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糖尿病或由骨骼变化诱发

糖尿病或由骨骼变化诱发

作者:德尔塔 日期:2022-04-01

科研人员的研究成果表明,骨骼具有控制血糖的作用,而且骨骼发生变化可能成为导致糖尿病的潜在诱因。研究发现了一种来源于骨骼、名为骨钙素的激素的功能,以及这种激素与胰岛素之间的。    研究小组曾在之前的研究中指出,骨钙素能够调节血糖水平。这种激素能够“激发”胰腺生成胰岛素,而这有利于提高其他细胞吸收血糖的能力。但是新的研究发现,只有骨骼在自然形成过程中发生分解的时候,骨钙素才能发挥作用。    研究人员通过实验鼠实验获得的研究成果表明,衰老骨骼的分解在促进新生骨骼形成的同时,也有助于血糖保持正常水平。科学家表示,发挥作用的就是骨钙素。他们认为这一发现将有助于找到对付II型糖尿病这一性疾病的更好**方法。研究人员在人体实验中测量了一组具有骨骼遗传缺陷的患者的骨钙素和血糖水平,zui终印证了在实验鼠身上获得的研究结果。    II型糖尿病是一种常见疾病。如果人体无法分泌足够的胰岛素或对胰岛素作出响应,并且无法控制血糖水平,就可能罹患糖尿病。此项研究对骨质疏松和糖尿病患者都具有重要意义。首先,此项研究表明骨钙素与糖尿病有关。其次,骨骼可能成为**II型糖尿病的新目标,因为其形成过程似乎有助于控制血糖。    此项研究表明,某些人的糖尿病可能是由骨骼发生变化诱发的。而这一信息可能有助于研发能够刺激骨钙素和胰岛素产生的药物。研究人员还表示,这一发现可能还意味着,某些用于**骨质疏松的壮骨药物可能会对这一过程产生干扰,并且导致血糖出现问题。

蛋白CELISA检测试剂盒实验18条通用规则

蛋白CELISA检测试剂盒实验18条通用规则

作者:德尔塔 日期:2022-04-01

蛋白CELISA检测试剂盒实验18条通用规则 1、要保证移液枪的准确性,误差不能超过2%。可用水和电子天平进行确定。但有专业人员进行矫正。 2、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后,要更换枪头。即使是吸取标准品时。 3、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都恢复到室温,以使结果更稳定。 4、实验时,要使底物避光保存。 5、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。 6、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。 7、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。 8、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。 9、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。 10、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加彻底。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。 11、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。 12、底物是光敏感的,要在临用前现配。 13、检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上。 14、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。 15、待检样品要澄清,否则会影响结果。 16、温浴时间应遵守试剂盒规定。 17、应尽量做双孔实验,这样才能保证数据的准确性。 18、对结果有疑问的样品要用其它方法进行确证。 蛋白CELISA检测试剂盒小鼠晚期糖基化终末产物(AGEs)ELISA试剂盒    ,英文名:    AGEs ELISA Kit 小鼠脱氧胶原吡啶交联(DPD)ELISA试剂盒    ,英文名:    DPD ELISA Kit 小鼠脱氧吡啶酚/脱氧吡啶啉(DPD)ELISA试剂盒    ,英文名:    DPD ELISA Kit 小鼠脱氢表雄酮硫酸酯(DHEA-S)ELISA试剂盒    ,英文名:    DHEA-S ELISA Kit 小鼠脱氢表雄酮S7(DHEA-S7)ELISA试剂盒    ,英文名

ELISA固体样本处理方法,您知道吗?

ELISA固体样本处理方法,您知道吗?

作者:德尔塔 日期:2022-04-01

ELISA固体样本处理方法:    固体样本处理原则:称取1g的固体样本,用9g的合适缓冲液溶解,分泌蛋白可以直接离心取上清检测,细胞内的蛋白,要先收集细胞,再用合适方法破碎,离心取上清测试。 1、组织标本:切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。对于植物组织,不好匀浆的话,就用液氮研磨,将植物组织放在研钵中,加入适量液氮,充分研磨。 2、细胞内蛋白样本: 许多待测蛋白不是分泌蛋白,而是存在于细胞内的蛋白,这个时候,要先收集细胞,洗涤干净,再破碎细胞,离心取上清。 (1)培养的细胞 A、动物细胞:用PH7.2-7.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融(如果反复冻融,破碎效果不好,就采用超声波破碎),以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。 B、植物细胞:用PH7.2-7.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右,置于冰盒上,用超声破碎仪,设置破碎2s,冷却30s的方式,充分破碎细胞,以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。 (2)组织的细胞 切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),去除上清,再用pH7.2-7.4左右的PBS小心洗涤沉淀的细胞三遍。再用上述的细胞破碎方法破碎细胞。 3、土壤:称取1g土壤,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工将标本充分混匀。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试

冬季来临,您的ELISA试剂盒保温做好了吗?

冬季来临,您的ELISA试剂盒保温做好了吗?

作者:德尔塔 日期:2022-04-01

冬天人人都穿着大棉袄,戴着厚手套,做好了保暖措施,可是您购买的ELISA试剂盒的保温工作做好了呢?那就由上海恒远告诉您正确的ELISA试剂盒保温方法吧。 1. 为何要保温?   因为ELISA属固相免疫测定,抗原、抗体的结合只在固相表面上发生。这是一个逐步平衡的过程,因此需经扩散才能达到反应的终点。 2. 保温的方式有哪些咧?    除有的ELISA仪器附有特制的电热块外,一般均采用水浴:     ① 可将ELISA试板置于水浴箱中,ELISA板底应贴着水面,使温度迅速平衡。     ② 为避免蒸发,板上应加盖,也可用塑料贴封纸或保鲜膜覆盖板孔,此时可让反应板漂浮在水面上。     ③ 若用保温箱,应放在湿盒内,湿盒要选用传热性良好的材料如金属等,在盒底垫湿的纱布,zui后将ELISA板放在湿纱布上。     ④ 湿盒应先放在保温箱中预温至规定的温度,特别是在气温较低的时候更应如此。     ⑤ 无论是水浴还是湿盒温育,反应板均不宜叠放,以保证各板的温度都能迅速平衡。     ⑥ 室温温育的反应,操作时的室温应严格限制在规定的范围内,标准室温温度是指20~25℃,但具体操作时可根据说明书的要求控制温育。     ⑦ 室温温育时,只要平置于操作台上即可。     ⑧ 应注意温育的温度和时间应按规定力求准确。     ⑨ 为保证这一点,一个人操作时,一次不宜多于两块板同时测定。 3.实验中的回温平衡    在加样之前约半小时左右,把试剂盒从冰箱中取出,放置在室温下进行平衡,平衡到=用手握住试剂瓶感觉到不凉为止。如果时间匆忙的话也可以利用手握住试剂瓶进行快速回温。   上海恒远是国内的、的科研试剂供应单位,产品齐全,现货促销上海elisa试剂盒,培养基价格,标准品厂家,抗体等试剂产品。专业经销ELISA试剂盒多年,产品质量有保证,售后服务有=障!

血清蛋白之球蛋白的定义及作用

血清蛋白之球蛋白的定义及作用

作者:德尔塔 日期:2022-04-01

球蛋白是一种存在于人体中的血清蛋白,球蛋白是一种常见的蛋白,基本存在于所有的动植物体中。球蛋白具有免疫作用,因此也有人称球蛋白为免疫球蛋白。免疫系统遇到外来的入侵物时会根据入侵物的不同产生不同数量的球蛋白,如果入侵物比较难以消灭,免疫系统刺激淋巴以后就会产生更多的球蛋白直到入侵物被球蛋白消灭为止。球蛋白偏低一般不是很常见,球蛋白偏高一般比较常见,球蛋白偏低一般是生理性原因,例如营养不良,蛋白质摄入不足,又或者是人体对外来蛋白的吸收能力不好,贫血也会造成球蛋白偏低。球蛋白偏高则常用于肝病的确诊。    球蛋白含有健康人血清所具有的各种抗体,因而球蛋白有增强机体抵抗力的作用。其免疫作用主要用于病情性传染的防治,也可用于丙种球蛋白缺乏症。另外,对体质虚弱久病不愈、免疫功能低下或使用皮质激素等免疫抑制剂**者,在应用有效抗菌素的同时,加用丙种球蛋白有助于控制感染。

您的ELISA试剂盒实验失败的原因究竟是什么?

您的ELISA试剂盒实验失败的原因究竟是什么?

作者:德尔塔 日期:2022-04-01

现在的elisa试剂盒可谓鱼龙混杂,难辨好坏,因为具有灵敏度高、特异性强,操作方法简便快速、无放射性污染以及应用范围广等很多优点,已经被许多的科研朋友所应用,虽说是操作简便快速,但是稍稍的不注意,实验就可能会失败,今天,上海沪鼎来为您找找ELISA试剂盒实验失败的原因究竟是什么?操作注意: 1. 溶血标本及混有红细胞的血清采用ELISA法检测易产生假阳性。可能是溶血血清中含有过氧化酶物质(红细胞或血红蛋白中的亚铁血红素),在洗涤过程中往往难以完全洗脱,它可使H2O2释放出原生态氧(O),从而催化底物四甲基联苯胺生成可溶性的有色物质,即显蓝色,产生假阳性。所以严重溶血标本禁用。 2. 标本受细菌污染。因菌体中可能含有内源性辣根过氧化物酶,因此,被细菌污染的标本同溶血标本一样,亦可产生非特异性显色而干扰测定结果。 3. 标本保存不当。在冰箱中保存过久的标本,在间接法ELISA测定中会导致本底过深、造成假阳性;为克服上述干扰,ELISA试剂盒测定的血清标本宜为新鲜采集;如不能立即测定,5 d内测定的血清标本可存放于4℃,1周后测定的血清标本应低温冻存;冻存后融解的标本,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混合后再测定,但混匀时应轻柔,不可强烈振荡。    塑料试管能吸附抗原物质,样本久置在塑料管内会使样本内抗原含量下降造成假阴性。使用真空采血管;并使用非抗凝标本,肝素抗凝血浆会增加OD值,EDTA、酶抑制剂可抑制ELISA系统中辣根过氧化物酶活性。    标本凝固不全。 在工作中,有时为了争取时间快速检测,常在血液还未开始凝固时即强行离心分离血清,使血清中仍残留部分纤维蛋白原,在ELISA测定过程中可以形成肉眼可见的纤维蛋白块,易造成假阳性结果;因此血液标本采集后必须使其充分凝固后再分离血清。  上海沪鼎生物科技有限公司秉承“信誉、质量、品牌、诚信为本"的理念,以优良的服务质量和实惠的价格,ELISA试剂盒实验前,请仔细阅读中英文说明书,我们提供免费代测,实验过程

支原体快速检测试剂盒(细胞培养)

支原体快速检测试剂盒(细胞培养)

作者:德尔塔 日期:2022-04-01

《Quick Cell快速支原体检测试剂盒》主要用于检测细胞培养上清或别的液体样品(如血清)中是否含有支原体污染,该试剂盒仅用于基础科研。 哺乳动物细胞的培养,支原体(Mycoplasma)污染是个世界性的问题。支原体污染几乎可以改变细胞的所有参数,导致实验结果的不准确、甚至完全错误。从2013年开始,《Nature》期刊已正式要求投稿的文章,如涉及细胞培养都要进行支原体检测。本试剂盒可以检测:(1)M.Hyorhinis、(2)M.Fermentans、(3)M.Arginini、(4)M. hominis、(5)M. orale、(6)M. salivarium、(7)M.pirum、(8)Acholeplasma Laidlawii、(9)M. agalactiae、(10)M.bovis、(11)M. buccale、(12)M. arthritidis、(13)M. pulmonis等几乎所有常见的污染细胞的支原体(注:M.为Mycoplasma的缩写)。以上13种支原体约占细胞支原体污染的99%以上,本试剂盒产品全部可以检测。绝大多数支原体污染集中于前8种。注意:本试剂盒无法检测Ureaplasma Urealyticum支原体!Ureaplasma Urealyticum在支原体污染种极其罕见。 与PCR法检测支原体比较,本试剂盒产品优势优势显著: 比较内容 支原体检测PCR法 Quick Cell 快速支原体检测试剂盒 操作时间 3小时 1小时 是否需要样品处理 样品需预处理,DNA提取 无需样品处理,直接使用上清 灵敏度 灵敏度低 较PCR法提高1000倍 是否需要电泳 需要电泳及染色 不需电泳,目测结果 试剂盒组成 (1)溶液Ⅰ:1150 μL (50次检测) (2)溶液Ⅱ:50 μL(50次检测) (3)溶液Ⅲ:指示剂,50 μL(50次检测) (4)阳性支原体DNA:50 μL (5)矿物油:1500 μL 使用方法 1. 待测样品的准备:为了准确判断细胞是否有支原体的污染,待测的细胞培养液样品来源于至少培养三天且汇合度在70-90%左右的细胞培养上清(贴壁细胞),无需离心。悬浮培养的细胞也需要在换液传代后,至少让细胞生长3天再取培养液进行检测

菌种培养操作流程

菌种培养操作流程

作者:德尔塔 日期:2022-04-01

标准的菌种培养操作流程、放大试剂盒、第三类试剂、或改变酶底物系统可在一定范围内提高灵敏度。为了优化灵敏度,建议孵育标准品和标本。若使用过氧化物酶作为显色系统,应严禁在洗液和稀释液中加叠氮钠,叠氮钠可抑制过氧化物ELISA试剂盒酶的活性。(1)抗原或抗体能以物理性地吸附于固相载体表面,可能是蛋白和聚苯乙烯表面间的疏水性部分相互吸附,并保持其免疫学活性;(2)抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物,而此种酶结合物仍能保持其免疫学和酶学活性;(3)酶结合物与相应抗原或抗体结合后,可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反应的存在,而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的,因此,可以按底物显色的程度显示试验结果。法是免疫诊断中的一项新技术,现已成功地应用于多种病原微生物所引起的传染病、寄生虫病及非传染病等方面的免疫诊断。也已应用于大分子抗原和小分子,根据已经使用的结果,认为法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点。不仅适用于临床标本的检查,而且由于一天之内可以检查几百甚至上千份标本,因此,菌种培养也适合于血清流行病学调查。含量测定    100mg    100751-200501    磷酸哌喹 含量测定    100mg    100752-200801    西沙必利    100mg    100753-    瑞格列奈HPLC法含量测定    100mg    100754-201003    盐酸伐昔洛韦含量测定    100mg    100755-200401    阿佐塞米含量测定    100mg    100757-200501    盐酸尼莫司汀    30mg    100758-    L-那格列奈    30mg    100759-    顺式那格列奈含量测定    100mg    100760-200501    奥美拉唑钠菌种培养

ELISA试剂盒技术经验总结出的严格注意(供参考)

ELISA试剂盒技术经验总结出的严格注意(供参考)

作者:德尔塔 日期:2022-04-01

根据我公司进口ELISA试剂盒实验技术部多年的经验以及客户们的咨询问题总结,整理分析出了几个需要严格注意的方面,实验者们随上海恒远来看一看吧(供参考)。    1. 读板时板底不清洁:难免洗板后板底有水渍,这也可能导致读数不准。  2. 温育温度的选择         说明书表明的温度可有两种(①37℃下1小时、②43℃下45分钟),从免疫测定的抗原抗体反应的本质来看,在较低的温度下反应较长的时间zui为完全。上海德尔塔生物建议在临床ELISA测定中尽量使用较低温育温度较长反应时间的条件。        3. 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉:曾用洗瓶直接冲洗板。后来虽然也用枪逐孔洗板,但对此注意不够。  4. 加终止液时应避免产生气泡:终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。  5. 加样板过多、加样速度慢,造成各孔反应时间不均一:但温度高时,加样时间过长将导致各孔时间的反应时间不均一;还使得孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗彻底。如果连续做好几块板,则有可能使某些板不能及时洗板,也导致孵育时间人为延长。       我公司拥有完善的售前、售中、售后服务,以及实验技术指导服务,欢迎您上海恒远进口ELISA试剂盒,第四季度八五折优惠,可为您节省时间提供免费代测服务。

大鼠ELISA试剂盒使用方法

大鼠ELISA试剂盒使用方法

作者:德尔塔 日期:2022-04-01

大鼠ELISA试剂盒临床测定技术的发展主要在于方法学的发展,而方法学的发展依托于试剂生产技术不断进步更新和型标记物的应用。目前,分子生物学正在并zui终肯定会让我们对整个生命科学有一个全面而彻底的认识,其对免疫测定技术发展的影响也是直接而又有效的,它使我们对以前一些难以检测的生物活性物质的测定变得轻而易举,并且大大提高了检测的灵敏度和特异性。 使用方法 1、 血清:操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。 2、 血浆:EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。ELISA试剂盒1000×g离心30分钟去除颗粒。 3、 细胞上清液:1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。 4、 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液。 5、 保存:如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 包括以下步骤: 1)抗原表位的计算机筛选; 2)抗原的制备; 3)血清的采集; 4)间接ELISA方法的建立; 5)间接ELISA方法的敏感性和特异性验证; 6)试剂盒的稳定性验证; 7)对屠宰场进行临床检测。该方法简单、快速、灵敏度高、特异性强、稳定性合格、重复性好。应用本发明制得的试剂盒能有效检出感染猪的戊型肝炎病毒,适用于大批量发病样本的检测,可用于猪戊肝的快速诊断,并预防、控制猪戊肝病毒的流行和阻断戊肝病毒由猪向人传播。 大鼠ELISA试剂盒Human Retinol binding protein,RBP ELISA试剂盒    人视黄醇结合蛋白(RBP)ELISA试剂盒    规格:    96T/48T Human ReverseTri-iodothyronine,rT3 ELISA试剂盒    人反三碘甲状腺原氨酸(rT3)ELISA试剂盒     规格:    96T/48T Human rheumatoid arthritis associated nuclear artigen,RANA ELISA试剂盒    人抗类风湿

梅毒血清试验的检查过程

梅毒血清试验的检查过程

作者:德尔塔 日期:2022-04-01

根据所用抗原不同,梅毒血清试验分为以下两大类: (一) 非梅毒螺旋体抗原血清试验,用心磷脂作抗原,测定血清中抗心磷脂抗体,亦称反应素。本试验敏感性高而特异性较低,且易发生生物学假阳性。早期梅毒患者经充分**后,反应素可以消失,早期未经**者到晚期,部分病人中反应素也可以减少或消失。目前一般作为筛选和定量试验,观察疗效,复发及再感染。 1、性病研究实验室试验(Venereal Disease Research Laboratory test,VDRL);用心磷脂、卵磷脂及胆固醇为抗原,可作定量及定性试验,试剂及对照血清已标准化,费用低。此法常用,操作简单,需用显微镜读取结果,缺点是一期梅毒敏感性不高。 2、快速血浆反应素试验(Rapid Plasma reagin test, RPR):是VDRL抗原的改良,敏感性及特异性与VDRL相似,优点是肉眼即可读出结果。 3、不加热血清反应素玻片试验(Unheated Serum Reagin USR)也是VDRL抗原的改良,敏感性及特异性与VDRL相似。 (二) 梅毒螺旋体抗原血清试验:用活的或死的梅毒螺旋体或其成分来作抗原测定抗螺旋体抗体。这种试验敏感性和特异性均高,一般用作证实试验。这种试验是检测血清中抗梅毒螺旋体IgG抗体,即使患者经过足够**,仍能长期存在,甚至终身不消失,血清反应仍持续存在阳性,因此,不能用于观察疗效。 1、荧光梅毒螺旋抗体吸收试验(FTA-ABS Test):此法是较敏感和较特异的螺旋体试验。 2、梅毒螺旋体血凝试验(TPHA):敏感性和特异性均高,操作简便,但对一期梅毒不如FTA-ABS试验敏感。 3、梅毒螺旋体制动试验(Treponema Pallidum immobilization ,TPI),用Nichol株螺旋体(活的)加病人血清(含抗体)后,在补体的参与下可抑制螺旋体的活动。如≥50%梅毒螺旋体停止活动,则为阳性。此试验特异性、敏感性均高,但设备要求高,操作难,仅供研究用。 注意事项 检查前禁忌:注意正常的生活饮食习惯,注意个人卫生。禁止不洁性交。 检查时要求:积极配合医生。 我司本着客户至上的原则为客户提

免疫金银染色(IGSS)操作流程

免疫金银染色(IGSS)操作流程

作者:德尔塔 日期:2022-04-01

一、基本原理     免胶体金检测技术是用金属离子和金属蛋白复合物应用免疫组化原理检测组织内抗原抗体的技术,常用胶体金(铁、汞等)重金属离子。由于胶体金容易制成各种大小的颗粒且有很高的电子密度及分辨率,又不影响抗体的活性,因此既可用于免疫组化又适于免疫电镜技术。 二、操作步骤 1、石蜡切片IGSS     (1)切片脱蜡至水。     (2)0.1%胰蛋白酶37℃消化20min或抗原修复20min(98℃),自然冷却至室温。     (3)0.05mol/L(pH7.4)TBS洗3×3min。     (4)l%EA(卵蛋白)15min,不洗。     (5)适当稀释的特异抗体室温4h或4℃孵育20h,或37℃孵育1h。     (6)0.05m01/L(pH7.4)TBS洗3×5min。     (7)0.02m01/L(pH7.4)TBS(内含0.1%BSA)洗10min。     (8)1%EA 15min,不洗,1:10~1:20稀释的PAGlonm室温孵育1h,或37℃孵育30min。     (9)0.05mol/L(pH7.4)TBS洗10min。     (10)1%戊二醛洗10min。     (11)双蒸水洗5min。     (12)1%明胶洗5min。     (13)银避光显影8~15min。     (14)双蒸水洗15min。     (15)固定:用显影定影液(1:4或1:10)固定5min,也可以用15%硫酸钠-20%硫代硫酸钠混合液固定1~3min,或用1%戊二醛固定5min,50℃温水洗3~6min。     (16)衬染,核固红衬染3min或甲基绿衬染3min。     (17)常规脱水,二甲苯透明,常规树胶封片。     (18)镜检:阳性物质呈黑色或黑褐色,颗粒分布于抗原—抗体反应部位;背景较干净,呈红色。 2、冰冻切片IGSS      做冰冻切片的组织可先经过固定再作切片,也可先制作冰冻切片,然后再固定。这要根据保存抗原的需要而定,固定过的组织可用含20%蔗糖的PBS(0.1mol/L,pH7.4)浸泡过夜,使切片减少冰结晶,保持组织细胞良好的形态结构。切片人0.05mol/L(pH7.4)TBS洗3×3min,染色步骤同石蜡切片。

为何细胞培养中要用到胎牛血清?

为何细胞培养中要用到胎牛血清?

作者:德尔塔 日期:2022-04-01

对于研究细胞的科学人士来说,血清都不会陌生,其中胎牛血清是实验操作的常客。一般而言,胎牛血清是指怀孕5-8个月的母牛被屠宰后,发育未完全的胎牛心脏穿刺采血后,通过一系列工艺处理zui终获得。此时胎牛血中含有特殊的生长发育因子,一旦胚胎发育完全这些因子自动消失。 胎牛血清的作用 胎牛血清具有极为重要的作用,其包括: 1.提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。 2.提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调变它们所结合的物质活力。 3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。 4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。 5.起酸碱度缓冲液作用。 6.提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。 胎牛血清是品质的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分zui少。 选择*的胎牛血清 WHO公布的《用动物细胞体外培养生产生物制品规程》中的要求: 1. 牛血清必须来自有文件证明无牛海绵状脑病的牛群或国家,并应具备适当的监测系统。 2.有些国家还要求牛血清来自未用过反刍动物蛋白饲料的牛群。 3. 证明所用牛血清中不含对所生产疫苗病毒的抑制物。 4. 血清要通过滤膜过滤除菌,保证无菌。 5. 无细菌、霉菌、支原体和病毒的污染,有些国家要求无细菌噬菌体污染。 6. 对细胞有良好的支持繁殖作用。 《中国生物制品主要原辅料质控标准》2000年版 我国对牛血清的质量中提出比较严格的标准要求: 包括蛋白质含量,细菌、真菌、支原体、牛病毒、大肠杆菌噬菌体、细菌内毒素,支持细胞增殖检查。一款来自澳洲的Ausbian胎牛血清在市场上颇受欢迎。它具有精选内毒素极低、产量大于1600瓶(500毫升)的血清批次,满足干细胞、基因敲除、原代培养、细胞典藏、长期传代等各类细胞的培养要求;完整的检测报告及灭病毒服务,为各类临床相关

糖化血清蛋白测定试剂盒用途及组成

糖化血清蛋白测定试剂盒用途及组成

作者:德尔塔 日期:2022-04-01

糖化血清蛋白测定试剂盒测定用途:用于全自动法测定糖化血清蛋白含量。血清蛋白半衰期较短,测定糖化血清蛋白浓度可有效反应患者过去1-3周的平均血糖的水平,并不受临时血糖浓度波动的影响,为临床糖尿病人的诊断和较长时间血糖控制水平的研究提供一个很好的指标。测定原理:糖化血清蛋白在碱性条件下与硝基四氮唑蓝生成紫红色化合物,其颜色深浅与糖化血清蛋白含量成正比,比较后可求得糖化血清蛋白含量。糖化血清蛋白测定试剂盒组成:1.碳酸钠缓冲液与硝基四氮唑蓝生(液体双试剂。试剂I:试剂II=3:1)2.糖化血清蛋白与稳定剂(冻与1ml)3.糖化血清蛋白与稳定剂(冻与1ml)样本要求:血清或血浆均应不溶于血,建议采用肝素抗凝血浆样本。样本采集后,应尽快分离血清和血浆,样本置于2-8℃可稳定14天,室温可稳定3天。

抗原与抗体对ELISA试剂盒影响因素

抗原与抗体对ELISA试剂盒影响因素

作者:德尔塔 日期:2022-04-01

ELISA试剂盒是一种免疫测定。一个抗原分子可带有不同的决定簇。在免疫测定中,抗原是指能与抗体结合的物质。在检修中主要通过抗原抗体反应检测体液中的抗体或抗原性物质。抗原的反应性取决于抗原决定簇(antigenic determinant),或称为表位(epitope)。免疫测定(immunoassay,IA)是应用免疫学技术测定标本的方法。  ELISA试剂盒抗原是能在机体中引起特异性免疫应答的物质。小分子化合物在与大分子蛋白质结合后能引起机体产生特异性抗体的,称为半抗原(hapten)。抗原进入机体后,可刺激机体产生抗体和引起细胞免疫。例如某些激素、药物等。能在机体中引起抗体产生的抗原多为分子量大于5000的蛋白质。ELISA试剂盒是一种免疫测定。一个抗原分子可带有不同的决定簇。  ELISA试剂盒如将多种抗原或含有多个抗原决定簇的抗原注入机体,则将由多系的B细胞产生相应的多种抗体,这些抗体均存在于免疫血清中。含有抗体的血清称为抗血清。免疫测定中所用的抗血清一般用抗原免疫兔、羊或马制得。将免疫的脾细胞(含产生抗体的B细胞)与小鼠肿瘤细胞融合,分离杂交瘤细胞,接种于小鼠腹腔,产生的腹水中含有浓度很高的单克隆抗体。