德尔塔
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小型冷库的设计与选用方法

小型冷库的设计与选用方法

作者:德尔塔 日期:2022-05-01

一、小型冷库一般分为室内型和室外型两种   1.冷库外的环境温度及湿度:温度为+35℃;相对湿度为80%。   2.冷库内设定温度:保鲜冷库:+5~-5℃;冷藏冷库:-5~-20℃;低温冷库:-25℃   3.进冷库食品温度:L级冷库:+30℃;D级、J级冷库:+15℃。   4.装配式冷库设备的堆货有效容积为公称容积的69%左右,贮存果蔬时再乘以0.8的修正系数。   5.每天进货量为冷库有效容积的8~10%。   二、小型冷库的库体   小型冷库一般以喷塑彩钢板做面板,硬质聚氨酯泡沫塑料或高密度聚苯乙烯做保温料,库体具有刚性好、强度高、隔热保温性能好、阻燃等特点。小型冷库库体一般采用板壁内部预埋件偏心挂钩式连接或现场发泡固合,密封性好装拆搬运方便,现场施工安装工程量小、省工省力、质量好、见效快。小型冷库选配先进的制冷机组,库容量与制冷设备匹配全理,降温速度快,省电节能,且全部自动化操作,运作安全可靠。小型装配式冷库适用广泛,冷库库温范围5℃--23℃,特殊装配式冷库可达-30℃以下,可满足不同用途的需求,适用于各种行业各部门使用。   三、小型冷库制冷设备选用   小型冷库制冷设备的心脏是冷库门机组,常用小型制冷机组通用的机型选用先进的氟机制冷设备,氟机制冷设备多利用对环境影响小的制冷剂R22和其他新型制冷剂。氟机制冷设备一般体积小、噪音小、安全可靠、自动化程度高、适用范围广,适于乡村小型冷库用制冷设备。   小型冷库用的制冷机与冷凝器等冷库板设备组合在一起常称作制冷机组,制冷机组有水冷机组和风冷机组之分。小型冷库以风冷机组为**形式,它有简单、紧凑、易安装、操作方便、附属设备少等优点,这种制冷设备也是较易见的。   制冷机组的制冷机是制冷设备的心脏,常见的压缩式制冷机有开放式、半封闭式和全封闭式之分。全封闭式压缩机体积小、噪音低、耗电少、高效节能。它是小型冷库的**机型,由全封闭式压缩机为主组成的风冷式制冷机组,可以做成象分体空调那样的形

透明塑料注塑过程中应注意的问题有那些呢?

透明塑料注塑过程中应注意的问题有那些呢?

作者:德尔塔 日期:2022-05-01

透明塑料由于透光率要高,必然要求塑料制品表面质量要求严格,不能有任何斑纹、气孔、泛白。雾晕、黑点、变色、光泽不佳等缺陷,因而在整个注塑过程对原料、设备。模具、甚至产品的设计,都要十分注意和提出严格甚至特殊的要求。其次由于透明塑料多为熔点高、流动性差,因此为保证产品的表面质量,往往要在机高温度、注射压力、注射速度等工艺参数作细微调整,使注塑料时既能充满模,又不会产生内应力而引起产品变形和开裂。 因此从原料准备,对设备和模具要求、注塑工艺和产品的原料处理几方面都要进行严格的操作。 (一)原料的准备与闪蒸干燥机由于在塑料中含有任何一点杂质,都可能影响产品的透明度,因此和储存、运输。加料过程中,必须注意密封,保证原料干净。特别是原料中含有水分,加热后会引起原料变质,所以一定要干燥,并在注塑时,加料必须使用干燥料斗。还要注意一点的是干燥过程中,输入的空气**应经过滤、除湿,以便保证不会污染原料。其盘式干燥机工艺如表2, 透明塑料的干燥工艺: 材料工艺 干燥温度(℃) 干燥时间(h) 料层厚度(mm) 备注 pmma 70~80 2~4 30~40 pc 120~130 >6

微卫星DNA分子标记及其应用

微卫星DNA分子标记及其应用

作者:德尔塔 日期:2022-05-01

微卫星(Microsatellite,MS)又称短串联重复(Short Tandem Repeats,STR)或简单序列重复(Simple Sequnce Repeat,SSR),是指基因组中以少数几个核苷酸(多数为2-4个)为单位多次串联重复组成的长达几十个核苷酸的序列。其中最常见的是双核苷酸重复,如(AC)n、(TG)n等,微卫星DNA广泛分布在真核生物的基因组中,大约每隔10-550kb就存在一个微卫星。微卫星DNA由于具有特异性的PCR扩增、多态信息容量(PIC)高、引物通用性好、突变率高、共显性等特点,已经被广泛应用。   1.微卫星DNA的特点及分类   微卫星DNA具有丰富的多态性,主要表现在核苷酸重复单位数目的多态性和重复序列中核苷酸的替换多态性。一般认为,一个微卫星DNA核心序列重复数目越高,其等位基因数目也就越多,多态性就越丰富。微卫星DNA遵循孟德尔遗传规律,能够稳定地从上一代传给下一代,且等位基因间呈现共显性遗传。除此以外,微卫星标记还具有DNA用量少、反应速度快、操作简易、结果重复性好等特点。 根据重复结构的不同可将微卫星DNA分为3类:完全重复型(perfect),单一序列单元无中断或无颠倒;不完全重复型(imperfect),单一序列单元有中断或有颠倒;混合型(compound),多个序列中单位有或无中断和有或无颠倒的混合。一般说来,微卫星DNA的重复序列两侧都有物种特异性的保守序列,所以,通过设计引物对基因组DNA进行PCR扩增、琼脂糖凝胶电泳(或聚丙烯酰胺凝胶电泳)和放射自显影(或银染),就可以检测到在简单重复序列重复单位数不同的DNA区域的多态性,这就是微卫星DNA分子标记。   2.微卫星分子标记方法的优点   微卫星在基因组中是均匀分布的。Winter 等人的研究表明, 除着丝粒及端粒区域外, 染色体的其他区域均广泛分布有微卫星位点。Litt 和Luty以及Weber 和May各自用热稳定Tag 酶的PCR 方法证明, 微卫星具有丰富的多态性。用微卫星作为遗传标记与其他DNA分子标记(包括RFLP、RAPD 和小卫星DNA等) 相比具有以下优点。 2.1 微

实验室常用微生物菌种的分离和纯化方法

实验室常用微生物菌种的分离和纯化方法

作者:德尔塔 日期:2022-05-01

从混杂微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物分离与纯化。在分子生物学的研究及应用中,不仅需要通过分离纯化技术从混杂的天然微生物群中分离出特定的微生物,而且还必须随时注意保持微生物纯培养物的“纯洁”,防止其他微生物的混入。   1、用固体培养基分离和纯化   单个微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度可以形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞生长群体,称为菌落。当固体培养基表面众多菌落连成一片时,便成为菌苔。不同微生物在特定培养基上生长形成的菌落或菌苔一般都具有稳定的特征,可以成为对该微生物进行分类、鉴定的重要依据。大多数细菌、酵母菌、以及许多真菌和单细胞藻类能在固体培养基上形成孤立的菌落,采用适宜的平板分离法很容易得到纯培养。所谓平板,即培养平板的简称,它是指固体培养基倒入无菌平皿,冷却凝固后,盛固体培养基的平皿。这方法包括将单个微生物分离和固定在固体培养基表面或里面。固体培养基用琼脂或其它凝胶物质固化的培养基,每个孤立的活微生物体生长、繁殖形成菌落,形成的菌落便于移植。最常用的分离、培养微生物的固体培养基是琼脂固体培养基平板。这种由Kock建立的采用平板分离微生物纯培养的技术简便易行,100多年来一直是各种菌种分离的最常用手段。 1.1 稀释倒平板法 首先把微生物悬液作一系列的稀释(如1:10、1:100、1:1000、1:10000),然后分别取不同稀释液少许,与已熔化并冷却至50℃左右的琼脂培养基混合,摇匀后,倾入灭过菌的培养皿中,待琼脂凝固后,制成可能含菌的琼脂平板,保温培养一定时间即可出现菌落。如果稀释得当,在平板表面或琼脂培养基中就可出现分散的单个菌落,这个菌落可能就是由一个细菌细胞繁殖形成的。随后挑取该单个菌落,或重复以上操作数次,便可得到纯培养。 1.2 涂布平板法 因为将微生物悬液先加到较烫的培养基中再倒平板易造成某些热敏感菌的死亡,且采用稀释倒平板法也会使一些严格好氧菌

七大特点确立 300Å C18的优势应用地位

七大特点确立 300Å C18的优势应用地位

作者:德尔塔 日期:2022-05-01

近年来,随着基因组和蛋白质组计划的实施,对不同蛋白质的快速分析,定性以及定量的需求更大,反相液相色谱以其快速简便,灵敏度高,重复性好,分辨率高等优势受到人们的重视,已成为一种常备的不可缺少的分析手段,并用于多肽药物分离中。反相液相色谱与各种质谱技术的结合也已成为蛋白质结构分析的重要手段和发展方向。 Chrom-Matrix公司所研发的InnovationTM 300Å C18依靠七大创新特点,确定了其在应用中的优势地位。 第一, InnovationTM 300Å C18色谱柱在100%水流动相中的稳定性,生物分离实际应用中经常遇见非常极性多肽。如果只有极性多肽, 可以使用InnovationTM HP Amide亲水色谱进行分离, 但是实际应用中经常是极性多肽和不同疏水性多肽混合物。特别是全盲条件下肽图谱, 希望线性梯度能从100%水流动相开始, 从而最大限度地获取酶切后不同极性肽的信息, Chrom-Matrix公司研发的InnovationTM 300Å C18色谱柱能100%在水流动相中稳定性非常好。 第二,碱性多肽在InnovationTM 300Å C18色谱柱上有对称峰形,InnovationTM 300Å C18通过成熟的超临界流体封端技术, 最大程度了消除硅醇基的酸性效应, 因此变成"名符其实"高品质的纯粹反相机理的高效液相色谱柱。因此所有的多肽,包括困难的多肽都能够获得对称峰形。相反, 许多碱性多肽在主要竞争对手色谱柱上峰严重拖尾甚至不出来。 第三,在InnovationTM 300Å C18(C8或C5)色谱柱上多肽LC-MS分析无需使用三氟乙酸,在多肽或蛋白质反相高效液相色谱分离纯化或分析中,三氟乙酸经常被使用作为离子对试剂维持峰形。如果只使用紫外检测,虽然没有问题,但是,随着液质联用技术变得越来越流行,生命现象中许多问题越来越依赖液质联用技术痕量分析蛋白质的结构和组成的变化(蛋白质组学), 科学家迫切需要在多肽或蛋白质LC-MS分析中避免使用三氟乙酸, 因为三氟乙酸严重降低了质谱检测灵敏度。InnovationTM 300Å C18(C8或C5)通过成熟的超临界流体封端技术, 最大程度了消除硅醇基的酸性效应, 因

红锥蝽卵子发生过程中胞外H+转运动力学的研究

红锥蝽卵子发生过程中胞外H+转运动力学的研究

作者:德尔塔 日期:2022-05-01

The Journal of Experimental Biology H+动力学调控卵子发生 红锥蝽卵子发生过程中胞外H+转运动力学 p{text-indent:2em; margin:6px 3px 6px 3px; line-height:21px;} 卵子发生在生物体形成过程中非常重要,影响到胚胎的发育以及个体的形成,在这个过程中,H+动力学起到一个关键的调节作用,细胞通过H+转运维持膜电势和产生跨膜的化学梯度来驱动次级代谢,但是在昆虫滋养型卵母细胞成卵过程中发生的H+流的变化和H+流引起的pH值变化所起到的调节作用却了解很少。利用“非损伤微测技术”可实现对H+流在不同时间和空间的实时监测,从而揭示H+流在昆虫滋养型卵母细胞生成过程中所起到的调节作用。 美国Wadsworth中心神经系统失调研究实验室科学家Bjornsson C. S.等采用“非损伤微测技术”对红锥蝽(Rhodnius prolixus)在相同生长部位的不同生长阶段进行胞外H+流实时监测发现,卵黄生成中期卵巢管中分离相邻卵泡囊的主茎表现出显著的H+外流,而在卵黄生成后期H+外流减弱。H+外流的现象不仅在主茎生成之前已经产生,而且先于邻近卵泡囊的卵黄生成起始阶段。另外在生成绒毛膜的末端卵泡囊和卵泡囊排卵后也分别检测到了H+的外流现象,这揭示了躯体的卵泡上皮细胞控制着H+的外流。 上图: 上图是通过非损伤微测技术在卵巢管不同部位不同生长时期检测到的H+流的变化情况。正值为外流,负值为内流。 该研究通过非损伤微测技术检测昆虫成卵过程中H+流的变化,揭示了H+流在卵黄生成的起始阶段、内吞、卵泡细胞骨架动力学及滤泡反馈机制调节中的重要作用,跨膜H+流可促使胞内pH值的改变。这为昆虫成卵过程的机理研究提供了新颖的思路和方法。 .tmp_b1{ margin:6px 6px;} 关键词:H+, 离子选择电极(ion-selective probe) , 卵子发生(oogenesis) 参考文献:Bjornsson CS, et al. The Journal of Experimental Biology,2004, 207, 2835-2844 全文下载: Abstract: The spatiotemporal dynamics of trans

PCR Array 简单实用的检测基因表达的高通量方法

PCR Array 简单实用的检测基因表达的高通量方法

作者:德尔塔 日期:2022-05-01

PCR Array 简单实用的检测基因表达的高通量方法 简介:什么是PCR芯片? 实时定量PCR是检测基因表达最灵敏,最可靠的方法。通过在试验过程中,实时监测荧光染料的信号变化,反映样品中的基因拷贝数。实时定量PCR线性范围广(能达到5个数量级),因此可以检测同一样品中表达量极低的基因和表达量很高的基因。但是,由于实时定量PCR需要制备标准曲线和同时分析内参基因,因此,每次实验只能检测少数几个基因的表达水平,若要检测大量基因,则工作量巨大,耗时长久。 通过简单的,经过优化的实时定量PCR体系,如SuperArray的RT2ProfilerTM PCR芯片,研究者可以同时研究大量基因,既可以进行某些特别感兴趣的信号通路的研究,也可以作为验证芯片结果的方法。   为了获得理想的实验结果,PCR芯片面临以下挑战:高特异性,高灵敏度和可重复性。高灵敏度或低检出限,在样品的总RNA量少,基因表达量低的情况下,也能检测出目的基因。高特异性,扩增产物严格保证基因特异性,避免非特异性产物,如引物二聚体的产生。可重复性,通过标准化的反应体系和实验方法,使得多人多次重复实验均能获得可靠的基因定量结果。 PCR芯片实验操作步骤 采用PCR芯片进行实验只需2小时。PCR芯片实验过程如图1所示:首先将RNA样品反转录为cDNA第一链,作为PCR模板;接着,将模板加入到反应体系(RT2 Real-TimeTM SYBR Green PCR Master Mix)中。在已经固定好基因特异性引物的96孔板各孔中,加入等量的PCR反应体系,进行PCR反应。采用仪器配套的软件计算PCR芯片中的每个基因的循环阈值(Ct)。最后,采用△△Ct方法比较对应的两个样本中同一基因的表达量变化。通过分析看家基因Ct值的一致性,可确定合适的标准化方法。芯片所设置的对照,可以检测PCR体系中是否存在DNA污染,或者是否有影响反转录或PCR实验步骤的因素存在。     图一 PCR芯片实验流程   PCR芯片的设计和所包含的基因 96孔模式的每种RT2Profiler PCR芯片,含有基因特异性引物,可用于研究

RNAi的机理与应用

RNAi的机理与应用

作者:德尔塔 日期:2022-05-01

RNAi 技术的机理与应用 关于 RNAi 技术 RNA 干扰(RNA interference,RNAi)是指在进化过程中高度保守的、由双链 RNA( double-stranded RNA,dsRNA) 诱发的、同源 mRNA 高效特异性降解的现象。 RNAi 受到追捧的原因主要有两个方面,一方面, RNAi 可以说是基因功能检验的试金石,利用 RNAi 技术可以缩短人类对人类基因功能的了解和认识的时间,在不久的将来有望将人类大部分基因的功能和作用全部弄清楚;另一方面,科研人员有望利用这种技术获得使致病基因失活的新型基因药物,而基因药物一直是生物技术界追捧的对象。 2002年,《自然》及《科学》两本重量级学术期刊把 RNA干扰技术视为生命科学领域重大突破,认为足以比肩 20 世纪早期发现抗生素,开启了基因**的另一个方向。 2006年10月,2006年度诺贝尔医学奖被授予美国斯坦福医学院病理学和遗传学教授安德鲁·菲尔和马萨诸塞州医学院分子医学教授克雷格·梅洛,表彰他们发现 RNAi机理。 RNAi迄今已对制药业和生物技术工业产生巨大影响。这也是诺贝尔奖评审委员会为什么不坚持研究成果要经过数十年实践验证的“惯例”,破格为菲尔和梅洛颁奖的原因之一。 目前,RNA干扰**技术正在快速进入人体试验阶段,已有多个 siRNA 药物进入临床试验,其中第一个RNAi药物 Bevasiranib(美国 Acuity Pharmaceuticals 公司)已处于Ⅲ期临床试验阶段,有望于 2009 年获准上市。   RNAi 机理   遗传物质 ,化学名称是“脱氧核糖核酸”,简称 DNA 。 DNA 包含约二万多个蛋白质的密码。当细胞决定要制造某一个蛋白质之时,属于该蛋白质的 DNA 密码便会被“影印”(专业上称为转录 Transcription ),做成一份核糖核酸的“副本” RNA ,又叫 mRNA 。 mRNA 副本会去细胞内的蛋白质“工厂”(核糖体〔 Ribosome 〕),然后,按次序将二十种胺基酸组合成一个蛋白质。  一些病毒觑准上述机制,把病毒的 RNA 送入细胞,借其核糖体,生产自己的蛋白质。这些以 RNA 储存遗传讯息的病毒,进入细胞后,会

唾液检测----未来的诊断方式

唾液检测----未来的诊断方式

作者:德尔塔 日期:2022-05-01

唾液检测----未来的诊断方式    唾液可用于口腔和牙科疾病的早期诊断和**,这个概念不难理解。但若说唾液中可能存在反映全身健康状况的生物标志物,有些人的心里难免要打个问号。事实上,唾液检测并非是新近被提出的概念,早在几年前就已经有“唾液诊断艾滋病”的新闻报道。     2008年,美国南加州大学的丹尼(Denny)等在《蛋白组学研究杂志》[J Proteome Res 2008,7(5):1994]发表文章指出,人的唾液中有1166种蛋白质。其中大部分蛋白质能同时在血浆和泪液中找到。当时研究者就提出,从这些蛋白质中可以找到与疾病相关的生物标志物,从而为今后的临床诊断提示一种新方式     随后有研究陆续发现,人唾液中的C反应蛋白、α -1B糖蛋白、肌酐等水平与心血管疾病、癌症、肾脏病等相关。     唾液与糖尿病     在不久前发表于《蛋白组学研究杂志》[J Proteome Res 2009,8(1):239]的一项研究证实,唾液蛋白质与2型糖尿病相关。     通过对2型糖尿病患者和对照者的唾液蛋白组学分析,印度学者发现了唾液中487种与2型糖尿病有关的蛋白。其中33%的蛋白以前从未被报告出现在人类唾液中。在这些蛋白中,有65种蛋白的水平在患者和对照者唾液中能相差2倍之多。进一步分析显示,一些蛋白水平在2型糖尿病患者的唾液中显著升高,在糖尿病前期患者中也有相应升高趋势,因此,可能作为未来无创诊断2型糖尿病和发现糖尿病前期患者的生物标志物。     唾液与癌症     早在2007年,美国M.D.安德森(Anderson)癌症中心的研究者就曾在《国际肿瘤学杂志》上报告[Int J Oncol 2007,30(3):743],在头、颈部鳞癌患者的唾液中,α -1B糖蛋白和补体因子B蛋白水平显著升高,而对照者唾液中几乎检测不到这两种蛋白。相应地,胱蛋白S、腮腺分泌因子等蛋白的水平在对照者唾液中存在,但在头、颈部鳞癌患者唾液中检测不到。     当时研究者就在报告中写道,这些蛋白将来可能作为临床诊断此类癌症的标志物。     通过一项动物研究,科学家们试图挖掘唾

InnovationTM高效强阳离子交换液相色谱柱为基因工程提升效率

InnovationTM高效强阳离子交换液相色谱柱为基因工程提升效率

作者:德尔塔 日期:2022-05-01

基因工程是当前科技发展最为迅速的领域之一,随着基因组学和分子工程学的发展,特别是“人类基因组计划”的初步完成,标志着基因工程发展到一个新的历史阶段,更展示出基因产业的巨大潜力。然而在基因产业,尤其是基因药物产业中其成本的70%甚至更高应用于蛋白质药物的分离纯化,可见分离纯化再次的重要作用。 然而,在基因工程的大规模蛋白质药分离纯化工艺优化过程中, 软胶柱效过低, 平衡和纯化时间太长等众多瓶颈问题无法解决,导致了分离纯化成本高, 效率低的恶果。如果大规模高效离子交换色谱柱(柱效8-12万)可以代替传统软胶柱, 不仅是发酵产生的基因工程蛋白质药(纯化体系简单)还是自然界(纯化体系复杂)天然蛋白质, 一个线性梯度纯化即可能获得完全提纯的蛋白, 时间缩短了10倍。这一理想的高效离子交换色谱柱一定是硅胶基质的! 事实上, 生物下游工程(biological downstream engineering)的未来一定是以高品质硅胶基质的高效离子交换色谱柱和廉价的假亲合配基亲合色谱柱为纯化核心, 配合用于粗纯化的膨化床吸附和用于脱盐常规的凝胶体积排阻色谱。 因此,Chrom-Matrix公司经过系统地调查,充分了解了为什么近几十年来硅胶基质的高效离子交换键合相产品质量没有取得质的突破的原因, 并且逐步的解决,最终研发出新型键合化学生产高品质硅胶基质的SCX, WCX, DEAE和SAX高效离子交换键合相。 Chrom-Matrix公司生产的InnovationTM SCX高效强阳离子交换液相色谱柱(适合于小分子和多肽的应用) 和InnovationTM BioSCX高效强阳离子交换液相色谱柱(适合于多肽和蛋白质的应用)。它们的稳定性、柱寿命、重现性绝对在硅胶基质高效强阳离子交换液相色谱中具有优势地位的色谱产品。InnovationTM SCX高效强阳离子交换液相色谱柱主要有以下产品特征。 (1)InnovationTM SCX键合相是一种最重要的离子交换键合相。非常稳定,非常可靠, 键合产品批次之间的差别小于5%。特别适合碱性或两性小分子化合物和多肽分离。键合相没有泄漏! (2)在许多

PCR常见问题

PCR常见问题

作者:德尔塔 日期:2022-05-01

PCR产物的电泳检测时间   一般为48h以内,有些**于当日电泳检测,大于48h后带型不规则甚致消失。 假阴性,不出现扩增条带   PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备,②引物的质量与特异性,③酶的质量及, ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。   模板:①模板中含有杂蛋白质,②模板中含有Taq酶抑制剂,③模板中蛋白质没有消 化除净,特别是染色体中的组蛋白,④在提取制备模板时丢失过多,或吸入酚。⑤模板核酸变性不彻底。在酶和引物质量好时,不出现扩增带,极有可能是标本的消化处 理,模板核酸提取过程出了毛病,因而要配制有效而稳定的消化处理液,其程序亦应 固定不宜随意更改。   酶失活:需更换新酶,或新旧两种酶同时使用,以分析是否因酶的活性丧失或不够而 导致假阴性。需注意的是有时忘加Taq酶或溴乙锭。   引物:引物质量、引物的浓度、两条引物的浓度是否对称,是PCR失败或扩增条带不 理想、容易弥散的常见原因。有些批号的引物合成质量有问题,两条引物一条浓度高,一条浓度低,造成低效率的不对称扩增,对策为:①选定一个好的引物合成单 位。②引物的浓度不仅要看OD值,更要注重引物原液做琼脂糖凝胶电泳,一定要有引物条带出现,而且两引物带的亮度应大体一致,如一条引物有条带,一条引物无条 带,此时做PCR有可能失败,应和引物合成单位协商解决。如一条引物亮度高,一条亮度低,在稀释引物时要平衡其浓度。③引物应高浓度小量分装保存,防止多次冻融 或长期放冰箱冷藏部分,导致引物变质降解失效。④引物设计不合理,如引物长度不 够,引物之间形成二聚体等。   Mg2+浓度:Mg2+离子浓度对PCR扩增效率影响很大,浓度过高可降低PCR扩增的特 异性,浓度过低则影响PCR扩增产量甚至使PCR扩增失败而不出扩增条带。     反应体积的改变:通常进行PCR扩增采用的体积为20ul、30ul、50ul。或100ul,应用多大体积进行PCR扩增,是根据科研和临床检测不同目的而设定,在做小体积如20ul 后

实验室规划设计

实验室规划设计

作者:德尔塔 日期:2022-05-01

实验室的建设,无论是新建、扩建、或是改建项目,它不单纯是选购合理的仪器设备,还要综合考虑实验室的总体规划、合理布局和平面设计,以及供电、供水、供气、通风、空气净化、安全措施、环境保护等基础设施和基本条件。因此实验室的建设是一项复杂的系统工程,在现代实验室里,先进的科学仪器和优越完善的实验室是提升现代化科技水平,促进科研成果增长的必备条件。“以人为本,人与环境”己成为人们高度关注的课题。本着“安全、环保、实用、耐久、美观、经济、卓越、领先”,的规划设计理念。规划设计主要分为六个方面:平面设计系统、单台结构功能设计系统、供排水设计系统、电控系统、特殊气体配送系统、有害气体输出系统等六个方面。下面就按上述六方面依次讲解。 一、平面设计系统 平面设计我们主要考虑以下几个方面的因素: 1、疏散、撤离、逃生、顺畅、无阻,安全通道;一般实验室门主要向里开,但如设置有爆炸危险的房间,房门应朝外开,房门材质**选择压力玻璃。 2、人体学(前后左右工作空间),完美的设备与科技工作者操作空间范围的协调搭配体现了科学化、人性化的规划设计。 在做平面设计的时候,首先要考虑的因素是就是“安全”,实验室是最易发生爆炸、火灾、毒气泄露等的场所。我们在做平面设计的时候,应尽量地要保持实验室的通风流畅、逃生通道畅通。根据国际人体工程学的标准。我们做如下的划分以供参照:(祥见下图) 实验台与实验台通道划分标准(通道间隔用L表示) L>500mm时,一边可站人操作; L>800mm时,一边可坐人操作; L>1200mm时,一边可坐人,一边可站人,中间不可过人; L>1500mm时,两边可坐人,中间可过人; L>1800mm时,两边可坐人,中间可过人可过仪器 天平台、仪器台不宜离墙太近,离墙400mm为宜。为了在工作发生危险时易于疏散,实验台间的过道应全部通向走廊。另:实验室建筑层高宜为3.7米-4.0米为宜,净高宜为2.7米-2.8米,有洁净度、压力梯度、恒温恒湿等特殊要求的实验室净

超高效液相色谱法UPLC超越HPLC--色谱实验室的新高度

超高效液相色谱法UPLC超越HPLC--色谱实验室的新高度

作者:德尔塔 日期:2022-05-01

在过去30年间,高效液相色谱法(HPLC)已经成为世界各地实验室应用最广泛的技术之一。这是因为HPLC是一种强大的多用途技术。它的强大体现在其应用范围广泛,覆盖从毛细管级到制备级的各个范围;在相关的检测技术范围内,它是一种多用途技术,能检测多种化合物。从根本上说,目前,HPLC技术的发展方向主要有三个方面:化学、检测器和系统/数据管理。色谱法在这些方面的进展使该技术得到了广泛认可。尽管如此,色谱技术仍有进一步发展的空间。那么,HPLC的未来将是怎样一幅图景?后续有哪些发展成果能扩大和延展这种公认技术的功用? UPLCTM的定义 液相色谱法的前沿技术正在研发中。北加利福尼亚大学的J. Jorgensen博士和杨百翰大学的M. Lee博士最近都发表了关于色谱实验室未来分析范围的深刻见解。他们的研究为分离科学描绘了一幅新图景。通过使用比以前小得多颗粒,使分离过程达到了一个新的终点。该方法的基本原理体现在范第姆特方程中。范第姆特方程是一个描述线速度与塔板高度(柱效)关系的经验式。   鉴于颗粒大小是变量之一,因此,它可用来描述各种颗粒大小的理论性能(图1)。从图1可以看出,一旦填料的颗粒大小低于2 μm,色谱技术就能达到一个新水平:不仅柱效更高,而且随着流速的提高不会使柱效降低。   图1:这些范第姆特曲线表明过去30年间颗粒大小的减小过程。理论塔板高度的降低意味着效率的提高。但即使是2.5 μm的颗粒,其效率也会在较高的流速下开始下降,而系统反压则会相应增高。如果使用UPLCTM技术和2 μm以下的颗粒,那么即使在较高的线速度下,效率也能得以保持。更短色谱柱和/或更高流速的使用加快了分析速度,提高了分辨率和灵敏度,从而使现在有可能充分利用色谱原理进行分离。   这就呈现了这样一种情景:峰容量和分离速度均被提高至新的极限。简言之,峰容量被定义为色谱法每单位时间内所能分辨的峰数量。峰容量和分离速度等性能指标得到提高后的色谱法被称为超高效液相色谱法,或UPLCTM。

通风柜的功能与安全性

通风柜的功能与安全性

作者:德尔塔 日期:2022-05-01

通风柜的功能与安全性      通风柜的功能与安全性 建设现代化的生化实验室是个综合的系统工程。在装备各种仪器设备及其配套设施的同时,既要考虑供电、给水、排水、送风、排风净化排污等要求,还要考虑到对人员、物体、周边环境的安全性,噪音、异味、视觉环境的舒适性,仪器设备的可操作性、功能性,以及信息处理的便捷性。 因此,现代化的生化实验室必须有最佳的设计和高品质的设备去满足。     在现代化实验室设备中有通风柜、中央实验台、边台、药品柜、器皿柜、气瓶柜等,其中通风柜是生化实验室设备中担负着十分重要的功能,是必不可少的设备。因此,选择通风柜是实验室建设中的重要问题,必须引起足够的重视。     通风柜的主要功能:     通风柜的功能中最主要的是排气功能,在化学实验室中,实验操作时产生各种有害气体、臭气、湿气以及易燃、易爆、腐蚀性物质,为了保护使用者的安全,防止实验中的污染物质向实验室扩散,在污染源附近要使用通风柜,以往通风柜使用台数较少,只在特别有害且危险的气体及产生大量热的实验中使用。通风柜只担负实验台的辅助功能。近年来考虑到改善实验环境,在实验台上进行的实验逐渐转移到通风柜内,这就要求在通风柜里要有最适于设备使用的功能。特别是大多新建的实验室都要求有空调,因此在建筑的初步设计阶段就要将通风柜的使用台数纳入空调系统的计划。由于通风柜在生化实验室中占有非常重要的位置,从改善实验室环境、改善劳动卫生条件,提高工作效率等方面考虑,通风柜的使用台数飞跃地增加。随之而来的是通风管道,配管、配线、排风等都成为实验室建设的重要课题。 使用通风柜的最大目的是排出实验中产生的有害气体,保护实验人员的健康,也就是说要有高度的安全性和优越的操作性,这就要求通风柜应具有如下特殊功能:         (1) 释放功能:应具备将通风柜内部产生的有害气体用吸收柜外气体的方式,使其稀释后排除室外的机构。    (2) 不倒流功能:应具有在通风柜

紫外分光光度计——测定六价铬的研究

紫外分光光度计——测定六价铬的研究

作者:德尔塔 日期:2022-05-01

铬是生物体必需的微量元素之一。铬的缺乏会导致糖、脂肪等物质的代谢紊乱, 但摄入量过高对生物和人类有害。铬的毒性与其存在形态有极大的关系: 三价铬化合物几乎无毒, 且是人和动物所必需的; 相反, 六价铬化合物具有强氧化性, 且有致癌性。一般来说, 六价铬的毒性要比三价铬大100倍。我国规定铬在地面水中最高允许浓度: 三价铬为0.5 mg/L, 六价铬为0.1 mg/L, 生活饮水最高允许浓度( 六价铬) 为0.055 mg/L。因此对六价铬需要一种简单、有效的分析方法。六价铬的测定方法有很多: 如二苯碳酰二肼可见分光光度法、示波极谱滴定法、原子吸收分光光度法、动力学光度法、流动注射光度法等, 但大多由于仪器价昂难以普及使用。分光光度法则以仪器价廉, 操作简单等优点,目前在我国仍具有广泛的实用价值。本文研究了在碱性条件下对六价铬的测定, 碱性条件下六价铬在紫外区有一较强的吸收峰, 因此建立了对六价铬的测定方法。 1 主要仪器和试剂配制 UV- 2201 紫外可见分光光度计, 722 可见分光光度计, PHS- 25B 型数字酸度计。 六价铬标准溶液: 称取于120℃干燥2 h 的K2Cr2O7( 优级纯) 0.282 9 g, 溶于少量水中并稀释定容至1 L, 摇匀得浓度为0.100 mg/mL 的储备液。2%(m/V) 氢氧化钾溶液: 称取2 g 氢氧化钾溶于100 mL蒸馏水中。1∶1 硫酸溶液: 将浓硫酸缓慢加入到等体积水中, 混合均匀。 所用试剂均为分析纯, 实验用水为二次蒸馏水。所用的玻璃器皿均在1 mol /L 的HNO3 溶液中浸泡12 h 以上。 2 方法与结果 2.1 六价铬的吸收光谱 准确移取1 mL 铬标准和适量的氢氧化钾溶液置于25 mL 容量瓶中, 定容后用1 cm 比色皿在波长200~400 nm 范围内扫描吸收曲线, 结果 产物的λmax 为372 nm; 故本文选372 nm 作为测试波长。 用移液管分别移取铬标准溶液0.00、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00 mL 于50 mL 容量瓶中,分别加适量氢氧化钾溶液, 然后用蒸馏水稀释至刻度, 摇匀; 得到Cr(VI) 的浓度分别是0.00、1.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.0