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硫酸铁铵的原理
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
中文名称：硫酸铁铵英文名称：ammonium ferric sulfate性状：纯品是无色的，但一般的是淡紫色八面晶体。用途：用作分析试剂和媒染剂，也用作制造药物等的原料。原理： 硫酸铁铵指示剂法应在稀硝酸溶液中进行，因铁离子在中性或碱性介质中能形成氢氧化铁沉淀。为防止沉淀转化（AgCl＋SCN-→←AgSCN＋Cl-），硫酸铁铵指示剂法加硝酸银滴定液沉淀后，应加入5ml邻苯二甲酸二丁酯或1～3ml硝基苯，并强力振摇后再加入指示液，用硫氰酸铵滴定液滴定。滴定应在室温进行，温度高，红色络合物易褪色。滴定时需用力振摇，避免沉淀吸附银离子，过早到达终点。但滴定接近终点时，要轻轻振摇，减少氯化银与SCN-接触，以免沉淀转化。
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ELISA试剂盒利益表现
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
ELISA试剂盒利益首要表现：特异性高：进行了广泛的非特异性排查，避免了由于交叉反应和烦扰致使的试验数据误差。 精 度 高：通过加标回收率和线性稀释试验，保证样本值的准确性，度高于同类商品。重复性好：lot-to-lot查看保证zui小的批间差异。 可靠性强：经优化的试剂盒组分可有用的阻遏假阳性和假阴性试验成果。 标准曲线：在保证数据的前提下供应较宽的查看规划，以满足需求。 报价低价：*RD试剂，国内分装配备，大大减少了客户由于报价高而有必要收购国产试剂盒的忌惮。
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细胞冻存你知道多少?
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
细胞冻存是细胞保存的主要方法之一。利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存，可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来，这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。而且适度地保存一定量的细胞，可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种，起到了细胞保种的作用。因此及时进行细胞冻存十分必要。细胞冷冻储存在-70℃冰箱中可以保存一年之久；细胞储存在液氮中，温度达-196℃，理论上储存时间是无限的。原理 细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融，实验证明这样可以zui大限度的保存细胞活力。目前细胞冻存多采用甘油或二甲基亚砜作保护剂，这两种物质能提高细胞膜对水的通透性，加上缓慢冷冻可使细胞内的水分渗出细胞外，减少细胞内冰晶的形成，从而减少由于冰晶形成造成的细胞损伤。复苏细胞应采用快速融化的方法，这样可以保证细胞外结晶在很短的时间内即融化，避免由于缓慢融化使水分渗入细胞内形成胞内再结晶对细胞造成损伤。注意事项 1．从增殖期到形成致密的单层细胞以前的培养细胞都可以用于冻存，但为对数生长期细胞。在冻存前一天换一次培养液； 2．将冻存管放入液氮容器或从中取出时，要做好防护工作，以免冻伤； 3．冻存和复苏用新配制的培养液。
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细胞株培养时消毒灭菌的方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
细胞株严格的消毒灭菌对保证细胞培养的成功是极为重要的，其方法分为物理法和化学法两类。前者包括干热、湿热、滤过、紫外线及射线等，后者主要指使用化学消毒剂等。①热灭菌：玻璃器皿，160~170℃，90~120min或180℃45~60min。②蒸气灭菌：用于玻璃器皿、滤器橡胶塞、解剖用具、耐热塑料器具、受热不变性的溶液等，不同物品其有效灭菌压力和时间不同，如培养用液、橡胶制品、塑料器皿等用68kPa(115℃)高压灭菌10min;布类、玻璃制品、金属器械等用103kPa(121.3℃)高压灭菌15~20min。③滤过除菌：适于含有不耐热成分的培养基和试剂的除菌，用孔径为0.22μm微孔滤膜可除去细菌和霉菌等，用此滤膜过滤两次，细胞株可使支原体达到某种程度的去除，但不能除去病毒。④紫外线：紫外线的波长为200~300nm，zui强是在254 nm，6~15平方米zui少一只紫外灯，高度要在2.5m以下，湿度45%~60%，杆菌效果好，球菌次之，霉菌、酵母菌zui差，实验前应不低于30分钟的照射时间。⑤熏蒸消毒：当遇有细胞培养出现多次污染，或实验室两个月一次的常规消毒，均可用高锰酸钾5~7.5g，加甲醛(40%)10~15ml，混合放入一开放容器内，立即可见白色甲醛烟雾，消毒房间需封闭24小时，致少4小时以上。⑥煮沸消毒：紧密情况时使用，金属器械和胶蹇在水中煮20~30分钟，趁热倾去水分即可使用。⑦化学消毒：化学药品消毒灭菌法是应用能杀死微生物的化学制进行消毒灭菌的方法。实验室桌面、用具及洗手用的溶液均常用化学药品进行消毒杀菌。细胞株常用的有：2%煤酚皂溶液(来苏尔)、0.25%新洁尔灭、3~5%甲醛溶液、75%酒精。
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转化细胞实验室*仪器简单介绍
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
一、CO2培养箱 CO2培养箱是转化细胞培养的*仪器，它为细胞提供了一个体外培养的舒适环境，如适宜的温度、湿度、酸碱度、O2浓度等。细胞在体外培养时很容易受到各种细菌、微生物的感染，因此，CO2培养箱的灭菌和抑菌能力就显得尤为重要。 二、纯水系统 细胞培养用水一般要求双蒸水(0.8MΩ以上)，实际上普通蒸馏水经玻璃器皿中按标准方法蒸馏二次得到的双蒸水是不能满足要求的，而且水中的内毒素直接参与细胞凋亡，血清中内毒素含量越低，对细胞毒性越小，越利于细胞的生长和传代;内毒素含量过高，会直接导致细胞提前老化。因此建议配置正式的水纯化系统。 三、超净工作台/生物安全柜 细胞培养对无菌环境要求很高，在细胞操作时，一般需要在100级空气质量条件下进行，因此超净工作台或生物安全柜就必须配备。 四、液氮罐 为了保存细胞，特别是不易获得的突变型细胞或细胞株，要将细胞冻存。冻存的温度一般为液氮温度-196℃，因此，需要液氮罐。在此环境中，一般细胞可以保存十年具有活性。 五、超低温冰箱 转化细胞的冻存过程需要一系列程序降温，一般4℃下存放30 min，转放-20℃ 1 hour，再转入-70至-80℃过夜，之后才可以转移到液氮内(-196℃)，这时就必须配备一台-86℃超低温冰箱。一般超低温冰箱保存细胞可达数月，对于不需要长期冻存的细胞，可暂时放于超低温冰箱保存。 六、恒温水浴 从液氮或超低温冰箱中取出细胞冻存管需要立即放于37℃水浴中快速复苏之后才传代培养，因此，恒温水浴也是细胞实验室*仪器。 七、离心机 细胞培养需要离心收集传代细胞，所以需要配置低速的常温离心机，对于后期细胞内容物的分离则需要高速冷冻离心机。 八、移液器和细胞培养的大量耗材 细胞实验中有大量频繁的移液操作，因此各种微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是*的。各类细胞培养板、细胞培养瓶、移液管等耗材更是不可或缺的，而且一次性，用量极大。 除上述仪器外，高压灭菌锅、倒置显微镜也是细胞培养的*仪器，发酵
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SPF巴马小型猪的培育及应用
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
小型猪在体型、大小、生理学及疾病发展等方面与人有较大的相似性，是理想的实验动物模型，在探索人的生命活动规律以及研究人类疾病的致病机制**、预防、药物筛选等方面均显示出独特的优势。美国在50年代初开始了小型猪的培育开发研究，我国对小型猪的研究开始于20世纪80年代初，虽然起步较晚，但是我国小型猪原始资源十分丰富，目前我国的小型猪品种主要有：五指山小型猪贵州小型香猪，藏猪版纳微型猪，广西巴马小型猪等；其中，广西巴马小型猪则具有国内其他品种小型猪的绝大部分优点。我国目前缺少病原微生物学和寄生虫学质量控制、遗传学背景清晰的SPF猪种群，缺少质量控制标准。巴马小型猪在分类学上与普通家猪相同，属于哺乳纲，偶蹄目，野猪科，猪属动物。小型猪由于它体型矮小、性成熟早、遗传性稳定、繁殖性能强、性情温驯、部分生理生化指标与人类相似等这些特有的生物学特性，易于实验操作，适合实验动物模型的建立。作为实验动物，巴马小型猪在人用猪源生物活性材料生产以及胚胎移植等研究中起着重要作用，实验用巴马小型猪有望取代猴、犬等成为被大量使用的新型实验动物。微生物学质量控制是实验动物标准化的重要内容之一，由于微生物感染实验动物可不同程度地干扰试验结果，污染试验材料，影响实验动物生产，甚至威胁人类健康。巴马小型猪的微生物学质量在一定程度上限制了其推广应用，培育SPF巴马小型猪基础群及核心群已迫在眉睫。因此，本项目开展了SPF 巴马小型猪的培育及应用研究，解决实验用猪瓶颈问题，提升我国动物疫病防控能力，实现种质资源共享利用。
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细胞传代密度及时间的确定
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
细胞传代密度及时间的确定1）细胞在扩增传代时，传代时的密度以及传代后的密度是通过什么方法确定的？是选取不同的密度传代对比生长曲线与活率曲线，还是在复苏后直接看其生长曲线？确定的标准是什么，我现在的想法是传代密度（复苏后直接看其生长曲线）到细胞缺糖与乳酸浓度较高时，接种后密度的确定为其进入对数期时的起点密度。（2）接种密度的确定，我们现在做的接种密度与传代密度是一致的。是不是正常接种密度与传代密度都一样？我们做了几个密度的Batch,对比了一下产量与质量，确实还是存在差异。传代与接种密度的确定主要是为了保证培养工艺的简单可重复，一般低密度如果不影响生长，工艺更简便，为了保证可操作性一般密度都规定一个范围。批次实验中不同接种密度对表达影响应该很小，但密度高必然培养时间段。质量这块的话，如果密度影响都这么大，那么将来工艺中加入其它条件，恐怕还会有影响，还是好好研究下产品本身，如果不稳定，将来会很难做。
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大肠杆菌培养基的制作流程
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
大肠杆菌培养基的制作流程： 1、加热,将琼脂融化 2、如果是要做试管,就加分装3ml培养基到试管,塞上试管塞,如果是做平板,就将培养基倒入锥形瓶中 3、按照培养基规定的灭菌方式灭菌 4、如果是斜面,则将灭菌后的试管放成一个梯度,是培养基形成一个斜面,如果是平板,就趁培养基凝固前将其倒入平板中,每个大约25ml,平板放置5min左右凝固后即可。 Baird-Parker琼脂平板（9cm） 10个/包 用于金黄色葡萄球菌的选择性分离培养 大肠杆菌培养基 Baird-Parker Agar Base 孟加拉红培养基平板（9cm） 10个/包 用于食品中霉菌及酵母菌总数测定 Rose Bengal Medium 牛津琼脂（OXA）平板（9cm） 10个/包 用于单增李氏菌的选择性分离 Oxford Agar Base PALCAM琼脂平板（9cm） 10个/包 用于单增李氏菌选择性分离 PALCAM Agar MRS琼脂平板（9cm） 10个/包 用于食品中乳酸菌总数测定 MRS Agar TCBS琼脂平板（9cm） 10个/包 用于致病性弧菌的选择性分离 Thiosulfate Citrate Bile Salts Sucrose Agar 玫瑰红钠琼脂平板（9cm） 10个/包 用于霉菌、酵母菌计数 Rose Bengal Medium 庆大霉素琼脂平板（9cm） 10个/包 用于霍乱弧菌的分离培养 Gentamycin Agar BCYE琼脂平板（9cm） 10个/包 用于军团菌的选择性分离培养 BCYE Agar Base GVPC琼脂平板（9cm） 10个/包 用于军团菌的选择性分离培养 GVPC Agar Base 大肠杆菌培养基
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大肠菌群实验的检测步骤
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
微生物菌种实验原理 所谓大肠菌群，是指在37℃培养24h 内能发酵乳糖产酸、产气的兼性厌氧的革蓝氏阴性无芽孢杆菌的总称。主要由肠杆菌科中四个属内的细菌组成，即埃希氏杆菌属、柠檬酸杆菌属、克雷伯氏菌属和肠杆菌属。 水的大肠菌群数是指100 mL水检样内含有的大肠菌群实际数值，以大肠菌群zui近似数(MPN)表示。在正常情况下，肠道中主要有大肠菌群、粪链球菌和厌氧芽孢杆菌等多种细菌。这些细菌都可以随人畜排泄物进入水源，由于大肠菌群在肠道内数量多，所以，水源中大肠菌群的数量，是直接反映水源被人畜排泄物污染的一项重要指标。目前，上已公认大肠菌群是粪便污染的指标。因而对饮用水必须进行大肠菌群的检查。 水中大肠菌群的检测方法，常用多管发酵法和滤膜法。多管发酵法可适用于各种水样的检验，但操作繁琐，需要的时间较长。滤膜法仅适用于自来水和深井水，操作简单、快速，但不适用于杂质较多、易于堵塞滤孔的水样。 材料与器皿 (—)培养基 1、普通乳糖蛋白胨培养液 蛋白胨 10g，乳糖5g，氯化钠 5g，1.6%溴甲酚紫乙醇液 1.0mL，蒸馏水 1000mL，pH 7.2~7.4。 将蛋白胨、乳糖、氯化钠加热溶解于1000mL蒸馏水中，调节pH为7.2~7.4，再加入1.6%溴甲酚紫乙醇液1.0mL，充分混匀，分装于有杜汉氏小管的试管中，每管10mL，115℃灭菌20min。 2、三倍浓缩乳糖蛋白胨培养液 按上述普通乳糖蛋白胨培养液浓缩三倍配制，分装于有杜汉氏小管的试管中，每管5mL。 1、 品红亚硫酸钠培养基(供平板分离用) 蛋白胨 10g， 乳糖 10g，K2HPO4 3.5g，琼脂 15～20g，蒸馏水1000mL，无水亚硫酸钠 5g，5%的碱性品红乙醇溶液 20mL，pH 7.2~7.4。 4、伊红美蓝培养基(EMB培养基)(供发酵法平板分离用，3和4可任选一种) 蛋白胨10g，乳糖10g，K2HPO4 2.0g，琼脂20g，蒸馏水1000mL，2%伊红(曙红)水溶液 20mL，5%美蓝(亚甲蓝)水溶液13mL，pH 7.2~7.4。 (二)灭菌移液管、灭菌稀释水、试管、杜汉氏小管、革兰氏染色液、灭菌培养皿。
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elisa酶联免疫试剂盒说明书实验中出现的意外状况解决方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
elisa酶联免疫试剂盒说明书运用校对过的微量移液器，打扫天然差错。移液器准确与否对定量查看尤为主要。仔细阅读说明书严厉按照说明书恳求进行规范化操作。不一样批号的试剂不可混用。值得改进的本地，重复实验断定树立后才华改进。洗刷彻底洗板不彻底，酶联络物本底显色会出现假阳性。洗刷液要新鲜，现用现配，陈腐的洗刷液会出现本底增高现象，也或许出现假阳性。严控反响时间反响时间过长，酶失活；反响时间过短，酶联络物不能与血清中的微生物抗原抗体充分联络，生成物结构懈怠不健壮，简单洗掉，都或许构成假阴性。过保存期的elisa酶联免疫试剂盒说明书不能运用留意ELISA试剂盒保存期，过保存期的试剂不能运用。评估试剂的实用性试剂的稳定与否，对准确率的高低到头主要。在试剂启用前，应进行阴、阳对照及样品重复比照实验。显色时间过短，参与中止液反响中止后，底物联络物的量过少，易出现假阴性。逾越显色恳求时间后显色，应判为假阳性，这或许与试剂本身有关。elisa酶联免疫试剂盒说明书加显色剂后当即显色，不可报阳性，这或许是本底显色的效果。
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羊源性成分核酸检测PCR-荧光探针试剂盒样本吹干后的操作方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
羊源性成分核酸检测PCR-荧光探针试剂盒在吹干样本之前，用甲醇清洗针头，避免杂质搅扰。因为净化进程中引入的溶剂，可能会降低待测组分的浓度或许不适宜直接分析，需要去掉悉数有机溶剂。湿盒应先放在保温箱中预温至规矩的温度，特别是在气温较低的时分更应如此。无论是水浴仍是湿盒温育，ELISA试剂盒反响板均不宜叠放，以保证各板的温度都能活络平衡。室温温育的反响，操作时的室温应严峻捆绑在规矩的范围内，标准室温温度是指20-25℃，但具体操作时可根据说明书的恳求操控温育。羊源性成分核酸检测PCR-荧光探针试剂盒样本吹干后应当即取下，避免吹的时间过长，ELISA试剂盒影响究竟查看效果。室温温育时，ELISA试剂盒板只需平置于操作台上即可。应留心温育的温度和时间。为保证这一点，一个人操作时，一次不宜多于两块板一起测定。即试剂盒前处理进程中把样本在60℃氮气下吹干，再用复溶液溶解单调残留物。浓缩方法：氮气吹干除杂、压缩空气吹干除杂。在吹样本时，针头应在液面上空，避免与样本触摸，避免发作交叉污染。在实习运用中，通过不一样的方案，具体的方法进程可有多种。不一样的药物，吹干后样本的保质期不一样，建议待样本回到室温后当即复溶。羊源性成分核酸检测PCR-荧光探针试剂盒然后保证试验效果的特异性与稳定性。
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抗原elisa试剂盒标本问题的解决方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
抗原elisa试剂盒zui常用的标本是血清，血浆通常可视为与血清同等的标本，标本致使的假阳性和假阴性成果主要是搅扰性物质所形成的，分为内源性物质和外源性物质两种： 内源性物质有人以为大概40%的人血清标本中含有非特异性搅扰物质，能够不一样程度影响检查成果。 多见的搅扰物质有：类风湿因子、补体、嗜异 性抗体、嗜靶抗原本身抗体、医源性诱导的抗鼠Ig （s）抗体、穿插反响物质和等。 （1）类风湿因子 人血清中IgM、IgG型类风湿因子（RF）能够与ELISA体系中的捕获抗体及酶符号二抗的FC段直接，然后致使假阳性。 处理该情况的方法是： ①用F（ab）2代替完好的IgG； ②标本用联有热变性（63℃，10 min）IgG的固相吸附剂处理（将热变性IgG参加到标本稀释液中同样有效）； ③检查抗原时，能够用2-巯基乙醇等参加到标本稀释液中，使RF降解。 （2）补体 ELISA体系中固相一抗和符号二抗过程中，抗体分子发作变构，其FC段的补体C1q分子位点被露出出来，使C1q 能够将二者连接起来，然后形成假阳性。 抗原elisa试剂盒处理的方法是： ①用EDTA稀释标本； ②用53℃，10 min或56℃，30 min加热血清使C1q灭活。 （3）嗜异性抗体 人类血清中含有能与啮齿类动物（如鼠等）Ig （s） 的天然嗜异性抗体，可将ELISA体系中一抗和二抗连接起来，也能形成假阳性。 处理的方法是： 可在标本稀释液中参加过量的动物Ig （s） ，但参加量缺乏或亚类不一样时无效。 也含亲水基团，其疏水基团与蛋白质的疏水基团借疏水键，然后削弱蛋白质与固相载体的，并借助于亲水基团和水分子的效果，使蛋白质回复到水溶液状态，然后脱离固相载体。 洗涤液中的非离子型洗涤剂通常是吐温20，其浓度可在0.05%-0.2%之间，高于0.2%时，可使包被在固相上的抗原或抗体解吸附而减低实验的灵敏度。 洗液需求稀释，应按要求稀释。制造洗液使用新鲜的和高质量的纯化水，电导率小于1.5μs/cm，ELISA试剂盒洗液假如结晶应待其融解后制造。 手洗条件一致性较差，对成果影响较大，避免
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elisa试剂盒白介素类实验时所具备的新作用
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
elisa试剂盒白介素类在使用过程中，如出现温育条件不一致现象，可以：恒温箱温育较水浴显色深，OD值高出0.1-0.15，均采用恒温箱，如用水浴水温应控制在37℃。1.实现了在细胞或亚细胞水平上示踪抗原或抗体的所在部位，elisa试剂盒白介素类或在微克、甚至纳克水平上对其进行定量。2.其抗原抗体反应具有高度的特异性。3.将酶催化反应的放大作用和抗原抗体亲和反应的高度专一性、特异性相结合，以酶标记的抗原或抗体作为主要试剂进行免疫测试，所以具有很高的灵敏度。进口ELISA试剂盒可用于检测待测物质，经检测与其它相仪物质无明显交叉反应。由于受到技术及样本来源的限制，不可能完成对所有相关或相仪物质交叉反应检测，elisa试剂盒白介素类因此本试剂盒有可能与未经检测的其它物质有交叉反应。
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恢复培养冷冻干燥保藏的菌种方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
费氏弧菌发光杆菌建议用下列方法恢复培养冷冻干燥保藏的菌种。1、安瓶管开封用浸过70％酒精的脱脂棉擦净安瓿管。用火焰将安瓿管顶端加热。滴无菌水至加热的安瓿管顶端使玻璃开裂。用挫刀或镊子敲下已开裂的安瓿管的顶端。2、菌株恢复培养用无菌吸管，吸取0.3-0.5ml适宜的液体培养基,滴人安瓿管内,轻轻振荡,使冻于费氏弧菌发光杆菌溶解呈悬浮状取0.1-0.2ml菌体悬浮液，移植于适宜的琼脂斜面/平板培养基上，剩余的菌液，注入适宜的液体培养基内，然后在建议的温度下培养。 3、注意事项菌种活化前，请将安瓿管保存在6一10℃的环境下。厌氧菌的培养，如无特别说明，自开封至接种完成，均需以无氧气体充填，以保持厌氧状态。费氏弧菌发光杆菌经过冷冻干燥保存后,延迟期较长,需连续两次继代培养才能正常生长,此时请将步骤二重复 一次。
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了解2017年研域生物ELISA试剂盒包装更换通知
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
尊敬的研域生物ELISA试剂盒新老客户：感谢大家长期以来对我公司的信赖与支持，为适应市场的需要和发展，我公司ELISA试剂盒包装再次升级，所以试剂盒全部更换包装，新包装更加环保和精美，原ELISA试剂盒的包装将于2017年5月27日以后不再使用，新的ELISA试剂盒包装将于2017年6月启用，请认准上海研域生物品牌。 关于此次更换ELISA试剂盒包装，希望您能理解和支持，我们也将一如既往以高质量的产品和服务全力回报广大科研客户的厚爱和支持。上海研域生物代理商专业提供科研类进口原装、进口分装全系列品牌酶联免疫ELISA试剂盒。产品种类齐全、现货供应质量长期保障，是多家科研机构和高校ELISA试剂盒供应商，欢迎各位新老客户惠顾！
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