-
NCI-N87细胞/ NCI-N87人胃癌细胞 培养步骤
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
NCI-N87细胞/ NCI-N87人胃癌细胞 培养步骤 产品名称：NCI-N87细胞 中文名称：人胃癌细胞；NCI-N87 规格：T25 形态特征：NCI-N87细胞表达表面糖蛋白癌胚抗原(CEA)和TAG72,并且没有左旋多巴胺脱羧酶(DDC)活性。它们的血管活性的肠肽(VIP)受体活性极低并缺乏胃泌激素受体。它们表达蕈毒碱胆碱受体。没有证据表明存在N-myc,L-myc,myb和EGF受体基因的重组。这个细胞株表达的c-myc和c-erb-B2RNA水平与其它细胞株相当。以下基因不表达:N-myc,L-myc,c-cis,IGF-2,或胃泌激素释放肽。报道NCI-N87细胞的植板率为4.3%。 生长状态：上皮细胞样 特征特性：贴壁生长 培养条件：RPMI1640+10%FBS (推荐HAKATA优等胎牛血清货号：HN-FBS-500） 传代方法：消化15-20分钟。1:2。4-5天长满。 冻存条件：HAKATA ® 无血清细胞冻存液 货号：H-W-100 规格：100ML 支原体检测：阴性 使用权限：A类 参考文献：Amelogenin：X，Y；CSF1PO：8,12；D13S317：8,11；D16S539：9，13；D18S51：17；D19S433：14,14.2；D21S11：30；D2S1338：23，24；D3S1358：14；D5S818：12,13；D7S820：10,11；D8S1179：14；FGA：20,21；TH01：9；TPOX：9,11；vWA：15，16； 供应商：上海慧颖生物科技有限公司 复苏周期：10个工作日左右 培养步骤： 1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。 1、对于贴壁细胞，传代可参考以下方法： 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回
-
RKO细胞| RKO人结肠癌细胞（低分化 处理方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
RKO细胞| RKO人结肠癌细胞（低分化 处理方法 素冉生物依托同济大学，上海市东方医院，上海市di一妇婴保健院供应人脐带间充质干细胞，人脂肪干细胞，无血清细胞冻存液，IPS功能性细胞，HUVEC细胞，各类细胞株细胞系，所有人源细胞均STR鉴定后入库。并供应各类血清，培养基，胰酶，双抗，完全培养基等。 产品名称：RKO细胞 中文名称：人结肠癌细胞（低分化 规格：T25瓶 形态特征：上皮样 生长状态：贴壁生长 是否STR鉴定： 培养条件：DMEM(高糖）+10%FBS（推荐HAKATA优等胎牛血清 货号：HN-FBS-500） 传代方法：消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。 冻存条件：HAKATA ® 无血清细胞冻存液货号：H-W-100 规格：100ML 支原体检测：阴性 使用权限：A类 参考文献：Amelogenin：X,X；CSF1PO：8,10；D12S391：15,20；D13S317：8,11；D16S539：13,13；D18S51：11,12；D19S433：14,14；D21S11：27,30；D2S1338：16,16；D3S1358：16,19；D5S818：11,13；D6S1043：14.1,19；D7S820：8,10；D8S1179：9,13,14；FGA：20,21,22,23；Penta E：11,13；TH01：6,10；TPOX：11,11；vWA：16,22； 复苏周期：10个工作日左右 培养步骤： 1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。 1、对于贴壁细胞，传代可参考以下方法： 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。 3.轻轻吹打细胞，完全脱
-
Caco2细胞| Caco2人结肠癌细胞 处理方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
Caco2细胞| Caco2人结肠癌细胞 处理方法 素冉生物依托同济大学，上海市东方医院，上海市di一妇婴保健院供应人脐带间充质干细胞，人脂肪干细胞，无血清细胞冻存液，IPS功能性细胞，HUVEC细胞，各类细胞株细胞系，所有人源细胞均STR鉴定后入库。并供应各类血清，培养基，胰酶，双抗，完全培养基等。 产品名称：Caco2细胞 中文名称：人结肠癌细胞 规格：T25瓶 形态特征：上皮样 生长状态：贴壁生长 是否STR鉴定： 培养条件：RPMI1640+10%FBS（推荐HAKATA优等胎牛血清 货号：HN-FBS-500） 传代方法：1：2传代 冻存条件：HAKATA ® 无血清细胞冻存液货号：H-W-100 规格：100ML 支原体检测：阴性 使用权限：A类 参考文献：Amelogenin：X；CSF1PO：11；D13S317：11，13，14；D16S539：12，13；D18S51：12；D19S433：15；D21S11：30，32；D2S1338：17，19.2，25；D3S1358：14，17；D5S818：12，13；D7S820：11，12；D8S1179：12，14；FGA：19；TH01：6；TPOX：9，11；vWA：16，18； 复苏周期：10个工作日左右 培养步骤： 1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。 1、对于贴壁细胞，传代可参考以下方法： 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。 3.轻轻吹打细胞，完全脱落后吸出，在1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。 4. 按5-6ml/瓶
-
研究发现外泌体外排的APOBEC3能够增强相邻细胞的抗病毒能力
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
乙型肝炎病毒(human hepatitis B virus，HBV)是引起人类乙型肝炎的病原体，能引起急慢性肝炎、肝硬化、肝癌等多种临床疾病，是我国常见的病毒性肝炎。虽然目前有HBV疫苗，但对慢性HBV感染仍无有效**手段。HBV感染仍然是世界性的严重公共卫生问题。缺乏合适的HBV感染动物模型是研究发病机制和研发药物及疫苗的瓶颈。 树鼩是灵长类动物亲缘关系较近的新型实验动物，有研究发现HBV可感染树鼩，也能检测到乙肝表面抗原和e抗原(HBsAg和HBeAg)。基于树鼩对HBV的易感性，发现鉴定出HBV功能受体——钠离子-牛磺胆酸共转运蛋白(sodium taurocholate cotransporting polypeptide， NTCP)，为新药研发提供了重要**靶点。但HBV对成年树鼩的感染率较低以及难以形成持续性感染等缺点限制了该模型的推广应用。 宿主限制因子是限制病毒跨种传播和模型建立的主要原因之一。宿主限制因子APOBEC3家族成员能够通过胞嘧啶脱氨基作用导致病毒基因组突变来抑制病毒的复制。 在中国科学院昆明动物研究所研究员郑永唐的指导下，博士研究生罗梦婷对树鼩APOBEC3家族基因序列特征、进化、表达和抗HBV作用及机制进行了研究。*鉴定发现，树鼩有5个APOBEC3基因家族成员，分别为APOBEC3A，-3C，-3F，-3G，-3H，也命名为A3Z1a、A3Z2a-Z2b、A3Z2d-Z2e、A3Z2c-Z1b、A3Z3。 树鼩A3Z1的2个基因和A3Z2的5个基因分别独立进化而来，并且在免疫器官中表达较高。树鼩APOBEC3A和APOBEC3H能够形成同源二聚体。干扰素和HBV感染刺激能够上调树鼩APOBEC3家族基因的mRNA表达水平，提示树鼩APOBEC3可能有限制HBV复制的能力。 随后在树鼩原代肝细胞中发现，使用干扰素后确实能够限制HBV在树鼩原代肝细胞中的复制水平，cccDNA指标甚至能够下降至与使用拉米夫定阳性药物相似水平。同时检测到干扰素刺激树鼩原代肝细胞后APOBEC3家族表达上调。体外实验验证，除A3Z2d-Z2e外，树鼩APOBEC3能够通过其基因编辑作用以及非编辑作用，在体外发挥较强抗HB
-
研究发现神经系统中细胞死亡模式的改变能促进新型神经元群体进化产生
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
近日，来自弗朗西斯克里克研究所等机构的科学家们通过研究发现，在大脑生长过程中预防神经元的死亡，意味着这些“僵尸”细胞可以发展成为功能性的神经元细胞。 在大脑发育过程中，大量神经元会自我破坏作为移除过量细胞的一种必要调节性机制，在大脑的特定区域，细胞凋亡（细胞）会影响大约50%的神经元的功能；研究人员通过对黑腹果蝇进行研究后发现，通过阻断阻断这些细胞死亡，其后来就会发育出新型的神经元网络，而且其作用和性质与现有的神经元并不相同。 研究人员对果蝇嗅觉系统中的神经元细胞凋亡的后阶段进行了遗传性地抑制，他们发现，被救援的僵尸细胞会发育称为功能性的嗅觉神经元细胞从而帮助果蝇进行嗅觉的检测，然而，这些僵尸神经元要比标准的相同细胞表达不同的嗅觉感受器，比如，在嗅觉器官下颚须中发现的某些僵尸细胞就拥有能检测二氧化碳的受体，昆虫就能利用这一线索来感知动物或人类的存在（当其呼吸时能够吸附二氧化碳来感知）；这些额外的神经元还能够给予果蝇与冈比亚按蚊相似的特性，但与果蝇不同的是，冈比亚按蚊的下颚须中含有二氧化碳感知的嗅觉神经元。这两种物种拥有一个大约生活在2.5亿年前的共同祖先。 当正常状况下会发生死亡的神经元被保护免于细胞凋亡时，其就会发育称为僵尸神经元，从而拥有与蚊子体内特定神经元相类似的特性，因此，细胞凋亡是一种特殊的因子，其能帮助蚊子和果蝇随着时间延续不断适应不同的环境。 从进化学的角度来看，研究结果表明，神经系统中细胞死亡模式的改变或能使得一个物种适应来自新环境的新压力，从而就能促进具有新型结构和功能特性的神经元群体得以进化产生。虽然研究人员并没有详细研究携带更多嗅觉神经元的果蝇的行为，但从理论上来讲，这种增加会使其以更高的灵敏性来感知气味，这或许有助于其寻找伴侣、食物并感知危险，因此相比其它个体而言，这或许就是一种特殊的优势了。
-
Nature：中心体调控大脑皮层发育的崭新机制
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
放射状胶质细胞是大脑发育关键的一种神经前体细胞，分裂产生大脑皮层几乎所有的神经元和胶质细胞。所有动物细胞都有中心体，通常位于细胞核附近的细胞质中。然而中心体在放射状胶质细胞内的定位十分独特，位于远离细胞核的顶端细胞膜上，即脑室腔的表面上。这种独特的亚细胞特征已被发现数十年，但其成因及功能一直令人困惑。清华大学生命科学学院、IDG-麦戈文脑科学研究院时松海教授和结构生物学高精尖创新中心史航研究员课题组线发表了题为“中心体的锚定调控神经前体细胞特性和大脑皮层的形成”（Centrosome anchoring regulates progenitor properties and cortical formation）的研究论文，*揭示了中心体调控哺乳动物大脑皮层神经前体细胞机械特性和分裂能力，进而影响大脑皮层的大小和折叠的崭新机制。这一发现公布在Nature杂志上。时松海教授和史航研究员课题组采用基于透射电镜成像的连续超薄切片技术，*观察到了放射状胶质细胞内的中心体是通过附着在母体中心粒上的远端附属物（distal appendages）锚定在顶端细胞膜上的（图1）。为了探索其分子调控机制和生理功能，研究人员在大脑皮层放射状胶质细胞内特异性地去除了远端附属物的重要构成蛋白CEP83，使得远端附属物无法形成，从而阻止中心体与细胞膜的连接。结果发现，去除CEP83蛋白后，母体中心粒上不再形成远端附属物，中心体和顶端膜发生了微小的错位，不再锚定在顶端膜上。进一步研究表明，中心体这一不足1微米的位移，不是通过影响初级纤毛的形成，而是破坏了顶端膜上特有的环状微管结构，导致顶端膜被拉伸、变硬。这一物理特性的改变引起了放射状胶质细胞内机械敏感信号通路相关的YAP蛋白（Yes-associated protein）的过度激活，从而导致了放射状胶质细胞前期的过度扩增以及之后中间前体细胞的增多，终使得大脑皮层神经细胞显著增加，体积扩大，并引发异常折叠。该研究解决了长期以来关于放射状胶质细胞内中心体特殊定位原因和作用的谜题，为研究神经前体
-
Rbm7——严重肺纤维化的新突破口
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
受伤后，身体大多数组织都有非凡的自我修复能力。在伤口愈合的复杂过程中，有些东西有时会出错，导致受伤区域周围形成过多的结缔组织，也称为纤维化，可能影响器官功能。现在，大阪大学的研究人员发现了一种纤维化疤痕组织的形成过程中起核心作用的新蛋白。研究发表在Immunity杂志，他们展示了Rbm7蛋白如何在组织损伤后诱导细胞死亡，然后导致特定类型的免疫细胞的重新聚集，从而引发组织纤维化的形成。虽然造成组织损伤的原因是多方面的，包括感染、创伤和药物副作用，但在所有这些情况下，组织的默认反应是完全相同的：形成新的组织来愈合和替换受伤的组织。这个看似简单的任务包含着组织和免疫细胞之间复杂的相互作用。虽然已经有大量的分子参与者被描述参与了这个相互作用，但是对于组织纤维化如何发展以及如何预防还缺乏一个清晰的认识。“纤维化是一种严重的现象，会不可逆转地恶化组织功能，”该文章的通讯作者Shizuo Akira说。“我们的研究目的是进一步了解纤维化的机制，并为组织纤维化的医学**探索一条潜在的新途径。”为了达到他们的目标，研究人员使用博来霉素（用于**皮肤／食道等鳞癌,恶性淋巴瘤和睾丸癌的药物，但会导致肺纤维化）诱导小鼠肺纤维化。他们首先发现，在纤维化的肺中，Rbm7（一种功能基本未知的蛋白质）的表达增加。研究人员随后调查了肺纤维化患者的临床标本，发现Rbm7在肺纤维化患者中也有大量存在。“缺乏Rbm7的小鼠的肺纤维化较少，”文章作者Kiyoharu Fukushima说，“这个有意思的现象促使我们想知道Rbm7促纤维化作用的分子机制。”研究人员表明，受损的组织细胞和一种特殊类型的免疫细胞（分离核的非典型性单核细胞，SatMs）之间的相互作用是纤维化发生的关键。当组织受到损伤时，例如药物博莱霉素处理，受影响的组织细胞会加速Rbm7的产生，Rbm7会引起下游一系列反应终导致这些组织细胞的死亡。死亡的组织细胞会释放一种趋化因子（包括CXCL12）招募促纤维化的单核细胞比如SatMs，招募的SatMs会
-
【连载-企业参考品】肺癌PCR和NGS参考品的选择
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
科佰生物作为一家提供企业核酸诊断标准品的企业，在该领域已经深耕多年，与全国该领域90%的企业都有过合作，成功支持过很多企业的试剂盒研发和获批，在该领域有丰富的经验。根据我们对市场的调研，对客户需求的理解，我们把我们的产品线划分为多个模块，主要为支持PCR的单点mutation、fusion和CNV产品，支持NGS的小panel和大panel(泛肿瘤、包含TMB和MSI)产品，支持IHC和Fish的FFPE block产品，支持标准品定标的dPCR检测试剂盒产品等。 接下来的几期，我们陆续会针对不用的肿瘤，遵循NCCN指南的标注，为大家分享我们对企业参考品选择的看法。 肺癌（Lung cancer）是恶性的肺部肿瘤，肇因于肺部组织细胞不受控制地生长。如不**，肿瘤细胞会转移至邻近组织或身体的其他地方。肺部常见的原发性恶性肿瘤属于上皮癌，可粗分为小细胞癌（SCLC）和非小细胞癌（NSCLC）。根据《2018年癌症统计数据》显示： 1. 2018年将有大约1810万癌症新发病例和960万癌症死亡病例。 2. 肺癌依旧是发病率（11.6%）和死亡率（18.4%）较高的恶性肿瘤。发病率其次为女性乳腺癌（11.6%）、前列腺癌（7.1%）、结直肠癌（6.1%）；死亡比例其次为结直肠癌（9.2%）、胃癌（8.2%）、肝癌（8.2%）。 从中国来看，肺癌是发病率（女性为乳腺癌较高）和死亡率较高的癌癌种。 肺癌的**一般分为外科**、放疗、化疗和免疫**，针对化疗和免疫**，临床已经有很多靶向药物，包含小分子和大分子药物，出于精准诊疗的原则，**前分子与生物标志物的分析尤为重要，针对肺癌的分子标志物主要包含EGFR，ALK，ROS1,BRAF,KRAS,MET,RET,ERBB2,PD1/PDL1,TMB(TMB是一个可能有助于选择适于免疫**患者的新型生物标志物，目前尚无测量TMB的共识)，各个分子标志物的临床意义和指导，请点击下载NCCN指南。因此围绕这些基因的诊断对肺癌的**有着非常重要的作用，被广泛应用于临床。 自然而然，国内外针对肺癌开发的诊断试剂盒是热门的，也是
-
荧光定量实验问题，我们来解决——这里有专属于你的定量试剂
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
您的荧光定量实验问题，我们来解决 ————这里有专属于你的定量试剂 作为实验达人，是否会遇到以下qPCR实验难题？ 在Prime 3设计出的众多引物中徘徊不定，且纠结于所选的引物的好与坏？ 既纠结于溶解曲线的峰型，而又缺少理想溶解曲线峰型的理论支持？ 既要排长队预约qPCR仪，又要费心劳力、分秒必争的计算体系配制时间，就为能及时上机？ 问题的解决只需要一款“高Ct值真实性产品” Hieff UNICON® Power qPCR SYBR Green Master Mix，采用的抗体法热启动Taq DNA聚合酶，有效抑制样品准备过程中及PCR反应时，引物退火导致的非特异性扩增。它的高检出率，高特异性、高扩增效率已经众多基因片段测试验证，无疑它就是一款“高Ct值真实性产品”！ 大量的引物筛选工作，能少则少！ 简化引物设计，提升引物使用率 以293T细胞cDNA为模板，利用Prime5软件设计200bp扩增长度的片段（GC含量：30%-70%）的引物共1000对，随机挑选88对，使用Hieff Unicon® Power预混液测定引物的扩增特异性。通过溶解曲线分析，88个检测片段中有86个（97.7%）目标片段有效扩增，说明Hieff Unicon® Power预混液引物兼容性强，具备高特异性扩增、高检出率的特点。 标准化的溶解曲线线型，避免结果误判 超高特异性，保证了Ct值的真实性 产物凝胶电泳实验与溶解曲线双标准判定特异性，建立理想溶解曲线线型 时间的碎片化？不再存在！ 1次体系配制，上机时间自由支配 经50次反复冻融或体系配制后4℃保存24h，扩增性能无变化 专业的酶制剂开发与运用专家 获取多种基因工程突变Taq DNA聚合酶（多种热启动形式），着力于Buffer的深入优化，翊圣生物开发出满足于常规通用型、高灵敏度、高特异性的等专项需求的定量产品。 翊圣生物qPCR产品详细参数指南 产品名称 货号 模板GC范围 特异性 扩增效率（质粒） 灵敏度 性价比 Hieff UNICON® Power qPCR SYBR Green Master Mix 11195ES ★★★★★ ★★★★★ ★★★★☆ ★★★☆☆ ★★★☆☆ Hieff UNICON® qPCR SYBR Green
-
L1210-LUC小鼠白血病荧光素酶标记细胞 处理方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
L1210-LUC小鼠白血病荧光素酶标记细胞 处理方法产品概述： 细胞名称 L1210（小鼠白血病细胞） 种属 小鼠 年龄（性别） 雌；8月龄 组织来源 淋巴细胞白血病 生长特性 悬浮 细胞形态 淋巴母细胞样 背景描述 L1210细胞的体外悬浮培养早是由G·Moore等(1966年)和P·Himmelfarb等(1967年)报导，源于用0.2%甲基胆蒽涂抹雌性小鼠的皮肤诱发的肿瘤。L1210细胞广泛用于化学因子和天然产物细胞毒活性的常规筛选；L1210细胞接种裸鼠在21天内100%(5/5)成瘤。 生长培养基 DMEM高糖＋10% FBS＋1% P/S 培养条件 气相：空气，95%；CO2，5% 温度：37℃ L1210-LUC小鼠白血病荧光素酶标记细胞 处理方法操作说明： 1)对于常温运输的细胞，收到细胞后，检查是否有运输问题，即细胞培养瓶或管是否破损，细胞培养液是否溢出。若没有运输问题，请75%酒精消毒后，保留封口膜，放入细胞培养箱中静置。严格检查培养箱的参数：温度，湿度和CO2浓度。细胞静置时间一般为6-12小时后，细胞状态稳定后，即可开始后续操作。选用正确的细胞培养体系，A2780(人卵巢癌细胞)严格按照说明书的培养条件进行培养。条件允许，培养的前三天内做细胞拍照记录，通过邮件发送给我们做及时状态跟踪。 2)对于干冰运输的细胞，请取出冷冻管后，须立即放入37C水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化，并注意水面不可超过冷冻管盖沿，否则易发生污染情形。然后将其复苏培养，次日更换培养液。 L1210（小鼠白血病细胞）注意事项： 1)细胞漂浮：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察，如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以离心去掉，留10ml培养液培养观察，细胞生长至汇合度80%，进行消化传代；如细胞还是不贴壁，将细胞离心收集转到新培养瓶，原培养瓶加部分培养液继续培养，中间注意观察，我们的技术人员会一直跟踪指导，直到问题解决。 2)对于生长缓慢的贴壁细胞：可采用适当的提高培养基中血
-
血清沉淀是什么？
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
血清中经常会出现肉眼可见的沉淀，其成分有多种类型，产生的原因有很多，主要有纤维蛋白、磷酸钙还有一些其它成分。1. 纤维蛋白（Fibrin）血清中肉眼可见的沉淀物大多属于这一类型。由于在生产过程中，血清采集、过滤（3 次 0.1 μm过滤）和灌装处理都是在低温条件下快速完成, 此时血清中纤维蛋白原（Fibrinogen）处于溶解状态。但在解冻之后, 血清中纤维蛋白原往往会发生凝集，形成肉眼可见的沉淀。2. 磷酸钙（Calcium Phosphate）这是一种常见的沉淀成分，通常会造成血清出现云雾状浑浊。当产品在 37℃保存时，这种现象尤其明显，在倒置显微镜下可观察到小黑点的存在。这些小黑点在布朗运动的作用下四处游动，常被误认为是微生物污染。3. 其他成分（Other） 血清中的其他成分也会形成沉淀，例如胆固醇形成的油脂滴和其他蛋白沉淀等。
-
血清沉淀会影响细胞培养吗？
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
1. 细胞生长我们在出厂前都会对血清进行一系列质检测试，确保血清质量达到严格标准。血清测试和细胞培养经验也表明，其沉淀成分不会影响血清作为细胞培养添加物的表现。这一点得到了众多客户和其他血清供应商的肯定。解冻之后, 血清中纤维蛋白原往往会发生凝集，形成肉眼可见的沉淀。2. 怀疑污染磷酸钙颗粒经常会被当成微生物污染而引发不必要的担忧。一般情况下，当操作人员融化血清后注意到有雾状浑浊时，常将其存放在 4℃冰箱中观察，并考虑接下来是否继续使用。但这样会使沉淀进一步增多，反而会使血清更加浑浊，进而误以为存在血清污染。并且，在倒置显微镜下，可在血清中观察到四处游动的小黑点（磷酸钙颗粒的布朗运动），更容易使人误以为存在微生物污染。为防止这类误解的产生，我们不建议客户培养血清来验证是否存在污染，而是将血清直接接种在细菌培养基上进行培养，以观察是否有细菌的增殖。并且，进行革兰氏染色，并在油镜（100 X 10 倍）下观察可直接确认是否存在微生物污染。
-
怎样操作可以尽量避免血清沉淀出现
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
1. 正确解冻 首先，应按照逐步解冻的方式正确解冻血清：从-20℃取出后，置于 4℃冰箱缓慢解冻，后置于室温完成解冻。如果直接从-20℃拿到室温或 37 ℃水浴解冻，则非常容易产生沉淀。在解冻过程中，请注意时不时缓慢摇晃瓶子，减少沉淀的产生。为避免反复冻融，建议您将血清分装使用。 2. 使用和保存注意事项 血清沉淀很难预测和避免，出现沉淀后也无需担忧，这并不会影响血清的品质。已知血清沉淀在以下条件下会有增多的可能： 1) 热灭活； 2) 37℃培养； 3) 反复冻融； 4) 伽马射线照射； 5) 2-8℃长期保存； 6) 长期保存于可自动化霜的冰箱中（温度不稳定）。 血清沉淀的形成机理多种多样，具体的机理尚不十分明确。我们尚不能准确预测和控制血清沉淀的产生。目前市面上所有品牌的血清产品都存在沉淀现象，这一点可以在各品牌网站上关于沉淀问题的声明上得到证实。 血清产品中出现沉淀属于常见现象，但不会影响血清的品质，对细胞培养而言也是没有任何问题的，大家可以放心使用！
-
什么是外泌体？
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
外泌体（Exosome）是一种直径为30-100nm的纳米级脂质包裹体结构，内部包裹了蛋白、mRNA和microRNA等物质。外泌体天然存在于体液中，包括血液、唾液、尿液和母乳，外泌体是活细胞分泌的来源于晚期核内体(也称为多囊泡体 )的膜性囊泡。 包括肿瘤细胞在内的几乎所有类型的细胞，都可以产生并释放外泌体。外泌体由细胞分泌释放出来，在血液等体液内传播，后又可被其他细胞吞噬，是细胞间通讯的重要介质。越来越多的证据表明，宿主细胞或肿瘤细胞分泌的外泌体参与了肿瘤发生、生长、侵袭和转移。免疫细胞和肿瘤细胞之间通过外泌体进行信息交换，这种通讯方式在调节肿瘤免疫中发挥了双重作用。外泌体既可以通过抑制免疫细胞（DCs、NK细胞、CD4+ 和CD8+ T细胞等）引发的抗肿瘤反应，以及诱导免疫抑制或调节细胞群（MDSCs、Tregs和Bregs）的免疫抑制。
-
外泌体的发展历史
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
1983年，外泌体*于绵羊网织红细胞中被发现，1987年Johnstone将其命名为“Exosome”。随后的10年，外泌体并未受到足够的重视。 直至1996年，G.Raposo发现类似于B淋巴细胞能分泌抗原提呈外泌体，这种外泌体携带MHC-Ⅱ类分子、共刺激因子和粘附因子。研究表明这种B细胞来源的外泌体可以直接刺激效应CD4+细胞的抗肿瘤反应。 1998年，L.Zitvogel等发现树突细胞（DC cell）也能产生有抗原提呈能力的外泌体，而且外泌体含有功能性的MHC-Ⅰ类和Ⅱ类分子，还有共刺激因子。这种外泌体启动了特异性的CTL杀伤作用，促进了T细胞依赖的抗肿瘤效应。 H.Valadi等发现，细胞之间可以通过外泌体中的RNA来交换遗传物质。这意味着细胞可以通过外泌体影响另外一个细胞，甚至可以把自己的基因强加给另外一个细胞。研究人员逐渐对小小的外泌体产生了极大的好奇。他们发现，肿瘤细胞的外泌体与正常细胞的外泌体之间存在差异，肿瘤的外泌体会促进肿瘤的生长和转移，肿瘤周围组织细胞分泌的外泌体具备杀伤肿瘤细胞的能力，等等。2013年的诺贝尔生理或医学奖颁给了三位科学家，他们分别是美国科学家James E. Rothman和Randy W. Schekman，德国科学家Thomas C. Südhof，以表彰他们发现细胞内部囊泡（外泌体等）运输调控机制。使外泌体的研究达到全新的高度。就外泌体的研究方向而言，干细胞、免疫、microRNA、靶向给药、癌症的诊断及**等都是热门研究领域。 2015年JHuan等人证实了急性髓细胞白血病（AML）的外泌体在白血病的骨髓微环境中具有抑制造血干细胞的功能。同年WANGY等人发现诱导多能干(iPS)细胞的外泌体可以在心肌细胞受到急性心肌缺血（MIR）影响时，给心肌细胞传送保护信号。 目前有关外泌体的研究，主要集中在外泌体颗粒的提取、纯化和内容物分析上。其中，外泌体的粒径表征和浓度信息是极为重要的参数。
咨询热线
18133906270
德尔塔官方微信