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PCR技术基本原理
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
1.PCR技术基本原理 PCR技术的基本原理 类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：①模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；②模板DNA与引物的退火(复性)：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；③引物的延伸：DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA 链互补的半保留复制链重复循环变性--退火--延伸三过程，就可获得更多的“半保留复制链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2～4分钟，2～3小时就能将待扩目的基蚶┰龇糯蠹赴偻虮丁５酱锲教ㄆ?Plateau)所需循环次数取决于样品中模板的拷贝。 PCR的反应动力学 PCR的三个反应步骤反复进行，使DNA扩增量呈指数上升。反应最终的DNA 扩增量可用Y＝(1＋X)n计算。Y代表DNA片段扩增后的拷贝数，X表示平(Y)均每次的扩增效率，n代表循环次数。平均扩增效率的理论值为100%，但在实际反应中平均效率达不到理论值。反应初期，靶序列DNA片段的增加呈指数形式，随着PCR产物的逐渐积累，被扩增的DNA片段不再呈指数增加，而进入线性增长期或静止期，即出现“停滞效应”，这种效应称平台期数、PCR扩增效率及DNA聚合酶PCR的种类和活性及非特异性产物的竟争等因素。大多数情况下，平台期的到来是不可避免的。 PCR扩增产物 可分为长产物片段和短产物片段两部分。短产物片段的长度严格地限定在两个引物链5’端之间，是需要扩增的特定片段。短产物片段和长产物片段是由于引物所结合的模板不一样而形成的，以一个原始模板为例，在第一个反应周期中，以两条互补的DNA为模板，引物是从3’端开始延伸，其5’端是固定的，3’端则没有固定的
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医用离心机典型故障的分析与检修
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
在医学检验中 , 离心机是常用来分离血清 , 血浆 , 沉淀蛋白质或作尿沉渣检查的仪器设备。利用离心机可使混合液中的悬浮微粒快速沉淀 , 借以分离比重不同的各种物质成分。在检验工作中 , 由于离心机开启、停止频繁使用时间相对集中 , 电机与机械磨损、消耗大 , 如果不能按时定期做好维修保养工作 , 极易发生停机不转或转速慢的故障 , 直接影响检验工作的正常开展。因此 ,能够掌握及时迅速排除离心机各类故障的方法 , 确保离心机始终处于完好工作状态是十分重要的。 故障检修: 就离心机出现停机不转或转速慢。 原因分析: 离心机通电后 , 将调速旋钮按顺时针方向缓缓地逐档增加 , 使电动机的转速逐步加快 , 直到需要的速度运行。当离心机出现停机不转或转速慢的故障时 , 首先要排除供电电源部分故障。如电源线断脱 , 插头、插座接触不良 , 轴承损坏或定子、转子线圈短路或断路以及烧毁等原因外 , 主要原因都是由于电刷开路 , 即转子上整流子与电刷之间不相吻合 ,接触不良造成的。 因为离心机上使用的电动机一般都是串激式电动机。它是由定子和转子两部分组成。定子是由铁芯及磁场线圈构成集中式的固定磁极。转子是由铁芯及转子线圈和整流子组成。电刷的作用是把定子线圈经整流子联接转子线圈的关键器件。串激式电动机的电路工作原理是电流从电源经定子磁场线圈、电刷、经整流子流入转子线圈 , 再由电刷、定子磁场线圈回到电源 ,从而构成回路。磁场线圈和转子线圈是由整流子经电刷串联的。线路各处的电流相等 , 所以只有保证串联电路畅通无阻 , 电动机才能按要求的转速正常工作。 由此可见 , 电刷的工作状况直接影响电动机的正常运转 , 但是由于电刷在与整流子之间的接触中 , 磨损、消耗或者弹簧失效等原因 , 容易造成电刷开路与整流子脱离接触 , 是造成离心机停机或转速慢故障的 主要原因。 检修步骤: 首先对电刷盒进行清洁处理 , 检查电刷磨损情况。当电刷磨损后的长度小于 10mm时 , 应更换同规格的电刷。更换电刷的
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细胞传代培养（消化法）
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
细胞传代培养（消化法） 一. 传代前准备： 1.预热培养用液：把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入 37℃水浴锅内预热。 2.用75％酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。 3.正确摆放使用的器械：保证足够的操作空间，不仅便于操作而且可减少污染。 4.点燃酒精灯：注意火焰不能太小。 5.准备好将要使用的消毒后的空培养瓶，放入微波炉内高火，8分钟再次消毒。 6.取出预热好的培养用液：取出已经预热好的培养用液，用酒精棉球擦拭好后方 能放入超净台内。 7.从培养箱内取出细胞：注意取出细胞时要旋紧瓶盖，用酒精棉球擦拭显微镜的台面，再在镜下观察细胞。 8.打开瓶口：将各瓶口一一打开，同时要在酒精灯上烧口消毒。 二.胰蛋白酶消化； 1.加入消化液：小心吸出旧培养液，用PBS清洗（冲洗），加入适量消化液（胰 蛋白酶液），注意消化液的量以盖住细胞**，最佳消化温度是37℃。 2. 显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察消化细胞，若胞质回缩，细胞之间不再连接成片，表明此时细胞消化适度。 3.吸弃消化液加入培养液：弃去胰蛋白酶液，注意更换吸管，加入新鲜的培养液。 三.吹打分散细胞： 1.吹打制悬：用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液。 2.吸细胞悬液入离心管：将细胞悬液吸入10ml离心管中。 3.平衡离心：平衡后将离心管放入台式离心机中，以1000转/分钟离心6-8分钟。 4.弃上清液，加入新培养液：弃去上清液，加入2ml培养液，用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。 四.分装稀释细胞： 1.分装：将细胞悬液吸出分装至2-3个培养瓶中，加入适量培养基旋紧瓶盖。 2.显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察细胞量，必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长，传代细胞的密度应该不低于5×105/ml，最后要做好标记 。 五.继续培养： 用酒精棉球擦拭培养瓶，适当旋松瓶盖，放入CO2培养箱中继续培养。传代细胞2小时后开始贴附在瓶壁上。当生长细胞铺展面积占培养瓶底面积25％时为一
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细胞的复苏
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
细胞的复苏 细胞复苏的原则－快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。 一. 实验前准备： 1.将水浴锅预热至37℃ 2.用75％酒精擦拭紫外线照射30min的超净工作台台面。 3.在超净工作台中按次序摆放好消过毒的离心管、吸管、培养瓶等等。 二．取出冻存管： 1.根据细胞冻存记录按标签找到所需细胞的编号。 2.从液氮罐中取出细胞盒，取出所需的细胞，同时核对管外的编号。 三．迅速解冻： 1.迅速将冻存管投入到已经预热的水浴锅中迅速解冻，并要不断的摇动，使管中的液体迅速融化。 2.约1-2min后冻存管内液体完全溶解，取出用酒精棉球擦拭冻存管的外壁，再拿入超净台内。 四.平衡离心：用架盘天平平衡后，放入离心机中3000r/min 离心3min 五.制备细胞悬液： 1.吸弃上清液。 2.向离心管内加入10ml培养液，吹打制成细胞悬液。 六.细胞计数： 细胞浓度以5×105/ml为宜。 七.培养细胞： 将复合细胞计数要求的细胞悬液分装入培养瓶内，将培养瓶放入37℃5％CO2的培养箱内2-4小时（或者24-48小时）后换液继续培养培养，换液的时间由细胞情况而定。 初学者易犯错误： 1水浴锅未预热或者未预热到37℃。 2.水浴锅内冻存管太多，导致传热不佳，使融化时间延长。 3.离心前忘记平衡，导致离心机损坏和细胞丢失。 4.一次复苏细胞过多，忘记更换吸头和吸管，导致细胞交叉污染。
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实验室污染与治理
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
本文分析了目前我国实验室存在的污染种类及危害，阐明实验室是一种不容忽视的污染源，其污染种类复杂，毒害较大。并针对不同污染提出相应治理办法。同时苏州礼耕社科学实验室设备有限公司根据自己工作累积并借鉴国际上相关的管理经验，提出对实验室污染防治措施，推行绿色实验室。 随着我国科学技术的发展，对各类实验室的需求越来越多，各学科的重点实验室、各学校、各系统内的重点实验室层出不穷。从实验室的分布来看，主要集中在学校（包括各高等院校和中学学校）、科研机构、检测机构和企业中的检验研究部门。企业实验室的污染问题可归纳为企业的环保问题，易于被各级部门重视，企业在处理自身的环保问题时，污染问题也得到相应的处理。而各类实验室多为相对独立的行政单位，区域分散，单个污染少，易于被忽视。 我国目前拥有各类高等院校1100所（1999年统计数字），普通高中1.5万所，初中6.3所。科研院所、质检、卫生防疫、环境监测、农林等各级检验机构近20000余个，已成为一个庞大的系统。实验室实际上是一类典型的小型污染源，建设的越多，污染的越大。这些实验室，尤其是在城区和居民区的实验室对环境的危害特别大，因为很多实验室的下水道与居民的下水道相通，污染物通过下水道形成交叉污染，最后流入河中或者渗入地下，其危害不可估量。科学工作者或者未来的科学工作者成了环境的污染者，令人十分遗憾。环境保护是事关可持续发展经济的大战略。在环保面前人人平等，必须本着“谁污染环境，谁负责处理”的原则贯彻执行。实验室的成本核算和对外收费都应包括实验室的环保费用在内。 实验室的污染源种类复杂，品种多，毒害大，应根据具体情况，分别制订处理方案。 1 实验室环境污染种类及危害[1] 1.1 按污染性质分 1.1.1化学污染 化学污染包括有机物污染和无机物污染。有机物污染主要是有机试剂污染和有机样品污染。在大多数情况下，实验室中的有机试剂并不直接参与发生反应，仅仅起溶剂作用，因此消
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细胞培养的前期准备
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
一.常用设备 准备室的设备： 单蒸馏水蒸馏器、双蒸馏水蒸馏器、酸缸、烤箱、高压锅、储品柜（放置未消毒物品）、储品规（放置消毒过的物品）、包装台。 配液室的设备： 扭力天平和电子天平（称量药品）、PH计（测量培养用液PH值）、磁力搅拌器（配置溶液室搅拌溶液）。 培养室的设备： 液氮罐、储品柜（存放杂物）、日光灯和紫外灯、空气净化器系统、低温冰箱（-80℃）、空调、二氧化碳缸瓶、边台（书写实验记录）。必须放在无菌间的设备：离心机（收集细胞）、超净工作台、倒置显微镜、CO2孵箱（孵育培养物）、水浴锅、三氧消毒杀菌机、4℃冰箱（放置serum和培养用液）。 二.无菌操作 无菌室的灭菌： 1.定期打扫无菌室：每周打扫一次，先用自来水拖地、擦桌子、超净工作台等，然后用3‰来苏尔或者新洁尔 灭或者0.5％过氧乙酸擦拭。 2.CO2孵箱（培养箱）灭菌：先用3‰新洁尔灭擦拭，然后用75％酒精擦拭或者0.5％过氧乙酸，再用紫外灯照射 3.实验前灭菌：打开紫外灯、三氧杀菌机、空气净化器系统各20-30分钟 4.实验后灭菌：用75％酒精（3‰新洁尔灭）擦拭超净台、边台、倒置显微镜的载物台。 实验人员的无菌准备： 1.肥皂洗手。 2.穿好隔离衣、带好隔离帽、口罩、放好拖鞋 3.用75％酒精棉球擦净双手。 无菌操作的注意事项： 1.凡是带入超净工作台内的酒精、PBS、培养基、胰蛋白酶的瓶子均要用75％酒精擦拭瓶子的外表面 2.靠近酒精灯火焰操作。 3.器皿使用前必须过火灭菌 4.继续使用的器皿（如瓶盖、滴管）要放在高处，使用时仍要过火。 5.各种操作要靠近酒精灯，动作要轻、准确，不能乱碰。如吸管不能碰到废液缸。 6.吸取两种以上的使用液时要注意更换吸管，防止交叉污染。 三.器械的清洗和消毒 玻璃器械洗消： (1)新的玻璃器皿的洗消： 1.自来水刷洗，除去灰尘。 2.烘干、泡盐酸：烤箱中烘干，然后再浸入5％稀盐酸中12小时以除去脏物、铅、砷等物。 3.刷洗、烘干：12小时后立即用自来水冲洗，再用
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医用离心机技术及选购介绍
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
1 离心机新技术简介 1．1 温度制冷 当转子高速旋转时，空气摩擦生热，转子温度会上升，试管中的样品温度也会升高。由于生物学样品对温度敏感。一般要求离心实验中温度保持4℃。没有电脑控制的智能化技术，是不可能做到±l℃的精度。因此，用制冷机对离心腔冷却，而达到冷却转子、冷却样品温度的目的。但测量旋转中的转子的实际温度极为困难，国内外都采用在离心腔底部离转子较近处理设温度传感器，间接测量转子温度。这里 T样品=T腔+T补偿。T补偿又与转子的类别、转速及运行时间有关。 1．2 无刷电机直接驱动 离心机是由电机带转子高速旋转的。过去的电机是带碳刷的直流电机，离心机运转时碳刷磨损，带来火花与噪声甚至振动，且有寿命，届时要更换碳刷万能再行运转。更严重的是碳刷的磨损带来碳粉尘的污染，不仅污染离心机，还会污染周围环境，这种污染对卫生行业是不合适的。 1．3 显示数字技术 模拟技术典型的表现形式为拧旋钮选择操作参数 (如转速、温度与时间等)，以表盘的指针来显示数据。其缺点为：选择参数与数据的读数值受操作人与读数人的人为干扰多，控制精度差。而且每次操作都要这样，重复性差。有的离心机虽数字显示(如旋钮选值而数字显示)，虽在读数上有改进，但取值原理未变仍属模拟技术；数字显示典型的表现形式为界面友好、键盘操作、数字化显示、可编程操作的全电脑控制，其核心为智能化控制，是由电脑来实现的。离心机操作所需要一切参数(如转速、温度、时间、加减速率档等)，键盘操作输人，并以数字显示出来， 因此选择操作参数与读取数误差极小。又由于是可编程操作，可把一组操作参数编成号码，可存取使用。 2 如何安全使用离心机 2．1 正确安装 (1)电源电压：电压波动要符合+l0％ 以内的国家标准，否则一些厂家的离心机是不能正常运转。如果电压波动在此以上，建议用稳压器，以供符合此电网。 (2)地线要牢：房间的电源的布线要符合要求。我国是三相四线制。三相是工业电中的三相，使用三相电时零线与
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快速细胞分析仪应用简介
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
快速细胞分析仪打造细胞质量控制和标准化技术平台 细胞计数一直是令大家头疼的事，传统的细胞计数不但麻烦，而且还没有办法判断细胞的活率、细胞的体积、细胞的的直径、细胞的浓度、以及细胞碎片等诸多问题。 传统的细胞计数方法就是一台细胞计数器（hemacytometer）和一部显微镜，为了得到准确的计数，血细胞计数器必须首先用擦镜纸彻底的进行清洁，然后用将要进行计数的细胞填满血细胞计数器，过程必须十分小心，这样才能保证细胞稀释的合适浓度和细胞没有聚集的现象，接着你得用显微镜按照血细胞计数器上的小栅格进行计数，为了准确起见，你**不停的计数直到你数了至少100个细胞为止。 目前使用比较常用的方法是：首先取来样品细胞用台盼蓝染色，然后通过CDC成像，细胞在CDC成像后通过软件来计算细胞的个数和细胞的活率，但是这种做法却存在一下缺点： 一是台盼蓝对细胞有毒害作用，对部分已损伤的细胞会致死，活性测量的结果会有所偏差； 二是对于细胞聚集的团块无法用染色来分辨计数。 三是检测结果重复性差 我现在给大家介绍一种新的方法： 把样品细胞悬浮在（一种等电压的电解质溶液）中，在通过一根毛细管测量通道时，被频率为1MHz的电脉冲全方位扫描检测细胞，由于死细胞的膜是破裂不完整的，胞内的细胞质同膜外的等渗透缓冲液有相同的电导率，因此电脉冲信号能够穿过膜直接检测到细胞核的大小，而活细胞拥有完整的细胞膜，电脉冲信号无法透过，测到的是全细胞的体积，每个细胞或团块经过测量孔时都会产生一个信号，信号次数就是细胞的数目，信号的大小也与细胞的大小呈一定比例，利用两者体积上的差异，就能够区分死活细胞 功能：细胞计数、细胞死活判断、细胞体积检测、细胞团校正. 包括: 细胞碎片数 细胞活率 细胞团校正系数 活细胞数 / 活细胞浓度 死细胞数 / 死细胞浓度 总细胞数 / 总细胞浓度 细胞直径 /
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啤酒发酵罐的清洗和灭菌
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
摘要：发酵罐的微生物状况对啤酒质量影响很大，清洁无菌是啤酒生产中卫生管理的基本要求。良好的CIP系统可以对发酵罐进行有效地清洗。对发酵罐的清洗机理、清洗方法、清洗程序、清洗剂/灭菌剂的选择以及CIP系统的运行质量等问题进行了探讨。 0前言 清洗和灭菌是啤酒生产的基础性工作，也是提高啤酒质量最关键技术措施。清洗和灭菌的目的就是要尽可能地去除生产过程中管道及设备内壁生成的污物，消除腐败微生物对啤酒酿造的威胁。其中，以发酵车间对微生物的要求最高，清洗灭菌工作占其工作总量的70％以上。目前，发酵罐的容积越来越大，物输送管道也越来越长，给清洗和灭菌带来许多困难。如何正确有效地对发酵罐进行清洗和灭菌，以适应当前啤酒“纯生化”的需要，满足消费者对产品质量的要求，应该引起啤酒酿造工作者的高度重视。 1清洗机理与影响清洗效果的相关因素 1.1清洗机理 啤酒生产过程中，与物料接触的设备表面，由于各种原因会沉积一些污物。对于发酵罐来说，其积垢成份主要有酵母和蛋白类杂质、酒花和酒花树脂化合物以及啤酒石等。因为受静电等因素作用，这些污物与发酵罐内壁表面之间具有一定的吸附能量，很显然，为了驱使污物脱离罐壁，必须付出一定的能量。此能量可以是机械能，即采用一定冲击强度的水流洗刷的办法；也可以采用化学能，如使用酸性(或碱性)清洗剂，使污物疏松、崩裂或溶解，从而脱离附着表面；还可以是热能，即通过提高清洗的温度，加快化学反应速度及加速清洗过程的进行。事实上，清洗过程往往是机械作用、化学作用和温度效应共同作用的结果。 1.2影响清洗效果的相关因素 1.2.1污物与金属表面间吸附能力的大小，与金属表面粗糙度有关。金属表面越粗糙，污物与表面间吸附力越强，清洗就越困难。用于食品生产的设备，要求Ra2 m)时，一般采用旋转喷射型洗涤器，通过增加洗涤器出口压力(0.3～0.7 MPa)，来加大洗涤半径，增强冲洗的机械作用，增加去垢效果。 2.1.5与球型洗涤器相比
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核酸分离与纯化的原理及其方法学进展
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
核酸的分离与纯化技术是生物化学与分子生物学的一项基本技术。随着分子生物学技术广泛应用于生物学、医学及其相关等领域,核酸的分离与纯化技术也得到进一步发展。各种新方法、经完善后的传统经典方法以及商品试剂方法的不断出现,极大地推动了分子生物学的发展。现就核酸分离与纯化的原理及其方法学进展作一综述。 核酸分离与纯化的原则 核酸在细胞中总是与各种蛋白质结合在一起的。核酸的分离主要是指将核酸与蛋白质、多糖、脂肪等生物大分子物质分开。在分离核酸时应遵循以下原则:保证核酸分子一级结构的完整性;排除其他分子污染。 核酸分离与纯化的步骤 大多数核酸分离与纯化的方法一般都包括了细胞裂解、酶处理、核酸与其他生物大分子物质分离、核酸纯化等几个主要步骤。每一步骤又可由多种不同的方法单独或联合实现。 1. 细胞裂解:核酸必须从细胞或其他生物物质中释放出来。细胞裂解可通过机械作用、化学作用、酶作用等方法实现。 (1) 机械作用:包括低渗裂解、超声裂解、微波裂解、冻融裂解和颗粒破碎等物理裂解方法。这些方法用机械力使细胞破碎,但机械力也可引起核酸链的断裂,因而不适用于高分子量长链核酸的分离。有报道超声裂解法提取的核酸片段长度从< 500bp ～ > 20kb 之间,而颗粒匀浆法提取的核酸一般< 10kb。 (2) 化学作用:在一定的p H 环境和变性条件下,细胞破裂,蛋白质变性沉淀,核酸被释放到水相。上述变性条件可通过加热、加入表面活性剂(SDS、Triton X-100 、Tween 20 、NP-40 、CTAB、sar-cosyl 、Chelex-100 等) 或强离子剂(异硫氰酸胍、盐酸胍、肌酸胍) 而获得。而p H 环境则由加入的强碱(NaOH) 或缓冲液 ( TE、STE 等) 提供。在一定的p H 环境下,表面活性剂或强离子剂可使细胞裂解、蛋白质和多糖沉淀,缓冲液中的一些金属离子螯合剂( EDTA 等) 可螯合对核酸酶活性所必须的金属离子Mg2+ 、Ca2+ ,从而抑制核酸酶的活性,保护核酸不被降解。 (3) 酶作用:主要是通过加入溶菌酶或蛋白酶(蛋白酶K、植物蛋白
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离心技术及离心机分类
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
离心是一重要的样品分离、分析技术，在医学实验室乃至相关领域得到广泛应用。 1 离心技术及离心机分类 离心是在离心力的作用下，利用被离心样品物质的沉降系数、浮力、密度的差别，进行分离、浓缩、提取制备样品以及分析测定生物大分子分子量和纯度。按其工作方式可分为离心过滤、离心沉降(或澄清)及离心分离。 离心机的设计原理是利用驱动转头旋转时所产生的离心场力加快样品粒子的沉降速度，把样品中不同沉降系数或浮力密度差的物质分离开。决定离心力大小的因素除转速(Revolved per minute，r／min)和离心(转头)半径外，还与粒子在旋转运动中所受到的力(重力、浮力、摩擦力)之作用影响有关，离心力方向与重力呈垂直，故常用相对离心力(Relative centrifugal force，rcO表示，即相对于重力作用在旋转粒子上的离心力，用重力加速度g(980cm／s )作为量值，也称为“g-Force”，表达式为：RCF=o)~／980。 离心技术的关键是如何根据样品粒子和介质的性质以及转子的技术参数来确定离心力、转速和离心时间设置。粒子(细胞、细胞器及大分子的统称)的沉降或分离速率取决于离心力、粒子的大小、形状和密度以及沉降介质的密度和粘度。 根据用途、转速、功能配置可将医学实验室常用离心机几大类型，不同转速的离心机产生不同的离心力，具有不同的用途。 低速机型设计有较大容量(Large capacity centrifuge，≥12L)，主要用于细胞、血清、血浆以及批量样品的分离制备，另在生物制药领域发挥着较大作用；高速离心机(High speed cen—trifuge)主要用于某些亚细胞器结构、核酸、蛋白质、质粒、细菌的分离和制备；而超速离心机(Ultracentrifuge)．~0适应于病毒、核酸及蛋白质的分离纯化，进一步的分析研究还可采用分析型超速离心机。 近年来，有一种称之为“通用实验室离心机(Universal lab—oratory centrifuge)”的机型进入医学实验室，在性能上顺应了分子生物学、细胞生物学等相关领域实验技术的需要，倍受实验室工作者的关注。其特点
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微透析活体取样技术介绍
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
微透析活体取样技术介绍 一． 微透析技术的基本原理和方法 微透析(Microdialysis)技 术是从上世纪八十年代发展起来的一种微量生物化学采样、检测技术，其基本原理是采用具有一定截留分子量的纤维半透膜制成极细的微透析探头(Microdialysis Probe，MDP)，将探头埋入待测的组织区域内，以恒定速度向探头内灌注与组织液成分相近的等渗灌流液，当灌流夜流经探头前端透析膜时，位于探头膜外侧的组织内较小分子量生物活性物质将顺浓度梯度从膜外扩散入膜内并随灌流液被引流出探头外，以一定的时间间隔有序地接收透析液，由于透析管中的灌流液不断流动更新，因此跨膜浓度梯度始终存在，微透析得以持续进行。并采用高灵敏度化学检测系统连续检测收集的透析液中待测生物活性物质浓度，便可 监测活体动物或人体特定组织区域内细胞外生物活性物质浓度随时间改变的动态变化。由于该技术具有活体取样、动态观察、定量分析、对组织损伤小、取样少、方便、快捷、可连续监测且易实现自动化等优点，因此在国外已被广泛应用于各个基础医学研究领域，对医学、药学、生命科学等领域，提供崭新的技术的发展空间，并随着这项技术的不断改进与完善，在近几年开始在临床上加以应用。 微透析技术是现代医学发展起来的一种新型生物化学采样技术。它可以对活体组织细胞外液进行生物化学采样，几乎适用于所用小分子活性物质的分析。而且对组织损伤极小。在麻醉或清醒的生物体上使用，特别适合于深部组织和重要器官的活体生化研究。 微透析系统一般由微透析探针、连接管、收集器、灌流液和微量注射泵组成。微透析探针是核心部件，由透析膜（管）与入液管和出液管连接而成，探针前端是多碳聚合物半透膜，透析分子极限为6－100kda,多为20kda。灌流液多为生理盐水、林格氏液和人造脑脊液。 二．应用范围 儿茶酚氨分析 精神药物学 乙酰胆碱/酰胆碱分析 神经病理及癌症研究氨基酸分析 药物动态学及毒理学 各种组织生化/药物分析 生理学 药理学 在药代
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电子级水的技术指标
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
指标级别 EW--I EW--II EW--III EW--VI 电阻率MΩ•cm@25℃ 18以上（95%时间）不低于17 15（95%时间）不低于13 12.0 0.5 全硅，最大值μg/L 2 10 50 1 000 〉1μm微粒数，最大值，个/ml 0.1 5 10 500 细菌个数，最大值，个/ml 0.01 0.1 10 100 铜，最大值，μg/L 0.2 1 2 500 锌，最大值，μg/L 0.2 1 5 500 镍, 最大值，μg/L 0.1 1 2 500 钠, 最大值，μg/L 0.5 2 5 1 000 钾, 最大值，μg/L 0.5 2 5 500 氯, 最大值，μg/L 1 1 10 1 000 硝酸根，最大值，μg/L 1 1 5 500 磷酸根, 最大值，μg/L 1 1 5 500 硫酸根，最大值，μg/L 1 1 5 500 总有机碳，最大值，μg/L 20 100 200 1 000 以上标准引自国际GB/T 1144.6.1--1997
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中草药有效成份的提取
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
中草药有效成份的提取、分离按传统生产工艺处理，存在生产周期长、收率低等问题，在除杂、除菌、除热原等方面具有极大的不稳定性，严重影响了制剂的品质 ；并且耗费大量水、电能源及有机溶剂，造成生产成本增加。而采用陶瓷超滤、微滤等技术则可以避免以上缺点，大大降低生产成本提高产品质量。 当前，膜分离技术在制药行业不能得到推广应用的原因不但是企业内部膜技术人员的短缺和资金的不足。还有一个更重要的原因：哪就是我们的技术人员和企业领导不愿意也不想改变现有的生产工艺。因为制药是一个特殊行业，改变一个工艺，不但有一定的风险，还有许多报批方面的麻烦。 但是市场激烈竞争的今天，谁能拥有降低成本并能提高产品质量的技术，谁就可以在竞争中战胜对手，就可以占领市场，使企业拥有更广阔的发展空间。而膜技术恰好具有这样的特点 。在这里，我们先简要的说明一下膜分离技术在中药制剂中的应用： 1、膜法精制中药口服液、药酒。中药口服液是近年来我国医疗保健行业大力发展的新剂型 ，由于其疗效好，见效快，服用方便等优点，受到广泛好评。原生产工艺采用水提醇沉法，不仅流程长，产品黏度大，提取液中还含有大量亚微粒、微粒和絮状物等杂质。难以用一般的沉降、板框过滤、浸取等方法精制，故成品静置后易产生沉淀，影响口服液的外观及品质。如果采用相应的截留分子量的膜进行超滤后 ，再进行罐装，则可以保证产品外观透明鲜亮、口感改善、保质期延长，同时还可简化生产工艺，为企业节约成本。主要工艺流程如下： 药材煎煮→水提液→微滤除杂→超滤提纯→成品罐装 由此可见，膜法处理中药口服液可以简化生产工艺，缩短生产周期，取代传统的板框过滤、硅藻土过滤等，有效去除鞣质、淀粉、树脂、蛋白、果胶等。并且得到的产品无论是澄清度 、透光度和稳定性都明显提高。长期存储澄清度不变。口服液不再有沉淀和挂壁现象。 2、水提液无需冷却可直接
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使用离心机注意事项和故障排除方法
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
1．1 使用注意事项 离心机应水平放置，距墙10cm以上，并保持良好的通风环境，免受热源和太阳光线的直接照射，室温不宜超过30℃ ，否则会影响制冷效果。当外界湿度较大时，离心机腔内的水分挥发慢，此时应及时清除，以防仪器生锈。离心刚从水温箱内取出的样本管时，应经常观察离心杯内是否有积水并及时倾倒，以保持离心杯的干燥和离心时的平衡。离心机严禁不加转头空转，如空转会导致离心机轴弯。离心机运转前必须确认转头已放稳且已加紧，转头盖必须放且放稳。安装好一个转头后，将水平仪平放在转头上，反复调整离心机前面的两个可调螺钉，直到完全水平。精密地平衡离心管和它们的内容物是十分重要的。使用时对负载必须平衡，符合对称安装。使用时如发现声音不正常，立即停机。有的普通离心机带有离心管套筒，平衡时应带上管套筒，一台离心机的套筒只能在该离心机上使用，不能在离心机之间(特别是不同型号的离心机之间)混用套筒 。 要注意防止放射性同位素对仪器的污染，首先要仔细观察样本管有无裂痕或沙眼小孔，以免离心时液体渗出；其次是放人离心杯的塑料管动作要轻，防止液体溅出。如液体进入离心杯造成离心机腔内污染，应立即将离心杯取出，用自来水反复冲洗并晾干，同时还应该对离心机腔内进行全面清洁。 1．2 常见故障 真空度下降是常见故障。对于高速、超速离心机，大部分都设有真空装置，目的是让离心腔在运行状态时处于中或高真空状态，减少对转头的摩擦，使其稳定运行。在真空度下降或抽真空不好时，要检查真空系统，一般是将油更换，真空度就会恢复。另外，小型或台式离心机，人们常会忘记将放在离心腔中的转头取出，时间长了转头会卡死在轴上。不能用力敲打，这样会损坏离心轴，导致转轴扭歪，会损坏离心机，甚至发生事故。必要时，可以请专业工程师协助取出。高速、超速离心机运行过程中，面板上有故障提示，可以针对相应的故障提示符处理故障。 此外，会遇到离心机不工作的现象。对于高速、超速离心
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