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土壤养分速测仪的选用技巧
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
在长期的农耕中人们总结出一套耕作的经验，在化肥施用盛行的今天，经验施肥的存在是十分普遍的。但是经验施肥也导致了养分的不平衡，这不仅降低了肥效，也降低了农田产量，更是会导致环境的污染，所以，平衡施肥，测土施肥都成为了国家要的农业技术。测土施肥需要依靠上壤养分分析,多年的实践经验表明,能否选择好土壤养分速测仪，常常是测土施肥成败的关键。 我们认为选择土壤养分速测仪应注意以下几个方面：国家对计量器具的生产有严格的管理,土肥仪属于计量器具,必须经计量产品监督检验部门对样机的性能、可靠性进行检验认定。例如滤光式光电比色土肥仪要检验仪器的稳定性、重复性、灵敏度和线性误差,还要检验仪器的耐震动、耐温度变化、绝缘安全性等。它必须符合国家检定规程”G179一90和电子测量仪器有关电源试验、环境试验和安全试验的要求,才能由计量管理部门颁发计量器具样机试验合格证书。在样机试验合格的基础上,技术监督部门还要对生产设施、人员技术水平、技术文件、检定条件、管理制度等生产条件进行考核,通过考核,才颁发计量器具制造许可证证书。 应该指出,样机试验合格证还只是说明仪器性能达到了国家检定规程的要求,对于土壤养分速测仪土壤养分测试而言,一般可以满足氮和钾的测定精度要求,而对于有机质和磷的测定精度却不能保证例如JJG179一90规定稳定性误差应小于1.5%,而当磷的含量低于10毫克/公斤,有机质含量低于10克/公斤时,稳定性误差只有低于0.5%(**低于0.3%,这是光栅式l类分光光度计的检定标准)才能符合农业部土壤分析技术规范对平行测定允差的要求.所以购仪器时要实地检查一个仪器的稳定性。检查的方法是:¹接通电源将仪器预热5一10分钟;º将仪器遮光盖盖上,调整仪器使显示器读数为零;观察仪器读数变化,三分钟内仪器最大和最小读数之差除以满量程读数,即为仪器的稳定性误差。俗话说仪器术怕不准就怕不稳,稳定性不合格的仪器是不能用的。
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土壤养分速测仪测定土壤养分前的取样方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
测土配方施肥技术是农民节本增收的重要途径，通过2年来的工作经验积累，我们发现在土壤和作物测试工作中，一般地说，采样误差常比现场操作误差、试剂误差、食品误差等偏大。所以一定要根据速测的目的和要求，注意采集有代表性或典型性的样品。土壤养分速测仪是测定土壤养分含量的重要仪器之一，其结果也十分准确可靠。 土壤养分速测仪在进行土壤养分速测时，通常用来化验的土样是少量的，而化验的结果却作为较大面积地块的代表。采样误差一般要比化验误差大的多。缩小采样误差的关键是采集的土样要有充分的代表性。一般先把采样区域划分为若干采样地块。同一采样地块里的地形、近期耕作施肥措施、作物长相和产量水平等应基本一致。每一采样地块的面积不应过大，一般不超过3.3hm2(50亩)。采样点的分布应尽量照顾到土壤的全面情况，不要太集中，不要在路旁、沟边、渠道附近和粪堆底等地方采样。因为这些地方不代表地块的平均肥力水平。 利用土壤养分速测仪的测定发现，上述采样方法在实际应用时，要结合当地的耕作和栽培方式进行。例如为了制定施肥方案，可在播种前或施肥前，在垄台上采样，取样深度应从垄台高度算起，横断垄向取0～20cm深的土样。如果在作物生育期，为指导追肥采样，则应考虑到作物根系范围，特别是玉米株间距离较大，播种时埯内施有口肥，根域附近或较远的地方地力差异大，因此要在植株附近(约10cm处)和两埯之间顺垄向多点、等量采样，然后混合。如果玉米和其他作物实行间种，为玉米追肥采样时，则只在间种玉米的地段取样。
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异氟烷吸入式麻醉在动物手术中的应用优势
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
动物手术前的麻醉不仅是为了减少动物疼痛满足动物福利的要求，也是为了保证动物手术顺利进行。目前注射麻醉在我国的动物麻醉中最为普遍，其优点是不需要昂贵的设备，只需要注射器就行，但麻醉剂注射动物后，必须经肝脏代谢完后，动物才苏醒；剂量过大会造成动物麻醉过度死亡，剂量过小动物不能进入麻醉状态或进入麻醉状态比较慢。在发达国家，气体吸入式的麻醉非常普遍，与传统的药物注射麻醉方式相比，具有以下显著的共同优点： * 动物进入麻醉状态较快，苏醒也迅速，一旦停止麻醉，一般2分钟内动物即可苏醒 * 麻醉深度容易控制，若在手术过程中发现动物状态不佳，可马上停止麻醉或者快速充氧进行抢救，因此安全性非常好； * 动物的发病率和死亡率低，动物手术的成功率高； * 更重要的是，吸入式麻醉剂在体内不参与代谢，几乎完全由肺泡经呼吸排出，对实验结果不造成影响，研究成果易得到国际认可。 在具体的实际应用中，我们可以明显地看到异氟烷吸入式麻醉方式的优势，下面就一些典型的动物实验采用异氟烷麻醉方式的优势： 1. 套管慢性给药、微透析和光学刺激/生理信号记录（光遗传学） 导管植入颅内，待动物恢复后，首先拔出导管帽，然后植入注射内管（探针或光纤）、通过管路（光纤跳线）连接注射器（激光器）。然而，植入内管（探针或光纤）和连接管路（光纤跳线）这一过程（如图1、2和3所示），虽然花费时间很短，也就几分钟的时间，如果动物不麻醉，动物会挣扎，配合不好，导致无法插管（插入光纤）；如果在戊巴比妥钠、乌拉坦等注射麻醉后进行，操作容易进行，但是这些麻醉方式的维持时间很长，往往达3-5个小时，不利于后期做清醒自由活动动物的给药或光刺激，而且额外增加了使用这些麻醉剂带来的副作用，测得的指标不准确，影响实验结果的客观性和可靠性。然而，如果使用异氟烷吸入式麻醉，则避免了这些问题的发生，而且操作简单，只需将动物放置于实验平台上，带上麻醉面罩，即可开始进行操作。 图1 套管
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小麦总RNA的提取方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
实验步骤 1. 所有容器高温灭菌两次，DEPC高温灭菌，所有的试剂用DEPC配制，高温灭菌。 2. 在一灭菌2mL管中加入：5mol/L异硫氰酸胍0.7mL、苯酚0.4mL、NaAc(pH4.0) 0.1mL。 3. 称取0.2g小麦黄化苗的叶片，迅速在液氮中研磨成粉末，转入已准备好的离心管中，剧烈震荡。 4. 混匀，冰浴30min。 5. 4℃，12000rpm，10min。 6. 上清至另一离心管中加0.4mL氯仿，剧烈震荡。冰浴放置5min。 7. 4℃，12000rpm，10min。 8. 弃有机相(下层) 加入0.4mL氯仿和0.4mL酚，室温放置5min。 9. 4℃，12000rpm，10min，弃有机相，加入等体积异丙醇。-20℃放置1h。 10. 4℃，12000rpm，10min，沉淀用70%乙醇洗两次。 11. 室温稍干燥。 12. 沉淀加20μLDEPC水溶解(-20℃保存) 13. RNA电泳：1％琼脂糖胶20mL，8μL样品，1μL样品缓冲液，1μLSYBR，100V恒压电泳，测OD260和OD260／OD280。 注意事项 1. 步骤1目的是去除RNA酶(外源)的影响。高温灭菌两次可以破坏RNA酶的复性过程，虽然RNA酶极易复性，但两次连续的高温会打乱它的复性历程，从而使RNA酶失活。 DEPC是RNA酶的非竞争性抑制剂。DEPC可以与RNA酶的活性中心的组氨酸咪脞环上的N结合，从而使RNA酶失活。因为DEPC能与RNA的N结合，从而修饰RNA，所以必须将DEPC最终除去。在高温灭菌时，DEPC因高温分解而挥发。UV也能修饰RNA，实验时应避免。DEPC灭菌后称为DEPC水，它是不含DEPC的。实验过程中要勤换手套，必要时要在超净工作台中进行。 2. 必须提前准备好变性剂。异硫氰酸胍可以变性RNA酶，也可以破细胞。本试验不可以用酶法破细胞。因为蛋白酶K的适合的条件也可以使RNA酶有活性。 NaAc酸性可以使DNA在有机相(酚相)中，而在碱性条件下，DNA和RNA都在水相中，无法分离。苯酚用于抽提DNA和蛋白质。 3. 低温防止内源性RNA酶降解RNA。剧烈震荡是使所有的细胞散开，浸在变性剂中。低温的细胞在相对高温的液体中是会形成一团，这样就会使内部的RNA没有水解RNA的机会。小麦的黄化苗因为没有光
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成年猪胰岛分离纯化方法的优化
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
实验试剂 胶原酶V，512 kut/mg(Sigma公司)，DNA酶(Sigma公司)，胎牛血清(Gibco公司)，RPMI1640培养液(Gibco公司)，Dextran(Pharmacia公司)，Hanks平衡盐溶液(Gibco公司)。 实验设备 离心机，注射器，显微镜，超净工作台等。 实验材料 成年杂种猪，猪龄12 mo，体质量150 kg左右，猪被屠宰放血后，在相对无菌条件下迅速取出胰腺，保存于4℃ Hanks液中送至实验室，热缺血时间少于10 min，冷缺血时间少于90 min。 实验步骤 1. 胰岛分离 胰腺取回后，置于超净工作台上，快速去除胰周组织、脂肪、血管及外科被膜，保留固有被膜。从胰头、胰体交界部横断胰腺，找到主胰管，用20 G套管针插入，缝合线结扎，尾部远端亦结扎切断，每次均取约15-20 g组织，注入4℃含Ca2 Hanks液配制的复合胶原酶溶液(1.5 g/L，内含DNA酶0.3 g/L)，注入量 = 胰质量×2，注射速度7 mL/min，3-4 min内完成，置入玻璃容器内，在38.5±0.1℃水浴中震荡消化，震速100 r/min，在消化过程中间断加入0.1 mmol/L的NaOH，使消化液pH值尽可能维持在7.8左右，从消化20 min开始每间隔4 min取样一次，双硫腙染色镜检，当胰腺组织被消化裂解成细沙状，镜检见大部分结构完整的胰岛从外分泌组织中脱落出来，立即用4℃冷Hanks液(含100 mL/L胎牛血清)终止消化，充分混匀后，用40目钢网过滤，收集消化后组织，4℃离心冼涤2次，去除脂肪等杂质细胞，取样镜检计数和观察消化后胰岛分离情况。 2. 胰岛纯化 用Dextran配制成密度为1.037，1.054，1.070，1.096，1.11 kg/L的不连续密度梯度液，依次将不连续密度梯度液各10 mL加入50 mL离心管中，最后将洗涤后的消化组织每0.5 mL与1.037 kg/L密度梯度液10 mL混匀，小心移至离心管中液体上层，形成不连续密度梯度。将2-4个离心管置入低温离心机中，先800 r/min离心5 min，然后2 500 r/min离心15 min，离心后在1.096-1.054 kg/L之间收集纯化的胰岛，4℃离心洗涤2次。分别取样镜检计数，估计纯度和行生物学活性及组织学鉴定。 3.
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线粒体(Mitochondrion)的活体染色的及电镜照片观察
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
实验原理 线粒体是细胞内一种重要细胞器，是细胞进行呼吸作用的场所。细胞的各项活动所需要的能量，主要是通过线粒体呼吸作用来提供的。活体染色是应用无毒或毒性较小的染色剂真实地显示活细胞内某些结构而又很少影响细胞生命活动的一种染色方法。詹纳斯绿B 是线垃体的专一性活体染色剂。线粒体中细胞色素氧化酶使染料保持氧化状态呈蓝绿色，而在周围的细胞质中染料被还原，成为无色状态。 实验试剂 1. 1/300 詹纳斯绿B 染液 2. Ringer 氏液(哺乳类用) 实验设备 1. 显微镜 2. 手术器材一套 3. 解剖盘 4. 小平皿 5. 载片 6. 盖片 7. 吸水纸 8. 10ml注射器 9. 吸管 实验材料 兔子一只、线粒体的电镜照片。 实验步骤 1. 兔肝细胞线粒体的活体染色 1) 用空气栓塞处死兔子，置于解剖盘内，迅速打开腹腔。 2) 取兔肝边缘较薄的肝组织一小块（2～3mm3），放入盛有Ringer 氏液的平皿内洗去血液(用镊子轻压)，用吸管吸去Ringer 氏液，在平皿内加1／300 詹纳斯绿B 染液，让组织块上表面露在染液外面，使细胞内线粒体的酶系可进行充分的氧化，这样才有利于保持染料的氧化状态，使线粒体着色。当组织块边缘染成篮色时即可，一般需要染30 分钟。 3) 染色后，将组织块移到载片上，用镊子将组织块拉碎，就会有一些细胞或细胞群从组织块脱离。将稍大的组织块去掉，使游离的细胞或细胞群留在载片上，加一滴Ringer 氏液，盖上盖片，吸去多余水分。 2. 结果 1) 显微镜观察，肝细胞质中许多线粒体被染成蓝绿色，呈颗粒状。 2) 线粒体的光镜切片观察 用詹纳斯绿B 染色的兔肝细胞光镜切片，肝细胞中的线粒体呈蓝绿色的颗粒。 3) 线粒体的电镜照片观察 不同细胞中线粒体的形态和数目不同。线粒体的外形多样，如圆形、椭圆形、哑铃形和杆状。线粒体的数目与细胞类型和细胞的生理状态有关，线粒体多聚集在细胞生理功能旺盛的区域。线粒体脊的数目与分布方式是多种多样的。一般与线粒体长轴垂直排列，
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防腐蚀隔膜泵泵体和电动机过热的原因分析
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
使用过程中，常常出现过热的现象，此时我们需要区分对待，要弄清楚到底是泵体过热还是电动机过热，再根据具体问题具体分析。 防腐蚀隔膜泵泵体发热 防腐蚀隔膜泵泵体过热常见的原因是由于轴承损坏造成摩擦所致，或者是由于润滑系统缺油、油质不好造成。因此在发现防腐蚀隔膜泵泵体过热后应首先检查润滑系统是否缺油或润滑油含有杂质等，其次排查轴承是否损坏。对于刚刚经过检修的泵体出现过热还应检查滚动轴承或托架盖是否间隙过小。经过上述检查后泵体仍然出现发热应检查泵轴是否弯曲或两轴不同心、同时检查叶轮平衡，调整泵轴或调整两轴同心度，清除叶轮平衡孔，以此保证泵轴与叶轮的转动平衡，排除故障。 防腐蚀隔膜泵电动机过热 防腐蚀隔膜泵电动机过热是常见的故障之一，原因主要有哪些呢? 造成电动机过热的原因主要是由于电压偏高或偏低、传动不畅、通风系统故障或机组故障造成电动机过热。电动机过热严重时会造成绝缘烧坏、转子断条等情况发生。因此，在发现电动机过热时应采用气动其他动力方式，进行停机检修。 电压原因造成的电动机过热应对电动机供电系统进行检查，通过恢复稳定供电，解决防腐蚀隔膜泵电动机过热故障。 另外传动不畅也会造成电动机过热，由于电动机与防腐蚀隔膜泵间的传动不畅造成电动机负载过大，出现小马拉大车的现象，电动机过载是温度升高。此种情况必须及时进行检修，造成机组故障。对电动机与防腐蚀隔膜泵的传统系统进行彻底排查，常见的传统不畅主要由于传动系统转动轴承缺油、轴承损坏等造成。找出故障所在点进行更换或润滑即可。 由于同分系统故障引起电动机过热时最为常见故障之一，其主要是由于风扇损坏、通风孔道堵塞、轴承磨损等原因使得通风系统不能完成所应承担的工作，造成电动机过热，严重的还将烧毁线圈。此种情况必须逐项排查，找出故障原因，通畅通风孔道、修补风扇、更换轴承即可解决故障。
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量化成像流式细胞技术在心血管研究中的应用
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
“我国每5个成年人中就有1个心血管病患者，每10秒钟就有1人死于心血管疾病“，心血管疾病在致中国城镇与农村居民死亡疾病中占首位。因此可见，心血管疾病的预防与**是未来临床与科研重点关注的研究方向。转化医学这一概念的提出促进了临床实践向基础研究提出新的命题，基础研究提出可能的解决方案进行临床验证，相互转化。目前中国转化医学的研究重点在心血管疾病与肿瘤，集中在疾病的发病机制、疾病的早期非创伤性诊断、疾病的规范**及新药物新技术的开发等。细胞水平建立体外疾病模型从而研究相关发病机制与**手段，是心血管疾病关注的重要方向。流式细胞检测和显微成像，是细胞水平研究的两大传统方法。利用流式细胞技术，科研人员可以分析上万个细胞，获得每个细胞的相对大小、颗粒度和荧光信号的数值，从而得到细胞群体的各种统计数据，筛选出稀有的细胞亚群。但是传统流式细胞检测技术存在一定局限，获得高通量的同时忽略了细胞承载的丰富信息。研究人员仅仅得到散点图上的一个点，而不是真实的细胞图像，缺乏细胞形态、亚细胞器结构与荧光信号空间分布的相关信息。要想获得基于细胞图像的数据，研究人员必须借助各种显微成像设备进行观察，但显微镜能够观察到的细胞数量是非常有限的，容易遗漏稀少事件，手动分析数据耗费大量人力和时间，而且受实验人员的主观因素影响，实验结果的稳定性很差，难以提供准确的细胞群体量化与统计数据。因此，量化成像流式细胞技术（）的出现结合了流式检测的高通量与荧光显微镜的高内涵，同时提供细胞图像与群体统计数据，给传统细胞分析带来了重大变革，在流式细胞分析、分选的传统技术之外开创了“成像流式“下一代专家级流式细胞技术的发展方向。 心脑血管研究经常涉及分离分析原位组织中的干细胞、前体细胞等，若仅仅使用传统流式分析方法，难以精确鉴定细胞。荧光显微镜又受通量的限制，难以捕获稀有现象。量化成像流式细胞技术的优势在于高功率激光器与785nm SSC专用激光器适合
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不同机型全自动凝胶染色仪的比较
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
凝胶染色是生物实验室内经常会遇到的实验操作，包括硝酸银染色实验和考马斯亮蓝染色脱色实验2大类。传统的凝胶染色实验一般都需要借助脱色摇床来完成，主要操作步骤有加液、换液、排液和清洗等，全程比较依赖人工参与，因此我们常把传统的凝胶染色称为人工或手动凝胶染色。由于使用脱色摇床而带来的非封闭性操作，手动凝胶染色实验过程中有时容易溅出染液，不仅污染实验室环境和实验人员衣物，有时甚至危害到实验人员的健康。此外，如果遇到多块凝胶同时染色的情况，传统的手动凝胶染色可能会有更多不便。针对这些问题，全自动凝胶染色仪应运而生。目前国内实验室见得到的主要有美国、日本和国产三类产品，各自的代表机型如下： 1. 美国GE Healthcare的(以下简称PP) 细心的用户会在现有的仪器资料上发现机身有Hoefertm这个商标，是的，这款仪器正是由美国电泳产品厂商Hoefer代工。PP分两种型号，一个是做自动凝胶染色的Gel Stainer(注意，gel和stainer中间有空格，不带空格GelStainer则是DHS家的凝胶染色仪产品，后面会有简单介绍)，一个是做自动Blot膜处理的Blot Processor。其实两者主要区别在于槽体部分的构造，Blot Processor槽体比较复杂，由若干带连接管道的凹陷小池构成，可以一次处理2-4块标准转印膜；Gel Stainer外观很像普通摇床，但池子为长菱形，有19*29cm和 29*35cm两种尺寸可选，染色池内有凸起的若干管口，作为进液口出液口分别连接到各种试剂瓶。PP内置了9个预设程序并允许自定义4个程序，染色池可容125-400ml的试剂，可以同时染色4-6块 8*7cm小尺寸凝胶、1-2块14*16cm标准尺寸凝胶、1-2块12.5*26cm大尺寸凝胶。图片： GE Gel Stainer GE Blot Processor 2. 日本ATTO的 ATTO在国内可能并不出名，但在日本可是凝胶电泳界的老牌厂商，已有50年历史。而这款AE-6630机型官方外号“染次郎”（不得不说有种东洋风味的萌呵），其外观设计以及实际做工如ATTO其他凝胶电泳设备一样，简约紧凑，扎实细致。主
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大肠菌群检测新方法——酶底物法检测系统
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
水质大肠菌群系统： 由LK-2010程控定量封口机、51或97孔定量检测盘、100mL定量瓶、酶底物检测试剂四部分组成。检测水样范围:饮用水、源水、瓶装水、中水、二次供水、管网水、废水、食品水、畜牧用水、医疗用水等。 该检测方法采用大肠杆菌产生β-半乳糖苷酶分解色源底物-ONPG(Ortho-nitrophenyl-β-D-galactopyranoside) 使培养液呈黄色。大肠埃希氏菌产生β-葡萄糖醛酸酶（β-glucuronidase）分解MUG（4 - methyl-umbelliferyl-β-glucuronide）使培养液在波长366 nm 紫外光下产生荧光的原理,来定性定量水中总大肠菌群、粪大肠菌群（耐热大肠菌群）及大肠埃希氏菌。 序号 指标名称 技术指标 1 名称 程控定量封口机 2 用途 用于GB5750-2006酶底物法检测水质总大肠菌群、大肠埃希氏菌，粪大肠菌群 3 可靠性 无漏液,无破孔 4 稳定性 可检测40,000个样品以上，使用寿命大于5年 5 方便性 开/关及退格键有定量数显窗口,有保洁窗口 6 快捷性 无需无菌室,24h检测水中总大肠菌群\大肠埃希氏菌\耐热大肠菌群 7 重量 ≤16kg 8 尺寸 39cm 长 X 27cm 宽 X 30cm 高 9 预热时间 ≤14min 10 噪音
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冷冻干燥的原理与过程
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
简言：博医康一直致力于冷冻干燥技术研发。在长期服务客户的过程中，发现广大冻干机使用客户对冻干的机理不了解，对制品的冻干工艺应该如何摸索及优化不知如何进行。针对以上问题特搜集整理冻干技术资料帮助正在使用冻干法或正打算使用冻干法进行干燥保存的用户。 冷冻真空干燥（以下简称冻干）是一个稳定化的物质干燥过程。是将含水的物质，先冻结成固态，而后使其中的水分从固态直接升华变成气态排除，以除去水分而保存物质的方法。溶液状态的产品经冷冻处理后，先后经过升华和解吸作用，使产品中的溶剂减少到一定程度，从而阻止微生物的生成或溶质与溶剂间的化学反应，使产品得以长时间保存并保持原有的性质。 真空冷冻干燥法是液态→固态→气态的过程。在冻干过程中，溶质颗粒之间的“液态桥”已被冻成“固态桥”，两颗粒间的相对位置已经被固定下来，并且两颗粒之间不存在气液界面的表面张力。随着溶剂的不断升华，“固桥”不断减少，但两颗粒之间的相对位置已不再发生变化，直至“固态桥”完全消失。 水和溶液的性质 水有三态，固态、液态、气态。三种状态可以相互转化。对应 0 ℃ 、 610Pa 以下所有过程，只要符合一定的条件都可成为升华过程 。物质有固、液、汽三态。物质的状态与其温度和压力有关。如图所示，水 (H2O ）的状态平衡图。图中 OA 、 OB 、 OC 三条曲线分别表示冰和水、水和水蒸汽、冰和水蒸汽两相共存时其压力和温度之间的关系。分别称为溶化线、沸腾线、升华线。此三条曲线将图面分成 I 、 II 、 III 三个区域，分别称为固相区、液相区和气相区。箭头 1 、 2 、 3 分别表示冰溶化成水，水汽化成水蒸汽和冰升华成水蒸汽的过程。曲线 OB 的顶端有一点 K ，其温度为 374 ℃ ，称为临界点。若水蒸汽的温度高于其临界温度 374 ℃ 时，无论怎样加大压力，水蒸汽也不能变成水。三曲线的交点 O，为固、液、 汽三相共存的状态，称为三相点，其温度为 0.01 ℃ ，压力为 610Pa 。在三相点以下，不存在液相。若将冰
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覆盆子及有效部位对老年大鼠学习记忆能力的影响及机制初探
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
摘 要 目的: 考察覆盆子有效部位对自然衰老大鼠学习记忆能力的影响。 方法: 18 月龄大的自然衰老大鼠分为老年组、银杏黄酮阳性组、覆盆子乙酸乙酯部位组、覆盆子氯仿部位组、覆盆子全药材组，另取 3 月龄的大鼠为青年对照组。覆盆子乙酸乙酯组、氯仿组、全药组分别灌胃给予相应提取物 12g / kg，阳性药物组给予银杏黄酮 5． 785mg / kg，老年组和青年组分别灌胃等容量生理盐水，连续 30d。检测大鼠在 Morris 水迷宫中的定位航行能力、空间探索能力，并检测大鼠脑组织中乙酰胆碱酯酶、乙酰胆碱转移 酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性、总超氧岐化酶活性、过氧化氢酶活性及丙二醛含量。结果: 覆盆子乙酸乙酯组、覆盆子氯仿组、覆盆 子全药组均可不同程度缩短大鼠的逃避潜伏期，明显增加穿越平台次数; 覆盆子乙酸乙酯组、覆盆子氯仿组、覆盆子全药组、银杏黄 酮阳性组可明显提高老年大鼠脑组织中的乙酰胆碱转移酶活性，同时覆盆子乙酸乙酯组、覆盆子氯仿组、银杏黄酮阳性组降低乙酰 胆碱酯酶活性; 覆盆子乙酸乙酯组、覆盆子氯仿组、覆盆子全药组、银杏黄酮阳性组可明显升高老年大鼠脑组织总超氧岐化酶、过氧 化氢酶活性，明显降低丙二醛含量; 覆盆子乙酸乙酯组、覆盆子氯仿组、银杏黄酮阳性组可明显升高谷胱甘肽过氧化物酶酶活性。 结论: 覆盆子乙酸乙酯部位能提高自然衰老大鼠的学习记忆能力，因为其提高老年大鼠脑部胆碱能功能和减少脑部自由基损伤最 为明显，其次是氯仿部位，最后是全药部位。 关键词 覆盆子萃取部位; 学习记忆; Morris 水迷宫; 衰老 现代药理研究发现，覆盆子作用广泛，除延缓衰老外、还有对生殖系统的调节作用、抗氧化作用等。我们前期发现覆盆子氯仿提取部位和乙酸乙酯提取部位对 D-半乳糖联合氢化可的松造成的肾阳虚型痴呆大鼠和东莨菪碱所致的学习记忆障碍 大鼠有很明显的改善其学习记忆的作用［1，2］，但对自然衰老大鼠学习记忆功能的影响尚无文献报道。故本研究以自然衰老的大鼠为研究对象，观
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Dolomite微流控芯片成功用于高通量单细胞DNA/RNA测序
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
随着现代生物学的发展，细胞群体的研究已不再能满足科研需求。单细胞测序通过对单个细胞进行测序，解决了用组织样本测序或样本少时无法解决的细胞异质性难题，为科学家研究解析单个细胞的行为、机制、与机体的关系等提供了新方向。 2011 年，《自然方法》杂志( Nature Methods )将单细胞测序列为年度值得期待的技术之一，2013 年，《科学》杂志（Science）将单细胞测序列为年度最值得关注的六大领域榜首，表明单细胞测序已成为科研热点。 美国哈弗和麻省理工学院的Evan Macosko发表了一篇单细胞RNA测序的文章，受到了极大的关注，详细过程如下图： Macosko et al., 2015, Cell 161, 1202–1214 该文章第一作者Macosko推荐使用英国Dolomite的芯片做单细胞测序，并与Dolomite公司合作进一步的开发此系统。 推荐芯片如下：
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冻干产品的崩解温度研究
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
对于冻干产品的共熔点大家已经熟悉了，它就是产品的真正固化点。也就是产品在抽真空前必须冷却低于共熔点，不然产品在抽空时将会起泡，在升华加热的时候也不能使产品超过这个温度，不然产品将熔化。因此，共熔点是在预冻阶段和升华阶段需要进行控制的温度值。 现在引入一个崩解温度的概念，它是不同于共熔点的另外一个温度。一个正常升华的产品，当升华进行到一定的时候，就会出现上层的干燥层和下层的冻结层，这二层之间的交界面就是升华面，升华面是随着升华的进行而不断下降的。 已经干燥的产品应该是疏松多孔，并保持在这一稳定的状态，以便下层冻结产品升华出来的水蒸汽能顺利地通过，使全部产品都得到良好的干燥。 但某些已经干燥的产品当温度升高到某一数值时，会失去刚性，变得有粘性，发生类似塌方的崩解现象，使干燥产品失去疏松多孔的状态，封闭了下层冻结产品水蒸汽的逸出通路，妨碍了升华的继续进行。 于是，升华速率变慢，从冻结产品吸收升华热也随之减少，由板层供给的热量将有多余，这样便引起冻结产品的温度上升，当温度升高到共熔点以上的温度时，产品就会发生熔化或发泡现象，致使冻干失败。 发生崩解时的温度叫做该产品的崩解温度。对于这样的产品要获得良好的干燥，只有保持升华中的干燥产品的温度在崩解点以下，直到冻结产品全部升华完毕为止，才能使产品温度继续上升。这时由于产品中已不存在冻结冰，干燥产品即使发生崩解也不会影响产品的干燥，因为产品已从升华阶段转入解吸干燥阶段。 没有发生崩解的干燥产品与发生崩解的干燥产品在外观上用肉眼看不出有什么差别，只有在显微镜下才能看到结构上的变化。当在显微镜下观察产品的冷冻干燥过程时，如果看到发生崩解现象，那么这时的温度就是该产品的崩解温度。 有些产品的崩解温度高于共熔点温度，那么升华时仅需控制产品温度低于共熔点就行了；但有些产品的崩解温度低于共熔点温度，那么按照一般的方法控制升华时就可能发生崩解现
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冻干过程温度、真空度等参数的控制概述
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
冻干机影响干燥过程的主要因素是升华界面的温度（或供热量）和水蒸汽逸出制品的能力。前者主要由搁板的温度和干燥箱的压力（真空度）所决定，而后者主要由升华界面的温度（对应的水蒸汽饱和压力）和箱内的水蒸汽分压所决定。因此，要使干燥过程具有“再现性”，搁板的温度、干燥箱的压力（真空度）和其水蒸汽分压这三个参数进行“过程控制”，才能使批与批间的制品具有相同的冻干条件和同样的质量。 下面从“过程再现”的角度分别介绍目前所采用的搁板温度，干燥箱内压力（真空度）和水蒸汽分压的控制。 一、搁板温度的控制 生物医药冷冻干燥机均用电加热，利用控制电加热的通断，可以方便地控制加热量和温度。一般采用两种方式。 1、 阶梯式升温 即将升温阶段分成若干区段，在每区段开始时接通加热器升温。当搁板（介质）温度达到该段值上限时，切断加热器，保温到该段时间结束，再转入下区段的升温。此种方式中每区段搁板的升温速率不进行控制，但因制品升温滞后于搁板的升温，因此制品的升温速率与预定的接近。 2、 跟踪式升温 根据制品要求的升温速率，制定出搁板升温速率曲线，将实测的搁板升温速率与对应时刻要求的升温速率曲线相比较，确定加热器的通断时间比例，并不断修正这个比例使实际升温曲线跟踪要求的升温曲线，这种方式能较准确的进行过程控制。 二、箱内压力（真空度）的控制 过去人们调控箱内压力的目的，主要在于提高箱内压力，可以提高升华界面允许的最高温度和供热量，从而可加快干燥的速度。引入“过程再现性”的观点以后，人们还要用能否获得“相同的冻干条件”来重新审视这些方法的优劣。箱内压力调控的方法主要有： 1、 校下漏孔法 这是目前多数生物、医药冻干机所采用的方法，它是基于提高干燥塔速率而提出来的。其方法是将无菌空气（或气体，下同）引入干燥箱和冷阱，在冷阱的冷凝表面上形成一层空气膜，因而水蒸汽的凝结阻力增大，冷阱压力提高，同时使干燥箱的压力也相应提高。
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