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提取动物组织DNA的方法
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
【实验步骤】 1．组织块解冻，用生理盐水洗去血污，剪取约0.5g组织，剪小放入2.0ml离心管中，用FM-200P研磨45秒； 2．加入0.45ml TES混匀，再加入50ul SDS（10%），5.0ul蛋白酶K（20mg/ml），充分混匀后，于56°C保温4-6h，每2h摇1次。 3．放置到室温，加入等体积饱和酚（500ul），颠倒混匀，10000r/m，离心10m，分离水相和有机相，小心吸取上层含核酸的水相，到一个新的1.5ml离心管。 4．加入等体积酚：氯仿：异戊醇（25：24：1），颠倒混匀，10000r/m，离心10分钟，取上层转移到新的1.5/2.0ml离心管中; 5．加入等体积氯仿：异戊醇（24：1），颠倒混匀，10000r/m，离心10分钟，取上层清液到一个新的1.5/2.0ml离心管; 6．加入2.5倍体积的-20°C预冷的无水乙醇沉淀DNA，观察现象。 7．12000 r/m，离心10分钟，弃乙醇; 8．-20°C保存的75%乙醇洗涤，10000 r/m，离心5分钟，去乙醇，55°C干燥DNA; 9．加入适量TE溶解DNA（具体依DNA的多少而定），-20°C保存备用; 【注意事项】 1．抽提每一步用力要柔和，防止机械剪切力对DNA的损伤。 2．取上层清液时，注意不要吸起中间的蛋白质层。 3．乙醇漂洗去乙醇时，不要荡起DNA。 4．离心后，不要晃动离心管，拿管要稳，斜面朝外。
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离心机电机轴承的发热问题
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
众所周知，离心机的轴承是很重要的一部分，一般有经验的离心机高手在购买离心机的时候都问询问厂家关于轴承的一系列问题。 今天主要说说离心机轴承发热的问题，轴承发热缘由有几种，要细致情况细致分析，有可能是由于过载或者超载，有可能是散热风扇等现问题，还有可能是由于机械摩擦产生的热量，但主要问题是轴承能否正宗，有的用户为了低价而置办低价轴承，从而产生轴承发热，发烫，以致呈现轴承烧毁等等现象。因此首先强调要置办正宗（进口）轴承。第二，要留意坚持机械的润滑，选用优质高温锂基脂，锂基脂的好差也是轴承发热的另一个主要缘由。另外要以你细致的情况检查，假设是机械摩擦会伴随噪音，机械部件会有明显的磨损你说轴承有松动，那就应该是轴承呈现问题，需求改换轴承。建议置办正宗进口轴承。 离心机是属于高转速化工设备，高转速就需求用到好的轴承，优质正宗的轴承可以保证离心机的长期正常运转，运用寿命以致长达10多年。第三，离心机主轴同心度能否准确，正常情况下人们不太留意同心度，主轴同心度倾向大很容易构成轴承发热。 当然在这里分析了是主要的原因，还有一些原因就是要靠用户自己平时多加小心了。
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10种常见的水处理方法
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
1. 沉淀过滤法 这是一种最原始的过滤方法，它是依靠水中微粒杂质的自身重量下沉来达到分离的目的。常用于水中杂质颗粒较大的场所，如江河湖水的初步自然澄清过滤。 2. 蒸馏法 蒸馏法是把水加热，变成气体，分出混入气相中的低沸点成分或飞沫成分，低沸点气体放于大气中。不挥发性不纯物残留于液相中，成为浓缩液排出。如此把水精制成高纯度的水。 此法耗电耗水量很大，且使用时需有人看守，使用不方便，现已较少使用。 3. 薄膜微孔过滤（MF）法 薄膜微孔过滤法包括三种形式：深层过滤、筛网过滤、表面过滤。 深层过滤是以编织纤维或压缩材料制成的基质，利用隋性吸附或是捕捉方式来留住颗粒，如常用的多介质过滤或砂滤；深层过滤是一种较为经济的方式，可去除98%以上的悬浮固体，同时保护下游的纯化单元不会被堵塞，因此通常做为预处理。 表面过滤则是多层结构，当溶液通过滤膜时，较滤膜内部孔隙大的颗粒将被留下来，并主要堆积在滤膜表面上，如常用的PP纤维过滤。表面过滤可去除99.9%以上的悬浮固体，所以也可作为预处理或澄清用。 筛网滤膜基本上是具有一致性的结构，就象筛子一般，将大于孔径的颗粒，都留在表面上（这种滤膜的孔量度是非常精准的），如超纯水机终端使用的用点保安过滤器；筛网过滤微孔过滤一般被置于纯化系统中的最终使用点，以去除最后的残留微量树脂片、碳屑、胶体和微生物。 4、活性炭吸附法 活性炭依靠吸附和过滤作用主要去除水中的异色、异味、余氯、残留消毒物等有机物杂质。 5. 电渗析 渗析是一种物理现象。如将两种不同浓度的盐水，用一张渗透膜隔开，浓度高的盐水中的溶质如无机盐离子通过膜向浓度低的盐水中渗透，这个现象就是渗析。这种渗析是由于含盐量浓度不同而引起的，称为浓差渗析。因为是以浓度差作为推动力，扩散速度始终是比较慢的。如果要加快这个速度，就可以在膜的两边加一直流电极。电解质在电场的作用下，会加快迁移的速度，这就称为电渗析。 电渗析耗电量大，且渗析
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变压吸附（PSA）制氮浅析
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
变压吸附（PSA）制氮浅析 工作原理 市场上目前的供氮方式主要有液氮、瓶装氮、现场制氮。综合三种供氮方式，现场制氮是目前最经济、高效、节能的的一种供氮方式。现场制氮适合于用气量在1000 Nm3/h以下的用户。现场制氮的一种主要方式即是变压吸附（Pressure Swing Adsorption，PSA）制氮机。PSA制氮的原理主要是基于碳分子筛（Carbon Molecular Sieving,，CMS）对氧和氮的吸附速率不同，碳分子筛优先吸附氧，而氮大部分富集于不吸附相中。CMS是一种以煤为主要原料经过特殊加工而成的，黑色表面充满微孔的颗粒，是一种半永久性吸附剂（可再生使用）。它对氧和氮的分离作用主要基于这两种气体在碳分子筛表面上的扩散速率不同，O2动力学直径较小，气体分子扩散较快，较多地进入分子筛固相（微孔），N2动力学直径较大，气体分子扩散较慢，进入分子筛固相较少，这样在气相中就可得到氮的富集成份。因此利用CMS对O2和N2在某一时间内吸附量的差别这一特性，按特定的程序，结合加压吸附、减压脱附的快速循环过程（变压吸附），完成氧-氮分离，从而在气相中获得高纯度的N2。PSA制氮具有经济、高效、运行成本低、适应 性强、易于操作、安全方便等特点。由于CMS有一定的吸附容量，当吸附饱和时就需要再生，所以单吸附塔的吸附是间歇式的，为保证连续供气，采用双吸附塔并联交替进行吸附，一塔工作一塔再生，连续产生N2。 CMS对O2、N2的吸附特性 注：随着吸附压力的增加，O2、N2的吸附量都增加，但是O2的吸附增加量远远高于N2。 工艺流程 空气经空气过滤器清除灰尘和机械杂质后进入空气压缩机，压缩至所需压力，经严格的除油、除水、除尘净化处理，输出洁净的压缩空气，目的是确保吸附塔内分子筛的使用寿命。装有碳分子筛的吸附塔共有二个，一个塔工作时，另一个塔则减压脱附。洁净空气进入工作吸附塔，经过分子筛时氧、二氧化碳和水被其吸附，流至出口端的气体便是N2及微量的氩和氧。另一塔（脱附塔）使已吸附的
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原代细胞周期测定的原理和BrdU方法
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
原代细胞周期测定的原理和BrdU方法 原理: 细胞周期:细胞一世代所经历的时间从一次细胞分裂结束到下一次分裂结束一个周期。细胞周期反应了细胞增殖速度。单个细胞的周期测定可采用缩时摄影的方法，但它不能代表细胞群体的周期，故现采用其他方法测群体周期。 测定细胞周期的方法很多，有同位素标记法、细胞计法等。 BrdU（5溴脱氧尿嘧啶核苷）加入培养基后，可做为细胞DNA复制的原料，经两个细胞周期后，细胞中两条单链均含BrdU的DNA将占l/2，反映在染色体上应表现为一条单体浅染。如经历了三个周期，则染色体中约一半为两条单体均浅染，另一半为一深一浅。细胞如果仅经历了一个周期，则两条单体均深染。计分裂相中各期比例，就可算出细胞周期的值。 试剂 1、仪器、用品：同常规细胞培养 2、试剂：BrdU（1.0mg/ml），甲醇、冰醋酸，Giemsa染液，秋水仙素，2×SSC液 BrdU方法 1、原代细胞生长至指数期时，向培养液中加入BrdU，最终浓度为10μg/ml。 2、44小时加秋水仙素，使每ml中含0.1μg。 3、48小时后常规消化细胞至离心管中，注意培养上清的漂浮细胞也要收集到离心管中。 4、常规染色体制片。 5、染色体玻片置56℃水浴锅盖上，铺上2×SSC 液，距紫外灯管6cm处紫外照射30分钟。 6、弃去2×SSC液，流水冲洗。 7、Giemsa液染色10分钟，流水冲洗，晾干。 8、镜检100个分裂相，计第一、二、三、四细胞期分裂指数。 9、计算：细胞周期（Tc）=48/{（M1+2M2+3M3+4M4）/100}（小时） 附： （1）BrdU配制：BrdU 10mg十双蒸水10ml 4℃下避光保存。 （2）2×SSC配制：NaCl 1.75克，柠檬酸三钠•2H2O 0.88克，加水至100ml，4℃保存。
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体外三维基质中原代CD34+细胞的扩增
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
体外三维基质中原代CD34+细胞的扩增 试剂和材料： 1. 培养基：含2mmol/L的左旋谷氨酰胺的IMDM，添加1%牛血清白蛋白，10μg/ml胰岛素，0.1mmol/L 2-巯基乙醇，50U/ml青霉素和50μg/ml链霉素； 2. 48孔培养板； 3. 0.05%胰蛋白酶，含EDTA； 4. 纤维粘连蛋白（fibronectin）包被的细胞基质支架； 5. 细胞因子（干细胞因子，IL-6，IL-3，Flt-3配体）； 实验方法： 1. 用含细胞因子的培养基重悬细胞（100ng/ml干细胞因子，20ng/ml IL-6，20ng/ml IL-3和100ng/ml Flt-3配体）； 2. 将2.5×105 CD34+细胞/ml接种到纤维粘连蛋白包被的48孔培养板； 3. 每周两次半量更换新鲜培养基； 4. 两周后收集细胞； （1）250g离心10min，从三维细胞基质支架中收集非贴壁的细胞； （2）贴壁的细胞用0.05%胰蛋白酶/EDTA孵育细胞基质，37℃孵育30min，随后250g离心10min；
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饲养层细胞共培养体外扩增原代CD34+细胞
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
饲养层细胞共培养体外扩增原代CD34+细胞 试剂和材料： 1. MSCs培养基； 2. 6孔培养板； 3. 丝裂霉素C，100μg/ml； 4. 共培养的培养基：IMDM添加10%FBS，100U/ml青霉素和100μl/ml链霉素； 5. 细胞因子（干细胞因子，IL-6，Flt-3配体，促血小板生成素）； 实验方法： 1. 将脐带血来源的间充质干细胞（CB-MSCs）作为饲养层细胞，用MSCs培养基重悬CB-MSCs，细胞浓度为5×104个细胞/ml； 2. 将CB-MNCs接种到6孔板； 3. 每周两次半量更换新鲜培养基； 4. 当CB-MNCs达到90%以上汇合时，用10μg/ml丝裂霉素C处理，37℃ 2.5h； 5. 用无血清IMDM将CB-MNCs洗两遍； 6. 按1×104/ml CD34+细胞重悬于含细胞因子的共同培养基（100ng/ml干细胞因子，100ng/ml IL-6，50ng/ml Flt-3配体，10ng/ml促血小板生成素）； 7. 将CD34+细胞接种到CB-MSCs饲养层细胞上； 8. 每周两次更换1/4培养基； 9. 2周后，收集未贴壁细胞；
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深冷法制氮与变压吸附（PSA）法制氮比较
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
深冷法制氮与变压吸附（PSA）法制氮比较 随着工业的迅速发展，氮气在化工、电子、冶金、食品、生物、医药等领域获得了广泛的应用，氮气的需求量逐年大幅增加。氮气的化学性质不活泼，在平常状态下表现为很大的惰性，不易与其他物质发生化学反应。因此，氮气在电子、化工、食品、生物、医疗中广泛的用来作为保护气和密封气，一般保护气的纯度要求为99.99%，有的要求99.998%以上的高纯氮。液氮是一个较方便的冷源，在食品、医疗、生命科学等方面得到越来越普遍的应用。 纯净的氮气无法从自然界直接汲取，但是可以通过分离空气获得。现有的空气分离氮气方法包括：深冷法、变压吸附法(PSA)、膜分离法。本文主要讨论深冷法和PSA法制氮。 原理 PSA法制氮是以空气为原料，以碳分子筛（CMS）作为吸附剂，运用变压吸附原理，利用碳分子筛对氧和氮的选择性吸附而使氮和氧分离的方法。空气经空气过滤器清除灰尘和机械杂质后进入空气压缩机，压缩至所需压力，经严格的除油、除水、除尘净化处理，输出洁净的压缩空气，目的是确保吸附塔内分子筛的使用寿命。装有碳分子筛的吸附塔共有二个，一个塔工作时，另一个塔则减压脱附。洁净空气进入工作吸附塔，经过分子筛时氧、二氧化碳和水被其吸附，流至出口端的气体便是氮气及微量的氩和氧。另一塔（脱附塔）使已吸附的氧气、二氧化碳和水从分子筛微孔中脱离排至大气中。这样两塔轮流进行，完成氮氧分离，连续输出氮气。PSA制取的氮气纯度为95%-99.9%，假如再经过氮气净化设备处理，得到的高纯氮气纯度可达99.9995%。目前PSA制氮最大的生产能力为3000 Nm3/h。 深冷法制氮是一种传统的制氮方法，已有近几十年的历史。它是以空气为原料，利用液氧和液氮的沸点不同（在1大气压下，O2的沸点为-183℃，N2的为-196℃），通过液态空气的精馏，使它们分离来获得纯氮，同时也可以获得纯氧。空气经空气过滤器清除灰尘和机械杂质后进入空气压缩机，压缩至所需压力，然后送
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ELISA的概念、原理、操作步骤
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
ELISA是酶联接免疫吸附剂测定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。此项技术自70年代初问世以来，发展十分迅速，目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。 (一) 原理 ELISA是以免疫学反应为基础，将抗原、牽9体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行，每加入一种试剂孵育后，可通过洗涤除去多余的游离反应物，从而保证试验结果的特异性与稳定性。在实际应用中，通过不同的设计，具体的方法步骤可有多种。即:用于检测抗体的间接法(图a)、用于检测抗原的双抗体夹心法(图b)以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。比较常用的是ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法。 (二) 操作步骤 方法一 用于检测未知抗原的双抗体夹心法: 1. 包被：用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg／ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。(简称洗涤，下同)。 2. 加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔)。 3. 加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5～1小时，洗涤。 4. 加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分钟。 5. 终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。 6. 结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“ "、“-"号表示。也可测O·D值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处，以空白对照孔调零后测各孔O·D值，若大于规定的阴性
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金属套玻璃高效雾化器检验规程及标准
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
金属套玻璃高效雾化器检验规程及标准 火焰原子吸收光谱分析用 一. 检验工具： 空气流量计、压力表、原子吸收光谱仪、无油空气压缩机、乙炔气、秒表、量筒（10mL）、蒸馏水（或纯净水）、Cu标液。 二. 检验规程及标准： 1. 取出雾化器，检查外观：玻璃部分不应有损坏和裂纹，金属焊接部分光滑没有沙眼， 钢针及其它粘接部分牢固，钢针没有弯曲和松动现象，尾部侧面不可有漏气现象。所配进液毛细管（共5支）是否齐全。 2. 将气源管与雾化器进气支管连接好，拧紧锁紧螺帽，不可有漏气现象。将空压机输出压力调整至原子吸收生产厂家设计规定的压力。 3. 空气流量的检查：用我公司提供的检查装置接上雾化器，用右下开关调整压力至原子吸收厂家设定压力，此时再看流量计，应为原子吸收厂家设定数值，上下出入在5％为合格。如不合格请送回厂家更换，用户无法调整。 4. 打开气源，将取样管插入蒸馏水中，将雾化器用手拿着使空气支杆方向与在原子吸收上的实际进气方向相同，吸喷蒸馏水，看喷雾状态，应散开后向前喷，散开面应大于8cm，雾应从3400（除去撞击球支杆位置约200）范围向外喷出，各个方向喷出量应基本相同。如喷雾角度或雾化不好：可转动撞击球角度，必须拿住撞击球根部(有胶圈部位)转动，否则容易造成连接支杆的折断，撞击球可在连接杆下方90度角内任意调节，（保证撞击球支杆在下方，使水珠可顺利排出），并将撞击球顶紧雾化器喷口，看喷雾状态，至满意为止。 5. 喷雾时雾化器发出的声音应一致，不可有突、突、突、突间断声音，如有间断声音请检查进样管是否插牢（插牢进样管排除）、进样管是否有破漏之处（更换进样管排除）。如仍不能排除，此雾化器为粘接不牢漏气，属不合格产品，由生产厂家更换。 6. 提升量的检查：将进样管插入10mL量筒内，量筒内灌入蒸馏水至刻线，测量提升量，从开始喷雾计算，一般情况雾化器的提升量在4-6mL/min，如提升量小了，可更换进样管，或剪短进样管（减小进样阻力），
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非接触式分液技术
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
非接触式分液技术 探讨生物传感器表面基材和试剂间的相互作用对移液结果的影响 在生物传感器表面涂上生物活性基质较为常见。但如低至微升或次微升量，则难度会有增加。如需要在一个特定形状的传感器上均匀分配基质而又不能超出边界，会更加复杂。总之，这并不是件容易的工作！ 非接触式小容量分配的最大优点之一就是分液针不与基板相接触，这样分配质量不受基板的影响。随着非接触式分配应用于更多非标准用途（如医学诊断），且既定应用（如基因组学）开始采用非标准材料作为基板，需要更多地考虑基材对分液形态的影响作用。 对于从非接触式移液器（不与基板相接触）中分配出的液滴来说，有很多材料属性都对其具有潜在的影响作用。最显著的例子是：基板的疏水性/亲水性，导电性及弹性。在医疗设备或生物传感器的生产中，经常使用一些特殊的基板。这需要将试剂放置于基板的一个特定位置。很多时候要求液滴之间间隔很小。不过，需要滴液布满一个基板的指定区域而打破球形状态也很普遍。 不管哪种方式，都必须格外注意表面特性对试剂分配的影响作用。传统“touch off”或“near touch off”移液器受基板状况影响很大；非接触式移液器虽不再需要接触基板，但仍存在基板/试剂的相互作用，且要遵循物理定律！ 疏水性/亲水性 水基材料会吸附亲水表面物质，而排斥疏水表面物质。对于非接触式分液来说，则体现在所得到的滴液的圆度上，这可通过测量其接触角（滴液与表面相接触的所成角）来量化。对于疏水性极高的表面，接触角会接近90度。而对于亲水表面，接触角会接近0度，滴液会有效地扩散在目标面上。 按照下图所示（图1），您可看到一颗被分配于一个较为洁净的玻璃面上的液滴。所得到的液滴既不扩展也不呈现显著的90度角。用浓盐酸对表面腐蚀一个晚上，可使表面变得更亲水。所得到的液滴会相当扁平（见图2）并扩散于更大的表面面积。相反，用疏水溶液（本例中为Rain-X™）处理表面，可形成非常好的
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智能真空泵的含义及其优越性！
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
什么是“智能真空泵” 所谓“智能真空泵”，顾名思义就是智能化、自动化的真空泵。一般特指集成了传感器、真空表、单片机等监控系统的微型真空泵|小型真空泵|微型气泵，能对真空泵关键参数如“真空度(负压)”、“流量”等进行实时、自动调整，从而完成一般要构建一个较复杂系统，才能完成的如“真空保压”、“自动定时停机、启动”、定时定量“真空抽滤”等的多种功能。 跟大型真空泵动辄几十、几百公斤的重量和庞大的体积相比，智能真空泵重量、体积都要小得多，甚至可以说是便携式；因而常常也被叫做“智能真空仪”、“台式真空泵”、“自动真空泵”、“便携式真空泵”。 【特点】 (1)可以调节实际工作中需要的真空度，可设定并通过集成的数字液晶面板，“实时”显示出当时的真空度(负压)值； (2)流量可以进行大小调节； (3)配备高灵敏度的进口传感器，优质流量调节阀门及精密控制电路，来完成“自动调节”功能，大大节省了开发人员的时间、精力； (4)内置低干扰、长寿命微型真空泵；配合微型气泵专用消音系统及独立减震系统，确保智能真空泵能长时间、低噪音、可靠的工作； (5)核心部件为一台微型真空泵，所以继承了微型真空泵无油无污染，可以连续24小时运转的优点，属于名副其实的干式真空泵，所以无需维护，不用加润滑油和真空泵油；智能真空泵背面 (6)交流220V供电，即插即用 【详细介绍及实例】 这种智能真空泵是通过独特的三种工作模式：区间、定时、极限，来达到自动调节真空度和流量目的的： 1.区间工作模式 可设定所需真空度的上限和下限两个数值，当泵工作达到真空度上限值时就会自动停机，当真空度跌落至下限值时泵就自动启动。 应用范围：对密闭容器进行真空保压等 实例：假如用型智能真空泵(它的最大负压-80kPa)，来对一个密闭容器进行“真空保压”，使之内部负压始终维持在-60kPa左右，则可设定上限为-55kPa，下限为-65kPa，期间容器内负压到达上限，
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HPLC设备的螺母、套圈系统
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
事实上，在分析仪器世界里，我们通常所说的“配件“是指一个由螺母和套圈组成的系统。 最终选择在您的系统中使用哪个螺母和哪个套圈将由一系列的参数决定: 1.接收口的螺纹 2.接收口的几何形状 3.所使用的管道尺寸和类型 4.端端口的制造材料 5.预期的压力值 ……以及一些其它参数.根据所有这些因素.让我们看看是否可以更清楚地表述配件。 螺母 配件系统的两个主要组成部分之一叫做螺母。螺母是用来提供驱动力使套圈密封。 螺母通常由头部和螺纹部分组成螺母头部具有几种几何形状(例如滚花形、六角形和方形)在紧固过程中起到辅助作。用螺纹部分使螺母与接收端口良好的匹配。让我们进一步对每个部分进行详细讨论。来帮助您辨别使用何种产品.以及还有哪些其他产品可选 螺纹 绝大多数螺母具有“外螺纹”就是说螺纹在螺母的外部。然而有些螺母却具有“内螺纹”也就是螺纹位于螺母的内部一通常叫做“盖形螺母”或“内螺纹螺母”。 由于绝大多数的螺母具有外螺纹让我们集中考虑这种螺母的几何形状。通常用两个主要数据来描述配件上的螺纹。第一个数据告诉我们螺纹的直径。第二个数据描述螺纹之间的距离。即螺距。以下是一个简单的示例: 在低压流体输送中应用最广的一种螺纹是1/4-28。注意这里用连字符分开的两个数据。现在，让我们应用以上说明，看看是否能确定一些有关这类螺纹的基本信息。 螺纹编号的第一个数据是“1/4”。由于我们知道这个数据代表的是螺纹直径我们有了第一个线索。在这种情况下编号的测量单位是英寸因此这就表示螺纹的直径是四分之一英寸。螺纹的直径是从螺纹的一个顶部，穿过整个螺纹向另一相反端的顶部进行测量的。换言之我们在寻求螺纹的最大直径在螺纹标注中的另外一个数据并不那样明显。您觉得它表示什么呢？记住，这个数据表示螺纹之间到底有多近。 想到了，好吧，如果您认为那表示在配件上共有28条螺纹您已经相当不错啦!但不幸的是，那不是正确答案。在这种
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等密度离心法去除红细胞和死细胞
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
等密度离心法去除红细胞和死细胞 器材和试剂： 所有直接接触细胞的用品和试剂必须无菌。 1. 标注体积刻度的试管（圆锥形底）； 2. 巴斯德吸管（短型和长型）； 3. 10ml刻度吸管和洗耳球或移液装置； 4. 台式离心机； 5. 淋巴细胞分离液或类似试剂； 6. 培养基； 实验方法： 1. 重悬细胞使之达到5×106—107个/ml的高浓度。在一个离心管中加入10ml淋巴细胞分离液，用巴斯德吸管或10ml移液管小心将5ml的原代细胞悬液加于淋巴细胞分离液面上。将容器倾斜一个角度，沿容器壁慢慢地将细胞悬液滴下，而不是直接滴到淋巴细胞分离液表面。目的是在两种液体之间得到一个清晰的界面，以便更好地分离； 2. 不制动1000r/min离心试管20min（注：离心时缓慢地减速可使淋巴细胞分离液与培养基之间形成清晰的界面）； 3. 从离心机中小心地取出容器，观察两液面之间的界面，可见一乳状黄色细胞带。红细胞和死细胞形成沉淀沉于容器底部； 4. 用一个巴斯德吸管吸出界面可见的细胞层，转入一个离心管； 5. 向收集的细胞中加入新鲜培养基并混匀。1000r/min离心5min，重复两次，洗去细胞表面的淋巴细胞分离液； 6. 将细胞重悬于已知体积的培养基中，进行细胞计数和活力测定；
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急速裂解法去除红细胞
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
急速裂解法去除红细胞 器材和试剂： 所有直接接触细胞的用品和试剂必须无菌。 1. 标注体积刻度的试管（圆锥形底）； 2. 巴斯德吸管（短型和长型）； 3. 台式离心机； 4. 培养级纯净水； 5. 2×Hanks平衡盐溶液； 6. 储存培养基，含10%血清； 实验方法： 1. 1000r/min离心原代细胞悬液5min，弃上清； 2. 向细胞沉淀中加入10ml培养级水，并用移液管轻轻来回吹打数次以重悬细胞（注：不同细胞的抗低张能力不同，控制暴露时间低于15s）； 3. 迅速加入等体积的2×Hanks平衡盐溶液恢复张力，用巴斯德吸管轻轻混匀细胞悬液； 4. 再次1000r/min离心5min，检查红细胞沉淀。如果红细胞仍大量存在，重复该步骤。否则在储存培养基中重悬洗涤过的细胞； 5. 计数及检测细胞活力后，放培养箱培养；
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