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沙门氏菌检测实验（实验介绍,材料和试剂,检验程序,操作步骤,细菌类型,实验结果）
作者：德尔塔 日期：2022-03-30
一、沙门氏菌测试介绍 沙门氏菌测试检测实验中沙门菌属是由符合肠杆菌科和沙门菌族进行定义的，是由能运动的细菌组成。该实验知识主要介绍了食品中沙门氏菌的检验方法，该检测方法同样适用于航空食品的检验。 二、沙门氏菌测试材料和试剂 1、移液器（1ml，10ml），恒温培养箱（36±1℃，42℃），冰箱，匀浆器，振荡器，培养皿，稀释瓶，天平，显微镜，接种棒等。 2、生化试剂和培养基 蛋白water水，缓冲蛋白胨水（BP），靛蓝基质试剂，尿素琼脂（pH 7.2），四硫酸钠纯净绿（TTB）富集液，氯化镁孔雀石绿富集液，三糖铁琼脂，亚硒酸胱氨酸（SC）富集液，亚硫酸铋琼脂（BS），糖发酵管，SS琼脂，氰化钾（KCN）培养基ONPG培养基，半固体琼脂，DHL琼脂，HE琼脂，WS琼脂，，氨基酸脱羧酶测试培养基，丙二酸钠钠，沙门氏菌因子血清：26种类型用于初步分型； 57种类型用于进一步键入； 163种类型用于详细键入。 序号 产品 CAS号 货号 备注 1 90*15mm培养皿 FM-90-X 2 蛋白胨 68308-36-1 SS6091 3 氯化镁孔雀绿肉汤（MM） PYJH50136 4 四硫磺酸盐煌绿增菌液（TTB肉汤） PYJH50538 5 亚硒酸盐胱氨酸（SC）增菌液 PYJH51513 6 亚硫酸铋琼脂（BS） PYJH50134 7 DHL琼脂/胆硫乳琼脂（DHL） PYJH50131 8 HE琼脂（HE） PYJH50137 9 WS琼脂 PYJH50145 10 SS琼脂 PYJH51791 11 三糖铁琼脂（TSI） PYJH50993 12 尿素琼脂（pH7.2） PYJH50627 13 氰化钾（KCN）培养基 151-50-8 HCC340707 14 氨基酸脱羧酶 15 ONPG培养基
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T7 DNA聚合酶测序技术（实验简介,实验步骤,注意事项,实验所需试剂）
作者：德尔塔 日期：2022-03-30
一、T7 DNA聚合酶测序技术实验简介： T7 DNA聚合酶测序实验中，T7 DNA聚合酶是第一批同时拥有两种活性的转移酶类，分别是5'→3'聚合酶活性与单链及双链3'→5'核酸外切酶活性，因此如果预先使用适当的方法处理T7 DNA聚合酶，则实验中的3'→5'核酸外切酶的活性也会随之大大降低，此时经处理后修饰完成的T7 DNA聚合酶也称为T7测序酶。通过使用T7测序酶获得的测序数据在每个碱基位置具有相对均匀的配对参与。因此，通过放射自显影获得的结果相对清晰并且易于辨别。 T7测序酶具有高聚合速度和高度连续性。因此，该酶在使用中不同于Klenow片段和逆转录酶。它几乎没有错误终止，整个反应可在短时间内完成，并且不需要其他反应（追赶步骤）。然而，对于具有紧密二级结构的区域，错误的终止反应将导致读取序列的困难。如果遇到这些情况，则应使用某些高温DNA聚合酶，例如Promega的测序级Taq DNA酶。利用高温DNA聚合酶独特的耐热性，测序反应可以在不利于二级结构形成的高温条件下进行。 二、T7 DNA聚合酶测序技术实验步骤 （一）模板准备 1. M13单链模板的制备： 转化为合适的大肠杆菌宿主菌株并接种在含有指示剂（例如X-gal / IPTG）的中上后，含有M13重组体的细胞将显示出无色的“噬菌斑”，实际上已被感染。细胞不会被溶解或杀死通过噬菌体。出现噬菌斑是因为被感染的细菌比周围未感染的细菌生长慢。从无色噬菌斑获得的感染细胞可通过培养测序反应所需的单链模板生产。 （1）将培养过夜的宿主细胞（例如NM522或JM101）用3ml TYP肉汁中1：100稀释。在37°C剧烈振荡1小时后，细胞进入早期对数期。此时，用滴管将含有重组M13（与琼脂）的合适噬菌斑转移到细胞中中。 （2）在37°C下剧烈振摇（300 rpm）孵育6小时。 （3）将细胞中转移到两个1.5ml 离心管中，并以12000g离心15分钟。将上清液转移到新的离心管中并离心15分钟。小心取出1-1.2ml上清液（注意不要触摸沉淀物），然后转移到新的离心管中。 （4）在上清液中加入0.25体积的3.75M
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植物病原物分离，培养与移植（,实验简介,实验步骤,注意事项,实验所需试剂）
作者：德尔塔 日期：2022-03-30
一、植物病原物的分离，培养与移植实验简介： 植物病原物的分离，培养与移植实验要求了解植物病原体菌，细菌，病毒和线虫的分离，培养并且接种的一般方法，并掌握其基本原理；了解植物传染病研究中常用的接种方法，比较不同接种方法在疾病发展过程和外部环境上的差异。 二、植物病原物的分离，培养与移植实验步骤 （一）病原菌的分离和培养 植物病原微生物分离和培养工作应在专门的无菌手术室或超净工作台中进行，但也可以在干净安静的室内进行。工作时在桌面上铺一块湿纱布，然后将所有工作用具放在湿纱布上。尽量少在室内四处走动，以减少空气流通，减少污染。所选的分离材料应尽可能新鲜，以减少腐生细菌混合的机会。从患病组织的边缘靠近健康组织可以减少污染。同时，这部分病原生物处于相对活跃的状态，生长迅速，易于成功分离。 植物病原菌的分离有组织分离法和稀释分离法两种，在病组织上产生大量孢子的病原菌以及病原细菌的分离都可用稀释分离法。 1组织分离方法请遵循以下步骤： （1）培养皿的准备：取一块无菌的培养皿，放在湿纱布上，在盖子上注明分离的日期，材料和分离者的名字。 （2）培养皿平板制备：用无菌操作法向培养皿中加入25％乳酸1－2滴（减少细菌污染），然后将熔化而冷至45℃左右的马铃薯琼胶中一管倒入培养皿中，轻轻摇动使成平面（分离细菌时则不能加乳酸）。 （3）切开小块患病组织（叶斑病）：取新鲜的病叶，选择典型的单个病斑，然后用剪刀或手术刀从病斑边缘切小块（每侧约3个） -5毫米长）。组织几个街区。 （4）表面消毒：将患病小块的组织浸入70％酒精中几秒钟后，按照无菌方法，将患病组织移入0.1％汞升的溶液中1-3分钟，然后将其置于无菌状态水连续冲洗三遍。您也可以使用漂白粉片（1-2片），研磨后添加10ml无菌水，并灭菌5-10分钟。用蘸有70％酒精的脱脂棉擦拭患处，水果，块茎和树枝等组织内部的病原菌，并用火焰将表面酒精燃烧掉，重复2-3次即可表面消毒。 （5）用无菌操作法将
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DNA的乙醇沉淀（DNA,实验简介,实验材料及试剂,实验步骤,实验所需试剂）
作者：德尔塔 日期：2022-03-30
一、DNA的乙醇沉淀实验简介： DNA的乙醇沉淀实验中乙醇可以消除核酸的水合层并暴露带负电的磷酸基团。Na可以将抗衡离子与这些带电基团结合，以减少沉淀形成部位多核苷酸链之间的排斥。当阳离子量足以中和暴露在磷酸残基的电荷时，形成乙醇沉淀。 二、DNA的乙醇沉淀实验所需材料及试剂： 冷100％乙醇（-20°C）、DNA样本、3M醋酸钠缓冲液、4°C微量离心机（在冷藏室中正常的微量离心机工作正常、乙酸钠缓冲液 三、DNA的乙醇沉淀实验步骤： 1.将DNA转移到一个容器中，使其占总体积的四分之一（例如：一个500 微升试管中的DNA溶液应不超过125 微升） 2.加入十分之一的乙酸钠缓冲液以平衡离子浓度 3.加入两倍体积预冷的无水乙醇；在-20°C的冰箱中放置一小时 4.在4°C微量离心机中以最高速度离心样品15分钟 5.用1 毫升微量移液器吸取上清液。重新离心，然后用200 微升移液器取出其余的 6.加入200 微升冷的70％乙醇；在4°C的离心机中离心5分钟 7.用200 微升移液器移出上清液。在37°C水浴中蒸发掉残留的乙醇 8.将沉淀转移到所需体积的水或TE缓冲液中。 四、DNA的乙醇沉淀实验所需试剂清单： 序列 产品名 货号 CAS 备注 1 10ul白吸头(灭菌) FT-10-H 2 200ul黄吸头 FT-200 3 1.5ml尖底连盖离心管 F-EP015 4 无水乙醇 JT26000 64-17-5 5 乙酸钠缓冲液 HC1966 6 醋酸钠缓冲液 HC1484 以上为DNA的乙醇沉淀实验，实验请选用高质量试剂。
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人类基因组DNA提取（实验简介,实验所需试剂,实验步骤,注意事项,实验所需试剂清单）
作者：德尔塔 日期：2022-03-30
一、人类基因组DNA提取实验简介： 人类基因组DNA提取实验中所用细胞裂解液裂解细胞膜，收集细胞核，添加SDS破坏核膜，使用蛋白酶K将核蛋白降解为小片段，然后从DNA上解离，通过苯酚-氯仿提取去除蛋白质，然后用无水乙醇，75。用％乙醇洗涤DNA沉淀物，真空干燥，并溶解在TE中以获得高分子量DNA。 二、人类基因组DNA提取实验所需试剂： 1.5ml Ep离心管,蛋白酶K溶液,NaAc,1000ul蓝吸头 三,人类基因组DNA提取实验步骤： 1.细胞分裂和RNase /蛋白酶K消化 ①将100微升抗凝全血放入1.5ml Ep离心管中，然后加入100微升裂解物和20微升RNaseA /蛋白酶K溶液，来回吸打混合，并在55°C孵育35min将离心管倒置来回几次直到溶液是水溶性的。 ②加入10微升的3M NaAc（pH 4.8），然后加入1250微升的结合缓冲液，充分摇匀以在12,000 rpm下离心30秒。 2. DNA与吸附柱结合 用移液管转移上清液，并将其加入离心吸附柱（设置收集管）中，静置1min以离心12,000 rpm30秒，然后将废液丢弃在收集管中。注意：待转移的上清液约为1300微升，而离心吸附柱的容量约为650微升，因此每次需要将650微升的上清液转移至离心吸附柱，进行离心处理，将废液丢弃在收集管中，然后重复实验操作步骤3。 3. DNA的纯化 ①在离心吸附柱（设置收集管）中加入600微升洗涤缓冲液（洗涤缓冲液），以离心12,000 rpm30秒。 ②重复步骤4一次，以离心12,000 rpm3分钟以完全除去洗涤缓冲液。 ③小心取出离心吸附柱，弃去收集管，将离心吸附柱放入干净的1.5ml Ep离心管中，向离心吸附柱添加50微升分离缓冲液（洗脱缓冲液）（代替缓冲液，必须添加在离心吸附柱的中央）静置1min,以离心12,000 rpm30秒。 ④取出装有提取的基因组DNA的Eppendorf离心管。 4. DNA的琼脂糖凝胶电泳 取8-10微升基因组DNA，加入2微升上样缓冲液，充分混合，将样品加入1％琼脂糖凝胶斑点中，然后进行电泳。 四,人类基因组DNA提取实验所需试剂清单： 序列 产品名 货号 CAS号 备注
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比色皿选择与使用（比色皿,实验简介,实验步骤,注意事项,所需试剂）
作者：德尔塔 日期：2022-03-30
一、比色皿选择与使用实验简介： 比色皿选择和使用过程中，引起实验较大误差的原因是比色皿不干净，但最近发现，引起实验较大误差的原因不仅仅是比色皿不干净，同时比色皿的选择不当也会导致不可预测的错误，所以作此总结，讲解如何正确的选择比色杯，以及使用比色杯过程中的清洗方法和需要注意的事项。 二、比色皿选择与使用实验步骤 （一）.选择正确的比色皿 比色皿的透光表面由的原材料是可以透射所使用的波长范围内的光的材料。工作于200-350nm的比色杯更加适用于紫外线区域，透明表面的石英比色杯必须由石英或熔融石英制成。石英比色皿可以在紫外线区域使用，并且可以用于可见区域，但价格通常较贵，因此应根据使用的波长选择比色杯。如果不使用紫外线区域，请使用普通的玻璃比色杯。不同材料所制成比色皿使用区域不同，如由普通硅酸盐光学玻璃制成的透光比色杯，更适合用于350nm至1000nm的可见光区域内。 （二）.正确使用比色杯 使用比色杯时，两个透光表面必须完全平行并垂直放置在比色杯支架中，以确保在测量过程中入射光垂直于透光表面，以避免光反射损失并确保固定的光路。试管通常是长方体，其底部和两侧是磨砂玻璃，而其他两侧则由光学玻璃制成的透光表面制成。因此，使用时应注意以下几点： 1拿住比色杯时，只能用手指触摸两侧的毛玻璃，并避免触摸光学表面。 2请勿使光学表面接触坚硬或肮脏的物体。盛放溶液时，其高度应为比色皿的2/3。如果光学表面上留有残余液体，首先使用滤纸进行轻轻吸收，然后再用丝绸/镜纸进行擦拭，擦去多余残留液体。 3需要注意比色杯中不能长时间的存放任何一种含有会腐蚀玻璃的物质的溶液。 4使用比色杯后，应立即用水冲洗。如有必要，可以将其浸泡在1：1盐酸中，然后用水将使用后的比色皿冲洗干净。 5需要注意的是比色皿禁止靠近、置于火焰或电炉上，禁止置于干燥箱中进行加热及烘烤。 6如果在测量过程中对比色皿有任何疑问，可以对其进行自我测试。可以将波长选择设置为实际
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色谱柱的选择（实验简介,实验步骤,注意事项,所需试剂）
作者：德尔塔 日期：2022-03-30
一、色谱柱的选择简介： 色谱柱的选择通常根据相似相容的原理进行色谱柱的选择，例如极性色谱柱对应极性物质，而色谱柱的规格如内径，柱长与固定液膜厚等参数，决定了这根色谱柱的分析能力。 二、色谱柱的选择实验步骤 （一）.使用氨基柱时： 应该注意的是，氨基色谱柱的键合官能团氨基丙基比C18和C8色谱柱的键合官能团C18和C8更容易水解，因此，首先必须准备好其使用寿命短，尤其是当使用条件在相反的条件下。在反相条件下使用时，此时影响最大的因素是PH值的范围，因此必须做好PH值范围的控制，PH值与水解成反比，当PH值越低时，水解的风险也就越。因此，在使用后以及准备长时间保存时，必须将氨基柱清洗并保存在纯净的水中。有机溶剂是良好的维护措施。 有一种情况是，当使用氨基色谱柱分析酸性物质（例如果汁中糖分）时，酸性物质的存在意味着质子的存在，质子可能会使带有轻微负电荷的氨基官能团质子化，从而导致使用一段时间后，某些类型的分析物的保留特性发生了变化，或者柱效降低了。这时建议用5-10倍于含有0.5-1.0％NH3的50-50乙腈-水溶液的色谱柱体积洗涤色谱柱，同时在后续再分析此类酸性分析物时在流动相中添加少量氨水，例如0.1％。 3.使用氰基柱时： 正相色谱柱通常用于正相色谱，但也可以用于反相色谱（即，正相色谱柱使用反相条件）。当将其用于正相色谱法时，可以使用低极性流动相，例如正己烷，而当用于反相色谱法时，作用于甲醇或水的强极性流动相，因为疏水性相对较低，并且由于具有腈基，因此与ODS（反相）相比具有不同的选择性。当用作反相时，适用于分离在ODS上分离时间过长的组分。 （三）.使用苯基柱时： 它属于正相色谱法和反相色谱法。它主要用于含苯基物质，属于一种特殊的色谱柱。当用于正相色谱时，可以使用低极性流动相，例如正己烷，请参阅相应的硅胶柱。当用于反相色谱时，可以使用强极性的甲醇或水的极性流动相，请参阅相应的C18柱。洗涤方法与氰基柱相同。 三、色谱柱的选择实验
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植物叶片的光合作用速率测定实验 （实验介绍,实验设备和试剂,实验步骤,实验计算结果）
作者：德尔塔 日期：2022-03-30
一、植物叶片的光合作用速率测定实验介绍 植物叶片的光合作用速率测定是植物生理学的基础研究方法之一，在作物产量，作物生态，新品种育种以及光合作用的基本理论等方面具有广泛的应用。 根据光合作用的一般反应式： C022H2O→（CH2O）O2H2OC022H2O→（CH2O）O2H2O 原则上，光合强度可以由任何反应物的消耗速率或产物的生产速率表示。由于植物中的水分含量很高，并且植物随时都在不断吸收和流失水分，因此水参与了许多生化反应，即体内的水分变化频繁，因此实际上不可能通过改变水分含量来测量光合速率。在科学实验中，可以使用以下方法测量和表达光合速率（表9-1），其中最常用的方法是：改进的半叶法，红外CO-2分析法和氧电极法。以下介绍主要介绍“改进的半叶方法”。 改进的半叶法原理： 在同一片叶子的中脉两侧，其内部结构和生理功能基本相同。叶子的一侧被遮蔽或部分去除，并放置在黑暗的地方，另一侧留在光下进行光合作用。一段时间后，将叶子两侧的相应区域取出并干燥并分别称重。可以根据被照射部分的干重的增加来计算光合速率。 为了防止叶片产生光合产物，可以限制双子叶植物的叶柄，单子叶植物的叶片的根部可以用沸水烫伤，或者用三氯乙酸（蛋白质沉淀剂）处理以破坏活细胞。韧皮部。这些处理几乎不影响水和无机盐向叶片的传输。 二、植物叶片的光合作用速率测定实验设备和试剂 设备：FS剪刀，分析天平，称量容器（或铝箱），烤箱，刀片，金属（也可提供有机玻璃）模板（或打孔器），纱布，热水瓶或其他便携式加热设备，夹具，盖瓷盘等。 试剂：三氯乙酸，石蜡。 序号 产品 货号 CAS号 备注 1 三氯乙酸 JT12006 76-03-9 2 切片石蜡 CG0206 8002-74-2 以上是实验采用的试剂，请采用高品质的德尔塔生物的生化试剂。 三、植物叶片的光合作用速率测定实验步骤 1.选择测试样品：实验可以在晴天的早晨8点至9点开始，并有10片代表性的叶
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细菌生化检验实验 （实验介绍,实验试剂,实验步骤,实验结果的判断）
作者：德尔塔 日期：2022-03-30
一、细菌生化检验实验介绍 石蕊既是pH指示剂又是氧化还原指示剂。在酸性溶液（pH 4.5）中为红色，在碱性溶液（pH 8.3）中为蓝色。介质的自然色应为紫蓝色（pH 6.8）。石蕊可以被某些细菌还原为无色基质。 牛奶含有乳糖和三种主要蛋白质，即酪蛋白，牛奶蛋白质和乳球蛋白。 牛奶凝结主要是由含有凝乳酶的细菌引起的，凝乳酶可将酪蛋白转化为酪蛋白，或由于乳糖发酵产生大量酸而导致酪蛋白沉淀。 一些细菌产生脂肪酶，脂肪酶可以分解牛奶中的脂肪，形成黄色透明液体。 一些细菌具有酪蛋白水解酶，可以催化酪蛋白水解，最终将其转化为透明的液体酪蛋白沉淀。此过程称为肽化。 二、细菌生化检验实验试剂 序号 产品 货号 CAS号 备注 1 脱脂奶粉 HC1218 2 石蕊 HXH502289 1393-92-6 3 水1000.0 mL 4 乙醇 JT26000 64-17-5 以上是实验采用的试剂，请采用高品质的德尔塔生物的生化试剂。 脱脂奶粉100.0克，石蕊属，水1000.0 mL 三、细菌生化检验实验步骤 将奶粉完全溶解在水中，调节至pH 6.8，添加石蕊溶液，直到其呈现紫蓝色（pH 6.8），分成试管，每管约5 mL。在115°C下灭菌10分钟，迅速冷却，然后放入冰箱中以备后用。 石蕊溶液的制备方法：称取2.5 g石蕊，在碗中研磨，转移到装有40％乙醇水溶液的50 mL烧瓶中，煮沸1分钟，静置约10分钟，吸取上清液并将其转移到另一个在烧瓶中，向原始烧瓶中加入50 mL 40％的乙醇水溶液，煮沸1分钟。 将上清液添加到之前的上清液中，将两种上清液均匀混合，离心沉淀，将上清液倒入100 mL量筒中，用40％乙醇补足100 mL，并逐滴加入1 M盐酸直至溶液呈紫色，这是2.5％的石蕊溶液。 95％乙醇42.1 mL加水至100 mL是40％乙醇溶液。 3.测试方法 接种受试细菌的18-24小时培养物。如果是厌氧菌，则在培养基试管中加入无菌铁屑或指甲，并盖上无菌凡士林，然后在36±1
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His-Tag重组蛋白亲和层析标准操作规程（His-Tag,简单介绍,实验所需材料,实验步骤,试剂清单）
作者：德尔塔 日期：2022-03-30
一，His-Tag重组蛋白亲和层析简单介绍 如果表达的蛋白质含有6个His片段，并且镍离子附着在亲和吸附凝胶上，则蛋白质会特异性地与吸附凝胶结合，下面详细介绍His-Tag重组蛋白亲和层析标准操作规程。 二，His-Tag重组蛋白亲和层析实验所需材料 His-Tag重组蛋白亲和层析实验材料 琼脂糖凝胶中镍亲和柱、紫外探测器、蛋白质电泳装置及配件，如夹子、玻璃板、灌封支架、缓冲罐等。、5毫升注射器 0.45μm过滤器、超声波干扰器 His-Tag重组蛋白亲和层析试剂： 1.结合缓冲液：20 mM Tris HCl，150 mM NaCl，10 mM咪唑，pH=8.0 2.洗脱缓冲液：20 mM Tris HCl，150 mM NaCl，不同浓度的咪唑，pH=8.0 3.20%乙醇 4.三蒸馏水 5.透析液：20 mM Tris HCl，1 mM EDTA，pH=8.0 注：纯化过程中使用的所有试剂都用三种蒸馏水定容。溶液制备后，用0.22μm滤膜过滤，并在4℃下保存。 在本实验中，可以先配制出相应pH值的高浓度母液，使用时稀释。例如： （1） 1 M Tris HCl，pH=8.0 称取60.57 g Tris，溶于400 mL三蒸馏水中，充分溶解，调节pH值至8.0，加入三份蒸馏水，使其体积达到500 mL。用0.22μm滤膜过滤，并在4℃下保存在玻璃瓶中。 （2） 2.5 M NaCl，pH=8.0 称取36.53g氯化钠，溶于200ml三蒸馏水中，充分溶解，调节pH至8.0，加入三蒸馏水至250ml，用0.22μm滤膜过滤，4℃保存于玻璃瓶中。 （3） 1 M咪唑，pH=8.0 称取咪唑17.02g，溶于200ml三份蒸馏水中，充分溶解，调节pH值至8.0，加入三份蒸馏水至250ml，用0.22μm滤膜过滤，4℃保存于玻璃瓶中。 三，His-Tag重组蛋白亲和层析实验步骤 3.1 准备样品 将IPTG诱导的菌液以7000转/分离心10分钟，收集菌细胞，用PBS冲洗两次，再用纯化用的平衡液漂洗一次，最后在平衡液（35mL/g菌球）中重新悬浮，超声破碎收集的菌液至澄清，13000离心机转速10分钟，取上清液，用0.45μm过滤器过滤。 3.2 工艺过程 3.2.1准备 打开盖子后，在4℃下储存的试剂经超声脱气40分钟，并平衡至纯化温度。 3.2.2打包列 装填塔
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糖皮质类激素兴奋剂的分析测定（简单介绍,实验所需材料,实验步骤,实验试剂清单）
作者：德尔塔 日期：2022-03-30
一、糖皮质激素兴奋剂简介 糖皮质激素兴奋剂也可以称为糖皮质激素的化学结构是类固醇化合物，具有调节葡萄糖代谢，促进蛋白质向糖的转化，增加血糖浓度，抗炎，抗过敏以及调节水和盐代谢的功能。人体大量摄入糖皮质激素会导致体内激素比例失调，葡萄糖代谢异常和无机盐代谢异常； 长期大量使用糖皮质激素也会引起感染或加重感染，导致心血管系统并发症，骨质疏松症，肌肉萎缩，伤口愈合延迟和消化系统并发症，例如增加胃酸和胃蛋白酶的分泌并抑制胃粘液分泌，降低抵抗力，甚至导致胃肠道出血或穿孔。 除了糖皮质激素对人体健康的许多副作用外，它还影响运动员参加比赛时的身体状况。它违反了体育比赛中公平竞争的原则。因此，这种药物属于国际奥委会禁止合成代谢类固醇兴奋剂的禁令。 近年来，不时发生在某些保健食品，营养补品和某些动物食品中用于运动运动的糖皮质激素的检测事件。由于意外食用这种受污染的食物，许多运动员出现了。不必要的积极结果。 除了对参赛运动员进行严格的兴奋剂检测外，2008年北京奥运会还要求对运动员的所有食品进行严格监控。本文采用固相萃取纯化技术和超高性能液相色谱法/串联四极质谱动物性食品中糖皮质激素的系统测定与分析激素兴奋剂。 二，糖皮质激素兴奋剂实验所需材料 试剂和材料 20孔真空萃取装置，旋转蒸发器，绿洲HLB（500mg，6cc）：乙腈、甲醇、甲酸、乙酸乙酯均为色谱法纯。实验用水为超纯水和无水硫酸钠。糖皮质激素标准品：强的松、泼尼松龙、氢化可的松、可的松、甲基泼尼松、倍他米松、地塞米松、倍氯米松、氟可的松，纯度≥98%。 三，糖皮质激素兴奋剂实验步骤 1.称取5 g均匀处理过的猪肉样品 2.加入10 g无水硫酸钠，20 ml乙酸乙酯，充分混合，匀浆1分钟，摇匀并提取10分钟，以10,000 rpm离心5分钟， 3.移入将上清液倒入浓缩瓶中，然后在残留物中加入10 ml乙酸乙酯 4.重复上述操作一次，将两种萃取液合并，在40°C旋转蒸发至干。 5.浓缩后，将样品溶于5ml 30％甲醇水溶液
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碳酸氢钠（简介,化学性质,MSDS,应用）
作者：德尔塔 日期：2022-03-30
一、碳酸氢钠简介： 碳酸氢钠表现为无味的白色结晶粉末或块状物，略带碱性（苦味）， pH（新鲜配制的0.1摩尔水溶液的pH）：在77°F下为8.3，pH（饱和溶液）：8-9，无毒。 碳酸氢钠是具有碱化和电解质替代性能的碳酸单钠盐，解离后，碳酸氢钠形成钠和碳酸氢根离子，离子形成会增加血浆碳酸氢盐并缓冲过量的氢离子浓度，从而导致血液pH升高。 二、碳酸氢钠的产品等级： 序列 产品等级 产品货号 备注 1 AR碳酸氢钠 SS1340 分析纯碳酸氢钠 2 GR碳酸氢钠 SS1473 优级纯碳酸氢钠 3 HPLC色谱碳酸氢钠 FS0040 色谱纯碳酸氢钠 4 动物细胞培养碳酸氢钠 SS1474 细胞培养级碳酸氢钠 碳酸氢钠相关产品： 碳酸氢钠别名 碳酸氢钠(144-55-8),小苏打;重碱;重碳酸钠;碳酸氢钠盐（NaHCO3）;碳酸氢单钠盐;碳酸氢钠(生物级);碳酸氢钠(缓冲液),纯碱 碳酸氢钠英文别名 Sodium bicarbonate(CAS:144-55-8);Sodium bicarbonate;Sodium hydrogen carbonate 碳酸氢钠CAS号 144-55-8 碳酸氢钠SMILES C(=O)(O)[O-].[Na+] 碳酸氢钠Inchi InChI=1S/CH2O3.Na/c2-1(3)4;/h(H2,2,3,4);/q;+1/p-1 碳酸氢钠InchiKey UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 碳酸氢钠分子式 Formula NaHCO3 碳酸氢钠分子量 84.01 碳酸氢钠闪点 FP No data available 碳酸氢钠熔点 Melting point 270°C 碳酸氢钠沸点 Boiling point No data available 碳酸氢钠极化度 No data available 碳酸氢钠密度 Density 2.159 碳酸氢钠蒸汽压 No data available 碳酸氢钠溶解度Solubility 溶于水(50 mg/ml)，不溶于乙醇。 碳酸氢钠性状 White, monoclin
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单细胞凝胶电泳实验(凝胶电泳,简单介绍,实验步骤,注意事项)
作者：德尔塔 日期：2022-03-30
一，单细胞凝胶电泳实验简单介绍 单细胞凝胶电泳实验（又称彗星实验）的操作过程主要包括单细胞悬液制备、凝胶板制备、细胞裂解与解卷、电泳与中和、染色与观察等步骤。下面是单细胞凝胶电泳的操作步骤和注意事项。 二，单细胞凝胶电泳实验步骤 2.1分离并制备单细胞悬浮液： 1.体外培养的细胞系：用胰蛋白酶消化，最后用PBS悬液和移液管形成单细胞悬浮液。细胞需要计数。我已经提到了具体数额。 2.体内器官细胞：处死动物，取出器官，在汉克斯溶液中制备单细胞悬液。 2.2橡胶板制备： 1.取100μl 0.5%NMA，置于45℃水浴中，涂于磨砂玻璃载玻片上，形成底漆。均匀地推动盖子滑动，无气泡，并在4度下固化5至8分钟。 2.水平移开盖玻片，取100μl 0.5%LMA于37℃水浴中孵育，20μl细胞悬液（约400个细胞）混匀，立即铺开载玻片，加盖玻片，4℃固化5～8分钟。 2.3细胞裂解和电泳： 1.从制备好的橡胶板上取下盖玻璃后，将其浸入4℃预冷的细胞裂解液中，在4℃下裂解2.5～3小时。 2.取出凝胶板，用双蒸馏水浸泡冲洗，放入电泳槽，在4℃预冷的电泳液中浸泡20分钟。 3.将玻片水平放置在阳极端附近，在4°C下进行20至25分钟（25 V，300 mA）的电泳。可以在电泳槽周围加冰块保持低温。 2.4中和染色： 1.电泳结束后，将凝胶板在中和液中浸泡10分钟，每次共3次，每次更换中和液。最后晾干。 2.取出橡胶板，放入染色罐中，用2μg/ml EB染色液在黑暗中染色5～10分钟。 3.用蒸馏水冲洗两次，每次5分钟。让其干燥，滤纸吸收多余的水分，并尽快在荧光显微镜下观察。 三，单细胞凝胶电泳实验注意事项 1.细胞必须被消化成单个细胞。如果你生长的细胞是悬浮生长的，或者形状是圆形的（如hela），那么你可以直接刮取细胞，否则，如果细胞是非圆形的，如成纤维细胞等，在实验前必须用胰蛋白酶消化使其变圆。许多彗星实验总是不能产生结果。你可以考虑这是否是原因。 2.在电泳过程中，每次实验的电流和电压强度都应该是恒定的（例如：20伏，200毫安恒定），
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膜分离技术的应用 (膜分离技术,简单介绍,所需的材料,实验步骤,实验试剂清单)
作者：德尔塔 日期：2022-03-30
一，膜分离技术的简单介绍 膜分离技术在银杏中的黄酮类化合物是银杏的主要有效成分之一。银杏黄酮具有较强的清除细胞内自由基的作用，能降低细胞的氧化代谢，调节脑、四肢动脉失血引起的一系列心脑血管疾病。具有明显而独特的疗效。银杏叶中黄酮类化合物的含量占干叶的0.8%～3.5%，并随品种、地理分布和季节变化而变化。传统的提取工艺相对成熟，工艺路线如下： 银杏叶提取物的原料预处理、提取、过滤、抽滤、浓缩、沉淀离心、色谱分离、浓缩、干燥、成品 二、膜分离技术所需的材料 原料：以采摘的银杏叶为原料。 三，膜分离技术的实验步骤 1.预处理：将原料放入烤箱中，在60~65℃的温度下干燥，然后用高速纸巾搅拌机粉碎。 2.提取过滤：以1:9（W/V）加入70%乙醇，70~75℃水浴，每隔2小时搅拌提取，用纱布过滤，滤渣中加入70%乙醇，1:6加入，70~75℃水浴，每隔2小时搅拌浸出，用纱布过滤，合并提取物。 3.抽滤：用抽滤装置进行真空过滤处理，收集滤液，滤渣丢弃。 4.浓缩：用减压蒸馏装置回收乙醇，得到浓缩液。 5.沉淀离心：浓缩液用3倍蒸馏水静止沉淀4～6小时，在16℃12000r/min条件下，离心15分钟，得到澄清透明的离心液。 6.色谱分离：取树脂体积4倍的离心液，通过聚酰胺柱，用蒸馏水冲洗至流出物清澈，再加入与树脂体积相同的25%乙醇洗涤，排干后用80%乙醇。洗提并收集较暗的部分。 7.浓缩干燥：将洗脱液减压浓缩，真空低温干燥，得到淡黄色银杏叶提取物成品，黄酮含量测定在33%。 四，膜分离技术的实验试剂清单 序号 名称 货号 CAS 备注 1. 黄酮 JT23256 525-82-6 2. 乙醇 JT26000 64-17-5 3. 聚酰胺树脂 JSH6040 68186-30-1 以上为膜分离技术的所需的实验试剂。
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chelex 100提取DNA(方法,原理,提取DNA的优缺点,实验步骤)
作者：德尔塔 日期：2022-03-30
一、chelex 100介绍 Chelex100螯合树脂产物是含有一对亚氨基二乙酸离子的苯乙烯-二乙烯基苯共聚物的有机化学产物（chelex 100螯合树脂在结合多价金属离子的过程中用作螯合基团）。由于Chelex 100树脂的羧酸基团，chelex 100通常被分类为弱阳离子交换树脂。但是，该产品与这种类型的交换树脂之间的区别在于Chelex 100具有非常高的金属离子比选择性。 Chelex100具有非常高的键合强度，还用于生命科学中以提取DNA。 产品名 Chelex100螯合树脂 货号 SS6072 规格 1g,5g,25g,100g,1kg 二、chelex 100提取DNA方法 ※ 加入1/50体积的蛋白酶K（10 mg / mL），并将样品在65°C孵育2小时至过夜。 ※ 200 uL 5％Chexlex-100，加入10 uL蛋白酶K（20 mg / mL），在37°C下孵育2小时。 ※ 50ul Chelex液及lfl蛋白酶K水，56％温水浴消化2h后，煮沸8min，迅速放人冰盒冷却4min，以5000r ／ min速度离心lmin。吸取上清液作为DNA扩增模板于?20 ％保存备用。 ※ 所有细菌菌株均在400μl的5％Chelex 100缓冲液（包含0.03％SDS，1％Tween-20和1％NP40）中处理并煮沸15分钟。通过除去一些上清液来扩增每个样品的DNA。为了裂解葡萄球菌，将蛋白酶K加入到5％Chelex 100缓冲液中，并将混合物在56℃下保温60分钟，然后煮沸15分钟。将存在肝素的血样在五倍体积的0.87％NH4Cl中进行红细胞裂解，沉淀白细胞，悬浮于200μl含20 mg / ml蛋白酶K的5％Chelex 100缓冲液中，于200℃温育。 56℃下60分钟，然后煮沸15分钟，离心1分钟，此时收集上清液用于PCR扩增。将CSF样品离心5分钟。然后除去上清液，并将细胞沉淀重悬于混合物中，并以与血样相同的方法处理。 三、chelex 100的应用 采用chelex100从头发以及其他样本中提取DNA（法医鉴定应用） ※ chelex100提取DNA实验首先取一小块冷冻的组织（少于1mg，可以用消毒的移液器尖端钻出），或1-3根有根的头发（需要依次用90％，70％乙醇和消毒水洗涤
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