-
淀粉样β诱导的F-肌动蛋白去稳定性突棘丢失对阿尔茨海默症形成的作用
作者：德尔塔 日期：2022-04-14
阿尔茨海默氏病（AD）是一种神经退行性疾病，表现为认知功能受损和记忆力减退。神经元形态的各种变化是AD临床症状的基础，包括突触丢失；在AD的小鼠模型中，这通过树突棘的丧失来表示。 树突棘富含主要的细胞骨架蛋白螺旋丝状肌动蛋白（F-actin），并经过重塑以稳定学习后的记忆。 Kommadi等人的研究了解是否G-肌动蛋白池的增加和F-肌动蛋白的减少是在AD发病之前，还是树突棘丢失的结果。 相对于野生型同窝对照，AD小鼠模型中的突触小体（APP / PS1）的F-肌动蛋白水平降低，而G-肌动蛋白水平升高，尽管总肌动蛋白没有降低，也没有表现出该病的病理特征（货号＃BK037） 。 Pyrene-肌动蛋白测定（货号#BK003）揭示，在Aβ1-42肽存在下，肌动蛋白显示出破坏的动力学，类似于APP / PS1肌动蛋白的聚合反应。 用DiI或鬼笔环肽（货号#PHDG1）对原代皮层神经元进行了长期体外染色，结果显示，第10天APP / PS1神经突中的F-肌动蛋白含量降低，而树突棘的数量或表面积没有随之变化。在第16天，在APP / PS1神经元中观察到脊柱，脊柱树突和脊柱表面积的显着减少，同时第三神经突中的F-肌动蛋白显着减少。用鬼笔环肽染色并用Ab42处理的原代皮层神经元表现出剂量依赖性的F-肌动蛋白减少，表明淀粉样蛋白β可以使F-肌动蛋白解聚。 APP/PS1小鼠表现出相对于WT对照组的恐惧条件电位降低，用肌动蛋白稳定剂jasplakinolide可逆转，表明F-肌动蛋白的破坏扰乱了记忆的形成。相对于野生型神经元，用phalloidin或DiI标记的APP/PS1蘑菇脊柱头部，用dSTORM定量，表现出显著减少的肌动蛋白杆长度和顺序，产生于F-肌动蛋白结构的改变。检查无认知障碍（NCI）、轻度认知障碍（MCI）和AD的人死后突触体中的G：F肌动蛋白比率（货号＃ BK037），发现F-肌动蛋白显著减少，而G-肌动蛋白没有变化。F-肌动蛋白的减少与全局认知能力减退、β-淀粉样蛋白水平、神经纤维缠结和Braak分期之间也有显著的相关性。 上面强调的细胞骨架的肌动蛋白工具在揭示F-肌动
-
新型冠状病毒肺炎病例标本采集与实验室检测技术指南
作者：德尔塔 日期：2022-04-14
为指导各级疾控部门和其他相关机构开展新型冠状病毒肺炎病例标本采集与实验室检测工作，特制定本技术指南。 一、标本采集 （一）采集对象。 新型冠状病毒肺炎疑似病例和聚集性病例，需要进行新型冠状病毒感染诊断或鉴别诊断者，或其他需要进一步筛查检测的环境或生物材料。 （二）标本采集要求。 1.从事新型冠状病毒检测标本采集的技术人员应经过生物安全培训（培训合格）和具备相应的实验技能。采样人员个人防护装备（Personal Protective Equipment，PPE）要求：N95及以上防护口罩、护目镜、连体防护服、双层乳胶手套、防水靴套；如果接触了患者血液、体液、分泌物或排泄物，应及时更换外层乳胶手套。 2.住院病例的标本由所在医院的医护人员采集。 3.密切接触者标本由当地指定的疾控机构、医疗机构负责采集。 4.根据实验室检测工作的需要，可结合病程多次采样。 （三）采集标本种类。 每个病例必须采集急性期呼吸道标本（包括上呼吸道标本或下呼吸道标本），重症病例优先采集下呼吸道标本；根据临床需要可留取便标本、全血标本、血清标本和尿标本。 标本种类： 1.上呼吸道标本：包括鼻咽拭子、咽拭子等。 2.下呼吸道标本：深咳痰液、肺泡灌洗液、支气管灌洗液、呼吸道吸取物等。 3.便标本/肛拭子：留取粪便标本约10克（花生大小），如果不便于留取便标本，可采集肛拭子。 4.血液标本：尽量釆集发病后7天内的急性期抗凝血，采集量5ml，建议使用含有EDTA抗凝剂的真空釆血管采集血液。 5.血清标本：尽量釆集急性期、恢复期双份血清。第一份血清应尽早（**在发病后7天内）釆集，第二份血清应在发病后第3～4周釆集。采集量5ml，建议使用无抗凝剂的真空釆血管。血清标本主要用于抗体的测定，不进行核酸检测。 6.尿标本：留取中段晨尿，采集量2～3ml。 （四）标本采集和处理。 1.鼻咽拭子：采样人员一手轻扶被采集人员的头部，一手执拭子，拭子贴鼻孔进入，沿下鼻道的底部向后缓缓深入，由于鼻道呈弧形，不可用力过
-
全球视角下四种最常用叶绿素荧光技术的使用趋势及展望
作者：德尔塔 日期：2022-04-14
在检测植物光合作用方面，叶绿素荧光测定法是全球范围内使用最广泛的技术之一。由于叶绿素荧光是一个强信号（约占吸收光线的2%）且几乎不需要样品制备，叶绿素荧光测定法成为了由表型驱动的作物育种研究（植物表型组学）的一个基本工具。 叶绿素荧光测定法起源于20世纪30年代后期，由考茨基（Kautsky，后人以他的名字命名了荧光增强效应）提出。20世纪60年代到80年代，世界各地的生物物理学家都致力于反卷积荧光信号的一些特性，奠定了叶绿素荧光常规测定方法的基础并沿用至今。荧光淬灭法是叶绿素荧光表型分析技术的理论基础，与光合电子传递反应的状态有关：当受体池饱和时，能够观测到荧光强度的增加，反之则会观测到荧光强度降低。 近日，Plant Phenomics在线发表了澳大利亚国立大学Alonso Zavafer等人题为Global Trends of Usage of Chlorophyll Fluorescence and Projections for the Next Decade的研究论文。 在该文章中，作者综述并研究了四种最常用的叶绿素荧光测定分析平台（分别是脉冲幅度调制荧光PAM、快速荧光动力学OJIP、快速重复率荧光FRR、日光诱导荧光SIF），比较了它们所依赖的基础理论和技术优势，提出了关于解答“哪种方法最准确和最有效”的许多论据。但迄今为止，每种方法的确切流行程度并未有数据评估。 因此在论文中，作者检索统计了过去十年中每个平台的相关文献(Figure 1)，评估了科学界对以上每种方法的见解，还确定了这几种平台的使用中可能存在的地理偏向性(Figure 2)。研究结果表明，尽管SIF在过去十年中迅速普及，PAM仍是目前最受欢迎和最具影响力的平台；在未来的十年中，SIF平台有望获得更大的影响力。 Figure 1: Popularity of different fluorometric methods based on publication count of the last ten years. Figure 2: Relative popularity of different fluorometric methods based on publication count during the last ten years by country.
-
电子材料的制备方法，实例观察和应用分析
作者：德尔塔 日期：2022-04-14
简要分析了电子材料的特点；电子材料和器件多为复合材料，软硬材质结合较多，比如碳化硅基底的柔性材料，材料结构复杂，制样前处理方法多样，或者大范围包埋或者小区域局部包埋再进行磨抛处理。 根据材料特性介绍电镜观察的注意事项以及对材料制备的要求。电子材料多有粘结剂，填充料等存在，此种材料多为不导电的高分子或无机材料，电镜观察时需要注意样品的导电处理及选择合适的观察信号类型，如期间内部的线路排布，由于和基底材料的材质不同元素差异大，一般选择背散射信号观察效果更好，为了减少荷电效应，一般采用低电压低束流模式进行观察。 对于扫描电镜观察的平整断面制备，一般需要先切至目标位置附近，再做离子束的处理。徕卡精研一体机EM TXP机械处理电子材料，一般不需要复杂包埋即可实现定点加工和磨抛，如果结构信息宏观则可以直接进行光镜或电镜或原子力的观察分析，如果要求高，则将样品磨抛至目标位置附近50微米左右，再装入离子束进行无应力加工。徕卡三离子束EM TIC 3X为散焦型离子枪，加工产热低，热量聚集效应不明显，对于耐热程度差的电子材料加工，优势非常显著。样品固定时，除了常用样品托可选择多功能样品托，样品形状不规则，也可进行加工处理。当需要冷冻加工时，徕卡冷冻台降温速度快，30min左右即可降温至-120℃，大大提高了工作效率。徕卡的三离子束设备，可选配多个样品台，有常温切割的标准样品台，大面积抛光的旋转样品台，冷冻加工的冷冻台，一次可以装载3个样品的三样品台，以及可以做液态样品的冷冻传输样品台。满足各个类型的样品的加工。 对于 电子材料基础研究的方面，往往需要透射电镜分析材料内部信息，如通道效应，原子像，相晶格像，ELLS能量损失谱等，透射电镜观察对样品制备要求更高，此次介绍主要介绍了徕卡超薄切片机UC7制备电子的材料的实例。徕卡超薄切片机在生物领域应用广泛，同样在材料领域优势不容小觑，制备的薄片速度快，无热效应，可直接观察，制备
-
肿瘤细胞中ecDNA新机制在斯坦福大学致癌基因研究的应用
作者：德尔塔 日期：2022-04-14
文章导读 eccDNA是染色体外的一种特殊的环状DNA，从它的出现至今已长达数年，但在起初的很长一段时间里并未得到人们的重视。随着高通量技术的发展，eccDNA(extrachromosomal circular DNAs，eccDNAs)作为染色体外的环状DNA的研究也进一步深入。在国际学术期刊《Nature》和《Cell》上相继发表的关于eccDNA在肿瘤的发生和发展中具有重要功能的报道使eccDNA成为了基因组学研究中的一个爆点。这两篇文章中认为eccDNA能够促进肿瘤细胞中原癌基因的表达，这一重要发现使eccDNA成为科研界关注的热点话题。 然而关于eccDNA在肿瘤细胞内的空间位置及作用机理仍未可知。近期，美国斯坦福大学研究团队在bioRxiv 预先发表了一篇题目为“EcDNA hubs drive cooperative intermolecular oncogene expression”的文章，对癌症细胞中ecDNA hubs（ecDNA聚集成簇）在致癌基因的表达中发挥重要的作用提出了一个新的分子机制，这为解析ecDNA在癌症细胞中的作用提出一个新方向，也为癌症**提供了新的理论基础。 发表平台： bioRxiv 发表日期： 2020.11.20 实验方法: WGS, RNA-seq, ChIP（以上服务云序均可提供） 文章链接：EcDNA hubs drive cooperative intermolecular oncogene expression 研究内容 此前研究发现ecDNA是大小约100kb-几Mb的双链环状DNA。由于其自身没有着丝粒，因此在细胞分裂中可随机分配到子细胞，这一特性使ecDNA在肿瘤耐药性方面发挥作用。而且，ecDNA也可以重新整合到染色体上或者形成重复序列（HSRs）。此外，ecDNA相比于染色体DNA有更加松散的结构，更适于其携带的致癌基因的转录和表达。ecDNA存在于正常染色体之外，其在细胞核中的空间组织目前还不清楚。但值得注意的是，ecDNA在某些生物学过程之后会发生聚集。本文中作者展示了由10-100个ecDNA聚集组成的ecDNA簇，它们聚集在间期细胞核内，驱动分子间增强子的重排从而驱动致癌基因表达。本研究中，通过检测在MYC-PVT1融合基因的ecDNA空间、表观和转录水平的动
-
病理切片染色在临床病理学诊断中的应用
作者：德尔塔 日期：2022-04-14
什么是病理学 按照普遍的理解，病理学科的诞生促进了人类对于疾病的病因、发病机制等方面的研究,帮助人类了解疾病的发生发展规律,阐明疾病本质。同时病理学科也是基础医学与临床医学的桥梁。 通过病理学诊断为临床诊疗提供有力的证据从而辅助临床医生做出正确的**决策。 病理诊断的常见手段：病理切片染色 病理学是一门古老的学科 考古发现，人类对于疾病最早的描述出现在古埃及时代，人们在莎草纸上对疾病进行文字化记载，其中很多疾病的描述类似现代医学中提到的骨折以及溃疡等症状。只不过在那个时代，人们对于疾病机理进行探索，往往笼罩上神秘的宗教色彩。 古希腊时期 细心的小伙伴可以注意到，肿瘤的英文“Cancer”，同时也有“巨蟹座”的含义，那是因为在古希腊人眼中，某些特性的肿瘤形成的病灶呈现出僵硬的肿块，并有向四周延伸的分布，犹如病人体内潜伏了一只螃蟹。 然而由于早期人们对疾病的认知往往与宗教神灵以及天文星象混为一谈，所以早期的病理学并没有长足发展。 十六和十七世纪 十六和十七世纪时期，科学家们开始从大量解剖中，由人体器官的功能结构的角度给出临床判读，奠定了现代医学的基础。 十九世纪显微镜的发明，更是使得人们可以从局部组织的特征对疾病进行诊断分类，这也是现代病理诊断产生的技术基础。随着显微镜的诞生，人们得以对人体组织器官进行细致入微的研究，并形成了科学的现代病理学知识体系。 21世纪以来 二十一世纪随着分子生物学赋能临床医学研究，病理的范畴涵盖了从组织到细胞、微生物，再到单个分子及其相互作用，也就相应地形成了组织、细胞、微生物以及分子病理诊断技术。 徕卡生物系统助力病理学研究 徕卡生物系统组织病理部门为组织病理学实验室和研究人员提供最优质、最全面的病理产品系列。理想的产品组合覆盖组织学的每个步骤，还为整个实验室提供高效的工作流程方案。 从组织标本的采集和运送，取材，标本识别，冰冻切
-
BRGSF小鼠：重度免疫缺陷小鼠的发展史和应用领域
作者：德尔塔 日期：2022-04-14
BRGSF小鼠：重度免疫缺陷小鼠 免疫缺陷小鼠的发展史 免疫缺陷小鼠是指免疫系统上一种或者多种免疫成分（比如T、B、NK细胞）存在缺陷/缺失的小鼠。这种小鼠被广泛应用于肿瘤学（比如肿瘤生长、转移、抗肿瘤药物筛选）、免疫学（比如免疫细胞发育增殖机制、免疫疾病发生机理）、传染病学（比如病毒/细菌性传染病致病机制）、干细胞生物学（比如人源干细胞移植）等研究领域。 免疫缺陷小鼠的发展史也是一部科学的进化史。从1966年由Foxn1基因突变获得具有T细胞缺陷的裸鼠（nude mice），1995年由PrkdcSCID基因突变获得具有T、B细胞缺陷的NOD/SCID小鼠，再到由PrkdcSCID和Il2rg-/-获得同时具有T、B、NK细胞缺陷的NOG小鼠（2000年由日本CIEA研发）、NSG小鼠（2007年由美国Jackson Lab研发），以及后续的一系列N*G系列小鼠（比如NRG、NDG、NKG）和它们的衍生模型（比如NSG-SGM3、NOG-EXL），更多的免疫缺陷小鼠模型还在被源源不断地研发出来。尽管拥有这么多竞争者，我们的重度免疫缺陷小鼠BRGSF依然不怯场。 BRGSF小鼠名字的意义 介绍小鼠我们先从来源和名字开始。BRGSF小鼠是2017年由法国巴斯德研究所James P. Di Santo团队构建的[1]，全称为BALB/c Rag2-/-Il2rg-/-SirpαNODFlk2-/-小鼠。就像人类的名字一样，小鼠名字里的每个字母也有着独特意义。 “B”显示BRGSF小鼠为BALB/c遗传背景。与NOD背景小鼠不同，BALB/c背景小鼠拥有完整的补体级联反应，体内存在有效的补体依赖的细胞毒性（Complement- dependent cytotoxicity, CDC）机制，可用于研发利用CDC机制清除CAR-T细胞的药物。 “R”表示BRGSF小鼠的Rag2基因被敲除。Rag2 （Recombination activating gene 2）编码RAG2蛋白，而RAG2和RAG1共同组成的RAG蛋白是T、B细胞分化发育过程中VDJ重排必需的重组酶。敲除Rag2导致小鼠缺乏成熟T、B细胞。 “G”表示BRGSF小鼠的Il2rg基因被敲除。IL2受体的gamma链是多种细胞因子（Il-2、Il-4、Il-7、Il-9、Il-15、Il-
-
生物3D打印应用 | 挤出与静电纺丝配合打印三维活性生物结构
作者：德尔塔 日期：2022-04-14
生物3D打印是以数字三维模型为模板，通过层层堆叠的方式制造生物材料、生物支架或组织器官的生产方式。其作为现代医学的有力辅助手段，正在实验和临床阶段发挥越来越重要的作用。 目前，生物3D打印的多种方式中，挤出式打印配合分散有细胞的水凝胶已经可以打印出多种简单的组织、器官，但其机械强度仍然无法达到在高度上随意堆叠的程度，即只能打出近似平面结构。因此，有科学工作者将分散有细胞的水凝胶与纤维搭配使用，通过纤维搭建的三维支架，将细胞填充以进行培养[1]。 目前比较成熟的纤维打印使用的是熔融沉积成型技术（Fused Deposition Modeling, FDM），但FDM相对较差的分辨率，使得打印出来的支架无法稳定提供用于细胞分化的合适微环境。在此情况下，新型的熔融电子书写（Melt Electrowriting, MEW，也被称为熔融静电纺丝）逐渐被人们所重视。MEW的打印精度完全可以达到相关实验的要求，但之前的报道均是先打印好支架，然后再将细胞嵌入其中。这对于结构复杂的支架而言，很难保证内部充分填充，于是荷兰乌特勒支大学教授Miguel Castilho和Jos Malda通过采用regenHU 3DDiscovery Evolution系列打印机的挤出和静电纺丝两种打印头协调工作，成功实现单步骤完成活性生物结构的打印过程。 同时安装静电纺丝打印头和挤出式打印头，即可实现单一步骤打印 该科研组为马间充质干细胞进行荧光染色后，将其分散在10%甲基丙烯酸酐化明胶（gelMA）中，作为生物墨水，用挤出式打印头进行打印；选用聚己内酯作为支架墨水，用静电纺丝打印头进行打印。静电纺丝可以打印细至13 μm的丝线，而gelMA的挤出式打印直径在200 – 400 μm之间，通过静电纺丝打印出框架，使得gelMA可以固定在既定位置，间接提高了挤出式打印头的分辨率。 分别用Dil（红）、DiO（蓝）和DiD（绿）染色的马间充质干细胞在纤维支架（灰）中的打印情况 当然，在生物体中，纤维的分布远比简单几何图形要复杂，为了证明这种打印方式可以应用
-
新形势下胰岛素生产企业将何去何从
作者：德尔塔 日期：2022-04-14
糖尿病流行病学及胰岛素药物市场 相关数据显示，2019年全球糖尿病患者超4.63亿，2045年或达7亿，我国糖尿病患者在检出率偏低情况下， 2019年已达1.16亿，2045年或达1.47亿；糖尿病患者，尤其是作为需要胰岛素依赖的I型糖尿病患者，需要长期承担高昂的**费用，其中主要的费用来自注射用胰岛素。 2019年全球糖尿病相关支出费用的7600亿美元，其中药物市场规模约960亿美元，而重中之重的胰岛素类药物约占一半，为450亿美元，2019年我国胰岛素及其类似物药物市场超260亿元人民币。 带量采购必将影响胰岛素药物价格 我国为降低居民医疗费用和国家医保负担，于2018年底实行药品带量采购政策，一经推行，中标化药多数降价超过80%，部分降价超95%；2020年底，带量代购政策进入生物药领域，作为大热门的癌症**热门靶点PD-1抗体药，也经历了断崖式降价，恒瑞卡瑞丽珠单抗降价85%。 而作为糖尿病**大品种药物的胰岛素，未来必将进入带量采购政策范围，大幅降价不可避免，别说降价85%，就算是降价60%，在胰岛素行业竞争日益激烈的当下，胰岛素厂家情何以堪。 胰岛素药物国际及国内市场竞争格局 当今胰岛素行业竞争日益激烈，从全球格局看，诺和诺德、礼来和赛诺菲三家公司占据了85%以上的市场，但后起之秀如Bioton、Workhardt、Biocon、Julphar、北京甘李、通化东宝等，都已经在全球市场占据一席之地。 据不完全统计，全球有产品上市的胰岛素生产厂家已近百家，而Wockhardt和Biocon等印度胰岛素生产企业，受益于当地医药研发政策和低制造成本，将对全球胰岛素市场格局带来剧烈冲击。 国内胰岛素市场竞争更加激烈且同质化严重，除通化东宝、甘李药业、珠海联邦、合肥天麦和江苏万邦等企业有胰岛素产品上市外，诸多大型药企如浙江海正、华东医药、恒瑞医药、正大天晴和山东新时代等均在布局胰岛素药物，据不完全统计，国内已经布局及正在布局胰岛素药物的药企超过50家，未来胰岛素行业的竞争，即将进入一片红海。 部
-
神经退行疾病致病基因TARDBP在肌萎性侧索硬化症与额颞叶痴呆的应用
作者：德尔塔 日期：2022-04-14
想获得国自然选题思路，提高国自然基金申请命中率？想调整研究方向，获得学术研究突破口？有机会发高分文章？你需要了解学科发展态势和未来走向！赛业生物专栏《Gene of the Week》每周会根据热点研究领域介绍一个基因，详细为您介绍基因基本信息、研究概况和应用背景等，助您保持学术研究敏锐度，提高科学研究效率，期待您的持续关注哦。今天我们要讲的主角是肌萎性侧索硬化症、额颞叶痴呆等神经退行性疾病的致病基因TARDBP。 基因基本信息 TARDBP基因研究概况 TARDBP基因编码的TDP-43 (TAR DNA binding protein 43)蛋白与DNA和RNA都能进行结合，在细胞内的RNA转录，选择性剪切和mRNA的稳定性调节方面都发挥着重要的功能。其为人所知主要是该蛋白的聚集和泛素化形成的蛋白质包涵体在肌萎性侧索硬化症ALS (amyotrophic lateral sclerosis)和额颞叶痴呆FTLD (frontotemporal lobar degeneration)患者的受损区域细胞中均能检测到。并且在大约1/3的阿尔茨海默病患中也能检测到TDP-43的异常变化。目前，在家族性ALS病例中已经鉴定出了40多个TARDBP的突变。 图1. TDP-43结构及疾病相关突变。从左到右，TARDBP有101个氨基酸的氨基末端（NTD）；接下来是两个RNA识别区（RNA recognition motifs， RRM），91个氨基酸的RRM1和74个氨基酸的RRM2；在NTD中还有一个16氨基酸的核定位信号（NLS）;一个11个氨基酸的核转运信号区（NES）；最后是富含甘氨酸的C末端，而线粒体定位区（M1,M3和M2）则分散在不同的区域；此外在甘氨酸富集区内还有一小段谷氨酸/天冬氨酸富集区（Q/N）。整个甘氨酸富集区是ALS相关突变最为频繁的区域。不同颜色的突变信息表示与不同的疾病相关，sALS表示散发性ALS相关突变，fALS表示家族性ALS相关突变，FTLD标志额颞叶痴呆。下方的蛋白质示意图分别表征TDP-43的N端，两个RNA识别区以及C端的三维结构。信息来源：https://doi.org/10.3389/fnmol.2019.00025。 图2. TDP-43的功能。TDP-43在细
-
仓鼠ELISA检测试剂盒优势与注意事项
作者：德尔塔 日期：2022-04-14
仓鼠ELISA检测试剂盒注意事项： 1. 仓鼠ELISA检测试剂盒品牌试剂盒使用前请保存在2-8℃。复溶后的标准品若未用完，请废弃。 2. 微量试剂运输中颠簸和可能的倒置，会使液体沾到管壁或瓶盖。因此使用前请1000转/分离心1分钟，以使附着管壁或瓶盖的液体沉积到管底。 3. 从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶,属于正常现象，微加热至40℃使结晶完全溶解后再配制洗涤液。 （加热温度不要超过50℃）使用时洗涤液应为室温。 4. 不同批号的试剂盒组份避免混用（洗涤液和反应终止液除外）。 5. 充分轻微混匀对反应结果尤为重要，zui好使用微量振荡器(使用zui低频率)，如无微量振荡器， 可在反应孵育前手工轻轻混匀。 6. 在试验中标准品和样本检测时建议作双孔检测。 7. 试验中所用的试管和吸头均为一次性使用，严禁在不同的液体之间混用！否则将影响试验结果。 8. 试验中请穿着试验服并带乳胶手套做好防护工作。特别是检测血液或者其他体液标本时，请按国家生物试验室安全防护条列执行。 仓鼠ELISA检测试剂盒公司优势： 1. 仓鼠甲状腺结合球仓鼠ELISA检测试剂盒品牌立足于科研前沿，主营ELISA试剂盒、抗体或抗原、血清、培养基等等各种科研试剂，满足各大高校以及研究机构在生物领域的科研需求。 2.完善的实验技术开发平台，和成熟的试剂研发系统，并熟练掌握了各种酶联技术，产品具有较强的稳定性和较高的准确性。 3.面向高校、研究所、医院、卫生防疫、商品检验检疫、专注于生物技术研发的公司等单位的广大客户。 4.多年积累的营销经验，已形成一套相对完整的产销体系，可为客户提供周到的售前售后服务。
-
大鼠ELISA检测试剂盒操作方法双抗分类
作者：德尔塔 日期：2022-04-14
大鼠ELISA检测试剂盒原理： 免疫测定技术的基础在于抗原抗体大鼠ELISA检测试剂盒之间的特异结合反应，所以任何优质的诊断试剂离不开优质的原料，如抗原抗体，酶等。以前用于免疫测定的抗原通常为各种纯化抗原，而抗体则为纯化抗原免疫动物后获得的多克隆抗体和使用杂交瘤技术得到的单克隆抗体，而抗原或抗体的标记物如酶标结合物则通过各种化学合成方法制备。近年来，随着分子生物学的发展，使用基因工程方法制备各种特殊的抗原或抗体及其酶结合物等免疫测定试剂几成为现实的新一代试剂，各种新型使用的测定方法也不断出现。 大鼠ELISA检测试剂盒操作方法： 双抗体夹心法： 1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃ 过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。（简称洗涤，下同）。 2. 加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。（同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔）。 3. 加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体（经滴定后的稀释度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗涤。 4. 加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。 5. 终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。 6. 结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在小鼠Elisa试剂盒检测仪上，于450nm（若以ABTS显色，则410nm）处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。 间接法： 1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃过夜； 2.次日洗涤3次； 3.加一定稀释的待检样品（未知抗体）0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤； 4.（同时做空白、阴性及阳性
-
电子显微镜样品制备详解
作者：德尔塔 日期：2022-04-14
关注“徕卡显微系统”官方微信 > 徕卡学院 > 课程回顾，注册即可观看完整视频。 近年来，随着新能源及半导体行业的蓬勃发展，涌现出大量新型材料及产品，其复杂的结构和组成、特殊的物理和化学性质，对这些材料的电镜制样过程带来巨大的挑战。具体如下：a. 材料尺寸分布范围大，对加工方法的通用性带来巨大挑战；b. 加工范围大、精度高，要求设备能够定点、大范围加工；c. 多层结构、组成复杂，对样品加工造成较大难度；d. 材料对热量敏感、或者极易与空气中的水汽或氧气反应，对加工、运输环境要求严苛。 针对上述材料特点和电镜制样难点，徕卡显微系统推出三种加工策略和两种设备，以便能尽可能真实地展现出材料表面及体相结构。 1.离子束切割/抛光(徕卡EM TXP → 徕卡EM TIC 3X) 对于绝大部分常见样品，无论是块材、片材、薄膜、颗粒或者粉末(包埋后)，均可使用精研一体机(徕卡EM TXP)对其进行精准的定点切割、研磨和抛光，接近我们所感兴趣的位置(预留~50 μm)，再使用三离子束切割仪(徕卡EM TIC 3X)进行无应力切割，直接暴露出目标位置。或者也可以在机械抛光后，使用徕卡TIC 3X对其进行大范围离子束抛光，去除应力损伤层，暴露出干净平整的样品表面。 2.超薄切片(徕卡EM TXP → 徕卡EM UC7/EM FC7) 对于高分子材料、晶体和较软的金属材料，我们能够先使用修块机或徕卡TXP对其表面进行修整，再使用钻石刀切出规整的表面，随后就能够借助超薄切片技术，加工出100 nm以下的薄片，进行透射电镜的观察。同时，该策略也能逐层去除表面材料，暴露出内部结构、缺陷或者杂质，再通过扫描电镜、能谱等仪器，表征确定其形貌与成分。 3.离子减薄(徕卡EM TXP → EM RES102) 对于块状、片状、甚至薄膜材料，我们可以使用TXP对其进行预加工，得到厚度小于30 μm，直径为3 mm的圆片，再通过离子减薄仪(徕卡EM RES102)进行中央的薄区加工，用于透射电镜观察。 4.高真空镀膜(徕卡EM ACE600) 高真空镀膜能够帮
-
细胞状态差的三大原因实例分析
作者：德尔塔 日期：2022-04-14
我们在做技术支持时常常接到用户来电： “老师，我的细胞状态很差，不知道怎么了，您能帮我分析下原因吗？” 细胞状态很差，常常出现的现象是：细胞边缘不清晰、细胞不饱满、折光性差、背景比较脏、黑点很多、细胞碎片多（细胞凋亡后的细胞碎片）、单个细胞内有空泡（凋亡）且空泡比较多；如果细胞出现老化，也就是细胞比较扁平、增殖减缓、细胞核体积增大、细胞突触变多，此时观察到的细胞状态也是不正常的。 ▲ 左图：背景很脏；右图：有较多小黑点 因此细胞状态差只是对这些现象的一种笼统说法。 究其根本，细胞状态变差主要是由于两种原因： 1 细胞营养条件不够 2 细胞被污染了 今天我们将深入分析影响细胞状态的这些原因。 营养条件不够 细胞营养条件不够时，就需要从培养基方面考虑。 1. 血清 由于血清来源于动物，且含有细胞培养中所需的各种营养（血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等），这奠定了血清是细胞培养实验中最普遍的试剂的基础。 市面上的牛血清产品名称虽然五花八门，但根据其不同的特性，追其根本，大致可分为以下四种。根据牛的取血年龄可以区分： 胎牛血清（Foetal Bovine Serum，简称FBS）指的是取自未出生，母牛剖腹心脏穿刺采血得来的血清。 国产胎牛血清（并无明确定义，但通常用此命名）指的是出生4-6小时，且未进行哺乳（unsuckled）进食的新生牛，有时还称作国产新生牛血清。 新生牛血清（Newborn Calf Serum，简称NBCS，或称小牛血清）指的是出生14天-3个月进行取血的牛血清。 成年牛血清（Adult Bovine Serum，简称ABS）指的是取血时牛龄通常超过12个月的牛血清。 以上取血牛龄的差异主要是受当地国家畜牧业的发展及法规限制影响，因为牛血多为畜牧业副产业，并未有专门为取血而养的牛。 这几种不同牛龄血清所含的促细胞生长因子、促贴附因子、激素及其他活性物质等组分与比例不同。常规来说，牛龄越小的牛血清，细胞培养效果越好。
-
多磷酸化肽标记技术
作者：德尔塔 日期：2022-04-14
蛋白质磷酸化是生物界最普遍，也是最重要的一种蛋白质翻译后修饰，20世纪50年代以来一直被生物学家看作是一种动态的生物调节过程。在细胞中，大概有1/3的的蛋白质被认为是通过磷酸化修饰的。蛋白质的磷酸化修饰与多种生物学过程密切相关，如DNA损伤修复、转录调节、信号传导、细胞凋亡的调节等。磷酸化蛋白质及多肽的研究可以帮助人们阐述上述过程的机理，进一步认识生命活动的本质。近年来随着蛋白质组技术的不断发展，蛋白质磷酸化的研究越来越受到广泛的关注。 蛋白质磷酸化在细胞信号转导中的作用 磷酸化多肽主要指肽链中的Ser、Tyr和Thr残基的侧链羟基被修饰成酸式磷酸酯多肽。磷酸化多肽是研究蛋白质磷酸化过程的必不可少的工具，因此研究蛋白质及多肽的磷酸化反应并确定成熟简便的合成路线就变得非常重要。目前为止，多肽的磷酸化修饰主要有后磷酸化法和单体法两种合成方法。后磷酸化法是多肽序列在树脂上合成完后，再对其中的Ser、Tyr或Thr的侧链羟基进行磷酸化；单体法则是将适当保护的磷酸化氨基酸直接引入到多肽序列中，这种方法较后磷酸化法操作更为简便，已经成为多肽磷酸化修饰的主要方法。 单体法修饰时，磷酸化的氨基酸由于侧链修饰的较大基团产生的位阻而导致难以与肽链缩合，并且之后的氨基酸引入都会比较困难，尤其在含有多个磷酸化位点修饰时，合成将变得异常困难，并且最终产物成分复杂，难以分离，产率极低。因此，当肽链中多个位点进行磷酸化时，可以考虑采用后磷酸化法，其合成过程主要就是在多肽合成结束之后，选择性的脱去要标记氨基酸的侧链保护基，对于Tyr，Thr可以直接使用侧链不保护的氨基酸进行反应。侧链保护基在1% TFA/DCM条件下可以定量的脱除。后磷酸化时，可以采用双苄基亚磷酰胺，四氮唑生成亚磷酰胺四唑活性中间体，连接到羟基上，然后在过氧酸条件下氧化生成磷酰基，完成反应。
咨询热线
18133906270
德尔塔官方微信