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干细胞的选择技巧
作者:德尔塔 日期:2022-04-01
干细胞选择指示剂时,一般要求变色明显(所以一般不选用石蕊),指示剂的变色范围与恰好中和时的pH要吻合。 ①在酸碱中和滴定的实验中,不用石蕊作指示剂,主要原因是:石蕊的“红色→紫色”、“紫色→蓝色”的颜色变化不够明显,不利于及时、准确地作出酸碱是否恰好完全中和的判断。 ②强酸强碱相互滴定,生成的盐不水解,溶液显中性,可选择酚酞或甲基橙作指示剂。 酚酞: 酸滴定碱——颜色由红刚好褪色; 碱滴定酸——颜色由无色到浅红色。 甲基橙:酸滴定碱——颜色由黄色到橙色; 碱滴定酸——颜色由红色到橙色。 ③强酸弱碱相互滴定时,由于生成强酸弱碱盐使溶液显酸性,所以应选择甲基橙作指示剂。 ④强碱弱酸相互滴定时,由于生成强碱弱酸盐,溶液显碱性,而应选用酚酞作指示剂。 说明: ①根据指示剂的变色判断出的滴定终点,并不是酸和碱完全反应的等当点,但没有一种指示剂的变色恰好是酸碱完全中和之点,因此把滴定终点看作等当点。 ②干细胞指示剂用量常用2~3滴,因指示剂本身也是弱酸或弱碱。若用量过多,会使滴定时酸或碱的消耗量增加。 54779-58-7 反苯环丙胺相关物质A标准品 40mg 5586-89-0 苯环丙胺相关物质B标准品 40mg 多库酯钠相关物质B标准品 40mg 碘帕醇相关物质C标准品 40mg 118-71-8 麦芽酚标准品 4g Maltol 氟化牙粉:氟化亚锡-二氧化硅标准品 4oz 氟化牙粉:氟化钠/碳酸氢钠粉标准品 4oz 04-93-9 盐酸万古霉素标准品 4vials 9002-60-2 促肾上腺皮质激素标准品 5 vails Corticotropin 50-56-6 羟可待酮标准品 5 vials 氟化牙粉:单氟磷酸钠(1500 ppm)/二氧化硅标准品 5.25oz " 氟化牙粉:单氟磷酸钠(1000 ppm)/二氧化硅标准品 5.25oz 干细胞
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HUVEC细胞质量控制
作者:德尔塔 日期:2022-04-01
正如人有喜怒哀乐,细胞也是如此,细胞的活力和状态是不断变化的,而非一成不变的。在细胞体外培养的过程中,离开机体保护的细胞是很脆弱的,在陌生的生长环境下即便是培养条件的轻微改变,也可能对细胞产生无法预估的影响。在原代细胞培养过程中,即使保持培养条件完全一致,在传代过程中,细胞的存活质量也是逐渐下降的。 以人脐静脉内皮细胞(HUVEC细胞)为例,HUVEC细胞是研究内皮细胞功能的经典体外细胞模型。在心血管疾病的研究中,主要用于研究内皮细胞功能改变或损伤后其衍生细胞因子对血压的影响;在肿瘤研究中,主要用于实体瘤中血管生成的研究。然而,HUVEC在传代培养过程中,其活力是逐渐衰退的,因此细胞传代zui多不超过10代。 传统的细胞培养主要是通过显微镜下形态学变化以及传代培养周期的变化预估细胞生长生存状态。这种主观判断既无法量化,也无法进行统计学分析。因此,目前对细胞存活质量的判断并没有准确、客观的统一标准,并且对体外培养细胞的存活质量控制往往被科研工作者们“忽略”,从而导致实验结果的不稳定。 体外细胞的有效培养新概念——“细胞质控”。通过细胞活力、细胞凋亡、细胞周期、细胞增殖及DNA损伤五方面对细胞生长生存状态进行的监控。 在这五个方面中,影响zui大的便是细胞活力,下面咱们专门来谈一谈细胞活力如何判断。在体外细胞培养的过程中,细胞总有一些因各种原因而死亡,总细胞中活细胞所占的百分比,即是我们常说的细胞活力。“细胞质控”中zui基础的指标便是细胞活力。常见的流式细胞设备及部分细胞计数仪器都可以对细胞进行计数,还可以提供准确、客观的细胞活力数据,为“细胞质控”提供准确、客观的统计学依据,细胞活力评估并不困难! 只要满足以下两个条件就可以进行细胞活力检测 ü 正常细胞的细胞膜是完整的。Propidium iodide(PI碘化丙啶)是一种核酸染料,常用于细胞凋亡(apoptosis)或细胞坏死(necrosis)的检测和流式细胞仪分析。PI不能通过正常完整的细胞膜
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解析植物缺水的分子机制
作者:德尔塔 日期:2022-04-01
我们都知道,当植物缺水时,它们的叶子会枯萎,它们开始看起来干干的。但是在分子水平上发生了什么呢?zui近,美国索尔克研究所的科学家们,在这个问题的答案上实现了重大飞跃,这对于帮助农作物适应干旱及其他气候相关压力源,是至关重要的。 的研究表明,在面对环境困境时,植物会使用一小组蛋白质作为“指挥员”,来管理它们对压力的复杂响应。这些结果可能有助于开发新的技术,来优化植物中的水分利用。 在分子水平上,植物对一个压力源的反应,是一个非常复杂的过程,涉及到数百个基因。我们现在发现了这一分子事件中的关键指挥者,这可能为帮助植物更好地耐受压力提供了线索,例如面临气候变化的干旱。如果你能控制这些导体中的一个,你就能控制所有它引导的基因。 植物如何很好地应对压力,可能取决于它是生存并茁壮成长,还是屈服于胁迫。正如同人类有肾上腺素这样的激素,帮助我们应对威胁,植物也有一些关键的激素,让它们在其生存的环境中应对压力。其中一种激素是脱落酸(ABA),这种植物激素参与种子发育和水分优化。当水分稀缺或盐度高的时候,根和叶会产生ABA。虽然激素被理解为可影响植物的应激反应,但是科学家们对于“它被释放后总体水平发生了什么事情”还知之甚少。 只有几十个调节蛋白决定着数百乃至数千个基因的表达。通过了解这些主调节因子是什么,以及它们如何起作用,我们可以更好地理解并潜在地调节应激反应。 在他们的研究中,索尔克研究所的科学家们实时跟踪了植物响应ABA的基因活动变化,并识别了这些主蛋白(控制着对一系列外部压力——包括干旱——的响应)中的少量蛋白。该研究团队使用一种技术,映射出这些调节蛋白与DNA结合的位置,定义了协调基因表达的关键因子,从而允许对正在改变的条件产生一个有效的细胞反应。 Salk团队专注于已知响应ABA的候选调节蛋白。他们将参考植物拟南芥的3日龄幼苗暴露于脱落酸,并在固定的时间点上检查基因表达,总共超过60个小时。 在这个过程中,他们
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微生物菌种对水体的影响
作者:德尔塔 日期:2022-04-01
微生物菌种大多与污水菌的大量生长有关。细菌的增殖又与由污水菌生长导致的溶解氧的减少有关系。这些结果是建立在一些假定条件上的。前提条件是水中有机物负荷非常大,以至于水中溶解氧都已经耗尽,并且不能通过曝气进行复氧。在这样的条件下,将会发生一些发酵反应。特别是在一些滞流的水中,水里的沉积物发酵并产生气泡(以甲烷和硫化氢为主),这样的现象很明显。这中间的过程非常复杂,而且不好说明,一般将其分为两个阶段,这两个阶段分别是产酸阶段(无产甲烷菌)和产甲烷阶段(产甲烷菌)。 产酸菌可以代谢掉有机物,并且可以生成少量的低级脂肪酸、低级的醛和酮类。例如,氨基酸—半胱氨酸被分解成乙酸、二氧化碳、氨气、硫化氢和游离的氢。 4C3H7O2NS+8H2→O4CH3COOH+4CO2+4NH3+4H2S+8H 产甲烷菌继续分解其产生的乙酸,生成甲烷、二氧化碳和水。 4CH3 →COOH+8H 5CH4+3CO2+2H2O 关于厌氧菌和产甲烷菌的细节可以参考Crow th er,Hark nes和 Zehnder的著作。 另外,厌氧菌不断地分解有机物。随着有机物的减少,厌氧菌的代谢开始减缓,好氧菌又会重新占据优势地位。 灭菌后的水中仍存在的杀菌剂并不能被立刻分解,除非得到了充足的接种物,才可以被稀释或分解,从而减轻其对细菌的毒性。河水的自净也可以引发菌群结构的变化:一种微生物菌种的数量会随着河水中纤维素类物质的消解而减少。 500mg 86227-47-6 二十烷五烯酸乙酯标准品 500mg 纯化葡萄籽低聚原花青素标准品 5×50mg 112-63-0 亚油酸甲酯标准品 Methyl Linoleate 5×50mg 301-00-8 亚麻酸甲酯标准品 Methyl Linolenate 5.97mg 133107-64-9 赖脯胰岛素标准品(2-8℃) Insulin Lispro 5.25oz 氟化牙粉:单氟磷酸钠(1500 ppm)/二氧化硅标准品 5.25oz " 氟化牙粉:单氟磷酸钠(1000 ppm)/二氧化硅标准品 5 vials 50-56-6 羟可待酮标准品 5 vails 9002-60-2 促
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关于显色培养基,你知道多少?
作者:德尔塔 日期:2022-04-01
显色培养基一般是在分离培养基中加入检测某些菌种的特异性酶底物。该底物由产色基团和微生物可代谢物质组成,通常为无色。但在特异性酶作用下游离出发色基团并显示一定颜色,直接观察菌落颜色即可对菌种做出鉴定。图. HiMedia公司生产的HiCrome™显色培养基Mueller Hinton琼脂鉴定的尿道病原菌。传统方法需48小时。该方法只需24小时。有些显色培养基加有抑制杂菌生长的物质,因而特异性大大提高。显色培养基通常为干粉状,容易保存。加蒸馏水溶解后,也无须高压灭菌,煮沸即可倒平板,划线接种,置适宜温度下培养一定时间即可。培养时间依具体培养基而定,通常是18-24小时,比传统时间显著缩短。HiMedia Laboratories作为世界*的微生物产品生长商,提供有众多以HiCromeTM为开头命名的显色培养基。HiCrome™显色鉴别培养基中含有多种显色剂(目测)或荧光显色剂(紫外灯照射观察)。特定菌种培养过程中分泌不同酶,分解某种显色剂,菌落显示不同颜色。HiMedia显色培养基产品更丰富,而且常用的培养基由植物源性蛋白成分或化学限定成分组成,性能等于或优于动物源性产品,安全性却更高,避开疯牛病风险和转基因植物风险,同时也具有更高的可重复性。近十年兴起了显色培养基。它将微生物的分离与鉴定合二为一,省时省力,操作简便,敏感性和特异性都较高,在培养之前也不需要增菌,因此具有巨大的优势。
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什么是培养基
作者:德尔塔 日期:2022-04-01
告别2017年,我们来到了2018年,首先威正翔禹生物丨缔一生物再次恭祝大家新年快乐!今天小编来同各位实验人一道分享下:培养基的那些事! 培养基(Medium)是供微生物、植物组织和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等。 常见培养基主要分为以下几类:微生物培养基、哺乳动物培养基、昆虫培养基、干细胞培养基、无血清培养基、植物组织培养基。 今天,小编向大家介绍的这款流行的『共增菌培养基』,不但能使多种微生物生长,而且具有以下共同特点: ①成分相对简单,干扰因素小,增菌效果更好 ②无动物源性成分,生产环境更洁净,操作人员更安全 ③期间差异小,实验数据更一致 ④具有ISO9001、ISO13485、WHO-GMP、欧盟、美国FDA等认证证书。 ⑤价格实惠。 ⑥进口手续简单。 它就是植物源性TSB (Soyabean HiVeg Medium ) 货号:MV011 适合大肠杆菌、沙门氏菌、李斯特菌、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、白色念珠菌、巴西曲霉菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌等大多数菌的生长繁殖。 好啦,如果你还想了解更多培养基,咨询。
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培养基的优点
作者:德尔塔 日期:2022-04-01
培养基一般分为群体培养及克隆培养两种方式。群体培养方式是指大量细胞置于同一培养瓶中进行贴壁或悬浮培养。克隆培养方式是指挑选单个细胞或单一集落(克隆)于体外进行培养。常用于细胞克隆化(纯化),建立细胞株,长期传代。以下是我们整理关于培养基的几点优点: 1、能长期传代,保持活性,便于监控检测结构功能和生命活动。 2、培养条件可以人为的控制便于研究细胞代谢、物理、化学、生物因素的影响 3、可用于各种观察和检测手段研究活细胞的变化(变异、分化)。可从细胞水平开展亚细胞结构和代谢分子的表达。 4、研究范围和细胞来源广泛,选择性广。 5、不同代次细胞可长期保存,既可开展同代次不同条件和方法研究,又可观察不同代次的动态变化。 6、耗资少、经济、成本低、可大量培养,利于生物制品的生产。以上就是培养基的优点,我公司现在培养基搞活动啦,需要的客户抓紧时间抢购哦。
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牛血清沉淀是怎么回事?如何避免?
作者:德尔塔 日期:2022-04-01
不少客户在为科研血清产品解冻时出现了沉淀现象,而新手们更是不知该如何是好。上海劲马公司技术员针对客户的问题反映做出总结,如何避免牛血清沉淀? *,解冻牛血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。 第二,勿将血清置于37℃太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中许多较不稳定的成份也会因此受到破坏,从而影响血清的品质。 第三,分装冻存时,须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一。 第四,若必须做热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。 第五,勿直接由-20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。 第六,热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。 我公司牛血清产品价格合理、信誉高、服务好,质量100%保证!如需订购,或咨询了解,欢迎各位朋友们通过致电、在线咨询等方式我司业务员(杨)。
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病原细菌与宿主互作新机制
作者:德尔塔 日期:2022-04-01
研究人员发现细菌六型分泌系统效应蛋白EvpP能通过抑制Ca2+依赖性MAPK-Jnk通路,阻止NLRP3炎症小体的活化,这对于深入理解病原菌与宿主的互作机制、指导抗感染药物的设计有着重要意义。病原细菌与动物和人类宿主的相互作用是一个非常复杂的问题,涉及到病原细菌对宿主的感染和疾病发生,以及宿主对于病原的抑制和清除过程。动物体内固有免疫细胞的细胞质中存在着一种被称为NOD-like receptors(NLRs)的模式识别受体。当NLRs被病原微生物激活后,招募下游ASC接头蛋白和pro-caspase-1,组装成一个蛋白复合物,该蛋白复合物被称为炎症小体(Inflammasome)。在炎症小体内,pro-caspase-1得以活化,导致细胞发生焦亡以及下游促炎性细胞因子IL-1β和IL-18的成熟与分泌,进而清除病原微生物。在这篇文章中,研究人员发现,海洋鱼类病原菌迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)能通过其三型分泌系统(T3SS)激活小鼠巨噬细胞内的NLRC4和NLRP3两种炎症小体,而其六型分泌系统(T6SS)却能够抑制NLRP3炎症小体的激活。研究人员进一步鉴定到了一个T6SS效应物EvpP。该效应蛋白能够被T6SS注射到小鼠巨噬细胞内从而介导T6SS对NLRP3炎症小体激活的抑制作用。此外,EvpP也能抑制由三磷酸腺苷(ATP)、尼日利亚菌素(Nigericin)以及单钠尿酸盐晶体(Monosodium urate crystals)所诱导的NLRP3炎症小体的激活。进一步的分子机制研究发现,EvpP能够抑制小鼠巨噬细胞内钙离子浓度的升高,导致下游Jnk信号通路受阻以及后续ASC接头蛋白无法寡聚化,阻断NLRP3炎症小体的激活。体内感染实验表明,EvpP对NLRP3炎症小体激活的抑制作用能帮助促进迟缓爱德华氏菌的体nei定植和感染。这一工作对于深入理解病原菌与宿主的互作机制、指导抗感染药物的设计有着重要意义。
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酶的载体结合法 交联法 包埋法等固定化方法
作者:德尔塔 日期:2022-04-01
酶的固定化方法不下百种,归纳起来大致可以分为三类,即载体结合法、交联法和包埋法。 (一)载体结合法 载体结合法是指将酶固定到非水溶性载体上的方法。根据固定方式的不同,这种方法又可以分为物理吸附法、离子结合法和共价结合法。物理吸附法是指将酶吸附到固体吸附剂表面的方法,固体吸附剂多为活性炭和多孔玻璃等。离子结合法是指通过离子键将酶结合到具有离子交换基团的非水溶性载体上的方法,载体有离子交换树脂等。共价结合法是指酶和载体以共价键的形式结合在一起的方法,这种方法需要酶和载体都具有氨基、羧基或羟基等官能团。 (二)交联法 交联法是指通过双功能试剂,将酶和酶联结成网状结构的方法。交联法使用的交联剂是戊二醛等水溶性化合物。 (三)包埋法 包埋法是指将酶包裹在多孔的载体中。例如,将酶包裹在聚丙烯酰胺凝胶等高分子凝胶中,或包裹在硝酸纤维素等半透性高分子膜中。前者包埋成格子型,后者包埋成微胶囊型。 与固定化酶技术相配套的是酶生物反应器。一个安装有固定化酶材料的容器就是酶生物反应器,它是把反应物质变成产品的重要生产车间。如葡萄糖溶液缓缓流进装有葡萄糖异构酶的生物反应器,出来的就是比原来溶液甜得多的新液体。 酶联免疫吸附试验 酶联免疫吸附试验(ELISA)是一种用酶标记抗原或抗体的方法,此法是将抗原、抗体免疫反应的特异性和酶的催化作用原理有机地结合起来的技术,可敏感地检测体液中微量的特异性抗体或抗原。
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数据库中存在的突变可能是实验处理造成的
作者:德尔塔 日期:2022-04-01
一项研究指出在DNA样品中发现的一些序列变异实际上可能是由样本处理过程中的损伤造成的,来自NEB(New England Biolabs)的研究人员研发了一种新运算方法评估这些损伤,并建议在样品制备过程中使用DNA修复酶,用以纠正这个问题。 这一研究成果表示,这种损伤比我们预期的更加普遍,这样的错误很可能会混淆真正的低频出现的体细胞突变。 我们大家都知道,从保存时间长的旧样品,或者福尔马林固定,石蜡包埋的组织中提取的DNA样品容易发生断裂和化学修饰,导致产生活体生物中本身并不存在的突变。但是的研究表明,事实上,任何DNA样本都可能出现这种人为诱变的损伤,比如DNA超声处理,即利用声能来搅拌用于扩增和测序的DNA片段,就有可能诱导引发突变的氧化损伤。 这样的突变有时只在少数样品中出现,因此不会造成多大困扰。但是在癌症生物学中,目前越来越强调亚克隆识别,还有在血浆中检测自由肿瘤DNA的突变,这两者在样品中的比率都很小。 NEB的研究人员Laurence Ettwiller等人设计了一种新的运算方法,计算DNA测序样本中这种损伤的程度。这一算法的基础为:超声处理期间DNA发生的氧化损伤会将鸟嘌呤转化为8-氧代鸟嘌呤(8-oxoguanine),这在测序过程中会被当作胸腺嘧啶用。 比对两条互补链的测序片段,这些变化了的鸟嘌呤就会被认为是错配位点,一条链读出胸腺嘧啶,但互补链显示的是胞嘧啶(能与鸟嘌呤配对)。另一方面,自然存在的鸟嘌呤-胸腺嘧啶突变又会出现本身配对的腺嘌呤。因此这一运算方法通过比对*和第二测序结果,评估胸腺嘧啶的错配程度从而确定损伤的程度。 研究人员利用这种被命名为Global Imbalance Value (GIV,整体不平衡值,生物通译)的运算方法,检测了千人基因组和癌症基因组图集项目里的数据,结果发现千人基因组数据中41%都出现了指示损伤的不平衡分数,癌症基因组图集项目更是高达73%。 对此研究人员建议在制备过程中将DNA修复酶混合物加入到DNA样品中,这样能得到稳定的氧化损伤率。
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凋亡检测流式操作参考方法
作者:德尔塔 日期:2022-04-01
流式细胞仪分析: 制备三个质控样本来设定流式细胞仪的荧光补偿和设置十字门的范围: 1、没有染色的细胞; 2、仅用Annexin V-FITC染色的细胞; 3、仅用PI染色的细胞. 经处理过的细胞此时可以在流式细胞仪上分析。按照常规的流式凋亡检测的操作即可。 使用流式细胞仪正确分析Annexin V-FITC/PI双染的细胞前要求仪器的荧光补偿来去除两种染料激发光之间的叠加。因为荧光补偿设置与PMT的电压直接相关,所以不同仪器之间的补偿不同。建议在实验开始阶段分析经Annexin V、PI分别单染的细胞来调整荧光补偿去除光谱重叠。根据未处理细胞空白对照和经Annexin V、PI分别细胞染色后的单染对照的分析设定十字门的位置。 Annexin V-FITC的绿色荧光通过FL1通道检测;PI红色荧光通过FL2或FL3通道检测,建议使用FL3。 参考下面的流式设置: 1. 上样未经染色的细胞,在线性FS-SS点图上显示细胞并设门圈出目标细胞群体。 注意:细胞在经培养后光散射信号会发生变化。要注意使用侧向散射光设门来识别出这些已改变的细胞。 2. 建立LogFL1-LogFL3双参数点图并分析以上光散射图中设门的细胞;保证>98%的细胞处于在X、Y轴Log 1为边界的左下象限中心区域。 3. 检测annexin V-FITC单染的细胞并检查FL1-FL3散点图,保证在左上和右上象限内没有颗粒。如果有颗粒出现在上端象限则说明有荧光渗漏;此时FL1的荧光被FL3 PMT检测到了。为了纠正这种现象,增加FL1漏到FL3荧光的补偿%(这可能在1-5%之间)。如果这个调节没有有效地去除FL3的阳性信号,此时要降低FL3 PMT的电压。 4. 检测PI单染的细胞并检查FL1-FL3散点图,保证在右上和右下象限内没有颗粒。如果有颗粒出现在右侧象限则说明有荧光渗漏;此时PI的荧光被FL1 PMT检测到了。为了纠正这种现象,增加FL3漏到FL1荧光的补偿%(这可能在15-25%之间)。如果这个调节没有有效地去除FL1的阳性信号,此时要降低FL1 PMT的电压。 注:如果在以上调节补偿过程中更改了PMT的电压
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青海发光杆菌的分离培养法
作者:德尔塔 日期:2022-04-01
青海发光杆菌的分离,可分为孢子分离法、组织分离法以及基内菌丝分离等。 1.孢子分离法 孢子分离法,是用食用菌的有性孢子或无性孢子萌发成菌丝,培养成菌种的方法。这种菌种生活力较强,但孢子个体之间有差异,且自然分化现象较严重,变异大,需经出菇试验才能在生产上应用。 (l)单孢分离法:是每次或每支试管只取一个担孢子, 让它萌发成菌丝体来获得纯菌种的方法。蘑菇和草菇用单孢分离得到的菌丝,有结实能力,可采用此法分离生产纯菌种。单孢分离生产上较少采用,而且技术复杂,一般采用多孢分离法。 (2)多孢分离法:就是把许多孢子接种在同一培养基上,让它们萌发、自由交配来获得食用菌纯菌种的一种方法。具体操作方法,有以下几种: ①种菇孢子弹射法:选择个体健壮、朵形圆正,无病虫害、出菇均匀、高产稳产,适应性强的八九分成熟的种菇,切去大部分,青海发光杆菌柄用无菌水冲洗数遍后再用已灭菌的纱布或脱脂棉、滤纸吸干表面水分。在接种箱或无菌室内,把种菇的菌褶朝下用铁丝倒挂在玻璃漏斗下面,漏斗倒盖在培养皿上面;上端小孔用棉花塞住。培养皿放在一个铺有纱布的搪瓷盘上,静置12~20小时,菌褶上的孢子就会散落在培养皿内。形成一层粉末状孢子印(平菇极淡紫色,蘑菇、草菇 为褐色,香菇、金针菇孢子印白色)。用接种针沾取少量孢子在试管中的琼脂外面或培养皿上划线接种。待孢子萌发,生成菌落时,选孢子萌发早、长势好的菌落进行试管培养。 V5 tag标签IgG 小鼠克拉拉蛋白(CC16) VEGFIgG 小鼠可溶性血小板内皮粘附分子1(sPECAM-1/sCD31) v-maf 肌腱膜纤维肉瘤癌基因同源物A(禽流感)IgG 小鼠可溶性血管内皮蛋白C受体(sEPCR) VSV-G tag标签IgG 小鼠可溶性瘦素受体(sLR) WEE1蛋白IgG 小鼠可溶性肌球蛋白重链2(sMHC-2) Wnt信号抑制因子1IgG 小鼠可溶性肌球蛋白重链1(sMHC-1) WRCH1IgG 小鼠可溶性核因子κB受体活化因子配基(sRANKL) XIAP相关因子1
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BI北美热灭活胚胎干细胞胎牛血清04-222
作者:德尔塔 日期:2022-04-01
舜冉(上海)生物科技有限公司销售胎牛血清,整理。 *类,别,是专门用于干细胞的特级胎牛血清 BI北美热灭活胚胎干细胞胎牛血清04-222 1、的特级胎牛血清 目前,性能的血清,还是要说说的特级胎牛血清,货号是SH30070.03,它是的“招牌菜”。 特级胎牛血清(Defined FBS),货号SH30070,是世界上*经过40纳米过滤的*胎牛血清,的促细胞生长作用及产品稳定性。内毒素含量≤10EU/ml,血红蛋白含量≤10mg/dl。 此血清可以广泛用于各种细胞培养,包含任何干细胞系的培养。 因为美国那边有疯牛病,无法进口。实际上,40nm的过滤,已经将全部的病毒、支原体处理掉,同时,是用于科研级别的,洁净程度非常高。不让进口,只是我们国家为了保护本国畜牧业的一个手段,针对牛肉方面,而胎牛血清是受到殃及而已。 BI北美热灭活胚胎干细胞胎牛血清04-222 2、的特级胎牛血清 稍次一点的是公司在美国原装生产的特级胎牛血清,这款血清,货号是16000-044,是100nm过滤3次,内毒素和血红蛋白含量都可以与的SH30070.03相媲美。也可以用于培养大部分的干细胞系。同样是美国来源,所以渠道特殊。 BI北美热灭活胚胎干细胞胎牛血清04-222 3.TCB的特级胎牛血清 TCB(Tissue Culture Biologicals)公司作为一家生物行业类的供应商,成立于1978年,大部分血清的采集和加工都在加利福尼亚。每一批的原材料都经过严格筛选,所有的产品都在FDA认证的cGMP车间进行! TCB 公司一贯重视产品质量,为客户提供zui的血清及相关产品,经过多年的发展,公司产品种类丰富,各种品质的血清和培养基能满足所有实验室的需求。 TCB 公司经过美国食品药品监督管理局(FDA)和美国农业部(USDA)的授权认证。与人相关的产品符合疾控中心(CDC)的相关法规。 TCB是美国农业部(USDA)动植物检疫局(APHIS)兽医处(VS)下属的国家动物进出口中心(NCIE)的检疫认可单位,允许可控原材料、组织、细胞等的进出口贸易! 4. Bioind特优级胎牛血清 血源来自北美和澳大利亚B
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关于细胞转染,你知道多少
作者:德尔塔 日期:2022-04-01
细胞转染定义:将外源分子如DNA RNA等导入真核细胞的技术。 瞬时转染:外源DNA/RNA不整合到宿主染色体中,因此一个宿主细胞可存在多个拷贝数,产生高水平的表达,但通常只持续几天,多用于启动子和其他调控元件的分析。一般来说,超螺旋质粒DNA转染效率较高,在转染后24-72h内分析结果,常常用到一些报告系统如荧光蛋白,β半乳糖苷酶等来帮助检测。 稳定转染:外源DNA既可以整合到宿主染色体中,也可能作为一种游离体存在。尽管线性DNA比超螺旋DNA转入量低但整合率高。外源DNA整合到染色体中概率很小,通常需要一些选择性标记反复筛选得到稳定转染的同源细胞系。 方法及特点: 化学法:磷酸钙法、DEAE-右旋糖苷法、阳离子脂质体法 物理法:电穿孔法、显微注射法、biolistic颗粒传递法 病毒介导法:逆转录病毒、腺病毒 阳离子脂质体法:带正电的脂质体与核酸带负电的磷酸基团形成复合物被细胞内吞。过程如下图: 特点:简单通用,适用性广,转染效率高,重复性好,但转染时需除血清,转染效率随细胞类型变化大。 脂质体法由于脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会远大于悬浮细胞,所以贴壁比悬浮转染效率要高。悬浮细胞建议使用电穿孔法。 电穿孔法:利用高压电脉冲对细胞膜的干扰,使其形成利于核酸进入的微孔。 特点:需要特定仪器,适用性广,除了质粒外,还可转染大的基因组,细胞致死率高。 逆转录病毒(RNA):通过病毒中膜糖蛋白和宿主细胞表面的受体相互作用进入宿主细胞,之后反转录酶启动合成DNA并随机整合到宿主基因组中。 特点:稳定转染,可用于难转染的细胞、原代细胞,体内细胞等,但携带基因不能太大。 腺病毒(双链DNA):先和细胞表面的受体结合,继而在αV整合素介导下被细胞内吞。 特点:可用于难转染的细胞。 转染步骤:DAY-1 铺板 DAY 0 DNA分子与复合物混合,转染细胞 After