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《Hepatology》补充抗氧化剂抗癌？不是想吃就能吃！
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
抗氧化剂在癌症的发生和发展中的角色越来越有争议，越来越多的证据显示不同的抗氧化剂在不同类型的癌症进程中，既有可能会起到积极的预防作用，又或者会加速癌症的发展。尽管不能全盘否认抗氧化剂在预防肿瘤方面积极的作用，该不该使用抗氧化剂以及如何使用，都给人们造成了相当的困扰。第二军医大学近日于《Hepatology》发文指出，在原发性肝细胞癌的发生进程中，靶向线粒体或非靶向线粒体的抗氧化剂具有相当不同的作用。两种类型的抗氧化剂通过影响ATM/ATR的活性，调控DNA的损伤修复，对原发性肝细胞癌的发生发展起到了截然不同的作用，为相关的药物**提供了新思路。本研究的RNA -seq实验部分由伯豪生物助力完成。 研究思路 研究结果 1.非靶向线粒体的抗氧化剂促进修复DNA损伤，抑制原发性肝细胞癌（HCC）的发生和发展，而靶向线粒体的抗氧化剂促进肝癌的发生和发展 通过注射DEN造成原发性肝细胞肿瘤的患病小鼠，分别饲喂两种类型，非靶向线粒体和靶向线粒体的抗氧化剂。饲喂非靶向线粒体NAC的小鼠，其肿瘤大小约为对照组的四分之一，相比而言，肿瘤生长得到了显著抑制。饲喂线粒体靶向型抗氧化剂SS31的HCC小鼠与对照组相比，肿瘤显著增大。相似的实验结果同时由另外两种抗氧化剂，线粒体靶Trolox和线粒体靶向型抗氧化剂MitoQ证实。 由DEN和CCl4共同作用造成的HCC更接近于人类病症，本研究中同时在DEN和CCl4共同作用产生的HCC小鼠模型上进行了相同的抗氧化剂处理，结果与DEN处理患病小鼠一致。 2.转录测序实验揭示两种类型抗氧化剂处理后氧化还原反应，以及DNA损伤应激反应相关基因表达量显著变化 对DEN 和CCl4共同处理造成的HCC小鼠，分别饲喂线粒体靶向和非线粒体靶向的两种类型的抗氧化剂处理后，进行转录组测序实验。与PBS处理对照组相比，GO功能分析显示，氧化还原反应相关的基因，表达量发生了显著变化，这表明小鼠体内的氧化还原反应状态可能对于HCC的发生发展起到了重要影响。RNA-seq实验揭
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南沙海洋大气温室气体监测系统
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
根据国家海洋局生态环境保护司《海洋环境监测与能力升级改造》项目工作计划，在国家海洋环境预报中心领导的大力支持下，2017年9月8-20日，国家海洋局海洋灾害预报技术研究重点实验室在我国南海南沙新建了一套的南沙海洋大气温室气体监测系统并开展试运行，相关工作得到了在国家海洋局南海分局及国家海洋局海口海洋环境监测中心站的鼎力协助。 该系统位于南沙群岛，其建设标准参考世界气象组织全球大气监测网（WMO/GAW）相应观测规范，同时，充分考虑到海洋大气高湿度高盐度等特征，采用目前国际上最先进的离轴积分腔输出光谱法，可实现大气中二氧化碳和甲烷浓度高精度连续观测。 南沙群岛位于我国海域的最南端，南沙群岛及毗邻海域是中国唯一位于珊瑚礁核心分布区的海域，是我国最大的热带渔场。特殊的气候、地理和生态环境条件使得南海群岛及周边海域成为海洋碳循环和海洋酸化的敏感区域。 本次南沙海洋大气温室气体监测系统建设工作由重点实验室派出夏冬冬副主任和温室气体监测项目负责人吕洪刚高级工程师负责系统选址、安装、调试工作,由国家海洋局南海分局海洋预报减灾处罗一丹处长负责任务的组织和协调工作，。南沙海洋大气温室气体监测系统的建成可弥补中国南海南部海域上空大气温室气体浓度高精度连续监测的空白，对开展南海海域海洋碳循环、海洋酸化和气候变化等领域的科学研究都具有重要意义。 到目前为止，国家海洋局已建成南沙、西沙、北礵和嵊山四个海洋大气温室气体监测系统，初步形成从南海南部至东海海洋上空温室气体的监测网，积累了大量海洋大气温室气体高精度连续监测的工作经验和技术储备，为未来建成全国海洋大气温室气体立体监测网打下坚实基础。 目前, 我国CO2年排放总量已位居世界第1, CH4和N2O排放总量也已位居前列。《京都议定书》以法规形式付诸实施无疑将对我国的政治、经济和外交产生重大影响。因此，长期、定点、准确地监测限排温室气体本底变化, 研究其源、汇和输送规律及其影响, 是
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真菌毒素快速检测箱--真正的真菌毒素检测移动实验室
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
一、 真菌毒素快速检测箱简介 上海飞测生物基于领先的荧光定量FPOCT技术平台，推出了真菌毒素移动检测平台--真菌毒素荧光定量快速检测箱，结合了胶体金快速、酶联免疫定量以及色谱法准确的特点，可在8min内快速准确定量的测定出粮油谷物饲料中的真菌毒素，包括黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、呕吐毒素、赭曲霉毒素A、伏马菌素、T2毒素等含量，样品前处理简单（仅需7min），六种毒素一次提取即可，操作简便，只需一步加样，无需标准品，无需做标准曲线，结果准确可靠且可现场打印，准确性高度符合HPLC法的检测结果，为真菌毒素的快速现场检测提供了一种全新的技术手段，适用于各类原料收储、粮油加工企业、饲料加工企业、养殖企业及政府相关监管部门。 二、 真菌毒素快速检测箱的组成 三、真菌毒素检测项目及性能参数 四、检测样本适用范围 五、检测过程 5.1 样品前处理过程 1、 粉碎； 2、 振荡提取（5min）； 3、 离心（2min）； 5.2 检测过程 1、 稀释； 2、 加样反应（8min）； 3、 读数，打印检测报告； 5.3 结果判断和输出 采用便携式真菌毒素荧光定量检测仪进行读数，检测结果更加准确、客观。 检测结果将呈现于荧光读数仪液晶显示屏上，同时可按打印键打印获得纸质的检测报告，另外，开通仪器的WIFI数据上传功能后，检测相关数据信息将自动上传至“食品安全溯源管理云平台”，便于溯源及质量管理。 六、上海飞测荧光定量FPOCT技术平台与其他方法学技术性能的对比 七、上海飞测生物真菌毒素荧光定量快速检测系统优点 8min快速准确定量检测：集胶体金快速检测、酶联免疫定量检测、色谱质谱准确检测的特点于一身，可在8min内实现多种霉菌毒素的快速准确定量测定； 内置定量标准曲线：仪器内置标准曲线，无需使用标准品，无需检测时再做标准曲线，既节省了成本，
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花生和花生油中黄曲霉毒素B1快速定量检测方案
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
一、 花生和花生油中黄曲霉毒素B1污染情况 花生是全球五大油料作物之一，广泛种植于亚洲、非洲、南美洲等发展中国家和美国等部分发达国家。中国是世界最主要的花生生产国，年种植面积 500 万 hm2，占全球种植面积总量的 20% ，居第 2 位; 产量达 1 600 万 t，占世界总产的40% ，居第 1 位。黄曲霉毒素来自于黄曲霉和寄生曲霉所产生的一种次生代谢物，具有急慢性毒性、致突变性、致癌性和致畸性，其中黄曲霉毒素 B1 毒性是氰化钾的 10 倍，砒霜的 68 倍，被世界卫生组织( WHO) 列为一级致癌物。而花生是最容易受黄曲霉毒素污染的粮油作物之一，花生从生产到消费的每一个环节都可能污染黄曲霉并产生毒素，对人类的健康和安全产生了极大的危害。 花生黄曲霉毒素的污染是世界性的问题，是花生及其制品花生油安全消费和出口面临的最大和最主要风险因素，受到广泛关注，世界各国和国际组织都对生产、出口和进口的花生及其产品作严格的黄曲霉毒素AFT 限量规定。而控制花生中和花生油中黄曲霉毒素AFT是一项世界性难题，目前还没有根本的解决办法。 二、 花生和花生油中黄曲霉毒素B1国家残留限量标准 食品类别 限量标准（μg/kg） 花生 20 花生油 20 引自：《GB 2761-2011 食品安全国家标准 食品中真菌毒素限量》 三、 上海飞测生物花生和花生油中黄曲霉毒素B1快速定量检测方案--8min准确定量 上海飞测生物基于领先的荧光定量FPOCT技术平台，率先推出了黄曲霉毒素B1荧光定量快速检测系统，包含黄曲霉毒素检测仪和黄曲霉毒素荧光定量快速检测试纸条，可在8min快速准确定量的检测出花生和花生油中黄曲霉毒素B1的残留含量，样品前处理简单，检测操作简便，结果准确可靠且可现场打印，准确性符合HPLC法的检测结果，适用于各类花生及花生油加工企业、第三方检测机构及政府监管部门。 3.1. 黄曲霉毒素B1荧光定量
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ALP高压灭菌器在发酵罐的灭菌应用
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
发酵罐，指工业上用来进行微生物发酵的装置。其主体一般为用不锈钢板制成的主式圆筒，其容积在1m3至数百m3。在设计和加工中应注意结构严密，合理。能耐受蒸汽灭菌、有一定操作弹性、内部附件尽量减少（避免死角）、物料与能量传递性能强，并可进行一定调节以便于清洗、减少污染，适合于多种产品的生产以及减少能量消耗。 发酵罐内可进行清洗的任何部分都应认真清洗，否则都可能成为杂菌的滋生地。易被忽略而不能充分清洗的地方有喷嘴角内部与取样管内以及罐顶等处。 发酵罐灭菌 ① 排气管为玻璃管，内装有棉花，以保证蒸汽能自由出入发酵罐，同时不会出现染菌现象。 ② 取样口上连接一段硅胶管，在硅胶管上安装节流夹，以防止培养基在灭菌是流出。 ③ 装入发酵罐溶积60%的培养基（成分同种子培养基）后，将发酵罐放入灭菌釜内，在115℃下，灭菌20min。当灭菌完成后，温度降到60℃以下时，打开灭菌釜，确认发酵罐上所连接的管路完好后，将罐去除。尽快将通气管接好，确认排气口正常后，以0.3-0.5L/min通入空气。接通冷却水管路，开搅拌在低速下进行培养基的冷却。 发酵罐的实消技术 1 进料空消完毕，开始进料，进料约2/3体积时，开搅拌。由于加热时物料糊化膨胀，故先不定容。当温度达到70℃时定容。 2 液化 底路直接进蒸汽加热至75℃左右，关蒸汽，加入用50℃水调匀的α-淀粉酶，严防酶结块，根据生产需要，调整加入量，从进风管通入少量空气，翻腾10-15min，关闭进气。 3 实消 用水冲洗入孔盖，盖好盖子进行实消，先将蒸汽管道内的残存水放完，然后通三路蒸汽，一路罐底，一路进风管，一路取样管，同时打开罐顶所有排汽阀门，小旋塞及压力表下的排汽旋塞，让蒸汽排出，先大后小，待罐压上升到1.2 kgf/cm2，温度121℃时，逐步关小各排汽阀门，保温保压25-30min。 保压时间到，关蒸汽，此时应即从分过滤器进无菌空气，开排气阀，关闭罐顶的所有阀门，开冷却水对发酵罐进行降温，待温度冷至35℃左右进行接
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P2实验室主要技术指标及规范要求
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
导语 P2实验室是指生物实验室安全等级的一个分类。在现在各类实验室当中，P2实验室是使用最为广泛的生物安全等级实验室。那么P2实验室都有哪些技术指标和要求呢？ 一、主要技术指标的确定 BLS-2 实验室主要用于初级卫生服务、诊断和研究，其实验对象的危害等级为Ⅱ级（中等个体危害，有限群体危害），具体定义为“能引起人类或动物发病，但一般情况下对健康工作者、群体、家畜或环境不会引起严重危害的病源体。实验室感染不导致严重疾病，具备有效**和预防措施，并且传播风险有限”。据此，待颁布的国标《生物安全实验室建筑技术规范》对BLS-2实验室规定了以下技术指标(静态)： 1、洁净度：无要求 2、最小换气次数：可开窗通风 3、与室外方向相邻相通房间的压差：无要求 4、温度℃：18~27 5、相对湿度％：30~70 6、噪声dB(A)：≤60 7、照度lx：300 上诉指标是建立BLS-2实验室的要求，建设者可根据实际需要适当提高相应指标，如洁净度、压差等。 二、建筑、结构和装修要求 现在BLS-2实验室大多数是在原有建筑物内进行改建，不同于新建的BLS-2实验室（国标中，要求新建BLS-2实验室宜离开公共场所一段距离），在与相邻其他房间之间，存在着一个相对隔离问题。所以在原有建筑物中改建BLS-2实验室，应重点注意以下几个问题： 1、在共用建筑物中建BLS-2实验室，应设可自动关闭的带锁的门，必要时，可设立缓冲区域，如缓冲间等。 2、如果没有机械通风系统，应有窗户进行自然通风，并应有防虫纱窗。（一般情况下，应有机械通风系统，否则，温湿度指标难以保证）。 3、应有防昆虫、鼠等动物进入和外逃的措施。 三、空调、通风和净化 为满足BLS-2实验室温湿度要求，宜配备机械空调通风系统，有特殊要求的可增设设计要求，如增设净化要求并按净化要求进行送回（排）风系统设计等。这方面，应重点处理好以下几个问题： 1、可以采用带循环风的空调系统。如果涉及化学溶媒，感染性材料操作和动物实验，则应采用全排风系统
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细胞污染过程中常见的微生物污染和预防
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
导语 你正在细胞科学的海洋愉快遨游，如果有一天，细胞污染忽然跑过来说：“大家好，我是细胞污染~”这时候，科研的小船说翻就翻。 今天Esco就同大家浅谈细胞污染，抛砖引玉。 体外细胞污染分类: 物理性、化学性、生物性污染。其中生物性污染常见且造成的后果也较为严重，培养的细胞一旦遭到微生物污染，将具有不可逆转性。轻则污染细胞废弃，重则连带污染培养箱内的其他细胞，甚至整个实验室的环境，给科研工作带来严重的损失和威胁。 一、怎样判断你的细胞是何种生物性污染？ 1.细菌污染 常见细菌种类为大肠杆菌、枯草杆菌、假单胞菌等(革兰阴性菌)、 葡萄球菌等(革兰阳性菌)，其中革兰阳性菌较为多见。 主要来源：操作不当或是器材消毒不严，或是各种营养成分隐性污染细菌没有被检测出来所造成的。 特点：污染速度快，易被发现。多数情况下细胞培养液短时间内变黄，培养基1～2d就会变浑浊，pH值降低，倒置显微镜下观察，可见胞浆出现大量颗粒，细胞变圆或崩溃，从壁上脱落，培养液中有大量圆球状颗粒物漂浮，呈细沙状，污染较轻时可见小菌体在细胞间运动。 图1 细菌污染 图2 洋葱佰克霍尔德菌污染 2.真菌污染 污染培养细胞的多为烟曲霉、黑曲霉、毛霉菌、孢子霉、白念珠菌、酵母菌等。 主要来源：实验人员（实验服） 特点：短期内不会引起培养液的浑浊，可在培养液中形成白色或黄色漂浮物，一般肉眼可见，较易被发现，4d左右才可在高倍镜下观察到丝状、管状或树枝状菌丝纵横交错在细胞之间或培养基中，有些真菌开始很像死细胞碎片，只是它很多很多的小块很清楚，象珊瑚状，不象细胞碎片分不清，慢慢的会长出很细的黑色丝状物。 图3 真菌污染 图4 霉菌（丝霉）污染 培养基呈淡紫色，或不变色，但会变得粘稠，并且具有季节性，长蘑菇的季节很容易污染这种菌类。 念珠菌污染呈链状排列，呈卵圆形散在细胞周边和细胞之间。 图5 白色念珠菌污染 常见的细胞污染之一，左侧为倒置显微镜下视图，右侧为革兰氏
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ALP高压灭菌器在果蔬汁饮料中的应用
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
食品超高压杀菌，是讲食品物料密封于弹性材料或置于无菌压力系统中，在高压下作用一段时间后，使之达到无菌要求。高压导致微生物的形态结构，生物化学反应、基因机制及细胞壁膜发生多方面的变化，从而影响微生物原有的生理活动机能。大量研究表明，超高压对果汁中的微生物起到灭活作用，在不同的压力及保压时间下达到灭菌效果，可延长果蔬汁饮料的货架期。 高压灭菌器对果蔬汁饮料品质的影响 由于超高压技术只作用于非共价键,能够保证共价键完好无损,因而能在较低温度下杀灭食品中的微生物,并较好保持食品物料原有的营养成分和色泽、口感等品质。 高压灭菌器对果蔬汁色泽的影响 果蔬汁的色泽直接影响消费者对商品的印象,是评价果蔬汁品质的重要指标之一。研究发现,相对于传统的热杀菌,超高压处理能够较好的保持果蔬汁的色泽,对番茄汁等甚至有改善色泽的作用。 红黄比率(a/b值)在商业贸易中较多用于评价番茄汁的色泽,a/b值越高表示色泽越红。 高压灭菌器对果蔬汁营养成分的影响 超高压会使果蔬汁中类胡萝卜素含量升高,其原因可能为超高压能够作用于细胞的膜脂,并且能够影响生物大分子如蛋白质和糖类聚合物的结构,从而影响大多紧连在细胞生物大分子,特别是蛋白质和膜质上的类胡萝卜素。 高压灭菌器对果蔬汁稳定性和流变性的影响 在果汁饮料中,既有果肉微粒形成的悬浮物,又有果胶、蛋白质等形成的真溶液,甚至还有脂类物质形成的乳浊液、悬浮物,放置时间过长会产生絮凝、混浊等。因此果汁的稳定性是商品果汁的重要品质。另外,流变性也是果蔬汁重要的品质特征,在果汁的加工工艺参数选择、质量控制、设备设计、感官性质等方面具有重要作用。 大肠杆菌的普遍存在，食品安全问题需要引起食品企业的重视，要加强产品的卫生学检验，而高压灭菌器（高压灭菌锅）是不可或缺的工具。 目前市面上，高压灭菌器品种繁多，有进口的有国产的，产品质量参差不齐。在业内质量口碑**的当属日本ALP高压灭菌器（东南科仪总代理）。日
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使用HUVEC细胞进行血管生成实验，并用LONZA核转仪转染anti-VEGFR2 siRNA
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
Srinivasan Kokatam1, Kanchan Tiwari1, Jenny Schroeder2, Andrea Toell2, Lubna Hussain3, Preeti Kapoor1. 1. Lonza India Pvt Ltd, Hyderabad, India; 2. Lonza Cologne GmbH, Cologne, Germany; 3. Lonza Walkersville, Inc., Walkersville, MD, U.S.A. 实验材料： 英文名 中文名 品牌 货号 single donor Clonetics™ HUVECs 脐静脉内皮细胞，单一供体 LONZA Clonetics C2517A EGM™ 2 Media 血管内皮细胞培养基 LONZA CC-3162 ViaLight™ Plus BioAssay Kit 细胞活力检测试剂盒 LONZA LT07-221 Matrigel 基质胶 Corning 356237 4D Nucleofector 核转仪 LONZA C+X+96模块 P5 Primary Cell Nucleofector Kit 核转试剂盒 LONZA V4XP-5024 V4XP-5032 Calcein AM Life Technologies C3100MP VEGFR2 ELISA VEGFR2的ELISA检测试剂盒 R&D Systems DYC1780-5 培养基配方： 实验流程简介： 1. 使用pmaxGFP质粒进行进行预实验，优化HUVEC细胞核转条件； 2. 检测核转条件对HUVEC细胞的Tube formation是否有影响； 3. 转染siRNA，确定对细胞活力影响最小的最佳浓度，确定检测蛋白表达降低的最佳时间点； 4. 评价siRNA对HUVEC细胞Tube Formation的影响。 实验结果： 图1. HUVEC细胞转染GFP质粒，转染效率约为82%，对细胞形态无明显影响： 图2. HUVEC细胞进行核转后，对Tube formation无明显影响： 图3. Anti-VEGFR2 siRNA转染后的细胞对VEGF无反应，证明siRNA发挥作用。 参考文献： 1. Timar, J. et. al. (2001) Angiogenesis-dependent diseases and angiogenesis therapy. Pathol. Oncol. Res.7 (2): 85-94 2. Murga M1, Fernandez-Capetillo O, Tosato G. (2005) Neuropilin-1 regulates attachment in human endothelial cells independently of vascular endothelial growth factor receptor-2. Blood 105 (5): 1992-9 3. Yang, S, Xin, X,
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弯曲条带以及我们该如何进行处理？
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
如果你曾经做过SDS-PAGE和Western blotting实验，你肯定会看到弯曲的或模糊的条带，不同于你的抗体数据表上显示的那些完美的条带形状。虽然这些弯曲的条带本身并不吸引人，但它们会影响到分子量，这可能会影响到条带密度测量的分析，尤其是在使用自动化程序或分析分子量相近的蛋白 不要担心，通常您可以采取五个非常简单的步骤，使您的完美印迹再次呈现。 清洁实验器材 你花了几个星期的时间来培养你的稀有细胞，用昂贵的新化合物来处理它们，小心地收集和溶解你的样本，然后却把你的凝胶放在两个脏的玻璃板之间。所以要确保你的玻璃板和梳子在铸造之前是干净的，这是确保你铸造完美凝胶非常重要的一步骤。 摇动和搅拌 凝胶铸造的一个主要问题是不适当的混合试剂，特别是丙烯酰胺。为了确保在凝胶中均匀地分离蛋白质，需要确保一个恒定的丙烯酰胺百分比。但同样的，你也要尽可能快地将配好的胶用于实验。一次彻底的混合凝胶试剂，接着是同样重要的脱气步骤，每次都能给你纯洁的凝胶。 保持试剂新鲜 相同的方式，缓冲buffer确保它们是新鲜的,重要的是调整到正确的PH值。我们经常发现我们的western blotting是重复不出来，使用将近6个月不新鲜的缓冲buffer，并将buffer一直放在阳光下，可能把buffer扔掉重新配置更有意义。 至少要检查一下buffer的pH值是必须的，因为它在您的蛋白质迁移中通过凝胶发挥重要作用。 低电压慢跑 如上所述，我们知道你希望尽快获得令人兴奋的结果，以高电压运行您的凝胶可能会导致您不得不再配胶并重新运行样品。 通过在高电压下运行你的凝胶，缓冲液和凝胶会变热，这是您的凝胶翘曲和弯曲的主要原因。 上样要适中 减少关于条带弯曲和更多关于印迹，这一步对于确保您从印迹获得最准确的结果至关重要。 尽管在最大体积中加载最大浓度蛋白质是有诱惑力的，但有时候减少上样量，可以确保您获得一个不错的条带而不是无法辨认的印迹。使用新的抗体，甚至是新的抗体批次，需要运用总蛋白质
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浅谈ELISA夹心法中抗体质量的重要性
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
理论上使用公认选择的亲和纯化抗体可得到高特异性，高敏感度的免疫测定。然而，由于经济原因或是缺乏合适的试剂，使得许多工作者采用低纯度的制品，这种试剂通常含有与试验中其它成分起交叉反应的抗体。现已发现在用抗人IgG抗血清的抗体时，抗体中含有不需要的抗体交叉反应。但当使用亲和纯的抗血清时，交叉反应不明显。研究任何ELISA系统，为了控制不需要的交叉反应，就要不惜使用亲和纯试剂。使用抗IgG血清抗体作为包被抗体，有时本底确实很低，但它的敏感度比仅使用亲和纯制品要低50-100倍。在高敏感度的实验中应用封闭试剂是很重要的。最终选择非亲和纯抗IgG血清抗体是基于这样设想：包被抗体或是结合的人IgG（抗原）与指示抗体有交叉反应，则过量的与指示抗体同种动物的血清，就可以封闭与酶标抗体的不要的结合。然而人血清白蛋白中含有少量的IgA和IgG会干扰检测。人血清白蛋白只适用于IgE的测定。同样，不能用牛血清白蛋白。因为其中含有微量的牛IgG。 抗血清抗体与亲和纯抗体对ELISA夹心法结果的影响可从下面实验看出。 实验a：包被抗体为粗制的绵羊抗人IgG抗体，指示抗体（检抗）为粗制山羊抗人IgG抗体 实验b：包被抗体为亲和纯的绵羊抗人IgG抗体，指示抗体（检抗）为粗制山羊抗人IgG抗体 实验c：包被抗体为粗制的绵羊抗人IgG抗体，指示抗体为亲和纯的山羊抗人IgG抗体 实验d：包被抗体和指示抗体都是亲和纯的兔抗人IgG抗体。 实验中使用5%血清（与指示抗体同物种来源）进行封闭，其他夹心法ELISA步骤相同。 结果显示，当粗制的抗IgG血清抗体被用在夹心法的两端（如实验a曲线）时，本底很高且曲线坡度不明显。虽然能成功应用此抗体类型，但问题是一种抗体结合另一种抗体。可能发生了山羊指示抗体结合了绵羊包被抗体，因为稀释液中的山羊血清过剩也不能降低本底值。当应用亲和纯化的包被抗体时（如实验b曲线），本底适当降低而且形成了标准曲线。然而，大多数工作者认为本底仍偏高，工作范围有限（2-60ng
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选择人碱性成纤维细胞生长因子bFGF ELISA试剂盒：实验僧支招
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）是成纤维细胞生长因子蛋白（fibroblast growth factors，FGFs）家族中的一员.目前已发现至少22种FGF，其中N3F-1（aFGF）、FGF-2（bFGF）及FGF-7的研究较为深入.bFGF是哺乳动物和人体中一种非常微量的活性物质，bFGF在生物学作用极其广泛，它在血管形成、促进创伤愈合与组织修复、促进组织再生和神经组织生长发育过程中起着十分重要的作用。 为什么选择EliKine™ 人 碱性成纤维细胞生长因子bFGF ELISA试剂盒？ 新手实验迷茫，通过查询大量的文献还是不了解自己选择哪个品牌的bFGF ELISA试剂盒好？目前市场上的bFGF ELISA试剂盒质量参差不齐，如何去挑选适合自己的ELISA试剂盒就显得特别重要。一方面，主要根据自己样本中待检指标的量，这就要求bFGF ELISA试剂盒的灵敏度，另一方面科学实验讲求重复性，要求ELISA试剂盒，其板内和板间变异系数应该控制在15%以内等等。简单来说ELISA试剂盒在保证真实可靠数据的情况下，实验时间越短，操作越便利，越容易受到用户欢迎!这也是选择试剂盒的一个指标。 产品名称及描述 货号 产品说明 EliKine™ 人 碱性成纤维细胞生长因子bFGF ELISA试剂盒 KET6006 详情 为什么我们选择人碱性成纤维细胞生长因子bFGF ELISA试剂盒？ EliKine™ 人碱性成纤维细胞生长因子bFGF ELISA试剂盒具有极高的灵敏度和特异性。对目标蛋白的类似物检测，尚未发现明显的交叉反应或者背景干扰。EliKine™ 双抗夹心bFGF ELISA试剂盒高品质捕获抗体和检测抗体，适用于多种类型的样品，同时运用可拆卸式酶标板设计，让您可灵活便捷的使用，并提供48次小包装，让你有更多选择！专业的技术支持，提供售后服务。更主要是权威杂志引用不断，广受各科研者的喜爱!选择EliKine™ ELISA试剂盒，就是选择放心！试试Abbkine产品吧，花更少的钱，获得更多的实验数据。 bFGF ELISA试剂盒优势比较： 因此选择集高特异性与灵敏性于一身的Abbkine EliKine™ ELISA试剂盒：涵盖细胞因子
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糖果又检出大肠杆菌，ALP高压灭菌器来护航
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
根据福建食药监总局网站消息，福建省食品药品监督管理局近期组织抽检糖果制品、酒类、调味品、饮料、豆制品、方便食品、蔬菜制品、水果制品、淀粉及淀粉制品、蛋制品、冷冻饮品、蜂产品、罐头和茶叶及相关制品等14大类食品共207批次，其中2批次样品抽检项目不合格。根据食品安全国家标准，个别项目不合格，其产品即判定为不合格产品，不合格产品信息如下: 1批次糖果不合格，漳州市芗城区家有喜事蜜饯商行销售的南靖县顺欣食品厂2017年7月1日生产的顺欣手工贡糖，大肠菌群不合格，检验机构为厦门泓益检测有限公司； 大肠菌群并非细菌学分类命名，而是卫生细菌领域的用语，它不代表某一个或某一属细菌，而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌，这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致。一般认为该菌群细菌可包括大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷白氏菌和阴沟肠杆菌等。 大肠杆菌的普遍存在，食品安全问题需要引起食品企业的重视，要加强产品的卫生学检验，而高压灭菌器（高压灭菌锅）是不可或缺的工具。 目前市面上，高压灭菌器品种繁多，有进口的有国产的，产品质量参差不齐。在业内质量口碑**的当属日本ALP高压灭菌器（东南科仪总代理）。日本ALP高压灭菌器具备《进口压力容器生产许可证》 、《进出口锅炉压力容器安全性能检验证书》以及高压灭菌锅上的压力表和减压阀，送当地计量部门计量后取得计量证书。日本ALP高压灭菌器的安全性能卓越，依靠温度传感器来控制温度，并有压力感应器，在温度或压力异常时会自动切断电源，确保安全，相比较单纯的依靠压力表了解内部压力情况，无需人为查控，安全性更高。如需更高级的配置，可选择日本ALP公司生产的CLG系列高压灭菌器，内置了温度和压力双重传感器，可以自动感应温度和压力的对应关系，确保不会有压力异常的情况出现，安全性更强。 日本ALP公司的CL系列高压灭菌器，采用机械锁和电子锁双锁装置，如果锁出现故障或盖子没有盖好，仪器不会启动；在灭菌
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胎牛血清和小牛血清的区别在哪里？
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
胎牛血清和小牛血清的区别在哪里？ 如果胎牛血清和小牛血清两种可选，更多的研究生物细胞培养员会选择胎牛血清，这是为什么呢？使用胎牛血清和小牛血清的区别在哪里？ 一、来源不同 胎牛血清(Fetal Bovine Serum ,FBS)是在屠宰怀孕母牛的时候,通过心脏穿刺采血获取的胎牛的血清，新生牛(小牛)血清(Calf serum, CS)采自出生10至14天的小牛。 二、组份与比例不同 两者所含的促细胞生长因子、促贴附因子、激素及其他活性物质等组份与比例不同，用途与用法不同：某些细胞必需胎牛血清才能生长，而有些细胞只需小牛血清即可，使用浓度不同，一般在5%-10%，有特殊要求的浓度在20%。 三、总体分析 胎牛本身生活在一个洁净环境当中，其血清与外界隔绝，只要生产工艺科学规范，其质量肯定要比后两者好。建议一般选用血清种类可以根据ATCC及实验需要来选择。其实，除了一些比较娇贵的细胞，如干细胞之类的，其余的大部分细胞培养，用国产的足以。
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ELISA吸光度值衰减如何巧妙应对？
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
ELISA吸光度值衰减如何巧妙应对？ 近日的罗老师在操作ELISA试剂盒实验的时候发现了一个问题，于是来电我公司的售后部门问道：加完显色液(购买)显色一定时间后，再加终止液（2M H2SO4，自己配制）后，立即测试其吸光度值，等过几分钟再测试吸光度值，发现两次测得的吸光度值发生衰减。第二次均小于第一次。并且，加终止液时，从第一条加到第12条后，测试发现，吸光度值从1-12条逐级衰减。前提是这12条酶标板都是同一种产品，并且包被相同蛋白。 经过我公司技术专员的分析，原来ELISA吸光度值衰减可以这样巧妙应对。 其实具体的原因也很简单，有可能是显色液的质量不够好。一般情况下，终止反应后OD值的下降前期不是很明显。终止后，吸光度值是会随着时间衰减，所以一般是加完终止液后立即测，这样比较准。再次分析12条显示逐级递减的原因看看是否是： ① 显色时间调整，如果你现在的显色时间是10MIN，那调整到30MIN，再加终止液,观察上述现象是否出现。 ② 终止液中加入少量甘油看下怎么样。建议您使用RD品牌的ELISA试剂盒，显色时间是30分钟，终止后要求在30分钟内检测，加入终止液后，**在加入终止液后2到3分终内检测，这是OD值相对比较高。拟合值能达到四个9。
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