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Isolation of osteoblasts from human bone.
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
Isolation of osteoblasts from human bone. Bone samples were cleaned of adherent soft tissue and osteoblasts isolated by two methods. a. The bone was cut into small pieces (2 mm × 2 mm), washed in Ca2+- and Mg2+-free digestion’s solution (10 min), and then sequentially digested (1 mg/ml trypsin, 10 min; 2 mg/ml Dispase, 20 min; and 3 mg/ml collagenase, 2 × 30 min) in digestion’s solution at 37°C. Cells released by the collagenase digestions were washed and grown to confluence in 25 cm culture flasks (Falcon) in primary cell culture system supplemented with 10% fetal calf serum (FCS). Incubations were carried out at 37°C in a humidified atmosphere of 5% CO2/ 95% air; the medium was changed every 2-3 days. b. Bone samples were cut into small pieces and plated into 5 cm Petri dishes containing 4 ml primary cell culture system supplemented with 10% FCS. Bone cells were allowed to grow out from the explants until confluent; the medium was changed every 2-3 days.
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Isolation and Transcription Profiling of Purified Uncultured Human Stromal Stem Cells
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
Isolation and Transcription Profiling of Purified Uncultured Human Stromal Stem Cells Isolation of Stromal Vascular Cells from Human Adipose Tissue 1. Adipose tissue was obtained by liposuction from abdominal, hip, and thigh regions of healthy female donors aged 18–39. 2. The stromal vascular fraction (SVF) was separated from adipose tissue. Lipoaspirate (300–400 ml) was washed with Hanks' balanced salt solution containing antibiotics (100 IU/ml penicillin and 100 IU/ml streptomycin, Life Technologies-BRL) and 2.5 μg/ml amphotericin B. 3. Washed adipose tissue was digested for 2 h on a shaker at 37°C in HBSS containing 0.2% collagenase. 4. Floating adipocytes were aspirated from pelleted SVF cells after centrifugation at 400 × g for 10 min. 5. Pellets were resuspended in red blood cell lysis buffer (2.06 g/l Tris base, 7.49 g/l NH4Cl, pH 7.2) for 10 min at room temperature. 6. After resuspending SVF cells in HBSS containing 2% fetal bovine serum (FBS), tissue clumps were allowed to settle for 1 min. 7. Suspended cells were passed through 100-μm and then 40-μm cell sieves. Cell suspensions (15 ml) were applied to Histopaque-1077 gradients (15 ml) in 50-ml tubes. 8. After centrifugation (400 × g, 30 min), cells at the gradient interface were collected, washed in HBSS, and passed through a 30-μm mesh. Cell counts and viability assessment were performed. Isolation of ADASC from SVF 1. CD45+ cells were removed using magnetic beads coupled to mouse antihuman CD45 MAb and a superMACS magnet according to instructions provided by the manufacturer. 2. Magnetic beads were also use
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鸡β干扰素(IFN-β)酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
本试剂盒仅供研究使用。 检测范围： 96T 2ng/L - 48ng/L 使用目的： 本试剂盒用于测定鸡血清、血浆及相关液体样本中β干扰素(IFN-β)含量。 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鸡β干扰素(IFN-β)水平。用纯化的鸡β干扰素(IFN-β)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入β干扰素(IFN-β)，再与HRP标记的β干扰素(IFN-β)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的β干扰素(IFN-β)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中鸡β干扰素(IFN-β)浓度。 试剂盒组成 1 30倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶 7 终止液 6ml×1瓶 2 酶标试剂 6ml×1瓶 8 标准品（96ng/L） 0.5ml×1瓶 3 酶标包被板 12孔×8条 9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶 4 样品稀释液 6ml×1瓶 10 说明书 1份 5 显色剂A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2张 6 显色剂B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1个 标本要求 1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融 2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。 操作步骤 1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 48ng/L 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 24ng/L 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 12ng/L 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 6ng/L 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl
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蛋白质组学技术分析方法及其仪器使用比较
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
蛋白质组学技术分析方法及其仪器使用比较 1 蛋白质组学概述 “蛋白质组”一词的英文是Proteome，它是proteins 和genome 两个词的组合，意思是proteins expressed by a genome，即为基因组表达的蛋白质[1]。蛋白质组的概念是1994 年由Wilkins首先提出，并首次在1995 年7月的“Electrophoresis”上发表，指“一个细胞或一种组织基因组所表达的全部蛋白质”[2]， 蛋白质组学(proteomics) 是从整体水平上研究细胞内蛋白质的组成及其活动规律。与基因固定不变的基因组不同，蛋白质组作为相应基因组所表达的产物随时间、地点、环境等条件变化。在同一机体不同的组织和不同细胞中、蛋白质的种类、数量不同； 即使同一组织或细胞在不同的发育阶段、生理状态、甚至不同的外界环境下，其蛋白质组也是在不断的变化之中； 在病理或**过程中， 与正常生理过程也不同。因此， 蛋白质组是一个动态的概念。其目的是从整体的角度分析机体内动态变化的蛋白质组成成分、表达水平、修饰状态，了解蛋白质之间的相互作用和联系， 揭示蛋白质功能与生命活动的规律。蛋白质组学的研究分为3 方面: (1) 蛋白质大规模鉴定和转录后修饰的微特征研究。(2) 差异显示蛋白质组学，即蛋白质表达水平的研究， 对肿瘤等疾病的应用有着广阔的前景。(3) 蛋白质间相互作用和翻译后修饰的研究[3]。分析不同蛋白质的表达可用来比较正常组织和肿瘤组织之间的差别，蛋白组学将成为鉴别疾病的标记物，可以阐述某种机制，这种机制在越来越多的分析中被应用。人类的基因组比预期要小的多，并且基因组计划中的肿瘤相关基因现在才被知道，然而较小的基因不能反映单一的蛋白质组。通常，广泛的翻译后修饰例如磷酸化、糖基化，蛋白水解处理作用都是很常见的方式。蛋白质翻译后修饰能够显著地改变蛋白质的功能，因此可以表达出细胞和组织特征。因此，在基因组中，蛋白组学的挑战之一就是通过蛋白效应器的知识理解组织特征，并且把它应用到临床中。 2蛋白质组学分析方法 蛋
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藜科植物生长在不同盐水平下的离子和渗透关系
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
藜科植物生长在不同盐水平下的离子和渗透关系 注：NaCl诱导的K+和H+的流速依赖于NaCl的浓度，K+外流和H+外流速具有显著的正相关性。 盐是影响作物产量的一个重要因素。人们通过提高作物的抗盐性来解决高盐毒害的问题，但是这造成了经济负担。藜科植物与生俱来就有抗盐的潜力，这种非凡的盐忍耐能力有助于我们了解植物对盐的反应过程，但是它的生理机制还不清楚。 2011年，澳大利亚的科学家使用非损伤微测技术研究了藜科植物quinoa离子和渗透的关系，用6个盐水平（0-500 mM NaCl）处理了70天，发现100 mM和200 mMNaCl适合生长，说明藜科植物拥有一个非常有效的调节渗透的系统来防止NaCl胁迫的突然出现。在幼年植物中发现保持高K+和低Na+水平，茎部的K+在老叶中慢慢增加，这是盐环境中K+在叶片渗透调节重要作用的证据。盐的水平增加5倍（从100 mM增加到500 mM）后，Na+含量只增加了50%，说明木质部有非常强烈的Na+控制能力或有效地把Na+从叶片移除的能力。 藜科植物根部收到NaCl诱导后的K+外流和H+外流之间有强烈的正相关性，说明快速的NaCl诱导的H+-ATPase的激活需要恢复，否则去极化的膜电势增加，胞质进一步渗漏K+。这个工作强调了在盐生植物中无机离子的渗透调节作用，即控制木质部Na+和K+的装载和转运到茎的过程。 关键词：盐土植物，离子装载，膜转运，渗透调节，K+，盐胁迫 参考文献：Hariadi Y et al. Journal of Experimental Botany, 2011, 62: 185 - 193.
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Primary brain cell isolation and culture
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
Primary brain cell isolation and culture. 1. Cerebella were removed from 7-day-old mice and passed through Nitex nylon netting (80 μm pore size) into primary cell system containing 20% (v/v) fetal calf serum (FCS). 2. The cell suspension was plated at a density of four cerebella per 12-well culture plate. 3. Primary cell culture system was changed two days after plating and twice a week thereafter, gradually decreasing the FCS concentration to 10%. 4. At 14 days in culture, dibutyryl-cAMP was added to the medium for 1 week to promote the morphological differentiation of astrocytes. 5. Experiments were performed on 3-week-old cultures. 6. Cortical astrocytes were prepared from 1-day-old mice following the same procedure used for cerebellar astrocytes plated at a density of two cortices per 12-well culture plate. 7. Cerebellar neurons were isolated and cultured from the cerebellum of 7-day-old mice, after mild trypsinization of the tissue followed by trituration in a DNase solution containing a trypsin inhibitor derived from soybeans. 8. Cells were suspended in a slightly modified primary cell culture containing 50 μM kainic acid and 10% (v/v) FCS and plated at density 2 × 106 cells per well in a 12-well culture plate. 9. The wells had been coated with poly-L-lysine. 10. Cytosine arabinoside (20 μM) was added after 48 h to prevent astrocyte proliferation. 11. Cells were used for experiments after 1 week in culture. 12. For the co-cultures, the neurons and astrocytes were prepared separately and seeded as described earlier. 13. The astrocytes were cultured on in
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miR-371-3的miRNA的表达可预测多能干细胞向神经细胞分化命运
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
多能干细胞是当前干细胞研究的热点和焦点。它可以分化成体内任意细胞，进而形成身体的各种组织和器官。因此，多能干细胞的研究不仅具有重要的理论意义，而且在人类疾病建模和再生医学方面极具应用价值。尽管长期以来科学家们一直致力于探索多种诱导干细胞特异性分化的实验方案，然而这些方法在诱导生成特异性细胞类型的效率上仍存在较大的差异，且研究人员很难对干细胞的分化方向进行准确的预测。 对13种人类胚胎干细胞（hESC）系和26种人类诱导多能干细胞(hiPSC)系进行了mRNA及miRNA表达谱系分析以筛查可预测干细胞向神经细胞分化的生物标记。分析结果表明过去用于区分小鼠胚胎干细胞及小鼠外胚层干细胞（EPI-SCs）的多个生物标记基因均与干细胞向神经细胞分化行为相关。此外，研究人员还发现一种叫做miR-371-3的miRNA的表达与人类干细胞向神经细胞分化潜能呈负相关。定量分析miR-371-3的表达可准确预测未分化多能干细胞的差异性神经性分化倾向。当研究人员将KLF4基因转导至这些细胞中提高miR-371-3表达时，KLF4转导细胞显示神经行为及多能标记物表达改变。在KLF4转导细胞中抑制miR-371-3表达则可恢复其神经性分化倾向。研究结果表明miR-371-3有可能在人类多能干细胞神经性分化行为过程中发挥了关键性的作用，并为预测及控制多能干细胞神经分化命运提供了一个有潜力的作用因子。 胚胎干细胞分化形成终末组织类型的详细机制是许多干细胞生物学家的研究目标。近来科学家们在干细胞命运预测研究中取得一系列突破性成果。不久前来自美国宾夕法尼亚大学医学院的研究人员在祖细胞研究中发现了一种基于组蛋白预测细胞命运的方法。研究小组证实胚胎细胞中的组蛋白乙酰转移酶P300和组蛋白甲基转移酶Ezh2通过影响组蛋白修饰在确定细胞向肝脏或胰腺命运转化中发挥重要的调控作用。从而为开发出推动胚胎干细胞生成**及研究所需肝脏或胰腺β细胞提供了有潜力的新方法。
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操作雪花制冰机的流程
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
一、雪花制冰机启动 打开水，放置在主电源开关（连接）的位置，雪花制冰机开始工作：机器设备的延误，也就是三分钟后，重新启动电源减速器，压缩机和其他部件，说明在此期间的高温冷凝红光（ LED ）的闪光（即延迟3分钟） 。在第一场雪的冰约三分钟后，压缩机启动了储备人冰箱，冰10分钟后正常，导致坚冰。 二、雪花制冰机停机 关闭主电源开关，机器停止工作。每次开机，机器必须被推迟了3分钟后自动运行。 三、制冰机指标说明 电子雪花制冰机的前面板，以监测五个灯如下： 绿色亮;机电源状态 黄灯亮;存储冰箱冰期，当冰被删除后10秒，机器会自动恢复工作 黄灯亮;鱼缸水，当水在10秒后，机器会自动恢复工作 红灯亮;冷凝器温度，环境温度太高或太低 红灯闪亮3分钟延迟在开机状态（正常） 红灯亮;冰钻井速度低于错误或改变850.rPm 红灯闪亮的高蒸发器温度：也就是说， 10分钟后开机不蒸发温度低于-1 ℃ ; 注：1.高的原因冷凝器温度：风扇不能正常工作;冷凝器插件;结露PC板温度传感器或环境温度太高导致损害。 2.高的原因蒸发温度：缺少制冷剂;冷凝温度过高;蒸发温度传感器或PC板损坏。 四、雪花制冰机建复位（重置） ，当激活由于安全装置停止工作时，机器，如重新启动机器时，首先确定故障原因和故障排除，然后按复位按钮（重置）或主电源开关关闭（断开） ，然后放置在上的立场（连接）的立场。
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制冰机/雪花制冰机-比朗问答篇
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
一、上海比朗制冰机冰状分类 1、制冰机冰状： A、圆柱冰状 B、方块冰状 C、雪花冰状 D、子弹头冰状 2、不同场合对不同形状制冰机的需求： A、圆柱冰状： 适用酒吧/KTV/宾馆/饭店/娱乐场所等，是调酒/饮料的最 佳选择. 可选择圆柱制冰机 YN-55P圆柱制冰机是最佳的选择. 快速链接：圆柱制冰机 B、方块冰状： 适用食品服务业/饭店(预先做冰饮料)/野营场所(用自动售冰机)/碳酸盐水饮料等. 可选择方块制冰机 YN-200P方块制冰机和YN-350P方块制冰机是最佳的选择. 快速链接：方块制冰机 C、雪花冰状： 适用咖啡厅/宾馆/饭店/超市/医院/实验室/化工等. 可选择上海比朗FMB系列，型号如：FMB40、FMB50、FMB70、FMB85、FMB100、FMB150、FMB200、FMB300等 快速链接：雪花制冰机 D、子弹头冰状： 适用大型超市/肉加工业/食品工业/化工业等. 可选择上海比朗BL系列，型号如：BL33、BL55、BL100、BL150等 快速链接：子弹头制冰机 3、日耗冰量： 根据使用场所的高峰时间的日用冰量来估算每天的最大用冰量，再选择不同产量的制冰机. 二、制冰机的冰型有哪些？ 圆形冰 方形冰 雪花冰 磷形冰 异形冰 矿块形冰 三、酒店制冰机的维护及保养方法？ 首先就是要对制冰机的进水过滤的设备进行清洗，或者更换，再把制冰机内的水槽、冰模、分流管进行清洗，还有进水阀和排水阀的清洗。还有就是对风冷的机器进行冷凝器的清洗液是相当的重要的。 然后就是制冰机的氟利昂的压力检测，少了就要补一些（少的话就要注意看哪里有漏的情况），整个来说保养总重要的就是清洗容易堵的东西，不管是堵通风还是堵通水。**是专业的人去弄，或者是对制冷有一定的认识的人去做。 四、制冰机传感器有哪些？ 冷凝温度、冰满、冰厚、水位 五、制冰机问题问答 问：我的制冰机运行良好但是就是不制冰.冷却水也很凉 答：不制冰怎么能叫运行良好？呵呵！ 冷却水很凉，有多凉？你测过温度吗？ 首先检查各开关、旋钮是否处于正确位置？ 如果以
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人S蛋白100B(S-100B)酶联免疫分析试剂盒使用说明书
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
本试剂盒仅供研究使用。 检测范围： 48T 50ng/L -1600 ng/L 使用目的： 本用于测定人血清、血浆及相关液体样本中S蛋白100B(S-100B)含量。 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人S蛋白100B(S-100B)水平。用纯化的人S蛋白100B(S-100B)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入S蛋白100B(S-100B)，再与HRP标记的S蛋白100B(S-100B)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的S蛋白100B(S-100B)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人S蛋白100B(S-100B)浓度。 试剂盒组成 1 20倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶 7 终止液 3ml×1瓶 2 酶标试剂 3ml×1瓶 8 标准品（3200ng/L） 0.5ml×1瓶 3 酶标包被板 12孔×4条 9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶 4 样品稀释液 3ml×1瓶 10 说明书 1份 5 显色剂A液 3ml×1瓶 11 封板膜 2张 6 显色剂B液 3ml×1/瓶 12 密封袋 1个 标本要求 1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融 2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。 操作步骤 1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 1600ng/L 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 800ng/L 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 400ng/L 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 200ng/L 2号标准品
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细胞膜的物质运转及受体功能
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
细胞膜的物质运转及受体功能 (1)分隔、形成细胞和细胞器，为细胞的生命活动提供相对稳定的内环境，膜的面积大大增加，提高了发生在膜上的生物功能；(2)屏障作用，膜两侧的水溶性物质不能自由通过；(3)选择性物质运输，伴随着能量的传递；(4)生物功能：激素作用、酶促反应、细胞识别、电子传递等。(5)识别和传递信息功能。 物质转运功能：细胞与周围环境之间的物质交换，是通过细胞膜 document.write('') 的砖运动功能实现的，其主要转运方式有以下四种。1)自由扩散：脂溶性物质由膜的高浓度侧向低浓度侧的扩散过程，称为自由扩散。不耗能，不需要载体。如：水、尿素、二氧化碳等. 2)协助扩散：非脂溶性物质在膜蛋白的帮助下，顺浓度差或电位差跨膜扩散的过程，称为协助扩散。不耗能，但是需要载体。协助扩散的三个特点：1、特异性：记忆中离子通道或载体一般指转运一种物质。2、饱和性：即当被转运物质增加到一定限度时，转运速率不再随之增加，这是由于离子通道或载体的数量有限的缘故。3、竞争性抑制：记忆中离子通道或载体同时转运两种或两种以上物质时，一种物质浓度增加，将削弱对另一种物质的转运。4.膜蛋白的分类：1 通道蛋白 2 门通道蛋白 3特化蛋白(通过接触改变自身构象来进行转运)如：葡萄糖进入红细胞。自由扩散和协助扩散都是顺浓度差进行的，细胞本身不消耗能量，均属于被动转运(被动运输)。3)主动转运：离子或小分子物质在膜上“泵”的作用下，被逆浓度差或逆电位差的跨膜转运过程，称为主动转运(主动运输)。主动运输需要消耗大量热量并且需要载体。有选择透过性。如：碘进入海带、葡萄糖进入除红细胞以外的细胞。4)入胞和出胞作用：是转运大分子或团块物质的有效方式。物质通过细胞膜的运动从细胞外进入细胞内的过程，称入胞。包括吞噬和吞饮。液态物质入胞为吞饮，如小肠上皮对营养物质的吸收；固体物质入胞为吞噬，如粒细胞吞噬细菌的过程。出胞是通过细胞膜的运动从细胞内派到细胞外的过程。细胞的代
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新一代Fluidigm 微流体芯片PCR技术在农业中的应用
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
通过对单核苷酸多态性（SNP）的筛查，对育种分类，鉴定，改良，及进行动植物管理， 为现代农业带来巨大改变。但采用有关方法前， 需要对物种进行大规模的筛选研究。市场上Affymetrix公司提供的芯片可扫描500,000到900,000个SNPs位点而Illumina公司 的BeadChips可扫描300,000到2,500,000 个SNPs位点等，但此等芯片，在高通量样本下成本将变得非常昂贵。遗传学家需要一个高通量，高精确度但成本划算的筛查方法 -Fluidigm公司的微流体芯片应用PCR 原理，进行于鉴别基因变异——单核苷酸多态性（SNP）筛查， 特别适合SNPs位点（约50-300）的快速的大规模样本（样本量达数千以上）的筛选。 鱼 – 我所欲也 美国阿拉斯加渔业局研究主管Jim Seeb和他的妻子Lisa 在大约20年前就采用SNPs作为遗传标记来鉴定三文鱼群体并以此管理捕捞业。在2008年1年中，阿拉斯加基因实验室采用Applied Biosystem的384孔PCR系统对大约30,000条三文鱼进行基因分型。如能对45个SNPs位点进行鉴定，但也产生1,350,000个数据点 (45x30,000)， 如使用传统384孔板及单通道PCR， 45块384孔板只能处理384个样本，所有样本需要 78x45块共3516块板和大量试剂！但当他们发现了 Fluidigm 公司的BioMark 系统后，他们可一次检测96个SNP点，将实验质量大大提升，使用极小量试剂和一块BioMark Dynamic Array可一次同时分析96个不同样本的96个SNPs位点（9216个数据）。“这是一种更简易和更少出错的工作流程”Seeb说。现在，该实验室每天在9台Fluidigm的PCR仪上进行16块芯片的实验，每周4天，并计划在2011年对200,000条三文鱼进行基因分型。“没有此项技术，我们根本无法完成这样的任务”渔业局首席遗传学专家Bill Templin说。 牛- 我所欲也，鱼与牛皆可得也！ 2009年的春天， 美国农业部的一位遗传学专家Curt Van Tassell正在寻找一种方法来对世界上每一头奶牛进行基因分型。在过去的10年中，Curt已经研究了数百头重要的奶牛的SNPs，希望找出其对生长速度、产奶产量、奶牛
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八臂迷宫实验方法
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
八臂迷宫 八臂迷宫（radial arm maze）实验也是最为常用的评价动物学习记忆能力的模型之一，由Olton等人于20世纪70年代中期建立。其基本依据是，控制进食的动物受食物的驱使对迷宫各臂进行探究；经过一定时间的训练，动物可记住食物在迷宫中的空间位置。该方法可同时测定动物的工作记忆（working memory）和参考记忆（reference memory）。所用动物包括大鼠、小鼠和鸽子。这一模型对脑区毁损和多种药物均很敏感。后者包括乙醇、东###（抗胆碱能药）和MK-801(NMDA受体拮抗剂)等。 （一） 实验设备 实验多数采用八臂放射迷宫，也有采用 十二臂或者二十四臂迷宫。这里介绍上海欣软信息科技有限公司（）生产的八臂迷宫。每个臂长41.9cm，宽11.4cm，高10.1cm；其上有一透明盖，两侧各有两个相对的光电管。迷宫中央八角形区的直径为27.4cm；上有一透明顶盖。中央区通往各臂的入口处有一活动门，用来对动物的出入臂进行控制。迷宫与计算机相联。也可用摄像跟踪系统（video tracking system）取代光电管来记录动物在迷宫内的活动行为。放置迷宫的房间内有一些外部暗示（extramaze cues）。动物在迷宫内可以看见这些暗示，并借此进行空间定位。实验用大鼠或小鼠进行。 （二）实验方法 1．动物适应实验环境1周后，称重，禁食24小时。此后每天训练结束后限制性地给予正常食料（据体重不同，大鼠16-20g，小鼠2-3g），以使体重保持在正常进食大鼠的80%~85%。 2．第二天，迷宫各臂及中央区分撒着食物颗粒（每只4~5粒，直径约3~4mm）。然后，同时将4只动物置于迷宫中央（通往各臂的门打开）。让其自由摄食、探究10min。 3．第三天，重复第二天的训练。这一过程让动物在没有很强的应激条件下熟悉迷宫环境。 4．第四天起，动物单个进行训练：在每个臂靠近外端食盒处各放一颗食粒，让动物自由摄食。食粒吃完或10min后将动物取出。 5．第五天，将食物放在食盒内，重复前一天的训练，一天2次。 6．第六天以后，随机选4个臂，每个
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Barnes迷宫--学习记忆的行为学研究方法（4）
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
巴恩斯迷宫（Barnes maze）是美国学者Carol A Barnes1979年发明的用于检测动物空间记忆的模型。与水迷宫和放射臂迷宫类似，巴恩斯迷宫利用啮齿类动物避光喜暗且爱探究的特性而建立的。动物获得的强化是从一个光亮、敞开的平台上面逃往位于平台下面的一个黑暗、狭小的箱里。该箱称为目标箱。经过训练，动物学习并记忆目标箱的位置。该模型对动物的应激性刺激较小，既不像放射臂迷宫那样需要禁食，也不像水迷宫那样应激性强。因此，在记忆研究中较为常用。尤其适用于与应激相关的记忆研究以及基因敲除小鼠的行为表型研究。 （一） 实验设备 不同厂家生产的巴恩斯迷宫大体相同。这里介绍上海欣软信息科技有限公司研发的巴恩斯迷宫。它是由加强的医用有机板成的一个圆形平台，可旋转，直径122cm。平台周边有18个或40个等距离圆洞，分别用于大鼠和小鼠；洞的直径分别为10cm和5cm。其中一个洞（称为目标洞）与一暗箱（即目标箱）相联。其他圆洞则为空洞，不与任何物体相联。暗箱设置成抽屉式，便于从中取出动物。从平台表面看不见目标箱。迷宫抬高140cm。动物通过目标洞可逃至目标箱内。对于小鼠巴恩斯迷宫的设置，也有不同的考虑。例如，有的将迷宫直径缩短（如88cm），洞的数目也减少（例如12个），洞的直径则与上述相当。据认为，这样的设置有利于增加小鼠获得比率。但不管用哪种设置，实验操作都类似。通过训练，动物获得对目标洞的空间定位。 （二） 实验方法 1． 实验开始前一天，将动物单个从目标洞置于目标箱内适应4min。 2． 将动物置于迷宫中央的塑料圆桶（直径20cm，高27cm）内限制活动5s。 3． 移开圆桶，启动计时器，实验者在挡帘后进行观察。动物四肢均进入目标箱，则计为一次逃避（escape）,并让动物在箱内停留30s。每一动物一次最多观察4min。在此期间如果动物仍然找不到目标箱，则将动物从迷宫移开，放入目标箱内并停留30s。利用这一间隙清洁迷宫。动物每天训练两次，连续5~6d。 4． 从第二次训练开
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