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您还不知道这些,实验高手来帮您

您还不知道这些,实验高手来帮您

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

elisa试剂盒实验有很多的注意事项,如果没有处理好,也是影响实验结果的重要因素之一。上海劲马带您揭开elisa试剂盒的神秘面纱。 1.试剂准备:所有试剂都必须在使用前达到室温,使用后请立即按照说明书要求保存试剂。实验操作中请使用一次性的吸头,避免交叉污染。 2.加样:加样或加试剂时,请注意在吸取标本 / 标准品,酶结合物或底物时,*个孔与zui后一个孔加样之间的时间间隔如果太大,将会导致不同的 “预孵育"时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)控制在10分钟内,如标本数量多,推荐使用多道移液器加样。 3.孵育:为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜,以避免液体蒸发;洗板后应尽快进行下步操作,任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。 4.洗涤:洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干,勿将滤纸直接放入反应孔中吸水,同时要消除板底残留的液体和手指印,避免影响zui后的酶标仪读数。 5.试剂配制:Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理,以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用,并使用相应的稀释液配制,不能混淆。请配置标准品及工作液,尽量不要微量配置(如吸取检测溶液A时,一次不要小于10μl),以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差;请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。 6.反应时间的控制:加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如,每隔10分钟),如颜色较深,请提前加入终止液终止反应,避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。 7.底物:底物请避光保存,在储存和温育时避免强光直接照射。建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请zui后乘以稀释倍数。     我司是一家专业

ELISA样本值低于空白值的问题解决方案

ELISA样本值低于空白值的问题解决方案

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

在ELISA实验过程中,样本值低于空白值是一个经常性的问题。     当样本值较低接近试剂盒的灵敏度就容易发生样本值低于空白值的现象,特别是在血清和血浆样本的检测。     究其原因,问题主要在于两个方面,一方面是误差,另一方面是基质效应。下面将逐个分析不同影响因素的原理、和解决方案。 一、关于误差 误差可分为三类,系统误差、随机误差和过失误差。在这三类误差中,系统误差对样本值和空白值之间的差异没有影响。ELISA样本值低于空白值在误差方面主要来源于随机误差和过失误差。 1、 随机误差 无法控制的变因,使测量值产生随机分布的误差,服从统计学上的正态分布。从统计学上来看,测量值有99%的置信限在±3SD之间,如果CV值是20%,随机误差的边界就是±60%,也就是说在CV值20%的状况下,样本值低于空白值60%之内,有可能是随机误差的影响,特别是空白值只有一个值时。 随机误差一般是不可消除的,只能通过多次测量获得的均值尽量逼近真值。 降低随机误差的解决方案如下: 方案1:增加空白值的重复数量,一般认为空白值重复10次,测量均值接近真值。 方案2:提高实验技能,也能够有效降低随机误差的影响。如果CV值在5%,样本值趋近于零时,在统计上样本值将不会低于空白值15%。 2、 过失误差 过失误差主要是由于测量者的疏忽,犯了不应有的错误造成的。过失误差是可以避免的。针对于ELISA样本值低于空白值的问题,过失误差产生的原因多数来源于空白孔HRP的重复加样或污染或洗涤不干净,造成空白值偏高,相对比来说,样本值低于空白值。 解决方案就是重复实验,规范操作。 二、关于基质效应   分析中,基质指的是样本中被分析物之外的组分,基质常常对分析物的分析过程有显著的干扰,并影响分析结果的准确性,这些影响和干扰被称为基质效应。   ELISA试剂盒在开发过程中,标准品不能采用人或动物血清、血浆作为标准曲线的稀释液,只能采用其模拟物。模拟物与被测样本在蛋白丰度、复杂性、pH等因素都会存在差异。

实验仪器的保护工作您做好了吗?

实验仪器的保护工作您做好了吗?

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件.所以在实验仪器这一块也是非常重要的。精密检测仪器的性能、可靠性、测量结果和寿命对实验结果都有很大影响。所以大家需要注意仪器工作环境要求: 防尘、防潮、防热、防震、防蚀。仪器的接地    接地的问题除对仪器的性能、可靠性有影响外,还对使用者的人身安全关系重大,因此所有接入市电电网的仪器必须接可靠的地线。电源电压    由于市电电压波动比较大,常常超出要求的范围,为确保供电电源的稳定,必须配用交流稳压电源。要求高的仪器单独配备稳压电源。另外应注意,插头中的电线连接应良好,使用时切莫把插孔位置搞错,导致仪器损坏。        温馨提示:加外所有仪器在关机停用时,要关断总机电源,并拔下电源插头,以确保安全。    上海德尔塔生物科技有限公司主营:Elisa试剂盒,人Elisa试剂盒,大鼠Elisa试剂盒,小鼠Elisa试剂盒,生物试剂,血清,抗体,培养基,标准品,国产血清、GIBCO胎牛血清等。种属齐全,价格优惠。期待您的与合作!

实验秘籍:elisa试剂盒的参考标准

实验秘籍:elisa试剂盒的参考标准

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

我们每做一个实验都会涉及到参考标准问题,所测的指标不同,参考标准也是不同的。针对这个问题,我司技术人员整理出7项ELISA试剂盒参考标准! *、标准曲线     1.定量方法:标准曲线至少由5个浓度组成,测定次数不少于5次,以确定工作浓度范围和IC50范围。     2.定性方法:工作浓度范围通过阴性、临界值浓度和阳性的样品测定来确定,每个浓度重复不少于5次,浓度与响应值之间应有一定的关系。 第二、检测限和定量限     1.检测限:20份空白样品测定均值加3倍标准差。     2.定量限:应大于标准曲线中zui低浓度点。对于定量方法,应对该浓度样品至少测定6次进行验证,而不能通过外延法推断。 第三、临界值(cut-off值)的确定     对于有zui高残留限量的药物,检测方法的临界值为20份添加MRL浓度的样品重复3次测定的均值减去1.64倍标准差,即95%置信限处。     对于禁用药物,检测方法的临界值为定量限,该值应达到公认的指标。 第四、精密度和准确度     对于有zui高残留限量的药物,添加浓度为MRL及MRL上下各一个浓度;对于禁用药物,添加浓度为定量限和2倍定量限,每个添加浓度至少测定5个平行样,并至少进行3批实验(不同检测日期,不同标准曲线,不同批次试剂盒)。     1.准确度:回收率范围大于40%或符合相应检测标准的要求。     2.精密度:以变异系数表示。     批内变异系数:每批平行样之间的变异系数小于或等于25%,对于禁用药物小于或等于30%.     批间变异系数:所有样品之间的变异系数值小于或等于30%,对于禁用药物小于或等于40%.     定性方法:阴性和阳性样品各测定不少于50份,确定假阳性率和假阴性率。 第五、交叉反应     试剂盒与待检药物类似物、代谢物或共同存在的药物测定交叉反应率。 第六、保存期     保存期通过保存条件的稳定性试验结果确定。 第七、复核试验     1.定量方法:检测限、IC50以及至少两个添加浓度的准确度和精密度,并与理化方法(或与具代表性进口试剂盒)比较。     2.定性

为什么高剂量的维生素C能杀死癌细胞?

为什么高剂量的维生素C能杀死癌细胞?

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

维生素C作为一种癌症**方法,有着不完整的历史,但是zui近,美国爱荷华大学的研究人员认为,这是因为它经常是通过一种必定会失败的方式使用的。延伸阅读:Science佐证诺奖得主观点:维生素C可抗癌;维生素C有助提升卵巢癌疗效;广州生物院阐明维生素C对肾癌细胞选择性杀伤作用产生的机理。     大多数维生素C**包括口服药物。然而,爱荷华大学的科学家已经表明,通过静脉注射给予维生素C,并绕过正常肠道代谢和排泄途径,可产生的血液水平高于口服摄入的100到500倍。正是这种超高浓度的血液,是维生素C攻击癌细胞的能力的关键。     爱荷华大学氧化还原生物学专家Garry Buettner早期的工作发现,在这种非常高的水平(在毫摩尔范围内)上,维生素C可选择性地杀死癌细胞,但是试管内和小鼠体内的正常细胞却能幸免。爱荷华大学医院和诊所的医生正在胰腺癌和肺癌的临床试验中测试该方法,该方法将高剂量、静脉注射维生素C与标准化疗或放疗相结合。早期的1期临床试验表明,这种**是安全的和耐受性良好的,并暗示该疗法可改善患者的预后结果。目前,更大的试验旨在确定该**是否能提高生存率。     该研究表明,维生素C容易分解,产生过氧化氢,这种所谓的活性氧可以破坏组织和DNA.。这项研究还表明,肿瘤细胞比正常细胞更难清除受损的过氧化氢。     在本文中,我们证明,癌细胞去除过氧化氢的效率要比正常细胞低得多。因此,癌细胞更容易因高量的过氧化氢而受损和死亡。这解释了在我们的临床试验中使用的非常高含量的维生素C,为何不影响正常组织,但对肿瘤组织却有破坏作用? 正常细胞有几种方法来消除过氧化氢,使其保持在非常低的水平,所以它不会造成损害。这项新的研究表明,过氧化氢酶是清除分解维生素C所产生的过氧化氢的主要途径。研究人员发现,具有较少量的过氧化氢酶活性的细胞,当它们接触大量的维生素C时,更容易受到损伤和死亡的影响。     这个基本的信息可以帮助我们确定,哪些癌症和哪些**可以通过添加

新城疫单抗ELISA试剂盒的研制及其初步应用

新城疫单抗ELISA试剂盒的研制及其初步应用

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

在单抗夹心ELISA和单抗PEG—ELISA的基础上建立了快速诊断新城疫(ND)的单抗ELISA试剂盒。以0.5~2μg/ml的M22单抗包板,在选择的*工作条件下,对提纯的新城疾病毒(NDV)的zui小检出量为2.5~5ng/ml病毒蛋白;NDV阳性血清对本试剂盒有特异性阻断作用,与鸡传染性支气管炎病毒(IBV)、鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)、鸡痘病毒(FPV)、减蛋综合征病毒(EDS—76)、鸡马立克氏病病毒(MDV)、大肠杆菌(E.coli)、沙门氏菌(Salmonella)交叉反应的阴性结果及双盲考核试验的结果均表明它对NDV具有特异性;试剂盒批内与批间重复试验变异系数小于6%;酶标抗体冻干前后活性未发生变化,以20%的脱脂乳为冻干保护剂冻干后工作浓度与物理性状*;包被单抗后的酶标板经吸干、密封后,在4℃可保存6个月,-20℃保存一年以上稳定性未发生变化;冻干后的酶标抗体在4℃可保存300天以上,0℃以下1年活性未见下降;试剂盒在4℃可保存6个月,0℃以下保存1年。用该试剂盒检测从疑有NDV强毒感染的鸡群中采集泄殖腔棉林样品3024份,共检出阳性1240份;从临床有典型ND病变的鸡群中采集样?

如何使用ELISA试剂盒方法说明

如何使用ELISA试剂盒方法说明

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

如何使用ELISA试剂盒方法说明1、血清:操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。2、血浆:EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液:1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液。5、保存:如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

培养基的优点

培养基的优点

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

培养基一般分为群体培养及克隆培养两种方式。群体培养方式是指大量细胞置于同一培养瓶中进行贴壁或悬浮培养。克隆培养方式是指挑选单个细胞或单一集落(克隆)于体外进行培养。常用于细胞克隆化(纯化),建立细胞株,长期传代。以下是我们整理关于培养基的几点优点: 1、能长期传代,保持活性,便于监控检测结构功能和生命活动。 2、培养条件可以人为的控制便于研究细胞代谢、物理、化学、生物因素的影响 3、可用于各种观察和检测手段研究活细胞的变化(变异、分化)。可从细胞水平开展亚细胞结构和代谢分子的表达。 4、研究范围和细胞来源广泛,选择性广。 5、不同代次细胞可长期保存,既可开展同代次不同条件和方法研究,又可观察不同代次的动态变化。 6、耗资少、经济、成本低、可大量培养,利于生物制品的生产。     以上就是培养基的优点,我公司现在培养基搞活动啦,需要的客户抓紧时间抢购哦。。。

入了ELISA的门 这些技术点你得知道

入了ELISA的门 这些技术点你得知道

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

为了得到更好的实验结果,一些ELISA试剂盒实验新手们还需多加了解技术内容,公司每周都会为您精心整理出重点技术要领,能够熟练的掌握好这些之后再应用到实验里面就会简单的多。今天的主要内容是入了ELISA的门,这些技术点你得知道。      样本加样方法      1、细胞上清:前处理必须是细胞离心去除,每孔直接加100μl即可。如果浓度太高需稀释时,用标准品稀释液直接稀释。      2、脑脊液:前处理必须是细胞离心去除,每孔直接加100μl即可。如果浓度太高需稀释时,用标准品稀释液直接稀释。      3、血清血浆:请加入50ul样本分析缓冲液后加50ul标本,如稀释量大,请将样本与样本分析缓冲液等量加入,不足部分用标准品稀释液补充至100ul。      A.血清标本应是自然凝固后,取上清,避免在冰箱中凝固血液;      B.血浆标本,推荐用EDTA的方法收集若待测样本不能及时检测,标本收集后请分装,冻存于-20℃,避免反复冻融。      C.血清标本不应添加任何防腐剂或抗凝剂;      D.标本应清澈透明,检测前样本中如有悬浮物应通过离心去除。      E.请勿使用溶血,高血脂或污染的标本检测,否则结果将不准确。      4、组织匀浆液的样本,要制备过程中需要在缓冲液中加入蛋白酶抑制剂,防止蛋白成份被内源性蛋白酶降解,造成检测结果的值偏低。      因组织匀浆液的样本蛋白种类多,含量丰富,实验参照血清血浆标本的处理方法进行,否则就会影响实验结果。具体是加入50ul样本分析缓冲液后加50ul标本,需稀释时,请将样本与样本分析缓冲液等量加入,不足部分用标准品稀释液补充至100ul。      因为目标蛋白不同,可能造成降解的蛋白类型可能不一样,如果实验前通过文献确定用哪种蛋白酶抑制剂,有针对性加入,可节省抑制剂。如果查不到相关文献,可采用组合抑制的办法确保蛋白不易被降解。

ELIS实验结果常见问题及解决方法

ELIS实验结果常见问题及解决方法

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

elisa试剂盒实验的zui后步骤就是实验结果的判定,这一步骤可谓是实验中zui关键的一步。在这环节中也难免会出现一些这样那样的问题。今天的文章中将为大家分享ELISA实验结果判断的一些常见问题及解决方法!一、Elisa结果判断常见问题    1.包括阴性对照孔在内,各孔显色普遍偏深;    2.包括阳性对照在内,各孔均无显色;    3.阳性对照不显色,而其它样本显色正常;    4.有些标本显色不深,判断阳性困难。二、解决方案     1.可能是洗涤不充分;加样过量;温育时间过长温度过高;按说明书重新操作。如无改善,可与生产厂家;    2.可能是漏加样本或酶液;温育时间过短温度过低;试剂保存不当活性下降;按说明书重新操作。如无改善,可与生产厂家;    3.阳性对照漏加、错加或失效。重新操作。如无改善,可与厂家,索要对照品;    4.重新操作。使用酶标仪,测定光吸收度,按P/N值标准判断。    上海沪鼎具有完善的实验技术开发平台,成熟的抗原、抗体研发系统,熟练掌握各种酶联技术,结合公司的研发团队,可以有效的保证公司产品强的稳定性和高的准确性,同时又具有zui有竞争力的价格。 公司目前可以提供生化试剂、分子生物学试剂及试剂盒,各种抗体及免疫学试剂盒、实验耗材等多门类上万种产品,产品涉及分子生物学、细胞生物学、免疫学等生命科学的各个领域。欢迎新老客户咨询选购自己心仪产品,我们将竭诚为您服务!

肠道微生物ELISA试剂盒调控外周淋巴结发育

肠道微生物ELISA试剂盒调控外周淋巴结发育

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

ELISA试剂盒进口大鼠血液中的淋巴细胞通过高内皮静脉(high endothelialvenules,HEVs)进入淋巴结中。这一过程首先是由一些地址素(addressin)的引导,其中包括a4b7的受体MadCAM-1以及CD62L的受体PNAd。在刚出生的小鼠中,MAdCAM-1的表达量较高,随着时间的推移,大约两周以后,PNAd的表达量占据主导地位。这一上调引导了基于L-选择素(L-selectin)的成体淋巴细胞归巢的效应。有报道指出,一类表达趋化因子受体CCR7的树突状细胞(DC)能够进入次级淋巴器官,进而促进高内皮静脉(HEV)的发育,但这类DC的活动是否受到肠道微生物的调节仍未可知。在SPF小鼠中,肠道相关淋巴结的发育受到一系列转录因子的调控,包括ID2, IRF8, Batf3, IRF4。同时也受到 Notch2-依赖型RALDH+&CD11b+CD103+DC的调控。这类DC十分特殊,有报道指出这类DC能够将常规CD4+T细胞转变为诱导型Treg细胞,以及诱导淋巴细胞的归巢行为。因此,这类细胞很可能受到肠道微生物的调节,进而影响淋巴结的发育。对此,来自清华大学医学院免疫学研究所的石彦教授课题组利用无菌培养小鼠模型与基因表达谱分析手段,证明了肠道微生物对RALDH+DC以及淋巴结发育的影响。相关结果发表在zui近一期的《Immunity》杂志上。首先,为了证明无菌小鼠中外周淋巴结的发育缺陷现象是由淋巴细胞归巢能力下降导致的,作者们利用CFSE标记了一定量的淋巴结细胞并通过尾静脉注射的方式分别导入SPF小鼠与GF(即无菌)小鼠体内。实验结束24小时之后,在SPF小鼠以及GF的腹股沟淋巴结,肠系膜淋巴结以及脾脏中都检测到了CFSE阳性的细胞群体。但是,相比于脾脏,GF小鼠的腹股沟淋巴结以及肠系膜淋巴结中的CFSE阳性细胞数量明显低于SPF小鼠。进一步的细胞特征分析也表明,CD4+T细胞,CD8+ T细胞,以及CD19+B细胞数量都明显减少。同时,作者发现五周左右的GF小鼠腹股沟淋巴结HEV中MAdCAM-1的表达量仍未下调,而PNAd的表达量也未明显上调,GF小鼠的淋巴结大小也明显低于SPF小鼠。通过将S

从费氏弧菌发光杆菌提取质粒向大肠杆菌DH10B电转化方法

从费氏弧菌发光杆菌提取质粒向大肠杆菌DH10B电转化方法

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

①费氏弧菌发光杆菌制做选择平板LB+25 mg/l Kan。②核对好要转化的质粒dna,在15 ml Falcon tube 和cuvette(电转化用的石英样品槽,两面磨光,两面磨砂)标好质粒名称。将Falcon tube、cuvette、质粒DNA、SOC培养基按顺序对应置于冰上预冷或解冻。转化前将大肠杆菌(45 µl aliquot of E. coli DH10B Cells)置于冰上解冻(约3-5 min)。一、将冰桶移置超净工作台上,取200-1000 µl、20-100 µl、0.5-10 µl 移液器(Fubbouoette)到超净工作台上。先用0.5-10 µl移液器取0.5-2 µl质粒DNA到大肠杆菌细胞内,再用调节到50 µl 的(20-100 µl移液器)上下吹吸数次。在冰上放置2 min。二、用调节到50 µl 的(20-100 µl移液器)将质粒DNA和大肠杆菌细胞混合液转移到电转化石英样品槽底凹槽的中央,在桌面上轻击数次使之分散。在冰上放置1-2 min。三、先用纸将样品槽擦拭一下,移到2.5 kV电脉冲发生器上,同时用1000 µl移液器吸好SOC培养基,约4.5-5 sec后鸣叫声停后,立即加入样品槽内(吹吸一次或不吹吸)。四、将细胞悬浮液从样品槽中取出并加入15 ml Falcon tube,在37℃,200/min振荡培养1 h。在样品槽中加满自来水,以便清洗。五、在此期间,可制做选择平板LB+25 mg/l Kan。六、将培养后的转化大肠杆菌悬液在超净工作台上全部倒入1.5 ml微量离心管,13000 rpm离心30 s(或到达13000 rpm后离心15 s)。用费氏弧菌发光杆菌1000 µl移液器取出大部分的上清,再用50 µl移液器全部弃掉剩余的上清,之后吸取100 µl lb培养基重新悬浮沉淀,上下吹吸数次到均匀。七、对三角铁焚烧灭菌,标记选择平板,取30 µl LB培养基加入平板中心,再取重新悬浮后的转化大肠杆菌30 µl加入平板中心。待三角铁冷却后,在平板上研磨,至无可见液体为止。注意三角铁一定要冷却,或先在无菌液的平板上研磨加速冷却。八、将选择平板在37℃下培养,1天后观察转化效果。九、清洗电转化样品槽。先用自来水吸瓶冲洗十多次,之后加入酒精,放置1 h,之后用蒸馏水冲

ELISA试剂盒的实验标准

ELISA试剂盒的实验标准

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

抗原elisa试剂盒实验标准以及质量平衡中一般有3次加样步聚,即加标本,加酶结合物,加底物。加样时应将所加物加在ELISA试剂盒板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可溅出,不可产生气泡。 加标本一般用微量加样器,按规定的量加入板孔中。每次加标本应更换吸嘴,以免发生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加样。 相关产品:间充质干细胞培养基    英文名称:    MSCM-acf-prf    规格:     间充质干细胞成骨细胞分化培养基    英文名称:    MODM-prf    规格:    500 ml 间充质干细胞脂肪细胞分化培养基    英文名称:    MADM-prf    规格:    500 ml 间充质干细胞软骨细胞分化培养基    英文名称:    MCDM-prf    规格:    500 ml 在抗原elisa试剂盒中一般有两次抗原抗体反应,即加标本和加酶结合物后。抗原抗体反应的完成需要有一定的温度和时间,这一保温过程称为温育(incubation),有人称之为孵育,在ELISA试剂盒中似不恰当,属固相免疫测定,抗原、抗体的结合只在固相表面上发生。以抗体包被的夹心法为例,加入板孔中的标本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗结合的机会,只有zui贴近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体接触。这是一个逐,因此需经扩散才能达到反应的终点。 乳腺上皮细胞培养基    英文名称:    MEpiCM-prf    规格:    500 ml 内皮细胞生长添加物    英文名称:    ECGS    规格:    5 ml 平滑肌细胞生长添加物    英文名称:    SMCGS    规格:    5 ml 平滑肌细胞生长添加物-无血清    英文名称:    SMCGS-sf    规格:    5 ml 周细胞生长添加物    英文名称:    PGS    规格:    5 ml 脑膜细胞生长添加物    英文名称:    MenCGS    规格:    5 ml 神经元生长添加物    英文名称:    NGS    规格:    5 ml 少突胶质前体细胞生长添加物    英文名称:    OPCGS    规格:    5 ml 抗原elisa试剂盒

鸭源性核酸PCR-荧光探针试剂盒技术要点

鸭源性核酸PCR-荧光探针试剂盒技术要点

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

1.鸭源性核酸PCR-荧光探针试剂盒加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。 2.合理安排检测量,以免反应板过多造成洗板等待时间长。 3.吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。 4.要尽量做双孔实验,这样才既能保证数据的准确性,又能反映出试剂盒的精密度。 5.样品稀释液应用加液器加注,并经常校对其准确性。 6.为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。 7.未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。辣根过氧化物酶标记抗人IgG工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的辣根过氧化物酶标记抗人IgG工作液。 8.ELISA试剂盒实验中,加样后及时放人孵箱,标本较多时,要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间,防止孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗彻底。 9.剩余样品及废弃物应经121℃高压蒸汽灭菌30分钟,或用5.0g/L次氯酸钠等消毒剂处理30分钟后废弃。 10.鸭源性核酸PCR-荧光探针试剂盒洗涤时各孔均需加满液体,防止孔口有游离酶不能洗净。 11.每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是zui后加底物溶液及2N H2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。 12.手工洗板时每次加入洗涤液后。应静置15~30s,不要将一个酶标孑L中的洗涤液溅入另一酶标孔中,防止交叉污染。甩去洗涤液后将酶标板放在毛巾或吸水纸上拍干。 13.对样本的结果有疑问时需要使用其他检测方法进行验证。 14.没有去离子水或双蒸水时,可以使用娃哈哈纯净水配制溶液,切勿使用自来水。 15.在使用微量加样器时,吸取不同瓶子中液体后要更换枪头,即使吸取标准品溶液。 16.吸取液体时速度不易太快,以免产生气泡,人ELISA试剂盒吸取的量不够准确。 17.鸭源性核酸PCR-荧光探针试剂盒吸取液体时要选用量程和需要量接近的微量加样器吸,减少误差。

正确检测Elisa试剂盒的几个步骤

正确检测Elisa试剂盒的几个步骤

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

进口elisa酶联免疫试剂盒方法在现行是非常流行的一种简单,有效,安全的检测方法,但是想要正确检测Elisa试剂盒,这些步骤必须有!跟随小编一起来了解下我司今天讲解的文章吧! 一、检测标本的收集和保存       用于ELISA测定的检测标本zui为常用的是血清(浆),有时因为特定的检测目的,也用到唾液、脑脊液、尿液、粪便等标本。目前检测上使用血清标本测定的标志物一般有传染性病原体的抗原和抗体、肿瘤标志物、激素、特种蛋白、细胞因子和**药物等。对用于激素和**药物测定的血清标本的收集,要注意收集时间甚或体位有可能会对测定结果产生影响。如可的松在早晨4~6点之间,会有一峰值出现:生长激素、促黄体激素(LH)和促卵泡激素(FSH)均以阵发性方式释放,因此,在测定此类激素时,有必要在密切相连的时间间隔内采取数份血样本,以其中间值为测定值。又如当从卧位变为站立位时,血清中肾素活性将出现明显增高。再如**药物的检测,应根据药代动力学选择服药后的zui适时间抽血检测。用于传染性病原体的抗原和抗体、肿瘤标志物和特种蛋白等的检测的血清标本的收集则没有时间和体位方面的影响,只是在处理和保存方面要考虑以下几个方面: (1)要注意避免出现严重溶血。血红蛋白中含有血红素基团,其有类似过氧化物的活性,因此,在以HRP为标记酶的ELISA测定中,如血清标本中血红蛋白浓度较高,则其就很容易在温育过程中吸附于固相,从而与后面加入的HRP底物反应显色。 (2)样本的采集及血清分离中要注意尽量避免细菌污染,一则细菌的生长,其所分泌的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白产生分解作用;二则一些细菌的内源性酶如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶本身会对用相应酶作标记的测定方法产生非特异性干扰。 (3)血清标本如是以无菌操作分离,则可以在2~8℃下保存一周,如为有菌操作,则建议冰冻保存。样本的长时间保存,应在-70℃以下。 (4)冰冻保存的血清标本须注意避免因停电等造成的反复冻融。标本的反复冻融所产生