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为何细胞培养牛血清？
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物，血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等，这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。科研人员选择用牛血清做细胞实验的理由有如下几点： 1.提供对维持细胞指数生长的激素，基础培养基中没有或量很少的营养物，以及主要的低分子营养物。 2. 提供结合蛋白，能识别维生素、脂类、金属和其他激素等，能结合或调变它们所结合的物质活力。 3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合，起到解毒作用。 4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。 5.起酸碱度缓冲液作用。 6.提供蛋白酶抑制剂，使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活，保护细胞不受伤害。 上海德尔塔生物科技有限公司主营：Elisa试剂盒,人Elisa试剂盒,大鼠Elisa试剂盒,小鼠Elisa试剂盒,生物试剂,血清,抗体,培养基,标准品,国产血清、GIBCO胎牛血清等。种属齐全，价格优惠。期待您的与合作！
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关于动物血清的常见问题及处理方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
血清是细胞培养中zui重要的元素之一。在实验室操作中要注意及处理方法： 1. 血清保存: 建议血清应保存在-5℃至-2O℃。然而，若存放于4℃时，请勿超过一个月。若您一次无法用完一瓶，建议您无菌分装血清至恰当的灭菌容器内，再放回冷冻。 2. 解冻血清的方法: 建议您将血清从冷冻箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室温下使之全融。但必须注意的是，融解过程中必须规则地摇晃均匀。 3. 血清解冻后发现有絮状沉淀物出现，该如何处理? 血清中沉淀物的出现有许多种原因，但zui普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成，而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解冻后，也会存在于血清中，亦是造成沉淀物的主要原因之一。但这些絮状沉淀物，并不影响血清本身的质量。 若您欲去除这些絮状沉淀物，可以将血清分装至无菌离心管内，以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。我们不建议您以过滤的方法去除这些絮状沉淀物，因为它可能会阻塞您的过滤膜。 4. 为什么要热灭活血清? 加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件，刺激平滑肌收缩，细胞和血小板释放组胺，激活淋巴细胞和巨噬细胞。在免疫学研究，培养ES细胞，昆虫细胞和平滑肌细胞时，推荐使用热灭活血清。 5. 有必要做热灭活吗? 实验显示，经过正确处理的热灭活血清，对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进，或完全没有任何作用，甚至通常因为高温处理影响了血清的质量，而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清，沉淀物的形成会显著的增多，这些沉淀物在倒置显微镜下观察，像是“小黑点”，常常会让研究者误以为是血清遭受污染，而把血清放在37℃环境中，又会使此沉淀物更增多，使研究者误认为是微生物的分裂扩增。 因此我们建议您，若非必须，您可以不需要做热处理这一步。如此一来，不但节省您宝贵的时间，更确保血清的质量! 6. 为什么储存在冰箱中的胎牛血清会出现沉淀? 胎牛血清没有预老化，
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动物细胞培养的基本概念
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
高等生物是由多细胞构成的整体，在整体条件下要研究单个细胞或某一群细胞在体内（in vivo）的功能活动是十分困难的。但是如果把活细胞拿到体外（in vitro）培养进行观察和研究，则要方便得多。活细胞离体后要在一定的生理条件下才能存活和进行生理活动，特别是高等动植物细胞要求的生存条件极其严格，稍有不适就要死亡。所以细胞培养技术（cell culture）就是选用*生存条件对活细胞进行培养和研究的技术。 动物细胞的生存环境与植物细胞差别很大，因而二者的培养方法很不相同。 细胞培养方式大致可分为两种（图2-25）：一种是群体培养（mass culture），将含有一定数量细胞的悬液置于培养瓶中，让细胞贴壁生长，汇合（confluence）后形成均匀的单细胞层；另一种是克隆培养（clonal culture），将高度稀释的游离细胞悬液加入培养瓶中，各个细胞贴壁后，彼此距离较远，经过生长增殖每一个细胞形成一个细胞集落，称为克隆（clone）。一个细胞克隆中的所有细胞均来源于同一个祖先细胞。此外，为了制取细胞产品而设计了转鼓培养法，使用大容量的圆培养瓶，在培养过程中不断地转动，使培养的细胞始终处于悬浮状态之中而不贴壁。 目前实验室中常用的几种细胞系 细胞系名称 细胞类型 来源 3T3 成纤维细胞 小鼠 HeLa 宫颈癌上皮细胞 人 BHK21 成纤维细胞 叙利亚仓鼠 PtKl 上皮细胞 袋鼠 L6 成肌细胞 大鼠 PCI2 嗜铬细胞 大鼠 SP2 浆细胞 小鼠 SP2／0 骨髓瘤浆细胞 小鼠 CHO 卵巢细胞 中国地鼠 正常细胞培养的世代数有限，如人胚成纤维细胞可传30-50代，相当于150-300个细胞增殖周期。癌细胞和发生转化的细胞则能无限培养下去，所谓转化即是指正常细胞在某种因子的作用下发生突变而具有癌性的细胞。目前世界上许多实验室所广泛传用的HeLa细胞系就是1951年从一位名叫Henrietta Lacks的妇女身上取下的宫颈癌细胞培养而成，此细胞系一直延用至今。 原代培养（primary culture）：也叫初代培养，指直接从体内取
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费氏弧菌发光杆菌保藏方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
费氏弧菌发光杆菌保藏方法（一）斜面冰箱保藏法这是蘑菇菌种的一种短期保存法，因为它简单易行，不需特殊设备，并能随时观察保藏菌种的情况，因此也是常用的菌种保藏方法。１、保藏方法 蘑菇菌种斜面冰箱保种一般使用PDA斜面培养基即可。菌种移接后，放在22-24℃温度下培养,要勤检查,当菌丝健壮地长满试管时,及时挑选无污染的培养斜面,棉塞用硫酸纸包扎后放置在4℃的冰箱中保藏。一般2-3个月转管一次。２、注意事项：由于斜面冰箱保藏是在4℃下进行,微生物单孢分离物活动并未停止,需要经常转管移接,因此对于保藏所用的斜面菌种质量要求较高，其菌丝形态、菌落特征应保持原有特性，操作人员必须对斜面菌种质量应具有有一定的鉴别能力，所挑选的菌种才能适合保藏，其次菌种的菌龄不能太幼也不能太老，否则冰箱保藏后转管扩接易造成退化。再则冰箱温度应控制在2-4℃之间,尽量恒温使菌丝体处于稳定的生理状态。（二）粪草管冰箱保藏法１、保藏方法：粪草管的培养基是由腐熟麦秆粉100,腐熟牛粪粉25,麸皮8, 石膏粉1%,碳酸钙2%,含水量65%左右,pH7.5制备而成,调配后装入试管中,经高压灭菌后,接入菌种块,放在22-24℃温度下培养。要勤检查是否有污染，当菌丝健壮地长满草基试管时，及时挑选生长正常无污染的试管，棉塞头用硫酸纸包扎后放置在2-4 ℃的冰箱中,该保藏方法为中期保藏，一般2-3年转管一次。２、注意事项：由于粪草管可保藏2-3年时间,因此如何防止粪草管的水分损失是该保藏方法时间长短的关键所在,一方面培养基含水量不能低于62%, 另一方面棉塞用硫酸纸包扎后可加些蜡进行封口,防止水分蒸发。 再则有条件应把试管保藏在具有保湿的冰柜或冰库中，温度控制在2-4℃,湿度控制在90%左右。（三）液体石蜡保藏方法液体石蜡防止培养基水分蒸发，隔绝斜面费氏弧菌发光杆菌与 空气接触，抑制菌丝的单孢分离物，可能使其处于休眠状态，推迟细胞衰老，延长菌丝的保藏，一般可保藏5-7年，是一种中长期的菌种保藏方法。１、保藏方法：液蜡保藏
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抗原elisa试剂盒实验步骤及注意事项
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
抗原elisa试剂盒操作步骤 1. 加样：标准品设定5个浓度点10个孔，每个浓度设定平行孔，加入50微升不同浓度的标准品，空白孔设定1个孔加入50微升蒸馏水（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔，在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品zui终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 2. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 3. 配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。 4. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。 5. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 6. 温育：操作同2。 7. 洗涤：操作同4。 8. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟. 9. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。 10. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。 注意事项： 1．抗原elisa试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。 2． 浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。 3． 各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。 4． 请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔*孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请zui后乘以总稀释倍数（×n×5）。 5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 6． 底物请避光保存。 7． 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8． 所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9． 本试剂不同批号组分
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微生物菌种的实验
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
微生物菌种步骤如下： (1) 用 2.5% (体积比) 的戊二醛固定收集的细胞样 0.5 h，与 1.25% (质量体积比)水质琼脂混合； (2) 将固定的琼脂制成1 mm 的切片，继续固定 0.5 h； (4) 用超纯水漂洗切片，在 1% (质量体积比)铀酰乙酸溶液中固定 1 h； (5) 用乙醇和氧化丙烯进行梯度脱水，将琼脂切片植入环氧树脂； (6) 铀酰乙酸染色后用于电镜观察。 5. 菌株分子生物学鉴定 5.1 基因组 DNA 的提取：采用从生工生物工程 (上海)有限公司购买的小量细菌基因组 DNA 快速提取试剂盒提取该菌株的基因组 DNA。 5.2 PCR 扩增：细菌 16S rRNA 基因的 PCR 扩增。前端引物和后端引物分别为 27F (5′- AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3′) 和 1492R (5′- GGTTACCTTGTTACGACTT-3′)。50.0 μL 扩增体系：10×Taq buffer 5.0 μL，2.5 mmol/L dNTPs 1.0 μL，基因组 DNA 2.0 μL，10.0 μmol/L 前端引物和后端引物各 1.0 μL，rTaq 酶 0.5 μL，ddH2O 39.5 μL。反应条件：94 °C 10 min；94 °C 45 s，55 °C 45 s，72 °C 90 s，共 35 个循环；72 °C 10 min。 1.5.3 16S rRNA 序列分析及系统发育树的构建： PCR 产物进行 B 型小 DNA 片段凝胶电泳。测序工作由北京六合华大基因科技股份有限公司完成。将菌株 CYJN-1 的 16S rRNA 序列采用 NCBI 的 BLAST 软件进行同源性比对，用 ClustalX 1.81 和 MEGA 4.0 软件构建系统发育树。 6. CYJN-1 的生长特性研究 6.1 不同能源物质对 CYJN-1 生长的影响：为了确定 微生物菌种的zui适能源物质，培养基中的硫代硫酸钠被下面的物质代替(g/L)：蛋白胨 1.0，葡萄糖 1.0，酵母提取物 1.0，乳糖 1.0，甘氨酸 1.0，赖氨酸 1.0，单质硫 10.0，Na2SO310.0，DBT (二丙苯噻吩，有机硫模式化合物) 0.01mmol/L。接种量 5%，30 °C、170 r/min 培养 2 d，测定细胞浓度，将细胞浓度换算成菌落形成单位(Colony forming unit，CFU)。 6.2 不同温度和初始pH对CYJN-1生长的影响：适宜的温度和 pH 环境同样是硫细菌生长所必需的条件。微生物
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原代细胞复苏技术
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
1. 原代细胞冻存复苏技术简介 在ELISPOT检测的应用中，往往需要用到冻存的淋巴细胞样品作为检测细胞。由于ELISPOT检测的是细胞的免疫功能，不仅仅需要保持细胞的存活率，而且还要保证细胞的功能不发生变化。传统的细胞冻存方法通常是为了保存细胞株，对细胞存活率的要求不高，更没考虑保持细胞原有的免疫状态，所以传统的细胞冻存方法已经不能满足ELISPOT检测的要求。参见图7.1。 考虑到ELISPOT检测的特殊性，荷兰U-CyTech公司经过精心的研究与反复的验证，推出了Cryostar™冻存试剂盒，在冻存液中添加了一系列对细胞有特殊保护作用的保护剂。达科为公司在接到Cryostar™冻存试剂盒之后，在我们的实验室以及国内数家客户的实验室做了细胞冻存与复苏的实验，并且对复苏之后的细胞做了ELISPOT检测。结果表明，淋巴细胞的存活率超过90%，ELISPOT斑点形成频率与新鲜细胞完全相同。 2. 细胞冻存、复苏的标准程序 l 实验仪器： ² 可控温度细胞离心机离心机； ² 血球计数板或者自动细胞计数设备； ² 细胞程序降温盒Nalgene “Mr. Frosty”； ² -70°C冰箱； ² 液氮罐； ² 37°C水浴锅。 l 耗材准备 ² 15ml圆锥底聚丙烯（PP）离心管； ² 无菌的原代细胞冻存管，2ml，外螺旋； l 试剂配制 ² 热失活补体胎牛血清； ² R0培养基：RPMI-1640培养基，含谷氨酰胺，加入1%双抗，不加血清。 ² 达优®无血清培养基：已经含有谷氨酰胺和双抗，打开即用。 ² Cryostar™重悬液(Cryostar™ Resuspension Medium)：含有细胞冻存保护成分，-20°C长期保存，4°C可以保存6个月。 ² Cryostar™ 2×冻存液（Cryostar™ Freezing Medium）：含有原代细胞冻存保护成分以及DMSO，-20°C长期保存，4°C可以保存6个月。
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ELISA试剂盒说明书：大鼠巨噬细胞甘露糖受体MMR试剂盒
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
大鼠巨噬细胞甘露糖受体（MMR）试剂盒使用说明书 本试剂盒仅供研究使用。 检测范围：96T 10ng/L-240ng/L 使用目的： 本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中巨噬细胞甘露糖受体（MMR）含 量。 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠巨噬细胞甘露糖受体（MMR）水平。用纯 化的大鼠巨噬细胞甘露糖受体（MMR）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微 孔中依次加入巨噬细胞甘露糖受体（MMR），再与HRP标记的巨噬细胞甘露糖受体（MMR） 抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在 HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的 巨噬细胞甘露糖受体（MMR）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值）， 通过标准曲线计算样品中大鼠巨噬细胞甘露糖受体（MMR）浓度。 大鼠巨噬细胞甘露糖受体（MMR）试剂盒组成 130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶 2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（480ng/L）0.5ml×1瓶 3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶 4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份 5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张 6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个 标本要求 1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能 马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融 2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。 大鼠巨噬细胞甘露糖受体（MMR）试剂盒操作步骤 1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀 释。 240ng/L5号标准品150µl的原倍标准品加入150µl标准品稀释液 120ng/L4号标准品150µl的5号标准品加入150µl标准品稀释液 60ng/L3号标准品150µl的4号标准品加入150µl标准品稀释液 30ng/L2号标准品150µl的3号标准品加入150µl标准品稀释液 15ng/L1号标准品150µl的2号标准品加入150µl标准品稀释液
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细胞冷冻保存方法、注意事项
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
1.1. 欲冷冻保存之细胞应在生长良好(log phase) 且存活率高之状态，约为80 – 90 ％ 致密度。 1.2. 冷冻前检测细胞是否仍保有其特有性质，例如hybridoma 应在冷冻保存前一至二 日测试是否有抗体之产生。 1.3. 注意冷冻保护剂之品质。DMSO 应为试剂级等级，无菌且无色(以0.22 micron FGLP flon 过滤或是直接购买无菌产品，如Sigma D-2650)，以5~10 ml 小体积 分装，4 oC 避光保存，勿作多次解冻。Glycerol 亦应为试剂级等级，以高压蒸汽 灭菌后避光保存。在开启后一年内使用，因长期储存后对细胞会有毒性。 1.4. 冷冻保存之细胞浓度： 1.4.1. normal human fibroblast: 1~3 x 106 cells/ml 1.4.2. hybridoma: 1~3 x 106 cells/ml，细胞浓度不要太高，某些hybridoma 会因冷冻 浓度太高而在解冻24 小时后死了。 1.4.3. adherent tumor lines: 5~7 x 106，依细胞种类而异。Adenocarcinoma 解冻后须 较高之浓度，而HeLa 只需1-3 x 106 cells/ml。 1.4.4. other suspensions: 5~10 x 106 cells/ml, human lymphocyte 须至少5 x 106 cells/ml。 1.5. 冷冻保护剂浓度为5 或10 ％ DMSO，若是不确定细胞之冷冻条件，在做冷冻保 存之同时，亦应作一个backup culture，以防止冷冻失败。 1.6. 冷冻方法： 1.6.1. 传统方法: 4 oC 10 分钟---> -20 oC 30 分钟---> -80 oC 16 - 18 小时(或隔夜) ---> 液氮槽vapor phase 长期储存。 1.6.2. 程序降温：利用等速降温机以–1 ～ -3 oC/分钟之速度由室温降至–120 oC， 放在液氮槽vapor phase 长期储存。适用于悬浮型细胞与hybridoma 之保存。 2. 材料： 2.1. 生长良好之培养细胞 2.2. 新鲜培养基 2.3. DMSO (Sigma D-2650) 2.4. 无菌塑料冷冻保存管(Nalgene 5000-0020) 2.5. 0.4 ％ w/v trypan blue (GibcoBRL 15250-061) 2.6. 血球计数盘与盖玻片 2.7. 等速降温机(KRYO 10 Series II) 3. 步骤： 3.1. 冷冻前一日前更换半量或全量培养基，观察细胞生长情形。 3.2. 配制冷冻保存溶液(使用前配制)
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培养基配制
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
1. 配制培养基时碳酸氢钠和hepes添加量之间没有必然的。碳酸氢钠是必须加的，与培养箱内的二氧化碳（溶解在液体内就是碳酸）形成碳酸缓冲对。而HEPES是两性有机缓冲剂（既可以缓冲酸也可以缓冲碱），其缓冲能力大大高于碳酸缓冲液。因此，碳酸氢钠应该按照说明书的剂量加，HEPES作为辅助缓冲，其用量为10-25mmol/L。2. 培养液的量是否要考虑添加血清的量？各种观点都有，但不是渗透压的因素。可以提高营养成分的浓度（曾有2X、4X氨基酸培养的），但效果也不是很明显。考虑到现在大多用配好的液体培养液，其配制时并不考虑血清的量，所以还是应该按照1L的量来配。3. 干粉的zui小包装必须一次溶解，因为干粉的混合不是均匀的。谷氨酰氨的水溶液不稳定，新配制的不用添加。另外，培养液溶解后不需调节pH，配方是根据pH7.4组成的，如果溶解后偏碱可以冲入CO2。
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多次间接ELISA都未显色的原因是什么
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
近日，贵阳医学院与上海劲马公司合作成功。该大学胡老师在线万，经过洽谈沟通后，胡老师购买BIM品牌Elisa试剂盒，并准备将样本寄来，由我们代测。胡老师说道：“我前几次实验都不怎么理想，我多次间接Elisa都未显色的原因是什么呢？” 为此，上海劲马技术员做出以下几个原因分析： 1.包被原：包括你的包被液有无问题，有没有配错。包被原一般加100微升，37度2小时。 2.封闭：封闭液用的是否适合？你说做了几次都没显色，空白孔也不显吗？如果空白也无颜色，那封闭就没有问题。一般封闭是200微升每孔，也可以满孔封闭。 3.一抗：检查你的一抗是否失效。是否是在37度反应。 4.二抗：底物，底物缓冲液……这些都要好好检查！ 5.洗涤：用PBST洗涤，包被和封闭时洗板3次；一抗二抗洗涤5次，每次间隔3分钟。 手工和机器洗涤没什么不同，就是省力一些。洗5次不会有负影响，在一抗和二抗洗涤过程中，恰恰需要多洗几次，这样有助于减少非特异性吸附。
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化学试剂的取用与存放方法马虎不得
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
要知道，化学试剂的存放与取用要求万万马虎不得。因为实验室里的所用试剂，有很多是易燃、易爆、有腐蚀性或有毒的。因此在使用时一定要严格遵照有关规定，保证安全。化学试剂的取用与存放方法马虎不得，您需注意： 1.不能用手接触试剂，不要把鼻孔凑到容器口去闻试剂(特别是气体)的气味。 2.不得尝任何试剂的味道。注意节约试剂，严格按照实验规定的用量取用试剂。如果没有说明用量，一般应按zui少量取用：液体1～2mL，固体只需要盖满试管底部。实验剩余的试剂既不能放回原瓶，也不要随意丢弃，更不要拿出实验室，要放入的容器内或交由老师处理。 几种特殊试剂的存放： 1.钾、钙、钠在空气中极易氧化，遇水发生剧烈反应，应放在盛有煤油的广口瓶中以隔绝空气。 2.白磷着火点低(40℃)，在空气中能缓慢氧化而自燃，通常保存在冷水中。 3.液溴有毒且易挥发，需盛放在磨口的细口瓶里，并加些水(水覆盖在液溴上面)，起水封作用。 4.碘易升华且具有强烈刺激性气味，盛放在磨口的广口瓶里。 5.浓硝酸、硝酸银见光易分解，应保存在棕色瓶中，贮放在阴凉处。 6.氢氧化钠固体易潮解且易在空气中变质，应密封保存；其溶液盛放在无色细口瓶里，瓶口用橡皮塞塞紧，不能用玻璃塞。
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Survivin抗体选择哪种比较好？
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
问：存活蛋白Survivin？ 存活蛋白/存活素(Survivin)是凋亡抑制蛋白家族成员之一，具有抑制细胞凋亡和调节细胞周期的双重功能，主要表达于胚胎和发育的胎儿组织中，高表达于大多数恶性肿瘤组织，而在终末分化成熟的正常成人组织中无表达或低表达。因此，它已成为肿瘤诊断，预后以及抗癌疗法的主要靶标。癌症中存活蛋白的过表达可以克服细胞周期检查点，以促进转化细胞通过有丝分裂的异常进展。 目前已知的与Survivin相关的癌症有：乳腺癌、膀胱癌、结肠/直肠癌、子宫内膜癌、食管癌、胃癌、头颈癌、肝细胞癌、口腔癌、胰腺癌和肾细胞癌等等。正因为如此，科学界对于Survivin的研究正如火如荼，科学家们希望进一步研究确定存活蛋白的新靶点并了解其生物功能，以期对于癌症的潜在诊断和**。 产品名称及描述 货号 产品说明 Survivin Polyclonal Antibody ABP54792 详情 Survivin抗体:为什么推荐Abbkine品牌？ 目前市面上能提供的存活蛋白有国产分装或原产的，国产分装的存活蛋白在质量稳定性上有不足，并且经过分装以后，其效价也有损失。而原产于国内实验室的存活蛋白有些具有较好的检测活性，在批次之间的稳定性上较难控制，而国内仅有的少量原产抗体也是多克隆抗体。至于*供应存活蛋白的进口品牌并不多，仅Abcam、Sigma等等几个品牌能够提供存活蛋白，但是其在性价比上远逊于Abbkine产品。 《存活蛋白Survivin内参抗体综合对比》 品牌 货号 反应种属 应用类型 价格/规格 Abbkine abp54792 人,小鼠,大鼠 WB:(1:500-1:2000) IHC:(1:100-1:300) IF:(1:200-1:1000) Elisa:(1:5000) 700/30ul 1540/100ul 2520/200ul Abcam ab134170 人 WB:(1:500-1:1000) IHC:（1:100-1:250) IF:（1:100) 880/10ul 2614/40ul 4358/100ul 由此，我们向您推荐Abbkine的Survivin Polyclonal Antibody，Abbkine的存活蛋白的免疫原是人源存活蛋白的多肽段，经过不断筛选和优化，终于得到的用的抗体
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酶联免疫试验预备之*洗刷方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
ELISA试剂盒剖析洗刷的方法除某些 ELISA 仪器配有特别的自动洗刷仪外，手工操作有浸泡式和流水冲刷式两种，进程如下：(1)浸泡式a.吸干或甩干孔内反响液；b.用洗刷液过洗一遍(将洗刷液注满板孔后，即甩去)；c.浸泡，行将洗刷液注满板孔，放置1-2 分钟，间歇摇摆，浸泡时刻不行随意缩短；d.吸干孔内液体。吸干应完全，可用水泵或真空泵抽吸，也可甩去液体后在清洗毛巾或吸水纸上拍干；e.重复操作c 和d，洗刷3-4次(或按阐明规则)。在间接法中如本底较高，可增加洗刷次数或延伸浸泡时刻。微量滴定板多选用浸泡式洗刷法。洗刷液多为含非离子型洗刷剂的中性缓冲液。聚苯乙烯载体与蛋白质的是疏水性的，非离子型洗刷剂既含疏水基团，ELISA试剂盒也含亲水基团，其疏水基团与蛋白质的疏水基团借疏水键，然后削弱蛋白质与固相载体的，并借助于亲水基团和水分子的作用，使蛋白质回复到水溶液状况，然后脱离固相载体。洗刷液中的非离子型洗刷剂一般是吐温 20，其浓度可在0.05%-0.2%之间，高于0.2%时，可使包被在固相上的抗原或抗体解吸附而减低试验的灵敏度。zui初用于小珠载体的洗刷，洗刷液仅为蒸馏水乃至可用自来水。洗刷时附接一特别设备，使小珠在流水冲击下不断地滚动淋洗，持续冲刷 2 分钟后，吸干液体，再用蒸馏水浸泡2 分钟，吸干即可。浸泡式犹如盆浴，流水冲刷式则好比淋浴，其洗刷作用更为完全，且也简洁、快速。已有试验标明，流水冲刷式相同也适用于微量滴定板的洗刷。洗刷时设法加大水流量或加大水压，让水流冲击板孔外表，洗刷作用更佳。
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鸡金属硫蛋白（MT）ELISA试剂盒实验方案
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
鸡金属硫蛋白试剂盒操作注意事项:1、试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。2、实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。不用的其它试剂应包装好或盖好。3、不同批号的试剂不要混用。4、鸡金属硫蛋白试剂盒保质前使用。5、使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。6、使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。7、实验完成后应立即读取OD值。加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
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