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血浆与血清的区别分析
作者：德尔塔 日期：2022-04-21
血清即离体的血液凝固之后，经血凝块聚缩释出的液体。主要成分：血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物，其组成成份虽大部分已知，但还有一部分尚不清楚，且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等，这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。 对血清的成分和作用的研究虽有很大进展，但仍存在一些问题。 主要是： 第一:血清的成份可能有几百种之多，目前对其准确的成份、含量及其作用机制仍不清楚，尤其是对其中一些多肽类生长因子、激素和脂类等尚未充分认识，这给研究工作带来许多困难； 第二:血清都是批量生产，各批量之间差异很大，而且血清保存期至多一年，因此，要保证每批血清的相似性极为困难，从而使实验的标准化和连续性受到限制； 第三:不能排除血清中含有易变物质，这被认为是“瓶中恶化”的原因之一。 鉴别方法： 血液凝固析出的淡黄色透明液体。如将血液自血管内抽出，放入试管中，不加抗凝剂，则凝血反应被激活，血液迅速凝固，形成胶冻。凝血块收缩，其周围所析出之淡黄色透明液体即为血清，也可于凝血后经离心取得。在凝血过程中，纤维蛋白原转变成纤维蛋白块，所以血清中无纤维蛋白原，这一点是与血浆最大的区别。而在凝血反应中，血小板释放出许多物质，各凝血因子也都发生了变化。这些成分都留在血清中并继续发生变化，如凝血酶原变成凝血酶，并随血清存放时间逐渐减少以至消失。这些也都是与血浆区别之处。但大量未参加凝血反应的物质则与血浆基本相同。为避免抗凝剂的干扰，血液中许多化学成分的分析，都以血清为样品。 血浆是血液的液体成分，血细胞悬浊于其中。人体含有2750-3300毫升血浆，约占血液总体积的55%。血浆的绝大部分是水(体积的90%)，其中溶解的物质主要是血浆蛋白，还包括葡萄糖、无机盐离子、激素以及二氧化碳。血浆的主要功能是运载血
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基于 Orbitrap 技术的全新GC-MS具有超高分辨率和亚ppm级的精确质量能力
作者：德尔塔 日期：2022-04-21
Cristian Cojocariu, Dominic Roberts, and Paul Silcock Thermo Fisher Scientific, Runcorn, UK 关键词 气相色谱；高分辨率；质量准确度；Orbitrap 技术 前言 Thermo Scientific™ Q Exactive™ GC 组合型四极杆 Orbitrap 质谱仪是一款全新的台式质谱，致力于将气相色谱（GC）的高分离能力与 Orbitrap 高分辨精确质量数（HR/AM）能力完美结合。 高质量数精度的质谱仪（MS）对于复杂基质下的目标化合物和非目标化合物测量非常关键，在进行化合物识别和确认时，对于提高测量结果的可靠性也非常关键。对于前者，获得稳定高质量数精度可以使用相对较窄的质量数提取窗口，充分利用该仪器的质量数解析能力优势；对于后者，提供足够准确的测量化合物质量数，允许化学家可靠预测元素组成和同位素比，以识别物质的化学结构。 结果证实，在使用 Q Exactive GC 质谱仪的高分辨率时，即使在很宽的浓度范围和复杂化学背景下，也能获得出色且稳定的质量精度。 实验 使用校准物质（FC 43, CAS 311-89-7）已知质量数调谐和校正 Q Exactive GC 系统，可获得 < 0.5 ppm RMS 的质量数精度。如图 1 所示，使用全扫描和不同分辨率（FWHM）在电子轰击电离（EI）模式下操作该系统。可以使用 GC 色谱柱聚硅氧烷流失物的质量数进行质量数校正。 表 1. 质谱仪条件 通过精确质量数获得出色选择性 采用 Q Exactive GC 技术可达到亚 ppm 级质量数精度和超高分辨率，可以在复杂基质中检测目标分析物。图 1 中展示了这种功能，以 60k 分辨率（FWHM，m/z 200）在全扫描模式下采集韭菜样品提取物（加标数个农残化合物，浓度为 10 ng/g）。采用 ±5 ppm 质量数偏差窗口提取异丙二酮质量数（m/z 314.0094），可在韭菜基质背景下生成一个化学干扰少，选择性高的提取离子色谱图（XIC）。作为对比，一个单位质量数提取窗口（±3,184 ppm），模拟单位质量数分辨率采集，该分辨率没有为检测该农残化合物提供足够的选择性（图 1）。 图 1. 采用
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锐博生物：Gut：IR-58—潜在的结肠直肠癌靶向药物的鉴定
作者：德尔塔 日期：2022-04-21
Gut：IR-58—潜在的结肠直肠癌靶向药物 重庆第三军医大学史春梦教授课题组于2016年11月14号在Gut杂志（IF：14.921）发表了名为《Identification of a fluorescent small-molecule enhancer for therapeutic autophagy in colorectal cancer by targeting mitochondrial protein translocase TIM44》的文章，首次鉴定了一种新的近红外（NIR）荧光团自噬增强子可作为潜在的结肠直肠癌靶向药物，我们一起来看看吧。 目的： 由于对自噬过程的调节有益于癌症**，因此鉴定新型自噬增强子具有重要意义。 然而，目前的自噬诱导抗癌剂由于其在靶外组织中的非特异性生物分布而发挥副作用。本研究旨在开发一种多功能试剂，以整合癌靶向，成像和**，并调查其机制。 设计： 合成、筛选和鉴定一系列靶向线粒体的近红外（NIR）荧光团，使其自噬活性增强，并在体外和体内测试光学性质和生物效应。使用抑制剂，小干扰RNA（siRNA），RNA测序，质谱和人类样品等研究基础机制。 结果：研究者筛选并鉴定了一种新的NIR自噬增强子，IR-58，它表现出显着的肿瘤选择性杀伤作用。 1. IR-58合成途径 图1 IR-58能够在CRC细胞中诱导自噬（图1A）。 IR-58的化学合成方法如图1B所示。合成化合物2和4之后，在Et 3 N催化作用下，用化合物2和4进行酰胺化反应合成关键中间体（化合物5，产率60％）。使用1H-核磁共振（1 H-NMR）测出化合物5的化学结构。随后，使用2,3,3-三甲基-3H吲哚和化合物5在1,2-二氯苯中进行N-烷基化反应制备吲哚季铵盐形式的化合物6。最后，化合物6与化合物7反应用乙酸钠作为催化剂通过缩合作用合成IR-58（1.63g，产率30％，绿色粘性固体）。 2. IR-58细胞及其动物体内功能研究 研究者研究了在HT-29与HCT116 CRC移植瘤中，IR-58优先于肿瘤富集的潜能。在裸鼠皮下植入人类HT-29与HCT116 CRC移植瘤，单次静注IR-58后成像。 图2 A,B展示了注射IR-58后移植瘤呈现出强烈的荧光。并通过组织病理学分析证实了IR-58碘化物在肿瘤细胞
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液相色谱微型化：我们为什么这样做？
作者：德尔塔 日期：2022-04-21
Evert-Jan Sneekes, Laurent Rieux 和Remco Swart 赛默飞世尔科技，荷兰阿姆斯特丹 摘要 液相色谱 (LC) 微型化通常是为了提高灵敏度，这是蛋白质组学检测低丰度肽和蛋白质的必然要求。微型化的其他优点还包括提高与质谱连接的效率并降低溶剂的消耗。如今，微型化液相色谱更容易使用，它的仪器操作和连接方式均与常规液相色谱系统一样。这为微型化液相色谱特别是毛细管和微流液相色谱应用于新的工作流程和应用领域提供了更多机会。 关键词 RSLCnano、纳升液相色谱、毛细管液相色谱、微流液相色谱、质谱、nanoViper 引言 微型化液相色谱技术的发展始于约三十年前，1987 年出现了首批商品化产品。随着时间的推移，纳升液相色谱成为生物分析研究不可或缺的工具，尤其是在要求最高级别灵敏度的蛋白质组学领域。然而，随着纳升液相色谱在蛋白质组学实验室中的日常应用，人们有时会遗忘灵敏度提高的原理。了解这些原理及其实际影响有助于帮助人们看到微型化液相色谱将如何为蛋白质组学、生物分析等带来益处。 灵敏度 - 尺寸因素 为了解内径较小的色谱柱会使灵敏度增加这一点，首先必须明确样品浓度和样品量之间的差异。这可以归纳如下： • 液相色谱的样品进样是指一定体积的某浓度样品的注入 - 这是一个固定量：例如 1 μL 1 pmol/μL = 1 pmol • 进样时，这个样品固定量被液相色谱系统稀释 - 这将得到一个新的浓度 • 在相同进样量情况下，较小体积的液相色谱将产生较高浓度 - 与大内径色谱柱相比，内径较小的色谱柱灵敏度更高 图1. 相同进样量在液相色谱系统中的浓度不同 图1 显示了在内径分别为4.6 mm 和 75 μm 的色谱柱上注入相同进样量（四条“肽”），显然后者的浓度更高些。相对增加的灵敏度可以采用公式1 计算。 光学检测器（如紫外检测器）和电喷雾质谱仪属于浓度敏感型仪器。它们的信号与从色谱柱洗脱峰中样品的浓度成正比。 图2 绘制了不同直径的色谱柱较直径为4.6 毫米的色谱柱的灵敏度相对增加（按
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Q Exactive Focus 结合 Compound Discoverer实现泮托拉唑杂质谱分析
作者：德尔塔 日期：2022-04-21
药物杂质鉴定新流程 — Q Exactive Focus 结合 Compound Discoverer 实现泮托拉唑杂质谱分析 关键词 药物杂质鉴定；Compound Discoverer；Q Exactive Focus；静 电场轨道阱高分辨质谱 1.引言 任何影响药物纯度的物质统称为杂质。人用药物注册技术要求 国际协调会（简称 ICH）对杂质的定义为药物中存在的，化学 结构与该药物不一致的任何成分。药物中含有杂质会降低疗 效，影响药物的稳定性，有的甚至对人体健康有害或产生其他 毒副作用。因此，检测有关物质，控制纯度对确保用药安全有 效，对保证药物质量非常重要。 质谱技术因其快速、高灵敏度和高专属性的分析能力，已经被广泛的应用于药物杂质鉴定，OrbitrapTM 静电场轨道阱高分辨 质谱具有超高的分辨率和长期稳定的高质量精度，可获得高质 量的一级和多级高分辨质谱数据，保证了鉴定结果的可靠性， 被越来越多的应用于定性分析中。 本文采用Thermo ScientificTM高效液相色谱-四极杆静电场轨道阱 Q Exactive™ Focus 高分辨质谱联用技术对药物泮托拉唑进行 了全面的杂质数据采集，利用高性能四极杆对目标化合物进行 高专属性选择，HCD 高能碰撞池进行二级碰撞碎裂，Orbitrap 静电场轨道阱采集一级和二级高分辨质谱数据。结合 Thermo 新一代的智能小分子化合物分析软件 Compound Discoverer™， 以高度灵活的自定义方式制定了泮托拉唑杂质分析工作流程（ 图 1）。 图 1. 基于 Q Exactive Focus 和 Compound Discoverer 的杂质鉴定流程 2.实验条件 2.1 液相色谱条件： 仪器：Thermo ScientificTM UltiMateTM 3000 超高效液相色谱仪 色谱柱：Hypersil Gold C18 (100×2.1 mm, 1.9 µm) 流动相：A 为水相：0.1% 甲酸水；B为有机相：乙腈梯度条件： 2.2 质谱条件 仪器：Thermo ScientificTM Q Exactive Focus 四极杆静电场轨道阱 高分辨串联质谱。HESI 离子源参数：Spray Voltage +3.5 KV、2.8 KV，快速正负切换；Sheath Gas Pressure: 40arb；Aux Gas
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蛋白提取的常见问题分析
作者：德尔塔 日期：2022-04-21
Q：如何进行组织液氮研磨？ A：将组织块在液氮里冻实，敲成大小合适的小块后放在研钵里，倒液氮，边研边加，保持研钵里有液氮，或是保持组织块不融。研碎了就行了。注意做前研钵等器具要预冷，用液氮或是先放负二十冰箱一段时间。 注意事项：1.液氮研磨的研钵，药勺必须预冷。2.开始研磨前，将研钵置于冰袋上，并加入少量的液氮，快速将样品转入其中。3.继续加入液氮，快速捣碎样品，然后快速研磨。4.待液氮挥发完前，继续加入液氮，快速淹没，重复操作，待样品变成非常细小的白色干粉时即可。5.将干粉刮下转入裂解液中，再加裂解液于研钵中，将其中的黏附的样品洗下。整个过程保持样品处于温度低的环境，研磨的速度要快而有力度。这样才能破碎细胞，同时不降解蛋白。 Q：膜蛋白不溶于loading buffer，或者煮沸后形成沉淀怎么办？ A：用60度变性1h；如果还是不行，把loading buffer的SDS换成LDS。 Q：多少细胞提的蛋白够做western blot？ A：一般5×106足够。但要看是哪种细胞，有的细胞的体积就很小，而有的细胞则铺得很开。常规做WB一个孔道上样要105个细胞。但也和目的蛋白及提取的方式有关。如果是膜蛋白或是某细胞器内分布的蛋白细胞数得增多。 Q：同一蛋白样品能同时进行两种因子的Western Blot检测吗？ A：可以，甚至可以同时测十几种样品。 Q：蛋白提取后可以存放多久？ A：－80℃，一年没有问题。关键两条：不要被蛋白酶水解掉；不要被细菌污染 Q：提取蛋白后做WB一般一次上样的蛋白总量是多少，跟目的蛋白的表达量有关系吗？ A：Western Blot一般上样30－100微克不等，结果跟目的蛋白的丰度、上样量、一二抗的量和抚育时间都有关系，也与显色时间长短有关。开始摸条件时，为了拿到阳性结果，各个步骤都可以量多一点时间长一点，当然背景也就出来了。要拿到好的结果，如果抗体好的话比较容易，抗体不好的话就需要反复地试了，当然有的不适合Western Blot的怎样做也不行。所以拿到好的结果不容易。 Q
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质谱法进行高通量蛋白鉴定的主要方法介绍
作者：德尔塔 日期：2022-04-21
蛋白质组（Proteome）指由一个基因组或一个细胞、组织表达的所有蛋白质。蛋白质全谱分析目的在于鉴定样本中尽可能多的肽和蛋白质混合物的组分。基于质谱技术的全谱鉴定，可为蛋白高通量的定量和修饰分析提供参考信息。传统的方法如蛋白质微量测序、氨基酸组成分析（如Edman降解法）费时费力、通量低，存在不容易实现规模化和自动化，结果灵敏度差等问题。当前主流的基于软电离技术的液相色谱-质谱系统（LC-MS/MS）是实现高通量蛋白鉴定的主要方法。 其基本原理是：首先将纯化后的蛋白质用消化酶（如胰酶）水解成肽段，肽段混合物经过除盐后首先进入液相色谱，实现初步分离，以降低样品复杂度。经液相色谱分离后的肽段先经过质谱的第一级--离子源（ESI，MALDI）使肽段离子化并形成分散的离子。接着选择部分强度较高的肽段母离子进入质谱的第二级系统（碎裂源）做进一步碎裂，使肽段离子被打碎成更小的、有规律的碎片离子。理论上蛋白质序列经过酶解后形成肽段，肽段再经过理论二级碎裂形成理论的二级碎片离子谱图。然后用实验产生的MS/MS谱图信息（主要包括质荷比、离子强度）与理论产生的MS/MS谱图信息比对，通过比较两者的相似度来确定谱图对应哪个肽段/蛋白（如图1）。其中理论蛋白质数据库来自基因组预测或前期实验验证等数据。 目前，常用的数据库有NCBI-nr（ http://www.ncbi.nlm.nih.gov/） 、Uniprot（ http://www.uniprot.org/）等。常用的搜索引擎有Mascot（ http://www.matrixscience.com/） 、Proteinpilot （http://www.absciex.com/products/software/proteinpilot-software）。Mascot一度被业界奉为鉴定软件的金标准，但其算法更偏向于鉴定长度较短的肽段序列。而Proteinpilot由于采用自动容错匹配、对所有可能的蛋白修饰采用了盲搜的策略，无肽段长度偏向性，鉴定效果更好。 图1 蛋白质组鉴定流程图 1、通量大：一次实验可鉴定6000多种蛋白质（以人HepG2为例）； 2、结果准确可靠：质谱仪的质量
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定量蛋白质组学方法分类介绍
作者：德尔塔 日期：2022-04-21
【蛋白研究系列专题】-4丨定量蛋白质组学方法，您值得拥有 1 背景和意义 从生命活动的直接执行者——蛋白质的角度研究生命现象和规律（特别是疾病防治和病理研究）已成为研究生命科学的主要手段。而这些研究往往离不开对细胞、组织或器官中含有蛋白质种类和表达量的研究。对处不同时期、不同条件下蛋白质表达水平变化的研究，识别功能模块和路径，监控疾病的生物标志物，这些研究都需要对蛋白质进行鉴定和定量。生物质谱技术的出现和不断成熟为蛋白质差异表达分析提供了更可靠、动态范围更广的研究手段。基于质谱技术，科学家们不断开发出新的定量蛋白质组学方法，来了解细胞、组织或生物体的整体蛋白质动力学。 2 方法学介绍 目前较主流的定量蛋白质组学方法有5种，分别是Label-free、iTRAQ、SILAC、MRM(MRMHR)、和SWATH。简述如下： 2.1 Label-free Label-free定量，即非标记的定量蛋白质组学，不需要对比较样本做特定标记处理，只需要比较特定肽段/蛋白在不同样品间的色谱质谱响应信号便可得到样品间蛋白表达量的变化，通常用于分析大规模蛋白鉴定和定量时所产生的质谱数据。 Label-free操作简单，可以做任意样本的总蛋白质差异定量，但对实验操作的稳定性、重复性要求较高，准确性也较标记定量差。因此，Label-free技术适合于大样本量的定量比较，以及对无法用标记定量实现的实验设计。 2.2 iTRAQ iTRAQ定量是目前定量蛋白质组学应用最广泛的技术， 该技术的核心原理是多肽标记和定量，将多肽的含量转化为114、115、116和117同位素的含量(或113、114、115、116、117、118、119和121的8标记)，从而简化了定量的复杂性，最终通过多肽定量值回归到蛋白的定量值，从而最终测定出不同样本之间蛋白质的差异。 iTRAQ定量不依赖样本，可检测出较低丰度蛋白，胞浆蛋白、膜蛋白、核蛋白、胞外蛋白等，且定量准确，可同时对8个样本进行分析，并可同时得出鉴定和定量的结果，特别适用于采用多种处理方式或
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蛋白质组学几种定量方法的案例解读
作者：德尔塔 日期：2022-04-21
上期分享的蛋白组学内容，是不是有些小伙伴还绕在云里雾里呀？这次，小编用实例说话，帮您梳理清楚。 一、Label-free定量 Label-free定量，顾名思义就是不需要对比较样本做特定标记处理，只需要比较特定肽段/蛋白在不同样品间的色谱质谱响应信号便可得到样品间蛋白表达量的变化，通常用于分析大规模蛋白鉴定和定量时所产生的质谱数据。 Label-free技术又可分为基于谱图数（Spectra Count，简称SC）和基于肽段母离子强度（或色谱离子流的峰面积即XIC）两种方法，后者更准确，使用更广泛。 技术特点 无需标记，操作简单； 不受比较样品数限制； 对实验操作稳定性、重复性要求高； 准确性较标记定量差； 要求至少做三次技术重复或生物重复。 适用范围 适合大样本量的定量比较； 对无法用标记定量实现的实验设计，易用label-free技术； 经典案例 题目：Label-free global serum proteomic profiling reveals novel celecoxib-modulated proteins in familial adenomatous polyposis patients（利用Label-free定量技术进行家族性腺瘤息肉病患者血清的全蛋白质组分析，寻找Celecoxib调控蛋白） 期刊：Cancer genomics proteomics 主要技术：Label-free定量 文章摘要：Celecoxib是一种环氧合酶选择性抑制剂，能够对患有预防家族性腺瘤性息肉病（FAP)和散发性大肠癌的病人进行防治。为了识别其具体的作用机制，本文采用多维色谱分离方法结合电喷雾串联质谱，使用Label-free定量技术，比较经Celecoxib处理前、后血清样品的蛋白质组表达量差异。发现了83个可能为Celecoxib响应的表达量显著差异蛋白。通过Western blotting方法，在FAP病人和结肠直肠癌细胞系中进一步确认了一些Celecoxib调控蛋白，为进一步进行Celecoxib作用机制的大规模临床试验奠定了基础。 图：Apo A-II蛋白中特征肽的定量结果比较 注：AB为处理前，CD为处理后 Fatima N, Chelius D et al. Label-free global serum proteomic profilin
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SWATH技术常见问题与解答
作者：德尔塔 日期：2022-04-21
SWATH（Sequential Window Acquisition of all THeoretical Mass Spectra）采集模式是苏黎世联邦理工学院及AB SCIEX（全球领先的生命科学分析技术公司）的科学家联合推出的一项基于质谱应用的新技术。利用此项技术，科学家有史以来首次可以获得单独蛋白质组学样品分析中每个肽段的数据。 Q: SWATH技术的原理是什么？ A: SWATH是MS/MSALL技术的扩展，其采集模式是一种新型的MS/MS扫描技术，将扫描范围划分为以25Dalton为间隔的一系列区间，通过超高速扫描来获得扫描范围内全部离子的所有碎片信息。 Q: SWATH技术有哪些特点？ A：灵敏度高——SWATH技术继承了MRM的数据采集模式，结合高分辨率的Triple-TOF 5600 plus质谱系统，具有与MRM相当的灵敏度； 可重现性高——重复样品间的定量相关性可达到0.99以上； 定量准确度高——定量准确度几乎与MRM技术相当； 线性动态范围广——定量范围可跨越4个数量级； Q: SWATH技术可以应用于哪些方面？ A: SWATH技术可以用于蛋白质组定量、蛋白复合体的鉴定和宿主蛋白（HCPs）分析。 蛋白质组定量——对细胞、组织或器官中含有的不同时期、不同条件下蛋白表达水平的研究，生物标志物的寻找都需要对蛋白质进行鉴定和定量。SWATH定量方法基于提取Transition峰面积计算出肽段含量，通过肽段含量推理出蛋白质含量的方法。SWATH定量应用到proteome-wide水平就产生了SWATH定量蛋白组，以此方法为基础可以迅速锁定几个样品间的差异蛋白质。 蛋白复合体的鉴定——在所有细胞功能中，蛋白质间的相互作用是最基本的活动。采用TAP技术将目标靶蛋白的相互作用蛋白特异性富集，然后结合具有高灵敏度、高准确度、高通量等特点的SWATH定量，能够高特异性的准确富集到靶蛋白的特异性相互作用蛋白，实现复合蛋白质的准确鉴定。 宿主蛋白（HCPs）分析——质谱能够在快速有效分析HCPs的同时确保更好的准确度，TripleTOF系统搭配SWATH采集模式分析HCPs，可以全面、准确定量分析的同时获得MSMS信息，一次进
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TSQ Endura LC-MS/MS与TraceFinder软件用于440种农残同时定量的高通量分析
作者：德尔塔 日期：2022-04-21
一站式流程化农残检测解决方案：TSQ Endura LC-MS/MS 与 TraceFinder 软件用于蔬菜基质 中 440 种农残同时定量的高通量分析 1.前言 近些年来，此起彼伏的食品安全事件引起了人们强烈的关注，持续不断地严格加强食品安全监管已经成为全社会最大的共识，这直接刺激了限量标准更严格、体系架构更严谨完备的 食品安全标准的诞生与升级。在中国，新版GB2763-2014《食品中农药最大残留限量》国家标准已正式颁布实施，它连同日 本的肯定列表制度（positive list system）、欧盟的EU/EC 指 令条例No.752/2014 等一道，共同构成了各国严格的食品安 全监管法规标准体系。相较于上一版，新国标2763-2014 收 录的农残种类与最大残留量指标（MRLs）都有了较大的扩容增项，这无疑对相应的农残检测手段提出了更高更严格的技术要求。时至今日，食品安全领域中的工作常态已然转变为对复杂基质中数百计的多农残项目同时进行高灵敏度、高特异性的高通量检测，这种业态转变需要质谱技术的革新，也需要测试解决方案的完善。 TSQ Endura LC-MS/MS是基于主动离子管控技术（Active Ion Management，AIMTM）开发的全新一代液质联用系统，它 通过S-lens射频透镜组、中性粒子挡杆、HyperQuad四极杆、 主动离子碰撞池、双模式离散打拿极检测器等集成创新（图1），使得仪器对离子聚焦、传输、隔离、碰撞与检测等离子操控 环节得以实现了全新突破，赋予了其领先的灵敏度、高达 500 SRM/s 的扫描速度与出色的稳健性，从而能全面满足复杂基质中多农残高通量检测的各种技术挑战，在食品安全领域中具有广阔的应用空间与使用价值。 本文展示了一种以 TSQ Endura MS 为平台、以 TraceFinderTM软件为流程化驱动引擎的一站式农残检测解决方案，并将其用 于菜椒基质中 440 种农残同时定量的高通量检测分析。 图 1. 创新的 TSQ Endura MS 质谱仪硬件构造示意图 1.实验条件 2.1 样品制备 实验使用的农残标样由Ultra Scientific 公司提供（Rhod
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TSQ Endura针对《中国药典》 2015 年版药材阿胶、鹿角胶、龟甲胶的鉴别方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-21
概要 该方法参考《中国药典》 2015 年版中药材阿胶、鹿角胶、龟甲 胶鉴别方法而开发的液相串联质谱（LC-MS/MS）检测方法。 本方法完全能够满足《中国药典》 2015 年版阿胶、阿胶珠、鹿角胶和龟甲胶药材鉴别方法对于灵敏度和重现性的要求。 鉴别原理 取药材粉末 0.1 g ，使用 1% 的碳酸氢铵溶液超声提取，向续滤液中加入过量的胰蛋白酶，恒温酶解。使用液相串联质谱仪（LC-MS/MS）检测酶解液中指定的特征选择反应监测离子 对，色谱峰信噪比均应大于 3:1，并同时呈现与对照药材色谱保留时间一致的色谱峰。 样品前处理 检测仪器 串联质谱联用系统：Thermo ScientificTM TSQ Quantum Access MAXTM 三重四极杆质谱仪 高效液相系统：UltiMateTM 3000 Rapid Separation LC Systems 快速分离液相系统 检测实例 1.对照药材阿胶、龟甲胶和鹿角胶的典型色谱图 2.药材阿胶、阿胶珠与阿胶对照药材的典型色谱图比较 可以观察到下图中，Fig.4B 药材阿胶（购自北京同仁堂）和 Fig.4C 药材阿胶珠（购自北京同仁堂）的色谱峰信噪比均应大于 3:1， 并同时呈现与 Fig.4A 阿胶对照药材色谱保留时间一致的色谱峰。 3.疑似假龟甲胶药材和疑似假鹿角胶药材与对照药材的典型色谱图比较 可以观察到下图中，Fig.5B 疑似假龟甲胶药材（购自某药材市场）色谱图中，不存在与 Fig.5A 龟甲胶对照药材色谱保留时间一致 的色谱峰；同理，Fig.6B 疑似假鹿角胶药材（购自某药材市场）色谱图中，并不存在与 Fig.6A 龟甲胶对照药材色谱保留时间一致 的色谱峰。 3.结论 综上所述，由 Thermo ScientificTM TSQ Quantum Access MAXTM 三重四极杆质谱仪和 UltiMate™ 3000 Rapid Separation LC Systems 快速分离液相系统构成的高效液相色谱-质谱联用仪系统完全可以满足《中国药典》 2 0 1 5 年版对于中药材阿胶、鹿角胶、龟甲 胶鉴别方法的要求。
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TSQ 8000 Evo 检测橡胶及弹性体材料中11 种亚硝胺
作者：德尔塔 日期：2022-04-21
李春丽 彭兴 赛默飞世尔科技（中国）有限公司 前言 N-亚硝基化合物是一类很强的化学致癌物质，包括亚硝胺和亚硝酰胺两大类物质，通常泛称为亚硝胺。超过300 多种N-亚硝基化合物在一种或多种动物身上显示出具有致癌作用[1]，并且40 多种动物包括灵长类都是易于感染N-亚硝基化合物而引起癌症，而且这类强致癌物质在实验动物体上诱导出的肿瘤在形态学特点与生化特点上都与相应的人体器官上发现的肿瘤相似[2]。美国环境保护局（USEPA）认为N-亚硝基二甲胺（NDMA）在极低的浓度（0.7 ng/L）下就会致癌，已将其列为优先控制污染物[3]。许多国家及国际组织都对相应制品中N-亚硝基胺的检测制定了严格的标准[4][5][6]，如中国出台了GB28482-2012 《婴幼儿安抚奶嘴安全要求》；欧盟《玩具安全新指令》（2009/48/EC）中，对其中的N-亚硝基胺含量及迁移量有着极为严格的规定。同时，与该指令配套的欧盟协调标准EN71-12 要求至少检测13 种N-亚硝基胺，包括脂肪族亚硝胺、脂环族亚硝胺及芳香族亚硝胺等。 因此开发出快速、灵敏和准确的N-亚硝胺化合物的测定方法，对卫生检测、削减和控制亚硝胺含量的研究是迫切需要的。使用GC-MS/MS 检测N-亚硝胺，已有一定程度的应用[7][8]。赛默飞世尔科技的串接气质联用TSQ 8000 Evo 具有高灵敏度、背景干扰小、稳定性高等特点。本文以TSQ 8000 Evo 为平台建立了橡胶及弹性体材料中11 种N-亚硝基胺GC-MS/MS 检测方法，结合赛默飞世尔科技特有的TraceFinder 软件系统进行数据采集、数据分析和报告输出，实现了数据的快速采集及数据结果的智能处理。为N-亚硝基胺的痕量检测提供了强而有力的技术支持。 1. 实验部分 1.1 仪器和试剂 质谱仪：TSQ 8000 Evo 质谱仪（赛默飞世尔科技，美国）； 气相色谱仪：Trace 1310 气相色谱配AI 1310 自动进样器（赛 默飞世尔科技，美国）； 色谱柱：TR-5MS（30 m×0.25 mm×0.25 μm）毛细管色谱柱； 试剂：正己烷，丙酮，甲醇；均为色谱级 1.2 实验方法 1.2.1 气
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锐博生物：特定的tRNA基因的表达促进肿瘤转移
作者：德尔塔 日期：2022-04-21
Cell重大发现：tRNAs促进肿瘤转移 转运RNAs（tRNAs）最初被认为是基因表达的静态参与者，但是6月2号，洛克菲勒大学的H. Goodarzi研究团队在Cell上发表的文章证明，tRNA也是基因表达的动态调节器，可影响疾病进展。接下来让我们一起来看看他们的研究成果吧。 H. Goodarzi研究团队发现，在人类乳腺癌中，某些特殊的tRNAs表达水平上升会使细胞获得转移能力。通过相关实验表明，tRNAGluUUC与tRNAArgCCG是乳腺癌转移的助推因子。这些tRNAs的增多会增强稳定性与转录物的核糖体结合性，这些转录物富含同源密码子。特别是tRNAGluUUC通过直接增强EXOSC2表达与增强GRIPAP1来构成一条受tRNA驱使的“可诱导”通路，从而促进癌症转移。tRNA因此成为了基因表达的动态调节器，而tRNA密码子谱则能影响疾病进展。 在这个研究中，研究者设置了5种不同人类细胞株实验组。这5种细胞分别是：非肿瘤的上皮细胞系，低转移性的乳腺癌细胞系MDA-231与CN34，以及与他们对应的高转移性亚株MDA-LM2、CN-LM1a。 原来tRNAs表达会插手癌细胞转移 通过特殊的tRNA建库技术（此为本研究中的关键，详见原文），结合高通量测序得到的tRNA表达谱显示乳腺癌细胞株系中的tRNAs表达水平与那些非肿瘤细胞不同。研究者在MDA-231与CN34亲本癌细胞群体内选择具有高转移能力的细胞株，对比后发现它们在tRNAs丰度上具有相似改变。这些在tRNAs水平上的协同调节说明tRNAs在促进癌症进程中起指导作用。实验结果表明相比起亲本细胞，高转移性细胞（MDA-LM2与CN-LM1a）中的tRNAArgCCG与tRNAGluUUC不管在tRNAs前体水平、成熟tRNAs水平还是基因座都呈现出协同增加。那么tRNAArgCCG与tRNAGluUUC的增加意味着什么呢？研究者通过实验得到下面一个结论。 他们就是幕后推手: tRNAGluUUG与tRNAArgCCG 在MDA-LM2细胞中减少tRNAGluUUG与tRNAArgCCG水平会使细胞的转移能力下降；反之，过表达tRNAGluUUG与tRNAArgCCG水平会使原本低转移能力的细胞获得更强的转移能力。这些结果表
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液相色谱-串联质谱法定量分析和定性确认食品中400 多种农药残留
作者：德尔塔 日期：2022-04-21
食品中多农药及相关化学品残留量的测定 液相色谱- 串联质谱法定量分析和定性确认食品中400 多种农药残留 食品安全分析工作流程 赛默飞生命科学质谱不仅拥有深厚悠久的技术传统，而且不断锐意创新。在全系TSQ® 三重四极杆质谱仪上都使用了可以拟合出教科书般完美理论电场的真正的共轭双曲面的四极杆质量分析。自1980 年赛默飞推出世界上第一台三重四极杆MS/MS (TSQ®) 质谱仪以来，TSQ® 三重四极杆质谱仪广泛应用于环保、农业、检疫、食品安全等方面的快速分析测试，完全可以胜任农作物、畜禽产品、奶制品及相关加工食品中大批量样品日常法规检测项目分析测试，如食品中农药残留、兽药残留、真菌毒素、添加剂、营养强化剂及有机污染物等项目，帮助您轻松应对日益严苛的法规检测要求。 TSQ® 三重四极杆质谱仪与赛默飞食品安全检测策略 概要 依照相关标准规定，对于水果、蔬菜等植物源样品中多种农药残留进行检测是在常规食品安全最为常见检测方法之一。本文参考GB/T 20769-2008 开发了快速检测多种农药残留的仪器方法，外标法定量。 前处理 相关试剂材料、标准品配置和储备、样品前处理方法，请参考上述标准，相关仪器方法请参考本文。另外，多农药残留检测，推荐使用QuEChERS 前处理方法。（TSQ 三重四极杆质谱简明应用手册--食品安全检测） 仪器 TSQ 三重四极杆液质联用系统配备有超高压液相系统。 液相条件 质谱条件 SRM 条件 实验结果 437 种农药检测的典型色谱图 正负模式切换扫描，保证每个色谱峰的扫描点数，获得可靠的定量结果。 一次进样，就可以获得同时定性定量的数据，利用QED/RER技术，获得二级全扫描谱图，搜库定性确认。 芦笋中添加水平为2 μg/kg 的苯线磷(fenamiphos)，轻松触发QED/RER 扫描，获得二级全扫描谱图，通过搜库确认定性检测结果。 结论 本方法完全能够满足国内和国际法规标准对于常规法规检测方法定量检测时灵敏度、重现性的要求。采
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