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超声波提取技术
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
超声波提取技术 超声波是指频率为20千赫～50兆赫左右的机械波，需要能量载体—介质—来进行传播。超声波在传递过程中存在着的正负压强交变周期，在正相位时，对介质分子产生挤压，增加介质原来的密度；负相位时，介质分子稀疏、离散，介质密度减小。也就是说，超声波并不能使样品内的分子产生极化，而是在溶剂和样品之间产生声波空化作用，导致溶液内气泡的形成、增长和爆破压缩，从而使固体样品分散，增大样品与萃取溶剂之间的接触面积，提高目标物从固相转移到液相的传质速率。在工业应用方面，利用超声波进行清洗、干燥、杀菌、雾化及无损检测等，是一种非常成熟且有广泛应用的技术。 超声波萃取的原理 超声波萃取中药材的优越性，是基于超声波的特殊物理性质。主要是主要通过压电换能器产生的快速机械振动波来减少目标萃取物与样品基体之间的作用力从而实现固--液萃取分离。 （1）加速介质质点运动。高于20 KHz声波频率的超声波的连续介质（例如水）中传播时，根据惠更斯波动原理，在其传播的波阵面上将引起介质质点（包括药材重要效成分的质点）的运动，使介质质点运动获行巨大的加速度和动能。质点的加速度经计算一般可达重力加速度的二千倍以上。由于介质质点将超声波能量作用于药材中药效成分质点上而使之获得巨大的加速度和动能，迅速逸出药材基体而游离于水中。 （2）空化作用。超声波在液体介质中传播产生特殊的“空化效应”，“空化效应”不断产生无数内部压力达到上千个大气压的微气穴并不断“爆破”产生微观上的强大冲击波作用在中药材上，使其中药材成分物质被“轰击”逸出，并使得药材基体被不断剥蚀，其中不属于植物结构的药效成分不断被分离出来。加速植物有效成份的浸出提取。 （ (3）超声波的振动匀化（Sonication）使样品介质内各点受到的作用一致，使整个样品萃取更均匀。 综上所述，中药材中的药效物质在超声波场作用下不但作为介质质点获得自身的巨大加速度和动能，而且通过“空化效应”获
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NO调节花粉管生长过程中胞内外Ca2+的变化和细胞壁构建
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
NO在极性生长中的功能 NO调节花粉管生长过程中胞内外Ca2+的变化和细胞壁构建 p{text-indent:2em; margin:3px 3px 3px 3px; line-height:20px;} 一氧化氮（NO） 在植物的生长发育过程中具有非常重要的作用。近日，中科院植物所林金星研究组深入研究了裸子植物白皮松花粉管生长过程中，NO对Ca2+、微丝骨架、囊泡转运和细胞壁构建的调节作用。 NO作为重要的信号分子，参与调控花粉管极性生长。通过应用显微注射、非损伤微测、免疫荧光标记等技术发现NO释放剂促进花粉萌发和花粉管伸长，并且具有浓度效应，而抑制剂则抑制花粉萌发和花粉管生长，同时使花粉管顶端膨大，丧失极性；NO释放剂促进胞外Ca2+内流，顶端Ca2+浓度梯度增加，NO抑制剂抑制胞外Ca2+内流，顶端Ca2+浓度梯度降低。 此外，NO释放剂促进囊泡运输，使花粉管顶端微丝束解聚，NO抑制剂具有相反的作用，同时NO使花粉管顶端酯化果胶增加而酸性果胶降低。 在白皮松花粉管中，NO促进胞外Ca2+内流，从而维持胞内Ca2+浓度梯度，进而影响花粉管顶端微丝骨架的组装，促进囊泡运输，使花粉管顶端酯化果胶累积，最终促进花粉管的正常生长。通过Ca2+流和细胞学实验结果，全面地认识了NO在花粉管中极性生长中的功能。 右图:使用荧光标记技术和非损伤微测技术得到的花粉管尖端Ca2+在NO释放剂和抑制剂处理后的Ca2+含量以及Ca2+流的变化图(右图)。正值为外流，负值为内流。 关键词：NO；钙离子内流(Calcium influx)；花粉管(Pollen tube)；细胞壁(Cell wall)；非损伤微测技术(SIET)。 参考文献：Wang Yuhua, New Phytologist, 2009, 182: 851-862 全文下载： Summary• Nitric oxide (NO) plays a key role in many physiological processes in plants, including pollen tube growth. Here, effects of NO on extracellular Ca2+ flux and microfilaments during cell wall construction in Pinus bungeana pollen tubes were investigated.• Extracellular
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静音无油空压机保养、维修知识及应用领域
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
随着环保科技的进步，这种节能环保、稳定耐用的低噪音无油空压机，在工业制造、实验分析、科技通讯、石油化工、环保能源、医疗保健、航天科技、印刷等众多行业中得到广泛应用。因此，关于静音无油空压机的日常维护和一般故障维修问题越来越受到用户的重视。 带着这些问题笔者专门采访了国内在这领域有着较强技术优势的瑞安艾特机电陈工，特将有关静音无油空压机保养及维修知识整理如下，以供广大用户参考。 1、 购买前的选择。选择品质好的、适合设备要求的使用起来麻烦就会少很多。 1.1建议用户选择像艾特机电那样据有技术优势的厂家生产的产品。同时在选择时，应该要求厂家提供尽可能详尽的技术参数，那些参数标识不完整的厂家，缺少了某些技术项目的检测，选择时要慎重。 1.2根据设备需要，选择流量稍大一点的型号，可以避免机器疲劳运转。增加机器的使用寿命。 2、 重视日常维护。正确的使用和维护，能够延长空压机的使用寿命，避免或减少故障的发生。 2.1、本身不含任何油性物质，切忌添加任何润滑油以及含油的物质。 2.2、严格按照空压机上的标定的电压、频率、额定的负荷工作，效果会更佳、更安全。 2.3、下班不使用时，养成及时切断电源的习惯。移动空压机或连接其它设备时，必须要切断电源。 2.4、一定要按出厂时设定的压力范围内操作（一般出厂最大压力设定为8 Bar，安全卸压8.8Bar）,否则会有储气罐爆炸的危险。（需要特殊压力的，请联系厂家定制） 2.5、注意电源电压与空压机铭牌标识的相符。电源电压高于空压机的适用电压时，有可能引发人身事故并损毁空压机，电源电压低于空压机适用电压时，会引起启动不良，甚至损坏马达。 2.6、应根据使用情况及时清洗滤清器，定期检查附件、电缆线，损坏立即更换。应保持机器清洁干爽不沾油污，这样才能充分发挥其性能。空压机不使用时，应放掉储气罐内的空气、排掉储气罐内污水，存放于干燥的环境中。 2.7、及时排掉储气罐内污水，建议一周应该至少排放
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石蜡切片制作基本技术
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
石蜡切片 石蜡切片（paraffin section） 组织学常规制片技术中最为广泛应用的方法。石蜡切片不仅用于观察正常细胞组织的形态结构，也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法，而且也已相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中。教学中，光镜下观察切片标本多数是石蜡切片法制备的。活的细胞或组织多为无色透明，各种组织间和细胞内各种结构之间均缺乏反差，在一般光镜下不易清楚区别出；组织离开机体后很快就会死亡和产生组织腐败，失去原有正常结构，因此，组织要经固定、石蜡包埋、切片及染色等步骤以免细胞组织死亡，而能清晰辨认其形态结构。 石蜡切片制作基本技术 石蜡切片法包括取材、固定、洗涤和脱水、透明、浸蜡、包埋、切片与粘片、脱蜡、染色、脱水、透明、封片等步骤。一般的组织从取材固定到封片制成玻片标本需要数日，但标本可以长期保存使用，为永久性显微玻片标本。 1.取材 应根据要求选取材料来源及部位。例如植物细胞有丝分裂多选取洋葱根尖，细胞分裂快又便于切取；猪的肝小叶边界清晰明确；耳蜗以豚鼠的内耳易于定位和剥离。材料必须新鲜，搁置时间过久则产生蛋白质分解变性，导致细胞自溶及细菌的滋生，而不能反映组织活体时的形态结构。 2.固定 用适当的化学药液——固定液浸渍切成小块的新鲜材料，迅速凝固或沉淀细胞和组织中的物质成分、终止细胞的一切代谢过程、防止细胞自溶或组织变化，尽可能保持其活体时的结构。固定能使组织硬化，有利于切片的进行，而且也有媒浸作用，有利于组织着色。固定液的种类很多，其对组织的硬化收缩程度以及组织内蛋白质、脂肪、糖类等物质的作用各不相同。例如纯酒精可固定肝糖而能溶解脂肪，甲醛能固定一般组织，但溶解肝糖和色素。固定液可分为单一固定液及混合固定液。前者有甲醛（蚁醛、福尔马林）、酒精、醋酸或冰醋酸、升汞、锇酸（四氧化锇）、重铬酸钾及苦味酸等，单一固定液不能固定细胞中的所有成分；
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镜头焦距计算公式
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
覆盖被拍摄景物的镜头焦距可以通过以下公式进行计算。 f=v*D/V(1) f=h*D/H(2) f： 镜头焦距 V： 拍摄景物的垂直方向高度 H： 拍摄景物垂平方向的长度 D： 镜头到拍摄景物间的距离 v： 相机画面的垂直方向高度 h： 相机画面的水平方向高度 格式 1型 2/3型 1/2型 1/3型 1/4型 v（垂直） 9.6mm 6.6mm 4.8mm 3.6mm 2.7mm h（水平） 12.8mm 8.8mm 6.4mm 4.8mm 3.6mm （1） 测量拍摄景物高度 1/2 型相机（画面尺寸） v=4.8mm 拍摄景物垂直方向高度 V=330mm(33cm) 镜头到拍摄景物间距离 D=2500mm(250cm) 代入公式（1） 可知f＝36mm （2） 测量拍摄景物长度的情况 1/2 型相机（画面尺寸） h=6.4mm 拍摄景物的水平方向长度 H=440mm(44cm) 镜头到拍摄景物间的距离 D=2500mm(250cm) 代入公式（2） 可知f＝36mm 注意：实际应用时，根据视野的V和H得出的值可能不一样，应该取较小的值，从而获得较大的视野。
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抗体常见问题解答
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
Q&A 常见问题： 如何选择合适的一抗？ 如何选择合适的二抗？ 如何选择合适的同型对照？ 如何选择阳性对照？ 如何确定一抗的稀释比例？ 如何选择合适的抗原修复方式？ 为何WB检测条带大小与预期有差别？ 抗体能够用于其他种属/实验方法？ 如何确定抗体是否能用于未经验证的种属？ 抗体能否与该蛋白的其它亚型或同一家族其他蛋白交叉反应? 如何保存抗体？ 如何分装抗体？ 能否提供抗体的免疫原序列？ 1、如何选择合适的一抗？ 请先确定您要检测的种属和使用的实验方法，然后查找相关产品，根据说明书上描述的“适用种属和实验方法”来确定合适的抗体。如果说明书中有明确您要检测的种属和实验方法均经过检测，则您可以放心地购买该产品。如果说明书中没有注明您用的种属和实验方法经过验证，那么请参考第8、9、10条。 Abcam网站所有说明书都是根据验证情况（Abcam实验室以及客户）实时更新的，所以可以放心参考！ 2、如何选择合适的二抗? 二抗的选择原则： 针对一抗来源的二抗（比如一抗是小鼠来源的，二抗就要是抗小鼠的） 针对一抗Ig亚型的（比如一抗是IgM，二抗就要是抗IgM的抗体） 为了增加特异性、降低背景：可以选择Fab段的抗体（去除Fc段的）、经过标本来源种属血清吸附的的二抗 查看二抗的说明书，选择经过验证可以用于相应实验方法的二抗 Abcam提供各种种属、各种类型和标记的二抗，完全满足您实验的需要： 可以通过一抗说明书页面的“Related Products”来选择合适的二抗 通过产品分类目录选择合适的二抗 3、 如何选择同型对照？ 同型对照的主要目的是确定一抗的结合是特异性的，而不是非特异性的Fc受体或与其他蛋白的相互作用。同型对照要与一抗的来源、Ig分型和标记完全一致。例如：一抗是FITC标记，其抗体分型是小鼠的IgG1，则同型对照要选择是FITC标记的小鼠的IgG1。 Abcam提供各种种属和Ig分型的同型对照产品，可以在Abcam和51AB的网站，产品分类“Isotype”/“同型对照”中查找和选择合适的产品 多抗
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生物实验室项目的设计理念与原则(参考资料)
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
北京宝丰轩生物实验室设备安装工程有限公司专业承接生 物安全等级实验室建设工程。P1· P2 · P3 · P4 等 级实验室，BSL-1 · BSL-2 · BSL-3 · BSL-4 · 等 级实验室，1000级，10000级洁净室建设工程 一．生物实验室项目的设计理念与原则 1. 最大限度地尊重所在地的生态环境，表达对环境的尊重 ： 生态理念的实验室设计 在对将要实施的实验室项目充分分析基础上,对方案构思中将主体建筑作为整体环境的背景的设计理念，将实验室所在建筑包容于环境之中。要充分的考虑到生物实验室周围的生态设施，树木草丛同样也可以起到环保隔离及优化空气质量的作用。 宝丰轩对客户项目的温馨提示：在实验室项目的周围，建议同期建设生态环保项目，花草树木在一定程度上也可以起到净化隔离和优化空气质量的作用。例如：双子叶植物丁香和樟科植物肉桂中的天然成分就可杀灭肠道致病菌和化脓性球菌，这两点在《开宝本草》《唐本草》中有详细介绍。 2. 生物安全实验室要具有前瞻性的设计理念 生物实验室具有下列特点： l 相对灵活性：每一个实验室都应有足够的空间来放置仪器和设备。划分出来的实验室工作区域板块还可以独立的施展它们各自的用途，以便可以在小区域进行实验工作而不影响其它实验项目，同时在必要的时候又可以整合在一起进行大规模的实验工作。 宝丰轩对客户项目的温馨提示：宝丰轩对实验室的内部设计具有丰富的设计经验，可以很好的满足客户的使用要求。 l 相对经济性：实验室考虑到为防护、工作以及配置方面的效率利用进行区域划分，从而避免了面积和空间的浪费。 宝丰轩对客户项目的温馨提示：在相对的空间范围内，宝丰轩会为您节省实际空间，帮助您有效的利用空间。 l 相对实验室内部的扩展性：建立在可增添结构的模块形式和可重复使用的运行系统基础上的实验室系统，能够在不牺牲一定功能或不影响相关实验室功能的情况之下进行必要的收缩和扩张。所以，预留充分的的实验室空间是必要的
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异钙调素结合在质膜胞外位点上并导致胞内钙离子水平上升
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
钙调素的研究被Nature China评为一周研究亮点 异钙调素结合在质膜胞外位点上并导致胞内钙离子水平上升 p{text-indent:2em; margin:5px 3px 7px 3px; line-height:21px;} 上图：百合花粉CaM的定位以及原生质体质膜Ca2+流 钙调蛋白（CaM）是一种高保守性的细胞内钙离子感应器。在植物中，胞外CaM也作为一个多肽信号影响许多生理功能，但是其在细胞质外的结合位点至今仍存在争议。 2009年5月，中科院植物所林金星研究组在《JBC》上发表文章，研究人员利用CaM交联QD系统对植物细胞表面CaM结合位点进行单分子水平检测，发现QD-CaM能选择性的结合在质膜外空间，并且通过高分辨率透射电子显微镜进行了进一步定位，证实了胞外CaM结合位点确实存在于植物细胞膜表面，但在植物细胞壁上却没有CaM结合位点。此研究为钠米技术在植物细胞研究上的应用提供了有力的证据。此外，研究人员还利用显微注射、FRET以及非损伤微测（SIET）等技术证明了胞外CaM在与其胞外结合为点结合后，可以引起胞内第二信使Ca2+信号的增强，这些发现说明了植物胞外CaM可以通过介导跨膜信号而发挥其信号肽的功能。 相关链接： 关键词：钙调素（Calmodulin, CaM）；离子选择性电极（Ion-selective microelectrodes）；质膜（Plasma membrane） 参考文献：Wang et al. J. Biol. Chem..2009, 284: 12000-12007 全文下载： Abstract Calmodulin (CaM) is a highly conserved intracellular calcium sensor. In plants, CaM also appears to be present in the apoplasm, and application of exogenousCaMhas been shown to influence a number of physiological functions as a polypeptide signal; however, the existence and localization of its corresponding apoplasmic binding sites remain controversial. To identify the site(s) of action, a CaM-conjugated quantum dot (QD) system was employed for single
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氧分子流作为黑头呆鱼胚胎的生理应激指标：一个实时水质生物监测系统
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
检测环境污染的有效手段——非损伤微测技术检测鱼胚胎的耗氧 氧分子流作为黑头呆鱼胚胎的生理应激指标：一个实时水质生物监测系统 p{text-indent:2em; margin:6px 3px 6px 3px; line-height:21px;} 淡水生态系统的安全与否对于人类来说至关重要，所以实时监测淡水环境中有害化学物质和生物制剂的含量是否超标非常必要。近期，美国普渡大学的科学家使用非损伤微测技术建立了一套实时监测水质的系统。 这项研究报告发表在《环境科学与技术》（Environmental Science and Technology）杂志上，通过非损伤探测方法可以发现多种污染物，如除草剂阿特拉津(atrazine)，其探测敏感性十分有效，甚至能探测到低于美国国家环境保护局(EPA)的标准。该研究在五个不同的模式（包括阿特拉津、氯化镉、五氯酚、马拉硫磷和氰化钾）下对受精后两天的黑头呆鱼胚胎呼吸耗氧量的实时影响，评价黑头呆鱼胚胎处于低浓度污染物时耗氧量瞬间变化的灵敏度。处理两小时后，五氯酚、氯化镉、阿特拉津导致耗氧增加，氰化钾、阿拉特津导致耗氧减少，马拉硫磷处理没有显著影响。 本研究的负责人Marshall Portfield称，这项技术可用于其他有机生命体，如果将胚胎鱼结合使用于瘤细胞，能够检测到潜在的致癌药物，或帮助发现新的**目标。普渡大学提出的这一研究理论具有很大的优势，它记录了敏感生命阶段的呼吸作用。这项研究非常令人欣慰，它能够成为保护人类健康的一项潜在应用工具。该研究采用非损伤微测技术l来监测环境毒物的存在，为水质监测提供了新的思路和方法。 上图：通过非损伤微测系统检测鱼胚胎的耗氧，在不同污染物处理下氧流不同 .tmp_b1{ margin:12px 6px;} 关键词：非损伤微测技术(NMT)，环境监测，氧气(Oxygen flux)，水质 参考文献：Sanchez BC, et al. Environ. Sci. Technol , 2008, 42, 7010-7017 全文下载： Abstract: The detection of harmful chemicals and biological agents in real time is a c
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酶联免疫吸附测定
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
1 试剂的准备 按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂。ELISA中用的蒸馏水或去离子水，包括用于洗涤的，应为新鲜的和高质量的。自配的缓冲液应用pH计测量较正。从冰箱中取出的试验用试剂应待温度与室温平衡后使用。试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保存。 2 标本的采取和保存 可用作ELISA测定的标本十分广泛，体液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、粪便)等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定(如血清、尿液)，有些则需经预处理(如粪便和某些分泌物)。大部分ELISA检测均以血清为标本。血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外，其他成份均同等于血清。制备血浆标本需借助于抗凝剂，而血清标本只要待血清自然凝固、血块收缩后即可取得。除特殊情况外，在医学检验中均以血清作为检测标本。在ELISA中血浆和血清可同等应用。血清标本可按常规方法采集，应注意避免溶血，红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质，以HRP为标记的ELISA测定中，溶血标本可能会增加非特异性显色。 血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染，菌体中可能含有内源性HRP，也会产生假阳性反应。如在冰箱中保存过久，其中的可发生聚合，在间接法ELISA中可使本底加深。一般说来，在5天内测定的血清标本可放置于4℃，超过一周测定的需低温冰存。冻结血清融解后，蛋白质局部浓缩，分布不均，应充分混匀宜轻缓，避免气泡，可上下颠倒混和，不要在混匀器上强烈振荡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤，澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价跌落，所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测，宜少量分装冰存。保存血清自采集时就应注意无菌操作，也可加入适当防腐剂。 3 加样 在ELISA中一般有3次加样步聚，即加标本，加酶结合物，加底物。加样时应将所加物加在LEISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可溅出，不可产生气泡。 加标本一般用微量加样器，按规定的量加入板孔
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色谱法及其基本分类
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
色谱法及其基本分类 一. 色谱法 色谱法：根据各物质在两相中的分配系数（表示溶解 或 吸附的能力）不同而进行分离、分析的方法。 各组分被分离后，可进一步进行定性和定量分析： 经典：分离过程和其含量测定过程是离线的，即不能连续进行 现代：分离过程和其含量测定过程是在线的，即 能连续进行 经典色谱法：将潮湿的碳酸钙挤出玻璃管，用刀将各色带切下，用适宜的方法进行分析； 现代色谱法：当一个两组分（A和B）的混合物样品在时间t1从柱头加入，随着流动相不断加入，洗脱作用连续进行，直至A和B组分先后流出柱子而进入检测器，从而使各组分浓度转变成电信号后在荧光屏上显示出来。 根据峰的位置（出峰时间 t ） ——定性 根据峰的面积 A （或峰高h） ——定量 二. 色谱法分类 （一）按两相物理状态分 1. 气相色谱法 (gas chromatography 简称 GC)用气体作流动相的色谱法。 2. 液相色谱法 (liquid chromatography 简称 LC)用液体作流动相的色谱法。 3. 超临界流体色谱法 (SFC) 用超临界状态的流体作流动相的色谱法。 超临界状态的流体不是一般的气体或流体 , 而是临界压力和临界温度以上高度压缩的气体 , 其密度比一般气体大得多而与液体相似 , 故又称为 “ 高密度气相色谱法 ” （二）按分离原理分 1. 吸附色谱法（ adsorption chromatography ）： 根据吸附剂表面对不同组分物理吸附能力的强弱差异进行分离的方法。 如：气一固色谱法、液-固色谱法——吸附色谱 2. 分配色谱法 （partition chromatography ）： 根据不同组分在固定相中的溶解能力和在两相间分配系数的差异进行分离的方法。 如：气-液色谱法、液-液色谱法——分配色谱 3. 离子交换色谱法（ion exchange chromatography ） 根据不同组分离子对固定相亲和力的差异进行分离的方法。 4. 排阻色谱法（ size exclusion chromatography）： 又称凝胶色谱法 （gel chromatography ）, 根据不同组分的分子体积大小的差异进行分离的方法。 其中：以水溶液
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创新的双重MRM扫描模式质谱用于药物定量过程中的代谢物检测
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
创新的双重MRM扫描模式质谱 用于药物定量过程中的代谢物检测 Paul D.Rainville,Jose Castro-Perez,Joanne Mather,and Robert S.Plumb Waters Corporation,Milford,MA,U.S. 介绍 市场上的药品及其代谢物的含量水平的测定对新疗法的开发来说非常重要。体液中的药物水平被用来确定药物的生物利用率。此外，药物代谢物信息的解析也至关重要，因为在一定浓度水平下，这些代谢产物是有毒性的，且比原型药具有更强的药效活性，干扰辅药，进而影响肝脏功能。这两块信息通常是从不同的分析实验中获取得到的，这加重了实验室的工作负担，降低了实验室的工作效率。因此，如果通过一次分析就能获得药物浓度、获取代谢物结构有关信息话，这种方式速度更快，也能节约更多成本。样品数量较少的情况下，比如说，在儿科研究中，这种能力对实验室获取必要的定量和定性数据至关重要。沃特世XevoTM TQ MS是一套串联四极杆质谱系统，装配有新型设计的碰撞池，可以通过一次分析过程中获取全扫描质谱和定量的多反应监测（MRM）的数据。下面我们提供一种一次分析就可获取全扫描质谱和多反应监测质谱数据的数据采集方法，并以此测定尿液中药物样品的含量，并利用相关全扫描数据来检测其相关的代谢产物。 下面我们提供一种一次分析就可获取全扫描质谱和多反应监测质谱数据的数据采集方法，并以此测定尿液中药物样品的含量，并利用相关全扫描数据来检测其相关的代谢产物。 实验 尿液是从服用400毫克布洛芬八个小时之后志愿者上采集的。样品进样分析之前冷冻保存。样品的制备是样品以13000RCF的速度离心5分钟，然后用水进行稀释，再把样品注入UPLC/MS/MS系统中。 结果 测定药物的浓度和药物的代谢产物是新药研发过程的两个重要方面。设计本实验的目的是：在依次进样中，用多反应监测质谱来测量尿液中的布洛芬的含量，用采集全扫描质谱数据来检测相关的代谢产物。Xevo TQ MS的碰撞池不断的冲入碰撞气，其独特的碰撞池设计使得该仪器
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ELISPOT酶联免疫斑点分析简介
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
ELISPOT 技术简介 随着酶联免疫分析技术在医学及生物学领域的广泛应用 , 使体外检测各种细胞因子及抗体研究有了新的突破。在研究免疫应答机制时以往常用用酶联免疫吸附法（ ELISA ）检测体液中游离的细胞因子（ CK ）或抗体，但由于游离的循环抗体或 CK 的半哀期不同，使之在体液中不断的被代谢或与靶器官结合，而不能确切的反映体内的抗体及 CK 的水平。 80 年代，国外的科研工作者根据 ELISA 技术的基本原理，建立了体外检测特异性抗体分泌细胞和 CK 分泌细胞的固相酶联免疫斑点技术（ ELISPOT ）。因其具有较高的特异性和敏感性，目前正被国内外广泛应用，对探索自身免疫系统疾病发病机制具有重要意义。 ELISPOT 法源自 ELISA ，又突破传统 ELISA 法，是定量 ELISA 技术的延伸和新的发展。两者都是检测细胞产生的细胞因子或其他可溶性蛋白，它们最大的不同在于： ELISA 通过显色反应，在酶标仪上测定吸光度，与标准曲线比较得出可溶性蛋白总量。 ELISPOT 也是通过显色反应，在细胞分泌这种可溶性蛋白的相应位置上显现清晰可辨的斑点，可直接在显微镜下人工计数斑点或通过德国AID的ELISPOT 分析系统对斑点进行计数， 1 个斑点代表 1 个细胞，从而计算出分泌该蛋白的细胞的频率。（某些研究不仅要测细胞因子生成量，还需检测分泌此细胞因子的细胞频率） 由于是单细胞水平检测， ELISPOT 比 ELISA 和有限稀释法等更灵敏，能从 20 万 -30 万细胞中检出 1 个分泌该蛋白的细胞。 捕获抗体为 BD 、 R&D 、 Mabtech 、 Diaclone 生产的高亲和力、高特异性、低内毒素单抗，在研究者以刺激剂激活细胞时，不会影响活化细胞分泌细胞因子。 ELISPOT 检测原理 细胞受到刺激后局部产生细胞因子，此细胞因子被特异单克隆抗体捕获。细胞分解后， 被捕获的细胞因子与生物素标记的二抗结合，其后再与碱性磷酸酶标记的亲和素结合。 BCIP/NBT 底物孵育后， PVDF 孔板出现“紫色”的斑点表明细胞产生了细胞因子，应用德国AID的ELI
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新一代萃取材质为检测安全提升保障
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
质量检测作为食品、医药、化工等行业的重要环节，关系到产品、企业甚至整个行业的发展，而被检测物的提取分离更是起着至关重要的作用，不论在欧洲标准、美国标准……对于数据及效果起到决定因素的正是萃取柱、色谱柱等材料。 据了解，人、动物、植物的体液和组织中微量物质的定性定量分析，如药物代谢研究、违禁药鉴别和食品的安全检测，通常要求使用固相萃取柱做样品预处理去掉绝大部分杂质,以确保分析检测的精确性和灵敏度，也最少程度污染昂贵的仪器。 但是，作为固相萃取柱的主要类型，石墨、聚合物和硅胶基质的“三国演义”，已慢慢呈现出硅胶基质独步天下的局面。尤其是当科奥美萃在全球率先推出以球形B型硅胶作为材料骨架的固相萃取产品之后，彻底改变了原有硅胶基质不规则、无定形等属性所带来的影响。 球形B型硅胶固相萃取产品键合技术好，因此保证了其对于分析物样品的处理能够达到高回收率，低干扰的效果。采用球形B型硅胶固相萃取产品的InnovationTM 系列，经过多方测试得出以下结果：PSA固相萃取柱GC-MS清洁度85%；Aminopropyl固相萃取柱GC-MS清洁度85%；C8+SCX固相萃取柱上三聚氰胺回收率（pH3.5上样）>95%；SCX固相萃取柱上三聚氰胺回收率（pH3.5上样）>95%；C18固相萃取柱GC-MS清洁度95%；羧酸型WCX固相萃取柱上司来吉兰（Seligiline）回收率（pH1上样，500mg/3cc）>95%；EDTA型WCX固相萃取柱上百草枯和敌草快回收率（pH7上样，500mg/3cc）>95%；Phenyl固相萃取柱GC-MS清洁度95%；DEAE固相萃取柱上异丁苯丙酸回收率>95%；SAX固相萃取柱上异丁苯丙酸回收率>90%；C8+SAX固相萃取柱上异丁苯丙酸回收率>90%；Cyano固相萃取柱GC-MS清洁度95%；Diol固相萃取柱GC-MS清洁度95%。 可见球形B型硅胶不论在清洁度还是在回收率上均能够帮助使用者获得最佳效果。 而且球形B型硅胶的压力降小，通透性好，对血浆等较为粘稠的样品很好操作，没有无定形无机硅胶固相萃取产品经常会发生的粘稠样品阻塞问题。
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洁净室质量控制及其检测方面的讨论
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
洁净室质量控制及其检测方面的讨论 关键词：洁净室 质控标准 检测 空气微生物 悬浮粒子 制药 生物制品 洁净室对于制药工业的重要意义已为人们肯定。生物制品 是制 药工业的一部分，对生产厂房有很高的洁净要求［1，2］。Gilland等曾在市售的 嗜酸乳杆菌产品中，分离到人为污染的短乳杆菌、发酵乳杆菌和植物乳杆菌等［3］ 。生物制品生产中，尤其是活菌、活疫苗的生产中，经常受到不同程度的污染，因此，不仅 需要重视洁净室的建立，更要重视质量控制方法及标准。 朝鲜战争中，美国发现大量电子仪器失灵，最后找到了主要原因，是灰尘在作怪，促成了洁 净技术的起步。1961年，诞生了世界上最早的洁净室标准，既美国空军技术条令203，1963 年，颁布了国际上最著名的洁净室标准：美国联邦FS209。1966年，颁布了修订后的209A， 时至1992年，建立了迄今被广泛采用的209E。国际上为了加强药品、生物制品质量管理规范 (GMP)，把洁净室定为必备的生产硬件之一。GMP对厂房、设备等，明确规定了相应的洁净要 求，并制订了有关标准。 1 洁净室的污染源 洁净室污染源按性质可分物理、化学、生物等。直径在0.001-1000μm的固态、液态或二者 的混合物质，包括生物粒子和非生物粒子，我们称为悬浮粒子(airborne particles)。微生 物一般以无生命的粒子作载体而悬浮，以气溶胶(Aerosol)形式存在于空气中，1μm以下 者永外悬浮，10μm以上者会逐渐沉下来而形成菌尘。洁净室污染可分为外部污染和内部污 染。外部污染指大气尘污染，可以通过光电法测得。内部污染，是由人和有关的物品、设备 等引起的。人是洁净室最大的污染源，占90%左右。人和环境造成了洁净室的污染，所以在 洁净室中，人的数量和活动应有特别严格的限制。一般男性每人每分钟向周围排放1000个以 上的含菌粒子，女性为750个以上。穿衣服时，静止态发菌量为10-300个/min·人，行走时 的发菌量为900-2500个/min·人。咳嗽一次发菌量为70-700个/min·人，喷嚏
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