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三重四极杆气相色谱质谱联用法测定水产品中6种多氯联苯
作者：德尔塔 日期：2022-04-22
1.前言 多氯联苯（PCBs—polychlorinated biphenyls）是一类苯环上与碳原子连接的氢被氯取代的联苯化合物，拥有 209 个异构体和同系物，是环境持久性有机污染物之一，被列为斯德哥尔摩公约中优先控制的12类持久性有机污染物之一。PCBs是重要的内分泌干扰物，具有致畸、致癌和致突变性，是危害人类健康的重要有机污染物。与常规污染物不同，该类持久性有机污染物在自然环境中极难降解，并能通过水或空气等载体转移，导致了在全球范围的污染传播。 目前，对 PCBs 的检测处理大多采用气相色谱仪或气质联用仪。但气相色谱法检测的选择性和特异性差，气质联用法的前处理过程繁琐，检出限高，两者都不能满足复杂基质痕量残留检测的要求，因此需要研究抗干扰能力、定性能力和检出限都能满足需要的痕量检测技术。 本文介绍了采用全新一代三重四极杆气相色谱质谱联用仪分析检测水产品中6种多氯联苯的方法，通过二级质谱扫描充分减少了在复杂基质样品中的背景干扰影响，提高了目标化合物的检测灵敏度，该方法具有灵敏度高、稳定性好、线性范围宽等优点。 2.实验部分 2.1仪器和试剂 质谱仪器：Thermo Scientific TM TSQ 8000 Evo 质谱仪（，美国)； 气相色谱仪：Thermo Scientific TM Trace1310 GC 配 AI l310 自动进样器（，美国）； 色谱柱：TG-5MS 30 m*0.25 mm*0.25 µ m 毛细管色谱柱； 试剂：二氯甲烷、丙酮、正己烷（农残级）； 2.2仪器方法 气相方法： 柱温箱：60 ºC 保持 1 min，以 20 ºC/min 升至 300 ºC，保持 5 min； 进样口：不分流进样，不分流时间：1 min； 衬管：惰性不分流（货号：453A1925），进样口温度为 270 ºC； 载气：恒流，1 mL/min；传输线：300 ºC。 质谱方法：离子源温度为 300 ºC，采用 Acquisition-Timed 方法，SRM 扫描，具体检测离子对如表 1 所示： 2.3前处理方法 2.3.1提取 准确称取匀质后的鱼肉试样5.0 g（精确至0.01 g），置于50mL带螺旋盖的聚丙烯离心管中，加入 8 mL 水，
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气相-三重四极杆串联质谱分析环境样本中的有机氯、多环芳烃及多氯联苯类物质
作者：德尔塔 日期：2022-04-22
Inge de Dobbeleer, Joachim Gummersbach, Hans-Joachim Huebschmann, Anton Mayer, Paul Silcock Thermo Fisher Scientifc, Dreieich, Germany 关键词 有机氯类农药；多氯联苯类；多环芳烃类；土壤样本；水样本；建筑材料；重现性；线性 实验目标 应用气相-三重四极杆串联质谱（GC-MS/MS）分析多种环境基质中的半挥发性化合物，以展示仪器的测试效率及相应的高品质测试结果。 前言 有机氯类农药（OCPs）、多环芳烃类化合物（PAHs）和多氯联苯类化合物（PCBs）是常规环境分析实验室以及外包检测实验室中一类常见的目标测试物。这些实验室为分析各类环境基质中的上述化合物开发了多种测试方法。 气相-质谱联用技术（GC-MS）非常适用于 OCPs、PAHs 和 PCBs的分析。与传统检测器如高效液相-紫外荧光检测器（HPLC-UVF）、气相-电子捕获检测器（GC-ECD）、气相-火焰离子检测器（GC-FID）相比，环境分析实验室应用气相-单四极杆质谱显著提高了这类化合物的检测灵敏度。这在一定程度上有效简化了样本前处理步骤，提高分析效率，从而降低实验室成本。相对于 GC-MS，GC-MS/MS 的测试灵敏度进一步显著提升。 这极大提高了仪器避除基质化学物质背景（即干扰物质）影响的能力，从而提高环境分析实验室的测试通量。这项技术已被越来越多的环境分析实验室所应用，以提升其竞争力。不幸的是，对于刚刚开始接触GC-MS/MS仪器的实验室来说，接受此项技术的主要挑战来源于在如何在不影响实验室的连续运行的前提下，实现高通量测试。 1,2 本篇应用报告主要描述了应用 Thermo Scientific™ TRACE™1310 气相色谱仪联用 TSQ™ 8000 三重四极杆质谱检测器对环境样本中的 OCPs、PAHs 和 PCBs 实现高效、高通量分析的方法，同时展示了在建立测试方法和数据处理流程中应用智能软件工具使实施、维护整个测试流程所消耗的时间最小化。 实验条件 样本前处理 水样本 向 1L 样本中加入正己烷震摇混合。待水相和有机相分离后，取有机相并加入无水硫
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气相色谱三重四极质谱联用法测定水产品中7种多溴联苯醚（PBDEs）
作者：德尔塔 日期：2022-04-22
摘要 本文建立了一种运用三重四极杆气质联用仪（GC-MS/MS）来检测水产品中多溴联苯醚的分析方法。试样中加入内标物BDE-77 后进行索氏提取，提取液经自动 GPC 系统除脂，多层硅胶层析柱净化后，在 15 m 长的毛细管气相色谱柱上分离，采用 GC-MS/MS 的多反应监测模式（Timed-SRM），以保留时间和离子对（母离子和子离子）信息来定性，以响应值高的离子对进行定量。结果表明，该方法的检测限为 0.1 pg/ul，相对标准偏差为 2.29-5.58%。 前言 多溴联苯醚（polybrominated diphenyl ethers，PBDEs）属于溴代阻燃剂（brominated flame retardants， BFRs）的一种，由于其优良的阻燃效率、热稳定性而被广泛地应用于建材、纺织、化工、电子电器等行业 . 近 10 年来全世界对 PBDEs 的需求量大幅增加，我国自 20 世纪 80 年代初以来， 十溴联苯醚已经成为国内产量最大的含溴阻燃剂。 作为一种添加型的阻燃剂，PBDEs 易于从产品中特别是在电子废品堆放及回收利用过程中向环境中释放 .1981 年在瑞典的梭鱼、鳗鲡和海鳟中发现了PBDEs 的存在[1] ，之后又在海鱼、贻贝、底泥中检测到了 PBDEs [2] .1987 年，Jansson 等人[3]首次提出把 PBDEs 归结为一类全球性的环境污染物，自此不断有报道从空气、水和人体中检出PBDEs，并且最近几年在世界范围环境中其含量呈快速上升趋势[4~8] . 一个对瑞典母乳中 POPs 比较详细的调查显示， 母乳中其他 POPs 如多氯联苯从 20 世纪 70年代至 90 年代呈减少趋势， 但是 PBDEs 含量一直处于递增趋势 [9] . 此后，欧洲、北美、日本、中国等地区相继开展了关于人体中 PBDEs 污染的研究。 本研究采用自动 GPC 结合多层硅胶层析柱净化技术进行样品的前处理－气相色谱三重四极杆质谱，建立测定水产品中多溴联苯醚的方法。本文介绍了采用全新一代三重四级杆气相色谱质谱联用仪（TSQ 8000）分析检测水产品中7种多溴联苯醚的方法。通过二级质谱扫描大大降低了复杂基质样品中的背景干扰影响，提高了目标化合
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Exactive Plus EMR 高分辨质谱仪实现非变性状态ADCs 药物的分析
作者：德尔塔 日期：2022-04-22
1 前言 单克隆抗体被认为是具有高度特异性的靶向药物，其对肿瘤细胞的靶向性非常高。而抗体- 药物偶联物（Antibody-drug conjugates，以下简称ADCs）技术，就是在抗体蛋白的特定氨基酸上偶联具有抗肿瘤作用的高效应化疗药物（或称小分子药物），以增加单克隆抗体的疗效、并降低小分子药物的毒性。相比单克隆抗体，ADCs 药物的生产工艺更为复杂，因此为了保证ADCs 药物的安全性和有效性，需对ADCs 药物的质量进行监控。药物抗体比（drug to antibody ratio，以下简称DAR）是评价ADCs 药物的生产工艺和产品质量的一个重要参数。目前大部分上市和在研ADCs 药物主要包括基于抗体自身的赖氨酸进行偶联的ADCs 药物（lysine-linked ADCs）和基于抗体自身链间二硫键经还原后的半胱氨酸进行偶联的ADCs 药物（cysteine -linked ADCs）（图1）。两类ADCs 的DAR 测定通常有UV、HIC和MS三种方法，其中MS检测方法因其快速、灵敏度高和强大的定性功能等优点，愈来愈广泛地被用于测定ADCs 的DAR。目前MS 用于测定ADCs 的DAR 通常是基于传统的RPLC/MS 平台，该平台下RPLC 采用的流动相呈酸性，且含有较高浓度的乙腈，蛋白在此条件下大多发生变性， 因此测定结果严格意义上讲反映的是ADCs 变性后的DAR。对于lysine-linked ADCs 而言，上述变性条件不影响其抗体结构的完整性，故RPLC/MS 平台不影响其DAR 测定。然而， 对于cysteine-linked ADCs 而言，上述变性条件破坏了维持抗体空间结构的非共价作用，ADCs 部分解离其轻链或重链，故RPLC/MS 平台无法用于其DAR 测定。随着非变性质谱（Native MS）技术的不断发展和推广，采用非变性质谱进行cysteine-linked ADCs 分析显示了强大的应用潜力。 Thermo ScientificTM ExactiveTM Plus EMR 质谱仪保持了Orbitrap 高分辨率、高质量精度的优势，同时扩展质量数范围至m/z 20000，并且在硬件设计上提升高质量端离子的传输效率，改进了HCD 压力，使其更加适用于完整蛋白质的分析。 适用于保留有三
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气相色谱/三重四极杆质谱内标法用于酒类产品中17种邻苯二甲酸酯的检测分析
作者：德尔塔 日期：2022-04-22
1. 前言 近年来，由于塑料制品在全球范围内的广泛使用，邻苯二甲酸酯(Phthalic Acid Esters，简称PAEs) 已成为全球最普遍的污染物之一。PAEs 不是食品添加剂，严禁违法添加到食品中。卫生部在发布的 2011 年第 16 号公告中，已将邻苯二甲酸酯类物质列入第六批“食品中可能违法添加的非食用物质”黑名单中。大量研究证实，PAEs 在人体内的残留将严重的影响到人类的生殖系统、免疫系统和神经系统，使生物体内激素不能正常分泌，导致细胞突变、致畸和致癌等危害。 本文采用全新一代三重四极杆气相色谱质谱联用仪（TSQ 8000）内标法分析检测酒产品中 17 种邻苯二甲酸酯的方法。通过二级质谱扫描充分减少了在复杂基质样品中的背景干扰影响，提高了目标化合物的检测灵敏度，同位素内标方法会减少仪器稳定性的影响，抵消提取过程的干扰影响，该方法具有检测限低，稳定性好，线性范围广等优点。 2. 实验部分 2.1 仪器和试剂 仪器：TSQ 8000 气相色谱 - 三重四极杆质谱仪 ( ，美国 ) 色谱柱：TR-5 MS 30 m×0.25 mm×0.25 µm 毛细管色谱柱 试剂：正己烷，农残级 白酒：自购于超市 2.2 仪器方法 气相方法： 柱温箱：60ºC 保持 1 min，以 20ºC/ min 升至 220ºC，保持1 min，再以 5ºC/min 的速率升至 290ºC，保持 3 min； 进样口：不分流进样，不分流时间 1 min，进样口温度为250ºC；载气：恒流，1 ml/min；传输线：280ºC 质谱方法：离子源温度为280 ºC，采用 Acquisition-Timed 方法， SRM 扫描，具体检测离子对如表 1 所示： 2.3 前处理方法 称取酒类样品2克，加入1 ml乙酸乙酯：乙醚 =1:1的溶液，摇匀。然后加入 4 毫升的水，震荡 3 分钟后，加入 3 克无水氯化钠混匀，置于 5000 r/min 的离心机上离心分离 3 分钟，取上清液过无水硫酸钠干燥后，氮吹至干。然后加入 1 毫升正己烷复溶，过 0.22 µm 滤膜后，进 GCMSMS 分析。 注：整个处理过程必须在玻璃容器中进行，严禁使用塑料制品，防止处理样品过程中混入非样品中
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三重四极杆气质联用法（TSQ 8000）测定白酒中16种邻苯二甲酸酯类残留物
作者：德尔塔 日期：2022-04-22
1.前言 邻苯二甲酸酯类增塑剂是一类增加聚合物树脂的可塑性、增强制品柔软性的助剂，也是迄今为止产量和消费量最大的助剂种类，其中邻苯二甲酸酯类的使用最为广泛。邻苯二甲酸盐由于未聚合到塑料基质中，随着使用时间的推移，可由塑料中转移到环境中，造成污染。也可通过呼吸、饮食和皮肤接触直接进入人体，导致肝肾功能下降，具有致突变性、致癌性。全球已有很多国家通过立法限制使用邻苯二甲酸酯类增塑剂，包括欧盟 REACH 法规和美国的《消费品安全改进法》等。 增塑剂在食品安全引起关注，首先是 2011 年 5 月起台湾食品中先后检出 DEHP、DINP、DNOP、DBP、DMP、DEP 等 6 种邻苯二甲酸酯类塑化剂成分，药品中检出DIDP。截至6月8日，台湾被检测出含塑化剂食品已达 961 项。6 月 1 日卫生部紧急发布公告，将邻苯二甲酸酯（也叫酞酸酯）类物质，列入食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂名单。 近段时间，白酒中检测出塑化剂的风波再次引起大家的关注，白酒添加塑化剂则有可能是为了让年份不够的酒液看起来好看，增加各种增粘剂可固化伪造粮食酒内的糖分，产生粘杯挂杯的效果。但同时也有可能是白酒产品中的塑化剂属于特定迁移，主要是生产或包装过程中与塑料制品接触，塑化剂被酒精溶出所造成的。 目前国内颁布了 GB/T 21911-2008《食品中邻苯二甲酸酯的测定》的检测方法。本实验在此标准基础上，进行优化，采用水浴加热去除乙醇后，正己烷提取，采用全新一代三重四极杆气相色谱质谱联用仪（TSQ 8000）分析检测白酒中 16 种邻苯二甲酸酯的方法。通过二级质谱扫描充分减少了在复杂基质样品中的背景干扰影响，提高了目标化合物的检测灵敏度。 2.实验部分 2.1 仪器和试剂 质谱仪 : TSQ 8000 质谱仪 ( ，美国 )； 气相色谱仪：Trace1310 GC 配 AI l310 自动进样器 ( ，美国 )； 色谱柱 : TR-PesticideII 30 m* 0.25 mm* 0.25 µm 毛细管色谱柱（带 5 m 预柱）； 试剂：正己烷，农残级； 白
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微生态制剂的冷冻干燥技术
作者：德尔塔 日期：2022-04-22
实验室低温喷雾干燥设备和冷冻干燥设备是两款不同的机型，下面讲的冷冻干燥技术是用冷冻干燥设备。 冷冻干燥技术是将湿的物料或浓缩液在较低的温度（-10~-50℃）下冻成固态,然后在真空下使其中的水分直接升华成气态,最终使物料脱水干燥的技术。 冷冻干燥会对微生物细胞造成一定的损害。细胞在冻干过程中要经历冷冻和干燥两种因素的作用,可以导致细胞膜物理条件或者敏感蛋白结构的变化,使细胞的活力下降。 在冷冻干燥期间细胞内外的水分被冻结成冰,冰晶会造成细胞的损伤,。冻干会引起溶质效应,使细胞的水分溢出,酶蛋白和抑制失活,细胞膜发生膜渗透,使胞内物质与胞外水溶性物质无控制地进行双向交换,从而造成细胞的代谢损伤。 此外,冷冻干燥还会使细胞膜上的脂肪酸发生变化,细胞膜的完整性受到破坏。在物料进行冷冻干燥前加入一定比例的冻干保护剂,可以大大减少冻干对微生物细胞的损伤,还可以在菌剂的保藏过程中起到很好的保护作用。这类保护剂有甘油、氨基酸类、聚乙二醇类和糖饲用酵母菌的分离与筛选及微生态制剂的研制类保护剂等,。 冷冻干燥技术是一种优质的干燥方法,但是,它需要比较昂贵的专用设备,干燥时间长，干燥过程中的耗能较大,加工成本高。
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气相-三重四极杆联用技术筛查黄瓜中有机磷、有机氯及拟除虫菊酯类农药残留
作者：德尔塔 日期：2022-04-22
前言 蔬菜作为人们日常生活中必不可少的食品，其日常消费量和市场需求量巨大。蔬菜种植过程中，为了提高蔬菜的产量，改善其品质，施用农药不可避免，由于缺少施用常识及监管措施，在农药的使用过程中存在滥用、误用等不规范现象，种植者在农药的选择上往往倾向于价格低廉，且高效的农药，而忽略了农药毒性及高残留等问题；另外，为了提高果蔬的产量和质量，减少种植、采摘以及运输、存储过程中的损失，种植者经常多种高毒农药混配使用，而且加大了施药用量和频次，这不仅使得果蔬中农药残留超标，并且加重了农药在产区周边环境中的残留，形成了难以逆转的恶性循环。许多国家和国际性组织（CAC、欧盟、美国、日本和中国等）对农药的最大残留限量（MRLs）进行了严格的规定[1] 。蔬菜中农药残留问题，不仅成为食品安全领域面临的严峻挑战，而且也制约了我国蔬菜产品的进出口贸易[2][3] 。因此，农药多残留检测方法已成为国内及国际上的重点研究方向，许多检测技术也应运而生。 有机磷、有机氯、拟除虫菊酯类农药是常用农药，包括多种高毒、剧毒农药及我国禁用农药。我国已颁布了 GBNY/T 761-2008《蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定》 [4] 的检测方法。本实验参照此标准进行，采用全新一代三重四极杆气相色谱质谱联用仪（TSQ 8000Evo）结合对应的农药残留筛查方法包（670 种化合物质谱信息），对样品中含有的有机磷、有机氯、拟除虫菊酯类农药残留进行筛查，进而对其中含有的相应农药进行确证和定量。 实验部分 仪器和试剂 质谱仪：TSQ8000Evo 质谱仪 ( ，美国 )； 气相色谱仪：Trace1310 气相色谱配 AI 1310 自动进样器 ( ，美国 )； 色谱柱：TG-5SILMS 30 m×0.25 mm×0.25 μm毛细管色谱柱； 试剂：正己烷，丙酮； 仪器方法 色谱方法 程序升温梯度：40℃ ( 维持 1.5 min)， 25℃ /min 到 90℃ ( 维持 1.5 min)， 25℃ /min 到 180℃ ( 维持 0 min)，5℃ /min 到280℃ ( 维持
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利用双压线性离子阱质谱仪多重解离技术对API杂质谱进行全面分析
作者：德尔塔 日期：2022-04-22
Theresa Lynch 1 ; Kate Comstock 2 ; Jack Cunniff 2 1 Gilead Sciences, 333 Lakeside Dr, Foster City, CA; 2 Thermo Fisher Scientific, 355 River Oaks Parkway, San Jose, CA 前言 活性药物成分（API）和成品药的杂质分析是药物研发中不可或缺的一环。杂质的化学结构信息在评估毒性、改进合成途径，以及根据目标成药选择最佳剂型至关重要。为保证药效与消费者的安全，世界各国的监管机构都制定了药物杂质分析的指引，清楚说明基于日服用量、使用时间，和药物靶标的限量标准。 LCMS 已经成为最常用的未知杂质分析技术。为了能在大量母药中识别并表征痕量杂质，具有高灵敏度、高扫描速度，并且能进行多级质谱分析（MS n ） 的质谱仪必不可少。在本研究中，Sigma-Aldrich 所售的研究级阿德福韦酯（adefovir dipivoxil，ADP） 被用来作为模型化合物进行 API杂质分析。ADP 是广泛用于慢性乙肝病毒感染的一种抗病毒处方药。本研究中使用的 LCMS 系统由 Thermo ScientificAccela TM UHPLC以及 Velos Pro TM 双压线性离子阱质谱仪构成。碎片信息通过结合应用 CID 与 Trap-HCD 解离技术获得。数据处理通过软件 Mass Frontier TM 完成。 分析方法 材料与试剂 阿德福韦酯（Adefovir dipivoxil，CAS# 142340-99-6）从 Sigma-Aldrich 购得，产品号 A9730。 乙腈和水 （Fisher）；乙酸铵（Sigma-Aldrich，产品号73594-25G-F）；甲酸（Sigma-Aldrich，产品号 33015- 500ml）。 样品制备 ADP溶液，0.5mg/mL，用 1 ml 20 : 80 的乙腈和水混合溶剂溶解 0.5mg ADP 获得。 HPLC方法 HPLC系统：Thermo Accela 1250 泵，开放式 Accela 自动进样器及 Accela PDA 色谱柱： Hypersil GOLD C18 2.1×150 mm，3 µM， Thermo Scientific 产品号 071399 柱温：35 ℃ 流速：0.5 ml/ 分钟 进样体积：8 μl 流动相：A – 水，B – 乙腈，C - 100 mM 乙酸铵，用乙酸调至 pH 5 梯度洗脱： 时间（min） A% B% C%
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高低温低气压试验箱：低气压环境对产品性能的影响
作者：德尔塔 日期：2022-04-22
许多产品的试验报告及实地考察都反映出气压降低对产品性能有重要影响，气压降低对产品的直接影响主要是气压变化产生的压差作用。它对密封产品的外壳会产生一个压力，在这个压力作用下会使密封破坏，降低产品的可靠性。然而，气压降低的主要作用还在于因气压降低伴随着大气密度的降低，由此会使产品的性能受到很大的影响。对产品性能的影响主要有三方面。 1、散热产品的温升随大气压降低而增加 电工电子产品有相当一部分是发热产品，如电机、变压器、接触器、电阻器等。这些产品在使用中要消耗一部分电能变成为热能，这样产品会发热，温度升高。产品因发热而使温度升高，这温度升高部分称之为温升。散热产品的温升随大气压的降低而增加，随海拨高度的增加而增加。导致产品的性能下降或运行不稳定等现象出现。 2、低气压对密封产品的影响 低气压对密封产品的影响主要是由于大气压的变化形成压差。压差引起一个从高压指向低压的力。在该力作用下，使气体流动来达到平衡。而对于密封产品，其外壳将承受此力。此力可以使外壳变形、密封件破裂造成产品失效。 3、低气压对电性能的影响 海拨高度增加气压降低，对电工电子产品的电气性能也会产生影响。特别是以空气作为绝缘介质的设备，低气压对设备的影响更为显著。在正常大气条件下，空气可以是较好的绝缘介质，许多电气产品以空气为绝缘介质。这些产品用于高海拨地区或作为机载设备时，由于大气压降低，常常在电场较强的电极附近产生局部放电现象，称之为电晕。更严重的是，有时会发生空气间隙击穿。这意味着设备的正常工作状态被破坏。 高低温低气压试验箱是为电子工业、国防、航空航天及科研院所确定电子产品(包括元器件、材料设备、整机)在高低温低气压同时作用下,考核产品质量和可靠性的专用设备,同时可进行电气性能参数的测量以及贮运和使用的适应能力的多种试验。 文章出自北京雅士林试验设备有限公司
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无血清细胞培养基与血清细胞培养基哪个好？
作者：德尔塔 日期：2022-04-22
很难一句话来说。但可以从几个方面分别比较。 1. 产品性能方面 无血清培养基更好。 血清并不是生来就为养细胞而来的。血清是全血的一部分，组分很复杂，有150多种已知组分组分，多种未知组分。这些组分中，有些对细胞生长是有利的，有些对细胞生长是无作用的，有些对细胞生长反而是有害的。 另外，不同的牛，由于其体质不同，其血清中各种组分的差异很大。比如血清中的EGF，有的含量为10ug/ml，有的仅为2ug/ml，相差了5倍。有时你用的血清不好用，不是你的运气差，很多时候也不是厂家骗你。仅仅是因为，牛生来不是为了给人抽血养细胞的。这是没法子的事情。 而无血清培养基，绝大多数都是面向某一种细胞而设计的。比如CHO细胞、293细胞、昆虫细胞、杂交瘤细胞、T淋巴细胞、间充质干细胞（MSC）等。产品设计是基于对该细胞的认识去单独设计的配方，仅添加有正面作用的组分，不会去添加作用不明或有害的物质（没来由的增加成本的事情很难发生）。所以，无血清培养基的性能从根子上讲要好于血清培养基，并且会随着人们对该细胞认识程度的增进而进一步提升。 2. 产品安全性方面 这个就非常明显了。 无血清培养基，其配方的各种物质都是明确的。没有任何未知的组分。 如果全部选择非动物来源的组分，那么从根子上就不会有含有任何的病毒、以及任何未知的蛋白组分。安全性是明确的。 3. 产品价格方面 一般来说，价格是无血清培养基最大的劣势。但就目前来看确实也不能一概而论。 事实上，已经大规模工业化应用的无血清培养基，其价格已经跟血清培养基相当，有的甚至低于血清培养基。比如T淋巴细胞培养基（免疫细胞无血清培养基），价格已经达到了400元/L的水平。已经低于血清培养基了。这当然是好事了，现在市场上基本上培养T淋巴细胞的已经没有人用血清了。 价格下降的原因也比较简单。就是大规模的生产带来了原料成本的大幅下降。无血清培养基中成本最高部分为各种基因重组蛋白。随着生物反应器的规模从几十升
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化合物结构鉴定：UHPLC 联用Q Exactive Focus分析霉酚酸酯的降解产物
作者：德尔塔 日期：2022-04-22
引言 强制降解实验能揭示各种环境因素对原料药和制剂的影响。它能提供药品安全信息、确定推荐储存条件、保质期和分析方法的特异性。而降解产物的信息能帮助改进化合物或配方的发展。霉酚酸酯（MMF）的商标名称为骁悉（CellCept），是一种免疫抑制剂和霉酚酸（MPA）的前体药物。MMF 广泛的应用在**器官移植排异反应和自体免疫疾病的移植药物中，为本研究选择的模型化合物。 本文采用高分辨台式质谱仪 Q Exactive Focus 开发了一种快速可靠的分析霉酚酸酯降解产物的完整工作流程，采用HRAM全扫描和数据依赖 MS/MS 在高分辨率和极性切换模式下实现降解产物的快速鉴定。HRAM MS 和 MS/MS 谱图以及正/负离子模式切换，能可靠完成降解产物的定性和结构鉴定。 实验方法 液相色谱方法 UHPLC：Thermo Scientific Ultimate 3000 RSLC 色谱柱：Thermo Dionex Acclaim 2.1×150 柱 , 2.2 µm 柱温：35 ℃，流速：0.5 mL/min，进样体积：1 µL 流动相：A -0.1% 甲酸水溶液 B - 含 0.1% 甲酸的乙腈 梯度洗脱： 0-0.5 min 保持 20% B，然后在 15 min 内线性增加到 40%B 质谱方法 质谱仪：Thermo Scientific Q Exactive Focus 台式高分辨质谱仪 HESI-II 离子源： ESI 正 / 负离子切换 全扫描采集：m/z 120-1000 amu，分辨率为 70,000（FWHM@m/z 200） MS/MS 采集：17,500 分辨率下数据依赖采集，HCD 归一化 碰撞能：35%，25% 阶梯变化 样品前处理方法 • 霉酚酸酯储备液，浓度为 2.5 mg/mL 的乙腈溶液，称取25mg标准品配制在10 mL乙腈中。 • 盐酸（0.01 N，pH 2），乙酸铵（5 mM，pH 6），氢氧化钠（0.01N，pH 8）和过氧化氢（3%，pH 8.2）。购买的 30% 过氧化氢用水稀释 10 倍后用于酸、碱和氧化研究。用氢氧化铵或乙酸调节强制降解溶液 pH 值。 • 用如上 pH 2、pH 6、pH 8 的溶液和过氧化氢（3%，pH 8.2）将浓度为 2.5 mg/mL 的霉酚酸酯储备液稀释 10 倍配制浓度为0.25 mg/mL 的强制降解溶液。强制降解溶液放置于60℃烘
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利用高分辨质谱Q Exactive Focus定量分析小麦和饲料中的真菌毒素
作者：德尔塔 日期：2022-04-22
引言 真菌毒素是真菌在食品或饲料里生长所产生的代谢产物，对人和动物都具有极大的健康隐患。据联合国粮农组织（FAO）统计，全球每年约有 25% 的农产品受到真菌毒素污染。为了保证食品和饲料的安全，全世界多个国家通过法规或标准严格规定粮食中主要真菌毒素的限量。但传统的检测方法存在耗时长，通量低，定性能力差等问题。本文采用高分辨台式质谱仪Q Exactive Focus建立了粮食提取物中多种真菌毒素的检测方法。方法具有媲美高端三重四极杆的灵敏度，同时可以对复杂基质中的痕量物质准确地定性分析，充分保障结果的准确性。 实验方法 液相色谱方法 UHPLC：Thermo Scientific Ultimate 3000 RSLC 色谱柱：Thermo Scientific Hypersil Gold (50*2.1mm，1.9 µm） 流速：0.3 mL/min，进样体积：5 µL 流动相：A 相：2mM 的甲酸铵和 20 µL/ L 的甲酸水溶液 B 相：2mM 的甲酸铵和 20 µL/ L 的甲酸甲醇溶液 质谱方法 质谱仪：Thermo Scientific Q Exactive Focus台式高分辨质谱仪。 实验采用正负切换 Full MS-ddMS 2 扫描方式进行筛查分析，采用正离子或负离子模式的 Full MS-ddMS 2 和 t-SIM- ddMS 2进行定量分析，如图 1 所示。利用数据依赖扫描获得二级子离子碎片离子信息进行确证。 Full MS：分辨率为 70,000（FMHW@m/z 200）。 t-SIM：分辨率为 70,000（FMHW@m/z 200），isolation width为 4 m/z MS/MS 采集：17,500（FMHW@m/z 200）分辨率下数据依赖采集；HCD NCE 为 45%，isolation width 为 4m/z。 样品前处理方法 参考文献 [1]，样品经 1% 的甲酸乙腈 / 水溶液浸提 15min 后，再震摇 1h 后，离心，过滤，供测定分析。 筛查结果分析 在一定的 Mass tolerance 下，采用化合物加合离子峰的精确质量数从 Fullscan 的数据中提取，得到 XIC 图谱。Q Exactive Focus 具有良好的质量精度，因此可以将提取窗口缩小至5ppm，甚至更低，充分保证了方法极高的选择性。同时，Q Exactive Focus 可以实现快速的正负
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细胞污染的分类、来源及预防污染的措施
作者：德尔塔 日期：2022-04-22
如何打一场漂亮的细胞保卫战？ 细胞污染是细胞培养的大敌，预防和避免污染是细胞培养成功的关键。一旦轻敌就会前功尽弃，不仅浪费时间，而且浪费人力、物力，甚至造成无法弥补的损失。而且小编的童鞋也经常向我抱怨：每到毕业季，就蓝瘦，香菇是因为细胞死了一批又一批，毕业遥遥无期啊！那么如何打一场漂亮的细胞保卫战呢？下面就跟随小编一起来学起来吧~ 步：认识细胞培养过程中有哪些污染？ 细胞培养污染是指培养环境中侵入了对细胞生存有害的成分和造成细胞变异的异物。体外细胞培养污染可分为三类：物理性、化学性及生物性污染。 物理性污染： 物理性污染通过影响细胞培养体系中的生化成分，从而影响细胞的代谢。 物理性污染的来源：培养环境中的物理因素，如温度、放射线、振动、辐射（紫外线或荧光）会对细胞产生影响。 物理性污染的现象：细胞、培养液或其他培养试剂暴露在放射线、辐射或过冷过热的温度中，可以引起细胞代谢发生改变，如细胞同步化、细胞生长受抑制，甚至细胞死亡。 化学性污染 化学性污染是一些对细胞有毒性的或对细胞产生刺激的化学物质。 化学性污染的来源： 未纯化的物质、试剂、水、血清、生长辅助因子及储存试剂的容器都可能成为化学性污染的来源。细胞培养的必需养分（如氨基酸）若浓度超过了合理的范围，也会对细胞产生毒性。同样，不同细胞系在培养条件下对血清和缓冲液的要求是不一样的，在培养中应严格控制。 化学性污染的现象：化学性污染同样会使细胞生长受抑制，甚至细胞死亡。 生物性污染 生物性污染包括比较容易发现的细菌、霉菌和酵母的污染，和较难发现的病毒、支原体和其他细胞的污染。 生物性污染的来源： ● 取材不慎或处理不当 ● 空气尘埃 ● 消毒不严 ● 操作不当 ● 试剂尤其是血清污染 生物性污染的现象： ● 细菌：G+菌较多。 ● 真菌：霉菌较多。 ● 支原体：不易检测。 ● 病毒：由于病毒有种属特异性，所以病毒污染的概率比较小。 第二步
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使用Exactive Plus EMR 台式高分辨质谱分析非变性状态mAb
作者：德尔塔 日期：2022-04-22
1,Yue Xuan2, 李静1，顾培明1，吴泽明1，Application Group, LC-MS, CMD, Japan3 1 2 Thermo Fisher Scientific, Bremen, Germany 3 Thermo Fisher Scientific, Yokohama, Japan 1 前言 在最近十年中，非变性质谱（Native mass spectrometry） 正在逐渐成为非共价结合的完整蛋白复合物表征的重要技术手段 [1]。对于完整单克隆抗体（mAbs），非变性质谱可提供分子量、糖型等的精确测量结果，还可用于高级结构（二聚、三聚和四聚）的测定；非变性质谱正在成为一种具有稳健性、快速且可靠的一线分析表征工具[2,3]。 在2013 年国际HUPO 大会上发布的Thermo ScientificTM ExactiveTM Plus EMR 质谱仪结合了无以伦比的高分辨率精确质量Thermo ScientificTM OrbitrapTM 分析和扩展质量数范围（EMR）功能，提供了一个出色的工具，用于研究类似天然状态下保留有三级和四级结构的蛋白质和蛋白质复合物的结构学、拓扑学和构造。可用于单克隆抗体的纯度、PEG 修饰的蛋白质、低聚蛋白药物、糖型和组装蛋白质的表征。同时，Exactive Plus EMR 质谱仪的全面分析性能使之成为筛查多肽和小分子的最佳解决方案。 EMR 对Exactive Plus 系统的升级体现在： 扩展的质量数范围m/z 350-20,000；高质量数离子的传输效率更高，提升信号强度；改进的HCD 压力和控制，更容易优化实验条件；能够捕捉更短时间的时域信号，提高信噪比。 图1 配备Advion Inc. TriVersa NanoMate® 芯片电喷雾离子源的Exactive Plus EMR 2实验方法 2.1样品准备 使用单抗分子量测试标准品（Waters 186006552），按Micro Bio-Spin® Columns（BIO-RAD）标准操作步骤将单抗溶液体系置换为100mM NH4Ac，单抗样品浓度为10μM。 2.2实验条件 基于芯片的直接注入上样条件 设备* TriVersa NanoMate® （Advion, USA）system 离子化电压（kV） 1.9 气压（psi） 0.3-0.6 *: The ESI Chip® consists of an array of 400 nanoelectrospray emitters wit
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