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敲降斑马鱼基因的方法学比较
作者:德尔塔 日期:2022-04-12
一、基因敲降的前期准备工作相同 1.1 生物信息学分析目标基因在斑马鱼早期胚胎发送过程中是否有表达。 1.2 收集斑马鱼早期发育胚胎(通常为48 hpf前的胚胎),提取总RNA,然后进行体外转录(RT)。 1.3 设计检测目标基因表达的PCR引物,以1.2获得的cDNA为模板,进行PCR扩增,确认目标基因在早期有表达。 二、MO法与CRISPRi法的敲降原理不同 2.1 MO是在转录后水平上敲降基因的功能(MO-Spl阻遏原始转录本的剪接,MO-Atg阻遏成熟转录本的翻译)(基因转录后调控) 2.2 CRISPRi 是在转录水平上敲降基因的功能(抑制基因的转录)(基因转录水平的调控)。 敲降工具有效性验证的方法不同 3.1 吗啡啉敲降法(确认有效性)的技术路线 抑制翻译的MO(MO-Atg)和抑制剪接的MO(MO-Spl)二者敲降基因的有效性评价方法不同。抑制剪接的MO(MO-Spl)的有效性评价方法是通过RT-PCR直接检测原始mRNA转录本的正常剪接是否被改变;抑制翻译的MO(MO-Atg)的有效性评价通常需要通过蛋白质印迹法进行检测。但是,由于适用于斑马鱼的抗体很少,过去一般通过报告基因法来进行有效性评价(参见我们发表的论文Dong et al., 2017. J Biol Chem. 292(31):13045-13055 ),但后来斑马鱼领域给出的MO使用指南(见已发表的研究论文:Stainier et al., 2017. Plos Genetics, 13(10): e1007000)指出这种报告基因评价法缺乏特异性,因而不再推荐该报告基因评价方法。也正是由于没有相应比较方便的评价方法,一般不推荐此种抑制翻译(MO-Atg)的MO敲降法。确认抑制剪接的MO(MO-Spl)敲降基因有效性的技术路线如下: 3.1.1 分析斑马鱼目标基因的基因组组成(外显子-内含子结构),然后针对该基因,设计阻遏原始转录本剪接的吗啡啉(morpholino)(MO-Spl)。 注:MO-spl不能阻止母源转录本的翻译,如果要阻止母源转录本的翻译,需要设计阻遏原始转录本翻译的吗啡啉(MO-Atg)。 3.1.2 订购吗啡啉MO-Spl或MO-Atg和标准对照MO。 3.1.3 将不同浓度的MO
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实验动物的第二位挑大梁能手-大鼠
作者:德尔塔 日期:2022-04-12
学者在Open Access里随机挑选了276 篇有关模式动物的学术论文,除去小鼠(Mouse)比例,其中有16 篇使用大鼠(Rat)作为了实验动物,大鼠无疑成为了实验动物的第二主角。而很多接触实验动物的同学们,对大鼠的了解却少之又少,可能对其还仅仅停留于它体型庞大,性格凶残等表象,其实,这样的理解不仅仅存在错误并且远远不够。 大鼠(Rat)属于野生褐家鼠的变种,在动物学分类上属于哺乳纲、啮齿目、鼠科、大鼠属。在这16篇大鼠文章中,有8篇用到Sprague-Dawley(SD)大鼠,7篇用到Wistar大鼠,也就是说它们是最常用的的两种大鼠品系。 下面以最常用到SD大鼠为例,首先看一组她们从出生到老去的照片,萌萌的非常可爱! 刚出生10天的SD仔鼠:约15 g,咋一看有点像一只小宠物猪,此时全身已经覆盖毛发,但眼睛和耳朵都还未睁开,依偎在母亲身边,找安全感呢。 2周左右,开始了它的童年生活了,约重50g,毛发浓密了,眼睛和耳朵都长开了,俨然像一只小大鼠啦! 大鼠与人类相比,可怜的几乎没有童年,它的童年是非常短暂并加速成长的,约在6周龄时,就达到性成熟,体重约为150g。雄鼠比雌鼠重几十克。 一般6-8周(2个月)的大鼠用于实验,体重大概达到200g左右,其体长不小于18~20 cm。 6个月大鼠达到体成熟,即各器官生长发育基本结束。雄性大鼠体重300~500g,雌性大鼠250~500 g。 上图我们看到大鼠几个关键阶段的写照,由于在不同阶段的大鼠,其解剖学,生理学及生物行为存在较大差异,并且研究发现大鼠的成长和衰老过程并非和人类一致,即它三年的寿命并非是人类衰老的缩影。 为了更准确反映人类疾病发展情况,我们还必须需要了解大鼠每个阶段与人类对应关系。 大鼠与人类年龄对比关系 我们通常会把一个人分为幼儿期、童年期、青春期、成年期、中年期及老年期等,同样有文献报道大鼠与人类的年龄也有某种联系,它们的对应关系并非线性,属于离散量。 大鼠一般寿命2-3年,在1.5个月就达到性成熟,
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基因型鉴定试剂盒使用说明书
作者:德尔塔 日期:2022-04-12
试剂盒成分 1、 YSY Buffer 2、2*PCR Master Mix(使用实验室常用的酶即可,由客户自备) 储藏条件:4oC 实验步骤 1、细胞与动物组织的准备: 1.1 培养细胞准备: 以培养密度为 1´106 个/ml 为例,在超净台内取 1ml(内含 300-1000 个细胞);对于某些类贴壁细 胞,可直接刮取侧壁细胞,植入已编号的 PCR 管内。 血液准备: 取适当部位,采集血液 1 ml。 注意:如果样品在 10 分钟内处理,则无需抗凝处理;在高通量采样情况下,如果样品在塑料PCR管内需存放 10 分钟以上,需采用抗凝处理。 1.3 哺乳动物组织准备: 采集相应部位,剪取 1mm3(1 ml)左右组织放入已编号的 PCR 管内。 1.4 斑马鱼尾鳍、果蝇等其他模式动物组织准备: 选取尾鳍、翅膀等无损害部位,可通过剪取、穿孔或针刺等方法制备少量新鲜组织,体积约 1mm3 即 1 ml。 2、基因组 DNA 模板的制备 加样 10ml 的 YSYBuffer 液分别逐一加入装有组织或细胞的 PCR 管壁(注意勿将枪头碰到组织 YSY Biotech 基因的故事 让斑马鱼来为您讲述 样品,防止污染);加样完毕后,将 PCR 管快速离心,确保溶液和组织或细胞均位于 PCR 管 底部; 制备基因组模板 PCR 管放入 PCR 仪中,启动 PCR 程序:65℃×30min、95℃×5min、16℃×1min。基因组 模板若不立即使用,请放入-20℃保存。 3、目标基因的 PCR 扩增(以下试剂请自备) 3.1 取用新的 PCR 管,按下列顺序组装 PCR 反应体系: 20 ml 反应体系(产物直接凝胶电泳进行基因型鉴定用) 基因组 DNA 模板(步骤 2.2 所得):1 ml 2 × PCR Master Mix:10 ml(自备) 正向引物(5mM): 1ml (自备) 反向引物(5mM): 1ml (自备) 超纯水: 7 ml(自备) 组装完毕后,将 PCR 管快速离心,确保所有溶液均位于 PCR 管底部; 将 PCR 管放入 PCR 仪中,启动客户自行设计的 PCR 程序完成 PCR 扩增。 4、PCR 产物验证 取
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点将科技助力森林水文过程研究
作者:德尔塔 日期:2022-04-12
2019年3月至7月,点将科技多次派遣工程师赴南岭北江源森林生态系统国家定位观测研究站进行森林水文过程研究设备安装、调试,项目实施期间多次冒着暴雨、冰雹、酷暑等恶劣天气条件进行户外作业,只为助力森林水文过程研究。 森林水文过程研究项目是中国林业科学研究院热带林业研究所提出的研究课题,点将科技作为项目设计协助方以及设备供应商,在整个项目过程中提供专业的技术支持、专业的仪器设备,并且派遣专业的仪器应用团队赴现场安装调试仪器。 水是森林生态系统物质循环的重要物质,同时也作为系统物质和能量循环以及森林生态水文过程的主要载体参与森林生态系统调控过程。从水量平衡看,不同植物种以及其按一定的空间结构组成的林分对大气降水具有不同的分配特征。因此,正确观测和分析森林对降雨的分配规律,对分析认识森林制备对水调节和分配作用,以及由此产生的空间格局和过程有着重要的意义。 森林水文项目使用仪器包括GRWS100研究级自动气象站、PE-SF08 植物插针茎流系统、SS-MP09 土壤多参数观测系统、径流监测系统、WS-EV蒸发站、HOBO H21小型自动气象站、激光雨滴谱监测系统、小流域流量监测系统、林间穿透雨监测系统、SS-ES30 大型野外全自动称重式土壤蒸渗系统等等。该项目从各个角度观测森林水文情况,现场部署9个全国首创的全封闭式径流场。通过气象站、蒸发站、大型蒸渗系统监测降雨以及蒸发情况;利用土壤观测系统中的多层土壤传感器监测水分在土壤中的分布、运动情况;再加上径流监测系统监测地表径流、壤中流等;另外部署小流域流量监测系统,监测森林环境中各小流域的流量;再配合植物茎流系统,监测植物对水分的利用情况。 森林水文过程研究项目全方位的监测森林中的水文过程,将水从来源到去向整个过程都使用仪器进行监测,利用监测数据全方位的分析森林水文过程,对森林水循环、森林对水的调节和分配等研究提供全面的数据。 树干液流监测数据 南岭北江源森林
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人Toll样受体7(TLR7)ELISA试剂盒说明书
作者:德尔塔 日期:2022-04-12
人Toll样受体7(TLR7)ELISA试剂盒正常值范围上海仁捷生物科技有限公司专业经营生产ELISA试剂盒,科研化试剂、分析试剂 ,代理许多先进水平的高科技产品,包括分子生物学、细胞生物学、免疫学、诊断等多个研究及应用领域。我们努力将欧美专业生产厂家的具有先进水平的产品推荐给各类研究人员;另一方面也非常重视自主产品研究和开发,推出了一系列具有竞争力的产品和服务。 人Toll样受体7(TLR7)ELISA试剂盒正常值范围品牌: RENJIBIO 检测方法: ELISA酶联免疫法 说明书:说明书随货发送,也可直接联系在线销售索取 测试种属:人、大小鼠、豚鼠、兔子、牛、羊、猪、鸡、鸭elisa试剂盒等种属 保存条件:2~8℃,温度6摄氏度,有效期6个月。 产地:进口/国产 库存:现货供应。 性状:48T/96T,盒装液体 品牌:仁捷生物/进口原装 检测波长:450nm 研究领域:炎症研究、神经生物学、新陈代谢、信号通路、免疫学。 注意要点:仅供科研实验,不得用于其他用途;请仔细阅读使用说明书,严格遵照规定操作,必能得出准确的结果. 可同时检测天然或重组的,且与其他相关蛋白无交叉反应。 适用范围:此试剂盒仅用于科研实验,禁用于临床 预期应用:ELISA法定量测定、、细胞上清或其它相关生物中的含量. 运输方面:现货供应,一般为快递运输,江浙沪隔天到,外地及偏远地方三至五天时间到货。 免费代测,从标本收集、保存、预试验、实验、数据分析等全实验提供完整的技术指导 人Toll样受体7(TLR7)ELISA试剂盒正常值范围组成及试剂配制 1:预包被板: 96T/48T 2:酶标记: (30倍浓缩)HRPIgG,亲合纯化 0.4mL x 1 3:品: -6 0.5mL x 2 4:EIA缓冲液: 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 30mL x 1 5:标记稀释液: 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 12mL x 1 6:显色剂: TMB底物液 15mL x 1 7:终止液: 1N 12mL x 1 8:浓缩洗涤液: (40倍浓缩) 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 50mL x 1 人Toll样受体7(TLR7)ELISA试剂盒正常值范围用户评价: 张:销售服务态度
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环境对色彩判断的影响
作者:德尔塔 日期:2022-04-12
春天里,白玉兰在路边灿烂地盛开!作为上海的市花,象征着一种开路先锋、奋发向上的精神。在繁忙的都市中,她给人一种清秀、典雅、超凡脱俗的感觉。可是,白玉兰是白色的吗? 从上面的图片中,无疑看到的白玉兰是白色的;可把它们放在三种纸张上时,马上发生了变化,白玉兰看上去没有那么白了,感觉偏深偏黄了; 当我们把它们的颜色提取出来,做成色块与三种纸张对比时,这种感觉得到了确认。 我们将花瓣拿到色彩实验室,用MetaVue VS3200非接触式成像分光色差仪进行测量,获得其色度数据与其在色度空间中的位置如下: 左图为MetaVue VS3200非接触式成像分光色差仪,点击产品名称,了解更多相关信息 可见其L*为87.92,b*值达+13.54,a*值为-4.06,为略带绿色相的浅黄色。其可见光谱范围内的反射率光谱为: 可见其在570nm-700nm的反射率比其它区域高,这一段是绿黄橙红色光,组合起来为浅黄色光。 对于白色的定义,国标《GB/T 15608-2006 中国颜色体系》中的定义为:“3.1白色white:物体明度大于8.5的中性色”,中性色的定义为:“3.25无彩色(中性色)neutral color:无光谱选择性的物体表面色。”所以依据国标,我们看到的白玉兰并不是白色的。 那我们为什么日常感觉是白色的呢? 这要谈一下眼睛的一个特性:视觉适应性。视觉适应性是指人眼对于不同照明光源或不同环境条件下会自动调整白点基准的特性,通过这种调整人眼可以更好地感知物体的光感特性,包括物体的颜色深浅变化、色相变化等。 同时看到很多物体的景象时,眼睛会根据景象中的颜色(光感)自动调节瞳孔大小和视网膜获得的感受,依据其中最浅的颜色和最深的颜色大脑重新定义白色和黑色,通过这两个极点来调整景象中的阶调,以获得对这个景象更加清楚和丰富的感知。 无疑这是人眼长期进化的结果,对人类适应各种自然和社会环境有很好的作用。下面的图片里中心的色块我们感觉一个是黑色或深灰色,另外一个是白色或浅灰色
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集胞藻PCC6803蛋白抗体分类及功能
作者:德尔塔 日期:2022-04-12
PHYTOAB公司开发了集胞藻PCC6803蛋白抗体,产品网址链接:http://www.phytoab.com/products/algae-antibodies/cyanobacteria 联系电话:400-810-0506 PHYTOAB是一家专门从事植物抗体生产和定制服务的企业,总部位于美国加利福尼亚州的旧金山湾区。目前,PHYTOAB公司生产了大量适用于不同种类植物的抗体,包括拟南芥、水稻、玉米、大豆、番茄和马铃薯等。PHYTOAB致力于为生物学家和研究人员提供很好客户体验和高质量的产品。 PHYTOAB抗体产品主要包括以下: PRIMARY ANTIBODIES for: 叶绿体相关抗体 线粒体相关抗体 细胞质相关抗体 质膜相关抗体 高尔基体相关抗体 内质网相关抗体 质体相关抗体 过氧化物酶体相关抗体 细胞核相关抗体 液泡相关抗体 细胞壁相关抗体 转录因子相关抗体 标签抗体 内参抗体 SECONDARY ANTIBODIES 光合作用相关抗体 PHYTOAB公司最新研发了许多用于光合作用研究的抗体。这些抗体是通过蛋白A纯化或免疫亲和纯化的兔的多克隆抗体,可以广泛应用于Western blot , ELISA等。 PSI PSI的主要亚基包括PsaA和PsaB,是光系统I的密切相关蛋白,参与P700,A0 (chlorophyll), A1 (a phylloquinone)和4Fe-4S铁硫中心Fx的结合。 PSII PS II 是一种完整的膜蛋白,膜蛋白的核心是由两个亚基D1和D2组成。这两个亚基跨膜并且与细菌光系统的L和M亚基同源。 PSII biognensis factors and related proteins 光合电子传递相关抗体 卡尔文循环相关抗体 天线蛋白相关抗体 细胞色素b6/f复合体相关抗体 F型ATP酶相关抗体 基因转录系统相关抗体 分子伴侣相关抗体 蛋白质合成相关抗体 TIC/TOC相关抗体 其他叶绿体蛋白相关抗体 内参抗体 内参在western blots实验中作为内部参照是必要的,它通过确保每个孔上样量相同来检测蛋白的表达水平。内参通常是各个细胞或组织中表达量高,且表达相对恒定的蛋白。因此,管家基因编码表达的蛋白常用于内参。另外,选择的内参分子量与检测的目的蛋白分子量尽量不同,从而使WB结果条带大小
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显微计数法不溶性微粒的优缺点
作者:德尔塔 日期:2022-04-12
显微计数法不溶性微粒介绍 药典规定:按照中国药典0903章节的要求,不溶性微粒的检测有两个方法,光阻法不溶性微粒检查和显微镜不溶性微粒检查。随着光阻法收录入药典作为不溶性微粒检查的一个方法以来,由于其操作简单,检测速度快,无需制样等优点深受广大用户的喜爱,也便成了用户偏爱和较高一种的检查方法。而显微镜法不溶性微粒慢慢淡出人们视野。 随着药学的发展,尤其是制剂学的飞速进步,各式新的剂型进入临床,如注射用乳剂,常见的有丙泊酚、中长链脂肪乳、三腔袋脂肪乳等,脂质体,混悬剂,滴眼剂,混悬剂,易产生气泡剂型等。此种注射剂剂型的特殊性,无法利用常用的光阻法检测不溶性微粒,因为其样品本身的不透明性、高粘度等原因,使得采用光阻法检测会产生假性结果,因为光阻法会将样品本身和气泡也作为颗粒计入。中国药典CP中规定所有的注射剂都要做不溶性微粒项目检查,故而显微镜法不溶性微粒检查设备是非常重要的选择。 常规显微镜不溶性检查的缺陷 1-常规显微镜不溶性微粒检查大家会采用一台简单显微镜,人工进行计数。此种操作的难点是: 2-无法避免人为的原因导致计数的偏差,主观性太强; 3-最重要的是人为计数对实验员眼睛的要求较高,用眼过度会造成视力过早下降,引起一些不必要的眼疾; 4-操作不规范性,测试结果重复性差 全自动显微镜不溶性微粒检测YH-MIP-0103系列,从样品制备到测试完成有一套完整的方案。 1-直接按照药典要求出具报告; 2-全自动进行滤膜全扫描,并进行颗粒图片分析; 3-可以区分颗粒性质,鉴别不溶性微粒的来源,是金属还是纤维; 4-按照颗粒性质进行归类分析统计; 5-光阻法检测不通过时,作为光阻法不溶性微粒的一个验证; 应用领域 应用范围:乳剂、脂质体、滴眼剂、混悬剂、易产生气泡剂型、粘度大制剂等 执行标准:中国药典CP,美国药典 USP 788、USP 789,欧洲药典 EP,英国药典 BP2013,日本药典JP等
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果蔬呼吸测定仪分析果蔬采收后的呼吸特性
作者:德尔塔 日期:2022-04-12
果蔬呼吸测定仪专用于常温、冷藏库、气调库、超市冷柜等储藏条件下的果品和蔬菜呼吸强度的测定和研究。它的特点是可以根据果蔬的大小来选择不同体积的呼吸室,加快了平衡和测定时间;仪器可以同时显示呼吸室的CO2浓度、O2浓度、温度和湿度;可以采用CO2浓度和O2浓度两种呼吸表示方法。与以往的CO2测定仪相比,具有多功能、高精度、快速、高效、方便等特点,非常适合于食品,园艺、果品、蔬菜、外贸等各类学校、科研院所及各公司企业用于各类果品和蔬菜的呼吸测定。 果蔬采收后虽然同化作用基本停止,但呼吸作用成为了新陈代谢的主导方面,呼吸作用会直接、间接的联系着各种生理生化过程,因此也影响着果蔬的耐贮性、抗病性的发展变化。果蔬的采后呼吸特性与果蔬储藏特性的关系是,呼吸作用越旺盛,各种过程变化越快,果蔬也越不耐贮藏,因此在果品蔬菜的贮藏、运输过程中,就需要使用呼吸测定仪来测定果蔬的采后呼吸特性,并有效控制果蔬的呼吸作用和代谢强度,以延长果蔬的储藏周期,提高果蔬产品的品质。 果蔬呼吸测定仪测定的主要内容是果蔬的采后呼吸特性的一个重要指标-呼吸强度,该仪器通过测定呼吸室的CO2浓度、O2浓度、温度和湿度等来分析果蔬的采后呼吸特性。它为果蔬的呼吸特性提供了两种表示方法,分别是CO2浓度和O2浓度,在功能上较以往采用的CO2分析仪更出色,具有多功能、高精度、快速、高效、方便等特点。 目前利用呼吸测定仪研究果蔬的采后呼吸特性,是快速、准确测定果蔬的采后呼吸强度的一种可靠、有效方法,在食品,园艺、果品、蔬菜、外贸等各类学校、科研院所、及各公司企业对各类果品和蔬菜的呼吸测定工作中,有非常重要的应用。
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树木年轮气候研究树轮采样标准
作者:德尔塔 日期:2022-04-12
本标准说明了树木取样环境的选择,树种的选择,年轮样本采集的方式、采集的高度、样本采集的数量和样本记录的有关细则 术语 1、敏感度 敏感度是测量树木年轮序列对气候信息敏感的量值指标。 2、郁闭度 郁闭度指森林中乔木树冠遮蔽地面的成都,是反映林分密度的指标,以树冠在林地垂直投影所占的面积与林地总面积之比表示。 3、生长锥 生长锥是一种用于钻取年轮髓芯样本的工具,规格有多种,长度在100-100cm,其组成分为三部分:1、钻柄:钻取树芯用的把手,把手上带有聚四氟乙烯防滑套,空心,能存放锥体和抽芯器,以保护锥体;2、锥体:为一长空心特种碳钢杆,内径有4.3mm,51.5mm,10mm,12mm四种,前端为5cm长的螺旋刃口,刃口可以通过旋转进入树木木质部,有三线和两线螺纹两种;3、抽芯器:是一个V型的通条(半圆形),前段有细齿刃,用于抽取树木样芯。 采样环境的选取原则 环境限制因子 1、人类影响 选择树木生长活动未受人类影响的采样环境。 2、环境稳定 要求树木生长的土壤、水分条件等自然环境未发生突变,没发生过河流引水、大面积的山体滑坡、泥石流、地震、雪崩等改变森林生长环境的事件。 3、自然灾害 选择树木生长未受森林火灾、病虫害等自然灾害伤害的区域。 4、山区 山区采样选择林缘区、立地条件较差的树株和石崖上的树株,应避免在密林深处取样。 5、荒漠区 荒漠区采样选择地下水有保证的区域,包括以古河道为主或在离现河道较远的地方、有生长能力且不受沙漠的掩埋作用的地方。 森林树线限制因子 1、森林上线 分析历史时期温度选取山区森林上限林缘区采样较为适宜。 2、森林下线 分析历史时期降水选取山区森林下线林缘区采样较为适宜。 敏感度限制因子 树木对气温、降水等气候要素的敏感度主要受小环境的影响。 1、地形 主要是坡度和悬崖石壁的影响,表现为:悬崖优于石壁,迎风坡优于背风坡,陡坡优于缓坡。 2、土壤厚度 土壤厚度与敏感度成反比,应选择土层厚度相对较薄的区域。 3、郁闭度 树株之间的
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植物维生素D(VD)ELISA免费代测试剂盒说明书
作者:德尔塔 日期:2022-04-12
植物维生素D(VD)ELISA免费代测试剂盒说明书 【中文名称】:植物维生素D(VD)ELISA免费代测试剂盒 【产品规格】:96T/48T。 【保存条件】:2-8℃低温保存 【保质期】:6个月,所有试剂盒均提供批次。 【试剂盒成分】:酶标板,试剂,标准品等。ELISA试剂盒检测范围:人、绵羊、小鼠、大鼠、猪、兔、山羊、牛、马、猪、其它动物细胞因子、植物细胞因子、骨代谢、细胞凋亡、激素内分泌、活性多肽、肝纤维化、自身抗体、血栓与止血、肿瘤、自身抗体科研Elisa检测试剂盒。 主要用于科研方面,不用于临床诊断。可以用于检测各种指标。 植物维生素D(VD)ELISA免费代测试剂盒实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中维生素C(VC)水平。用纯化的维生素C(VC)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入维生素C(VC),再与HRP标记的维生素C(VC)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的维生素C(VC)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中维生素C(VC)浓度。 植物维生素C(VC)ELISA免费代测试剂盒索取说明书或有技术问题请的在线销售人员!凡在公司购买ELISA试剂盒的客户,可享受我司提供的免费代测服务、全程技术指导及完整的售前售中售后服务,如有问题请,我们会以zui快的速度为您解答! 样本处理及要求 .组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。 2. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融. 3. 不能检测含NaN3 的样品,因
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如何选择合适的二抗
作者:德尔塔 日期:2022-04-12
二抗是在其他宿主体内制备的能与一抗或一抗片段结合的抗体,上面通常连有酶或荧光素等标记物。二抗针对某一特定物种的所有抗体均具有特异性,因而使用标记的二抗可以免去对每一个一抗进行标记,大大节省了时间和费用。检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择,同时在后继实验中也会有不同的检测方案,如ELISA、WB、IHC、IF、IP、Flo等,因此在选择二抗的时候要综合考虑一抗的类型及后继检测方案的要求,一般来说,选择合适的二抗需要从下面几个方面考虑: 一抗的种属来源: 二抗应根据一抗的物种来源选择相应的抗该物种的二抗,例如:如果一抗是小鼠源的单克隆抗体,二抗则选抗小鼠的二抗。 一抗的类别与亚型: 二抗需与一抗的类别或亚类相匹配,通常是针对单克隆抗体而言。如果单克隆一抗是小鼠IgG的某一亚类,那么几乎所有的抗小鼠IgG都可以与之结合,在不清楚一抗为何种类/亚类的情况下,可以选用抗相应物种IgG,或者你也可以选择专门针对这一亚类的二抗。 二抗的种属来源: 二抗的种属来源与其质量没有必然的联系,不同来源的二抗在一般的实验里没有太多的差别。然而在一些特殊的实验里,如双标实验里,如果两个一抗一个山羊来源,一个小鼠来源,则相应的二抗分别要抗山羊和抗小鼠的二抗,这时候,二抗就不能选择山羊或者小鼠来源的。 二抗的耦联标记: 耦联到二抗上的标记主要有酶(辣根过氧化酶HRP和碱性磷酸酶AP或其衍生物APAAP,PAP),荧光基团(FITC、PE、Dylight等),生物素,金颗粒。选用哪种探针的二抗主要取决于具体的实验。对于WesternBlot和ELISA,常用的二抗是酶标二抗;而细胞或组织标记实验(细胞免疫化学、组织免疫化学、流式细胞术)中常用荧光基团标记的二抗;免疫组化中也可以使用HRP或AP标记的二抗。 二抗的纯度: 亲和层析纯化相对于传统的血清纯化、盐沉淀等方法更加高效,得到的抗体纯度较高,产生的非特异性背景少,所以亲和层析纯化的抗体一般更受人们欢迎。 血清吸
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Applichem实验室污染清除试剂助力COVID-19核酸检测
作者:德尔塔 日期:2022-04-12
进入冬季以来,全国多地区又出现了新冠疫情的复发,大规模核酸检测仍是当下快速控制和扑灭疫情的重要手段之一。为了给检测人员提供一个安全、放心的实验环境,高效、准确地完成数以百万计样本的核酸检测,实验室污染清除必不可少! 核酸污染清除 COVID-19大规模核酸检测基本都采用荧光定量PCR方法,该方法操作方便、灵敏度高,但也正是由于其超高的灵敏度,使得微量的核酸污染就可造成假阳性结果。尤其是大批量样本集中进行PCR检测极易出现因实验环境核酸污染导致的假阳性问题,不仅会让检测准确率降低,还会延误病例确诊进而造成大量人力、医疗资源的浪费。 传统的核酸污染清除多通过修饰、酶解(如DNase)或变性等几种方式,实践证明这些方式存在核酸降解不彻底、试剂具有腐蚀性和毒性等不足。德国AppliChem的DNA-ExitusPlus™(货号A7089)是一种无腐蚀、无致癌性的核酸(包括DNA、RNA)清除试剂,该产品可断裂双链DNA并将其降解,且已降解的核酸片段不能被恢复,从而能彻底消除PCR过程中由于非目标DNA导致的假阳性扩增。 DNA-ExitusPlus™产品信息: 推荐理由: 高效性:试剂中各组分协同催化作用,能快速、非序列特异性不可逆的降解核酸污染; 使用简单:喷洒或浸泡处理10-15分钟即可完成清除作用,升温至50度可提高反应速度; 安全无毒害:产品为非酶类试剂,且仅对裸露核酸有非常好的清除效果,不会对人体造成影响和伤害; 无污染:所有组分可生物降解、不会造成环境污染和破坏; 无腐蚀性:不含有机溶剂或者挥发性物质,不含无机酸或者碱性物质,通过严格腐蚀性测试,不会对金属形成腐蚀。 使用方法: 实验操作台表面 直接将DNA-ExitusPlus™喷到操作台表面作用10~15分钟,无菌湿布擦拭后即可,无需用水冲洗。 仪器表面 用布或纸巾蘸取适量 DNAExitusPlus™擦拭仪器表面,充分作用后再用干净湿布擦一遍即可。一些小的部件可在DNA-ExitusPlus™中浸泡10min左右,然后用清水冲洗、晾干。 塑料及玻璃器皿 向
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挑选护肤品——不看宣传看“说明书”
作者:德尔塔 日期:2022-04-12
近日来儿童使用“激素面霜”导致类库欣综合征的事件引起了激烈讨论。其实此类事件并不是第一次发生,2019年“3•15”时《中国消费者报》报道其购买了市场上热销的8款产品进行检验,含有激素的6款“宝宝霜”均为“卫消字号”产品。在此类事件屡禁不止的情况下,除了监管部门要加大力度打击不法商家,作为消费者也要学会甄别护肤用品。 挑选皮肤用产品要先了解各类产品有什么区别,目前市面上常见的皮肤用产品大概分为:国药准字、妆字号、消字号、械字号。 国药准字是指在现行《药品管理法》中规定,生产药品“需要经过国务院药品监督管理部门批准,并发给药品批准文号”。相应的皮肤产品为药品,要遵从医嘱使用。 妆字号是化妆品(以涂擦、喷洒或者其它类似的办法,散布于人体表面任何部位,以达到清洁、消除不良气味、护肤、美容和修饰目的的日用化学工业产品)的代号。化妆品如含有现行《化妆品卫生规范》中规定的限用物质、限用防腐剂、限用紫外线吸收剂、限用染发剂等,会按照《化妆品卫生规范》要求在标签上标注相应的使用条件和注意事项。 消字号是经地方卫生部门审核批准的卫生批号,属于卫生消毒用品范畴。消字号仅有消毒功能不具备**效果,生产企业和经营企业不应该对“消”字产品做任何有疗效的宣传。并且《消毒产品生产企业卫生规范》第三十条明确规定:“消毒产品禁止使用抗生素、抗真菌药物、激素等物料。” 械字号是指医疗器械备案字号,常见的有械字号面膜。械字号产品是风险程度低,实行国家常规管理可以保证其安全、有效的医疗器械。械字号产品安全性更高,经过国家药品监督管理局备案,特殊人群使用时更安全。如:敏感性皮肤、激素脸、玫瑰痤疮等皮肤抵抗力比较差时都可以进行使用。 综上,消费者如果是选用日常护肤产品,**妆字号产品或者根据需要选择械字号产品。并且一定要在正规渠道选购产品,购买到的产品可以通过国家药品监督管理局“化妆品查询”、“医疗器械查询”查询产品的备案信息,防止购买
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鼠疫杆菌(YP)核酸检测试剂盒说明书
作者:德尔塔 日期:2022-04-12
鼠疫杆菌(YP)核酸检测试剂盒说明书 技术原理: DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。 在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性) 发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。 特点优势: .特异性:所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到00%。 2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为00%。 3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到03cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。 4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的7种呼吸道及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。 5. 优势:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。 6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。 需要自备的器材: .方法仪器:分析天平、离