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梅毒血清试验的检查过程
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
根据所用抗原不同，梅毒血清试验分为以下两大类： (一) 非梅毒螺旋体抗原血清试验，用心磷脂作抗原，测定血清中抗心磷脂抗体，亦称反应素。本试验敏感性高而特异性较低，且易发生生物学假阳性。早期梅毒患者经充分**后，反应素可以消失，早期未经**者到晚期，部分病人中反应素也可以减少或消失。目前一般作为筛选和定量试验，观察疗效，复发及再感染。 1、性病研究实验室试验(Venereal Disease Research Laboratory test，VDRL)；用心磷脂、卵磷脂及胆固醇为抗原，可作定量及定性试验，试剂及对照血清已标准化，费用低。此法常用，操作简单，需用显微镜读取结果，缺点是一期梅毒敏感性不高。 2、快速血浆反应素试验(Rapid Plasma reagin test， RPR)：是VDRL抗原的改良，敏感性及特异性与VDRL相似，优点是肉眼即可读出结果。 3、不加热血清反应素玻片试验(Unheated Serum Reagin USR)也是VDRL抗原的改良，敏感性及特异性与VDRL相似。 (二) 梅毒螺旋体抗原血清试验：用活的或死的梅毒螺旋体或其成分来作抗原测定抗螺旋体抗体。这种试验敏感性和特异性均高，一般用作证实试验。这种试验是检测血清中抗梅毒螺旋体IgG抗体，即使患者经过足够**，仍能长期存在，甚至终身不消失，血清反应仍持续存在阳性，因此，不能用于观察疗效。 1、荧光梅毒螺旋抗体吸收试验(FTA-ABS Test)：此法是较敏感和较特异的螺旋体试验。 2、梅毒螺旋体血凝试验(TPHA)：敏感性和特异性均高，操作简便，但对一期梅毒不如FTA-ABS试验敏感。 3、梅毒螺旋体制动试验(Treponema Pallidum immobilization ，TPI)，用Nichol株螺旋体(活的)加病人血清(含抗体)后，在补体的参与下可抑制螺旋体的活动。如≥50%梅毒螺旋体停止活动，则为阳性。此试验特异性、敏感性均高，但设备要求高，操作难，仅供研究用。 注意事项 检查前禁忌：注意正常的生活饮食习惯，注意个人卫生。禁止不洁性交。 检查时要求：积极配合医生。 我司本着客户至上的原则为客户提
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免疫金银染色（IGSS）操作流程
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
一、基本原理 免胶体金检测技术是用金属离子和金属蛋白复合物应用免疫组化原理检测组织内抗原抗体的技术，常用胶体金（铁、汞等）重金属离子。由于胶体金容易制成各种大小的颗粒且有很高的电子密度及分辨率，又不影响抗体的活性，因此既可用于免疫组化又适于免疫电镜技术。 二、操作步骤 1、石蜡切片IGSS （1）切片脱蜡至水。 （2）0．1％胰蛋白酶37℃消化20min或抗原修复20min（98℃），自然冷却至室温。 （3）0．05mol/L（pH7．4）TBS洗3×3min。 （4）l％EA（卵蛋白）15min，不洗。 （5）适当稀释的特异抗体室温4h或4℃孵育20h，或37℃孵育1h。 （6）0．05m01/L（pH7．4）TBS洗3×5min。 （7）0．02m01/L（pH7．4）TBS（内含0．1％BSA）洗10min。 （8）1％EA 15min，不洗，1：10～1：20稀释的PAGlonm室温孵育1h，或37℃孵育30min。 （9）0．05mol/L（pH7．4）TBS洗10min。 （10）1％戊二醛洗10min。 （11）双蒸水洗5min。 （12）1％明胶洗5min。 （13）银避光显影8～15min。 （14）双蒸水洗15min。 （15）固定：用显影定影液（1：4或1：10）固定5min，也可以用15％硫酸钠-20％硫代硫酸钠混合液固定1～3min，或用1％戊二醛固定5min，50℃温水洗3～6min。 （16）衬染，核固红衬染3min或甲基绿衬染3min。 （17）常规脱水，二甲苯透明，常规树胶封片。 （18）镜检：阳性物质呈黑色或黑褐色，颗粒分布于抗原—抗体反应部位；背景较干净，呈红色。 2、冰冻切片IGSS 做冰冻切片的组织可先经过固定再作切片，也可先制作冰冻切片，然后再固定。这要根据保存抗原的需要而定，固定过的组织可用含20％蔗糖的PBS（0．1mol/L，pH7．4）浸泡过夜，使切片减少冰结晶，保持组织细胞良好的形态结构。切片人0．05mol/L（pH7．4）TBS洗3×3min，染色步骤同石蜡切片。
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为何细胞培养中要用到胎牛血清？
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
对于研究细胞的科学人士来说，血清都不会陌生，其中胎牛血清是实验操作的常客。一般而言，胎牛血清是指怀孕5-8个月的母牛被屠宰后，发育未完全的胎牛心脏穿刺采血后，通过一系列工艺处理zui终获得。此时胎牛血中含有特殊的生长发育因子，一旦胚胎发育完全这些因子自动消失。 胎牛血清的作用 胎牛血清具有极为重要的作用，其包括： 1.提供对维持细胞指数生长的激素，基础培养基中没有或量很少的营养物，以及主要的低分子营养物。 2.提供结合蛋白，能识别维生素、脂类、金属和其他激素等，能结合或调变它们所结合的物质活力。 3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合，起到解毒作用。 4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。 5.起酸碱度缓冲液作用。 6.提供蛋白酶抑制剂，使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活，保护细胞不受伤害。 胎牛血清是品质的，因为胎牛还未接触外界，血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分zui少。 选择*的胎牛血清 WHO公布的《用动物细胞体外培养生产生物制品规程》中的要求： 1. 牛血清必须来自有文件证明无牛海绵状脑病的牛群或国家，并应具备适当的监测系统。 2.有些国家还要求牛血清来自未用过反刍动物蛋白饲料的牛群。 3. 证明所用牛血清中不含对所生产疫苗病毒的抑制物。 4. 血清要通过滤膜过滤除菌，保证无菌。 5. 无细菌、霉菌、支原体和病毒的污染，有些国家要求无细菌噬菌体污染。 6. 对细胞有良好的支持繁殖作用。 《中国生物制品主要原辅料质控标准》2000年版 我国对牛血清的质量中提出比较严格的标准要求： 包括蛋白质含量，细菌、真菌、支原体、牛病毒、大肠杆菌噬菌体、细菌内毒素，支持细胞增殖检查。一款来自澳洲的Ausbian胎牛血清在市场上颇受欢迎。它具有精选内毒素极低、产量大于1600瓶（500毫升）的血清批次，满足干细胞、基因敲除、原代培养、细胞典藏、长期传代等各类细胞的培养要求；完整的检测报告及灭病毒服务，为各类临床相关
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糖化血清蛋白测定试剂盒用途及组成
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
糖化血清蛋白测定试剂盒测定用途：用于全自动法测定糖化血清蛋白含量。血清蛋白半衰期较短，测定糖化血清蛋白浓度可有效反应患者过去1-3周的平均血糖的水平，并不受临时血糖浓度波动的影响，为临床糖尿病人的诊断和较长时间血糖控制水平的研究提供一个很好的指标。测定原理：糖化血清蛋白在碱性条件下与硝基四氮唑蓝生成紫红色化合物，其颜色深浅与糖化血清蛋白含量成正比，比较后可求得糖化血清蛋白含量。糖化血清蛋白测定试剂盒组成：1.碳酸钠缓冲液与硝基四氮唑蓝生（液体双试剂。试剂I:试剂II=3:1）2.糖化血清蛋白与稳定剂（冻与1ml）3.糖化血清蛋白与稳定剂（冻与1ml）样本要求：血清或血浆均应不溶于血，建议采用肝素抗凝血浆样本。样本采集后，应尽快分离血清和血浆，样本置于2-8℃可稳定14天，室温可稳定3天。
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抗原与抗体对ELISA试剂盒影响因素
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
ELISA试剂盒是一种免疫测定。一个抗原分子可带有不同的决定簇。在免疫测定中，抗原是指能与抗体结合的物质。在检修中主要通过抗原抗体反应检测体液中的抗体或抗原性物质。抗原的反应性取决于抗原决定簇（antigenic determinant），或称为表位（epitope）。免疫测定（immunoassay，IA）是应用免疫学技术测定标本的方法。 ELISA试剂盒抗原是能在机体中引起特异性免疫应答的物质。小分子化合物在与大分子蛋白质结合后能引起机体产生特异性抗体的，称为半抗原（hapten）。抗原进入机体后，可刺激机体产生抗体和引起细胞免疫。例如某些激素、药物等。能在机体中引起抗体产生的抗原多为分子量大于5000的蛋白质。ELISA试剂盒是一种免疫测定。一个抗原分子可带有不同的决定簇。 ELISA试剂盒如将多种抗原或含有多个抗原决定簇的抗原注入机体，则将由多系的B细胞产生相应的多种抗体，这些抗体均存在于免疫血清中。含有抗体的血清称为抗血清。免疫测定中所用的抗血清一般用抗原免疫兔、羊或马制得。将免疫的脾细胞（含产生抗体的B细胞）与小鼠肿瘤细胞融合，分离杂交瘤细胞，接种于小鼠腹腔，产生的腹水中含有浓度很高的单克隆抗体。
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我们要如何选择ELISA试剂盒
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
一直以来，ELISA试剂盒以其敏感性高、特异性强、重复性好的优点，在科研中深受广大，科研工作者的喜爱。而市面上各种试剂盒，数不胜数。让大家都产生了，选择性综合症，也挑不出自已的那个试剂盒。现在我们公司列出了一下，一些选购的常识，希望能为大家选购时提供帮助。 客户如何选择ELISA试剂盒有以下几点： *步、明确检测何种蛋白 第二步、明确编码该蛋白的基因与其它哪些物种同源性 第三步、寻找检测这些物种蛋白的试剂盒 第四步、咨询商家ELISA试剂盒使用的抗体类型：多抗还是单抗？ 单抗是针对什么抗原决定簇的？ 五步、 做出自己的判断该买哪个试剂盒 上海劲马ELISA试剂盒准确度高，灵敏度高，特异性强，检测时间短，操作非常简便，安全可靠。含税含运费，提供免费代测及技术指导。感谢您对本公司的支持，欢迎您来电与我公司业务员洽谈。
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上海恒远R&D原装ELISA试剂盒检测的影响因素有哪些?
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
ELISA试验以操作简单、灵敏度较高、特异性较好的特点在科研领域上得到了广泛的应用，但操作中的各个环节对试验的检测效果都有影响,操作不当将引起较大的误差。下面给大家简单的讲解一下本公司产品R&D原装ELISA试剂盒检测过程中的影响因素。 1. 肿瘤标志物具有特异性和非特异性的双重特点。 2. 各种肿瘤特性的不同，如肿瘤的分期、大小、定位、组织来源及转移趋向等的不同。 3. 各种抗体的不同，如多克隆抗体、单克隆抗体、抗体决定簇和抗体亲和性等的不同。 4. 各种检测系统的不同，如检测原理、标记物、实验条件、检测技术、检测仪器和检测敏感度等的不同。 5. 检验人员的专业水平和技术经验、以及实验室条件和实验的可靠性等的差异。 上海德尔塔生物科技有限公司主营：Elisa试剂盒,人Elisa试剂盒,大鼠Elisa试剂盒,小鼠Elisa试剂盒,生物试剂,血清,抗体,培养基,标准品,国产血清、GIBCO胎牛血清等。欢迎广大用户来电，我们将本着 “专注品质、信守承诺、积极沟通、创新服务”的精神，热诚为每一位客户提供zui的服务！
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ELISA试剂盒大部分对检测有干扰的物质
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
目前ELISA试剂盒检测的样本中，除了细胞上清外，还有比较大的一部分是血清和血浆样本。对于ELISA试剂盒客户来说，在实验中可能用到不同的样本，如何辨别所购的ELISA试剂盒能否测手中的样本呢？对于zui常见的细胞上清，我们大家知道，培养细胞过程中，无特别情况一般是10%的牛血清加入培养基中，经过培养后，细胞的吸收消耗，zui后细胞上清中蛋白含量会很少，而且对于一般牛血清生产的厂家来说，在生产过程中已经去除了，所以对一般ELISA而言，不会影响抗体抗原的结合。 1、如厂家没有提供专门用于血清血浆样本的缓冲液，那么只要用已知浓度的待测指标蛋白加入所测种属的血清作为样本加样和用已知浓度的待测指标蛋白加入PBS缓冲液中同时检测对比，ELISA试剂盒即可知道该试剂盒是否可以直接用来测血清血浆样本。 2、如厂家没有提供专门用于血清血浆样本的缓冲液，只是有一个笼统的或统一的稀释液，那么只要用已知浓度的待测指标蛋白加入所测种属的血清直接加样和用已知浓度的待测指标蛋白加入厂家提供的统一的缓冲液中同时检测，也可得出该试剂盒是否可直接用来检测血清血浆样本。 3、如厂家提供专门用于血清血浆样本的缓冲液，可用已知浓度的待测指标蛋白加入所测种属的血清直接加样和用缓冲液按说明书分别加样，也可得出结果。 如该种类型ELISA试剂盒样本总量如为100μl的话，一般而言，会是50μl的样本加样量和50μl的特定的缓冲液。 在使用试剂盒的过程，可将已知浓度的蛋白用血清或血浆调配到试剂盒标定的检测限的zui高值的2倍，加入50μl做两孔，一孔补入常规的50μl标准品稀释液，ELISA试剂盒一孔补入50μl样本分析缓冲液，即可区分出效果来，有时候，有些厂家为了达到“消除”的效果，在样本分析缓冲液中加入待测目标蛋白，为了鉴别出这种情况，也可直接加入样本分析缓冲液做一孔，同时做对比，这样可试出试剂盒中的针对血清血浆样本的缓冲液是否真的有效。
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您的ELISA试剂盒比色结果的表达方法对了吗?
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
您的ELISA试剂盒比色结果的表达方法对了吗? 比色效果的表达以往通用光密度（oplical density，OD），现按规则用吸光度（absorbence，A），两者含义相同。通常的标明方法是，将吸收波长写于A字母的右下角，如OPD的吸收波长为492nm，标明方法为"A492nm"或"OD492nm"。 酶标比色仪简称酶标仪，通常指于测读ELISA试剂盒效果吸光度的光度计。关于固相载体方法的不相同，各有特制的适用于板、珠和小试管的规划。许多试剂公司配套供应酶标仪。酶标仪的主要功用目标有：测读速度、读数的性、重复性、度和可测规划、线性等等。优异的酶标仪的读数通常可到0.001，性为±1%，重复性达0.5%。举例说，若某孔测得的A值为1.083，则该孔相关于空气的真实A值应为1.083±0.01（1.073~1.093），重复测定数次，其A值均应1.083±0.05（1.078~1.088）在之间。酶标仪的可测规划视各酶标仪的功用而不相同。通常的酶标仪在0.000~2.000，新类型的酶标仪上限拓宽达2.900，甚至更高。超出可测上限的A值常以"*"或"over"或其它符号标明。应留心可测规划与线性规划的不相同，线性规划常小于可测规划，比如某一酶标仪的可测规划为0.000~2.900，而其线性规划仅0.000~2.000，这在定量ELISA中制造标准曲线时应予留心。 酶标仪不该安排在阳光或强光照射下，操作时室温宜在15~30℃，运用前先预热仪器15-30分钟，测读效果更安稳。 ELISA试剂盒测读A值时，要选用商品的活络吸收峰，如OPD用492nm波长。有的酶标仪可用双波长式测读，即每孔先后测读两次，在zui适波长（W1），第2次在不活络波长（W2），两次测定间不移动ELISA试剂盒板的方位。例如OPD用492nm为W1，630nm为W2，毕竟测得的A值为两者之差（W1-W2）。双波长式测读可减少由容器上的划痕或指印等形成的光烦扰。 肉眼判断结果时，显色浅不易观察，影响结果的准确性，必须使用酶标仪检测，以保结果一致性。 上海恒远BIM试剂盒为了迎接圣诞及元旦的到来，现正火热促销中，订购本公司ELISA试剂盒即可
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新手秘籍:选购elisa试剂盒的必看要点
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
ELISA试剂盒虽然有多种类型，不过它们都有一个共同特点，就是进行抗原捕获。ELISA试剂盒以其敏感性高、特异性强、重复性好的优点，在科研中深受广大科研工作者的喜爱。而市面上各种试剂盒数不胜数。让大家都产生了选择性综合症，也挑不出自已的那个试剂盒。现在上海沪鼎列出一些选购Elisa试剂盒的要点，希望能为大家选购时提供参考。 必看要点： 1、明确检测何种蛋白； 2、明确编码该蛋白的基因与其它哪些物种同源性； 3、寻找检测这些物种蛋白的试剂盒； 4、咨询供应商ELISA是试剂盒使用的抗体类型：多抗还是单抗，单抗是针对什么抗原决定簇的； 5、做出自己的判断该买哪个试剂盒。 重点注意： 1、按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。 2、实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。 3、不同批号的试剂不要混用，保质前使用。 4、避免长时间打开盖子，实验完成后应立即读取OD值。 5、加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。 6、按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。 上海沪鼎生物科技有限公司为广大客户提供高质量的免疫学和生命科学相关产品。质量可靠，被全国各大院校科研机构认可并为Elisa试剂盒标准品对照品长期供应商。我们将以专业执着，精益求精的精神服务于广大科研用户。
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CRISPR其实没那么神？
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
新兴基因编辑技术CRISPR成为热门话题，许多人相信CRISPR会为基因疗法注入新的活力。那么，CRISPR真的进入黄金期了么？ CRISPR如何起作用？ 传统基因疗法是通过无害病毒或一些其它载体将“正版”基因送入细胞，补偿致病的缺陷基因。而CRISPR能用正确序列替换“坏”基因，直接修复细胞的基因缺陷。这种方式减少了外源基因进入错误位点的可能，原则上优于传统的基因疗法。此外，CRISPR修补的基因受到天然启动子的控制，蛋白质产物不会过多也不会太少。 CRISPR发展到了什么地步？ 现在研究者们已经用CRISPR成功**了患有遗传性肝病和肌营养不良的动物，本周ASGCT年会还将出现有更多这样的临床前成果。 为什么说CRISPR还没准备好？ 在安全有效的修复人类基因之前，CRISPR还有一段很长的路要走。对于绝大多数人类疾病（比如肌营养不良和囊性纤维化）来说，把细胞取出来修好再放回去并不现实，因为回到体内的细胞极少能够存活。我们需要CRISPR在体内发挥**作用，在这种情况下，基因导入遇到的障碍依然挡在CRISPR面前。举例来说，研究者们必须找到有效途径将活性CRISPR送入人体的特定组织。 你真的需要CRISPR么？ 传统的基因疗法在不少疾病领域已经走了很长一段路，没有必要再用CRISPR从头来一遍。欧洲已经批准了一种**于罕见代谢病的基因疗法。美国一家公司今年也在申请批准，希望用他们的基因疗法**Leber先天性黑朦（LCA）。还有不少研究者准备在本次ASCGT年会上公布传统基因疗法取得的喜人成绩。鉴于CRISPR等基因编辑技术的效率还远远赶不上基因导入，不少人表示并不打算换用这些新技术。 CRISPR还存在什么问题？ 用CRISPR删除基因相对来说比较容易，但它矫正基因的效果并没有那么好。因为CRISPR校正DNA需要通过同源介导修复（HDR），这一过程只在分裂中的细胞激活。不幸的是，机体内绝大多数细胞（肝细胞、神经元、肌细胞、眼细胞和造血干细胞）一般都没在分裂。 研究者们正在积极解决这一问题。Broad 研究所的CR
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原代细胞实验中样本的处理方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
原代细胞实验中样本的处理方法 1. 血清：全血标本于室温放置2小时或4℃后于1000×g离心20分钟，取上清即可检查，搜集 血液的试管应为一次性的无热原，无内毒素试管。 2. 血浆：抗凝剂举荐运用EDTA.Na2，标本搜集后30分钟内于1000×g离心15分钟，取上清即可 检查。防止运用溶血，高血脂标本。 3. 安排匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲刷安排，以去掉残留血液（匀浆中裂解的红细胞 会影响测量效果），称重后将安排剪碎。将剪碎的安排与对应体积的PBS（一般按1:9的分量体积比，比方1g的安排样本对应9mL的PBS，详细体积可依据试验需求恰当调整，并做好记载。举荐在PBS中参加蛋白酶抑制剂）参加玻璃匀浆器中，于冰上充沛研磨。为了进一步裂解安排细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或重复冻融。zui终将匀浆液于5000×g 离心5~10分钟，取上清检查。 4. 细胞培养上清：取细胞培养上清于1000×g离心20分钟，除掉杂质及细胞碎片。取上清检查。 5. 其它生物标本：1000×g离心20分钟，取上清即可检查 6. 标本应清澈通明，悬浮物应离心去掉。 7. 标本搜集后若不及时检查，请按一次运用量分装，冻存于-20℃/-80℃冰箱内，防止重复冻融， 1-6月内检查,4℃保留的应在1周内进行检查。 8. 如果您的样本中检查物浓度高于标准品zui高值，请依据实际情况，做恰当倍数稀释(主张先做 预试验，以判定稀释倍数)。 原代细胞HMEpiC cDNA 上皮细胞cDNA 20 reactions HMF cDNA 成纤维细胞cDNA 20 reactions HUVEC cDNA 人脐静脉内皮细胞cDNA 20 reactions HUAEC cDNA 人脐动脉内皮细胞cDNA 20 reactions HUVSMC cDNA 人脐静脉平滑肌细胞cDNA 20 reactions HUASMC cDNA 人脐动脉平滑肌细胞cDNA 20 reactions HBMEC tRNA 人脑微血管内皮细胞总RNA 10 µg HBVSMC tDNA 人脑血管平滑肌细胞总RNA 10 µg HBVC tRNA 人脑血管周细胞总RNA 10 µg HCPEC tRNA 人脉络丛内皮细胞总RNA 10 µg HCPEpi
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随上海恒远一起来为进口标准品做一个分类吧!
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
近日，有几位购买了我公司进口标准品的客户到了一个分类的问题，对此，上海恒远的技术人员做出了一个分类总结，下面我们一起来看一看吧。 *，我们可以按照它的技术特性来分类： 1、化学成分标准物质，具有确定的化学成分，并用技术上正确的方法对其化学成分准确的计量，用于成分分析仪器的校准和分析方法的评价。 2、物理化学特性标准物质，具有某种良好的物理化学特性，并已经过准确计量，用于物理化学特性计量器具的刻度校准或计量方法的评价。 3、工程技术特性标准物质，具有某种良好的技术特性并经准确计量，用于工程技术参数和特性计量器具的校准、计量方法的评价及材料或产品技术参数的比较计量。 第二，还可以按照学科或专业分类：可分为地质学、物理化学等十几类，Iso采用这种方法汇编了标准物质指南。 上海恒远进口标准品提供实验技术指导，您收到产品之后，如果有什么技术方面需要咨询的问题，我们随时可以给您去的。上海恒远欢迎您
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威正翔禹生物科普：关于胎牛血清知识问答（二）
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
胎牛血清在细胞培养中受到很多实验人的青睐，今天小编把关于胎牛血清的保存使用做一个整理，希望对于初次接触细胞培养的你能够有所裨益哦！ 1、胎牛血清有必要做热灭活吗? 答：实验显示，胎牛血清是不需要做热灭活的。 （1）首先将胎牛血清置于50℃以上的温度长达30分钟是完全没有必要的。尽管如此，有些实验室还是把胎牛血清的热灭活作为常规来执行。事实上， 热灭活目的是为了去除血清中补体等对热敏感的物质，但是在胎牛血清中对补体的灭活则明显没有必要。（2）Triglia和Linscott曾对商业胎牛血清中的补体成分进行测定，他们发现胎牛血清中含有的C1，C6仅达成年动物血清的1-3%，而其它补体成分仅有成年动物的5-50％，至于补体的主要成分C3在胎牛血清中则几乎不能检出。Pinyopummintr等证明血清去除灭活步骤不影响牛胚胎的发育分化。又有研究结果证实热灭活步骤减弱了胎牛血清和小牛血清对细胞的促粘附作用。（3）此外，热灭活经常给血清产品带来负面的影响，对血清的加热经常导致血清中沉淀的产生，导致很多营养因子的损失。因此，胎牛血清已无需再灭活。 总之，经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进，或完全没有任何作用，甚至通常因为高温处理影响了血清的质量，而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清，沉淀物的形成会显著的增多，这些沉淀物在倒置显微镜下观察，像是“小黑点”，常常会让研究者误以为是血清遭受污染，而把血清放在37℃环境中，又会使此沉淀物更增多，使研究者误认为是微生物的分裂扩增。若非必须，可以不需要做热处理这一步。不但节省时间，更确保血清的质量！ 2、细胞培养中出现黑点是污染吗？如何处理？ 答：一旦您在细胞培养的过程中发现有黑点生成，首先，要肉眼观察培养基是否混浊，然后，在镜下观察培养细胞生长的状态，黑点是否游动。如果细胞被污染，微生物则会大量繁殖，培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。如果在镜下观察细胞，生长
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人血清应该在什么样的条件下保存
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
人血清组织样品采集： 1.首先准备好用于包装样品的铝箔或冷冻保存管，并且用油性记号笔在铝箔或冻存管外表多处写明样品编号。 2. 准确切除所需组织。 3. 离体新鲜组织，立即剔除结缔组织和脂肪组织等非研究所需的组织类型。 4. 在RNase-free 的0.9％生理盐水中漂洗样品，以去除血污和污物。 5. 用准备好的铝箔或冷冻保存管装载包裹组织，迅速投入液氮冷却。 6. 把样品袋（纱布袋等）放入液氮中冷冻一下，而后将液氮冷却的组织放入样品袋（每个样品袋只保存同样的组织，样品较多时应分装至多个小袋，不要在一只样品袋中放过多的样品以防无法放入液氮罐或无法从液氮罐中取出），袋口留一根编号绳，绳上粘2 张标签纸（标签上注明：客户名、样品名称、编号、日期，粘2 张标签纸是为了防止标签脱落造成样品混乱），迅速转入液氮罐。 7. 填写样品登记单，写明样品名称、组织类型、编号、取样日期、样品处理过程等情况。 人血清注意事项： 1. 对肿瘤组织的取材，应尽可能准确地判定肿瘤组织和正常组织，如果有可能请根据冰冻切片报告的结果来判定要进行研究的取材部位。 2. 不要用 Eppendorf 管保存组织样品，因为 Eppendorf 管从液氮中取出时极易发生爆裂而造成样品损失。 3. 步骤 2～5应在冰上尽可能快速进行，时间过长会导致样品RNA降解 。 4. 在临床手术过程中采集的病理或正常样品，如果没有条件立即从手术室中取出进行后续处理，请在切除后立即转移到液氮中保存。
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