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细胞培养技术注意事项
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
1. 原代细胞实验进行前，无菌室及无菌操作台(laminar flow) 以紫外灯照射30-60 分钟灭菌，以70 %ethanol 擦拭无菌操作抬面，并开启无菌操作台风扇运转10 分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，且即使培养基相同亦不共享培养基，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以70 % ethanol 擦拭无菌操作抬面。操作间隔应让无菌操作台运转10 分钟以上后，再进行下一个细胞株之操作。 2. 无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如试管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暂时放置，其它实验用品用完即应移出，以利于气流之流通。实验用品以 70 % ethanol 擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在抬面之中央无菌区域，勿在边缘之非无菌区域操作。 3. 小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约45° 角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。 4. 工作人员应注意自身之安全，须穿戴实验衣及手套后才进行实验。对于来自人类或是病毒感染之细胞株应特别小心操作，并选择适当等级之无菌操作台(至少 Class II)。操作过程中，应避免引起aerosol 之产生，小心****，例如DMSO 及TPA 等，并避免尖锐针头之伤害等。 5. 定期检测下列项目： 5.1. CO2 钢瓶之CO2压力 5.2. CO2 培养箱之CO2浓度、温度、及水盘是否有污染(水盘的水用无菌水，每周更换)。 5.3. 无菌操作台内之airflow 压力，定期更换紫外线灯管及HEPA 过滤膜，预滤网(300小时/预滤网，3000 小时/HEPA)。 6. 水槽可添加消毒剂(Zephrin 1:750)，定期更换水槽的水 7. 认真按照操作规程进行实验，一般不大会导致污染，很多情况下是由于所用的试剂或培养基有污染而使实验失败，粉末培养基配制好后(加了血清)，一般在4度尽量不要超过1个月，如在-20度存放时间可长一些，但也不要超过3-4个月，可能对于永生化细胞株来说要求
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肿瘤细胞培养方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
肿瘤细胞培养成功关键在于：取材、成纤维细胞的排除、选用适宜的培养液和培养底物等几个方面。在具体培养方法方面，肿瘤细胞培养与正常组织细胞培养并无原则差别，初代培养应用组织块和消化培养法均可。1、取材：人肿瘤细胞来自外科手术或活检瘤组织。取材部位非常重要，体积较大的肿瘤组织中有退变或坏死区，取材时尽量避免用退变组织，要挑选活力较好的部位。癌性转移淋巴结或胸腹水是好的培养材料。取材后宜尽快进行培养，如因故不能立即培养，可贮存于4℃中，但不宜栽过24小时。2、培养基：肿瘤细胞对培养基的要求不如正常细胞严格，一般常用的 RPMIl640、 DMEM、Mc-Coy等培养基等皆可用于肿瘤细胞培养。肿瘤细胞对血清的需求比正常细胞低，正常细胞培养不加血清不能生长，肿瘤细胞在低血清培养基 中也能生长。肿瘤细胞对培养环境适应性较大，是因肿瘤细胞有自泌（Autocrine）性产生促生长物质之故。但这并不说明肿瘤细胞完全不需要这些成分。 按不同细胞需要不同的生长因子；肿瘤细胞与正常细胞之间、肿瘤细胞与肿瘤细胞之间对生长因子的需求都存在着差异。但大多数肿瘤细胞培养中仍需要生长因子。 有的还需特异性生长因子〔如乳腺癌细胞等）。总之培养肿瘤细胞仍需加血清和相关生长因子培养更易成功。3、成纤维细胞的排除：成纤维细胞常与肿瘤细胞同时混杂生长，致难以纯化肿瘤细胞。而且成纤维细胞常比肿瘤细胞生长得快，zui终能压制肿瘤细胞的生长。因此排除成纤维细胞成为肿瘤细胞培养中的关键。
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单克隆抗体制备---单克隆抗体的大量生产及鉴定
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
1.单克隆抗体的大量生产 大量生产单克隆抗体的主要方法： （1）体外使用旋转培养管大量培养杂交瘤细胞，从一清液中获取单克隆抗体。但此方法产量低，一般培养液内抗体含量为10～60μg/ml,如果大量生产，费用较高。 （2）体内接种杂交瘤细胞，制备腹水或血清。 2.单克隆抗体的鉴定 对制备的McAb进行系统的鉴定主要包括以下几个方面： （1）抗体特异性的鉴定 除用免疫原（抗原）进行抗体的检测外，还应该用与其抗原成分相关的其它抗原进行交叉试验，方法可用ELISA、IFA法。例如：制备抗黑色素瘤细胞的McAb，除用黑色素瘤细胞反应外，还应该用其它脏器的肿瘤细胞和正常细胞进行交叉反应，以便挑选肿瘤特异性或肿瘤相关抗原的单克隆抗体 （2）McAb的Ig类与亚类的鉴定 一般在用酶标或荧光素标记的第二抗体进行筛选时已经基本上确定了抗体的Ig类型。如果用的是酶标或荧光素标记的兔抗鼠IgG或IgM，则检测出来的抗体一般是IgG类或IgM类。至于亚类则需要用标准抗亚类血清系统作双扩或夹心ELISA来确定。在作双扩试验时，如加入适量的PEG（3%），更有利于沉淀线的形成。 （3）McAb中和活性的鉴定 用动物或细胞的保护实验来确定McAb的生物学活性。例如，如果确定抗病毒McAb的中和活性，则可用抗体和病毒同时接种于易感的动物或敏感的细胞，来观察动物或细胞是否得到抗体的保护。 （4）McAb识别抗原表位的鉴定 用竞争结合试验，测相加指数的方法测定McAb所识别抗原位点，来确定McAb的识别的表位是否相同。 （5）McAb亲合力的鉴定 用ELISA或RIA竞争结合试验来确定McAb与相应抗原结合的亲合力。
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ELISA试剂盒的一些技术关键
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
1、细胞上清：前处理有必要把细胞离心去掉，每孔直接加100μl即可。假定浓度太高需稀释时，用标准品稀释液直接稀释。2、脑脊液：前处理有必要把细胞离心去掉，每孔直接加100μl即可。假定浓度太高需稀释时，用标准品稀释液直接稀释。3、血清血浆：请参与50ul样本分析缓冲液后加50ul标本,如稀释量大，请将样本与样本分析缓冲液等量参与，缺少部分用标准品稀释液赔偿至100ul。4、组织匀浆液的样本，要制备过程中需要在缓冲液中参与蛋白酶抑制剂，防止蛋白成份被内源性蛋白酶降解，构成查看效果的值偏低。
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细胞培养的一些问题
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
细胞培养常见问题 1. 液体培养基的保存是冷藏好？还是冷冻好？ 要冷藏！！因为液体培养基经冷冻后再经溶化时，其溶液的pH值会发生改变，溶液往往变碱，某些成分溶解也会受到影响对细胞生长不利。故液体培养基一定要存放在冷藏箱中，通常液体培养基在冷藏条件下可存放6个月 ~ 一年。 2. 液体培养基中谷氨酰胺的作用，及使用方法。 几乎所有的细胞对谷氨酰胺有较高的要求，细胞需要谷氨酰胺合成蛋白质，在缺少谷氨酰胺时，细胞生长不良而死亡。所以，各种培养液中都含有较大量的谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不稳定，应置-20 ◦C冰冻保存，用前加入培养基中。加有谷氨酰胺的液体培养基4 ◦C 冰箱储存两周以上时，应重新加入原来量的谷氨酰胺。基础医学细胞中心在其服务项目中配制分装了高浓度（100倍）的谷氨酰胺溶液（1ml/支）。每支1ml的谷氨酰胺加到99ml完全培养基中，其终浓度为2mM/ml培养基。包装为粉红色，-24◦C保存。 3.培养用液pH对细胞生长的影响 由于，大多数细胞适宜pH为7.2~7.4，偏离此范围对细胞将产生有害的影响。各种细胞对pH的要求也不完全相同，原代培养细胞一般对pH变动耐受差，无限细胞系耐受力强。 但总体来说，细胞耐酸性比耐碱性强一些，偏酸环境中更利于细胞生长。因此，我们在配制培养用液时，可把液体的pH稍微调得偏酸一些。液体在经过0.10um或0.22um滤膜过滤时，溶液的pH还会向上浮动0.2左右。 4.常用培养基及培养用液的渗透压范围 培养基名称 渗透压范围（mOSM） DMEM（高糖） 315 ~ 350 DMEM（低糖） 270 ~ 330 RPMI-1640 260 ~ 290 MEM-EBSS 280 ~ 310 MEM-NEAA 280 ~ 310 McCoy 280 ~ 310 MEM-a 280 ~ 310 M—199 275 ~ 305 IMDM 270 ~ 300 DMEM/F-12 280 ~ 310 F—10 270 ~ 300 F—12 275 ~ 300 培养基名称 渗透压范围（mOSM） L—15 280 ~ 320 D-Hanks 280 ~ 300 Hanks 280 ~ 300 PBS 275 ~ 300 5.细胞传代消化时所用胰酶浓度越高越好吗？ 不见得！因为胰蛋白
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您还不知道这些,实验高手来帮您
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
elisa试剂盒实验有很多的注意事项,如果没有处理好,也是影响实验结果的重要因素之一。上海劲马带您揭开elisa试剂盒的神秘面纱。 1.试剂准备：所有试剂都必须在使用前达到室温，使用后请立即按照说明书要求保存试剂。实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染。 2.加样：加样或加试剂时，请注意在吸取标本 / 标准品，酶结合物或底物时，*个孔与zui后一个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不同的 “预孵育"时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)控制在10分钟内，如标本数量多，推荐使用多道移液器加样。 3.孵育：为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜，以避免液体蒸发；洗板后应尽快进行下步操作，任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。 4.洗涤：洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干，勿将滤纸直接放入反应孔中吸水，同时要消除板底残留的液体和手指印，避免影响zui后的酶标仪读数。 5.试剂配制：Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理，以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用，并使用相应的稀释液配制，不能混淆。请配置标准品及工作液，尽量不要微量配置(如吸取检测溶液A时，一次不要小于10μl)，以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差；请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。 6.反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如，每隔10分钟)，如颜色较深，请提前加入终止液终止反应，避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。 7.底物：底物请避光保存，在储存和温育时避免强光直接照射。建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请zui后乘以稀释倍数。 我司是一家专业
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ELISA样本值低于空白值的问题解决方案
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
在ELISA实验过程中，样本值低于空白值是一个经常性的问题。 当样本值较低接近试剂盒的灵敏度就容易发生样本值低于空白值的现象，特别是在血清和血浆样本的检测。 究其原因，问题主要在于两个方面，一方面是误差，另一方面是基质效应。下面将逐个分析不同影响因素的原理、和解决方案。 一、关于误差 误差可分为三类，系统误差、随机误差和过失误差。在这三类误差中，系统误差对样本值和空白值之间的差异没有影响。ELISA样本值低于空白值在误差方面主要来源于随机误差和过失误差。 1、 随机误差 无法控制的变因，使测量值产生随机分布的误差，服从统计学上的正态分布。从统计学上来看，测量值有99%的置信限在±3SD之间，如果CV值是20%，随机误差的边界就是±60%，也就是说在CV值20%的状况下，样本值低于空白值60%之内，有可能是随机误差的影响，特别是空白值只有一个值时。 随机误差一般是不可消除的，只能通过多次测量获得的均值尽量逼近真值。 降低随机误差的解决方案如下： 方案1：增加空白值的重复数量，一般认为空白值重复10次，测量均值接近真值。 方案2：提高实验技能，也能够有效降低随机误差的影响。如果CV值在5%，样本值趋近于零时，在统计上样本值将不会低于空白值15%。 2、 过失误差 过失误差主要是由于测量者的疏忽，犯了不应有的错误造成的。过失误差是可以避免的。针对于ELISA样本值低于空白值的问题，过失误差产生的原因多数来源于空白孔HRP的重复加样或污染或洗涤不干净，造成空白值偏高，相对比来说，样本值低于空白值。 解决方案就是重复实验，规范操作。 二、关于基质效应 分析中，基质指的是样本中被分析物之外的组分，基质常常对分析物的分析过程有显著的干扰，并影响分析结果的准确性，这些影响和干扰被称为基质效应。 ELISA试剂盒在开发过程中，标准品不能采用人或动物血清、血浆作为标准曲线的稀释液，只能采用其模拟物。模拟物与被测样本在蛋白丰度、复杂性、pH等因素都会存在差异。
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实验仪器的保护工作您做好了吗?
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
的试剂，良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件.所以在实验仪器这一块也是非常重要的。精密检测仪器的性能、可靠性、测量结果和寿命对实验结果都有很大影响。所以大家需要注意仪器工作环境要求： 防尘、防潮、防热、防震、防蚀。仪器的接地 接地的问题除对仪器的性能、可靠性有影响外，还对使用者的人身安全关系重大，因此所有接入市电电网的仪器必须接可靠的地线。电源电压 由于市电电压波动比较大，常常超出要求的范围，为确保供电电源的稳定，必须配用交流稳压电源。要求高的仪器单独配备稳压电源。另外应注意，插头中的电线连接应良好，使用时切莫把插孔位置搞错，导致仪器损坏。 温馨提示：加外所有仪器在关机停用时，要关断总机电源，并拔下电源插头，以确保安全。 上海德尔塔生物科技有限公司主营：Elisa试剂盒,人Elisa试剂盒,大鼠Elisa试剂盒,小鼠Elisa试剂盒,生物试剂,血清,抗体,培养基,标准品,国产血清、GIBCO胎牛血清等。种属齐全，价格优惠。期待您的与合作！
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实验秘籍：elisa试剂盒的参考标准
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
我们每做一个实验都会涉及到参考标准问题，所测的指标不同，参考标准也是不同的。针对这个问题，我司技术人员整理出7项ELISA试剂盒参考标准! *、标准曲线 1.定量方法：标准曲线至少由5个浓度组成，测定次数不少于5次，以确定工作浓度范围和IC50范围。 2.定性方法：工作浓度范围通过阴性、临界值浓度和阳性的样品测定来确定，每个浓度重复不少于5次，浓度与响应值之间应有一定的关系。 第二、检测限和定量限 1.检测限：20份空白样品测定均值加3倍标准差。 2.定量限：应大于标准曲线中zui低浓度点。对于定量方法，应对该浓度样品至少测定6次进行验证，而不能通过外延法推断。 第三、临界值（cut-off值）的确定 对于有zui高残留限量的药物，检测方法的临界值为20份添加MRL浓度的样品重复3次测定的均值减去1.64倍标准差，即95%置信限处。 对于禁用药物，检测方法的临界值为定量限，该值应达到公认的指标。 第四、精密度和准确度 对于有zui高残留限量的药物，添加浓度为MRL及MRL上下各一个浓度；对于禁用药物，添加浓度为定量限和2倍定量限，每个添加浓度至少测定5个平行样，并至少进行3批实验（不同检测日期，不同标准曲线，不同批次试剂盒）。 1.准确度：回收率范围大于40%或符合相应检测标准的要求。 2.精密度：以变异系数表示。 批内变异系数：每批平行样之间的变异系数小于或等于25%，对于禁用药物小于或等于30%. 批间变异系数：所有样品之间的变异系数值小于或等于30%，对于禁用药物小于或等于40%. 定性方法：阴性和阳性样品各测定不少于50份，确定假阳性率和假阴性率。 第五、交叉反应 试剂盒与待检药物类似物、代谢物或共同存在的药物测定交叉反应率。 第六、保存期 保存期通过保存条件的稳定性试验结果确定。 第七、复核试验 1.定量方法：检测限、IC50以及至少两个添加浓度的准确度和精密度，并与理化方法（或与具代表性进口试剂盒）比较。 2.定性
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为什么高剂量的维生素C能杀死癌细胞？
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
维生素C作为一种癌症**方法，有着不完整的历史，但是zui近，美国爱荷华大学的研究人员认为，这是因为它经常是通过一种必定会失败的方式使用的。延伸阅读：Science佐证诺奖得主观点：维生素C可抗癌；维生素C有助提升卵巢癌疗效；广州生物院阐明维生素C对肾癌细胞选择性杀伤作用产生的机理。 大多数维生素C**包括口服药物。然而，爱荷华大学的科学家已经表明，通过静脉注射给予维生素C，并绕过正常肠道代谢和排泄途径，可产生的血液水平高于口服摄入的100到500倍。正是这种超高浓度的血液，是维生素C攻击癌细胞的能力的关键。 爱荷华大学氧化还原生物学专家Garry Buettner早期的工作发现，在这种非常高的水平（在毫摩尔范围内）上，维生素C可选择性地杀死癌细胞，但是试管内和小鼠体内的正常细胞却能幸免。爱荷华大学医院和诊所的医生正在胰腺癌和肺癌的临床试验中测试该方法，该方法将高剂量、静脉注射维生素C与标准化疗或放疗相结合。早期的1期临床试验表明，这种**是安全的和耐受性良好的，并暗示该疗法可改善患者的预后结果。目前，更大的试验旨在确定该**是否能提高生存率。 该研究表明，维生素C容易分解，产生过氧化氢，这种所谓的活性氧可以破坏组织和DNA.。这项研究还表明，肿瘤细胞比正常细胞更难清除受损的过氧化氢。 在本文中，我们证明，癌细胞去除过氧化氢的效率要比正常细胞低得多。因此，癌细胞更容易因高量的过氧化氢而受损和死亡。这解释了在我们的临床试验中使用的非常高含量的维生素C，为何不影响正常组织，但对肿瘤组织却有破坏作用？ 正常细胞有几种方法来消除过氧化氢，使其保持在非常低的水平，所以它不会造成损害。这项新的研究表明，过氧化氢酶是清除分解维生素C所产生的过氧化氢的主要途径。研究人员发现，具有较少量的过氧化氢酶活性的细胞，当它们接触大量的维生素C时，更容易受到损伤和死亡的影响。 这个基本的信息可以帮助我们确定，哪些癌症和哪些**可以通过添加
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新城疫单抗ELISA试剂盒的研制及其初步应用
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
在单抗夹心ＥＬＩＳＡ和单抗ＰＥＧ—ＥＬＩＳＡ的基础上建立了快速诊断新城疫（ＮＤ）的单抗ＥＬＩＳＡ试剂盒。以０．５～２μｇ／ｍｌ的Ｍ２２单抗包板，在选择的*工作条件下，对提纯的新城疾病毒（ＮＤＶ）的zui小检出量为２．５～５ｎｇ／ｍｌ病毒蛋白；ＮＤＶ阳性血清对本试剂盒有特异性阻断作用，与鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）、鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）、鸡痘病毒（ＦＰＶ）、减蛋综合征病毒（ＥＤＳ—７６）、鸡马立克氏病病毒（ＭＤＶ）、大肠杆菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）、沙门氏菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）交叉反应的阴性结果及双盲考核试验的结果均表明它对ＮＤＶ具有特异性；试剂盒批内与批间重复试验变异系数小于６％；酶标抗体冻干前后活性未发生变化，以２０％的脱脂乳为冻干保护剂冻干后工作浓度与物理性状*；包被单抗后的酶标板经吸干、密封后，在４℃可保存６个月，－２０℃保存一年以上稳定性未发生变化；冻干后的酶标抗体在４℃可保存３００天以上，０℃以下１年活性未见下降；试剂盒在４℃可保存６个月，０℃以下保存１年。用该试剂盒检测从疑有ＮＤＶ强毒感染的鸡群中采集泄殖腔棉林样品３０２４份，共检出阳性１２４０份；从临床有典型ＮＤ病变的鸡群中采集样?
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如何使用ELISA试剂盒方法说明
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
如何使用ELISA试剂盒方法说明1、血清：操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。2、血浆：EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液：1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液。5、保存：如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
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培养基的优点
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
培养基一般分为群体培养及克隆培养两种方式。群体培养方式是指大量细胞置于同一培养瓶中进行贴壁或悬浮培养。克隆培养方式是指挑选单个细胞或单一集落（克隆）于体外进行培养。常用于细胞克隆化（纯化），建立细胞株，长期传代。以下是我们整理关于培养基的几点优点： 1、能长期传代，保持活性，便于监控检测结构功能和生命活动。 2、培养条件可以人为的控制便于研究细胞代谢、物理、化学、生物因素的影响 3、可用于各种观察和检测手段研究活细胞的变化（变异、分化）。可从细胞水平开展亚细胞结构和代谢分子的表达。 4、研究范围和细胞来源广泛，选择性广。 5、不同代次细胞可长期保存，既可开展同代次不同条件和方法研究，又可观察不同代次的动态变化。 6、耗资少、经济、成本低、可大量培养，利于生物制品的生产。 以上就是培养基的优点，我公司现在培养基搞活动啦，需要的客户抓紧时间抢购哦。。。
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入了ELISA的门 这些技术点你得知道
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
为了得到更好的实验结果，一些ELISA试剂盒实验新手们还需多加了解技术内容，公司每周都会为您精心整理出重点技术要领，能够熟练的掌握好这些之后再应用到实验里面就会简单的多。今天的主要内容是入了ELISA的门，这些技术点你得知道。 样本加样方法 1、细胞上清：前处理必须是细胞离心去除，每孔直接加100μl即可。如果浓度太高需稀释时，用标准品稀释液直接稀释。 2、脑脊液：前处理必须是细胞离心去除，每孔直接加100μl即可。如果浓度太高需稀释时，用标准品稀释液直接稀释。 3、血清血浆：请加入50ul样本分析缓冲液后加50ul标本,如稀释量大，请将样本与样本分析缓冲液等量加入，不足部分用标准品稀释液补充至100ul。 A.血清标本应是自然凝固后，取上清，避免在冰箱中凝固血液； B.血浆标本，推荐用EDTA的方法收集若待测样本不能及时检测，标本收集后请分装，冻存于－20℃，避免反复冻融。 C.血清标本不应添加任何防腐剂或抗凝剂； D.标本应清澈透明，检测前样本中如有悬浮物应通过离心去除。 E.请勿使用溶血，高血脂或污染的标本检测，否则结果将不准确。 4、组织匀浆液的样本，要制备过程中需要在缓冲液中加入蛋白酶抑制剂，防止蛋白成份被内源性蛋白酶降解，造成检测结果的值偏低。 因组织匀浆液的样本蛋白种类多，含量丰富，实验参照血清血浆标本的处理方法进行，否则就会影响实验结果。具体是加入50ul样本分析缓冲液后加50ul标本，需稀释时，请将样本与样本分析缓冲液等量加入，不足部分用标准品稀释液补充至100ul。 因为目标蛋白不同，可能造成降解的蛋白类型可能不一样，如果实验前通过文献确定用哪种蛋白酶抑制剂，有针对性加入，可节省抑制剂。如果查不到相关文献，可采用组合抑制的办法确保蛋白不易被降解。
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ELIS实验结果常见问题及解决方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
elisa试剂盒实验的zui后步骤就是实验结果的判定，这一步骤可谓是实验中zui关键的一步。在这环节中也难免会出现一些这样那样的问题。今天的文章中将为大家分享ELISA实验结果判断的一些常见问题及解决方法！一、Elisa结果判断常见问题 1.包括阴性对照孔在内，各孔显色普遍偏深； 2.包括阳性对照在内，各孔均无显色； 3.阳性对照不显色，而其它样本显色正常； 4.有些标本显色不深，判断阳性困难。二、解决方案 1.可能是洗涤不充分；加样过量；温育时间过长温度过高；按说明书重新操作。如无改善，可与生产厂家； 2.可能是漏加样本或酶液；温育时间过短温度过低；试剂保存不当活性下降；按说明书重新操作。如无改善，可与生产厂家； 3.阳性对照漏加、错加或失效。重新操作。如无改善，可与厂家，索要对照品； 4.重新操作。使用酶标仪，测定光吸收度，按P/N值标准判断。 上海沪鼎具有完善的实验技术开发平台，成熟的抗原、抗体研发系统，熟练掌握各种酶联技术，结合公司的研发团队，可以有效的保证公司产品强的稳定性和高的准确性，同时又具有zui有竞争力的价格。 公司目前可以提供生化试剂、分子生物学试剂及试剂盒，各种抗体及免疫学试剂盒、实验耗材等多门类上万种产品，产品涉及分子生物学、细胞生物学、免疫学等生命科学的各个领域。欢迎新老客户咨询选购自己心仪产品，我们将竭诚为您服务！
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