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纳升注射器的疑难处理
作者:德尔塔 日期:2022-05-04
纳升2010注射器是一个直接采用活塞位移技术的微处理器控制的注射系统,金属环安装盒见下图。玻璃毛细管装入白色的塑料环垫内,当金属环被旋紧时,两个黑色的橡皮垫圈被压缩并将玻璃毛细管夹住在固定位置。 安装完毕的纳升注射器侧面见下图。 因为活塞被压缩,这样进入玻璃毛细管射出滴头中的液体。最终因为活塞的直径与玻璃毛细管一致,不可能射出更多的液体。如果活塞继续压滴头的尖端,滴头可能会爆裂或导致活塞从白色的塑料环垫内脱出,如果发生这样的事情将不可避免地导致纳升注射器2010漏液。
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Mesenchymal progenitor cells derived from human muscle
作者:德尔塔 日期:2022-05-04
Mesenchymal progenitor cells derived from human muscle Harvesting traumatized muscle derived mesenchymal progenitor cells (MPCs) 1. The muscle tissue was dissected without contaminating by granulation, adipose or fibrous tissues. 2. The excised muscle was transferred into a dish containing primary cell culture system and minced until the slurry could easily passed through the tip of a 25 mL serological pipette. 3. The minced muscle tissue was then transferred to a 50 mL conical tube containing primary cell culture system and 0.5 mg/mL Collagenase Type 2, and incubated at 37°C for 2 hours with gentle agitation. 4. At the end of the digestion, the suspension was vortexed briefly and passed through a 5 mL serological pipette to mechanically break down any tissue remnants. 5. The digestate was strained through a 40 μm sieve into a new 50 mL conical tube and centrifuged for 5 minutes at 200g. 6. After aspirating the supernate, the pellet was resuspended in primary cell culture system supplemented with 10% fetal bovine serum (FBS) and 5 units/mL of penicillin, streptomycin and fungizone (PSF). 7. The cell suspension was plated in a T175 tissue culture flask and incubated for 2 hours at 37°C, and then the cells were washed extensively with Hank’s Buffered Saline Solution (HBSS) to remove any cells that did not adhere to the tissue culture plastic. 8. The adherent cells were cultured in primary cell culture system supplemented with 10% FBS and 3 units/mL of PSF. 9. On each of the first three days, the cells were washed with primary cell culture system and the medium was
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高架十字迷宫实验方法及注意事项
作者:德尔塔 日期:2022-05-04
高架十字迷宫实验方法及注意事项 【实验仪器】 【实验方法】 将大鼠置于迷宫中央,头朝开臂,观察者距离迷宫中心至少1m。分别记录实验期(通常为5min)内大鼠进入开臂和闭臂的次数和在两臂滞留时间(进出臂标准应严格界定,以四肢全部入臂或两只前爪出臂为准)。计算大鼠进入开臂次数和在开臂滞留时间分别占总次数(进入开臂和闭臂次数之和)和总时间(在开臂与闭臂滞留时间之和)的百分比,以此作为评价焦虑的指标。通常这二指标间呈高度相关。如果一个药物增加动物对开臂的偏爱(即增加进入开臂的次数和在开臂滞留时间的百分比),而不改变入臂总次数,则认为该药有抗焦虑作用。类似地,如果药物减少对开臂的偏爱,同时又不改变入臂总次数,则认为该药有致焦虑作用。 【注意事项】 (1) 为了提高大鼠入臂总次数,避免大鼠躲在闭臂,通常将大鼠置于开场(open field)中活动5min后再放入迷宫。实验前5-7d每天抚摸动物1-2min也可减少无关应激刺激对本实验的影响。 (2) 入臂总数反映动物的运动活性(locomotor activity),评价药物对焦虑状态的影响应该在不改变入臂总次数的前提下进行。如果一个处理以类似的方式同时减少动物对开臂的偏爱和入臂总次数,那么要确定它是致焦虑作用还是镇静作用,就有必要作协方差分析(analysis of covariance)。考虑到入臂总次数与上述两个焦虑指标有一定的相关性,Pellow和Lister建议改用孔板仪(holeboard apparatus)测量动物的运动活性,紧接着做迷宫实验。 (3) 高架十字迷宫具有某些表观信度(face validity),动物不愿探究迷宫开臂可能由于啮类动物厌恶空旷区域和迷宫抬高引起的恐惧二者共同作用的结果,目前尚不清楚这两个因素哪个在致焦虑中占优势。 (4). 可使用雄性或雌性大小鼠或者雄性沙土鼠。每只动物只检测一次,实验中跌落动物**淘汰数据。若在开臂的四周设置窄凸缘防止跌落,会降低对抗焦虑药评价的敏感性。 详细内容请参考公司网站www.softmaze.com和实验博客:blog.sina
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Isolation of rodent pancreatic β cells
作者:德尔塔 日期:2022-05-04
Isolation of rodent pancreatic β cells 1. Adult rats weighing 250-350g were anesthetized, sacrificed and immediately used for pancreas sampling. 2. Rat islets were isolated from male wistar rats by digestion of primary cell solution. 3. The pancreas were excised and placed in a digestion of primary cell solution. 4. Tissue was minced and incubated for 40 minutes at 37°C. 5. After purification on a Ficoll gradient (Sigma), the isolated islets were washed twice in a phosphate-buffered saline (PBS) and the islets were cultured in primary cell system with 10% fetal calf serum. 6. The isolated islets were then exposed for 6-7 minutes at 37°C to the same medium supplemented with digestion of primary cell solution. 7. The incubation was stopped by the addition of primary cell solution, supplemented with 0.5% bovine serum albumin, 2.8 mM glucose and 10 mM Hepes, pH 7.4. 8. The resulting suspension, which comprised mostly single cells, was centrifuged for 5 minutes at 130g. 9. The pellet was re-suspended in primary cell system to obtain a final concentration of 3×105 cells. 10. For mouse islet isolation, pancreases were excised and placed in a primary cell system. 11. Tissue was minced and incubated for 38 minutes at 37°C. 12. After washing of the digested tissue, islets were hand picked under a stereomicroscope. 13. Rodent islets were cultured in primary cell system supplemented with 10% fetal calf serum. 14. The insulin-secreting cells (INS) were cultured primary cell system supplemented with 10% fetal calf serum, penicillin and streptomycin. 15. INS were k
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高低温试验箱故障的分析
作者:德尔塔 日期:2022-05-04
1)高低温试验箱能过制冷,说明外部因素冷却水的问题可以排除。 2)由于是温度保持不住,观察制冷压缩机在试验箱运行过程中是否能够启动,压缩机在试验箱运行过程中都能够启动,说明从主电源到各压缩机的电器线路正常,电器系统方面也没有问题。 3)电气系统没有问题,继续检查制冷系统。首先检查两组制冷机组的低温(R23)级压缩机的排气和吸气压力都较正常值偏低,而且吸气压力呈抽空状态,说明主制冷机组的制冷剂量不足。用手摸主机组R23压缩机的排气和吸气管路,发现排气管路的温度不高,吸气管路的温度也不低(未结霜),这也说明了主机组的R23制冷剂缺乏,系统漏氟。 4)未确定故障原因,结合试验箱的控制过程进一步确认故障原因,该试验箱拥有两套制冷机组。一为主机组,另一为辅助机组,在降温速率较大时,两组机组同时工作,在温度保持阶段初期,两组机组依然同时工作。待温度初步稳定下来,辅助机组停止工作,由主机组来维持温度的稳定。如果主机组R23泄露,会使主机组的制冷效果不大,由于降温过程中,两机组同时工作,故没有温度稳定不住的现象,而指示降温速率降低。在温度保持阶段,一旦辅助机组停止工作,主机组又无制冷作用,试验箱内的空气就会缓慢上升,当温度上升到一定程度,控制系统就会启动辅助机组来降温,将温度下降至设定值(-55℃)附近,然后辅助机组又停止工作,如此反复,便会出现如图3所示的故障现象。至此,已确认生产故障的原因是主机组的低温(R23)级机组的制冷剂R23泄漏。 5)对制冷系统进行查漏,用检漏仪和肥皂水相结合的方法检查,发现一热气旁通电磁阀的阀杆裂了约1cm的细缝。更换此电磁阀,对系统重新充氟,系统运行正常。由于上文可以看出,对该故障现象的分析和判断基本上是有易至难,先“外"后“里",先“电气"后“制冷"的脉络进行分析和判断的,熟悉和了解试验箱的原理和工作过程是分析故障判断故障的基础。
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恒温水浴锅与恒温水槽区别及用途
作者:德尔塔 日期:2022-05-04
恒温水浴锅主要用于对需要加热的样品进行所需某一温度的精确控制,以实现在对不同样品在同一种温控环境下作出比较,或同一样品在不同温度下所呈现的不同状态进行比对。由于恒温水浴锅内的水处于静止状态,所以在不同点会产生较小的温度差异。水浴锅一般用于对三角瓶的加热,在不取下水浴锅盖板的情况下,只能使用容量不大于1000 ml的三角烧瓶。 恒温水槽具有内外循环水流的特点,在使用容量在1000ml-5000ml的三角烧瓶,由于其底面积较大以及高度较高,造成水温不均匀现象更加严重,此时对温度均匀度要求较高的情况下,有必要加人循环泵强制水流循环以提高水温均匀性。其另外一个用途是利用其具有外循环的特点,用来建立第二恒温场。 恒温水浴锅和恒温水槽主要区别在于水温均匀性上,水浴锅水温均匀性(≤0.5℃),恒温水槽水温均匀性(≤0.05℃),同时恒温水槽增加了外循环功能,极大的扩展了使用范围。
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分子影像学在中国的发展历程
作者:德尔塔 日期:2022-05-04
分子影像学在中国的发展历程 在过去的近百年里, 医学影像学发展的主要动力来自物理学和计算机科学, 而 21 世纪以来,影像医学影像发展的主要的因素将是基因组学和生物化学。随着人类基因组测序工作的完成以及基因和蛋白质组学等研究的不断深入, 以细胞病理学为基础的现代医学正逐步向分子医学方向发展。而作为连接分子生物学与临床医学的桥梁,分子影像学必将成为21世纪医学影像学的发展趋势与主导。分子影像学相比经典的医学影像学,所特有的——早期诊断也将对现代、未来的医学模式产生革命性的影响. 近十年,分子影像学以惊人的速度发展。国际知名学府哈佛大学、 斯坦福大学、 麻省理工大学、牛津大学等相继成立了分子影像研究中心,并取得了丰硕的研究成果。国外学者已经应用分子成像技术对疾病的组织表现型、酶活性及基因表达等方面进行了深入研究。在细胞水平,用分子成像活体示踪影像学标记的细胞,已成功用于监测病变内的炎性细胞浸润及细胞移植**中移植干细胞在活体内的迁移、分化情况。在分子水平,通过标记与靶组织特异性识别并能与之结合的分子,动态观察疾病的发生、发展过程,可同时监测多个生物事件,并对其进行时间和空间上的研究。这些过程包括:细胞代谢异常、 细胞表面受体表达异常、 酶活性异常、 细胞凋亡、 肿瘤血管生成等; 在基因水平, 应用报告基因(包括双报告基因及多报告基因)成像,可间接反映目的基因的表达情况,已成功实现了对基因**过程的活体监测,并应用于肿瘤的发生、生长、转移及其他特性的研究。 我国自 2002 年起才开始分子影像学研究工作。2002 年 10 月在杭州举行的主题为 “分子影像学” 的第 194 次香山科学会议就分子影像学的研究现状、未来发展方向及其重大意义等问题进行了广泛的交流和讨论。这次会议也说明,国家开始逐步认识到分子影像的重要性以及我们与国际的差距。虽然参加本次会议的学者来自于跨度很大的多个学科,但少有医学影像学专家,也可以看出本
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如何区分数码相机和摄像头像素
作者:德尔塔 日期:2022-05-04
数码相机的像素是衡量的最重要指标。像素指的是数码相机的。数码相机规格中的多少百万像素,指的就是的分辨率。CCD是一种感光半导体芯片,用于捕捉图形,广泛运用于扫描仪、复印机以及无胶片相机等设备。与胶卷的原理相似,光线穿过一个镜头,将图形信息投射到CCD上。 CCD像素,是CCD的主要性能指标,它决定了显示图像的清晰程度,分辨率越高,图像细节的表现越好。CCD是由面阵感光元素组成,每一个元素称为像素,像素越多,图像越清晰。 由于内含的晶体管越多,也就是像素越多,所以CCD的分辨率就越高;单一像素的尺寸越大,CCD的敏感度越高。与JVC比较,JVC是模拟相机,分辨率、敏感度、画质都与CCD没法比。 而数码相机和都没有详细清楚的概念。它们只是在民品市场一种通俗的说法。严格来讲,两者的成像器件是一样的,只是后端输出和处理方式不一样。比如,JVC的分辨率指标是“电视线”,传统闭路电视系统的说法。详细比较就有很多了。一般来讲,数字输出的相机比模拟输出的相机(如JVC)分辨率要高(在同等像素的前提下) 随着科技的发展,工业级和研究级的数字摄像头的空间分辨率远远高于模拟摄像头.模拟摄像头最多35万像素,在成像精度、噪音状况和可操作性方面,数字摄像头的表现远远优于模拟摄像头。在色彩还原能力上,高性能的模拟摄像头通常有较好的表现,对色彩要求较高的应用还可以选用3模拟摄像头,不过这种摄像头的价格不菲。
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制作胶体金试纸的硝酸纤维素膜选择及应用技巧
作者:德尔塔 日期:2022-05-04
硝酸纤维素膜又称为NC膜, 在胶体金试纸中用做C/T线的承,同时也是免疫反应的发生处.所以NC膜成为该试验中最重要的耗材,而由于其属于非标准器件,基本上每个项目开始阶段都会遇到如何选择合适的NC膜的问题.同时也存在是否要对NC膜进行后期处理及如何处理的讨论. 一. NC膜的生产原理 这个虽然看上去属于生产厂商的事情,但是GMP有个观点是强调对过程的控制才会有好的结果.那么只有了解NC膜的大致生产过程和基本原理才能更好的掌握这种材料的特性,最终制作出满意的试纸.你了解吗? 我找了很久,终于找到一些比较直观的图片,大家可以到德宝公司的官方网站看到 生产NC膜的过程和普通的造纸过程是非常类似的,我们可以借鉴对造纸的认识来理解. 首先,匀浆配比 购买回的原料硝酸纤维素粒子是一种非常普遍的有机化学物,溶解形成混浆,在该浆体内,会加入一定比例的来调整最后形成的膜的性质,一般是一个试剂配方,主要包含表面活性剂/高分子聚合物/盐离子/成型剂等溶解在一个缓冲体系内. 不同的厂家加入的溶液配方不一样,直接导致了在产品的差异. 其次,滚筒铺膜 配好的匀浆通过滚筒,形成了一张薄膜,平摊在十分光滑的平面上.这个和造纸的过程是非常相似的. 最后,成型 在匀浆内的成型剂开始挥发,膜逐步干燥成型.同时在这个过程中由于温度比较高,有些厂家在这个过程采取了在密闭腔体内成型,同时补充配方溶液的形式,来避免一些有效成分的蒸发. 切割出产品 通过以上步骤生产出来的膜是呈一个宽度极大的产品,宽度的大小直接和滚筒的大小相关,滚筒越大生产越方便,但设备的成本也越高.宽膜要经过切割才能成为我们购买到的25mm或18mm(或20mm)宽,而长度上,成品卷膜和宽膜的长度是相同的.理论上可以让厂家切成你需要的任意宽度,但这样会造成原料的浪费和人力成本的增加,后来厂商在和试纸生产厂家的协调过程中,综合用料成本和生产便利性基本确定了上面说的宽度,以次为标准.关于不同宽度的用途差异,稍后详述. 从生产的过程,我们可以得知, NC膜本身是已经添
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恒温恒湿试验箱的制冷技术原理
作者:德尔塔 日期:2022-05-04
恒温恒湿试验箱针对-40℃机型可以采用单级制冷循环,也可以采用复叠式制冷循环系统,但单级制冷循环是靠调小压缩机的膨胀阀开启度,减小制冷剂流量限流来调低蒸发压力(约0.7个大气压),从而获得更低的蒸发温度的,这样的设计是以牺牲系统的制冷量来达到的(制冷量约只有标准的0.7~0.8),导致制冷效率低并加大了压缩机的负载,而且易引起压缩机线圈过热,影响了压缩机的寿命。 冷冻系统设计:获取-20℃以下的低温时均采用复叠式制冷循环系统. 先谈谈为恒温恒湿试验箱 获取低温而采用两级压缩复叠制冷循环的原因: (1)单级压缩蒸气制冷循环压比的限制 单级蒸气压缩式制冷机的最低蒸发温度,主要取决于它的冷凝压力及压缩比.制冷剂的冷凝压力由制冷剂的类别和环境介质(如空气或水)的温度决定,在通常情况下,它处于0.7~1.8Mpa范围内.压缩比与冷凝压力和蒸发压力有关,当冷凝压力一定时,随着蒸发温度的降低,蒸发压力也相应下降,因而使压缩比上升,它将引起压缩机排气温度的升高,润滑油变稀,使润滑条件变坏,严重时甚至会出现结炭和拉缸现象;另一方面,压缩比的增大将导致压缩机的输气系数降低,制冷量减少,实际压缩过程偏离等熵过程越远,压缩机功耗增加,制冷系数下降,经济性降低.将出现以下一些影响. a.任何制冷剂,蒸发温度越低,则蒸发压力也就越低.过低的蒸发压力,有时可能造成压缩机难以吸气,或者使外界的空气进入制冷系统. b.当蒸发温度过低时,某些常用制冷剂已达凝固温度,无法实现制冷剂的流动,循环. c.蒸发压力降低,制冷剂的比体积增大,制冷剂的质量流量减少,制冷量大大下降.为了获得所需制冷量,必须增大吸气容积,使压缩机体积过于庞大. (2)制冷剂热物理特性的限制。 现在恒温恒湿箱中单级制冷循环基本上采用的中温制冷剂是R404A,在一个大气压下其蒸发温度是-46.5℃(R22/-40.7℃),但空气冷却式冷凝器传热温差通常取10℃左右(在强制送风散热循环下,蒸发器和内箱的温差),就是说箱内只能制取-36.5℃的低温,当然,通过调低压缩机
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凝胶成像概述
作者:德尔塔 日期:2022-05-04
凝胶成像定义 凝胶成像即对dna/rna/蛋白质等凝胶电泳不同染色(如eb、考马氏亮蓝、银染、sybr green)及微孔板、平皿等非化学发光成像检测分析。 凝胶成像系统可以应用于分子量计算,密度扫描,密度定量, PCR定量等生物工程常规研究。 凝胶成像系统的原理 样品在电泳凝胶或者其他载体上的迁移率不一样,以标准品或者其他的替代标准品相比较就会对未知样品作一个定性分析。这个就是图像分析系统定性的基础。根据未知样品在图谱中的位置可以对其作定性分析,就可以确定它的成份和性质。 样品对投射或者反射光有部分的吸收,从而照相所得到的图像上面的样品条带的光密度就会有差异。光密度于样品的浓度或者质量成线性关系。根据未知样品的光密度,通过于已知浓度的样品条带的光密度指相比较就可以得到未知样品的浓度或者质量。这就是图像分析系统定量的基础。采用最新技术的紫外透射光源和白光透射光源使光的分布更加均匀,最大限度的消除了光密度不均造成的对结果的影响。 凝胶成像应用范围 总体上来说凝胶成像可应用于:凝胶成像系统可以用于:蛋白质、核酸、多肽、氨基酸、多聚氨基酸等其他生物分子的分离纯化结果作定性分析 (1)分子量定量 对于一般常用的DNA胶片,利用分子量定量功能,通过对胶上DNA Marker条带的已知分子量注释,自动生成拟合曲线,并以它衡量得到未知条带的分子量。通过这种方法所得到的结果较肉眼观察估计要准确很多。 (2)密度定量 一般常用的测定DNA(脱氧核糖核酸)和RNA(核糖核酸)浓度的方法是紫外吸收法,但它只能测定样品中的总核苷酸浓度,而不能区分各个长度片段的浓度。利用凝胶成像系统和软件,先将DNA胶片上某一已知其DNA含量的标准条带进行密度标定以后,可以方便的单击其他未知条带,根据与已知条带的密度做比较,可以得到未知DNA的含量。此方法也适用于对PA GE蛋白胶条带的浓度测定。 (3)密度扫描 在分子生物学和生物工程研究中,
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生物样本库发展现状
作者:德尔塔 日期:2022-05-04
生物样本库是标准化搜集处理、储存和分发健康和疾病生物体的生物大分子、细胞、组织和器官等样本,以及相关的个体生理及病理信息的系统。目前主要是人体样本的搜集储存,包括核酸、蛋白、细胞、血液及其分离成分、尿液、唾液、毛发、精液、卵子、受精卵、卵巢组织、睾丸组织、胎盘、脐带、胸腺、脂肪、皮肤、骨髓、角膜、血管、心脏瓣膜、肌腱、骨骼、脑组织、各种来源的肿瘤组织以及一些体积较大结构相对完整的器官。2007年全美组织库产品使用量达到150万件,为病理研究和临床应用提供了有力的支持。随着样本分析技术和医学水平的进一步提高,生物样本库的价值在未来将会进一步体现。 早期的样本库是随着上世纪中叶随着冻存理论和技术的发展而出现的,比如1949年George Hyatt创建美国海军组织库和1952年捷克斯洛伐克的R. Klen建立的University Hospital Hradec Kralove的组织库。自上世纪八十年代基于冻存技术的进一步提升及基础研究和临床应用的要求,生物样本库得到了较快的发展。1999年成立的英国的UK Biobank是目前比较大的样本库,到2010年底已经入库了50万人共1500万份的血液和尿液样本。除了单个储存机构,样本库也在朝着网络化发展,样本分散储存在多个加盟单位,而信息统一管理,通过网络方便查询,使生物信息自愿利用率大为提高。例如1987年成立的美国国家癌症研究所的Cooperative Human Tissue Network (CHTN)和拥有30多个成员过和280多个加盟单位的欧洲Biobanking and Biomolecular Resources Research Infrastructure(BBMRI)/ pan-Europe。在北美、欧洲等地还出现了一些全国性的样本库联合会以规范和协调样本库的技术、发展和成员单位间的相互合作,比如America Association of Tissue Banks、British Association for Tissue Banking等为代表的全国性样本库联合会,以规范样本库技术、协调成员单位间的相互合作,促进行业发展。 中国的生物样本库起步较晚,发展却十分迅速,除了政策和资金的支
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生物样本冷冻储存技术
作者:德尔塔 日期:2022-05-04
1 储存温度 生物样本的长期储存通常使用尽可能低的温度来降低样本内的生化反应提高样本内各种成分的稳定性。生物大分子、细胞、组织和器官的常用储存温度有-800C(超低温冰箱), -1400C(液氮气相或深冷冰箱)以及-1960C(液氮液相),温度越低样本的稳定保存时间越长。0~-600C是水的结晶温度,容易对细胞和组织的微观结构造成伤害,一般不使用这一温度来保存组织和细胞。部分经过提纯的生物大分子可以在0~-600C稳定保存一定时间,但在组织样本内生物大分子受到细胞组织内多种因素的影响,稳定性有可能明显降低,所以通常样本库不使用0~-600C作为储存温度。 温度 意义 相关设备 生物样品存储应用 0~-600C为组织和细胞内水的结晶温度,温度进入此范围组织内的水开始结晶伤害细胞和组织微观结构。 各种冷冻冰箱 可中长期保持经过提纯的生物大分子的稳定性,但不能存保持组织中的生物大分子稳定性、细胞活性及组织微观结构。 -800C为水的结晶温度之下较为安全的温度,同时样本内的生化反应显著减弱。也是目前自动化存储设备所能使用的最低温度。 超低温冰箱 可中期保持组织内生物大分子的稳定性;短期保持细胞活性和组织微观结构。 -1360C为水的玻璃化温度,水的结晶对细胞和组织不再有明显伤害,样本内的各种生化反应几近停止。 液氮箱/罐气相; 深冷冰箱 可中长期保持组织内生物大分子、细胞和组织微观结构的稳定性,为不少样本库推荐用于长期冻存组织。 -1960C为液氮蒸发的温度,是常规方法所能实现的最低温度。样本内的各种生化反应可以认为停止,水的结晶对细胞和微观组织的伤害可以忽略。 液氮箱/罐液相 可长期保持组织中的生物大分子稳定性、细胞活性及组织微观结构,但对存储耗材有较高要求。 -800C样本储存 -800C低于危害性较大的水的结晶温度范围,也是常用设备超低温冰箱能达到的温度,基于操作简便性、储存量和成本等因素来考量,这一温度也是目前保存样本中生物大分子活
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生物样本库建设、管理及相关产品建议
作者:德尔塔 日期:2022-05-04
建样本库的基本原则是安全、准确、便捷。其中安全包括样本生物安全、样本信息安全、设备运行安全;准确包括样本信息准确、样本存放取出位置准确;便捷包括工作流程便捷、软件系统操作便捷、信息交流便捷、硬件软件耗材供应及技术支持便捷。 样本库通常由基础设施、冻存设备、冻存耗材、编码及读码设备、监控设备、管理软件和人员配置构成。合理的架构及流程可以保证样本库运行安全、准确、便捷。常规生物样本库工作流程图举例如下: 1 基础设施 基础设施一般包括质检室、样本处理室、冰箱室、液氮设备室、监控室、空调设备、备份电源等。其中需要注意的是:冰箱是产热设备,需要和液氮设备分开放置。立式冰箱如不能背靠墙摆放,可保持一定距离背对背摆放。考虑到超低温冰箱目前仍是组织库的主要存储设备,在运行过程中会大量产热,配备样本库空调时对其功率和性能可靠性需要给予足够的考虑。备份电源也是样本库的基本配备。在供电不够十分稳定的地区,在选择冰箱时还要考虑到冰箱的温度绝缘性(即满载样品时断电后温度上升的速度)。当样本容量足够大时,还需要考虑使用自动化取放样品的设备。对于特别重要的样本,条件许可的情况下可以将样本的备份分开放置于不同的物理地点以增加安全性。 2 设备 -800C冻存设备(超低温冰箱) 超低温冰箱稳定工作的温度通常在-800C左右,在取放样品的时候很容易升至-600C的再结晶温度范围,容易造成样本生物稳定性的衰减。所以在选用超低温冰箱的时候制冷能力(速度)是一个关键参数。制冷能力强的冰箱能够在温度受到扰动的,快速降至设定的温度以尽量减少对样本的伤害。另外,由于样本库的目的是长期存放样品,超低温冰箱需要在满载情况下多年不间断运行,对其可靠性和温度稳定性都比普通实验室的要求要高。样本库的冰箱需要有运行温度的连续记录功能,以便追踪温度波动。 -1400C冻存设备(液氮气相和深冷冰箱) 液氮气相和深冷冰箱是实现-1400C长期样品储存的
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如何使用反向移液技术更精准的移取蛋白溶液
作者:德尔塔 日期:2022-05-04
每支移液器的液程通常都用纯水和正向移液技术校准过。因此我们推荐使用正向移液技术移取水性溶液,如缓冲液,稀释酸或碱。当移取不同于水的液体时,由于具有不同的液体特性,其移液量可能偏离所选的量 程。比如 一些生物溶液的移液,可能会在移液器尖端或试管中产生气泡或泡沫,这将使移液量产生偏差。在这种情况下,我们推荐使用反向移液技术移取高粘度或者容易产生泡沫的液体。反向移液技术减少了喷溅,泡沫和气泡形成。这种方法尤其适用于移取小体积的液体。 下面先介绍一下正向移液和反向移液技术的操作。 1.将按钮压至第一停点。 2.将吸头浸入液面下1cm处,缓慢释放按钮使其滑回原位。将吸头从液体中移出,接触容器边缘除去多余的液体。 3.排液时,吸头紧贴容器壁先轻按按钮至第一停点,略作停顿后,将按钮按至第二停点(这个操作会将吸头内的液体彻底排尽),将吸头从容器中沿容器壁移出。 4.松开按钮至准备位置。 1.将按钮压至第二停点。 2.将吸头浸入液面1cm处,缓慢释放按钮使其滑回原位。这将时液体充满吸头。将吸头从液体中取出,接触容器边缘去掉多余液体。 3.放液到接收容器时平稳地轻按按钮至第一停点。保持在这个位置。一些液体会残留在吸头中不能被放出。 4.残留在吸头内的液体能够被吹回原溶剂中或者同吸头一起丢弃。 5.松开按钮到准备位置。 选择合适的移液器对于微量移液的精准性也很重要,Thermo Scientific F系列移液器的超强吹出设计则满足了微量移液对精准性的需求。低于50μl液程的Thermo F系列移液器均采用双活塞设计,与其它普通移液器相比,其空气吹出能力增大50%-60%,因此在小体积的液体吹出时会非常干净完全,大大提高了移液的精准性。 我们使用Thermo Scientific Finnpipette F2 1-10 μl移液器,配合Thermo Scientific Finntip Flex 10吸头,同时分别使用正向移液和反向移液,移取1%牛血清白蛋白(BSA,Sigma A7030)进行移液精准性测试。 图1 表明当使用反向移液技术




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