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比色皿选择与使用(比色皿,实验简介,实验步骤,注意事项,所需试剂)
作者:德尔塔 日期:2022-03-30
一、比色皿选择与使用实验简介: 比色皿选择和使用过程中,引起实验较大误差的原因是比色皿不干净,但最近发现,引起实验较大误差的原因不仅仅是比色皿不干净,同时比色皿的选择不当也会导致不可预测的错误,所以作此总结,讲解如何正确的选择比色杯,以及使用比色杯过程中的清洗方法和需要注意的事项。 二、比色皿选择与使用实验步骤 (一).选择正确的比色皿 比色皿的透光表面由的原材料是可以透射所使用的波长范围内的光的材料。工作于200-350nm的比色杯更加适用于紫外线区域,透明表面的石英比色杯必须由石英或熔融石英制成。石英比色皿可以在紫外线区域使用,并且可以用于可见区域,但价格通常较贵,因此应根据使用的波长选择比色杯。如果不使用紫外线区域,请使用普通的玻璃比色杯。不同材料所制成比色皿使用区域不同,如由普通硅酸盐光学玻璃制成的透光比色杯,更适合用于350nm至1000nm的可见光区域内。 (二).正确使用比色杯 使用比色杯时,两个透光表面必须完全平行并垂直放置在比色杯支架中,以确保在测量过程中入射光垂直于透光表面,以避免光反射损失并确保固定的光路。试管通常是长方体,其底部和两侧是磨砂玻璃,而其他两侧则由光学玻璃制成的透光表面制成。因此,使用时应注意以下几点: 1拿住比色杯时,只能用手指触摸两侧的毛玻璃,并避免触摸光学表面。 2请勿使光学表面接触坚硬或肮脏的物体。盛放溶液时,其高度应为比色皿的2/3。如果光学表面上留有残余液体,首先使用滤纸进行轻轻吸收,然后再用丝绸/镜纸进行擦拭,擦去多余残留液体。 3需要注意比色杯中不能长时间的存放任何一种含有会腐蚀玻璃的物质的溶液。 4使用比色杯后,应立即用水冲洗。如有必要,可以将其浸泡在1:1盐酸中,然后用水将使用后的比色皿冲洗干净。 5需要注意的是比色皿禁止靠近、置于火焰或电炉上,禁止置于干燥箱中进行加热及烘烤。 6如果在测量过程中对比色皿有任何疑问,可以对其进行自我测试。可以将波长选择设置为实际
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色谱柱的选择(实验简介,实验步骤,注意事项,所需试剂)
作者:德尔塔 日期:2022-03-30
一、色谱柱的选择简介: 色谱柱的选择通常根据相似相容的原理进行色谱柱的选择,例如极性色谱柱对应极性物质,而色谱柱的规格如内径,柱长与固定液膜厚等参数,决定了这根色谱柱的分析能力。 二、色谱柱的选择实验步骤 (一).使用氨基柱时: 应该注意的是,氨基色谱柱的键合官能团氨基丙基比C18和C8色谱柱的键合官能团C18和C8更容易水解,因此,首先必须准备好其使用寿命短,尤其是当使用条件在相反的条件下。在反相条件下使用时,此时影响最大的因素是PH值的范围,因此必须做好PH值范围的控制,PH值与水解成反比,当PH值越低时,水解的风险也就越。因此,在使用后以及准备长时间保存时,必须将氨基柱清洗并保存在纯净的水中。有机溶剂是良好的维护措施。 有一种情况是,当使用氨基色谱柱分析酸性物质(例如果汁中糖分)时,酸性物质的存在意味着质子的存在,质子可能会使带有轻微负电荷的氨基官能团质子化,从而导致使用一段时间后,某些类型的分析物的保留特性发生了变化,或者柱效降低了。这时建议用5-10倍于含有0.5-1.0%NH3的50-50乙腈-水溶液的色谱柱体积洗涤色谱柱,同时在后续再分析此类酸性分析物时在流动相中添加少量氨水,例如0.1%。 3.使用氰基柱时: 正相色谱柱通常用于正相色谱,但也可以用于反相色谱(即,正相色谱柱使用反相条件)。当将其用于正相色谱法时,可以使用低极性流动相,例如正己烷,而当用于反相色谱法时,作用于甲醇或水的强极性流动相,因为疏水性相对较低,并且由于具有腈基,因此与ODS(反相)相比具有不同的选择性。当用作反相时,适用于分离在ODS上分离时间过长的组分。 (三).使用苯基柱时: 它属于正相色谱法和反相色谱法。它主要用于含苯基物质,属于一种特殊的色谱柱。当用于正相色谱时,可以使用低极性流动相,例如正己烷,请参阅相应的硅胶柱。当用于反相色谱时,可以使用强极性的甲醇或水的极性流动相,请参阅相应的C18柱。洗涤方法与氰基柱相同。 三、色谱柱的选择实验
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植物叶片的光合作用速率测定实验 (实验介绍,实验设备和试剂,实验步骤,实验计算结果)
作者:德尔塔 日期:2022-03-30
一、植物叶片的光合作用速率测定实验介绍 植物叶片的光合作用速率测定是植物生理学的基础研究方法之一,在作物产量,作物生态,新品种育种以及光合作用的基本理论等方面具有广泛的应用。 根据光合作用的一般反应式: C022H2O→(CH2O)O2H2OC022H2O→(CH2O)O2H2O 原则上,光合强度可以由任何反应物的消耗速率或产物的生产速率表示。由于植物中的水分含量很高,并且植物随时都在不断吸收和流失水分,因此水参与了许多生化反应,即体内的水分变化频繁,因此实际上不可能通过改变水分含量来测量光合速率。在科学实验中,可以使用以下方法测量和表达光合速率(表9-1),其中最常用的方法是:改进的半叶法,红外CO-2分析法和氧电极法。以下介绍主要介绍“改进的半叶方法”。 改进的半叶法原理: 在同一片叶子的中脉两侧,其内部结构和生理功能基本相同。叶子的一侧被遮蔽或部分去除,并放置在黑暗的地方,另一侧留在光下进行光合作用。一段时间后,将叶子两侧的相应区域取出并干燥并分别称重。可以根据被照射部分的干重的增加来计算光合速率。 为了防止叶片产生光合产物,可以限制双子叶植物的叶柄,单子叶植物的叶片的根部可以用沸水烫伤,或者用三氯乙酸(蛋白质沉淀剂)处理以破坏活细胞。韧皮部。这些处理几乎不影响水和无机盐向叶片的传输。 二、植物叶片的光合作用速率测定实验设备和试剂 设备:FS剪刀,分析天平,称量容器(或铝箱),烤箱,刀片,金属(也可提供有机玻璃)模板(或打孔器),纱布,热水瓶或其他便携式加热设备,夹具,盖瓷盘等。 试剂:三氯乙酸,石蜡。 序号 产品 货号 CAS号 备注 1 三氯乙酸 JT12006 76-03-9 2 切片石蜡 CG0206 8002-74-2 以上是实验采用的试剂,请采用高品质的德尔塔生物的生化试剂。 三、植物叶片的光合作用速率测定实验步骤 1.选择测试样品:实验可以在晴天的早晨8点至9点开始,并有10片代表性的叶
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细菌生化检验实验 (实验介绍,实验试剂,实验步骤,实验结果的判断)
作者:德尔塔 日期:2022-03-30
一、细菌生化检验实验介绍 石蕊既是pH指示剂又是氧化还原指示剂。在酸性溶液(pH 4.5)中为红色,在碱性溶液(pH 8.3)中为蓝色。介质的自然色应为紫蓝色(pH 6.8)。石蕊可以被某些细菌还原为无色基质。 牛奶含有乳糖和三种主要蛋白质,即酪蛋白,牛奶蛋白质和乳球蛋白。 牛奶凝结主要是由含有凝乳酶的细菌引起的,凝乳酶可将酪蛋白转化为酪蛋白,或由于乳糖发酵产生大量酸而导致酪蛋白沉淀。 一些细菌产生脂肪酶,脂肪酶可以分解牛奶中的脂肪,形成黄色透明液体。 一些细菌具有酪蛋白水解酶,可以催化酪蛋白水解,最终将其转化为透明的液体酪蛋白沉淀。此过程称为肽化。 二、细菌生化检验实验试剂 序号 产品 货号 CAS号 备注 1 脱脂奶粉 HC1218 2 石蕊 HXH502289 1393-92-6 3 水1000.0 mL 4 乙醇 JT26000 64-17-5 以上是实验采用的试剂,请采用高品质的德尔塔生物的生化试剂。 脱脂奶粉100.0克,石蕊属,水1000.0 mL 三、细菌生化检验实验步骤 将奶粉完全溶解在水中,调节至pH 6.8,添加石蕊溶液,直到其呈现紫蓝色(pH 6.8),分成试管,每管约5 mL。在115°C下灭菌10分钟,迅速冷却,然后放入冰箱中以备后用。 石蕊溶液的制备方法:称取2.5 g石蕊,在碗中研磨,转移到装有40%乙醇水溶液的50 mL烧瓶中,煮沸1分钟,静置约10分钟,吸取上清液并将其转移到另一个在烧瓶中,向原始烧瓶中加入50 mL 40%的乙醇水溶液,煮沸1分钟。 将上清液添加到之前的上清液中,将两种上清液均匀混合,离心沉淀,将上清液倒入100 mL量筒中,用40%乙醇补足100 mL,并逐滴加入1 M盐酸直至溶液呈紫色,这是2.5%的石蕊溶液。 95%乙醇42.1 mL加水至100 mL是40%乙醇溶液。 3.测试方法 接种受试细菌的18-24小时培养物。如果是厌氧菌,则在培养基试管中加入无菌铁屑或指甲,并盖上无菌凡士林,然后在36±1
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His-Tag重组蛋白亲和层析标准操作规程(His-Tag,简单介绍,实验所需材料,实验步骤,试剂清单)
作者:德尔塔 日期:2022-03-30
一,His-Tag重组蛋白亲和层析简单介绍 如果表达的蛋白质含有6个His片段,并且镍离子附着在亲和吸附凝胶上,则蛋白质会特异性地与吸附凝胶结合,下面详细介绍His-Tag重组蛋白亲和层析标准操作规程。 二,His-Tag重组蛋白亲和层析实验所需材料 His-Tag重组蛋白亲和层析实验材料 琼脂糖凝胶中镍亲和柱、紫外探测器、蛋白质电泳装置及配件,如夹子、玻璃板、灌封支架、缓冲罐等。、5毫升注射器 0.45μm过滤器、超声波干扰器 His-Tag重组蛋白亲和层析试剂: 1.结合缓冲液:20 mM Tris HCl,150 mM NaCl,10 mM咪唑,pH=8.0 2.洗脱缓冲液:20 mM Tris HCl,150 mM NaCl,不同浓度的咪唑,pH=8.0 3.20%乙醇 4.三蒸馏水 5.透析液:20 mM Tris HCl,1 mM EDTA,pH=8.0 注:纯化过程中使用的所有试剂都用三种蒸馏水定容。溶液制备后,用0.22μm滤膜过滤,并在4℃下保存。 在本实验中,可以先配制出相应pH值的高浓度母液,使用时稀释。例如: (1) 1 M Tris HCl,pH=8.0 称取60.57 g Tris,溶于400 mL三蒸馏水中,充分溶解,调节pH值至8.0,加入三份蒸馏水,使其体积达到500 mL。用0.22μm滤膜过滤,并在4℃下保存在玻璃瓶中。 (2) 2.5 M NaCl,pH=8.0 称取36.53g氯化钠,溶于200ml三蒸馏水中,充分溶解,调节pH至8.0,加入三蒸馏水至250ml,用0.22μm滤膜过滤,4℃保存于玻璃瓶中。 (3) 1 M咪唑,pH=8.0 称取咪唑17.02g,溶于200ml三份蒸馏水中,充分溶解,调节pH值至8.0,加入三份蒸馏水至250ml,用0.22μm滤膜过滤,4℃保存于玻璃瓶中。 三,His-Tag重组蛋白亲和层析实验步骤 3.1 准备样品 将IPTG诱导的菌液以7000转/分离心10分钟,收集菌细胞,用PBS冲洗两次,再用纯化用的平衡液漂洗一次,最后在平衡液(35mL/g菌球)中重新悬浮,超声破碎收集的菌液至澄清,13000离心机转速10分钟,取上清液,用0.45μm过滤器过滤。 3.2 工艺过程 3.2.1准备 打开盖子后,在4℃下储存的试剂经超声脱气40分钟,并平衡至纯化温度。 3.2.2打包列 装填塔
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糖皮质类激素兴奋剂的分析测定(简单介绍,实验所需材料,实验步骤,实验试剂清单)
作者:德尔塔 日期:2022-03-30
一、糖皮质激素兴奋剂简介 糖皮质激素兴奋剂也可以称为糖皮质激素的化学结构是类固醇化合物,具有调节葡萄糖代谢,促进蛋白质向糖的转化,增加血糖浓度,抗炎,抗过敏以及调节水和盐代谢的功能。人体大量摄入糖皮质激素会导致体内激素比例失调,葡萄糖代谢异常和无机盐代谢异常; 长期大量使用糖皮质激素也会引起感染或加重感染,导致心血管系统并发症,骨质疏松症,肌肉萎缩,伤口愈合延迟和消化系统并发症,例如增加胃酸和胃蛋白酶的分泌并抑制胃粘液分泌,降低抵抗力,甚至导致胃肠道出血或穿孔。 除了糖皮质激素对人体健康的许多副作用外,它还影响运动员参加比赛时的身体状况。它违反了体育比赛中公平竞争的原则。因此,这种药物属于国际奥委会禁止合成代谢类固醇兴奋剂的禁令。 近年来,不时发生在某些保健食品,营养补品和某些动物食品中用于运动运动的糖皮质激素的检测事件。由于意外食用这种受污染的食物,许多运动员出现了。不必要的积极结果。 除了对参赛运动员进行严格的兴奋剂检测外,2008年北京奥运会还要求对运动员的所有食品进行严格监控。本文采用固相萃取纯化技术和超高性能液相色谱法/串联四极质谱动物性食品中糖皮质激素的系统测定与分析激素兴奋剂。 二,糖皮质激素兴奋剂实验所需材料 试剂和材料 20孔真空萃取装置,旋转蒸发器,绿洲HLB(500mg,6cc):乙腈、甲醇、甲酸、乙酸乙酯均为色谱法纯。实验用水为超纯水和无水硫酸钠。糖皮质激素标准品:强的松、泼尼松龙、氢化可的松、可的松、甲基泼尼松、倍他米松、地塞米松、倍氯米松、氟可的松,纯度≥98%。 三,糖皮质激素兴奋剂实验步骤 1.称取5 g均匀处理过的猪肉样品 2.加入10 g无水硫酸钠,20 ml乙酸乙酯,充分混合,匀浆1分钟,摇匀并提取10分钟,以10,000 rpm离心5分钟, 3.移入将上清液倒入浓缩瓶中,然后在残留物中加入10 ml乙酸乙酯 4.重复上述操作一次,将两种萃取液合并,在40°C旋转蒸发至干。 5.浓缩后,将样品溶于5ml 30%甲醇水溶液
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碳酸氢钠(简介,化学性质,MSDS,应用)
作者:德尔塔 日期:2022-03-30
一、碳酸氢钠简介: 碳酸氢钠表现为无味的白色结晶粉末或块状物,略带碱性(苦味), pH(新鲜配制的0.1摩尔水溶液的pH):在77°F下为8.3,pH(饱和溶液):8-9,无毒。 碳酸氢钠是具有碱化和电解质替代性能的碳酸单钠盐,解离后,碳酸氢钠形成钠和碳酸氢根离子,离子形成会增加血浆碳酸氢盐并缓冲过量的氢离子浓度,从而导致血液pH升高。 二、碳酸氢钠的产品等级: 序列 产品等级 产品货号 备注 1 AR碳酸氢钠 SS1340 分析纯碳酸氢钠 2 GR碳酸氢钠 SS1473 优级纯碳酸氢钠 3 HPLC色谱碳酸氢钠 FS0040 色谱纯碳酸氢钠 4 动物细胞培养碳酸氢钠 SS1474 细胞培养级碳酸氢钠 碳酸氢钠相关产品: 碳酸氢钠别名 碳酸氢钠(144-55-8),小苏打;重碱;重碳酸钠;碳酸氢钠盐(NaHCO3);碳酸氢单钠盐;碳酸氢钠(生物级);碳酸氢钠(缓冲液),纯碱 碳酸氢钠英文别名 Sodium bicarbonate(CAS:144-55-8);Sodium bicarbonate;Sodium hydrogen carbonate 碳酸氢钠CAS号 144-55-8 碳酸氢钠SMILES C(=O)(O)[O-].[Na+] 碳酸氢钠Inchi InChI=1S/CH2O3.Na/c2-1(3)4;/h(H2,2,3,4);/q;+1/p-1 碳酸氢钠InchiKey UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 碳酸氢钠分子式 Formula NaHCO3 碳酸氢钠分子量 84.01 碳酸氢钠闪点 FP No data available 碳酸氢钠熔点 Melting point 270°C 碳酸氢钠沸点 Boiling point No data available 碳酸氢钠极化度 No data available 碳酸氢钠密度 Density 2.159 碳酸氢钠蒸汽压 No data available 碳酸氢钠溶解度Solubility 溶于水(50 mg/ml),不溶于乙醇。 碳酸氢钠性状 White, monoclin
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单细胞凝胶电泳实验(凝胶电泳,简单介绍,实验步骤,注意事项)
作者:德尔塔 日期:2022-03-30
一,单细胞凝胶电泳实验简单介绍 单细胞凝胶电泳实验(又称彗星实验)的操作过程主要包括单细胞悬液制备、凝胶板制备、细胞裂解与解卷、电泳与中和、染色与观察等步骤。下面是单细胞凝胶电泳的操作步骤和注意事项。 二,单细胞凝胶电泳实验步骤 2.1分离并制备单细胞悬浮液: 1.体外培养的细胞系:用胰蛋白酶消化,最后用PBS悬液和移液管形成单细胞悬浮液。细胞需要计数。我已经提到了具体数额。 2.体内器官细胞:处死动物,取出器官,在汉克斯溶液中制备单细胞悬液。 2.2橡胶板制备: 1.取100μl 0.5%NMA,置于45℃水浴中,涂于磨砂玻璃载玻片上,形成底漆。均匀地推动盖子滑动,无气泡,并在4度下固化5至8分钟。 2.水平移开盖玻片,取100μl 0.5%LMA于37℃水浴中孵育,20μl细胞悬液(约400个细胞)混匀,立即铺开载玻片,加盖玻片,4℃固化5~8分钟。 2.3细胞裂解和电泳: 1.从制备好的橡胶板上取下盖玻璃后,将其浸入4℃预冷的细胞裂解液中,在4℃下裂解2.5~3小时。 2.取出凝胶板,用双蒸馏水浸泡冲洗,放入电泳槽,在4℃预冷的电泳液中浸泡20分钟。 3.将玻片水平放置在阳极端附近,在4°C下进行20至25分钟(25 V,300 mA)的电泳。可以在电泳槽周围加冰块保持低温。 2.4中和染色: 1.电泳结束后,将凝胶板在中和液中浸泡10分钟,每次共3次,每次更换中和液。最后晾干。 2.取出橡胶板,放入染色罐中,用2μg/ml EB染色液在黑暗中染色5~10分钟。 3.用蒸馏水冲洗两次,每次5分钟。让其干燥,滤纸吸收多余的水分,并尽快在荧光显微镜下观察。 三,单细胞凝胶电泳实验注意事项 1.细胞必须被消化成单个细胞。如果你生长的细胞是悬浮生长的,或者形状是圆形的(如hela),那么你可以直接刮取细胞,否则,如果细胞是非圆形的,如成纤维细胞等,在实验前必须用胰蛋白酶消化使其变圆。许多彗星实验总是不能产生结果。你可以考虑这是否是原因。 2.在电泳过程中,每次实验的电流和电压强度都应该是恒定的(例如:20伏,200毫安恒定),
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膜分离技术的应用 (膜分离技术,简单介绍,所需的材料,实验步骤,实验试剂清单)
作者:德尔塔 日期:2022-03-30
一,膜分离技术的简单介绍 膜分离技术在银杏中的黄酮类化合物是银杏的主要有效成分之一。银杏黄酮具有较强的清除细胞内自由基的作用,能降低细胞的氧化代谢,调节脑、四肢动脉失血引起的一系列心脑血管疾病。具有明显而独特的疗效。银杏叶中黄酮类化合物的含量占干叶的0.8%~3.5%,并随品种、地理分布和季节变化而变化。传统的提取工艺相对成熟,工艺路线如下: 银杏叶提取物的原料预处理、提取、过滤、抽滤、浓缩、沉淀离心、色谱分离、浓缩、干燥、成品 二、膜分离技术所需的材料 原料:以采摘的银杏叶为原料。 三,膜分离技术的实验步骤 1.预处理:将原料放入烤箱中,在60~65℃的温度下干燥,然后用高速纸巾搅拌机粉碎。 2.提取过滤:以1:9(W/V)加入70%乙醇,70~75℃水浴,每隔2小时搅拌提取,用纱布过滤,滤渣中加入70%乙醇,1:6加入,70~75℃水浴,每隔2小时搅拌浸出,用纱布过滤,合并提取物。 3.抽滤:用抽滤装置进行真空过滤处理,收集滤液,滤渣丢弃。 4.浓缩:用减压蒸馏装置回收乙醇,得到浓缩液。 5.沉淀离心:浓缩液用3倍蒸馏水静止沉淀4~6小时,在16℃12000r/min条件下,离心15分钟,得到澄清透明的离心液。 6.色谱分离:取树脂体积4倍的离心液,通过聚酰胺柱,用蒸馏水冲洗至流出物清澈,再加入与树脂体积相同的25%乙醇洗涤,排干后用80%乙醇。洗提并收集较暗的部分。 7.浓缩干燥:将洗脱液减压浓缩,真空低温干燥,得到淡黄色银杏叶提取物成品,黄酮含量测定在33%。 四,膜分离技术的实验试剂清单 序号 名称 货号 CAS 备注 1. 黄酮 JT23256 525-82-6 2. 乙醇 JT26000 64-17-5 3. 聚酰胺树脂 JSH6040 68186-30-1 以上为膜分离技术的所需的实验试剂。
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chelex 100提取DNA(方法,原理,提取DNA的优缺点,实验步骤)
作者:德尔塔 日期:2022-03-30
一、chelex 100介绍 Chelex100螯合树脂产物是含有一对亚氨基二乙酸离子的苯乙烯-二乙烯基苯共聚物的有机化学产物(chelex 100螯合树脂在结合多价金属离子的过程中用作螯合基团)。由于Chelex 100树脂的羧酸基团,chelex 100通常被分类为弱阳离子交换树脂。但是,该产品与这种类型的交换树脂之间的区别在于Chelex 100具有非常高的金属离子比选择性。 Chelex100具有非常高的键合强度,还用于生命科学中以提取DNA。 产品名 Chelex100螯合树脂 货号 SS6072 规格 1g,5g,25g,100g,1kg 二、chelex 100提取DNA方法 ※ 加入1/50体积的蛋白酶K(10 mg / mL),并将样品在65°C孵育2小时至过夜。 ※ 200 uL 5%Chexlex-100,加入10 uL蛋白酶K(20 mg / mL),在37°C下孵育2小时。 ※ 50ul Chelex液及lfl蛋白酶K水,56%温水浴消化2h后,煮沸8min,迅速放人冰盒冷却4min,以5000r / min速度离心lmin。吸取上清液作为DNA扩增模板于?20 %保存备用。 ※ 所有细菌菌株均在400μl的5%Chelex 100缓冲液(包含0.03%SDS,1%Tween-20和1%NP40)中处理并煮沸15分钟。通过除去一些上清液来扩增每个样品的DNA。为了裂解葡萄球菌,将蛋白酶K加入到5%Chelex 100缓冲液中,并将混合物在56℃下保温60分钟,然后煮沸15分钟。将存在肝素的血样在五倍体积的0.87%NH4Cl中进行红细胞裂解,沉淀白细胞,悬浮于200μl含20 mg / ml蛋白酶K的5%Chelex 100缓冲液中,于200℃温育。 56℃下60分钟,然后煮沸15分钟,离心1分钟,此时收集上清液用于PCR扩增。将CSF样品离心5分钟。然后除去上清液,并将细胞沉淀重悬于混合物中,并以与血样相同的方法处理。 三、chelex 100的应用 采用chelex100从头发以及其他样本中提取DNA(法医鉴定应用) ※ chelex100提取DNA实验首先取一小块冷冻的组织(少于1mg,可以用消毒的移液器尖端钻出),或1-3根有根的头发(需要依次用90%,70%乙醇和消毒水洗涤
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10 种**的DNA染剂及探针
作者:德尔塔 日期:2022-03-30
Deoxyribonucleic acid (or DNA) is one of the most important macromolecules in biology. It acts as the instructions for critical cell processes such as protein synthesis and is the blueprint for much of cellular structure. Because of DNA's importance, many visualization and quantification tools have been developed. Reagents and probes have been created to detect DNA in all kinds of applications- microscopy, gel electrophoresis and flow cytometry to name a few. With over 50 different dyes on the market, it can be a bit overwhelming to determine the optimal one for any given experiment. To simplify the process, here is what we consider the 10 Best DNA Dyes. Ethidium bromide溴化乙锭 cheap, potential hazard, well-established, impermeable, gel electrophoresis, fluorescence microscopy, orange fluorescence Ethidium bromide (EtBr) is one of the most popular DNA probes. This is because it was one of the first to be commercially available. As early as the 1950s, it was used to treat diseases in livestock. In the 1970s, scientists began using it as a DNA probe. In addition to its early adoption, ethidium bromide is comparatively inexpensive. Even in large quantities, it remains very affordable, running around $30 per gram. Ethidium bromide is excellent for staining DNA in agarose gel electrophoresis. It can also be used to detect dsDNA in PCRs. Upon binding to DNA, EtBr experiences a roughly 20-fold increase in brightness. It releases an orange fluorescence (605 nm) when excited by UV light (~300 nm). Ethidium bromide can also detect RNA depending on how much RNA folding occurs
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肠道菌群提取细菌DNA的方法
作者:德尔塔 日期:2022-03-30
肠道菌群提取细菌DNA实验目的: 肠道菌群提取细菌DNA实验是建立一种简便的从肠道菌群中提取基因组DNA的方法,用于肠道细菌重复基因间共有(ERIC)-PCR检测。 肠道菌群提取细菌DNA实验方法: 比较了Tr??is-EDTA缓冲液,chelex-100,超纯水,2%十二烷基硫酸钠和10%Triton-100(经超声处理和不经超声处理)提取细菌DNA的方法,并与商业粪便DNA提取试剂盒方法进行了比较。被认为是DNA提取的金标准。比较是基于ERIC-PCR反映的DNA的产量和纯度以及微生物的结构和性能指标。 肠道菌群提取细菌DNA实验结果: 通过chelex100的方法获得的DNA的产量和纯度与通过粪便DNA试剂盒获得的DNA相似。通过chelex100方法提取的DNA与通过粪便DNA试剂盒提取的DNA获得的ERIC-PCR结果基本相同。 肠道菌群提取细菌DNA实验结论: 鉴于其简单性和成本效益,建议将chelex方法用于ERIC-PCR实验。它适用于从肠道微生物中提取总DNA,特别适用于处理大量样品。 肠道菌群提取细菌DNA实验介绍 ※ 动物的肠道内有大量,活跃和复杂的微生物群落[1]。至少有400-500种不同的微生物,构成一个复杂的生态系统。 ※ 它们在定植抗性中发挥着重要作用,即在胃肠道中防止病原体定植和自发机会性微生物的生长。合成或代谢潜在致癌物并产生抗致瘤产物的肠道细菌可能与结直肠癌有关,这是美国第二大最常见的癌症死亡原因[4]。 ※ 益生菌被定义为一种生物,在摄入一定数量后,其健康益处超出宿主固有的基本营养[5,6]。在人类中,益生菌可有效预防眼袋炎的发作和复发[7,8],在小鼠中,它们可有效预防实验性结肠炎并减少肠道细菌的移位[9,10]。 ※ 共生肠道菌群已通过基于培养的技术和分子检测进行了监测[11,12]。肠细菌重复基因间共有(ERIC)-PCR使用靶向短重复序列的寡核苷酸,这些短重复序列分散在各个细菌基因组中[11]。共生肠道菌群可以根据扩增产物的电泳图谱在属,种和菌株水平上鉴定[13-15]。 ※ 这些测定法监测动物肠道细菌的能力取决于PCR的效率。从肠道菌群获得PCR
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同位素丰度(同位素,同位素丰度概念,怎么计算同位素丰度)
作者:德尔塔 日期:2022-03-30
同位素: 同位素是元素的原子,化学上结构式相似,但是中子数不同,因此具有不同的扩散性,质量数。 同位素举例:镁可以是以下形式Mg-24,Mg-25,Mg-26。所有物质都有不同的质量数,只有不同的质量数,也就是说,它们的原子数是相同的。 同位素丰度概念 同位素丰度在化学中的相对丰度定义是自然界中特定同位素的百分比,元素周期表中列出的元素的原子质量是该元素所有已知同位素的平均质量,随着原子核内中子数量的变化,元素的身份保持不变,原子核中中子数的变化表示同位素:元素7的中子有14个氮,而元素8的中子有15个氮。 更简单的解释:同位素丰度指的是元素中每种同位素的相对含量称为其同位素丰度/相对丰度。 为了解决同位素丰度问题,需要相对丰度或特定同位素的质量。 步骤1:找到平均原子质量 从元素周期表中的同位素丰度问题中识别元素的原子质量。 以氮气为例:14.007 amu。 步骤2:设定相对丰度问题 使用以下公式解决相对丰度化学问题: (M1)(x)+(M2)(1-x)= M(E) ※M1是一种同位素的质量 ※x是相对丰度 ※M2是第二个同位素的质量 ※M(E)是元素周期表中元素的原子质量 同位素丰度计算示例:如果一个氮同位素的质量14的氮为14.003 amu,另一个氮同位素的质量15的氮为15.000 amu,则求出同位素的相对丰度。 问题是要求解x的相对丰度。将一个同位素分配为(M1),将另一个同位素分配为(M2)。 M1 = 14.003 amu(氮14) x =未知相对丰度 M2 = 15.000 amu(氮15) M(E)= 14.007 amu 将信息放入等式后,它看起来像这样: 14.003x + 15.000(1-x)= 14.007 为什么可以这样建立等式:回想一下,这两个同位素的总和等于自然界中总氮的100%。该方程式可以设置为百分比或小数。用百分比表示,等式为:(x)+(100-x)= 100,其中100表示??自然界中的总百分比。如果将方程式设置为十进制,则意味着丰度等于1。该方程式将变为:x +(1-x)=1。请注意,该方程式仅限于两个同位素。 同位素丰度计算步骤3:求解x
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空气净化器(空气除甲醛,空气除病毒,空气灭菌,空气净化,空气除臭)
作者:德尔塔 日期:2022-03-30
空气净化器介绍 一、空气净化器主要功能 空气灭菌消毒 空气除菌率>99% 物表(物体表面)灭菌消毒 物表除菌率>99% 空气除臭、除味、除香烟 除臭率>99% 空气除甲醛、苯以及对人体有害的 甲醛净化率>99% 空气挥发性有机物(TVOC) TVOC净化率>99% 空气除病毒 空气除H1N1病毒率 100% 市场零售价: 8500RMB/台 二、低温等离子灭菌消毒和传统净化消毒设备性能比较: 注1:长期喷洒化学消毒剂易造成环境污染 注2:滤芯使用后成为二次污染物,难以处理。滤芯需活性炭滤芯,其他滤芯净化、消毒效果较差。 注3:人体照射紫外线后会癌化,普通小功率紫外灯效果差。 注4:不同房间效果不同,效果普遍较差。 注5:滤芯使用后成为二次污染物,难以处理 。价格一般较高。 注6:易产生氮氧化物,对人体有害;滤芯使用后成为二次污染物,难以处理 。 三、传统净化消毒设备宏观上性能缺陷: 1、功能缺失 :部分产品只能净化空气,无消毒功能,部分产品可以对空气消毒,但无法对物表消毒。 2、空间缺失 :部分产品只能对空气净化、消毒,但无法对物表进行消毒,部分产品只能对可见部位消毒,但对物体阴面 或角落无法消毒。 3、时间缺失 部分产品只能在无人的 情况下净化、消毒,有 人的情况下不能工作。 ※:备注:呼吸道类病毒是24小时连续出现或存在的的,有人的时候灭菌消毒必要且重要,每天一次或几次消毒只能在有限的时间段内阻断病毒传播,但其余大部分时间段内无法阻挡病毒的传播,这是医护人员被感染新冠病毒的主要原因。 四、BIOFOUNT等离子净化器的性能特点及优势: 1、双消毒+空气净化: 本机是全球首款既可对空气灭菌消毒,又能对物表灭菌消毒,还能对空气净化的 产品。除细菌病毒、除甲醛、除臭、除香烟、除霉菌等性能卓越。 2、低价格+高科技 : 本机在全球首次利用最前沿的低温等离子技术对空气和物表
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什么是磷酸化及磷酸化其作用?
作者:德尔塔 日期:2022-03-30
磷酸化知识介绍: 磷酸化是将磷酰基(PO3-)化学加成到有机分子上。磷酰基的去除称为去磷酸化。磷酸化和去磷酸化均通过酶(例如激酶,磷酸转移酶)进行。磷酸化在生物化学和分子生物学领域很重要,因为它是蛋白质和酶功能,糖代谢以及能量存储和释放的关键反应。 小分子化合物磷酸化,提纯,制备,液相检测-德尔塔生物为您提供全套磷酸化服务。 磷酸化的目的 磷酸化在细胞中起关键的调节作用。其功能包括: ※ 对糖酵解很重要 ※ 用于蛋白质-蛋白质相互作用 ※ 用于蛋白质降解 ※ 调节酶抑制 ※ 通过调节需要能量的化学反应来维持体内平衡 磷酸化的类型 许多类型的分子可以进行磷酸化和去磷酸化。磷酸化的三种最重要类型是葡萄糖磷酸化,蛋白质磷酸化和氧化磷酸化。 ※ 葡萄糖磷酸化 葡萄糖和其他糖类经常被磷酸化为分解代谢的第一步。例如,D-葡萄糖的糖酵解的第一步是将其转化为D-葡萄糖-6-磷酸。葡萄糖是易于渗透细胞的小分子。磷酸化形成一个较大的分子,该分子不易进入组织。因此,磷酸化对于调节血糖浓度至关重要。葡萄糖浓度又直接与糖原形成有关。葡萄糖磷酸化也与心脏生长有关。 ※ 蛋白质磷酸化 洛克菲勒医学研究所的Phoebus Levene于1906年首次发现了一种磷酸化蛋白(phosvitin),但直到1930年代才描述了该酶的磷酸化作用。 当磷酸基团添加到氨基酸时,蛋白质就会发生磷酸化。通常,氨基酸是丝氨酸,尽管在真核生物中苏氨酸和酪氨酸上也发生磷酸化,而在原核生物中组氨酸上也发生磷酸化。这是酯化反应,其中磷酸基与丝氨酸,苏氨酸或酪氨酸侧链的羟基(-OH)反应。酶蛋白激酶将磷酸基团与氨基酸共价结合。精确的机制在原核生物和真核生物之间有所不同。研究最深入的磷酸化形式是翻译后修饰(PTM),这意味着蛋白质从RNA模板翻译后会被磷酸化。逆反应,去磷酸化,是由蛋白质磷酸酶催化的。 蛋白质磷酸化的一个重要例子是组蛋白的磷酸化。在真核生物中,DNA与组蛋白结合形成染色质。组蛋白磷酸化修饰染色质的结构