要将出液管与进液管用软管连接即可。 外循环，将出液管用软管连接在槽外容器进口，将进液管接在槽外容器出口。 3、 插好电源，开启电源开关。 4、 温度设定： 如工作温度高于环境温度，按设定功能键进入温度设定值设定。再按设定功能键保存设定值。 如工作温度低于环境温度，开启制冷开关，再按以上方法进行温度设定。 三、 注意事项 1、 使用前槽内一定要加入液体介质。 2、 仪器应安置于通风干燥处，后背及两侧离开障碍物300mm距离。 3、 使用完毕，所有开关置关闭状态，拔下电源插头。 4、 内循环可能会使反应槽内温度不稳定，故通常不打开循环功能开关。
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mCherry标签抗体—可进行WB/IF应用的mCherry单抗
作者：德尔塔 日期：2022-04-28
mCherry是一种被广泛用于生物技术作为示踪剂的红色荧光染料，包括分子的标记和细胞组分的定位等。不同于其它从维多利亚水母中分离的GFP蛋白和其它绿色荧光蛋白变体，mCherry以及其它大多数红色荧光蛋白是从Discosoma菌种中分离出来的蛋白。mCherry因为其颜色和单体分子的光稳定性，比其它荧光蛋白标签更优异，其最大激发光和发射光分别为587nm和610nm。 如何选择合适的mCherry标签抗体？ 我们在选择时，主要根据自己的需要，特别是实验应用上的需要。其中需要考虑的因素包括了，mCherry抗体的应用检测类型、mCherry抗体的克隆性及制备来源等。比如该mCherry抗体是否能用于免疫荧光的检测？是否可以用于免疫沉淀IP实验？我是否需要特异性更好的单克隆GST标签抗体？我是否需要考虑下是选择小鼠来源的还是兔来源的？ 另外，抗体的效价也是考察该抗体性价比的重要方面，也即相当于实际应用时的稀释比率。一个效价高的100μl mCherry抗体（假如其WB检测的稀释比率是1:4000，最终使用液相当于400ml），要比效价低的1ml的mCherry抗体（假如WB检测的稀释比率是 1:200，最终使用液相当于200ml）性价比更高。 我买了Abbkine的mCherry标签抗体做WB和IF实验的，都比较理想；后来试了一下IP实验，虽然说明书上没有写，但是效果也超出预期，很不错。 ——武汉同济医院一客户 产品名称及描述 品牌 货号 产品说明 Anti-mCherry Tag Mouse Monoclonal Antibody (9D3) Abbkine A02080 为什么推荐Abbkine品牌的mCherry抗体？ 供应mCherry抗体的进口品牌有很多，包括Sigma、Novagen、Qiagen、Abcam等，其中Abcam有一款星级推荐的mCherry抗体，品名为Anti-mCherry antibody [1C51] (货号为：ab125096)，该抗体是Abcam推荐的唯一星级mCherry，可用于IF/ICC、IHC以及WB等实验。该抗体为单克隆抗体，克隆号为1C51，该抗体2013年的中国报价为￥3996/100μl。Abcam的抗体在品牌知名度、质量以及售后方面都是很值得推荐的，当然其价格较高。 相
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线粒体内参抗体—克隆号为14Y2的COX IV单克隆抗体
作者：德尔塔 日期：2022-04-28
细胞色素c氧化酶(Cytochrome c oxidase，简称COX)是一种异源寡聚酶，通常含有13个亚基，定位于线粒体内膜，是线粒体呼吸链的酶复合物。细胞色素c氧化酶中形成催化中心的3个最大的亚基由线粒体DNA编码，其余10个亚基包括COX IV由细胞核内的基因组DNA编码。细胞色素c氧化酶(COX)活性缺陷和人类多种疾病相关。COX IV抗体可用作线粒体蛋白上样量的，其检测目标蛋白大小为16kD左右。 什么时候选择线粒体内参抗体？ 我们知道，在Western Blotting中使用内参其实就是在WB过程中的另外用内参对应的抗体检测内参蛋白，这样在检测目的产物的同时可以检测内参的表达，由于内参在各组织和细胞中的表达相对恒定，借助检测每个样品内参的量就可以用于校正上样误差，这样半定量的结果才更为可信。此外使用内参可以作为空白对照，检测蛋白转膜情况是否完全、整个Western Blot显色或者发光体系是否正常。 常用的细胞总蛋白质内参有GAPDH和细胞骨架蛋白β-Actin或β-Tubulin等。对于一些植物的样本，则需要特别的植物Actin蛋白作为内参。当实验样品中只是核蛋白，而不是细胞总蛋白提取液时，可以用组蛋白H（Histone H），或者增殖细胞核抗原（PCNA）等为核内参抗体。而在一些特别的针对线粒体作为微环境的研究课题时，需要提取线粒体总蛋白并检测其中的目标蛋白含量，这时候常规的细胞总蛋白内参就不是很合适，我们推荐使用线粒体总蛋白的内参抗体，对于线粒体蛋白的检测，常用COX IV或VDAC1作为内参抗体，这里面COX IV又是被引用最多的。COX IV的检测分子量大约在16kD左右，比较适合用于检测目标蛋白在较大的WB实验。 我们课题组是做凋亡和线粒体方面研究的，经常研究线粒体方面的通道蛋白，一直使用Abbkine的COX IV抗体来做WB，效价挺高的。——武汉大学生科院一客户 产品名称及描述 品牌 货号 产品说明 Anti-COX IV Mouse Monoclonal Antibody (14Y2) Abbkine A01060 小鼠源的单克隆抗体一般在特异性、稳定性以及效价都要优于多克
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食品中肉毒杆菌的检验方法浅析
作者：德尔塔 日期：2022-04-28
肉毒杆菌是一种生长在缺氧环境下的致病菌，全称肉毒梭状杆菌，在罐头食品及密封腌渍食物中具有极强的生存能力。它在繁殖过程中所分泌的毒素具有极强的毒性，是氰化钾毒性的一万倍，是毒性最强的毒素之一。纯化结晶的肉毒杆菌毒素 1 mg 能杀死 2 亿只小鼠，对人的半致死量为 40 IU/kg。 肉毒杆菌毒素（Botulinum Toxin）前体是在肉毒杆菌细胞内产生的无毒化合物，肉毒杆菌死亡后无毒化合物释放出来，经肠道中的胰蛋白酶或细菌产生的蛋白酶激活后方始具有毒性。 肉毒杆菌毒素作用的机理是阻断神经末梢分泌能使肌肉收缩的乙酰胆碱，从而达到麻痹肌肉的效果。人们食入和吸收这种毒素后，神经系统将遭到破坏，将会出现头晕、呼吸困难和肌肉乏力等症状。 新西兰乳制品巨头恒天然集团8月3日宣布，旗下部分婴儿奶粉和运动饮料等产品可能 “受到污染”，含有肉毒杆菌。多家食品厂商产品受到影响。RephiLe 技术人员根据《GB/T4789.12-2003食品中卫生微生物学检验肉毒杆菌及内毒素检验》和《SN/T 2525-2010 食品中肉毒梭菌的PCR 检测》总结出了对食品中肉毒杆菌进行初步检验的方法。 一、实验原理 将样品经增菌后划平板分离单菌落，挑取可疑菌落到胰蛋白胨葡萄糖酵母浸膏肉汤 (TPGY)培养基培养，对培养物用 DNA 提取试剂盒抽提 DNA，进行 PCR 扩增，用琼脂糖凝胶电泳检验 PCR 产物中是否含有肉毒杆菌的的特征条带，从而初步判断食品是否被肉毒杆菌污染。 二、仪器和试剂 紫外检测仪 NanoDrop1000 (Eppendorf)，台式微量冷冻离心机 Microfuge 22R（Beckman Counter），凝胶成像分析系统 Gel DocTM XR （Bio-RAD）， PCR仪 My Cycler （Bio-RAD），Direct-Pure UP 超纯水系统（RephiLe），核酸电泳仪 EPS100 (上海天能)。 细菌基因组 DNA 提取试剂盒（Axygen），dNTP （Takara） 三、试验方法 1、样品制备和增菌培养 接种前，先将增菌培养基煮沸 10 ~ 15 min，以排除溶解于培养基中的氧，并迅速冷却，切勿摇动。每 15 ml 增菌
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初步探讨ELISA的分类和发展
作者：德尔塔 日期：2022-04-28
引言 1971年瑞典的Engvall等人分别以纤维素和聚苯乙烯试管作为固相载体吸附抗原/抗体，建立了酶联免疫吸附测（Enzyme Linked Immunosrbent Assay,简称ELISA），后来人们改用板式反应孔进行ELISA，大大地提高了实验通量。ELISA实验具有极高的灵活性，实际操作中人们可以根据自己的需要以及手上已有的材料进行灵活的组合而进行各种可样的ELISA进行反应测定，另外ELISA实验中的相关试剂和耗材都已经商品化，所以ELISA被广泛地应用于生物学的各种研究中。通过ScienceDirect搜索可以看出，1975年只有1篇文献是研究ELISA的，1976年为6篇，但是到2010年这一数字上升到1994篇，历年文献累计达29490篇，足见其研究之广。ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。在测定时，受检标本（测定抗体或抗原）与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，间接地放大了免疫反应的结果，使测定方法达到很高的敏感度。 ELISA的种类及原理 关于ELISA的分类众说纷纭，不同文献从原理或操作上都有不同的分类意见。这里先将ELISA分为以下四大类，然后针对每一类进行详细讲解：(1)直接ELISA；（2）间接ELISA；（3）夹心ELISA；（4）竞争抑制ELISA。其它的ELISA都隶属于这四类ELISA或由这四类ELISA组合衍生。 【直接ELISA】 直接ELISA是所有ELISA中步骤最简单的一种，其方法是将抗原按一定的比例用包被缓冲液稀释好包被到固相载体上，包被完成后简单洗涤，再加入封闭液，
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小型喷雾干燥仪常见问题与解决方案
作者：德尔塔 日期：2022-04-28
1.风机不工作可能原因？ 答：中间继电器R201.2损坏，变频器损坏，风机损坏。 解决方法：更换R201.2，与上海鑫翁科学仪器有限公司联系。 2、电加热器不工作可能原因？ 答：风机未启动，固态继电器SSR201损坏，电加热器损坏。 解决方法：启动风机，更换固态继电器SSR201，与上海鑫翁科学仪器有限公司联系。 3、空气压缩机不工作可能原因？ 答：中间继电器R201.1损坏，空压机未启动，空压机损坏。 解决方法：更换R201.1，启动空压机。 4、设备没电可能原因？ 答：外加插座不可靠，断路器NFB在关闭位置。 解决方法：检查外接电源是否有电，把NFB打开。 5、HMI触摸屏无显示工作可能原因？ 答：面板启动按钮损坏，开关电源损坏，中间继电器R1.2损坏，触摸屏损坏。 解决方法：更换启动按钮，更换开关电源，更换R1.2，与鑫翁公司联系。 6、PLC不工作可能原因？ 答：断路器NFB在关闭位置，中间继电器R1.1损坏，PLC损坏。 解决方法：打开NFB，更换R1.1，与鑫翁公司联系。 7、进风温度无显示可能原因？ 答：PT-100温度探头连接松动，PT-100损坏，PT温度模块损坏。 解决方法：紧固，与鑫翁公司联系。 8、出风温度无显示可能原因？ 答：PT-100温度探头连接松动，PT-100损坏，PT温度模块损坏。 解决方法：紧固，与鑫翁公司联系。 9、进风温度无法达到设定值可能原因？ 答：风机风量太大。 解决方法：修改风机参数。 10、进风温度波动大可能原因？ 答：PID值不准确。 解决方法：进行进风温度自调。 11、出风温度无法达到设定值可能原因？ 答：进风量太大（蠕动泵手动时）。 解决方法：修改蠕动泵参数。 12、出风温度波动大可能原因？ 答：PID值不准确。 解决方法：进行出风温度自调。 13、干燥室底端滴料可能原因？ 答：进风温度太低，雾化空气压力太低，压缩空气漏气，进料量太大。 解决方法：增加进风温度，打开设备后盖板将压力调至2-3Bar（￠6蓝色气管），检查各处 连接是否漏气，修改蠕动
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冻干室消毒最新灭菌技术—干雾空间灭菌系统
作者：德尔塔 日期：2022-04-28
【摘要】冻干针剂的生产需要严格无菌环境中操作，属于无菌药品非最终灭菌。其过程微生物空间显得相当重要。冻干针剂是在专门的冻干室里生产的，冻干室属于A/B区洁净度级别，要严格控制好微生物，包括环境中的微生物和设备的微生物，冻干机一般都会有全自动的高压蒸汽灭菌，而环境中的微生物此时就显得特别关键的一个控制环节。药品生产质量的五要素分别是人、设备、原理、环境和方法。本文针对环境因素控制提出了一套完整的冻干室消毒方案—干雾空间灭菌系统，是冻干室消毒最新灭菌技术，能有效控制环境微生物，符合新版GMP对洁净区的要求，容易通过验证。 【关键词】冻干室，最新灭菌技术，干雾空间灭菌，冻干室消毒 冻干室是冻干针剂生产的无菌洁净室，其风险高于其他无菌操作次于灌装工艺，西林瓶装内的药品直接暴露在空气中，环境质量的好坏直接影响到产品质量及风险的程度，为了降低风险保证产品质量必须对空气微生物进行控制，欧菲姆干雾空间灭菌系统可以有效的控制空间微生物，使空间环境时刻处于可接受的风险度中。 欧菲姆干雾空间灭菌系统源于欧洲法国，专为新版GMP设计，干雾效果领先全球，电能转化为机械能产生5um大小的干雾颗粒加上超高初始化速度，干雾能迅速覆盖每一个空间角落，碰撞并网捕空气中的微生物立即起杀灭作用，并且5um气态颗粒可以在空中做布朗运动，扩散性非常好。干雾系统配合杀孢子剂（成分是稳定过氧化氢+胶质银离子）更臻完美，稳定性能不但优于VHP而且符合企业成本控制目标，最合适国内制药企业使用。 欧菲姆干雾空间灭菌优势： 1、杀菌效果好，对枯黑有6个对数值的杀灭率 2、广谱的杀菌能力，能杀灭包括芽孢、真菌及病毒在内的200多种微生物 3、5um干雾颗粒，扩散性非常好能扩散到每一个角落，做布朗运动 4、性能稳定，不受温度、PH的影响 5、无色无毒，无残留，安全可靠 6、验证资料齐全，容易通过GMP验证 7、杀菌时间超短，2-3个小时可完成整个灭菌流程 8、进口欧洲，专为
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