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操作ELISA试剂盒时,实验室需求留意这几点
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
实验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制实验条件,待检样品应作一式二份,以确保实验作用的准确性。有时本底较高,阐明有非特异性反应,可选用羊血清、兔血清或BSA等封闭。在ELISA试剂盒当中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其间包含: 1. 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其方法可所以凹孔平板、试管、珠粒等。现在常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在运用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,调查其显色反应是否均一性,据此判明其吸附功能是否良好。 2. 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体外表时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有必定影响,一般多选用4℃18~24小时。蛋白质包被的zui适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它实验条件相一同,调查阳性标本的OD值。选择OD值zui大而蛋白量zui少的浓度。关于多数蛋白质来说一般为1~10μg/ml。 3. 酶符号抗体作业浓度的选择:首先用直接ELISA法进行开始效价的滴定(见酶符号抗体部份)。然后再固定其它条件或采纳“方阵法”(包被物、待检样品的参阅品及酶符号抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其作业浓度。 4. 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体有潜在的致癌作用,应留意防护。有条件者应运用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是现在较为满意的供氢体。ELISA试剂盒底物作用一段时间后,应参与强酸或强碱以停止反应。一般底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物运用液有必要新鲜配制,尤其是H2O2在临用前参与。本公司主营的产品有elisa试剂盒、生化试剂盒、抗体、重组蛋白、标准品、对照品、培养基、血清、酶、实验耗材、进口试剂及实验外包服务等。提供各种抗体、免疫学相关的检测
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MS培养基使用注意事项,及特点分析方案
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
MS是人名Murashige and Skoog的缩写。MS培养基是Murashige和Skoog于1962年为烟草细胞培养设计的,其特点是无机盐和离子浓度较高,是较稳定的离子平衡溶液,它的硝酸盐含量高,其养分的数量和比例合适,能满足植物细胞的营养和生理需要,因而适用范围比较广,多数植物组织培养快速繁殖用它作为培养基的基本培养基。 基于此,这种培养基就用他们的名字来命名了。 MS培养基是目前使用zui普遍的培养基。其具有较高的无机盐浓度,能够保证组织生长所需的矿质营养还能加速愈伤组织的生长。由于配方中的离子浓度高,在配制、贮存和消毒等过程中,即使有些成分略有出入,也不会影响离子间的平衡。MS固体培养基可用于诱导愈伤组织,也可用于胚、茎段、茎尖及花药的培养,其液体培养基用于细胞悬浮培养时能获得明显的成功。MS培养基的无机养分的数量和比例比较合适,足以满足植物细胞在营养上和生理上的需要。因此,一般情况下,不用再添加氨基酸、酪蛋白水解物、酵母提取物及椰子汁等有机附加成分。和其它培养基的基本成分相比,MS培养基中的硝酸盐、钾和铵的含量高,这是它的显著特点。 MS培养基配方表: 注意事项: 1.母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是:每种母液中的几种成分称量完毕后,分别用少量的蒸馏水彻底溶解,然后再将它们混溶,zui后定容到1 L。 2.母液Ⅲ的配制方法是:将称好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分别放到450 mL蒸馏水中,边加热边不断搅拌使它们溶解,然后将两种溶液混合,并将pH调至5.5,zui后定容到1 L,保存在棕色玻璃瓶中。 3.MS培养基中还需要加入2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、萘乙酸(NAA)、6 苄基嘌呤(6BA)等植物生长调节物质,并且分别配成母液(0 1 mg/mL)。其配制方法是:分别称取这3种物质各10 mg,将2,4-D和NAA用少量(1 mL)无水乙醇预溶,将6BA用少量(1 mL)的物质的量浓度为0.1 mol/L的NaOH溶液溶解,溶解过程需要水浴加热,zui后分别定容至100 mL,即得质量浓度为0 1 mg/mL的母液
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血清在细胞培养中常见问题
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
⚑ 正常情况下,融化后血清的外观颜色应该是? 血清为动物来源,成分复杂,不同批次间会存在一些外观上的差别。一般情况下,它们的颜色可能是金黄色、红色、琥珀棕色或者是介于三者之间。 ⚑ 血清应如何保存? 未拆封的血清应存放于-15至-20℃,避免反复冻融。拆封后的血清应无菌分装成一次的用量并存放于-15至-20℃,在产品质量证书标识的效期内均可使用。2-8℃溶解后建议尽快使用。 ⚑ 血清的有效期是多久? 大部分康宁血清效期是5年,针对每个批次,请通过质检文件确定具体效期日期。 ⚑ 血清应如何融解? 从冰箱中取出血清,放于2-8℃融化,融化过程中不时旋转(swirling mix)混匀。充分融解后分装或平衡到室温后使用 ⚑ 为什么有时血清中出现絮状沉淀?是否需要去除?如何去除? 多种原因可能导致絮状沉淀的形成,最常见的原因之一是融化过程中,脂蛋白聚集所致。该现象一般不会影响产品质量。可以400g离心5分钟,取上清,然后过滤。根据需要选择合适的滤膜孔径,一般的是0.22um PES材质的滤膜。为避免滤膜阻塞,建议离心后取上清加入培养基内一起过滤而不是直接过滤血清。 ⚑ 为什么存放于冰箱中的血清会出现沉淀?如何避免该现象? 在2-8°C条件下存放,血清中的多种蛋白或脂蛋白会形成肉眼可见的沉淀,如血纤蛋白(fibrin),单体时处于溶解状态,在冻融过程中会发生聚集,形成肉眼可见的沉淀。但该现象一般不会影响血清的性能。可以400g离心5分钟,取上清,然后过滤。根据需要选择合适的滤膜孔径,一般的是0.22um PES材质的滤膜。为避免滤膜阻塞,建议离心后取上清加入培养基内一起过滤而不是直接过滤血清。为尽量避免出现上述现象,建议血清分装成一次性用量存于-15°至-20℃冰箱,避免反复冻融和融化后的血清在2-8°C条件下长时间放置。 ⚑ 血清是否需要做灭活处理? 这取决于您的应用。 灭活过程中,会导致血清中某些成分被破坏,如氨基酸,维生素,生长因子等。所以只有在您的实验对血清有特殊要求时,才会考
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关于新药研发中 宿主细胞蛋白 那些事
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
宿主细胞是生产诸如重组蛋白、抗体和疫苗类药物的上游材料,不同用途的药物会采用不同的宿主细胞,重组蛋白类药物常用的细胞有中国仓鼠卵巢细胞(CHO),新型疫苗常采用非洲绿猴肾细胞(Vero)、犬肾细胞 (MDCK)、昆虫细胞、人二倍体细胞,传统疫苗还会采用大肠杆菌、鸡胚等作为宿主细胞。 宿主细胞蛋白如果残留在药物制剂中,会引起人体的免疫应答——过敏反应,如:发热、水肿,甚至休克等。人体的免疫应答性质和效果,会受到HCPs的浓度、数量和个体免疫系统差异影响而不同。药物监管部门最关注患者用药的安全性,所以HCPs的监控变得越来越重要。作为药企来说,药物研发周期很长,成功率也很低,投入和产出不是直接划等号的,因此在药品研发的中后期,药企也会非常关注生产工艺设计过程中HCPs的控制。因为,药物中HCPs残留量会影响临床试验效果,国外曾有报道,由于药企开发的新药在临床实验中出现免疫反应,导致临床实验推迟、搁置或重新设计工艺,如:易普森公司,凝血因子9(IB1001) 临床实验在2012年被搁置,2017才获批。 药品即使被成功开发,但如果想进入不同国家的市场,还要达到当地药物监管部门的标准,所以药企都会遵照不同国家药典要求,严格建立HCP监控体系。中华人民共和国药典2010年版第三部就明确规定CHO细胞残余蛋白占总蛋白含量要小于0.05%以下;对Vero细胞残余蛋白会随不同产品而异,ELISA方法检测法每个剂量不高于2微克或4微克。美国FDA认为可以接受的范围为1-100/100万,即1-100个PPM。 当前,广泛被使用于HCP检测的方法是双抗体夹心酶联免疫法(ELISA)。在药物研发中,通常会建立通用和专属的HCP ELISA方法。前期可以采用通用HCP ELISA试剂盒。到临床实验时,药企会采用专属试剂盒,即工艺特异HCP ELISA试剂盒,需要单独纯化HCP蛋白,免疫筛选抗体。 HCP ELISA的原理是先将HCP抗体包被酶标板,孵育待测样品,通过HCP抗体捕获和富集样品中HCPs,再加入与包被酶标板的抗体种属不同的,酶
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详细介绍一下连接酶分子生物学酶试剂
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
分子生物学(molecularbiology)是从分子水平研究生物大分子的结构与功能从而阐明生命现象本质的科学。自20世纪50年代以来,分子生物学是生物学的前沿与生长点,其主要研究领域包括蛋白质体系、蛋白质—核酸体系(中心是分子遗传学)和蛋白质-脂质体系(即,生物膜)。1953年沃森、克里克提出DNA分子的双螺旋结构模型是分子生物学诞生的标志。 T4 DNA连接酶分子生物学酶试剂,DNA连接酶在辅助因子ATP的作用下,可催化双链DNA或RNA上的5'-磷酸末端和3'-羟基末端之间形成磷酸二酯键,可用于催化平末端或黏性末端之间的连接反应,也可修复双链DNA、RNA或DNA/RNA杂交双链中的单链切口。在DNA片段与载体、Linker或Adaptor DNA的连接中具有广泛应用。 本产品提供了常规浓度和高浓度酶的规格,以满足不同使用者的实验需要。 产品名称 编号 规格 包装 单价 加入购物车 T4 DNA Ligase 80107S 20000U, 400U/μL ¥398.00 T4 DNA Ligase 80107L 100000U, 400U/μL ¥1698.00 T4 DNA Ligase(高浓度) 80107H S 100000U, 2000U/μL ¥1698.00 T4 DNA Ligase(高浓度) 80107H L 500000U, 2000U/μL ¥5998.00 T4 DNA连接酶分子生物学酶试剂 产品介绍1、活性单位定义:在20μl 1×T4 DNA连接酶反应缓冲液中,6μg λDNA/Hind III的酶切产物在16℃下反应30分钟,50%的DNA片段被连接所需的酶量定
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肿瘤标志物的来源有哪些?
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
肿瘤标志物又称肿瘤标记物,是指特征性存在于恶性肿瘤细胞,或由恶性肿瘤细胞异常产生的物质,或是宿主对肿瘤的刺激反应而产生的物质,并能反映肿瘤发生、发展,监测肿瘤对**反应的一类物质。肿瘤标志物存在于肿瘤患者的组织、体液和排泄物中,能够用免疫学、生物学及化学的方法检测到。肿瘤标志物的来源有哪些?①肿瘤细胞的代谢产物,如:糖酵解产物、组织多肽抗原、核酸分解产物。②分化紊乱的细胞基因产物,如:异位的ACTH片段,甲胎蛋白、癌胚抗原、胎儿同工酶。③肿瘤细胞坏死崩解释放进入血液循环的物质,主要是某些细胞骨架蛋白成分,如细胞角质素片段抗原21-1(Cyfra21-1),多胺类物质。④肿瘤宿主细胞的细胞反应性产物,如:VCA-IgA、EA-IgA。
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纳氏试剂的配置方法
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
纳氏试剂(Nessler)是指一种利用紫外-可见分光光度法原理用于测定空气中、水体中氨氮含量的试剂。配制方法有两种1、二氯化汞-碘化钾-氢氧化钾( HgCl2-KI-KOH)溶液称取 15.0 g 氢氧化钾( KOH),溶于 50 ml 水中,冷却至室温。称取 5.0 g 碘化钾( KI),溶于 10 ml 水中,在搅拌下,将 2.50 g 二氯化汞( HgCl2)粉末分多次加入碘化钾溶液中,直到溶液呈深黄色或出现淡红色沉淀溶解缓慢时,充分搅拌混合,并改为滴加二氯化汞饱和溶液,当出现少量朱红色沉淀不再溶解时,停止滴加。在搅拌下,将冷却的氢氧化钾溶液缓慢地加入到上述二氯化汞和碘化钾的混合液中,并稀释至100 ml,于暗处静置 24 h,倾出上清液,贮于聚乙烯瓶内,用橡皮塞或聚乙烯盖子盖紧,存放暗处,可稳定 1 个月。2 、-碘化钾-氢氧化钠( HgI2-KI-NaOH)溶液称取 16.0 g 氢氧化钠( NaOH),溶于 50 ml 水中,冷却至室温。称取 7.0 g 碘化钾( KI)和 10.0 g ( HgI2),溶于水中,然后将此溶液在搅拌下,缓慢加入到上述 50 ml 氢氧化钠溶液中,用水稀释至 100 ml。贮于聚乙烯瓶内,用橡皮塞或聚乙烯盖子盖紧,于暗处存放,有效期 1 年。
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常见的肿瘤标志物有哪些?
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
当体内出现癌症病灶时,在血液和尿液中会出现健康时几乎不会出现的特殊蛋白、酵素、荷尔蒙。体检中检测的这些特殊物质被称为肿瘤标志物。一般在日常体检中,基本都是通过高精度的血液和血清检测,来排查这些肿瘤标志物的。 那么常见的肿瘤标志物有哪些呢? PSA:对前列腺癌有特殊反应的肿瘤标志物。良性前列腺肥大、急性前列腺炎等,也可能出现高值。 CA125:发生卵巢癌、子宫癌、肝癌、胆囊癌、胰腺癌、胃癌时,会出现高值。子宫内膜异位症、子宫肌瘤、卵巢囊肿等良性疾病,或月经期、妊娠后期,也可能出现高值。 CEA:发生消化系统癌症(大肠、胃、胰腺、肝、胆管等癌症)、肺癌、甲状腺癌、乳腺癌、卵巢癌等时,会出现高值。肝硬化、慢性肝炎、胃溃疡、肺气肿等,大量吸烟的人群,也可能出现高值。 AFP:对肝细胞癌、转移性肝癌有特殊反应。肝硬化、肝炎妊娠后期,也可能出现高值。 CA19-9:对胰腺癌、胆囊(胆管)癌、卵巢癌特别敏感,会出现强烈高值。胃、唾液腺、支气管、前列腺、结肠、直肠、卵巢等部位癌症发生时,也可能出现高值。急慢性胰腺炎、慢性肝炎、肝硬化、糖尿病、良性妇科疾病等,也会出现高值。 抗P53抗体:对癌症的早期发现起到关键作用的肿瘤标志物。结合其他肿瘤标志物检测项目,可提高癌症的检出概率。 PIVKA-Ⅱ:对肝癌有特殊反应,癌症发生时会出现高值。当身体缺少维生素K,或出现肝脏疾病时,也会有类似反应。 Pro-GRP:肺癌(小细胞癌)的肿瘤标志物之一。 CYFRA:对消化器官癌、肺癌、乳腺癌、胰腺癌诊断非常有用。 CA15-3:乳腺癌标志物,卵巢、子宫、胰腺癌发生时也会上升。 SCC:血清肿瘤标志物。出现宫颈部、肺、食道、头颈部、尿路、性器官、皮肤等部位的鳞状细胞癌症时,会出现高值。 ST439 BCA225:均为乳腺癌肿瘤标志物。
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mNGS及古细菌DNA检测应用推荐PCR去污染试剂盒
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
mNGS及古细菌DNA检测应用推荐PCR去污染试剂盒 描述 在研究和诊断中,PCR是一种检测DNA是否存在的敏感方法。PCR中使用的聚合酶经常被E.coli DNA污染。当检测少量细菌DNA时,污染的DNA可能导致灵敏度降低和假阳性。其他污染源可能是dNTPs、缓冲体系、引物/探针,以及操作过程中引入的DNA污染。一般来说,对细菌的检测和分型采用16S或23S rDNA基因保守区段为靶点的广谱范围探针。该方法对细菌DNA污染非常敏感,而大多数Master mix和聚合酶中都发现细菌DNA的痕迹。当使用qPCR检测或定量少量的细菌DNA时,污染的E.coli DNA可能会导致假阳性结果。 为了解决这个问题,我们开发出PCR去污染试剂盒,既能去除Master mix中细菌DNA污染,又不影响PCR反应的灵敏度。此外,该试剂盒无RNase活性。 优势 1. 减少背景污染,提高目标基因检测下限; 2. 不影响PCR检测灵敏度; 3. 简单易用,操作方便。 应用 1. 去除PCR及RT-PCR的mastermix中E.coli内源DNA污染及其他DNA污染; 2. 用于终点PCR和探针依赖的qPCR; 3. 用于细菌检测及基因分型; 4. 用于古细菌DNA检测。 组分及特性 dsDNase:双链特异性DNA酶,去除Master mix、引物及探针等的污染DNA; DTT:60℃条件下,能够不可逆灭活dsDNase,确保模板DNA不被清除。 不降低反应灵敏度 DNA污染是高灵敏度应用面对的主要问题。这些应用,以低丰度DNA为目标检测基因,极易受到污染DNA的干扰。因此,任何影响PCR灵敏度的去除DNA污染的方法,都是不能使用的。 Figure 2. 用PCR去污染试剂盒处理/未处理的mastermix、5个10倍梯度稀释的gDNA和水(NTC)为模板进行qPCR检测。与NTC untreated组相比,NTC decontaminated组在45个cycle仍然没有信号,说明PCR去污染试剂盒能去除mastermix中的污染。PCR去污染试剂盒处理前/后数据相比,Cq值并没有明显改变,说明基本不影响反应灵敏度。 ArcticZymes Technologies成立于20世纪80年代后期,总部位于挪威。致
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Abbexa褪黑素ELISA试剂盒丨精确的褪黑素浓度分析
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
褪黑素被熟知的功能主要是可以改善睡眠质量(用量0.1~0.3mg),能缩短睡前觉醒时间和入睡时间,改善睡眠质量,睡眠中觉醒次数明显减少,浅睡阶段短,深睡阶段延长,次日早晨唤醒阈值下降。有较强的调整时差功能 。 褪黑素zui大的特点应该是,它是迄今发现的zui强的内源性自由基清除剂。褪黑素的基本功能就是参与抗氧化系统,防止细胞产生氧化损伤.在这方面,它的功效超过了已知的所有体内物质.新研究证明,MT是内分泌的总司令,它控制体内各种内分泌腺的活动。从而间接地控制我们全身的机能. 褪黑素的作用包括: 1.防止病变 由于MT很容易进入细胞,因此可担任保护细胞核DNA的任务。如果DNA受到损害就可能导致癌变。 如果血液中有足够的Mel,就不容易患癌症。 2.调整昼夜节律 褪黑素是一种诱导自然睡眠的体内激素,它通过调节人的自然睡眠而克服睡眠障碍,提高睡眠质量. 3.推迟老化 老年人的松果体逐渐缩小,分泌的Mel相应减少。体内各器官需要的Mel量不足,导致老化而生疾病。科学家称松果体为人体的“老化时钟”。我们从体外补充Mel,便可以拨回老化时钟了。 4.对中枢神经系统的调节作用 大量临床和实验研究显示,褪黑素作为内源性神经内分泌激素,对中枢神经系统有直接和间接地生理调节作用,对睡眠障碍、抑郁症和精神疾病具有**作用,并对神经细胞有保护作用。 5.对免疫系统的调节作用 神经内分泌和免疫系统是互相联系的,免疫系统和它的产物可改变神经内分泌的功能。 6.对心血管系统的调节作用 Mel是具有多种功能的光信号,通过其分泌的改变将环境光照周期的信息传递给体内有关的组织.使它们的功能活动适应外界的变化。因此,血清褪黑素分泌水平可反应一天中相应时刻和一年的相应季节 此外,褪黑素还与人体呼吸系统、消化系统、泌尿系统有调节作用。 Abbexa褪黑素(Melatonin,MT)蛋白,抗体和ELISA试剂盒等提供了一系列独特而可靠的产品来支持研究中的褪黑素分析(仅用于科研,不可用于临床诊断
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基因突变常见的检测方法有哪些?
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
基因突变检测是指通过建立一系列电泳,分析DNA构象或解链特性,或者利用DNA变性和复性等特性,进行DNA突变的分析。该检测方法可用于多种疾病的早期筛查、诊断及预后判断,对肺癌、乳腺癌、结直肠癌等肿瘤患者的早期筛查、诊断及预后具有重要意义。 基因突变常见的检测方法有哪些? 1.焦磷酸测序法 测序法的基本原理是双脱氧终止法,是进行基因突变检测的可靠方法,也是使用最多的方法。但其过程繁琐、耗时长,灵敏度不高,对环境和操作者有危害,故在临床应用中存在一定的限制。 2.单链构象异构多态分析技术 依据单链DNA在某一种非变性环境中具有其特定的第二构象,构象不同导致电泳的迁移率不同,从而将正常链与突变链分离出来。与测序法相比,灵敏性更高。 3.聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析技术 通过聚合酶链反应扩增出可能包含突变的基因组片段,然后利用限制性内切酶对这些聚合酶链反应片段进行酶切,电泳检测后根据酶切片段的长度差异来判断是否存在突变位点。该法一般用于检测已知的突变位点。 4.探针扩增阻滞突变系统 又称等位基因特异聚合酶链反应,是利用Tap DNA聚合酶缺少3′到5′外切酶活性,聚合酶链反应引物的3′端末位碱基必须与其模板DNA互补才能有效扩增的原理。通过设计适当的引物以检测突变基因。 5.高分辨率溶解曲线分析技术 利用不同长度或不同碱基组成的DNA序列溶解曲线不同的原理,在聚合酶链反应后直接运行高分辨率溶解即可完成对样品突变分析。该技术是一种灵敏度100%的表皮生长因子受体基因突变筛选技术,可用于体细胞突变的检测。 6.高效液相色谱法 该方法是基于发生错配的杂合双链DNA与完全匹配的纯合双链DNA解链特征的差异而进行检测的,可检测出含有单个碱基的置换、插入或缺失的异源双链片段。与测序法相比,该法简单、快速,不仅可用于已知突变的检测,还可用于未知突变的扫描。但只能检查有无突变,不能检测出突变类型,结果判断容易出错。 7.微数字聚合酶
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解析:血清的质量规范
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
培养基是供微生物、植物安排和动物安排成长和维持用的人工配制养料,一般含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)、维生素和水等,有的还含有抗菌素、色素、激素和血清。培养基由于配制的质料不同、使用要求不同,而储存保管方面也稍有不同;液体培养基不易长期保管,均改制成粉末。 血清的质量规范:血清质量凹凸取决于两方面因素:一是选材目标,二是选材过程。用于选材的动物应健康无病并且在的出生天数之内,选材过程应严厉按照操作规程履行,制备出的血清要经过严厉的质量鉴定。WHO公布的《用动物细胞体外培养出产生物制品规程》中的要求:1. 牛血清必须来自有文件证明无牛海绵状脑病的牛群或国家。并应具备适当的监测系统。 2. 有些国家还要求牛血清来自未用过反刍动物蛋白饲料的牛群。 3. 血清要经过滤膜过滤除菌,确保无菌。 4. 无细菌、霉菌、支原体的污染,有些国家要求无细菌噬菌体污染。 5. 对细胞有杰出的支撑繁衍效果。 我国在对牛血清的质量《我国生物制品主要原辅料质控规范》中提出比较严厉的规范要求。包括蛋白质含量,细菌、真菌、支原体、大肠杆菌噬菌体、支撑细胞增殖检查。
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BD Rhapsody 助力单细胞测序研究
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
单细胞测序技术自2009年问世,2013年被Nature Methods评为年度技术以来,越来越多地被应用在科研领域。自此,单细胞测序技术被广泛应用于基础科研和临床研究。 单细胞在许多领域都占有一席之地,对于癌症早期的诊断、追踪以及个体化**具有重要意义。 基本原理 单细胞测序首先不是仅仅对一个细胞进行测序,而是说该项技术能对单一细胞的基因组或转录组进行测序,可以理解为单细胞水平上的测序。 为什么要进行单细胞测序?世界上没有两片相同的叶子,对于多细胞生物来说细胞与细胞之间是存在差异的,很多时候是基因组、转录组上的失之毫厘,功能上的差之千里。比如在肿瘤组织中,肿块中心的细胞与肿块周围的细胞,原发灶与转移灶的细胞,其基因组与转录组等遗传信息是存在差异的,这也就导致不同肿瘤细胞表现出免疫特性、生长速度、侵袭能力等表型方面的差异,最终导致对不同抗肿瘤药物的敏感性不同或放疗敏感性的差异。 传统测序方法所展示的信息也是在多细胞水平上的平均信息,而单细胞水平上的测序则完全可以反应同一个细胞群里不同细胞的基因组和转录组状况。单细胞测序技术的出现,使得从混杂的样品中筛选出异质性信息的难题得以解决,该技术的成熟使用也必将生命科学研究向前迈进一大步 BD Rhapsody BD Rhapsody™单细胞分析系统应运而生,此系统的诞生基于 BD 在细胞生物学领域 40年的专业技术,克服了传统检测的局限性,能够对成千上万个单细胞的数百个表达基因同时进行数字定量,每个细胞提取独立数据,体现异质性,可以鉴定和表征新型和罕见细胞类型,有助于理解从免疫学到肿瘤学等多个领域内的生物学过程。 BD重磅推出的Rhapsody™单细胞分析系统克服了传统检测的局限性,如微阵列和大量细胞 RNAseq,传统检测依赖于对多个细胞的平均检测,来实现对细胞间微妙差异的观察。与其他单细胞分析系统相比,BD Rhapsody™的特点及优势在于: 1.更高的
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华雅思创生物带你探索解读CAR-T疗法
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
免疫疗法是当下肿瘤**领域最具前景的发展方向之一。随着PD-(L)1等免疫检查点抑制剂应用范围逐渐扩大,CAR-T疗法研究不断出现新的进展,CAR-T疗法作为有别于传统药物的“活药”,不仅对复发、难治性肿瘤患者表现出了突破性疗效,其生产体系和使用场景也有别于普通药物。鉴于当下生物技术的更新速度,预计CAR-T疗法还将带给市场更多惊喜。 什么是CAR-T疗法 --------------------------------------● 想要了解CAR-T,我们首先聊一聊普通T细胞是如何在免疫系统发挥作用的。在免疫系统中,T细胞需要借助抗原递呈细胞(APC)来杀死异常细胞。APC表面有许多用于识别细胞表面抗原的MHC(主要组织相容性复合体)分子,等APC识别到异常细胞之后,MHC就会和T细胞受体(TCR)结合,把信号传递给T细胞。在CD3、CD4和CD8等分子的帮助下,T细胞才能最终识别异常细胞并将其杀死。但是肿瘤细胞却把自己的这些“指纹”给毁了,导致APC细胞就无法识别它。 CAR-T(嵌合抗原受体T细胞)是通过基因改造技术,让患者T细胞表达嵌合抗原受体,使效应T细胞的靶向性、杀伤性和持久性均较常规应用的免疫细胞高,并能克服肿瘤局部免疫抑制微环境和打破宿主免疫耐受状态。 CAR-T的前世今生 --------------------------------------● 嵌合抗原受体(CARs)是由一个胞外抗原结合域(通常是一个单链抗体,也可以是多肽或者其他蛋白质),一个铰链区(促进抗原受体与肿瘤抗原的结合),一个跨膜区(用来固定CAR),一个T细胞激活结构域(CD3 ζ,提供T细胞活化的第一信号)以及一个或多个胞内共刺激结构域组成(CD28/4-1BB,提供T细胞活化的第二信号)。CAR的胞外部分用来识别特异性的肿瘤抗原,随后胞内信号域会刺激T细胞增殖,并且通过细胞溶解和细胞因子释放来消除肿瘤细胞。 历经十余年,CAR-T经历了四代结构,每一代结构都是在各个细节上突破,使CAR-T往更为精准、更为高效、更为持久的方向发展。 1989年,第一代基于免疫球蛋白样scFv和FcεRI受体(
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处理中药标准品结果需遵循哪些步骤?
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
远方的思念,因为有你;远方的祝福,因为有你;远方的亲情,因为有你;远方的情谊,还是因为有你;在三伏天到来的日子里,我托短信捎去我的祝福,愿你幸福甜蜜、清凉顺意。标准品的标定主要有两个流程,一是初步标定,二是正式标定。昨日下午,我公司技术员,针对中药标准品的标定结果做出总结,下面我们一起来看,处理标准品的标定结果请遵循这四个步骤: 一、如该药物没有可进行等当量换算并符合要求的容量法时,可采用反复纯化的原料,色谱法确定纯度后扣除有关物质、炽灼残渣、水分和挥发溶剂等后的理论含量确定为标准品含量,以此为基准进行对照品(标准品)的换代和量值传递。 二、用于抗生素微生物检定法的第yi代基准标准品可参照上述方法标定,如为多组份抗生素,其组份比例应与拟上市产品组份比例一致或接近,或以其中某一组份纯品为基准中药标准品,但要注意标准品换代时量值传递的恒定。 三、仅用于鉴别定性的化学对照品,注重其结构确证的研究资料,纯度和含量的要求一般可适当降低。 四、杂质对照品,用作限度要求时,应提供其来源(合成路线)、结构确证的研究资料,应具备较高的纯度和含量,并提供纯度和含量的的测定结果,提供质量控制标准。 公司相关产品种属众多,中药标准品充分满足广大科研用户的需求,产品厂家直销,一步法试剂盒简单快捷灵敏,提供优质服务!贴心售后!我司产品只能用于科学研究,不得用于医学诊断,具体各指标使用说明书请联络客服索取!