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医学上ELISA是什么意思？
作者：德尔塔 日期：2022-03-01
ELISA指的是酶联免疫吸附实验，属于即将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行的技术。 ELISA试验优点是简便易懂，但带有操作者的主观性，不能精确定量。 ELISA实验原理： 1971年Engvall和Perlmann发表了酶联免疫吸附剂测定（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）用于IgG定量测定的文章，使得1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法。这一方法的基本原理是： ①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。 ②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在测定时，把受检标本（测定其中的抗体或抗原）和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。 用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开，最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。 加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据颜色反应的深浅有无定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，故可极大地放大反应效果，从而使测定方法达到很高的敏感度。 扩展资料： 结果判断—— 1、定性测定： 定性测定的结果判断是对受检标本中是否含有待测抗原或抗体作出"有"或"无"的简单回答，分别用"阳性"、"阴性"表示。"阳性"表示该标本在该测定系统中有反应。"阴性"则为无反应。 2、定量测定： ELISA操作步骤复杂，影响反应因素较多，特别是固相载体的包被难达到各个体之间的一致，因此在定量测定中，每批测试均须用一系列不同浓度的参考标准品在相同的条件下制作标准曲线。
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elisa实验原理是什么？
作者：德尔塔 日期：2022-03-01
ELISA实验原理是酶分子与抗体或抗抗体分子共价结合，此种结合不会改变抗体的免疫学特性，也不影响酶的生物学活性。酶标记抗体可与吸附在固相载体上的抗原或抗体发生特异性结合。滴加底物溶液后，底物可在酶作用下使其所含的供氢体由无色的还原型变成有色氧化型，出现颜色反应。 因此，可通过底物的颜色反应来判定有无相应的免疫反应，颜色反应的深浅与标本中相应抗体或抗原的量呈正比。此种显色反应可通过ELISA检测仪进行定量测定，这样就将酶化学反应的敏感性和抗原抗体反应的特异性结合起来，使ELISA方法成为一种既特异又敏感的检测方法。 扩展资料： ELISA实验基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体 ( 聚苯乙烯微量反应板 ) 表面，使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行，用洗涤法将液相中的游离成分洗除。常用的 ELISA 法有双抗体夹心法和间接法，前者用于检测大分子抗原，后者用于测定特异抗体。 ELISA方法已被广泛应用于多种细菌和病毒等疾病的诊断。在动物检疫方面，ELISA在猪传染性胃肠炎、牛副结核病、牛传染性鼻气管炎、猪伪狂犬病、蓝舌病等的诊断中已为广泛采用的标准方法。
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ELISA实验原理与操作注意事项
作者：德尔塔 日期：2022-03-01
ELISA是酶联接免疫吸附剂测定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。此项技术自70年代初问世以来，发展十分迅速，目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。 ELISA实验原理： ELISA是以免疫学反应为基础，将抗原、牽9体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。 由于抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行，每加入一种试剂孵育后，可通过洗涤除去多余的游离反应物，从而保证试验结果的特异性与稳定性。在实际应用中，通过不同的设计，具体的方法步骤可有多种。即:用于检测抗体的间接法、用于检测抗原的双抗体夹心法以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。比较常用的是ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法。 ELISA使用注意事项： 1.正式试验时，应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件，待检样品应作一式二份，以保证实验结果的准确性。有时本底较高，说明有非特异性反应，可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。 2.在ELISA中，进行各项实验条件的选择是很重要的，其中包括: (1)固相载体的选择：许多物质可作为固相载体，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体，在使用前均可进行筛选：用等量抗原包被，在同一实验条件下进行反应，观察其显色反应是否均一性，据此判明其吸附性能是否良好。 (2)包被抗体(或抗原)的选择：将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时，要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间。吸附温度，时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18～24小时。蛋白质包被的最适浓度需进行滴定：即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg／ml等)进行包被后，在其它试验条件相同时，观察阳性标本的OD值。选择OD值最大而蛋白量最少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1～10μg／ml。 (
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elisa为什么要封闭？
作者：德尔塔 日期：2022-03-01
elisa为什么要封闭？封闭是否必要，取决于ELISA的模式及具体的实验条件。并非所有的ELISA固相均需封闭，封闭不当反而会使阴性本底增高。 一般说来，双抗体夹心法，只要酶标记物是高活性的，操作时洗涤彻底，不经封闭也可得到满意的结果。特别是用单抗腹水直接包被时，因其中大量非抗体蛋白在包被时同样也吸附在固相表面，业已起到了类似封闭剂的作用。 但在间接法测定中，封闭一般是不可少的。包被好的ELISA板干燥后放入密封袋或锡袋中，在低温可保存数月。
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elisa封闭液的作用是什么？
作者：德尔塔 日期：2022-03-01
elisa封闭液的作用是什么？为了减少非特异性。也就是说，封闭中的蛋白会非特异性将elisa板子中没有结合包被物的位点封闭掉，这样之后加入的抗原或者抗体就不会再和板子发生非特异性的结合，使elisa的结果更加的准确。
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48/96T规格的ELISA试剂盒有哪些区别？使用注意事项
作者：德尔塔 日期：2022-03-01
Elisa试剂盒规格分为48T和96T，同是试剂盒这两者又有哪些区别呢？德尔塔试剂来告诉你。 96T是指可以做94个标本，2个标准对照，48T是指可以做47个标本，1个标准对照。 Elisa试剂盒使用注意事项： 1.Elisa试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可运用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。 2.浓洗刷液可能会有结晶分出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗刷时不影响效果。 3.各步加样均应运用加样器，并常常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时刻控制在5分钟内，如标本数量多，引荐运用排枪加样。 4.请每次测定的一同做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔孔OD值的)，请先用样品稀释液稀释必定倍数(n倍)后再测定，核算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。 5.严峻按说明书的操作进行，试验效果判定有必要以酶标仪读数为准。 6.本试剂不同批号组分不得混用。 7.封板膜只限一次性运用，以避免穿插污染。 8.全部样品，洗刷液和各种废弃物都应按感染物处理。 9.底物请避光保存。
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白介素的概述及作用是什么？
作者：德尔塔 日期：2022-03-01
白细胞介素简称白介素，是指在白细胞或免疫细胞间相互作用的淋巴因子，它和血细胞生长因子同属细胞因子。两者相互协调，相互作用，共同完成造血和免疫调节功能。白细胞介素在传递信息，激活与调节免疫细胞，介导T、B细胞活化、增殖与分化及在炎症反应中起重要作用。 中文名：白介素 外文名：Interleukin 全 称：白细胞介素 性 质：白细胞相互作用的淋巴因子 概述: 白细胞介素是由多种细胞产生并作用于多种细胞的一类细胞因子。由于最初是由白细胞产生又在白细胞间发挥作用，所以由此得名，现仍一直沿用。最初指由白细胞产生又在白细胞间起调节作用的细胞因子，现指一类分子结构和生物学功能已基本明确，具有重要调节作用而统一命名的细胞因子，它和血细胞生长因子同属细胞因子。两者相互协调，相互作用，共同完成造血和免疫调节功能。白细胞介素在传递信息，激活与调节免疫细胞，介导T、B细胞活化、增殖与分化及在炎症反应中起重要作用。 白细胞介素interleukin 缩写为IL，功能关系免疫反应的表达和调节，这种调节有来源于淋巴细胞或巨噬细胞等的许多因子参与。来源于淋巴细胞的有淋巴细胞活素，来源于巨噬细胞的总称为monokine，其中的各个因子的生物活性各有不同（例如巨噬细胞活化，促进T细胞繁殖等），因子自身的物理化学性质多不清楚。 在对免疫应答的研究过程中，在丝裂原刺激的细胞培养上清中发现了许多具有生物活性的分子，研究者各以自己测得的活性进行命名，十几年报道了近百种因子。后来借助分子生物学技术进行比较研究发现，以往许多以生物活性命名的因子实际上是具有多效性的同一物质。 特征: 白介素2（IL-2）分子量为1.5万的糖蛋白，对T细胞激活及生长有作用。IL-2主要由CD4+和CD8+T细胞产生，IL-2主要以自分泌或旁分泌方式发挥效应。不同种属间，IL-2沿种系谱向上有约束性，向下无约束性。IL-2是参与免疫应答的重要细胞因子，并参与抗肿瘤效应和移植排斥反应。 作用: IL-2对T细胞的作用 IL-2是T细胞生长
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分子生物学体外细胞培养具体操作过程和注意事项
作者：德尔塔 日期：2022-03-01
一、准备工作 准备工作对开展细胞培养异常重要，工作量也较大，应给予足够的重视，推备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒，培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌，无菌室或超净台的清洁与消毒，培养箱及其他仪器的检查与调试。 二、取材 在无菌环境下从机体取出某种组织细胞（视实验目的而定），经过一定的处理（如消化分散细胞、分离等）后接入培养器血中，这一过程称为取材。如是细胞株的扩大培养则无取材这一过程。机体取出的组织细胞的首次培养称为原代培养。 理论上讲各种动物和人体内的所有组织都可以用于培养，实际上幼体组织（尤其是胚胎组织）比成年个体的组织容易培养，分化程度低的组织比分化高的容易培养，肿瘤组织比正常组织容易培养。 取材后应立即处理，尽快培养，因故不能马上培养时，可将组织块切成黄豆般大的小块，置4℃的培养液中保存。取组织时应严格保持无菌，同时也要避免接触其他的有害物质。取病理组织和皮肤及消化道上皮细胞时容易带菌，为减少污染可用抗菌素处理。 三、培养 将取得的组织细胞接入培养瓶或培养板中的过程称为培养。如系组织块培养，则直接将组织块接入培养器皿底部，几个小时后组织块可贴牢在底部，再加入培养基。如系细胞培养，一般应在接入培养器皿之前进行细胞计数，按要求以一定的量（以每毫升细胞数表示）接入培养器皿并直接加入培养基。细胞进入培养器皿后，立即放入培养箱中，使细胞尽早进入生长状态。 正在培养中的细胞应每隔一定时间观察一次，观察的内容包括细胞是否生长良好，形态是否正常，有无污染，培养基的PH是否太酸或太碱（由酚红指示剂指示），此外对培养温度和CO2浓度也要定时检查。 原代培养一般有一段潜伏期（数小时到数十天不等），在潜伏期细胞一般不分裂，但可贴壁和游走。过了潜伏期后细胞进入旺盛的分裂生长期。细胞长满瓶底后要进行传代培养，将一瓶中的细胞消化悬浮后分至两到三瓶继续培养。
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elisa试剂盒哪个公司好？找上海德尔塔生物
作者：德尔塔 日期：2022-03-01
elisa试剂盒哪个公司好？目前市场上的ELISA试剂盒质量参差不齐，如何去挑选适合自己的试剂盒就显得特别重要，上海德尔塔生物总结具体有以下几点可供参考。 特异性： ELISA试剂盒的特异性与试剂盒的关键组分，抗体对有关。若抗体对中之一为多抗，另一个必须为单抗，建议使用双单抗。 灵敏度： 灵敏度反映的是试剂盒检出被检物质的更低量的能力，用户可根据自己样本中待检指标的量选择合适的试剂盒，如果待检指标量很低，一般的试剂盒不能满足要求，可选择高敏的ELISA试剂盒。 重复性： 科学实验讲求重复性，一般ELISA试剂盒，其板内和板间变异系数应该控制在15%以内。 简便性： 试剂盒在保证高质量数据的情况下，实验时间越短，操作越便利，越容易受到用户欢迎。这也不妨作为选择试剂盒的一个指标。 经济性： 进口分装试剂盒因为省去不少物流和报关费用，与国外原装进口试剂相比价格上有比较大的优惠，而且能提供比较灵活的包装规格，特别是48T等小包装，目前很多客户因为对品牌的信任度问题，主要还是选择国外原装进口，但是国内进口分装比较成熟的公司仍然是一个非常好的选择。 美誉度： 一个品牌不光要有知名度，更重要的是美誉度。通过行业调查公司以及网络，相关宣传资料等可以找到美誉度高的ELISA试剂盒供应商，这个反映的不仅是产品质量的问题，对供应商的售前售后服务也是一个非常严格的检验。
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ELISA试剂盒能够多次或重复使用吗？
作者：德尔塔 日期：2022-03-01
ELISA试剂盒能够多次或重复使用吗？elisa试剂盒不可以重复用的，因为板孔上的抗体做过一次之后就已经结合掉了，要重复做的话，肯定只能买新的试剂盒。 至于说稳定性差，我个人认为不是手法问题，因为试剂盒在大量操作的时候是比较简单的，起码在同一个人操作的时候，一般不会出现太大的偏差。我倒是觉得有可能是试剂盒质量问题，不知道你测的是什么指标。
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ELISA试剂盒是否可以重复用?
作者：德尔塔 日期：2022-03-01
有的朋友可能会有这样的疑问，就是ELISA试剂盒是否可以重复用？在这上海德尔塔生物再次说明下，ELISA试剂盒是不可以重复使用的，因为板孔上的抗体做过次之后就已经结合掉了，要重复做的话，肯定只能买新的试剂盒。试剂盒在大量操作的时候都是比较简单的，起码在同个人操作的时候，般不会出现太大的偏差。如果是96孔板的话，96孔板的孔可以拆卸下来，当然可以这次用几个，下次用几个的。 实验用几个孔，下次再用其他的孔，有可能吗？比如96孔板，可多次使用吗？如果是96孔板的话，96孔板的孔可以拆卸下来哈，当然可以这次用几个，下次用几个的。 96T的ELISA试剂盒是次必须用完还是可以分多次用？不是的，试剂盒的保质期般都是在半年，如果保存得当的话，不会出现问题，至于分几次用，要看您具体的实验安排了，般的都是分两到三次用完。 ELISA试剂盒开封以后可以在4度冰箱里放多久？个月之做实验用了半，还剩下半打算这个月用，可行吗？结果影响很大么？国产的、进口相比，进口保质期要长些，试剂盒没有明确保存时间，基本上打开后佳是30 天以内（4度），包被的东西，出厂就弄好了，这个就要段时间，再到自己的手上，好打开次全用。其实试剂盒也没多少钱，我们经常就是用十几个孔就换新的了，1个月的话，没问题。试剂盒保质期般是6个月，放在2到8度保存，你才个月的话，没有问题。
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ELISA试剂盒可以检测几个样品？
作者：德尔塔 日期：2022-03-01
ELISA试剂盒使用的客户通常会关心的问题，ELISA试剂盒可以检测几个样品？德尔塔生物ELISA试剂盒的规格有96T和48T两种，排列的板条形式为12×8和6×8。每次实验的标准曲线一般会设7个不同浓度，及一个空白对照组，一条标准曲线需要8个孔。客户在使用ELISA试剂盒时，我们一般会建议标准曲线要做复孔，待测样品也尽量做复孔。用户检测的样本数可以总结为： 96T: 12×8 标曲2×8，不做复孔：测10×8 样品数，做复孔：测5×8样品数 48T：6×8 标曲2×8，不做复孔：测4×8 样品数， 做复孔：测2×8样品数 需要注意的是，客户可以根据自己的实际样本数量和实验计划选择合适的ELISA试剂盒的产品规格。同时ELISA试剂盒的板条数是可以进行拆分的，客户在计算好自己实用的板条数后，也可将不用的板条与干燥剂一起保存于-20 ℃。
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ELISA试剂盒都可以通过什么仪器使用？
作者：德尔塔 日期：2022-03-01
ELISA试剂盒都可以通过什么仪器使用？是所有的ELISA都可以通过酶标仪测试吗?是用酶标仪来测的，基本上所有的Elisa都是可以用酶标仪测得，而且酶标仪也有很多不同的型号的，它们的功能也大同小异的，所以测Elisa是酶标仪的主要功能之一。 1、ELISA试剂盒都可以通过酶标仪使用。 2、酶标仪即酶联免疫检测仪是酶联免疫吸附试验的专用仪器又称微孔板检测器。可简单地分为半自动和全自动2大类，但其工作原理基本上都是一致的，其核心都是一个比色计,即用比色法来进行分析。测定一般要求测试液的最终体积在250μL以下，用一般光电比色计无法完成测试，因此对酶标仪中的光电比色计有特殊要求。
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蛋白酶k配制、使用方法及作用
作者：德尔塔 日期：2022-02-18
蛋白酶k（Proteinase K）是一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶，用于生物样品中蛋白质的一般降解。可以用于消化各种蛋白。用于各种常见的分子生物学、细胞生物学等相关实验，例如基因组DNA抽提、酶的消化去除等。 酶活力，>30U/mg。在37℃，以血红蛋白为底物，1分钟内可以产生相当于1微摩尔酪氨酸Folin阳性的氨基酸或多肽的蛋白酶K的量，定义为一个单位蛋白酶K酶活力。 在很宽的pH范围内有效，有效的pH范围为pH4.0-12.5，最佳pH范围为pH7.5-8.0。 蛋白酶K的最佳反应温度为65℃，但在65℃或更高的温度蛋白酶K自身的也非常迅速地降解。很多时候反应温度选择50-55℃。 在0.2-1%SDS或约10mM尿素存在的情况下，蛋白酶K显示更高的酶活性。蛋白酶K的常用工作浓度为0.05-1mg/ml，根据所用缓冲液是否含有SDS、尿素、pH是否适合、温度是否适合等因素确定具体的工作浓度。 蛋白酶K跟蛋白酶有什么区别： 蛋白酶K广泛应用于分子生物学,药理学等科研方面.一种非特异性、枯草杆菌蛋白酶相关的丝氨酸蛋白酶,具有很高的比活性.一般储存在-20°C,避光防潮密闭干燥。 蛋白酶是所有能够催化分解蛋白质的酶类的统称,而蛋白酶K则是特指一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶,用于生物样品中蛋白质的降解,比如在提取DNA时溶解DNA的水中就有一定量的蛋白酶K.所以它们不属于同一个产品。 蛋白酶K配制标准：20mg/ml蛋白酶K配制标准(proteinase K)：将200mg的蛋白酶K加入到9.5ml水中，轻轻摇动，直至蛋白酶K完全溶解。不要涡旋混合。加水定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20℃。 蛋白酶K的保存：保存在-20℃冰箱里，避免反复冻融，有效保证12月。 孵育温度为55至65℃，理想孵育温度为58℃，孵育时间为15分钟至48小时;理想孵育时间为2小时。 作用：蛋白酶K在原位杂交技术中通常用于杂交前的处理，它具有消化包围靶DNA蛋白质的作用，以增加探针与靶核酸结合的机会，提高杂交信号.但蛋白酶K的浓度过高、消化时间过长或孵育温度过高时，都会对细
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凝血酶的作用
作者：德尔塔 日期：2022-02-18
凝血酶又叫做凝血酵素，为白色或类白色的冻干块状物或粉末。是一种由凝血酶前体(血浆中的必要成分)形成的蛋白质水解酶,催化纤维蛋白元变成纤维蛋白而促使血液凝固。用于毛细血管出血的局部止血以及外科手术后组织愈合。凝血酶能使纤维蛋白原转化成纤维蛋白。局部应用后作用于病灶表面的血液很快形成稳定的凝血块，用于控制毛细血管、静脉出血，或作为皮肤、组织移植物的黏合、固定剂。pH＜5时失效。凝血酶对血液凝固系统的其他作用尚包括诱发血小板聚集及继发释放反应等。每1ml中含500单位的0.9% 氯化钠溶液微显浑浊。 生理作用： 当循环凝血因子在暴露的血管外组织与组织因子相接触时，凝血酶会在组织上聚集。凝血酶通过激活血小板，催化纤维蛋白原转化为纤维蛋白，促进血块稳定而在血栓性疾病的引发和传播上有着核心作用。 药理作用： 凝血酶能使纤维蛋白原转化成纤维蛋白。局部应用后作用于病灶表面的血液很快形成稳定的凝血块，用于控制毛细血管、静脉出血，或作为皮肤、组织移植物的黏合、固定剂。pH<5时失效。凝血酶对血液凝固系统的其他作用尚包括诱发血小板聚集及继发释放反应等。
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