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什么是表面活性剂
作者：德尔塔 日期：2022-02-18
表面活性剂(surfactant)，是指加入少量能使其溶液体系的界面状态发生明显变化的物质。具有固定的亲水亲油基团，在溶液的表面能定向排列。表面活性剂的分子结构具有两亲性：一端为亲水基团，另一端为疏水基团；亲水基团常为极性基团，如羧酸、磺酸、硫酸、氨基或胺基及其盐，羟基、酰胺基、醚键等也可作为极性亲水基团；而疏水基团常为非极性烃链，如8个碳原子以上烃链。表面活性剂分为离子型表面活性剂（包括阳离子表面活性剂与阴离子表面活性剂）、非离子型表面活性剂、两性表面活性剂、复配表面活性剂、其他表面活性剂等。 溶于水能够显著降低水的表面能的物质称为表面活性剂(surface active agent，SAA)或表面活性物质。 传统观念上认为，表面活性剂是一类即使在很低浓度时也能显著降低表（界）面张力的物质。随着对表面活性剂研究的深入，一般认为只要在较低浓度下能显著改变表（界）面性质或与此相关、由此派生的性质的物质，都可以划归表面活性剂范畴。 表面活性剂有天然的，如磷脂、胆碱、蛋白质等，但更多的是人工合成的，如十八烷基硫酸钠C18H37-SO3Na、硬脂酸钠C17H35-COONa等。表面活性剂范围十分广泛（阳离子、阴离子、非离子及两性），为具体应用提供多种功能，包括发泡效果，表面改性，清洁，乳液，流变学，环境和健康保护。
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辣根过氧化物酶制作过程
作者：德尔塔 日期：2022-02-18
过氧化物酶体与溶酶体不同，过氧化物酶体不是来自内质网和高尔基体，因此它不属于内膜系统的膜结合细胞器。过氧化物酶体普遍存在于真核生物的各类细胞中，但在肝细胞和肾细胞中数量特别多。过氧化物酶体含有丰富的酶类，主要是氧化酶，过氧化氢酶和过氧化物酶。氧化酶可作用于不同的底物，其共同特征是氧化底物的同时，将氧还原成过氧化氢。过氧化物酶体的标志酶是过氧化氢酶，它的作用主要是将过氧化氢（H2O2，Hydrogen Peroxide）水解。氧化酶与过氧化氢酶都存在于过氧化物酶体中，从而对细胞起保护作用。 HRP的制备 ⒈水提取： 称取 10斤用水冲刷干净的鲜辣根（辣根皮中亦含有丰富的HRP），用菜刀切成小碎块，在搅肉机中搅碎1~2次。碎渣浆用1倍体积的水在低温下搅拌提取过夜（亦可采用高速抽提法）。次日用甩干机（或离心机）甩干，收集滤液，碎渣再用1/4倍体积水浸泡提取一次，合并两次滤液，量总体积和度，0。 ⒉硫酸铵分级分离： 在不断搅拌下，每升滤液中慢慢加入226克硫酸铵粉末（相当于0.40饱和度），大约在1~2小时内加完，置冷室中放置过夜。次日将上清液小心地用虹吸管移出，下面浑浊液以3000转/分离心15分钟，弃沉淀，合并上清液。再按每升上清液加258克硫酸铵粉末（0.8饱和度）随加随搅拌，当硫酸铵全部溶解后，置冷室过夜。次日，虹吸出上清液，沉淀部分在冰冻离心机中以13000转/分离心20分钟，弃去上清液，收集沉淀。将沉淀悬浮于100~150毫升蒸馏水中（加水量要使沉淀全部溶解为止），分装于透析袋内，放在流动自来水中进行透析1~2天，直到硫酸铵透析完毕为止（可用5%乙酸钡溶液或奈氏试剂进行检查）。然后改换成用蒸馏水透析，中间更换2~3次，用0.1 mol/L硝酸银溶液检查透析外液无氯离子为止。 将透析液合并，在冰冻离心机中以 4000转/分离心 15分钟；去沉淀，量上清液的体积。 ⒊丙酮分级分离： 将上清液倒入烧杯并置冰盐浴中，在不断搅拌下，用细滴管沿杯壁加入1倍体积预冷至-15℃的丙酮，放置片刻，在冰冻
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简单植物酸碱指示剂的提取方法
作者：德尔塔 日期：2022-02-18
植物酸碱指示剂提取 一、花瓣为原料： 取新鲜的月季花数朵,去掉花蕊,留下花瓣,先用清水洗净(冲洗掉花瓣上的尘土)再放入研钵或洁净的瓷碗中,用玻璃棒或洁净的竹筷将花瓣捣成浆状.然后加1～2毫升酒精,再捣几次,使其溶解,并用少量蒸馏水加以稀释(不用酒精直接用蒸馏水溶解也可以,因花青素能溶于水,此处用酒精还有一定的防腐作用),但不宜太稀,以免影响颜色的变化.如汁液过于浑浊,可用纱布包着挤出液体,以滤去残渣,或用离心机分离掉残渣.所得澄清液即为植物酸碱指示剂。 二、果皮为原料的制备法： 取一只表皮颜色较深的紫红色新鲜萝卜,用清水洗去泥灰,再用小刀把紫红色的表皮小心刮下(不要把肉质带下),放入研钵或瓷碗中,把它捣成浆状,然后加酒精少许,再捣几次,使其充分溶解.以下步骤与用花瓣为原料的制法相同.这样便制得颜色较深的紫红萝卜皮的指示剂试液,一只200克重的萝卜,一般可制得50毫升左右的试液. 三、植物全株为原料的制备法：取半斤荠菜,去长根后洗净,分两次投入500毫升的沸水中氽一分钟,捞出荠菜后,剩下的水溶液经过滤后,所得滤液即为酸碱指示剂了.实验用品：试管、量筒、玻璃棒、研钵、胶头滴管、点滴板、漏斗、纱布.花瓣、植物叶子、萝卜、酒精溶液（乙醇和水的体积比1：1）、稀盐酸、稀NaOH溶液.
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脂肪酶的存在及如何分离纯化
作者：德尔塔 日期：2022-02-18
脂肪酶广泛的存在于动植物和微生物中。植物中含脂肪酶较多的是油料作物的种子，如蓖麻籽、油菜籽，当油料种子发芽时，脂肪酶能与其他的酶协同发挥作用催化分解油脂类物质生成糖类，提供种子生根发芽所必需的养料和能量；动物体内含脂肪酶较多的是高等动物的胰脏和脂肪组织，在肠液中含有少量的脂肪酶，用于补充胰脂肪酶对脂肪消化的不足，在肉食动物的胃液中含有少量的丁酸甘油酯酶。在动物体内，各类脂肪酶控制着消化、吸收、脂肪重建和脂蛋白代谢等过程；细菌、真菌和酵母中的脂肪酶含量更为丰富。由于微生物种类多、繁殖快、易发生遗传变异，具有比动植物更广的作用p H、作用温度范围以及底物专一性，且微生物来源的脂肪酶一般都是分泌性的胞外酶，主要的发酵微生物有黑曲霉，假丝酵母等等。适合于工业化大生产和获得高纯度样品，因此微生物脂肪酶是工业用脂肪酶的重要来源，一般不同来源的脂肪酶特性也不一样并且在理论研究方面也具有重要的意义。 脂肪酶的分离纯化 酶的分离纯化是将酶从细胞中或者其他酶原料中提取出来，在于杂质分开、从而获得符合研究和使用要求的酶制品过程。 主要包括：细胞破碎、酶的提取、离心分离，过滤与膜分离，沉淀分离，层析分离，电泳分离，萃取分离，浓缩干燥和结晶等。 酶的纯化选择：首先考虑其用途，实验室研究和临床**中所使用的为高纯度的酶；而工业用途的酶对纯度的要求不是很严格，但是一定纯度的酶制剂不仅可以保证催化反应快速有效的进行，而且也降低了反应的复杂性，增加了反应的可预测性。 大部分微生物脂肪酶为胞外酶，发酵后通过离心或者抽滤出菌体，得到的含酶上清液通过硫酸铵或有机溶液萃取浓缩，出去部分蛋白质和糖类，然后再用层析法进一步纯化。除了少部分基因工程菌能够高效表达功能性脂肪酶，绝大部分野生型菌株都要联合两种以上的层析方法纯化才能获得预期纯度的蛋白质。
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水合肼制作工艺种类
作者：德尔塔 日期：2022-02-18
水合肼会侵蚀皮肤、粘膜，损害人体内的酶类，因此被认为是有毒的。水合肼液体是以二聚物存在，于水和乙醇混溶，不溶于乙醚和氯仿；有强的还原作用和腐蚀性，能侵蚀玻璃、橡胶、皮革、软木等，在高温加热时、分解成氮气、氨气于氢气。水合肼还原性极强，与卤素、硝酸、高猛酸甲等激烈反应，在空气中可吸收二氧化碳、发出烟雾。 1.酮连氮法 将次氯酸钠与氨反应，生成的酮连氮中间物在高压下水解生成水合肼。采用丙酮、氧化剂或者次氯酸钠与氨反应生成中间体酮连氮，在次氯酸钠、丙酮、氨的摩尔比例1:2:20的混合条件下，充分反应后其收率达到98%(以氯计)。稀和成液经加压脱氨塔脱去未反应的氨，氨被水吸收后再返回酮连氮反应器，脱氨塔釜底液由腙、酮连氮及盐水组成，将其送入酮连塔，从塔蒸出的是一丙酮连氮与水的低沸共混物（沸点95℃，质量分数为55.5%的丙酮连氮），塔釜为盐水，塔顶馏出的丙酮连氮在加水压解塔内与1MPa的压力下水解，生成丙酮和水合肼。生成的丙酮由塔顶馏出，返回到并酮连氮反应器中，釜液位10%-12%的肼水溶液，经浓缩得到80%水合肼。 2.拉西法 用次氯酸钠氧化最终生成水合肼。反应所用的氢氧化钠浓度为8%，在通道入氯气生产次氯酸钠时，氨气化钠过剩，用纯水吸收氨气成水溶液。氨与次氯酸钠溶液的混合比为20:1，控制反应温度为170℃，反应可在加压下进行并在数秒内完成。 3.尿素法 以次氯酸钠为氧化剂，尿素为氮源，合成水合肼。将尿素溶解于水中形成尿素液，在硫酸镁存在下与次氯酸钠和烧碱混合液在管式氧化反应器中进行反应得到粗肼，既氧化液，肼含量大与2%。因为粗肼中含有大量的氯化钠、碳酸钠及氢氧化钠等杂质，所以将粗肼通过五层锅真空蒸馏除去这些杂质，并通过分馏釜制得含肼大于6%的淡肼水溶液，再通过蒸发器进一步浓缩得到40%的水合肼。这种技术容易掌握。副反应较多因此必须维持很低的肼浓度（一般为2%-3%），因此副产大量的盐需要处理，同时蒸发提浓水合肼需要消耗大量的热能，因此
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胃蛋白酶如何提取
作者：德尔塔 日期：2022-02-18
胃蛋白酶（英文名称：Pepsin）是一种消化性蛋白酶，由胃部中胃粘膜主细胞所分泌，功能是将食物中的蛋白质分解为小的肽片段。主细胞分泌的是胃蛋白原，胃蛋白酶原经胃酸或者胃蛋白酶刺激后形成胃蛋白酶，胃蛋白酶不是由细胞直接生成的。 胃蛋白酶的提取方法： 1.胃蛋白酶源主要存在于胃粘膜底部，采集原料时剥取得粘膜直径大小与收率有关。一般取直径10cm、深2-3mm的胃基低部粘膜最适宜，每头猪胃平均剥取粘膜100g左右。 2.自溶、过滤：在夹套锅内预先加水100升及盐酸3.6-4升，加热至50度时，搅拌下加入200千克猪胃粘膜，快速搅拌使酸度均匀，保持45-48度，消化3-4小时，得自溶液。 3.脱脂、去杂质：将滤液降温至30度以下，加入15-20%氯仿或乙醚，搅匀转入沉淀脱脂器内，静置24-48小时，使杂质沉淀，分出弃去，得到脱脂酶液。 4.浓缩、干燥：取清酶液，在40度以下减压浓度原体积的1/4左右，再将浓缩液真空干燥。球磨过80-100目筛，即可得到胃蛋白酶粉。
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硫鸟嘌呤合成工艺
作者：德尔塔 日期：2022-02-18
硫鸟嘌呤化学名为2-氨基嘌呤-6（H）硫酮，呈白色或微黄色粉末、有鲜味，易溶于水，难溶于乙醇、丙酮等有机溶剂，主要用于**急性白血病，对慢性粒细胞白血病也有一定疗效。 中文名称：硫鸟嘌呤; 中文别名：6-硫鸟嘌呤；2-氨基嘌呤-6(1H)-硫酮;2-氨基-6-巯基嘌呤;6-硫代鸟嘌呤;6-巯基鸟嘌呤; 英文名称：tioguanine 英文别名：6H-Purine-6-thione, 2-amino-1,7-dihydro-;tabloid;2-aminomercaptopurine;2-amino-9H-purine-6(1H)-thione;tioguanin;2-Amino-6-purinethiol;bw5071;2-Amino-6-mercaptopurine,2-Amino-6-purinethiol;Thioguanine;2-Amino-6-mercaptopurine;2-Amino-1H-purine-6(7H)-thione;6-Thioguanine;lanvis;6-tg;thio-guanin;6-thioguanidine;wellcomeu3b;THIOGUANINE;2-amino-1,7-dihydro-6H-purine-6-thione;2-AMINO-6-MERCAPTOPURINE;6-Mercaptoguanine; CAS号：154-42-7 分子式：C5H5N5S 分子量：167.19 生产编号：T21880 由鸟嘌呤经置换反应制得。将吡啶、盐酸鸟嘌呤及五硫化二磷加热回流16h后，常压回收吡啶至反应物呈粘稠状，再状压蒸馏至吡啶回收完。降温至70℃以下，缓缓加入约鸟嘌呤量20倍的水（仿止溢料），加完后继续搅拌半小时，冷却过液，过滤，水洗。将紫沉淀物投入工业氨水中，加活性炭，加热回流1h，趁热滤除活性炭，滤兴高采烈用盐酸调节pH至4，冷却结晶。过滤，再精制一次，得硫鸟嘌呤。
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细胞与组织核蛋白提取方法
作者：德尔塔 日期：2022-02-18
核蛋白指在细胞质内合成，然后运输到核内起作用的一类蛋白质。如各种组蛋白、DNA合成酶类，RNA转录和加工的酶类、各种起调控作用的蛋白因子等。核蛋白一般都含有特殊的氨基酸信号，起蛋白质定向、定位作用。 细胞和动物组织核蛋白的提取方法： 细胞蛋白提取： 1. 取5-10×106个细胞，在4℃，500×g条件下离心2-3分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。 2. 用冷PBS洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。 3. 每20ul细胞压积中加入200μl冷的Buffer A，2ul蛋白酶抑制剂混合物，高速涡旋振荡15秒，置冰上10分钟。 4. 再次高速涡旋振荡5秒，然后在4℃，16000×g条件下离心5分钟。 5. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到胞浆蛋白，请置于冰上或-80℃冰箱保存备用。 6. 在沉淀中加入200μl冷的Buffer B，2ul蛋白酶抑制剂混合物，高速涡旋振荡15秒。 7. 置冰上40分钟，每隔10分钟高速涡旋振荡15秒。 8. 在4℃，16000×g条件下离心10分钟。 9. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到核蛋白。 组织蛋白提取： 1. 取适量组织样本剪碎，加冷PBS，用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体（或用液氮研磨），冰上静置5分钟，小心将上清吸入另一预冷的干净离心管。 2. 在4℃，500×g条件下离心2-3分钟，弃上清。 3. 每20ul细胞压积中加入200μl冷的Buffer A，2ul蛋白酶抑制剂混合物，高速涡旋振荡15秒，置冰上10分钟。 4. 再次高速涡旋振荡5秒，然后在4℃，16000×g条件下离心5分钟。 5. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到胞浆蛋白，请置于冰上或-80℃冰箱保存备用。 6. 在沉淀中加入200μl冷的Buffer B，2ul蛋白酶抑制剂混合物，高速涡旋振荡15秒。 7. 置冰上40分钟，每隔10分钟高速涡旋振荡15秒。 8. 在4℃，16000×g条件下离心10分钟。 9. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到核蛋白。 蛋白提取物请分装后于-80℃冰箱保存备用。 吉至试剂核蛋白提取试剂盒操作简单、方便，从培养细胞或新鲜组织中提核
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透析袋保存和使用
作者：德尔塔 日期：2022-02-18
透析袋使用前： 1.将整条透析袋剪成适当长度（10-20cm）的小段。 2.在体积的2%（m/v)碳酸氢钠和1mmol/LEDTA(PH=8)中将透析袋煮沸10min。 3.将透析袋用蒸馏水彻底漂洗。 4.将透析袋置500ml 1mmol/L EDTA(PH=8)中煮沸10min。 5.透析袋冷却后放在30%或者50%的酒精中、存放于4度冰箱中，应确保透析袋始终浸没在液体中。 从此时起用透析袋时一定要戴手套操作。 6.在使用之前要用蒸馏水将透析袋里外加以清洗。 透析袋使用操作： 1.一端用橡皮筋或线绳扎紧，也可以使用透析袋夹夹紧。 2.由另一端灌满水，用手指稍加压，检查不漏，方可装入待透析液。 3.通常要留三分之一至一半的空间，以防透析过程中，透析的小分子量较大时，袋外的水和缓冲液过量进入袋内将袋涨破。 4.含盐量很高的蛋白质溶液透析过夜时，体积增加50％是正常的。 5.为了加快透析速度，除多次更换透析液外，还可使用磁子搅拌。 6.透析的容器要大一些，可以使用大烧杯、大量筒和塑料桶。 7.小量体积溶液的透析，可在袋内放一截两头烧园的玻璃棒或两端封口的玻璃管，以使透析袋沉入液面以下。 透析袋使用后如何保存： 1.使用生理盐水浸泡除去蛋白，并用蒸馏水清洗干净，置于50%的乙醇中即可保存即可。 2.用完后，要彻底洗干净，透析袋可保存在0.1%叠氮钠（可防止微生物生长） 3.使用后的透析袋洗净后可存于4度蒸馏水或者30%乙醇中，确保透析袋始终浸没在溶液内。长时间不用，可加少量的NaN2,防止长菌。从此时起取用透析袋必须戴手套，洗净晾干的透析袋弯折易裂，用时仔细检查，不漏方可使用。
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线粒体提取试剂盒使用注意事项
作者：德尔塔 日期：2022-02-18
线粒体提取试剂盒用于动物细胞或组织中分离出完整而纯化的线粒体。适合用于动物软组织和硬组织及培养细胞的线粒体的制备。其制备物产量高，可用于细胞凋亡、信号传递、代谢和蛋白组织学研究。产品不含污染性蛋白酶和核酶，即到既用性能稳定。 核线粒体的分离原理: 1.通过机械方法破裂细胞。 2.通过低速差速离心去除残渣碎屑和巨大细胞。 3.通过高速差速离心获得线粒体。 使用注意事项： 1.全程低温操作，将样品管放在冰水浴而不是碎冰中。 2.快速、微量制备比大规模制备操作更方便快捷，因而更容易获得完整的线粒体。 3.在不破坏亚细胞器的情况下、破碎细胞是制备线粒体的最关键环节。与组织块相比，培养细胞特别是贴壁培养细胞在用玻璃均浆时较难破壁，因而要选小容量、玻璃均浆器，间隙严密的研杵上下研磨培养细胞。在相差显微镜下检查未裂解细胞应在50%左右。研磨过度将破坏线粒体。研磨不足会降低得率。 4.离心力g计算正确的离心速度，不同离心机可依据此精确计算离心速度。 5.进行Western Blot和2D-胶电泳，可直接加入样品缓冲液裂解线粒体。
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卵清蛋白如何提取
作者：德尔塔 日期：2022-02-18
蛋清中的主要蛋白质包括卵清蛋白、卵转铁球蛋白、类卵沾蛋白、卵沾蛋白、溶菌酶、球蛋白G2、球蛋白G3等。卵清蛋白等电点4.5，其本质是含磷糖蛋白。卵清蛋白是蛋清中的主要蛋白组分。 卵清蛋白是一种优质蛋白质，占蛋清蛋白总量的 54%-69%，卵清蛋白是典型的球蛋白，分子量为 44.5k Da，属含磷糖蛋白，有四个自由巯基、385 个氨基酸残基。这些氨基酸残基相互缠绕折叠形成具有高度二级结构的球型结构，大部分为α-螺旋和β-折叠。卵清蛋白中心有 1 个二硫键和 4 个巯基，当加热时暴露出来，通过分子间相互作用使卵清蛋白胶体结构变得更稳定。 操作步骤： 1，取新鲜鸡蛋两只，得蛋清50ml，置于烧杯中放置在25℃－30℃的水中，不断搅拌条件下，缓慢加入等体积得三氯乙酸－丙酮（1:2V/V），立即出现大量白色絮状沉淀，加完后最终PH约3.5，继续搅拌30min，然后在4℃冰箱中放置过夜。 2,次日用漏斗抽滤，得黄绿色清液。 3，边搅拌边加入4℃预冷的丙酮200ml沉淀蛋白，在4℃放置2h之后将上清液小心倒入瓶中回收，下部沉淀部分于4000rpm离心5min，收集沉淀。 4，将沉淀溶于10ml无离子水中，对无离子水（50倍）透析4h，换水两次，再对碳酸钠缓冲液透析过夜，4000rpm离心10min ,去除不溶物。
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果胶的提取与储存
作者：德尔塔 日期：2022-02-18
果胶存在于植物中的一种酸性多糖的物质。一般是以粉末状态存在、颜色为淡黄色、稍微有些酸酸的味道，水溶性较好、被广泛用于食品、医药、日化及纺织等行业。 果胶提取： 1、选取如柑桔、柚子、柠檬、苹果、梨、山楂等水果的，果皮果芯以及榨汁后的果渣。 2、原料中含的果糖甙、芳香物质、色素、酸类和盐类等成分在提取果胶前需要漂洗干净，以免影响果胶品质及胶凝力。柑桔类果皮首先提取精油，然后经搅碎、再用95℃--98℃蒸汽加热10分钟。以破坏果胶、避免果胶水解降低胶凝力。这种处理可与回收残余精油同时进行。 3、果胶的抽提包括原果胶的水解与果胶的溶出两个过程。在整个过程中要掌握好时间和温度、时间和温度。温度高、则需时较短，温度低、则需要时间长。需要较高的温度或者多次抽取才能提净果胶。 提取时，将搅碎的原料倒入抽提锅内，加4倍水、加亚硫酸调节PH值至1.8~2.7,、通入蒸汽，边搅拌边加热到95℃，保持45~60分钟、即可抽取大部分果胶。 果胶液的浓缩与储存： 将过滤清的果胶液送入真空浓缩锅中，保持真空667毫米汞柱以上，沸点50℃左右，浓缩至总固体达到7%~9%为止。浓缩毕，即将果胶液加热至70℃,装入玻璃瓶中，加盖密封，置于70℃热水中加热30分钟杀菌，冷却、送入仓库，或将果胶液装入木桶中，加0.2%亚硫酸氢钠搅拌均匀，密封储存。
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瑞氏染液染色过程
作者：德尔塔 日期：2022-02-18
瑞氏染色是目前最常用而又最简单的染色方法。瑞氏试剂中之酸性伊红和碱性美蓝混合经化学作用后，变成中性之 伊红化美蓝，久置后，经氧化而含有天青。此三种染料分别和细胞核及浆中的NH3+和COO-等结合，使细胞核及胞浆着色。由于系中性染料，又有缓冲液调节酸碱度，所以细胞受染后，蓝红等颜色都较适中，核染质、胞浆及其中之颗粒显色较为清楚。 瑞氏染色分两相进行，第一相是酸性染料伊红与细胞中的碱性物质如血红蛋白、嗜酸性颗粒等结合；碱性染料天青B与细胞中的酸性物质如核染色质（chro－matin）、特异中性颗粒、血小板及富含核蛋白的胞质结合。第二相是天青B和伊红在适宜条件下形成紫色的天青B一伊红复合物（azure B－eosin complex），这种复合物是形成Romanowsky－Giemsa效应的基础。 Romanowsky－Giemsa效应包括： 1.白细胞核染色质染成紫色，疟原虫的染色质染成红色； 2.中性粒细胞的颗粒及血小板颗粒区染成紫色； 3.产生本效应必须有两种染料参与，一种是天青B、另一种是伊红。 天青B与DNA分子中的磷酸基结合，而伊红既与DNA分子中的阳离子部位结合，又与天青B结合，与天青B的结合力来源于电子供一受体的电子转移力，天青B的甲氨基（－NHCHs）与伊红分子中的叛基（－COOH）间形成氢键。因此，天青B是噻嗪类染料中能与伊红形成复合物的最佳选择，因为拥有四个甲基侧链的亚甲蓝不能以氢键与伊红结合。 甲醇除作为染料的溶剂，能将瑞氏染料解离成带正电荷的天青B和带负电荷伊红外，因其具有脱水力，还可将细胞固定为一定形态，并使蛋白沉淀为颗粒状、网状结构，增加细胞与染料的接触表面，增强染色效果。 细胞中的各种有机物质（特别是蛋白质）、染料等对环境的州值非常敏感。如环境偏酸，氢离子增多，降低对碱性染料的亲和力；增强伊红着色，出现异常红染；相反，则可出现异常蓝染。最佳环境应维持在PH值6 4～6、8，必须使用缓冲溶液。
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氯化铵制作生产
作者：德尔塔 日期：2022-02-18
氯化铵主要用于干电池、蓄电池、铵盐、鞣革、电镀、精密铸造、医药、照相、电极、粘合剂、酵母菌的养料和面团改进剂等。 氯化铵简称“氯铵”，又称卤砂，是一种速效氮素化学肥料，含氮量为24%～25%，属生理酸性肥料。它适用于小麦、水稻、玉米、油菜等作物，尤其对棉麻类作物有增强纤维韧性和拉力并提高品质之功效。但是，由于氯化铵的性质决定并如果施用不对路，往往会给土壤和农作物带来一些不良影响。 生产制作方法： 重结晶法：将粗品氯化铵加入溶解器，通人蒸汽溶解，经过滤，将滤液冷却结晶、离心分离、干燥，制得工业氯化铵成品。离心分离的母液返回溶解器使用； 复分解法：首先将氯化铵母液加入反应器中加热至105℃后，加入硫酸铵和食盐，于117℃进行复分解反应，生成氯化铵溶液和硫酸钠结晶，经过滤分离除去硫酸钠，将氯化铵饱和溶液送至冷却结晶器，冷却至32～35℃析出结晶，过滤，把结晶分别用4种不同浓度的氯化铵溶液进行淋洗，控制Fe
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ATP含量检测试剂盒介绍
作者：德尔塔 日期：2022-02-18
ATP检测试剂盒(ATP Assay Kit)可以用于检测普通溶液、细胞或组织内的ATP(adenosine 5'-triphosphate)水平。细胞和组织样品一步裂解即可完成样品制备，检测灵敏度高达1nmol/L，化学发光可以持续稳定达30分钟，并且获得的样品还可以同时进行Western检测。 ATP、作为最重要的能量分子在细胞的各种生理、病理过程中起着重要作用。ATP水平的改变、会影响细胞的功能，通常细胞在凋亡、坏死或处于一些毒性状态下，ATP水平会下降，而高葡萄糖刺激等对于一些细胞可以上调细胞内ATP水平。通常ATP水平的下降表明线粒体的功能受损或下降，在细胞凋亡时ATP水平的下降通常和线粒体的膜电位下降同时发生。 样品制备非常简单。本试剂盒提供了可以用于细胞和组织裂解的ATP检测裂解液，简单裂解后即可用于ATP检测。无需进行高氯酸或三氯乙酸(TCA)抽提，或样品裂解后的煮沸等繁琐操作。 本试剂盒根据萤火虫荧光素酶(firefly luciferase)催化荧光素产生荧光时需要ATP提供能量研制而成。 当萤火虫荧光素酶和荧光素都过量时，在一定的浓度范围内荧光的产生和ATP的浓度成正比。这样就可以高灵敏地检测溶液中的ATP浓度。本试剂盒在样品体积为100微升时可以检测浓度低达1nmol/L的ATP。而常规的细胞或组织裂解液中ATP的浓度仅为0.1-1μmol/L，一些常见细胞的细胞内ATP水平约为10nmol/mg蛋白。并且本试剂盒的检测浓度范围非常大，检测上限可以高达10μmol/L，并在5nmol/L-10μmol/L范围内可以形成良好的标准曲线。 本试剂盒进行了特殊的优化设计，使检测ATP时的化学发光非常稳定。对于ATP标准曲线的检测结果显示，在开始反应后10分钟内化学发光无明显下降，开始反应后30分钟内化学发光的下降不超过10%。 使用本试剂盒中的ATP检测裂解液裂解获得的细胞或组织样品，不仅可以用于ATP检测，还可用于检测蛋白浓度、进行SDS-PAGE或一些常规的较易溶解蛋白的Western检测。 本试剂盒的使用方便快捷，通常10-20个样品可以在30-60分钟内测定完毕。 上
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