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浅谈ELISA试剂盒结果出错的原因

浅谈ELISA试剂盒结果出错的原因

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体检测,我们在ELISA检测中影响因素有很多,而且它的操作中有一定的技术要求,在实验中除正常反应外,有时常可见到一些错误结果(即假阳性或假阴性结果)。引起 ELISA 测定错误结果的原因主要有:       1.样本因素;       2.试剂因素;       3.操作因素。       血清样本是zui常用于ELISA样本,血浆一般可视为与血清同等标本,标本引起的假阳性和假阴性结果主要是干扰性物质所致,分为内源性物质和外源性物质两种: 1.内源性物质       在血清标本中有40%的人血清中含有非特异性干扰物质,它在不同程度影响测定结果。常见的干扰物质有:类风湿因子、补体、嗜异性抗体、嗜靶抗原自身抗体、医源性诱导的抗鼠Ig(s) 抗体、交叉反应物质和其它物质等。       (1) 类风湿因子(RF)       人血清中IgM、IgG型RF可以与ELSIA系统中的捕获抗体及酶标记二抗的 FC 段直接结合,从而导致假阳性。 解决这个问题的方法有:       ① 用 F(ab)2 替代完整的 IgG;       ② 标本用联有热变性(63°C,10 min)IgG 的固相吸附剂处理(将热变性 IgG 加入到标本稀释液中同样有效);       ③ 检测抗原时,可以用2-巯基乙醇等加入到标本稀释液中,使 RF 降解。       (2) 补体 ELISA 系统中固相一抗和标记二抗过程中,抗体分子发生变构,其 FC 段的补体 C1q 分子结合位点被暴露出来,使 C1q可以将二者连接起来,从而造成假阳性。 解决的办法是:       ① 用 EDTA 稀释标本;       ② 用 53°C,10 min 或 56°C,30 min 加热血清使C1q灭活。       (3) 嗜异性抗体  人类血清中含有能与啮齿类动物(如鼠等)Ig (s) 结合的天然嗜异性抗体,可将 ELISA系统中一抗和二抗连接起来,也能造成假阳性。 解决的办法是:可在标本稀释液中加入过量的动物 Ig (s) ,但加入量不足或亚类不同时无效。       (4) 嗜靶抗原的自身抗体  抗甲状腺球蛋白、抗胰岛素等嗜靶抗原的自身抗体,有时能与靶抗原结合形成复合物,在 ELISA 方

微生物菌种灭菌原理及问题

微生物菌种灭菌原理及问题

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

1,微生物菌种灭菌原理     培养基在制备后的24h内完成灭菌工序。高压灭菌的原理是:在密闭的蒸锅内,其中的蒸气不能外溢,压力不断上升,使水的沸点不断提高,从而锅内温度也随之增加。在0.1MPa的压力下,锅内温度达121℃。在此蒸气温度下,可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。注意完全排除锅内空气,使锅内全部是水蒸气,灭菌才能彻底。     高压灭菌放气有几种不同的做法,但目的都是要排净空气,使锅内均匀升温,保证灭菌彻底。常用方法是:关闭放气阀,通电后,待压力上升到0.05MPa时,打开放气阀,放出空气,待压力表指针归零后,再关闭放气阀。关阀再通电后,压力表上升达到0.1MPa时,开始计时,维持压力0.1~0.15MPa,20min。到达保压时间后,即可切断电源,在压力降到0.5MPa,可缓慢放出蒸气,应注意不要使压力降低太快,以致引起激烈的减压沸腾,使容器中的液体四溢。当压力降到零后,才能开盖,取出培养基,摆在平台上,以待冷凝。     对高压灭菌后不变质的物品,如无菌水、栽培介质、接种用具,可以延长灭菌时间或提高压力。而培养基要严格遵守保压时间,既要保压彻底,又要防止培养基中的成分变质或效力降低,不能随意延长时间。对于一些布制品,如实验服、口罩等也可用高压灭菌。洗净晾干后用耐高压塑料袋装好,高压灭菌20~30min。2,灭菌过程中容易遇到的问题     高压微生物菌种前后的培养基,其pH值下降0.2~0.3单位。高压灭菌后培养基pH值的变化方向和幅度取决于多种因素。培养基中成分单一时和培养基中含有高或较高浓度物质时,高压灭菌后的pH值变化幅度较大。高压灭菌通常会使培养基中的蔗糖水解为单糖,从而改变培养基的渗透压。在8%-20%蔗糖范围内,高压灭菌后的培养基约升高0.43倍。培养基中的铁在高压灭菌时会催化蔗糖水解,可使15%~25%的蔗糖水解为葡萄糖和果糖。培养基值小于5.5,其水解量更多,培养基中添加0.1%活性炭时,高压下蔗糖水解大大增强,添加1%活性炭,蔗糖水解率可达5%。

脂肪干细胞的应用情况

脂肪干细胞的应用情况

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

脂肪干细胞组织是人体内含量十分丰富的组织。随着肥胖症患者的增多,人类脂肪开始“富余”,并渐成为累赘。人们一直以为,脂肪仅仅只有储存热量作用,过量储存会导致脂肪肝、血管硬化。殊不知,脂肪还蕴藏有十分稀缺的干细胞资源。Zuk等人将脂肪抽吸术后的脂肪细胞(processed lipoaspirate cell,PLA)收集、消化后进行体外培养研究。经过不同的细胞因子的诱导,PLA能够向骨、软骨、骨骼肌、脂肪、神经等组织转化。PLA经转化后细胞表面的CD标记物与骨髓干细胞的诱导分化标记物有所不同,如两者CD49d及CDl06的表达特征正好相反。由于这种多分化潜能细胞来源于脂肪组织,故被称为脂肪干细胞(adipose--derived stern cell,ASC)。     ASC能够转化为多种非脂肪相关组织,且其诱导因子与BMSC有着较大的相似性。经含有胰岛素、地塞米松和吲哚美辛(消炎痛)的培养液培养后,ASC可分化为脂肪细胞,胞内富含脂滴,易为油红。染色。将这些细胞置人含有去羟基维生素D和磷酸甘油的环境中,能转化为骨组织;成软骨的转化则需要有细胞因子TGF-p的参与;则参与了向骨骼肌方向的转化。在成神经组织的实验中,化学成分p-巯基乙醇起着重要的作用;转化后的细胞表达了神经系统特异性物质,如神经特异性核蛋白(NeuN)、神经特异性烯醇酶(NSE)、神经丝蛋白(NF-70)、微管相关蛋白-2(MAP-2)、神经胶质酸性原纤维蛋白(GFAP)、半乳糖脑苷脂酶(GalC)等。     由于人体内含有大量的脂肪组织,经负压抽吸即可微创获得足够的脂肪组织。实验表明,平均350m1脂肪抽吸物可分离出1×108 单个核细胞。因此,脂肪干细胞zui大的一个优点便是含量丰富。整形外科门诊即可进行抽脂美容手术。利用手术的废弃物进行组织再造,说明脂肪干细胞又是一个廉价的干细胞来源。由于存在着一定优点,脂肪干细胞对组织工程来说是一种有用的种子细胞来源。脂肪干细胞有可能成为一种廉价、可大量获得的自体干细胞,同时不存在医学伦理学和免疫排斥等问题。人丙型肝炎IgM(HCV-IgM)ELIS

兔食管上皮细胞培养步骤

兔食管上皮细胞培养步骤

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

原代细胞实验材料:       1. 大兔的正常食管组织       2. 6孔培养板:用多聚赖氨酸4℃包被过夜       3. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素和200000U/L庆大霉素,pH7.4       4. 手术刀、解剖剪、解剖镊、眼科剪,眼科镊         实验方法:       1. 处死大兔,取正常食管组织放入含双抗的PBS(pH=7.2)中反复清洗3次,以洗去组织表面的血丝及粘液;       2. 小心的用眼科剪镊将食管黏膜与黏膜下组织分离;       3. 分离出的粘膜组织用含双抗的PBS(pH=7.2)反复冲洗若干次;       4. 将清洗后食管黏膜组织剪成1mm3 左右大小的组织块;       5. 再次用含双抗的PBS(pH=7.2)反复清洗,直至清洗液清亮为止;       6. 将黏膜组织块按1块/cm2 的密度接种于6孔培养板中,上皮面朝下;       7. 将贴满组织块的培养板室温放置5~10分钟,待组织块贴壁后,转入37℃、5%CO2 的培养箱中静置培养。       8. 静置2h左右,待组织块基本不会浮起后,加入0.5-1ml培养液,置于37℃、5%CO2 的培养箱中继续培养。3-4天后有上皮原代细胞从组织边缘爬出,7天左右铺满板面。 人高敏三碘甲状腺原氨酸(u-T3)ELISA试剂盒    进口/分装    Human Ultrasensitivity Tri-iodothyronine,u-T3 ELISA Kit                     人黄体生成素释放激素(LHRH)ELISA试剂盒    进口/分装    Human Luteinizing Hormone-Releasing Hormone,LHRH ELISA Kit                      人8异前列腺素(8-iso-PG)ELISA试剂盒    进口/分装    Human 8-iso prostaglandin,8-iso-PG ELISA Kit                     人肾素(Renin)ELISA试剂盒     进口/分装    Human Renin ELISA Kit                     人肾上腺素(EPI)ELISA试剂盒    进口/分装    Human Epinephrine/Adrenaline,EPI ELISA Kit                     人雌二醇受体(ER)ELISA试剂盒    进口/分装    Human Estradiol receptor,ER ELISA Kit  原代细胞

转化细胞培养技术中的准备工作

转化细胞培养技术中的准备工作

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

一、转化细胞准备工作   准备工作对开展细胞培养异常重要,推备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒,培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌,无菌室或超净台的清洁与消毒,培养箱及其他仪器的检查与调试等。   1、清洁、消毒、液体   直接接触细胞的用品要超净处理——无非必须分子   直接接触细胞的用品要彻底消除微生物   超净和消毒过的样品要密闭保存,标记消毒时间   实验室保持洁净,随时消毒   尽量采用商品化一次性用品   操作者也要清洁和消毒   缓冲液要符合生理渗透压(280~310 mOsm)和pH(7.2~ 7.4 )   2、玻璃器皿超净   去污剂煮沸30min(超声波震荡30min) 温水刷洗 流水冲洗 酸性洗涤液浸泡 流水冲洗 蒸馏水冲洗 纯水漂洗 在洁净温箱中烤干 密封消毒   3、消毒   干热——玻璃器皿  160℃,120min   湿热(高压,120 ℃ )  10~20磅,20~30min   紫外线——空气   消毒剂——场面   微孔过滤——液体  0.22um、0.45um   二、转化细胞生长的条件和培养基要求:   选择合适的培养基,保证全过程的无菌   细胞的营养需要:氨基酸、维生素、碳水化合物、无机离子、蛋白质、促生长因子。其中很多成分系用血清、胚胎浸出液等提供,在很多情况下还需加入10%的胎牛或新生牛血清。 相关产品:人褪黑素(MT)ELISA试剂盒    进口/分装    Human Melatonin,MT ELISA Kit                 人血栓素B2(TXB2)ELISA试剂盒    进口/分装    Human Thromboxane B2,TX-B2 ELISA Kit                 人皮质酮/肾上腺酮(CORT)ELISA试剂盒    进口/分装    Human Corticosterone,CORT ELISA Kit                 人前列腺素E2(PGE2)ELISA试剂盒    进口/分装    Human Prostaglandin E2,PG-E2 ELISA Kit                 培养基的制备:a..浓度要准-渗透压、b. 酸碱度要适宜-酸度计   转化细胞的生存环境:a.. 温度、b.气相、 c.渗透压--290mmol/L

关于研域ELISA试剂盒在实验时酶标仪环境的重要性

关于研域ELISA试剂盒在实验时酶标仪环境的重要性

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

关于研域ELISA试剂盒在实验时酶标仪环境的重要性,我司专业的技术师为你分享一些心得: A、仪器应放置在噪音低于40分贝的环境下。 B、操作环境温度应在15℃至40℃之间,环境湿度在15%~85%之间。 C、操作时电压应保持稳定。 D、为延缓光学部件的老化,应避免阳光直射。 E、保持干燥、干净、水平的工作台面,以及足够的操作空间。 F、操作环境空气清洁,避免水汽、烟尘。 G、仪器应放置在无强磁场和干扰电压的位置。   ELISA试剂盒实验时有气泡的解决办法: 1、采用更好材质的板或采用专门的96孔板振荡器。 2、可以用tip吸走,但实验中费事、效果还不是很理想。 3、使用吹风机,将吹风机打开,并调节到zui高温度,对96孔板吹1-2秒就可以了。 4、使用注射器针头扎破。   上海研域化学试剂有限公司总部设在上海,公司专业经营生命科学领域的研究试剂、ELISA试剂盒、实验室消耗品等,我们致力于向国内外生命科学研究人员提供*的产品和技术服务。

微生物菌种的具体保存方法

微生物菌种的具体保存方法

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

微生物具有容易变异的特性,因此,在保藏过程中,必须使微生物的代谢处于zui不活跃或相对静止的状态,才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素,所以,菌种保藏方法虽多,但都是根据这三个因素而设计的。微生物菌种保藏方法大致可分为以下几种: 1.传代培养保藏法又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等(后者作保藏厌氧细菌用),培养后于4—6℃冰箱内保存。 2.液体石蜡覆盖保藏法是传代培养的变相方法,能够适当延长保藏时间,它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡,一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡,另一方面可阻止氧气进入,以减弱代谢作用。3.载体保藏法是将微生物吸附在适当的载体,如土壤、沙子、硅胶、滤纸上,而后进行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛。4.寄主保藏法用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物,如病毒、立克次氏体、螺旋体等,它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内感染并传代,此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。5.冷冻保藏法可分低温冰箱(-20—-30℃,-50—-80℃)、干冰酒精快速冻结(约-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。6.冷冻干燥保藏法先使微生物在极低温度(-70℃左右)下快速冷冻,然后在减压下利用升华现象除去水分(真空干燥)。

地球更加温暖-外地核中*的轻元素(氧)

地球更加温暖-外地核中*的轻元素(氧)

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

在这几天,上海地区温度提升,根据之前对比明显炎热的多。在此上海劲马为您说明了进口试剂盒的一对一实验技术服务,然而夏季的来临会影响到产品与实验,所以您在我公司购买前、后都注意一下温度的问题,我公司技术人员也会为您特别讲说试剂的保存等问题。        下面我们就来看看上海劲马今天为您分享的内容:地球更加温暖--外地核中*的轻元素(氧)。在《美国国家*院刊》中的这篇论文描述了它们如何通过实验在实验室中排除了在外地核中可能存在的其他轻元素,而只留下氧。         有科学家猜测当地核遇到地幔时,应该还有一些其他元素趁机进入到地核当中,其中硫和氧的可能性被认为zui大,但一直以来都没有人能够通过单独的地震数据或实验模型证明这一点。         对这一问题,新研究中研究人员通过对铁和镍进行加热加压的方式,在实验室中模拟地球的内核,而后逐一添加被怀疑的轻元素进行实验。通过使用密度泛函理论,一个又一个的可疑元素被剔除了,zui终只留下了氧。他们的计算表明氧元素占地球外核的3.7%。         研究人员承认,他们关于地核中存在氧的理论并不新鲜,这项研究的价值是通过实验等数据证实了这一猜测。氧在外地核中存在的理论将改变此前对早期地球的假设,意味着那时候的地球将更加温暖。         即便如此也不是所有的科学家都认同这一结论,尤其是硫的缺乏,目前不少陨石中都包含有硫,且硫也被认为是火星内核的重要组成成分。因此,要说服绝大多数的科学家,这项研究还有更多的工作要做。

低氧探针常见问题解答

低氧探针常见问题解答

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

常见问题解答(FAO): Hypoxyprobe-1 探针如何溶解? Pimonidazole HCl 是弱碱性盐酸盐,水溶性非常好,建议溶解于116mg/ml 的中性生理盐水。 Pimonidazole HCl免疫剂量是多少? 探针与低氧组织结合程度取决于探针的硝基被还原率以及组织与探针的结合度。(exposure = concentration x time)。硝基被还原率很难预测,但是结合度可以测定。以下数据统计了:探针的免疫剂量(MW 290.7)。对于常规的小动物大小比较均一的,例如:小鼠或大鼠,我们推荐:探针用量:60 mg/kg。从30 mg/kg to 400 mg/kg在小鼠和大鼠都有用到,在此范围内的探针用量,不会由于血流效应而导致毒性或氧量的改变。除非大于100mg/kg以上的注射量小鼠后肢,需要注意。 对于体型较大个体,注射剂量依据个体的基础表面积而定。对于人样本,推荐剂量为:0.5 gm/m2,狗样本:0.28 gm/m2 Pimonidazole HCl 探针是否能够渗透进入低氧大脑组织或脑肿瘤组织?   Pimonidazole HCl可以自由渗透进入脑以及脑肿瘤组织。 探针注射后,多久可以进行收获组织? 对于人体组织的一些研究表明,收获组织需要在免疫后15-24小时后检查。探针在血浆中的半衰期是5小时,因此16-24小时相当于3-5个探针半衰期循环。也就是说:在组织检查时:大概有1/8 到1/32 的探针仍存在,冷固定后,这样减少了非特异性染色,且低背景。 另外关于人类肿瘤研究表明,活组织检查应该在免疫后,1.5-4小时,然后组织及时转到液氮固定。这种方法背景也较低。 通过研究的一些文献,可以对实验有个指导。小鼠血浆中的探针半衰期在0.25hour.这种情况下,采取1-2小时收获组织然后采取快速固定方法,可有效的消除背景。   产品订购信息:   英文名称 货号 规格 产品描述 Hypoxyprobe Kit HP1 100/200/1000Kit Pimonidazole /Mouse Mab Hypoxyprobe Kit HP2 100/200/1000Kit Pimonidazole/FITC-Mab/anti-FITC HRP Hypoxyprobe Kit H

如何正确的保养elisa试剂盒实验仪器

如何正确的保养elisa试剂盒实验仪器

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

zui近发现我们实验室的仪器有的可以用很长时间,并且在使用的过程中不会出现故障。有的仪器没几年就出现这样或者那样的问题。是质量不好的原因吗?小编就问了我司的实验室技术总监,他说正确的保养elisa试剂盒实验仪器,对实验也是很关键的。下面小编就简单的介绍一下:ELISA试剂盒实验仪器保养:1、仪器的接地:接地的问题除对仪器的性能、可靠性有影响外,还对使用者的人身安全关系重大,因此所有接入市电电网的仪器必须接可靠的地线。2、仪器工作环境:环境对精密检测仪器的性能、可靠性、测量结果和寿命都有很大影响,为此对它有以下几方面的要求: 防尘,防潮,防热,防震,防3、电源电压:由于市电电压波动比较大,常常超出要求的范围,为确保供电电源的稳定,必须配用交流稳压电源。要求高的仪器单独配备稳压电源。另外应注意,插头中的电线连接应良好,使用时切莫把插孔位置搞错,导致仪器损坏。以上是有关仪器的一般性维护的主要内容,加外所有仪器在关机停用时,要关断总机电源,并拔下电源插头,以确保安全。您了解了吗?如果您还有关于ELISA试剂盒的疑问或者建议,或者在线咨询!

微生物菌种的具体保存方法

微生物菌种的具体保存方法

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

微生物具有容易变异的特性,因此,在保藏过程中,必须使微生物的代谢处于zui不活跃或相对静止的状态,才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。    低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素,所以,菌种保藏方法虽多,但都是根据这三个因素而设计的。微生物菌种保藏方法大致可分为以下几种: 1.传代培养保藏法又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等(后者作保藏厌氧细菌用),培养后于4—6℃冰箱内保存。 2.液体石蜡覆盖保藏法是传代培养的变相方法,能够适当延长保藏时间,它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡,一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡,另一方面可阻止氧气进入,以减弱代谢作用。3.载体保藏法是将微生物吸附在适当的载体,如土壤、沙子、硅胶、滤纸上,而后进行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛。4.寄主保藏法用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物,如病毒、立克次氏体、螺旋体等,它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内感染并传代,此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。5.冷冻保藏法可分低温冰箱(-20—-30℃,-50—-80℃)、干冰酒精快速冻结(约-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。6.冷冻干燥保藏法先使微生物在极低温度(-70℃左右)下快速冷冻,然后在减压下利用升华现象除去水分(真空干燥)。

使用胎牛血清的小细节您知道吗?

使用胎牛血清的小细节您知道吗?

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

运用胎牛血清应留心啥?今天小编要为咱们解说运用胎牛血清时应留心的小细节,究竟细节是实验成功与否的要害:1.运用前需做细菌、支原体培养及内毒素测定,在确实无污染的情况下方可运用。 2.每批小牛血清测定总蛋白含量并分别配成10%20%,25%于荃础培养墓和HAT培养基中,对骨越瘤细胞和杂交瘤细胞进行培养,查询小牛血清对瘤细胞和融合细胞的细胞毒性。若在20%浓度小牛血清情况下,细胞生长差,则该批小牛血清不适宜应用。 3.应在细胞培养瓶内进行,培养期间随时可放于倒置显微镜下查询,可避免由于肉眼查询的忽略。经增菌培养I周后,虽肉眼未见生长,还有必要进一步做分别培养,直至确实无菌后方可运用。 4.杂交瘤实验全过程有必要选用同一批血清。常常更换不一样批号的血清是影响培养成果的zui主要因素之一,并常致使悉数实验失利。

山西大学:显色弱灵敏度低是怎么回事?

山西大学:显色弱灵敏度低是怎么回事?

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

昨天上午来自山西大学的程老师通过到本公司吴,此次山西大学的程老师想要了解下做试验时显色弱灵敏度低是怎么一回事?随后恒远吴为程老师安排了技术人员进行解答:   在完成所有实验步骤进行底物TMB溶液显色后,酶标板中孔的显色比较浅,即只有微弱的信号呈现。 出现该现象的可能原因: 1.产品过有效期,试剂没有按规定进行适当的保存。 2.试剂,标准品或者样品在使用前没有平衡到室温。 3.少加了试剂的量或者加入试剂的稀释比例不当。 4.洗板或者加样过程中,酶标物受污染失活。 5.孵育时间和孵育温度未达到实验要求。 6.洗涤液稀释倍数不符合要求,洗板次数过多,洗板冲击力过大,洗板浸泡时间过长。 7.底物溶液TMB显色时间太短。     听完本公司技术人员的一番解说后,程老师表示:怪不得贵公司的口碑一向很不错,单单凭借服务这一块就很让人信服!后期有实验项目,还会继续保持合作的!                        购买本公司BIM品牌ELISA试剂盒,不仅有优惠,还全程提供免费的技术指导及代测服务哦!

ELISA试剂盒实验之温育小课堂开课啦!

ELISA试剂盒实验之温育小课堂开课啦!

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

ELISA试剂盒实验中,有一个步骤是*的,那就是保温,这一保温过程大家称之为温育!ELISA属固相免疫测定,抗原、抗体的结合只在固相表面上发生。以抗体包被的夹心法为例,加入板孔中的标本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗结 合的机会,只有zui贴近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体接触。这是一个逐步平衡的过程,因此需经扩散才能达到反应的终点。在其后加入的酶标记抗体与固相抗 原的结合也同样如此。这就是为什么ELISA反应总是需要一定时间的温育。    温育常采用的温度有43℃、37℃、室温和4℃等。37℃是实验室中常用的保温温度,也是大多数抗原抗体结合的合适温度。在建立ELISA方法作反应 动力学研究时,实验表明,两次抗原抗体反应一般在37℃经1~2小时,产物的生成可达。为加速反应,可提高反应的温度,有些试验在43℃进行,但不宜 采用更高的温度。抗原抗体反应4℃更为彻底,在放射免疫测定中多使反应在冰箱中过夜,以形成zui多的沉淀。但因所需时间太长,在ELISA试剂盒中一般不予采用。   保温的方式除有的ELISA仪器附有特制的电热块外,一般均采用水浴,可将ELISA试剂盒板置于水浴箱中,ELISA板底应贴着水面,使温度迅速平 衡。为避免蒸发,板上应加盖,也可用塑料贴封纸或保鲜膜覆盖板孔,此时可让反应板漂浮在水面上。若用保温箱,ELISA试剂盒应放在湿盒内,湿盒要选用传 热性良好的材料如金属等,在盒底垫湿的纱布,zui后将ELISA板放在湿纱布上。湿盒应先放在保温箱中预温至规定的温度,特别是在气温较低的时候更应如此。 无论是水浴还是湿盒温育,反应板均不宜叠放,以保证各板的温度都能迅速平衡。室温温育的反应,操作时的室温应严格限制在规定的范围内,标准室温温度是指 20~25℃,但具体操作时可根据说明书的要求控制温育。室温温育时,ELISA试剂盒只要平置于操作台上即可。应注意温育的温度和时间应按规定力求准 确。为保证这一点,一个人操作时,一次不宜多于两块板同时测定。         上海沪鼎生物科技

为什么血清的颜色有的成黄色有的成红色呢?

为什么血清的颜色有的成黄色有的成红色呢?

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

相信有不少科研工作者都比较好奇一个问题,那就是为什么血清有的血清成黄色,而有的血清成红色呢?到底哪种颜色才是正常的呢?质量好的血清又是哪种颜色呢?今天上海恒远将围绕这个问题为大家分析一下!              根据我公司多年经验技术员的分析:血清中,血红蛋白含量的不同,可表现出黄色或红色。我国的细胞培养用血清标准是不高于20mg/dl,实际上,血红蛋白含量的高低对血清并无直接影响,这个指标的意义在于能体现出采血过程的严谨规范程度,良好的操作能降低血清的溶血。   国产血清的采血点很分散,大多是由屠户采血后马上离心收集,所以很少会有溶血,表现出明亮的蜡黄色,当然,国产血清也很少有标准意义上的胎牛血清。进口血清或多或少总有点溶血,因为真正的血清凝血功能差,红细胞容易破裂。不过总的来说,国产的血清呈现出蜡黄。进口的血清,质量的呈现出谈黄、微红色,如Gibco 16000,差点的呈现出橘红色或鲜红色。当然,热灭活血清或保存不当的血清,由于血红蛋白的破坏氧化,会呈现出暗红,甚至咖啡色。        上海恒远血清包装规格分别有100ML、200ML和500ML,主要涉及品牌有HyClone、GIBCO、NQBB、Sigma,保证,质量稳定可靠,价格经济实惠。咨询。