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肠道微生物ELISA试剂盒调控外周淋巴结发育
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
ELISA试剂盒进口大鼠血液中的淋巴细胞通过高内皮静脉（high endothelialvenules，HEVs）进入淋巴结中。这一过程首先是由一些地址素（addressin）的引导，其中包括a4b7的受体MadCAM-1以及CD62L的受体PNAd。在刚出生的小鼠中，MAdCAM-1的表达量较高，随着时间的推移，大约两周以后，PNAd的表达量占据主导地位。这一上调引导了基于L-选择素（L-selectin）的成体淋巴细胞归巢的效应。有报道指出，一类表达趋化因子受体CCR7的树突状细胞（DC）能够进入次级淋巴器官，进而促进高内皮静脉（HEV）的发育，但这类DC的活动是否受到肠道微生物的调节仍未可知。在SPF小鼠中，肠道相关淋巴结的发育受到一系列转录因子的调控，包括ID2, IRF8, Batf3, IRF4。同时也受到 Notch2-依赖型RALDH+&CD11b+CD103+DC的调控。这类DC十分特殊，有报道指出这类DC能够将常规CD4+T细胞转变为诱导型Treg细胞，以及诱导淋巴细胞的归巢行为。因此，这类细胞很可能受到肠道微生物的调节，进而影响淋巴结的发育。对此，来自清华大学医学院免疫学研究所的石彦教授课题组利用无菌培养小鼠模型与基因表达谱分析手段，证明了肠道微生物对RALDH+DC以及淋巴结发育的影响。相关结果发表在zui近一期的《Immunity》杂志上。首先，为了证明无菌小鼠中外周淋巴结的发育缺陷现象是由淋巴细胞归巢能力下降导致的，作者们利用CFSE标记了一定量的淋巴结细胞并通过尾静脉注射的方式分别导入SPF小鼠与GF（即无菌）小鼠体内。实验结束24小时之后，在SPF小鼠以及GF的腹股沟淋巴结，肠系膜淋巴结以及脾脏中都检测到了CFSE阳性的细胞群体。但是，相比于脾脏，GF小鼠的腹股沟淋巴结以及肠系膜淋巴结中的CFSE阳性细胞数量明显低于SPF小鼠。进一步的细胞特征分析也表明，CD4+T细胞，CD8+ T细胞，以及CD19+B细胞数量都明显减少。同时，作者发现五周左右的GF小鼠腹股沟淋巴结HEV中MAdCAM-1的表达量仍未下调，而PNAd的表达量也未明显上调，GF小鼠的淋巴结大小也明显低于SPF小鼠。通过将S
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从费氏弧菌发光杆菌提取质粒向大肠杆菌DH10B电转化方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
①费氏弧菌发光杆菌制做选择平板LB+25 mg/l Kan。②核对好要转化的质粒dna，在15 ml Falcon tube 和cuvette（电转化用的石英样品槽，两面磨光，两面磨砂）标好质粒名称。将Falcon tube、cuvette、质粒DNA、SOC培养基按顺序对应置于冰上预冷或解冻。转化前将大肠杆菌（45 µl aliquot of E. coli DH10B Cells）置于冰上解冻（约3-5 min）。一、将冰桶移置超净工作台上，取200-1000 µl、20-100 µl、0.5-10 µl 移液器（Fubbouoette）到超净工作台上。先用0.5-10 µl移液器取0.5-2 µl质粒DNA到大肠杆菌细胞内，再用调节到50 µl 的（20-100 µl移液器）上下吹吸数次。在冰上放置2 min。二、用调节到50 µl 的（20-100 µl移液器）将质粒DNA和大肠杆菌细胞混合液转移到电转化石英样品槽底凹槽的中央，在桌面上轻击数次使之分散。在冰上放置1-2 min。三、先用纸将样品槽擦拭一下，移到2.5 kV电脉冲发生器上，同时用1000 µl移液器吸好SOC培养基，约4.5-5 sec后鸣叫声停后，立即加入样品槽内（吹吸一次或不吹吸）。四、将细胞悬浮液从样品槽中取出并加入15 ml Falcon tube，在37℃，200/min振荡培养1 h。在样品槽中加满自来水，以便清洗。五、在此期间，可制做选择平板LB+25 mg/l Kan。六、将培养后的转化大肠杆菌悬液在超净工作台上全部倒入1.5 ml微量离心管，13000 rpm离心30 s（或到达13000 rpm后离心15 s）。用费氏弧菌发光杆菌1000 µl移液器取出大部分的上清，再用50 µl移液器全部弃掉剩余的上清，之后吸取100 µl lb培养基重新悬浮沉淀，上下吹吸数次到均匀。七、对三角铁焚烧灭菌，标记选择平板，取30 µl LB培养基加入平板中心，再取重新悬浮后的转化大肠杆菌30 µl加入平板中心。待三角铁冷却后，在平板上研磨，至无可见液体为止。注意三角铁一定要冷却，或先在无菌液的平板上研磨加速冷却。八、将选择平板在37℃下培养，1天后观察转化效果。九、清洗电转化样品槽。先用自来水吸瓶冲洗十多次，之后加入酒精，放置1 h，之后用蒸馏水冲
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ELISA试剂盒的实验标准
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
抗原elisa试剂盒实验标准以及质量平衡中一般有3次加样步聚，即加标本，加酶结合物，加底物。加样时应将所加物加在ELISA试剂盒板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可溅出，不可产生气泡。 加标本一般用微量加样器，按规定的量加入板孔中。每次加标本应更换吸嘴，以免发生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加样。 相关产品：间充质干细胞培养基 英文名称： MSCM-acf-prf 规格: 间充质干细胞成骨细胞分化培养基 英文名称： MODM-prf 规格: 500 ml 间充质干细胞脂肪细胞分化培养基 英文名称： MADM-prf 规格: 500 ml 间充质干细胞软骨细胞分化培养基 英文名称： MCDM-prf 规格: 500 ml 在抗原elisa试剂盒中一般有两次抗原抗体反应，即加标本和加酶结合物后。抗原抗体反应的完成需要有一定的温度和时间，这一保温过程称为温育（incubation），有人称之为孵育，在ELISA试剂盒中似不恰当,属固相免疫测定，抗原、抗体的结合只在固相表面上发生。以抗体包被的夹心法为例，加入板孔中的标本，其中的抗原并不是都有均等的和固相抗结合的机会，只有zui贴近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体接触。这是一个逐，因此需经扩散才能达到反应的终点。 乳腺上皮细胞培养基 英文名称： MEpiCM-prf 规格: 500 ml 内皮细胞生长添加物 英文名称： ECGS 规格: 5 ml 平滑肌细胞生长添加物 英文名称： SMCGS 规格: 5 ml 平滑肌细胞生长添加物-无血清 英文名称： SMCGS-sf 规格: 5 ml 周细胞生长添加物 英文名称： PGS 规格: 5 ml 脑膜细胞生长添加物 英文名称： MenCGS 规格: 5 ml 神经元生长添加物 英文名称： NGS 规格: 5 ml 少突胶质前体细胞生长添加物 英文名称： OPCGS 规格: 5 ml 抗原elisa试剂盒
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鸭源性核酸PCR-荧光探针试剂盒技术要点
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
1.鸭源性核酸PCR-荧光探针试剂盒加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。 2.合理安排检测量，以免反应板过多造成洗板等待时间长。 3.吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。 4.要尽量做双孔实验，这样才既能保证数据的准确性，又能反映出试剂盒的精密度。 5.样品稀释液应用加液器加注，并经常校对其准确性。 6.为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜。 7.未使用完的酶标板或者试剂，请于2-8℃保存。辣根过氧化物酶标记抗人IgG工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的辣根过氧化物酶标记抗人IgG工作液。 8.ELISA试剂盒实验中，加样后及时放人孵箱，标本较多时，要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间，防止孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗彻底。 9.剩余样品及废弃物应经121℃高压蒸汽灭菌30分钟，或用5.0g/L次氯酸钠等消毒剂处理30分钟后废弃。 10.鸭源性核酸PCR-荧光探针试剂盒洗涤时各孔均需加满液体，防止孔口有游离酶不能洗净。 11.每次实验留一孔作为空白调零孔，该孔不加任何试剂，只是zui后加底物溶液及2N H2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。 12.手工洗板时每次加入洗涤液后。应静置15～30s，不要将一个酶标孑L中的洗涤液溅入另一酶标孔中，防止交叉污染。甩去洗涤液后将酶标板放在毛巾或吸水纸上拍干。 13.对样本的结果有疑问时需要使用其他检测方法进行验证。 14.没有去离子水或双蒸水时，可以使用娃哈哈纯净水配制溶液，切勿使用自来水。 15.在使用微量加样器时，吸取不同瓶子中液体后要更换枪头，即使吸取标准品溶液。 16.吸取液体时速度不易太快，以免产生气泡，人ELISA试剂盒吸取的量不够准确。 17.鸭源性核酸PCR-荧光探针试剂盒吸取液体时要选用量程和需要量接近的微量加样器吸，减少误差。
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正确检测Elisa试剂盒的几个步骤
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
进口elisa酶联免疫试剂盒方法在现行是非常流行的一种简单，有效，安全的检测方法，但是想要正确检测Elisa试剂盒，这些步骤必须有！跟随小编一起来了解下我司今天讲解的文章吧！ 一、检测标本的收集和保存 用于ELISA测定的检测标本zui为常用的是血清（浆），有时因为特定的检测目的，也用到唾液、脑脊液、尿液、粪便等标本。目前检测上使用血清标本测定的标志物一般有传染性病原体的抗原和抗体、肿瘤标志物、激素、特种蛋白、细胞因子和**药物等。对用于激素和**药物测定的血清标本的收集，要注意收集时间甚或体位有可能会对测定结果产生影响。如可的松在早晨4～6点之间，会有一峰值出现：生长激素、促黄体激素（LH）和促卵泡激素（FSH）均以阵发性方式释放，因此，在测定此类激素时，有必要在密切相连的时间间隔内采取数份血样本，以其中间值为测定值。又如当从卧位变为站立位时，血清中肾素活性将出现明显增高。再如**药物的检测，应根据药代动力学选择服药后的zui适时间抽血检测。用于传染性病原体的抗原和抗体、肿瘤标志物和特种蛋白等的检测的血清标本的收集则没有时间和体位方面的影响，只是在处理和保存方面要考虑以下几个方面： （1）要注意避免出现严重溶血。血红蛋白中含有血红素基团，其有类似过氧化物的活性，因此，在以HRP为标记酶的ELISA测定中，如血清标本中血红蛋白浓度较高，则其就很容易在温育过程中吸附于固相，从而与后面加入的HRP底物反应显色。 （2）样本的采集及血清分离中要注意尽量避免细菌污染，一则细菌的生长，其所分泌的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白产生分解作用；二则一些细菌的内源性酶如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶本身会对用相应酶作标记的测定方法产生非特异性干扰。 （3）血清标本如是以无菌操作分离，则可以在2～8℃下保存一周，如为有菌操作，则建议冰冻保存。样本的长时间保存，应在-70℃以下。 （4）冰冻保存的血清标本须注意避免因停电等造成的反复冻融。标本的反复冻融所产生
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ATCC菌种快速增菌培养基检测效果的研究
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
为了验证对于ATCC菌种特异性、复苏效果以及快速生长的特点，比较了3种培养基对于大肠杆菌O157:H7的增菌效果。研究结果表明，8h培养时间内，MicroFast快速增菌培养基对于冷损伤和热损伤的大肠杆菌O157:H7菌株具有良好的修复和增殖效果。MicroFast快速增菌培养基营养组分适合O157菌株的生长需求，在MicroFast快速增菌培养基中，大肠杆菌O157:H7菌株的倍增时间为13.5min，远高于mEC+n的28min，且MicroFast快速增菌培养基对于大肠杆菌O157:H7菌株具有良好的选择特异性，能够短时间内（8h内）有效富集培养大肠杆菌O157:H7菌株，是一种能够实现大肠杆菌O157:H7菌株快速、特异增殖的培养基，将其结合检测金标卡，能够实现8h内快速检测，结果可信可靠。 关键词：MicroFast快速增菌培养基 大肠杆菌O157:H7 增菌 效果 目前，病原微生物污染防控是食品安全的刚性需求，微生物污染是食品不合格的主要原因，也是造成食物中毒的主要原因，尤其以细菌性食物中毒为主，食品中大肠杆菌污染率zui高达到了41.1%，大肠杆菌O157则为3.7%[1]。肠出血性大肠杆菌O157:H7是肠出血性大肠杆菌(EHEC)的一个血清型，是引起食源性疾病主要血清型[2]，主要临床症状为突发性腹痛、腹泻、血便，严重时并发肾衰竭，病死率高。大肠杆菌O157:H7主要污染肉类食品[3，4]，蔬菜中也时有检出[5]，是食品中潜在危害巨大的食源性致病菌。因此，快速、特性、的检出食品中大肠杆菌O157:H7，对于其引起的食源性疾病防控以及暴露病例的**具有重要的意义。本文比较了MicroFast快速增菌培养基（简称MF培养基）、改良EC肉汤培养基（简称：mEC+n）和FP培养基对大肠杆菌O157:H7的增菌效果，以期验证不同培养基的增菌优势和特异性，为探索省时、、特异的快速检测方法提供依据。 1 材料与方法 1.1菌种 大肠埃希氏菌O157:H7（ATCC12478/NCTC12900）为实验用标准阳性菌株。 大肠杆菌FSCC146255/146264、ATCC25922/8739、CMCC44102/44103（Escherichia coli）、肠
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固体培养基难以凝固的原因
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
在显色培养基培养时经常会用到固体培养基，但是，在配制培养基过程中偶尔会出现不凝固、半凝固或者一摇晃培养基就破碎的现象，问题在哪里呢？ 许多文献指出，琼脂的凝固程度主要受到PH值和琼脂含量的影响，PH值较低(≤4.0)时，PH值是影响凝固等级的主要因素；PH值较高(5.0~8.0)时，琼脂浓度是影响凝固等级的主要因素。药典上培养基配方中明确规定了PH值和琼脂含量，如配制操作正常，凝固应是不会出现问题的。为此，我们针对培养基出现的凝固异常进行了分析及试验： 一、培养基PH值问题：培养基灭菌前后PH值有何变化？经查阅大量相关学术研究，不同培养基灭菌前后PH普遍有这样的变化超势：高压灭菌前pH值4.5-8.0的培养基灭菌后pH值变化较小，偏酸性的略上升，偏碱性的略下降。但酸性或碱性较强的培养基灭菌前后PH值变化较大。因我们常使用的培养基pH值均在4.5-8.0范围内，所以偶尔出现的培养基凝固不好应不是PH值影响的。 二、琼脂问题：琼脂是显色培养基zui常用的凝固剂，是一种海藻多糖，PH在4-10之间才会形成凝胶，且其凝胶强度和琼脂糖的浓度有关。目前我们实验室使用的均是成熟配方的培养基，为什么会偶尔出现凝固不好的现象呢？ 我仔细核查了琼脂粉的生产厂家、批号、保质期及配制时的称量、溶解、定容和转移等过程。排除了琼脂粉质量问题，但发现培养基分装准备高温灭菌时，有部分经开水溶解的琼脂呈细小颗粒状沉在瓶底，即未完全溶解，后查阅资料发现，琼脂加热至95℃时才开始溶解，说明我们用热水溶解琼脂时，琼脂未能完全溶解，这可能是导致培养基难凝固的原因。于是我们在配制培养基时，先将琼脂煮沸5分钟后再分装、灭菌，zui后培养基冷却至40℃时能完全凝固。自琼脂溶解方式改变后，便未再出现培养基不凝固、半凝固或者一摇晃显色培养基就破碎的现象
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怎么预防干细胞老化
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
干细胞在培养过程中如果环境不适合其生长就会出现部分细胞的老化现象。这是干细胞培养的一个难点也是经常出现的问题。本文描述干细胞老化时出现的迹象，以及其预防措施。干细胞老化的表现★ 细胞胞浆内特别是在核区附近出现黑色颗粒，表示细胞开始出现老化；★细胞胞浆内出现空泡，则表明该细胞已老化或者已经开始分化（在全部细胞中出现少数老化细胞是正常的）；★ 细胞立体感逐渐消失，细胞间的间隔不清，部分细胞扁平状，细胞的形状趋向多样；★ 贴壁性减退，出现一些漂浮的细胞；部分分泌强的细胞分泌物增多，细胞表面会比较脏；★ 细胞增殖速度明显下降，分裂相的细胞明显减少。干细胞老化的原因和预防1) 接种密度的影响：部分干细胞具有一定的分泌性能，能够分泌一些对细胞有支持能力的因子类物质；所以必须维持一定的接种密度，否则会导致细胞增殖减慢，zui后出现老化；2) 消化过度：消化细胞时会对细胞的表面蛋白有较强的损伤，所以消化的时间不能过长，使用合适浓度和pH 值的消化酶，否则会导致细胞老化和分化；3) 合适的密度的时候就要传代：细胞如果过密，接触抑制作用会导致细胞的活力减弱并影响增殖导致老化；4) 使用合适的血清和培养基：不同的干细胞对培养基特别是血清的要求不同，所以使用不同的培养用的血清进行筛选，寻找该干细胞培养的血清是预防细胞老化，维持细胞正常生长的重要保证。
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细胞培养过程中添加剂起到的作用
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
肿瘤细胞能量来源：谷氨酰胺L－谷氨酰胺是一种氨基酸，细胞的重要能量来源、参与蛋白质的合成和核酸代谢。同时L-谷氨酰胺不稳定，在中性的水溶液中会自发降解； 降解产物对细胞有毒性 （对干细胞，原代细胞影响尤其大）。能影响细胞活性、蛋白表达水平及糖基化模式等。那如何解决呢？方案有二： 选择不含谷氨酰胺的培养基，自己添加 选择稳定的谷氨酰胺替代物经过科学家不断努力，终于找到了稳定的谷氨酰胺替代物： glutaGRO。它有何方功能呢？原来，它是由L-丙氨酸和L-谷氨酰胺缩合形成的二肽，稳定性高，可在室温下保存，2年稳定 （谷氨酰胺需冷冻保存），使用更方便。同时不易降解，不产生有毒性氨，更利于细胞生长。但仍需注意：该替代物适于哺乳动物细胞培养，但不适合昆虫肿瘤细胞培养体系！！！能量来源 : 丙酮酸 (Sodium Pyruvate)丙酮酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源。当葡萄糖不足的时候，细胞可以代谢丙酮酸钠，保证细胞更好地生长。同时某些对葡萄糖利用存在问题的细胞必需添加哦。平衡盐溶液平衡盐溶液主要是由无机盐、葡萄糖组成；它的作用是维持细胞渗透压平衡，保持pH稳定及提供简单的营养；同时用于取材时组织块的漂洗、细胞的漂洗、配制其他试剂等。它由这些小伙伴组成：PBS 磷酸盐缓冲液，DPBS（Dulbecco’s Phosphate-Buffered Salines）， Earle’s 平衡盐， Hank’s 平衡盐。具体每种试剂的成分，欢迎大家留言咨询，或者访问：http://cellgro.com/。培养基中的pH缓冲剂绝大多数细胞的*生长条件是pH 6.8-7.8。多数培养基利用碳酸氢钠进行缓冲，碳酸氢钠的缓冲需要二氧化碳。其中高碳酸氢钠 (1.5 – 3.7g/L) 需要 5 – 10% CO2，低碳酸氢钠(0.35g/L) 不需要二氧化碳孵箱。当然，也有不依赖于二氧化碳的氢离子缓冲剂如：HEPES，在一定范围内对细胞无毒性作用。能较长时间控制恒定的pH范围，保证细胞的良好生长。大家可以根据肿瘤细胞和实验要求具体选择。
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转化细胞大规模培养技术的操作方式
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
转化细胞深层培养可分为：分批式、流加式、半连续式、连续式、连续式和灌注式五种。 一、分批式培养（batch culture） 是细胞规模培养发展进程中较早期采用的方式，也是其它操作方式的基础。该方式采用机械搅拌式生物反应器，将细胞扩大培养后，一次性转入生物反应器内进行培 养，在培养过程中其体积不变，不添加其它成分，待细胞增长和产物形成积累到适当的时间，一次性收获细胞、产物、培养基的操作方式。 该方式的特点: 操作简单。培养周期短，染菌和细胞突变的风险小。反应器系统属于封闭式，培养过程中与外部环境没有物料交换，除了控制温度、pH值和通气外，不进行其他任何控制，因此操作简单，容易掌握； 直观反映细胞生长代谢的过程。因培养期间细胞生长代谢是在一个相对固定的营养环境，不添加任何营养成分,因此可直观的反映细胞生长代谢的过程,是动物细胞工艺基础条件或"小试"研究常用的手段； 可直接放大。由于培养过程工艺简单，对设备和控制的要求较低，设备的通用性强，反应器参数的放大原理和过程控制，比较其它培养系统较易理解和掌握，在工业化生产中分批式培养操作是传统的、常用的方法，其工业反应器(Genetech)规模可达12000L。 分批培养过程中，细胞的生长分为五个阶段：延滞期、对数生长期、减速期、平稳期和衰退期，见图1。分批培养的周期时间多在3-5天，细胞生长动力学 表现为细胞先经历对数生长期（48-72h）细胞密度达到zui高值后，由于营养物质耗劫或代谢毒副产物的累积细胞生长进入衰退期进而死亡，表现出典型的生长 周期。收获产物通常是在细胞快要死亡前或已经死亡后进行。 二、流加式培养（feeding culture） 1、流加式培养是在批式培养的基础上，采用机械搅拌式生物反应器系统，悬浮培养细胞或以悬浮微载体培养贴壁细胞，细胞初始接种的培养基体积一般为终 体积的1/2～1/3，在培养过程中根据细胞对营养物质的不断消耗和需求，流加浓缩的营养物或培养基，从而使细胞持续生长至较高
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马铃薯淀粉的作用及培养基的配置
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
马铃薯淀粉是由土豆，包括土豆皮，煮熟后，干燥并精细磨碎。马铃薯淀粉应用广泛，尤其是在食品市场上成为国内外淀粉深加工行业的产品。但是我们今天要说的是在实验室中，马铃薯淀粉又有哪些作用呢？ 马铃薯淀粉的作用： PDA培养基是马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称，其做法是马铃薯去皮，切成块加水，煮沸30min（注意火力的控制，可适当补水） ，用纱布过滤，滤液加糖，补足水至100ml，装入三角瓶，高温蒸汽灭菌。 马铃薯培养基可提供微生物培养所需要的碳源、氮源、生长因子（维生素）还有无机盐。宜培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌。 另外马铃薯淀粉还有一种发酵的，是白色粉末； 具有淀粉的特有气味。常用作微生物发酵用大分子低级碳源，用前好用淀粉酶水解液化。 既然以上已经提到了马铃薯培养基，那下面我们就具体来了解一下马铃薯培养基的配置方法： 马铃薯去皮，切成块加水，煮沸30min(注意火力的控制，可适当补水) ，用纱布过滤，滤液加糖，补足水至100ml，装入三角瓶。 综合马铃薯培养基 20%马铃薯煮汁 1000 毫升 磷酸二氢钾 3克 硫酸镁 1.5克 葡萄糖 20克 维生素 10毫克 琼脂 18克 先配制20%马铃薯煮汁，方法同上。在煮汁中加入上述各种组分，加热溶解后补足水分，调整pH值到6。分装，灭菌，备用。 该培养基用于培养和保存灵芝、平菇、香菇等食用菌菌种。马铃薯糖琼脂培养基 把马铃薯洗净去皮，取200克切成小块，加水1000毫升，煮沸半小时后，补足水分。在滤液中加入10克琼脂，煮沸溶解后加糖20克(用于培养霉菌的加入蔗糖，用于培养酵母菌的加入葡萄糖)，补足水分，分装，灭菌，备用。 把这培养基的pH值调到7.2～7.4，配方中的糖，如用葡萄糖还可用来培养放线菌和芽孢杆菌。 按所用原料不同，可分为两类：应用肉汤、马铃薯汁等天然成分配制的，称为天然培养基;应用化学药品配成并标明成分的，称为合成培养基或综合培养基。马铃薯培养基就是天然培养基，综合马铃薯培养基就是人工合成的。 马铃薯淀粉的制取
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恒远分享:细胞冷冻保存法及解冻培养技巧
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
培养细胞时为防止以下问题，细胞将做冷冻保存:*、株化细胞产生性状转变。第二、污染。第三、株化细胞之增殖或生理特性有特定之限制，只能在一定的代数范围内进行增殖培养或进行特定实验。目前可能解决这些困难的方法其中之一是细胞冷冻保存法，将冷冻细胞储于冷冻管中，将其中一部分拿出来做一些必要的检查，其它的冷冻细胞则在需要时拿出来解冻，用来进行实验。本方法亦可节省继代培养时所花费的劳力、物力，并可防止培养中经常发生意外事故，丧失细胞珠。因此冷冻保存法为研究上之基本技术之一。 说明 : 1.经过冷冻保存后的细胞，其生存率会下降，冷冻时之冷却速度，保存温度，解冻时升高温度的速度以及添加之冷冻保存液之种类、浓度等都可影响细胞存活率。 2. 一般而言，４℃以下慢慢地冷冻，保存于液态氮中（-196℃）。 3. 37℃快速解冻。 4.保护剂（抗冻剂）：添加甘油 （glycerol） （ I0 %左右 ） 或dimethy1sulfoxide （DMSO） （ 5- 10% ） 。 5.有些细胞如果采用上述的方法时，无法得到高的存活率。此时，则必需考虑可能伤害细胞的机制，添加剂之作用等而来找出适当的条件来修正。 材料 : 1.增殖期之细胞 （9成满），培养于培养皿中数个。 2.冷冻用培养基（2倍） : 培养基内加入三倍血清及15% DMSO，保存在冰箱中。 3. 冷冻管、保利龙制容器、铝制ample支持棒。 步骤: 1.准备2 x 107cells/ml的细胞悬浮液。 2.冷冻用培养基（2倍） :以微温水溶解DMSO，在培养基中混合为15% （v/v）。这是DMSO的二倍浓度之溶液。必须在进行实验前在行配制，配好后放在冰箱中，使用量必须和细胞悬浮液的量相等；使用时维持在4℃。 3.分装: 在冷冻管管中分别加0.5ml （1/2冷冻管体积）冷冻用培养基（2倍）及2 x 10（7次方）cells/ml的细胞悬浮液；等量混合。将盖子扭紧后，在管中部贴上胶带密封。 4.记载卷标 : 用抗冻marker pen在冷冻管上写明细胞名称、代数、冷冻的年，月，日等所需要的项目。 5.放进冷却的保利龙容器中，而在-
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分享:ELISA试剂盒的储存方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
用什么办法贮存ELISA试剂盒，对ELISA操作者来说是非常重要的，由于贮存办法直接影响到商品质量。 对于开封后试剂盒要以怎样的方式保留呢？它的有效期是多久？ 贮存ELISA试剂盒有这些讲究： 1. 一切试剂均按试剂瓶标签上所示保留。请注意，收到试剂盒后请尽快将规范品、检查溶液A、检查溶液B以及96孔板保留于-20℃。 2. 运用后的试剂盒：剩下试剂仍需依照试剂瓶标签所示的温度保留，开封后的酶标板要加干燥剂后密封保留于-20℃，防止湿润。 3. 试剂盒内酶标条可拆卸，按试验需要可分屡次运用。运用后的剩下试剂盒主张在初次试验后1个月内运用结束。商品过期时刻以盒子上的标签为准，保质期内一切组分都保证是安稳的。 4.未开封的试剂盒：一切试剂均按试剂瓶标签上所示保留。请注意，收到试剂盒后请尽快将规范品、检查溶液A、检查溶液B以及96孔板保留于-20℃。 5.运用后的试剂盒：剩下试剂仍需依照试剂瓶标签所示的温度保留，开封后的酶标板要加干燥剂后密封保留于-20℃，防止湿润。 温馨提示：试剂盒内酶标条可拆卸，按试验需要可分屡次运用;运用后的剩下试剂盒主张在初次试验后1个月内运用结束。商品过期时刻以盒子上的标签为准，保质期内一切组分都保证是安稳的。
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兔ELISA试剂盒为何备受推崇?
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
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热销 physitemp小鼠测温仪探头RET-3（现货）
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
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