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三种干细胞类型之间的差别
作者：德尔塔 日期：2022-04-06
在一项独立的研究中，Ji等人研究了特定DNA甲基化标记在特定细胞系的发育进程中所起作用。他们对造血细胞群进行了全基因组DNA甲基化分析，结果显示了显著的外成弹性。DNA甲基化所发生的变化，也许是作为指导命运选择（如：是致力于骨髓发育，还是致力于淋巴发育）的一个主要因素而出现的。 通过利用不同转录因子对分化的成年细胞重新编程而产生的“诱导多能干”（iPS）细胞，具有“体细胞核转移”（SCNT）所产生的“胚胎干”（ES）细胞和来自自然受精的胚胎的ES细胞的很多典型性质。 然而，这三个细胞类型并不是相同的，现在它们之间一个有趣的差别已被发现：iPS细胞保留它们来自其中的供体组织的一个“外成记忆”，而基于SCNT的重新编程则将成年细胞的DNA甲基化状态重置为接近与ES细胞相似的状态。
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你未必知道的32条ELISA实验秘诀
作者：德尔塔 日期：2022-04-06
只有不断学习与实验才能逐渐积累经验，做出更好的实验效果。在前面的资讯内容及技术文章中，上海恒远为大家分享许多ELISA试剂盒的操作技巧、要求、方法等相关技术，我公司技术员根据自身多年【ELISA试剂盒实验】经验，整理出的ELISA操作技巧。下面我们一起来看下具体内容，你未必知道的32条ELISA实验秘诀： 1.加样后及时放人孵箱，标本较多时，要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间，防止孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗彻底。 2.显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用。 3.加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。 4.合理安排检测量，以免反应板过多造成洗板等待时间长。 5.液体全部加入酶标孔后，将酶标板放在桌子上平行轻轻摇晃30s，使液体充分混合均匀，也使其得到充分的反应。 6.洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。 7.吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。 8.要尽量做双孔实验，这样才既能保证数据的准确性，又能反映出试剂盒的精密度。 9.为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜。 10.未使用完的酶标板或者试剂，请于2-8℃保存。辣根过氧化物酶标记抗人IgG工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的辣根过氧化物酶标记抗人IgG工作液。 11.作时必须戴手套，穿工作衣，严格健全和执行消毒隔离制度。 12.试验结果的判定必须以酶标仪读数为准。 13.样品稀释液应用加液器加注，并经常校对其准确性。 14.剩余样品及废弃物应经121℃高压蒸汽灭菌30分钟，或用5.0g/L次氯酸钠等消毒剂处理30分钟后废弃。 15.不同批号试剂组分不得混用。 16.ELISA试剂盒实验洗涤时各孔均需加满液体，防止孔口有游离酶不能洗净。
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急!如何寻求让ELISA系统更稳定的方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-06
ELISA检测系统可谓是免疫学反应应用到科研出产中zui为敏捷的技术手段。可是在新老手操纵过程中老是会泛起或大或小的题目，例如花板，假阳性，全显色，全部显色，显色比空缺还低。 德尔塔生物研究人员一直在寻求让ELISA试剂盒实验，ELISA系统更稳定的方法。让我们的客户实验更加方便，减少更多操作中遇到的困扰。 常用封锁剂有：0.05%-0.5%的bsa；10%的小牛血清或1%明胶；脱脂奶粉，比较价廉，可以高浓度使用（5%－10％）；还有一些稀有用到的各种动物血清（主要为了排除相似蛋白干扰）和酪蛋白等等。详细的试验还要有坚固的理论外也要实践，看一下*可不可以应用到自己试验当中去。但*选用什么，要依据试验详细来实践。应留意以下原理：因为蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附结合的，靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间的作用，这种物理吸附长短特异性的，受蛋白质的分子量、等电点、浓度等的影响，大分子蛋白质较小分子蛋白质通常含有更多的疏水基团，故更易吸附到固相载体表面。小分子必需依赖和大的蛋白载体偶联后才能固定在固相载体上。有的包被原可能不是蛋白，对于生物素和脂类物质或小分子物质我们要事先对其改造再加以包被，亲和素生物素:先亲和素先包被载体，加入生物素化的dna，这种包被方法平均、牢固，已扩大应用于各种抗原物质的定量测定。常用的包被液除了刚才提到的ph9.6碳酸盐缓冲液，还有ph7.2的磷酸盐缓冲液和ph7-8的tris-hcl缓冲液等等。 包被原的性质很重要，蛋白浓度，是否降解，这关系到您做出的抗体可不可以被其识别，所以保留抗原很重要，我做重组蛋白时，师兄都严格警告我一定要在冰浴下缓慢融化就是这个道理。封锁就是让大量不相关的蛋白质充填这些旷地空闲，从而排斥ELISA后的步骤中干扰物质的再吸附。但有时因为试验的需要，包被原的特殊性也可能采用中性的缓冲溶液来包。 上海德尔塔生物主营：ELISA试剂盒,
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四月浓春 劲马提醒ELISA实验注意这9个事项
作者：德尔塔 日期：2022-04-06
各位亲们，已四月中旬啦！上海劲马免疫学研究检测中心为大家带来了技术内容。ELISA实验步骤繁琐，总有这样那样的小问题。下面我们来一起看下，四月浓春，劲马提醒ELISA实验注意这9个事项： 一、样品和试剂的混匀 稀释前、后的样品必须充分混匀，所有试剂在加样前也须摇匀，以保证试验的均一性。 二、样品稀释 酶联免疫反应是一种敏感性很高的反应，如果血清不稀释，不可避免会产生很强的非特异性反应，出现假阳性。因此，国外检测血清抗体的试剂盒，均规定将血清稀释至适当的倍数，以降低非特异性反应，使特异性的抗原抗体反应充分体现出来。一般产品的样品稀释倍数均通过大量试验确定，以保证试验的灵敏度和特异性。但是，有些用户未能严格按使用说明书操作，如某些产品应取10μl样品进行稀释，个别用户取5μl甚至1μl样品进行稀释，由于吸嘴上不可避免地沾有样品以及微量移液器的精度不够，因此造成样品稀释倍数不准确，检测结果出现问题。 三、加样 在现在的ELISA商品试剂盒中，必然有使用微量加样器加入样本的步骤。注意的关键点是：加样不可太快，要避免加在孔壁上部，不可溅出和产生气泡。加样太快，无法保证微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上部的非包被区，易导致非特异吸附。溅出会对邻近孔产生污染。出现气泡则反应液界面有差异。所以，有时候一份标本用相同的试剂盒这次测定为阳性，下次测定为阴性，往往就是上述加样及试剂的错误所致。 四、温育 ELISA作为一种固相免疫测定，抗原抗体的结合反应在固相上进行，要使液相中的抗原或抗体与固相上的特异抗体或抗原完全结合，必须在一定的温度条件下反应一定的时间。温育所需时间与温度成反比，即温度越高，则所需时间相对较短。zui为常用的温育温度有37℃和室温，其次是43℃和2～8℃。一些操作者，擅自改变说明书操作，使用自己喜欢的温育时间和温育温度，这样造成一些不必要的麻烦。因为，不同试剂盒有不同的温育时间和温育温度的选择，随意更
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换热器性能试验测控系统
作者：德尔塔 日期：2022-04-06
换热器机能实验普遍采取的办法是等雷诺数法及威尔逊分别系数法。 利用这些办法失掉的丈量数据均是在差别的冷、热流体流量、差别的冷、热流体收支口处温度跟压力下测取的，并据此数据停止数学剖析得出换热器的传热特征与阻力特征。 传统的流量调理办法是经由过程转变分流管阀门开度的年夜小来调理流量,采取变频器后只经由过程转变输出频率来准确把持泵或风机的转速即可。 泵或风机的现实流量与流畅截面积、流体的粘度、管路的安排及转速等诸多要素有关。多种变量的影响对流量的准确把持提出更高的请求。 对薄壁的板式换热器，因为冷、热侧的流量差别或压力波的影响,使板片发生弹性变形，则两侧流量产生变更并彼此影响，因而在测试工况较多时无奈树立准确的把持函数，而智能把持为处理这类庞杂成绩供给了无效的办法。 现在，换热器机能实验台的测试手腕跟把持办法比拟落伍，人工实验义务沉重、实验数据精度无限、难以测验换热器的机能。为此，咱们研制开辟了存在盘算机主动把持、把持办法轻便、丈量数据精度较高的换热器机能实验测控体系。 1、实验体系形式 1）体系构造本体系由两部门构成: 一部门是由冷、热水箱及换热器所构成的现场流程； 另一部门是由现场检测与把持所构成的测控体系(见图1)。数据采集、归档及处理等工作，实现了在较短的时间内完成全部14组数据的测量、整理及报表输出工作。 3、论断 （1）本体系处理了换热器机能实验进程中,数据记载义务沉重、实验时光长、数据存储及数据处置繁琐的成绩。 （2）对多变量影响的换热器流质变化及薄壁换热器流质变化交互影响下的流量把持成绩,宜采取存在无需工具数学模子自顺应才能的把持办法。“客户的满意、行业的发展是我们坚持不懈的目标”，仪器仪表世界网 始终将客户放在*位，尽可能的将服务水平提高到更高的层次，同时也为行业的发展尽自己的一己之力。中仪华世将会与客户携手并进，共同
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高压灭菌培养基的高压灭菌有哪些步骤
作者：德尔塔 日期：2022-04-06
一、码放锥形瓶。将装有培养基的锥形瓶直立于金属小筐中，再放入高压蒸气灭菌锅内。如果没有金属小筐，可以在两层锥形瓶之间放一块玻璃板隔开。二、放置其他需要灭菌的物品。将其他需要灭菌的物品也放入高压蒸气灭菌锅内，如装有蒸馏水的锥形瓶、带螺口盖的玻璃瓶、烧杯、广口瓶（以上物品都要用牛皮纸封口），用牛皮纸包裹的培养皿、剪刀、解剖刀、镊子、滤纸、铅笔等。三、灭菌。待需要灭菌的物品码放完毕，盖上锅盖。在98kPa、121.3℃下，灭菌20min。灭菌后取出锥形瓶，让其中的培养基自然冷却凝固。放置1d后再使用。
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关于细胞不贴壁的原因以及解决方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-06
在培养细胞的时候，有的同学会出现细胞不贴壁的，到底是什么原因会出现这种情况呢?下面上海沪鼎给大家简单讲解一下! 可能原因如下： ●胰蛋白酶消化过度 ●支原体污染 ●培养基pH值过碱（NaHCO3分解） ●细胞老化 ●接种细胞起始浓度太低或太高 解决方法： ●缩短胰蛋白酶消化时间或降低胰蛋白酶浓度 ●分离培养物，检测支原体。清洁支架或培养箱。如发现支原体污染，丢弃培养物 ●使用无菌醋酸溶液调整pH值或充入无菌CO2 ●启用新的保种细胞 ●调节*接种细胞浓度 上海沪鼎生物科技有限公司主营：Elisa试剂盒,人Elisa试剂盒,大鼠Elisa试剂盒,小鼠Elisa试剂盒,生物试剂,血清,抗体,培养基,标准品,国产血清、GIBCO胎牛血清等。种属齐全，价格优惠。期待您的与合作！
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原代细胞染色体制备操作步骤
作者：德尔塔 日期：2022-04-06
1、 原代细胞实验材料 培养液（PRMI 1640、M199、DMEM等），小牛血清、0.025%胰蛋酶、秋水仙素，刻度离心管，直吸管及弯头吸管，培养瓶或皿、KCL、甲醇、冰乙酸、载玻片。 2、 培养液配制 培养液 85-95% 小牛血清 5-15% 双抗（选择） 100u/ml 3、 操作过程 （1）培养细胞：选择处于指数生长期、用大瓶培养的80-90%汇合单层培养细胞； （2）终止培养：当有大量圆形发亮细胞出现时，加秋水仙素0.01-0.03ug/ml培养混合液，置温箱继续培养6-10小时以抑制分裂期细胞停止于分裂中期；（3）聚集细胞： （A） 摇动法： 原代细胞可利用分裂中期细胞变圆与底物附着不牢特点，此时可持培养瓶，左右反复横向水平摇动，可使90%的中期分裂细胞从瓶壁脱落； （B） 消化法： 将培养液倒入离心管内，给培养瓶内加0.025%胰蛋白酶液0.5-1ml/瓶，水平左右摇动，便培养瓶底壁面完全接触消化酶，稍后用弯头吸管吹打，待细胞完全脱落后，加入3-5ml前培养终止消化。用吸管移入装有培养液的离心管内2000rpm10分钟。弃上清液，留沉淀细胞； （4）低渗处理：给沉淀细胞加顶温的37℃0.075MKCL8ml左右，用吸管打均匀，在温箱中静置20-30分钟； （5）预固定：向低渗处理适当的离心管中加新鲜配制的3∶2甲醇，冰乙醇固定液1-2ml，用吸管轻松吹打调匀，此措施能起到使细胞表面轻微固定，可防止固定后细胞粘连成块。 （6）固定：800-1000rpm10分钟，弃上清液加新鲜配制的3∶2甲醇冰乙酸固定液10ml，加入时要沿管壁慢慢加入，后轻轻吹打，封口后室温静置30分钟以上，反复三次； （7）原代细胞制片：末次离心后，倒掉上清液，留沉淀细胞，加新鲜配制固定液0.5ml左右，混匀后冰片制片，其它同外周血方法。
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菌种质量的检验方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-06
1、青海发光杆菌直接观察。对引进菌种，先观察包装是否合乎要求，棉塞有无松动，试管、玻璃瓶和塑料袋有无破损，棉塞和管、瓶或袋中有无病虫侵染，菌丝色泽是否正常，有无发生变化。然后在瓶塞边作深吸气，闻其是否具备特有的香味。原种和栽培种可取出小块菌丝体观察其颜色和均匀度，并用手指捏料块检验含水量是否符合标准。2、显微镜检验。若菌丝透明，呈分枝状、有横隔、锁状联合明显，再加上具有不同品种固有的特征，则可认为是合格菌种。3、观察菌丝长速。将供测的菌种接入新配制的试管斜面培养基上，置于zui适宜的温、湿度条件下进行培养，如果菌丝生长迅速、整齐浓密、健壮有力，则表明是优良青海发光杆菌菌种，否则即是劣质菌种。4、出菇实验。经过检验后，认为是优良菌种的，可进行扩大转管；同时可取一部分母种用于出菇（耳）试验，出菇实验常用的方法有瓶栽法和压块法两种，置zui适宜温湿条件下培养，观察菌丝生长速度、转管快慢、吃料能力、出菇速度、子实体形态、产量和质量等来综合评价青海发光杆菌菌种质量优劣。
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抗原elisa试剂盒做标准曲线样品检测时需要注意的问题
作者：德尔塔 日期：2022-04-06
1、抗原elisa试剂盒样品的浓度等指标是根据标准曲线计算出来的，所以首先要把做标准曲线看作是比做正式实验还要重要的一件事，否则后面的实验结果无从谈起。2、设置标准曲线样品的标准浓度范围要有一个比较大的跨度，并且要能涵盖你所要检测实验样品的浓度，即样品的浓度要在标准曲线浓度范围之内，抗原elisa试剂盒包括上限和下限。而对于呈S型的标准曲线，尽量要使实验样品的浓度在中间坡度zui陡段，即曲线几乎成直线的范围内。3、抗原elisa试剂盒采用倍比稀释法配制标准曲线中的标准样品浓度，这样就能够保证标准样品的浓度不会出现较大的偏离。4、检测标准样品时，应按浓度递增顺序进行，以减少高浓度对低浓度的影响，提高准确性。5、标准曲线的样品数一般为7个点，但至少要保证有5个点。6、做出的标准曲线相关系数因实验要求不同而有所变动，但一般来说，相关系数R至少要大于0.98，对于有些实验，至少要0.99甚至是0.999.抗原elisa试剂盒在S曲线的低浓度部门可以用乘幂方程很好的拟合，中低浓度部门可以用直线方程，中间部门可用对数方程，而中后段可用四参数。免疫检测时尺度点（可以是倍比稀释的，也可以不是）浓度假如和相应的吸光度（OD）值假如能够呈现直线关系当然是的了，这时可以通过EXELL等利便的获得拟合曲线，进而推算出样品的浓度值。 关于尺度曲线的拟合方式，直线、二次曲线、三次曲线、指数、对数等虽都可用于ELISA及其它生物学反应中的曲线拟合，但都只合用于曲线的一部门，有的合用于前半段，有的合用于后半段，有的合用于中间一段，而Logistic曲线则对曲线的全部都有较好的合用性。在一个长的区间内，Logistic应该都能拟合得较为理想。假如用来定量，S形曲线的中间段（较陡处）是比较好的，而两真个平坦部门计算误差会大，有时甚至会很大。用于免疫检测的所谓“尺度曲线"实在称为拟合曲线比较合适。目前上zui流行的免疫检测拟合方式是“四参数逻辑拟合"，用这种拟合方式往往能够比较的反映浓度和吸光
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羊源性成分核酸检测PCR-荧光探针试剂盒试验的时间
作者：德尔塔 日期：2022-04-06
羊源性成分核酸检测PCR-荧光探针试剂盒双抗体夹心ELISA法一次试验需求4-4.5小时，竞赛ELISA法一次试验需求2-2.5小时。酶生机的测定实际上就是测定酶促反响的速率。酶生机的巨细即酶含量的多少，可以用每克酶制剂或每毫升酶制剂含有多少酶单位来表明，单位是U/g或U/ml。酶生机的测定办法：①测定完结一定量反响所需的时刻；②测定单位时刻内酶催化化学反响量。首要经过产品的增加量或底物的减少数来测定。羊源性成分核酸检测PCR-荧光探针试剂盒常用的办法有：①分光光度法；②荧光法；③同位素测定法；④电化学法。ELISA试剂盒的办法通常是对可溶性抗原或抗体进行定性和定量的检查，所以酶活性是不能用ELISA来检查的。生化测定的烦难首要在于下列几个方面：查阅文献挑选测定办法，制造试剂，预试验以判别该办法是不是合适自个的研讨资料，重复调整以优化测定系统和测定过程。羊源性成分核酸检测PCR-荧光探针试剂盒对于研讨经历和测定练习都缺乏的研讨生而言，上述烦难常常会形成测定重复失败，导致时刻、样品和试剂的很多，不能及时获得牢靠的数据。
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优良的光合细菌菌种和产品的外观质量辨别
作者：德尔塔 日期：2022-04-06
1、ATCC菌种外观上看比较均匀，基本无上下分层。 相反，市场上有许多光合细菌是上下分层的，上层比较清淡，下层则比较深厚，上层颜色浅，下层颜色深，zui底层可能还会有一层黑黑的沉淀。 而的光合细菌菌种和产品，上下都是比较均匀的，没有较明显的分层，颜色比较均匀，外观看起来也悦目。（当然，除了培养基溶解时，会与硬水中的重金属离子反应产生的絮装沉淀除外） 这种上下无分层，颜色均匀，不是靠加悬浮剂，或增稠剂而造成的，而是自然培养出来的，不加任何修饰而成的。少数地方，由于水质的原因，可能会产生稍稍的差别。 2、没有粘壁现象。 很多市场上的产品都有粘壁现象，即在容器的壁上形成一层红紫色的颜色层，就象是油漆一样，洗不掉，抹不去。这主要是在培养过程中形成的，也有在保存过程中形成的。 的光合细菌菌种和产品，应该是没有一丝一毫的粘壁现象。所以外观上看起来质量也更好。 3、颜色的深度比较深。 根据国家质量标准，可以用721分光光度计，测量A660nm处的吸光值，如果大于1.5，则说明，浓度一般都在30亿/毫升以上，好的光合细菌菌种和产品都在1.5以上。 4、颜色鲜艳无杂色。 的菌种和产品，不仅颜色深，而且，比较鲜艳，没有杂色，比如是大红色，血红色，或是深紫色，看起来是很悦目的，没有不良的杂色，或是暗暗的颜色。 5、保存期限长。 可以保存夏天3月以上，冬天6月以上。在期限内外观基本无变化。保持80%以上的活力。 6、ATCC菌种培养周期短，接种量少。 好的菌种，接种量在10--20%即可，我中心推崇20%接种量，培养条件好的，可只用10%接种量，都可以在3--5天内培养好（条件是用白炽灯培养， 温度在30--37度），或在7天培养好（条件是用太阳光照培养，阳光充足时，仅是白天照射培养，液体温度在30--38度，晚上不培养）。 而市场上很多菌种要50%以上接种量，当然，在有条件情况下，用大接种量是有好处的，在有条件的情况下，推荐用30%的接种量，能更稳妥，更快地培养成功。 7、基本不存在杂菌
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冷冻保存细胞的解冻与复苏要点
作者：德尔塔 日期：2022-04-06
肿瘤细胞冷冻保存细胞的解冻与复苏要点：慢冻快融 （1）快速解冻。冻存细胞从液氮中取出后，应立即放入 37℃水浴中，轻轻摇动冷冻管，使其在 1 分钟内全部融化（不要超过 3 分钟）。 （2）解冻操作过程动作要轻。由于冷冻保存过的细胞变得非常脆弱，不仅解冻速度要快，而且动作要轻。一般情况下，解冻后的细胞可直接接种到含完全生长培养液的细胞培养瓶中直接进行培养（1ml 冻存细胞液加入到 25－30ml 新鲜完全培养液中），24 小时后再用新鲜完全培养替换旧培养液，以去除 DMSO。如果，细胞对冷冻保护剂特别敏感，那么，解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂，然后再肿瘤细胞接种到含完全生长培养液的培养瓶中。 特别注意： （1）解冻时务必注意安全，预防冷冻管爆裂。要带手套，用镊子将细胞冷冻管从液氮中取出，放入 37℃水浴中。切不可直接用手，以免冻伤。 （2）冷冻管在水浴中解冻时，要将冻存管盖子拧紧，确定拧紧后再投入水浴锅中肿瘤细胞，注意液面不可超过冻存管盖面，否则，易发生污染。
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影响哺乳动物细胞复苏的因素
作者：德尔塔 日期：2022-04-06
影响哺乳动物原代细胞复苏的因素包括：（a）细胞类型，（b）生长阶段，（c）细胞处于细胞周期的哪个阶段，（d）终悬液中的细胞数量和浓度。可通过优化以上因素来提高复苏细胞活力， 另外，还需考虑冻存保护剂的特性以及冻存过程的具体操作。哺乳动物细胞培养对其他细胞和微生物的污染特别敏感，例如 Hela 细胞。由于这种特性，初始细胞系可通过同工酶分析、染色体组型分析、免疫分析或基因组分析，检测来源。冻存前后均应该进行如上检测。特别需要注意的是，病毒和支原体污染。 一套完整健全的哺乳动物细胞系鉴定程序应该包括，检查是否存在细菌、真菌、病毒、支原体、甚至原生生物原代细胞的污染。哺乳动物细胞准备冻存时，需要将细胞调整到合适生长状态， 确保既能得到足够的复苏细胞又无大量非必需生长的细胞。对大部分哺乳动物细胞来说，*起始细胞数为 106-107/ml 左右。为方便加入等体积的冻存保护剂（2× 冻存保护剂 + 培养基），细胞悬液浓度应以起始浓度的两倍准备。或者，也可将沉淀细胞重悬在冻存 保护剂（1× 冻存保护剂 + 培养基）中达到预期细胞数。细胞操作应该温和小心，确保原代细胞在冻存前是健康的。尽量避免剧烈吹打及 高速离心。适当情况下，可注入 5% 或 10% CO2 来调节 pH。
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分析细胞常见的消化液
作者：德尔塔 日期：2022-04-06
ATCC细胞取材进行原代培养时常常需要将组织块消化解离形成细胞悬液，传代培养时也需要将贴壁细胞从瓶壁上消化下来，常用的消化液有胰酶(Trypsin)溶液和edta溶液，有时也用胶原酶(collagenase)溶液。 1.胰酶溶液：胰酶活性可用消化酪蛋白的能力表示，常见有1：125和1：250，即一份胰酶可消化125或250份酪蛋白。组织培养用胰酶溶液一般配制成0.1-0.25%浓度，配制时要用不含Ca2+、Mg2+及血清的平衡盐溶液(如前面的D-Hank"s)，因为这些物质会对胰酶产生抑制作用。胰酶作用及溶解的*pH是8-9，配制胰酶溶液应将液体调至pH8左右，充分溶解，过滤除菌。过滤后可以再调只pH7.5，也可不调。 使用细胞清洗液配制胰酶消化液：含0.5%胰酶的ATCC细胞清洗液(100ml细胞清洗液加0.5g胰酶)，过滤除菌，分装于4度保存。 2.EDTA溶液：EDTA溶液也常用来解离细胞，它的作用机制是破坏细胞间的连接。对于一些贴壁特别牢固的细胞，还可以用EDTA和胰酶的混合液进行消化。EDTA溶液的使用浓度为0.02%，配制时应加碱助溶，配制后可过滤除菌，也可高温消毒灭菌。 3.胶原酶溶液：胶原酶在上皮类细胞原代培养时经常使用，胶原酶作用的对象是胶原组织，因此不容易对ATCC细胞产生损伤。胶原酶的使用浓度为0.1-0.3mg/L或200000U/L,作用的*pH为6.5。胶原酶不受Ca2+、Mg2+及血清的抑制，配制时可用PBS。
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