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洗板时ELISA试剂盒的洗液不能混用
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
ELISA试剂盒洗板时留神各种试剂盒的洗液不要混用。然后削弱蛋白质与固相载体的联络,并借助于亲水基团和水分子的联络作用,使蛋白质回复到水溶液状况,然后脱离固相载体。洗刷液中的非离子型洗刷剂通常是吐温20,其浓度0.05%-0.2%之间,高于0.2%时,可使包被在固相上的抗原或抗体解吸附而减低试验的灵敏度。假定洗液需要稀释,应按恳求稀释,所用的水电导率在1.5us/cm之下,洗液假定结晶应待其融解后制作。保证洗板浸泡时刻为40 秒左右,孔内液体被洗板机吸收得越洁净洗刷作用非常好,手艺洗板防止洗液在孔内构成气泡。ELISA试剂盒选择着试验的胜败。聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的,而在洗刷时应把这种非特异性吸附的干扰物质洗刷下来。反响板不宜叠放,以保证各板的温度都能灵敏平衡。其他温育中还有边缘效应,边上的值会偏高,主张为了客观的区别作用,将质控放在非边缘方位。便是靠洗刷来到达别离游离的和联络的酶符号物的意图。经过洗刷以铲除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体联络的物质,以及在反响过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。应留神温育的温度和时刻应按规则力求准确。ELISA试剂盒温育是在空气浴中完毕,选用水浴会构成值偏高或花板。
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一个完整合格的ELISA试剂盒组成
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
近期多地区ELISA试剂盒都开始有大量降雨现象,梅雨季的到来,更是对夏季的意味加深,此后就快要到高温时节了,要加强对实验的温度问题做好啦。在昨日中,我司对ELISA试剂盒组成做了总结,下面就来看看吧。1、已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂);2、酶标记的抗原或抗体(结合物);3、酶的底物;4、阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),参考标准品和控制血清(定量测定中);5、酶联物(结合物)及标本的稀释液;6、洗涤液;7、ELISA试剂盒酶反应终止液。
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高品质ELISA试剂盒标本宜在新鲜时检查,您造吗?
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
高品质ELISA试剂盒标本宜在新鲜时检查。如有细菌污染,菌体中也许富含内源性HRP,也会发作假阳性反应。保留过久可发作聚合在ELISA中可使本底加深。 冻住标本溶解后,蛋白质部分浓缩,散布不均,应充沛混匀宜轻缓,防止气泡,可上下颠混合,不要在混匀器上激烈震动,污浊或有沉积的标本应先离心或过滤,弄清后再检查,重复冻融会使蛋白效价下降,所以代测样本如需保留作屡次检查,宜少数分装冰存。严格按照说明书的操作进行,试验结果判定有必要以酶标仪读数为准,酶标包被板开封后如未用完,应立即装入密封袋中加干燥剂保留。高品质ELISA试剂盒报价主张一切的规范品、样本和空白对照都做双份检查,取平均值,以减小试验差错,若显色过浅,可适当延伸底物温育时。 德尔塔生物ELISA试剂盒在长期的销售实践中形成了独特的市场优势,产品齐全、价格合理、经营稳健、信息反馈及时、并能随时随地享受国外供应商zui直接、zui周到、zui完善的售后服务。作为生物技术产品销售的综合性生命科学公司,我司在免疫学、分子生物学和常规生化试剂方面表现的尤为。想要了解更多ELISA试剂盒文章资讯,欢迎锁定上海德尔塔生物科技有限公司!
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劲马为您简单介绍“试剂盒”这个词
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
试剂盒是什么?本章就有上海劲马为您简单介绍: 试剂盒简单说就是能完成一个特定的生物学实验的必需的试剂/器材的集合,例如分子生物学实验中zui常见的提取质粒DNA需要的三种buffer。生物试剂公司把这些必需的东西都包装在一个盒子里面出售,这样一个盒子里面的东西就能保证你完成一个特定的实验。 对的,就这么简单,上海劲马所主推的Elisa试剂盒在国内有许多种叫法:例如:ELISA检测试剂盒、ELISA?Kit、酶联免疫试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒、酶联免疫分析试剂盒、酶免试剂盒等,比较常见的叫法是ELISA检测试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒等?ELISA试剂盒自从60-70年代问世以来,得到*科研工作者的认可及推崇,在欧美及中国获得很大的推广,尤其是国内生化领域的长足发展。?Elisa生物试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。 免疫测定技术的基础在于抗原抗体之间的特异结合反应,所以任何的诊断试剂离不开的原料,如抗原抗体,酶等。以前用于免疫测定的抗原通常为各种纯化抗原,而抗体则为纯化抗原免疫动物后获得的多克隆抗体和使用杂交瘤技术得到的单克隆抗体,而抗原或抗体的标记物如酶标结合物则通过各种化学合成方法制备。近年来,随着分子生物学的发展,使用基因工程方法制备各种特殊的抗原或抗体及其酶结合物等免疫测定试剂几成为现实的新一代试剂,各种新型使用的测定方法也不断出现。 上海劲马产品达上万种,由于网上数据有限,如您在我司未找到您想要的产品,请在线我司,或咨询。我们竭诚为您服务。
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如何降低ELISA试剂盒实验背景,上海恒远来告诉您!
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
ELISA实验的原理似乎很简单,不外乎固定抗原,添加一抗、二抗和底物,间中夹杂着洗涤和封闭。然而,即使是平淡无奇的洗涤和封闭,如果做得不太好,也有可能毁了整个实验。在实验结束时,我们是否能获得有意义的信息,ELISA试剂盒这在很大程度上取决于结果的信噪比。ELISA试剂盒背景噪音会影响您对结果的判断。如何降低ELISA的背景,上海恒远总结如下: 洗涤很重要 洗涤步骤看似很无聊,其实很重要,因为如果未结合的材料(如非特异结合的抗体或检测试剂)残留在微孔板中,那么它会增加背景噪音。如有必要,可增加洗涤液中的盐浓度,这会阻止非特异结合反应。如果背景过高,而您怀疑洗涤不够时,可以尝试增加洗涤次数。 封闭更关键 封闭液的作用是让不相关的蛋白占据微孔板中潜在的结合位点。这就降低了可产生信号的抗体非特异结合的机会。您当然也希望抗体只与目的蛋白结合吧。如果您的背景过高,怀疑封闭不充分,那么您可以尝试使用更高浓度的封闭液,或适当延长封闭时间。 如果您一直被背景问题所困扰,那么也许您该花些时间来优化封闭液。这可能需要时间,但也是值得的。目前主要有两种类型的封闭液:蛋白和非离子型去污剂。您使用的类型须取决于多个因素,包括微孔板的表面试剂、ELISA试剂盒吸附的抗原、您的抗体和检测试剂。好的封闭液应降低非特异性结合,但它不应当与抗原、抗体或检测试剂发生相互作用。 ELISA实验zui常用的非离子型去污剂是Tween-20。这种封闭液便宜、稳定,在去除洗涤过程中的一些非特异结合上很有用。但它们只在存在时起作用,ELISA试剂盒因为很容易被洗掉。因此所有洗涤液中也必须添加封闭液。请勿使用高浓度(正常浓度为0.01-0.1%),它会降低特异结合,产生假阴性。另一个选择是使用蛋白和非离子型去污剂这两种封闭液,后者可协助洗涤过程中的封闭。 蛋白封闭液则有所不同,是*的。它们与开放位点结合并封闭,同时稳定与微孔板结合的抗原分子。常用的蛋白封闭液包括牛血清白蛋白(BSA)
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蛋白定量实验须知的流程
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
上海德尔塔生物科技有限公司(蛋白定量)技术服务流程 一、蛋白定量概述 蛋白定量即蛋白质定量,蛋白质的定量分析是生物化学和其他生命学科员常涉及的分析内容。在生化实验中,对样品中的蛋白质进行准确可靠的定量分析,是经常进行的一项非常重要的工作。根据物理性质可采用紫外分光光度法,紫外分光光度法是根据物质分子对波长为200-760nm这一范围的电磁波的吸收特性所建立起来的一种定性、定量和结构分析方法。操作简单、准确度高、重现性好。波长长(频率小)的光线能量小,波长短(频率大)的光线能量大。分光光度测量是关于物质分子对不同波长和特定波长处的辐射吸收程度的测量。 二、客户须知 1、标本类型:可为液体类(细胞培养上清、血清、血浆、尿液、胸水、腹水、脑脊液等);组织(动物、植物各种组织) 2、样本保存:请尽早检测,2-8℃保存一周左右;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存。 如需周期收集样本,请将样本及时分装标号后,置-20℃或-70℃保存;避免反复冻融。 3、请提前告诉我们:您样本的种属(人、大鼠、小鼠、兔、猪等)、样本数量、待测指标。 三、报告内容及标准 1、实验结果 2、详细的实验步骤 3、完整的实验报告(试剂耗材,实验方法,实验结果及结果说明)。 四、收费标准及服务周期 收费标准及服务周期因根据客户提供的样品不同而有所改变,详细请跟客服专员或参考所签署的合作合同。 五、质量保证 本法可用于检测包括血清、血浆、尿液、细胞培养上清、组织匀浆,细胞裂解液等标本,本方法操作简单、准确度高、重现性好,此实验有专门实验人员操作,可保证实验结果的高准确性及时间性。 六、售后服务 本公司会不定期进行顾客回访,以提高我们的服务质量。本条款以所签订的合作合同为依归,详情会因合同内容的不同而有所差异。
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上海劲马技术解说:如何灵活运用ELISA试剂盒?
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
ELISA实验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,但是真正到自己上手的时候还是会犯糊涂,出状况!如何更好地运用ELISA试剂盒、掌握ELISA实验呢?上海劲马技术为您解说:如何灵活运用ELISA试剂盒? 1.对于一些小分子的检测,一般来说,要用竞争法ELISA去检测,也要购买采用这个方法的盒子。一般细胞因子的检测,都是采用常规的夹心法ELISA检测,因为因子分子量比较大,一般10几个KD左右,很容易找到两个或者多个抗原表位。 而小分子很难找到两个不同的表位,也就决定了包被抗体和检测抗体无法同时结合小分子并固相化。解决方案就是酶标板上包被二抗,每个孔加入一定量的酶标的小分子,然后加样品,再加不带标记的检测抗体,显色底物。样品的目的小分子的含量越高,吸光度越低。 2.还有一个问题,这是不是客户的误区,就是拿来一个指标就想当然地尝试用ELISA去检测。ELISA检测方法简单,灵敏度高,但是该检测活性的检测活性,该做western的做western。 上海劲马对ELISA的操作提醒: 1.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。 2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。 3.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。 4.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。 5.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。 要想熟练的灵活运用ELISA试剂盒,还需要多动手操作。在实验中遇到相关技术问题,都可我司技术人员,上海劲马为您解答!
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胎牛血清相关知识,免费科普啦!
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
胎牛血清取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。显然,胎牛血清是品质zui高的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分zui少。 胎牛血清是细胞培养中用量zui大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。 1.提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。 2. 提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调变它们所结合的物质活力。 3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。 4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。 5.起酸碱度缓冲液作用。 6.提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。 上海恒远是国内的、的科研试剂供应单位,产品齐全,价格透明,公司主营:Elisa试剂盒,,生物试剂,血清,抗体,标准品,国产血清、GIBCO胎牛血清等。
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订购舜冉细胞株事先需要准备什么
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
1.客户应具有一定细胞培养知识与经验,并具备基本培养条件(细胞培养实验室,无菌操作台,二氧化碳培养箱,倒置显微镜等)2.认真阅读细胞株说明书,如有不清楚可直接负责的销售人员进行索要细胞培养技术,进行沟通处理。并按说明书要求准备好相应的无菌的培养基,血清,双抗,细胞培养瓶,培养板等。(细胞培养相关产品也可直接在舜冉订购)
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ELISA实验出现异常的原因
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
在使用ELISA试剂盒做实验的时候,有些细节若是做不好会出现实验异常,或者效果不佳,那么你有想过是什么原因吗? 一、白板异常:显色步骤结束后,酶标板所有孔均无颜色。阳性对照不显色。 1. 试剂已过效期,或不同试剂盒组分混用(解决方式:检查试剂的组分及批号,确认未过期以及所有组分均属对应的试剂盒。不同试剂盒或不同批号的试剂不能混用)。 2. 错加、漏加试剂底物、显色剂 A或B(解决方式:严格按说明书的步骤操作,加完试剂后可观察一下液面高度是否一致,以减少漏加现象)。 3. 洗板及加样过程中,酶标受污染失活失去催化显色剂显色的能力(解决方式:确认盛酶标的容器不含酶抑制剂如叠氮钠等,确认配制洗液的容器已洗干净)。 4. 终止液误作洗涤液稀释或当底物缓冲液配制(解决方式:每次配制时都应看清标签标明物质)。5. 蒸馏水有问题(解决方式:确认配制洗液的纯化水达到要求且未污染,与好蒸馏水比较)。·显色弱、灵敏度低:实验结束后,包括阳性对照、质控在内的所有板孔颜色均较淡。 二、阴阳性对照正常,但质控、参考品或个别弱阳性标本未能检出。 1. 未达要求的孵育温度及孵育时间可检出强阳性标本,但质控或弱阳性标本受 温度变化影响较大而被未检出(解决方式:质控品或标本避免反复冻融。标本在一周内使用的,可存于 2-8℃,如需长期保存,应置于-20℃以下保存。质控品应小量分装,并置于-20℃以下保存)。 2. 质控品或标本高温放置过久,或被反复冻融致待测物滴度下降,而未能检出(解决方式:重新设定酶标仪的参数,特别是检查滤光片是否匹配)。 3. 仪器设定不正确,滤光片不匹配(解决方式:重新设定酶标仪的参数,特别是检查滤光片是否匹配)。 三、实验结束后,阴阳性对照正常,质控正常,但临床标本感觉显色较弱 1. 待测标本中可能不含强阳性标本,故结果可能是正常的(解决方式:如有怀疑,可复检)。 2. 标本加入叠氮钠作为防腐剂(解决方式:酶免实验中的标本禁用叠氮钠作
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甲硫氨酸试样制备过程
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
中文名称:甲硫氨酸英文名称:methionine;Met1. 高氯酸滴定液(0.1mol/L) 配制:取无水冰醋酸(按含水量计算,每1g水加醋酐5.22mL)750mL,加入高氯酸(70~72%)8.5mL,摇匀,放冷,加无水冰醋酸适量使成1000mL,摇匀,放置24小时。若所测供试品易乙酰化,则须用水分测定法测定本液的含水量,再用水和醋酐调节至本液的含水量为0.01%~0.2%。 标定:取在105℃干燥至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾约0.16g,精密称定,加无水冰醋酸20mL使溶解,加结晶紫指示液1滴,用本液缓缓滴定至蓝色,并将滴定结果用空白试验校正。每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于20.42mg的邻苯二甲酸氢钾。根据本液的消耗量与邻苯二甲酸氢钾的取用量,算出本液的浓度。 2. 结晶紫指示液 取结晶紫0.5g,加冰醋酸100mL使溶解。 操作步骤: 精密称取供试品约0.13g,加无水甲酸3mL与冰醋酸50mL溶解后,照电位滴定法,用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定,并将滴定的结果用空白试验校正。每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于14.92mg的C5H11NO2S。
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ELISA实验的前期准备
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
实验者在挑选好了产品之后要怎样去使用,今天我们就一起来看看ELISA实验的前期准备。 ELISA实验的前期准备: 1、准备各种实验仪器及材料(如:微量移液器、吸头、医用蒸馏水等)。 2、浓缩样品稀释液与医用蒸馏水1:4倍稀释成应用样品稀释液。 3、使用前应将盒内各试剂取出,室温放置至少30分钟。 4、用应用样品稀释液来稀释样品,按照1:100的体积比来稀释样品如10μl的样品加入到1ml的应用样品稀释液中,充分混匀待用。 5、浓缩洗液与医用蒸馏水1:19倍稀释后成为应用洗涤液。 今天的内容就到这里了,了解更多的ELISA试剂盒技术资讯,欢迎您关注我公司,我公司每周都会有的新闻实验等内容要分享给您。
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ELISA实验的应对策略
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在科研上得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,ELISA试剂盒如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。今天我们将操作中各个环节常出现问题解决办法总结于下,整理出应对策略:选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。标本收集与保存:避免使用肉眼可见的溶血标本、高脂标本和混浊标本;2-8℃下,标本可放置24-48小时,长期保存需放置-20℃下。请避免反复冻融。试剂盒中会有提示,一般需要准备的有: 洗涤液;用前配制;有的试剂盒会标明,配好的4度下一般可以放一个月;如果没有标明,尽量用新鲜的,不要多配制。 显色液(有A液和B液的),用前15分钟配制;标准品:有的试剂盒中标准品是已经配制好的,4度保存,有的是要现配制的,按照说明书操作; 浓缩生物素结合的二抗和HRP:如果需要配制,试剂盒没注明配好可以保存多久的话,尽量现配现用(用前15分钟配制); 原则是:试剂盒上没有指出配制物的储藏方式的话,应该现配现用;不要怕麻烦;还有小瓶的管子开盖前要离心,以免盖子上粘连以后总量不够。室温温育的试剂,特别是温育时间比较短的实验操作的试剂,加样对数据的影响比较大,特别要注意加样问题。 我们追求优良的质量保障,为您提供价格适宜的产品,欢迎新老客户,产品涵盖ELISA试剂盒,进口ELISA试剂盒、实验耗材等!咨询我公司业务人员!
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胆红素的鉴别
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
中文名称:胆红素英文名称:bilirubin性状 本品为橙色至红棕色结晶性粉末。 鉴别(1)取〔含zui测定〕项下溶液,照紫外-可见分光光度法(附录ⅤA),在400~500nm波长处,测定吸收曲线,并与胆红素对照品图谱比较,应一致,其zui大吸收为453nm。 (2)取本品,加三氯甲唍制成每1ml含0.lmg的溶液,作为供试品溶液。另取胆红素对照品同法制成对照品溶液。照薄层色谱法(附录ⅥB)试验,吸取上述两种溶液各10μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸(10:l:0.5)为展开剂,展开,取出,晾干。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。 检查 干澡失重取本品约0.5g,五氧化二磷60℃减压干燥4小时,减失重量不得过2.0%(附录ⅨG)。 含量测定 取本品约10mg,精密称定,用少量三氯甲唍研磨后转移至100ml棕色量瓶中,超声处理使溶解,取出,迅速放冷,再加三氯甲唍稀释至刻度,摇匀。精密量取5ml,置另一100ml棕色量瓶中,加三氯甲唍稀释至刻度,摇匀。照紫外-可见分光光度法(附录ⅤA),在453nm的波长处测定吸光度,按胆红素的吸收系数()1038计算.即得。
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HAKATA胎牛血清的作用
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
胎牛血清(FBS)的作用:1、提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。2、提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调变它们所结合的物质活力。3、有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。4、是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。5、起酸碱度缓冲液作用。6、提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。胎牛血清是品质zui高的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分zui少;牛血清是细胞培养中用量zui大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。