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WB检测中二抗的选择方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-21
WB检测之二抗 二抗选择 二抗是用一抗免疫动物制备的抗一抗的抗体，选择范围较窄，基本是商品化的，在不考虑二抗修饰类型的前提下，二抗的选择需要遵循以下原则：二抗来源种属、一抗来源种属和抗原来源种属互不相同。例如如果研究对象是人的蛋白X，选择了鼠抗X一抗，则可选择兔抗鼠二抗或者羊抗鼠二抗。 二抗选择要考虑的问题有： ①对单抗类一抗，二抗需与一抗的类别或亚类相匹配（多抗类一抗主要是IgG类免疫球蛋白故相应二抗就是抗IgG抗体，不作考虑）。 一抗类别或亚类 二抗 IgM 抗IgM IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3 抗IgG、抗IgG1、抗IgG2a、抗IgG2b、抗IgG3 未知 抗IgG ②某些组织或细胞含有较多的Fc受体，如脾脏、淋巴细胞等，此时二抗需要选择抗IgG F(ab’)2二抗，避免各种Ig保守结构域导致的交叉反应。然而各种Ig仍具有保守的轻链结构域，因此还是有一定程度的交叉反应。 WB检测之内参抗体 Western Blot检测方法不仅能检测靶蛋白存在与否，还能比较不同条件下或者不同组织中靶蛋白的相对表达量，可作为蛋白表达水平最直接的证据。在WB实验中有众多不确定因素影响靶蛋白表达水平的测定，如方法学本身性质、操作误差等。为准确衡量靶蛋白表达水平，需要精确一致的上样量，使用内参的意义即是保证上样量的一致。内参即内部参照（Internal Control），对哺乳动物细胞一般指管家基因的表达蛋白(Housekeeping Proteins)。此类蛋白在各组织和细胞中的表达相对恒定，可作为检测蛋白表达水平变化的参照物。当内参条带亮度基本一致时，基本可以确定上样量是一致的，通常采用比较靶蛋白和内参蛋白条带亮度比值来进行相对定量。 WB实验中涉及到的蛋白-抗体结合是一个复杂的活性生物大分子间的相互作用，众多因
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ELISA检测方法有哪些？
作者：德尔塔 日期：2022-04-21
酶联免疫吸附测定（Enzyme Linked ImmunoSorbent Assay，ELISA）是研究蛋白抗体的重要方法。它是采用抗原与抗体的特异结合将被测物质与酶标抗体进行直接或间接结合，然后通过标记酶与底物产生颜色反应进行定性和定量分析。那么，它与其它检测方法的灵敏度及您了解吗？ 检测方法 灵敏度 化学比色法 mg/mL 酶反应测定 μg/mL 凝胶扩散法/浊度法 μg/mL 酶联免疫法 ng/mL ELISA通常分为四种类型：直接法、间接法、竞争法、夹心法等。 直接法（Direct ELISA）仅需要抗原和酶标一抗，操作简便，可避免交叉反应，然而该方法要求酶标一抗有较高的特异性要求，同时也并非所有的一抗适合标记处理。直接法在实际运用中并不多见，它并不能对样本中抗体进行定量分析，因为样本中抗体是非酶标抗体，无法进行后续显色，但是该法经过改进就是竞争性ELISA方法，见后文。 间接法（Indirect ELISA）使用了二抗增加信号强度，也使抗体的选择多样化，然而间接法容易产生交叉反应。间接法只能用于测定抗体，主要用于疾病的诊断，其优点是只需要改变包被抗原，酶标抗体是通用的。 夹心法（Sandwich ELISA）分为双抗体夹心法和双抗原夹心法： 双抗体夹心法中抗原被两个抗体——捕捉抗体和检测抗体，结合于不同位点。捕捉抗体固定于载体上，检测抗体通过结合抗原进行显色分析。应用于双抗体夹心法检测的抗体需是单抗，而且对同一抗原结合位点不同，如此才能避免交叉反应或两种抗体竞争性结合同一位点。夹心法具有高灵敏度、高专一性的优势，但该法只适用于有多个结合位点的抗原检测，主要用于检测各种大分子抗原——例如在医学检测中测定HBsAg、HBeAg、AFP等。由于双抗体夹心法特异性高，在检测过程中有时会将样本和酶标抗体同时加入进行反应（一步法），此时如果样本
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如何辨别ELISA实验中的假阴性和假阳性结果？
作者：德尔塔 日期：2022-04-21
【蛋白研究系列专题】-13丨ELISA的真真假假 ELISA被广泛应用于农业、养殖业、食品安全、临床诊断等领域，是一种灵敏度高、特异性强、操作简便的检测方法。在实际应用中，ELISA操作的各方面均对结果产生影响，如移液器的使用、样本存放、加样、溶血、试剂温度、避光等。除此之外，一些非主观因素也会对结果造成较大偏差。 ELISA实验中的假阴性和假阳性结果，让各位实验君头都大了吧？欲哭无泪吧？今天，小编和各位一起分享下假阴性、假阳性的原因及解决办法。 假阴性 ①标本用肝素或EDTA等抗凝处理，易造成HBsAg检测结果假阴性。肝素抗凝血浆会增加OD值,可能与高浓度肝素具有强大的负电荷，能吸附酶标记物不易洗脱有关。EDTA、酶抑制剂（如NaN3）可抑制ELISA系统中的辣根过氧化物酶活性，造成假阴性。 肝素 ②采用双抗体夹心法测定抗原时，如果用一步法测定，而此时被测物浓度过高，则可能由于勾状效应导致检测结果为阴性。为避免这种情况可以对样本进行稀释，或者直接改用双抗体夹心两步法。 双抗体夹心法 ③样本内被测物的浓度较低，也易造成假阴性结果。比如某些疾病发展初期被检物浓度低于检测限。 ④某些情况下，个别个体的基因突变也可能导致检测结果为假阴性。尤其是检测用抗体的结合位点在突变区的情况下，这种情况虽然极其罕见，但是也可能存在的。 假阳性 假阳性的出现通常是样本中掺杂有同源或同工物质，例如类风湿因子、补体、交叉反应物质和其它物质等。 类风湿因子 ①血液样本处理时，如有溶血会使样本中具有弱过氧化物酶活性的亚铁血红素催化底物四甲基联苯胺（TMB）显色，产生假阳性结果。因此，在处理ELISA最常检查的血清样本时，要注意凝集过程、离心过程等细节，避免出现溶血和掺杂血细胞。 ②RF（一种能结合多种动物IgG Fc的自身IgM抗体）可与酶标二抗Fc结合造成假阳性。为避免这种情况，在检测抗原时可加入2-巯基乙醇使RF降解，或用
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果糖，甘露醇，半乳糖，一水合葡萄糖，乳糖水分测定方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-21
简介 糖的类型比较多，而且多数糖不溶于甲醇，所以需要甲醇/甲酰胺配比的溶剂来溶解，并且有些糖类还需要加热到50℃才能很好的溶解。下面我们将为您介绍不同类型糖的溶剂配比及加热温度。 2.仪器 1、s300卡尔费休水分测定仪（容量法） 2、万分之一分析天平 3、容量瓶、量筒等玻璃仪器 3.试剂 1、无吡啶容量法卡尔费休试剂 2、无水甲醇，甲酰胺 4.实验步骤 1、仪器标定： 用10μL的进样针取10μL的纯水，在仪器的标定功能中进行卡尔费休试剂的标定，重复3-5次，仪器会自动计算标定的平均值。 2、样品处理： 用粉碎机样品粉碎至粉末状。 3、糖的类型，溶剂配比、温度设定及样品量： 果糖：30ml甲醇/甲酰胺 2:1，室温 2g 甘露醇：30ml甲醇/甲酰胺 2:1，50℃ 2g 半乳糖：30ml甲醇/甲酰胺 2:1，50℃ 3g 一水合葡萄糖：30ml甲醇，50℃ 3g 乳糖：0ml甲醇/甲酰胺 2:1，室温 0.2g 蔗糖附着水：25ml甲醇/氯仿 1:4 室温0.5g 蔗糖总含水量：30ml甲醇/甲酰胺 2:1，50℃ 1g 4、测量及结果计算： 1、对照上面的列表根据不同类型的糖配置相应的溶剂，并取相应的量加入反应杯，用仪器中的“打空白”功能，把溶剂中的水分反应掉。 2、用10μL的进样针取10μL的纯水，在仪器的“标定”功能中进行卡尔费休试剂的标定，重复3-5次，仪器会自动计算标定的平均值。 3、进入仪器的“测量”功能，根据上面的列表取相应重量的样品量，加入到反应杯中，输入样品重量并开始测量，2分钟左右就可以测量结束，测量结束仪器会自动计算结果并保存，次过程重复3-5次；
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肌电信号的采集影响因素与肌电信息处理方法介绍
作者：德尔塔 日期：2022-04-21
肌电信息的采集，包括肌电信息的检出与引导、显示与记录以及特殊的采集技术，如电极的固定与定位技术等。肌电信号通常受下述因素影响： (1)肌肉的类型、功能和状况(包括疲劳); (2)位于肌肉和电极之间的组织、骨骼和皮肤的特性; (3)电极材料、表面结构、几何形状和间隔： (4)电极相对于皮肤的位置。 人体生物电的检出，必须依靠感受器一电极的引导。由于人体生物电中，肌电比较微弱，因此引导肌电的电极选择关系甚大。常用的有表面电极和针式电极(比较见表1)。电极的尺寸、形状、材料、工艺等，对检出肌电的性能都有影响。电极通常用银片制成，也有使用金、铝等材料。表面电极形状一般为圆形，直径约在7～10咖，大的也有达15mm的。 不管采用何种电极，检测出来的信号都是许多运动单元发放的肌电位的向量和，必须通过适当的分析方法对不同动作的肌电信号加以分离。这是肌电假肢的核心，直接影响到假肢控制的准确性和灵活性。 目前的肌电信息处理技术主要有以下几种： (1)常规时域幅值肌电处理方法 这种方法是用肌电信号的时域峰峰值的均值，或用整组电极采集肌肉信号的综合特征，经控制电路识别后分别控制相应的假手动作。其特点是一对电极或一个域值电压只能控制一个自由度。目前大多数商业化假肢都采用这种控制策略。如果要控制多自由度，就必须有几对电极来对信号进行采集，而要在截肢者身上找到几对可以满足多自由度控制要求的肌肉是很难的，而多电极也会大大降低控制器的可靠性和稳定性。 (2)时间序列分析方法 这种方法将表面EMG信号的多通道看成一个向量值的自回归过程，采用时间序列方法来提取肢函数分类所需的信息，获得肢体运动的数值与方向的预测。肌电信号可以等价为零均值白噪声过程激励的一线性系统的输出，一个典型的4～6阶的AR模型，就可以准确地对上肢的肌电信号进行分类。近年来，对EMG的研究主要采用两通道信号，利用Marpie算法建立AR模型，得到AR参数，然后用贝叶斯准则判
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影响种子罐培养的主要因素介绍
作者：德尔塔 日期：2022-04-21
影响种子罐培养主要因素包括：营养条件，培养条件，染菌控制，扩培级数确定以及接种量的确定。 1培养基 培养基关系营养的获取，对微生物的生长、繁殖、酶活性与产量均有直接影响。培养基可分为C/N基础生长营养，无机盐渗透压控制，微量元素维系组成，以及pH酶活性调节系统。 培养基的要求以组成简单，来源丰富，价格便宜，取材方便为宜。 注： A种子罐最后一级当与生产罐一致，此时前罐已建立发酵所需酶系，新环境条件下不需要重新构建； B种子罐培养基应当增加N用量，且无机氮的增量比例要大一些； C菌种进级之后由于设备差异（罐型、搅拌形式、转速等），培养基配比需要重新根据实验调整 2种龄、接种量 种龄要求：对数生长期移种，这是因为嫩种和老种转罐后启动速度均较慢，会导致发酵周期增加且产量低。 接种量：接种量影响新环境下的迟滞期长短，这是因为接种量伴随细胞分裂繁殖所需的RNA等代谢物，此类物质含量多可快速进入对数生长期，故接种量与新环境下的迟滞期成反比。 3温度 前期看温度，后期看溶氧。 任何微生物都有其最适温度范围，如下 生物学范围内，每升高10℃，微生物生长速度可提升一倍，温度直接影响细胞代谢酶系。 在最适范围之内，提高对数生长期的前期的温度有利于菌体的合成，对数生长期后期溶解氧对菌体合成速率影响更大，此时需要提升通气量及搅拌等。 4 pH影响 阴离子（醋酸根，磷酸根）被吸收或氮源被利用后产NH3，使pH升； 阳离子（NH4+,K+）被吸收或有机酸积累使pH降； 高C培养基pH往低pH移动； 高N培养基pH往高pH移动。 调节pH三种方式：a酸碱溶液；b缓冲液；c缓冲剂（酸性或碱性盐） 5通气搅拌 通气量、罐压、搅拌共同决定了当前的溶氧状态，只有当溶解氧大于当前的BOD时，今天才能正常生长，移种之后菌体进入对数生长期，分裂繁殖速率指数增长，当此时应当交替调节通气量和搅拌功率，以使DO达到菌体所需标准，一旦无法满足菌体可适当降温，降低菌体耗氧速率，此时菌体分
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酚醛树脂 F44的分类、化学特性及应用介绍
作者：德尔塔 日期：2022-04-21
指标名称; 酚醛树脂 F44 一、外观:黄色或浅棕黄色高黏度液体 环氧当量/(g/mol) 250 185~195 环氧值/(mol/100g) 0.40 0.51~0.54 可水解氯/(mol/100g)≤ 0.05 0.02 无机氯/(mol/100g)≤ 0.001 0.001 软化点/℃ < 10 28 挥发分/%≤ 2.0 2.0 相对密度1.220。黏度(66℃)5000mPa.S。是一种耐热性环氧树脂。 酚醛树脂 F44(EPN)化学名称线型酚醛多缩水甘油醚，平均分子量600。浅棕黄色黏稠液体 二、产品分类 酚醛树脂 F44，是以线型酚醛树脂（Novolac）与环氧氯丙烷作原料，在NaOH存在下，反应而成的。常用的酚醛树脂 F44有以下几种。 （1）苯酚型酚醛树脂 F44 （2）邻甲酚型酚醛树脂 F44 （3）双酚A型酚醛树脂 F44 三、化学特性 酚醛树脂 F44与双酚A型环氧树脂相比，由于分子结构中含有2个以上的环氧基，固化后交联密度高，产品的耐热性、耐溶剂性、耐化学药品性及尺寸稳定性，都会相对提高。但是，产品脆性会增大，与铜箔的粘合性有所降低。 酚醛树脂 F44由于分子结构中含有2个以上的环氧基，所以归属多官能团环氧树脂。 邻甲酚型酚醛树脂 F44与苯酚型酚醛树脂 F44基本相同，只是在苯环邻位上有甲基存在，在耐水性和熔融粘度等方面优于前者。双酚A型酚醛树脂 F44与传统的酚醛树脂 F44相比，不仅固化物具有更高的耐热性，和二氨基二苯砜（DDS)固化后，Tg达224℃，而且具有良好的综合性能。 四、行业中应用： 1.覆铜板中应用：在覆铜板生产中，酚醛树脂 F44一般不单独使用，而是添加在双酚A型环氧树脂中，配合使用。用它来改进、提高产品的耐热性和尺寸稳定性等性能。酚醛树脂 F44的添加量，一般为双酚A型环氧树脂的20%-30%。 添加多官能环氧树脂的树脂体系与传统的双酚A型环氧树脂体系相比，为了使其在上胶、热压过程中具有相似的工艺条件，随着多官能环氧树脂添加量的增加，应适当地减少固化促进剂的用量。 2.酚醛树脂 F44应用 3.PCB油墨中应用.应用UV涂料、无溶剂涂料、高耐热乙烯基树脂、重防腐涂料树脂，
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关于经颅磁刺激**常见问题解析
作者：德尔塔 日期：2022-04-21
很多人不知道经颅磁刺激器可以应用到很多领域的**之中，有些宝宝出现抽动症状，很多家长不知道是什么原因。其实这是抽动症，也称多动症，刚开始是挤眼、扭嘴，等不挤眼扭嘴了就又开始清嗓子、打嗝、发鼻声、摇头等等，这些症状是反反复复，时轻时重，此病不但影响孩子的健康。也会影响宝宝的正常生活。不能正常的上课学习。家长们不知道该如何**，经颅磁刺激疗法可以帮助孩子告别这些痛苦的折磨。该技术自问世以来，已在全世界范围内有广泛的应用。英国、德国、美国、丹麦、日本、以色列、中国等很多国家和地区应用该技术在更广泛的范围内进行诊断、**和科研项目。 1、什么是重复经颅磁刺激疗法(Repetitive Transcranial Magnetic Stimulation, rTMS)? 经颅磁刺激是一种非系统性(不经过全身血液循环的)、非侵入性的神经调节疗法，通过把相当于核磁共振强度的磁脉冲高度聚焦于大脑有关部位刺激神经细胞来达到**疾病的作用。 2、经颅磁刺激疗法的机制是什么? 重复经颅磁刺激技术是建立在生物电磁学理论基础上发展起来的一门新医疗技术。它是根据法拉第电磁感应原理，通过强电流在线圈上产生磁场，然后磁场无创伤地穿透颅骨进入大脑皮层，并在相应的皮层引起局部微小感应电流，改变大脑皮层的膜电位促使大脑皮层产生相关的生理效应，比如激发神经介质的释放(如五羟色胺、去甲肾上腺素、多巴胺)，使神经介质功能正常化，从而起到**作用。 3、经颅磁刺激能**哪类疾病? 经颅磁刺激主要用于难治性脑功能疾病的**，涵盖精神科、神经科、康复科。目前，经颅磁刺激用于抑郁症的疗效已得到了医学界的广泛认可，并通过了FDA认证。同时，每年都有上万篇TMS项目的文章发表，内容涉及TMS应用在精神领域对抑郁、幻听、神经性耳鸣、焦虑、睡眠障碍、强迫症等适应症的**;在神经领域的神经损伤后的康复、帕金森病、癫痫病的**等;在康复领域涵盖了各类精神、神经损伤后的功能恢复、康复后生活质量的改变等。 4、经颅磁刺激真的有效吗?
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Millar压力与压力容积导管的操作维护、故障排除指南
作者：德尔塔 日期：2022-04-21
Millar Mikro-Tip® 导管是世界上最精确的生理压力导管，提供灵敏的压力参数测量，专门研究气道压力、椎管压力或任一心血管压力。 Millar 导管优越性： ☑ 能极其敏感探测到微小的压力变化。 ☑ 无运动伪迹。 ☑ 无导管移动伪迹。 ☑ 反应频率极好 (平均 10 kHz)。 ☑ 无信号衰减。 因其极度的敏感性，这些导管对其他因素也很敏感，包括： ✴ 灯光。 ✴ 湿度。 ✴ 温度。 ✴ 静电放电。 ✴ 过度压力、张力或加重。 这意味着，它们需要一定程度的维护才能确保导管的准确性和预期寿命。 最佳实践提示： ＊请将您的导管存放于阴凉、干燥的环境中。 ＊将导管置于随附的塑料托盘中。 ＊运输时导管尖端有泡沫或塑料盖子保护。在操作时，上述这些都该在位。在不使用时，尖端必须置于托盘内的保护罩中。 保管 * 请将您的导管存放于阴凉、干燥的环境中。 * 将导管置于随附的塑料托盘中。 * 运输时导管尖端有泡沫或塑料盖子保护。在操作时，上述这些都该在位。在不使用时，尖端必须置于托盘内的保护罩中。 重要提示：为了防止基线漂移，请在每次校准和使用前，将压力传感器预先浸泡在 37℃ 的无菌水或生理盐水中 30 分钟。 操作与维护： 请： 请勿: 导管(和/或卷尾导管)，压力传感器和电极 ·每次使用前检查是否有损坏（裂纹、扭结等） ·离传感器/电极区域 5-10 毫米远持导管，避免损坏脆弱的内部导线 ·如果必须使用镊子或其它手术器械来夹持及导入导管，需在器械尖端套软管以减缓对导管接触 ·在电除颤或电外科手术过程中断开 ·处理导管时使用静电放电垫或接地手环（推荐） ·使用鞘型插管器（o形环密封插管器）在大型动物体内插入导管 ·使用后立即清洗 ·弯曲、扭结、切割、弄皱、打结、折叠、挤压等，特别是传感器、电极区域。 ·用传感器和电极敲击坚硬表面 ·接近传感器/电极的任何区域持导管，包括电极之间或电极与压力传感器之间 ·在传感器/电极区域使用尖锐物 ·对传感器或电极过度用力或施压，例如，不在导管上设物
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Langendorff系统工作原理及清洁保养、使用注意事项介绍
作者：德尔塔 日期：2022-04-21
Langendorff 系统工作原理 外循环的目的是保证整个系统恒温。具体工作流程是：当水位超过蓝色浮标至浮标浮起，加热棒才加热，白色出水泵将恒温水注入心脏腔室和蛇形灌注管外的玻璃器皿最终反流，实现恒温。 内循环的目的就是给心脏灌注恒温KH液。具体工作流程是：灌注液槽注入K-H液，并通入混合气，然后通过“蠕动泵”蠕动带出，返回水槽中的蛇形管保温，再通过蛇形管进入主动脉插管。内外循环就构成了灌流工作原理。 Langendorff 温度控制原理 将温控器分别与电源和灌流装置相连，当水槽为空时，确保温控器关闭。加水至蓝色浮漂浮起后，一般将温控器设定为38摄氏度，加热棒工作，温度探头测量水温并反馈给温控器对加热进行调节。为防止损坏水浴槽，避免泄漏，建议的最高水温为45°C。 恒压/恒流控制原理 在恒压灌注模式中，连接到主动脉插管上方三通的压力传感器测量灌注压力，压力信号反馈到泵控制器，再调节泵速度来控制该压力。 拿量杯测量一定泵速度下的流量，使用泵控制器将泵设定在所需的速度，实现恒流灌注模式设定。 视频：https://v.qq.com/iframe/preview.html?vid=i0394iq1v5p&auto=0%22 Langendorff 系统清洁保养 确保 Langendorff 系统处在一个干净的环境中是十分必要的，因为生理灌流液会支持细菌以及真菌增长从而影响到离体心脏的制备。引起 Langendorff 制备中毒性的一个关键原因是管道和灌流系统中细菌和真菌的增长。充分的保养可以延长您设备的使用周期。 注意事项 ☑ 使用杀菌剂 为了减少恒温水浴槽和加热系统管道中的藻类和微生物的增长，实验时请使用去离子（或蒸馏）水。阳离子的表面活性剂和杀菌剂可以被用来避免恒温水槽中生长藻类和微生物。 ☑ 请勿用高压灭菌 请注意 Langendorff 装置主要由有机玻璃（或丙烯酸）构成。任何情况下这个系统都不应该被使用高压进行灭菌。 ☑ 请勿使用沸水 沸水可能会软化或者分解 Langendorff 装置的有机玻璃。当清理系统时请不要使用80°C以上的热水。
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微生物实验常用的36种培养基的配制说明
作者：德尔塔 日期：2022-04-21
1.牛肉膏蛋白胨培养基（用于细菌培养） 牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl 5g，水1000mL，pH7.4～7.6。 2.高氏1号培养基(用于放线菌培养) 可溶性淀粉20g，KNO3 1g，NaCl 0.5g，K2HPO4•3H2O 0.5g，MgSO4•7H2O0.5g，FeSO4•7H2O0.01g，水1000mL，pH7.4～7.6。配制时注意：可溶性淀粉要先用冷水调匀后再加入到以上培养基中。 3.马丁氏（Martin）培养基（用于从土壤中分离真菌） K2HPO41g，MgSO4•7H2O0.5g，蛋白胨5g，葡萄糖10g，1/3000孟加拉红水溶液100mL，水900mL，自然pH，121℃湿热灭菌30min。待培养基融化后冷却55～60℃时加入链霉素(链霉素含量为30μg/mL)。 4.马铃薯培养基(PDA)(用于霉菌或酵母菌培养) 马铃薯(去皮)200g，蔗糖(或葡萄糖)20g，水1000mL，配制方法如下： 将马铃署去皮，切成约2cm2的小块，放入1500mL的烧杯中煮沸30min，注意用玻棒搅拌以防糊底，然后用双层纱布过滤，取其滤液加糖，再补足至1000mL，自然pH，霉菌用蔗糖，酵母菌用葡萄糖。 5.察氏培养基(蔗糖硝酸钠培养基)(用于霉菌培养) 蔗糖30g，NaNO3 2g，K2HPO4 1g，MgSO4•7H2O0.5g，KCl 0.5g，FeSO4•7H2O0.1g，水1000mL，pH7.0～7.2。 6.Hayflik培养基(用于支原体培养) 牛心消化液(或浸出液)1000mL，蛋白胨10g，NaCl 5g，琼脂15g，pH7.8～8.0，分装每瓶70mL，121℃湿热灭菌15min，待冷却至80℃左右，每70mL中加入马血清20mL，25%鲜酵母浸出液10mL，15醋酸铊水溶液2.5mL，青霉素G钾盐水溶液(20万单位以上)0.5mL，以上混合后倾注平板。 *注意：醋酸铊是极毒的药品，需特别注意安全操作。 7.麦氏(McCLary)培养基(醋酸钠培养基) 葡萄糖0.1g, KCl 0.18g，酵母膏0.25g，醋酸钠0.82g，琼脂l.5g，蒸馏水l00mL。溶解后分装试管，1l5℃湿热灭菌15min。 8.葡萄糖蛋白胨水培养基(用于V.P.反应和甲基红试验) 蛋白胨0.5g，葡萄糖0.5g，K2HPO4 0.2g，水100mL，pH7.2，1l5℃湿热灭菌20min。 9.蛋白胨水培养基(用于吲哚试验) 蛋白胨10g，NaCl 5g，水1000mL，pH7
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实验室通风控制及换气次数要求说明
作者：德尔塔 日期：2022-04-21
实验室空调通风系统的设计包含了空气处理、制冷加热和除湿、气流组织、控制、安全等部分，它们是一个整体而不是独立系统。实验室的通风设计首要解决的问题是安全性问题，还要考虑到为实验人员创造一个舒适的工作环境，解决温度、气流、噪音的问题，同时要保证最低的能源消耗，系统稳定，容易控制，易于操作管理。简而言之就是要从安全、舒适、节能、可靠运行方面进行设计。 本文主要说明实验室换气次数、送排风形式、房间压差和控制系统标准。 一、ASHRAE 规定实验室空调和通风设计参数 1）室内外温度湿度要求； 2）空气质量； 3）设备和工艺热负荷，包括显热和潜热； 4）内部负荷的预期增加； 5）最小换气次数； 6）进风和补风； 7）排风设备类型； 8）控制和报警； 9）通风柜的尺寸和数量的调整可能； 10）房间压差； 11）设备和电源的备用。 二、换气次数的选择 《化工采暖通风和空调调节设计规范》规定化验室房间的最小换气量一般在6 次/h~8次/h。ASHRAE规定验室内的整体换气次数应由下列风量之决定：从局部排风设备或其他房间排风所排出的总风量；带走房间热负荷所需的制冷风量；最小换气次数需求。在使用情况下，实验室的最小换气次数应维持6 次/h~10 次/h。 在通常情况下>10次/时房间换气次数被认为是合适的。但是当实验室内有可能产生高热负荷的分析设备，或房间内有较大量的局部排风时，则可能需要相应增大换气量。湿法化学室有通风柜，加热间有大量的加热炉。通风柜的计算方法则参照《化工采暖通风和空调调节设计规范》中对轻、中度危害或有危险的有害物质，在室内顶棚有补风的情况下，通风柜的操作口最小吸风面速度0.5m/s。对于通风柜的使用率，当通风柜的数量大于2个时，则应该取60%~70%同时使用率。加热炉则是以维持炉内加热温度的热平衡法则计算所需的排风量。通过以上可以计算出总的安全通风量，此外负荷计算的空调风量，还有最小换气次数10次进行比较，三者取最大值。 三、送风和排风
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实验室常遇到的11个小问题的解决办法介绍
作者：德尔塔 日期：2022-04-21
1、打开粘固的玻璃磨口 当玻璃仪器的磨口部位因粘固而打不开时，可采取以下几种方法进行处理。 (1)敲击用木器轻轻敲击磨口部位的一方，使其因受震动而逐渐松动脱离。对于粘固着的试剂瓶、分液漏斗的磨口塞等，可将仪器的塞子与瓶口卡在实验台或木桌的棱角处，再用木器沿与仪器轴线成约70°角的方向轻轻敲击，同时间歇地旋转仪器，如此反复操作几次，一般便可打开粘固不严重的磨口。 (2)加热有些粘固着的磨口，不便敲击或敲击无效，可对粘固部位的外层进行加热，使其受热膨胀而与内层脱离。如用热的湿布对粘固处进行“热敷”、用电吹风或游动火焰烘烤磨口处等等。 (3)浸润有些磨口因药品侵蚀而粘固较牢，或属结构复杂的贵重仪器，不宜敲击和加热，可用水或稀盐酸浸泡数小时后将其打开。如急用仪器，也可采用渗透力较强的有机溶剂(如苯、乙酸乙酯、石油醚及琥珀酸二辛酯磺酸钠等)滴加到磨口的缝隙间，使之渗透浸润到粘固着的部位，从而相互脱离。 2、打开紧固的螺旋瓶盖 当螺旋瓶盖拧不开时，可用电吹风或小火焰烘烤瓶盖周围，使其受热膨胀，再用于布包住瓶盖用力将其旋开。如果瓶内装有不宜受热或易燃物质时，可取一段结实的绳子，一端拴在固定的物体上(如门窗把手)，再把绳子按顺时针方向在瓶盖上绕一圈，然后一手拉紧绳子的另一端，一手握住瓶体用力向前推动，就能使瓶盖打开。 3、取出被胶塞粘结的温度计 当温度计或玻璃管与胶塞或胶管粘结在一起而难以取出时，可用小改锥或刀锉的尖端插入温度计(或玻璃管)与胶塞(或胶管)之间，使之形成空隙，再滴上几滴水，如此操作并沿温度计(或玻璃管)周围扩展，同时逐渐深入，很快就会取出。也可用恰好能套进温度计(或玻璃管)的钻孔器，蘸上少许甘油或水，从温度计的一端套入，轻轻用力，边旋转边推进，当难以转动时，拔出再蘸上润滑剂，继续旋转，重复几次后，便可将温度计(或玻璃管)取出来。 4、清除仪器上的特殊污垢 当玻璃仪器上粘结了特殊的污垢，用一般的洗涤方法难
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实验室常用分析仪器对于样品的要求有哪些？
作者：德尔塔 日期：2022-04-21
1、红外光谱仪 (1)样品必须预先纯化，以保证有足够的纯度; (2)样品须预先除水干燥，避免损坏仪器，同时避免水峰对样品谱图的干扰; (3)易潮解的样品，请备干燥器放置; (4)对易挥发、升华、对热不稳定的样品，请用带密封盖或塞子的容器盛装并盖紧。 2、紫外-可见吸收光谱仪 样品溶液的浓度必须适当，且必须清澈透明，不能有气泡或悬浮物质存在。 3、气相色谱仪 能直接分析的样品应是可挥发、且是热稳定的，沸点一般不超过300℃，不能直接进样的，需经前处理。 4、液相色谱仪 样品要过滤 5、离子色谱仪 样品可以溶于水，或稀酸、稀碱，所用的酸碱不能含有待测离子。对于样品中含有待测元素，但在水、酸、碱溶液中以非离子状态存在的化合物，需要进行相应的样品前处理。 6、原子荧光光谱仪 (1)样品分析一般要求 原子荧光光谱仪分析的对象是以离子态存在的砷(As)、硒(Se)、锗(Ge)、碲(Te)等及汞(Hg)原子，样品必须是水溶液或能溶于酸。 (2)固体样品 ①无机固体样品样品经简单溶解后保持适当酸度。 检测砷(As)、硒(Se)、碲(Te)、汞(Hg)，介质为盐酸(5%，v/v); 检测锗(Ge)，介质为硫酸(5%，v/v); 检测汞(Hg)，介质也可为硝酸(5%，v/v)，检测(As)介质也可为硫酸(2%，v/v)。 由于铜、银、金、铂等金属对待测元素的干扰较大，因此该几类合金样品中的砷、硒、碲、汞不宜采用本仪器测定。 ②有机或生物固体样品 样品经硝化处理为溶液并保持适当酸度，其介质酸度与无机样品同。 7、气相色谱-质谱联用仪 进入气相色谱的样品，必须是在色谱柱的工作温度范围内能够完全汽化。 8、液相色谱-质谱联用仪 (1)为确保分析结果准确、可靠，要求样品完全溶解，不得有机械杂质。 (2)液相色谱–质谱联用时，所有缓冲体系一律用易挥发性缓冲剂，如乙酸、醋酸铵、氢氧化四丁基铵等配成。 9、元素分析仪 样品必须是不含吸附水的均匀固体微粒或液体，并经过提纯。如样品不纯(含吸附水、有机溶剂、无机盐或其它杂质)会影响分析
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高压蒸汽灭菌器温度与压力校准方法介绍
作者：德尔塔 日期：2022-04-21
我国目前尚未出台高压蒸汽灭菌器等相关灭菌设备计量参数的检定规程或校准规范，实验人员在定期校验的过程中缺少必要的技术依据。本文探讨高压蒸汽灭菌器压力、温度、时间等参数的校准方法，为实验猿提供多种校准途径，供安全监管中选择。 一、高压蒸汽灭菌器的基本参数 基本参数： ①额定工作压力不大于0.25MPa。 ②灭菌工作温度：115~138℃。 压力指示仪表校准方法： 为确保现场校准结果的可靠性，应遵循下列基本原则： 1）环境条件： 温度：（20±5）℃；若无法保证，可适当放宽。但需对温度影响进行评定，并在校准结果中加以修正。 相对湿度：不大于80%。 2）计量标准器： 选用的标准器其测量范围应大于或等于被校压力指示仪表的测量范围，其示值最大允许误差绝对值应不大于被校压力指示仪表最大允许误差绝对值的1/3（数字式）或1/4（模拟式）。 二、高压蒸汽灭菌器压力校准方法 1、方法一现场校准法 此方法适用于手提式、立式等工作容积较小的、且具有手动放汽阀的高压蒸汽灭菌器。通常高压蒸汽灭菌器在放汽阀的尾部会备有金属软管，便于合理地排放冷空气。因此，只需将金属软管与检定用压力校验器连接可靠，保证气密性，即，能按检定规程对高压蒸汽灭菌器的压力指示仪表进行现场校准。 操作要点: 金属软管的耐压需要大于等于400kPa，若无法达到，需更换成满足要求的压力连接软管，构成校准系统的压力气密性不应超过0.1 kPa/min。 校准设备： 标准器选用数字压力计（不低于0.2级，上限不超过500 kPa）或精密压力表（不低于0.4级，上限值视被检压力指示仪表而定），配套设备选用气体压力校验器（稳定性优于0.02% FS，工作压力大于600 kPa）。 现场校准法的压力校准上限常常受到高压蒸汽灭菌器上安装的安全阀额定工作压力的限制，当无法校准到被校压力指示仪表上限压力时，可给出最高额定工作压力的校准值。 2、方法二直接比较法 此方法适用于安装有测试连接器的高压蒸汽灭菌器。通常为大型、直接蒸
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