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光学显微镜对玻片厚度的要求
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
麦克奥迪显微镜脱水与样品附着：由于多次离心使细胞丢失，光学显微镜因此**先将细胞附着在玻片或塑料片表面，使细胞随同该玻片或塑料片一起脱水、干燥。光学显微镜对玻片厚度的要求为使细胞能附着在玻片或塑料片，需先在玻片或塑料片上铺设一层膜，铺膜方法如下: (1)光学显微镜最简单的方法是铺一层薄的聚乙烯醉缩甲醛(formvar )膜。将洗净的玻片在(0.5-1)%聚乙烯醉缩甲醛氯仿溶液中浸葵，待氛仿挥发后玻片上呈现一层白膜，将玻片在抓仿中振荡几次使膜变薄即可用。 (2)将0.1纬多聚L-赖氨酸(制备时将1mg多聚赖氨酸溶于l ml过滤后的水中)滴在洗净的玻片上，待液滴展开后在450C供箱中干燥。此种方法**，因为多聚L-赖氨酸带正电荷，能使较多的表面带负电荷的细胞附着。 (3)麦克奥迪显微镜将血浆和甘油各以(30--40)%，光学显微镜对玻片厚度的要求和((3-5)%的比例加到蒸馏水中，成为甘油蛋白液。将该液滴在洗净的玻片上，光学显微镜展开并烘干。将铺好的蛋白膜浸入2%戊二醛中使蛋白固定，洗净后干燥可备用。使用前将血浆滴在该蛋白膜上使之“活化”, 30分钟后用缓冲液冲洗，便可直接应用。 数码显微镜将固定与清洗后的细胞用过滤后的水制成浓度适宜的细胞悬液，光学显微镜悬滴在已铺好膜的玻片或塑料片上，在湿润、低温(40C)环境中放置(30-120)分钟，使细胞附着到膜上。用细镊子夹起玻片在清洁的双蒸水中振荡，光学显微镜洗去未附着的细胞。光学显微镜对玻片厚度的要求偏光显微镜然后迅速放入盛有50%丙酮〔或乙醉)的器皿中。脱水过程是将玻片每隔约3分钟，依次放入浓度递增的丙酮或乙醉中，光学显微镜或在放玻片的器皿中不断增加脱水剂浓度。据作者所在实验室经验，后一种操作比较方便。光学显微镜具体做法可每隔3分钟将器皿中的脱水剂吸出一半，再加入浓度为100%的等量脱水剂。经过5-6次操作，光学显微镜对玻片厚度的要求显微镜价格器皿中脱水剂浓度达0.5%以上，细胞脱水成功。临界点干燥后将玻片或塑料片用导电胶粘于样品墩
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光照培养箱的最常见问题介绍及常见故障
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
光照培养箱微电脑全自动控制，触摸开关，操作简便;可编程多段控制方式，白天、黑夜均可单独设置温度、湿度、光照度和时间等。风道式通风，工作室风速柔和，温度均匀;中空反射钢化渡膜玻璃，绝热性能好，美观大方。全封闭不透光灯罩，选装工作室电源，消毒装置等。 光照培养箱使用说明： 1、控温设定请参考智能型数字温度控制器说明书。 2、接通电源，合上电源开关，整机通电，开关内的电源指示灯亮。 3、此种培养箱有断点保护功能及一分半钟左右延时功能，压缩机停机后再次启动要达一分半钟左右。 4、如需照明打开照明开关。 常见故障： 1、启动容易缩短其使用寿命。 2、平衡模式工作下压缩机一直处于工作状态制冷效果比较好且对压缩机可以得到有效保养。 3、有可能是排放物品过于密集造成或者箱内循环风机不工作 4、用长光照的话时间久灯泡容易发热也会造成温度不均匀 5、温度不均匀 6、如果是单制式工作的话温度降低到一定数值时才工作，开关门时都会引起温度大幅度波动。造成压缩机平凡 7、压缩机不制冷，培养箱内温度不均匀，或者循环风口结冰等现象。
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PCR引物设计原则简介
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
实验步骤 首先引物与模板的序列要紧密互补，其次引物不能在模板的非目的位点引发DNA 聚合反应(即错配) ，再次引物与引物之间避免形成稳定的二聚体或发夹结构。引物设计应注意如下要点： 1．引物的长度一般为15-30 bp，常用的是18-27 bp。 2．引物序列在模板内应当没有相似性较高，尤其是3’端相似性较高的序列，否则容易导致错配。引物3’端出现3 个以上的连续碱基，如GGG 或CCC，也会使错误引发机率增加。 3．引物3’端的末位碱基对Taq 酶的DNA 合成效率有较大的影响。不同的末位碱基在错配位置导致不同的扩增效率，末位碱基为A 的错配效率明显高于其他3个碱基，因此应当避免在引物的3’端使用碱基A。 4．引物序列的GC 含量一般为40-60%，过高或过低都不利于引发反应。上下游引物的GC含量不能相差太大。 5．引物的另一个重要参数是熔解温度（Tm）。这是当50％的引物和互补序列表现为双链DNA分子时的温度。合理的退火温度从55℃到70℃。为获得最佳结果，两个引物应具有近似的Tm值。 6．引物二聚体或发夹结构也可能导致PCR 反应失败。应该尽量避免。
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PCR产物的TA克隆
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
实验原理 1. DNA片段回收方法：DNA片段在适当浓度的琼脂糖凝胶中，通上一定电压进行电泳，不同大小的DNA分子由于迁移率的不同而分离开。切下带有所需DNA片段的凝胶，用冻融法、玻璃奶回收法或商品化胶回收试剂盒将目的片段回收纯化。 2. 利用Taq酶能够在PCR产物的3’末端加上一个非模板依赖的A，而T载体是一种带有3’T突出端的载体，在连接酶作用下，可以把PCR产物插入到质粒载体的多克隆位点，可用于PCR产物的克隆和测序。 实验试剂 1. pMDTM18-T Simple Vector Kit(Takara公司) 2. TAE电泳缓冲液 3. 琼脂糖(Agarose) 4. 6×电泳加样缓冲液：0.25％溴粉蓝，40％(w/v) 蔗糖水溶液，贮存于 4℃。 5. 溴化乙锭(EB)溶液母液：配制成10mg/mL，用铝箔或黑纸包裹容器，储于室温即可。 6. 70%乙醇 7. 胶回收试剂盒(Omega公司) 实验设备 1. 水平式电泳装置 2. 电泳仪 3. 台式高速离心机 4. 恒温水浴锅 5. 微量移液枪 6. 微波炉或电炉 7. 紫外透射仪 8. 凝胶成像系统或其它照相设备 实验步骤 1. 胶回收试剂盒回收PCR产物(以Omega公司 Gel Extraction Kit为例) 1) 当目的片段DNA完全分离时，转移凝胶至紫外灯上尽可能快地切下目的片段。 2) 凝胶块转移至1.5ml离心管(离心管已经称重了)中，称重得出凝胶块的重量。近似地确定其体积(假设其密度为1g/ml)。加入等体积的Binding Buffer(XP2)，于55-65℃水浴中温浴7min或至凝胶完全融化，每2-3 min振荡混合物。(在凝胶完全溶解之后，注意凝胶-Binding buffer混和物的pH值。如果其pH值大于8的话，DNA的产量将大大减少。如果是橙色或红色，则要加入5μl 浓度为5 M，pH为5.2的醋酸钠，以调低其pH值。该混合物的颜色将恢复为正常的浅黄色。) 3) 取一个干净的HiBind DNA Mini柱子装在一个干凈的2ml收集管内(已备好)。 4) 将第三步获得的DNA/熔胶液全部转移至柱子中。室温下10,000 x g离心1分钟。弃收集管中的滤液，将柱子套回2ml收集管内收集管。 5) 如果DNA/凝胶熔液的
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Real-Time PCR实验流程
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
实验试剂 Total RNA Kit ：Omega：(Cat.No．R6834) First Strand cDNA Synthesis Kit：GeneCopoeia(Cat.No．C0210A) 2xAllinOneTMQ-PCRMix：GeneCopoeia（cat.No．D0101A) Primer synthesis：invitrogen 实验设备 Real Time PCR：ABI 实验材料 样品为5个人源的细胞培养液，其编号分别为：NO.I、No.2、No.3、No.4、No.5，其中No.1为对照组，其它四个为不同的样品组。 实验步骤 1. RNA抽提 1) 样品处理：取适量样本加入 1ml TRK 裂解液匀浆样品。室温 14,000 × g 离心 5 min去除不溶解的的杂质，小心转移上清至 1.5ml 离心管。 2) 加入等倍体积 70% 乙醇至裂解液中，抽打或涡旋混匀。 3) 将柱子套在收集管中，转移混合液至柱子中。室温 10,000 × g 离心 30-60 秒，弃去滤液。 4) 把柱套放新收集管中，加入 300ul RNA Wash Buffer I 至柱子上，按以上条件离心，弃去滤液。把柱套放回收集管中。 5) DNase 消化: 配制 DNASE 消化液( Digestion Buffer, 73.5ul ; RNase-Free DNase I,1.5ul) ,混匀, 将消化液转移至柱子膜的正中央，室温静置 15 分钟。 6) 加 500ul RNA Wash Buffer I 至柱子，按以上条件离心，弃滤液。 7) 把柱套放回收集管中，加 500ul RNA Wash Buffer II 至柱子上，按以上条件离心，弃滤液。 8) 把柱套放回新收集管中，加 500ul RNA Wash Buffer II 至柱子上，按以上条件离心，弃滤液。 9) 把柱套放回收集管中， 10,000xg 离心空柱 2min 以甩干柱子基质。 10) 把柱子装在 1.5ml 离心管上，加入 30-100ul DEPC Water 柱子基质上，室温静置 2min 。10,000xg 离心 1min 洗脱出 RNA 。 11) RNA浓度测定 吸取lul抽提的RNA用DEPC水稀释10倍后．在Nanodrop上测定RNA浓度，以DEPC水做空白对照，同时记录RNA浓度及其OD260／OD280。 2. RNA电泳检测 1) 变性胶制备 取1gAgarose 75ml去离子水煮沸，冷却至70℃左右加入10ml 10×Mops和15ml 甲醛
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酵母菌的鉴定
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
实验原理 微生物学的类别分门、纲、目、科、属、种，生产酒精用酵母菌属于微生物中的真菌门、子囊菌纲、原子囊菌亚纲、内孢霉目、内孢霉科、啤酒酵母属、卡尔斯伯酵母属等。 (一)形态特征的鉴定 把酵母菌接种到麦芽汁固体培养基上，让它长成菌落，观察其菌落的形态、颜色、质地、边缘、表面等特征。把它再接种到液体麦芽汁培养基中，观察是否能产生醭、试管或培养仪器表面壁上能否形成菌环，培养液中是否产生沉淀、混浊程度等。另外，还要取样在显微镜下观察其单细胞的形态、大小、能否形成孢子、孢子的大小以及繁殖方式等。 (二)生理生化特征的鉴定 酵母菌的生理生化特征主要表现为发酵葡萄糖、果糖、蔗糖、麦芽糖等糖类的能力。同时，还需测定利用其它碳水化合物、同化酒精、耐酒精，利用硝酸盐还是硫酸盐，发酵产酸、产醋、耐温、耐酸、抗重金属离子、抗杂菌性等的能力。 最后，根据以上得出的形态特征和生理生化特征，查阅有关资料，把具有相同特征的一类酵母菌，就可以归属于某一属。 一、酵母菌糖发酵试验 酵母菌在厌氧条件下能分解糖类，产生各种有机酸、气体和其它产物。酵母菌种类不同对各种糖类的发酵能力各异。因此，这是鉴别酵母菌种类的一项重要依据。 酸的产生可根据培养基中溴甲酚紫（pH6.8-5.2由紫变黄）或溴麝香草酚蓝（pH7.6-6.0由蓝变黄）指标剂颜色的改变来确定。产气可由发酵管气泡的产生予以证实。 二、酵母菌碳源同化试验 碳是酵母菌细胞的重要组成成分，约占酵母菌体重量的50%，为酵母菌生命活动提供所需的能量和组成其结构的物质。酵母菌对各种碳源的利用，因种类不同而异。这是酵母菌分类鉴定的一个重要依据。 三、酵母菌氮源同化试验 酵母菌蛋白酶不分泌于菌体外，故酵母菌对复杂的蛋白质不能利用，酵母菌对一些较简单的含氮化合物的利用程度也不一致。 四、酵母菌生长曲线的测定试验 酵母菌属于单细胞真核型微生物，把一定数量的酵母菌接种于的液体培养基中，在适宜的温度下培养时
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醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白质实验方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
实验原理 带电荷的蛋白质，在电场中向着与其所带电荷电性相反的电极泳动称为电泳。血清中各种蛋白质的等电点不同，但大都在pH7以下，若将血清置于pH8.6的缓冲液中，则这些蛋白质均带负电，在电场中都向阳极移动。由于各种蛋白质在同一pH环境中所带负电荷多少及分子大小不同，所以在电场中向阳极泳动速度也不同。蛋白质分子小而带电荷多者，泳动速度快；反之，则泳动速度慢。因此可将血清蛋白质依次分为清蛋白、a1-球蛋白、a2-球蛋白、b-球蛋白和g球蛋白五条区带，经染色可计算出各血清蛋白质含量的百分数。 以醋酸纤维薄膜（CAM）为支持介质，电泳分离后经染色处理，可展示出清晰的蛋白质电泳图谱。由于染色时染料与蛋白质的结合与蛋白质的量成正比，因此将各蛋白质带剪下，分别用一定量的NaOH稀溶液洗脱下来，即可进行比色，测定出各蛋白质区带的相对含量。也可用一定量的有机溶剂使CAM溶解制成透明膜而用光密度计进行扫描定量。 醋酸纤维薄膜电泳具有微量、快速、简便及分辨率较高等优点，广泛应用于血清蛋白、血红蛋白、脂蛋白、同工酶的分离和测定。 实验试剂 1．巴比妥—巴比妥钠缓冲液(pH8.6，m=0.06)。称取巴比妥2.21克和巴比妥钠12.36克，溶于500毫升蒸馏水中，加热溶解。待冷至室温后，再加蒸馏水稀释至1000毫升。 2．染色液 （1）丽春红S染色液：称取丽春红S O.4g、三氯醋酸6g，用蒸溜水溶解并稀释至100ml。 （2）氨基黑10B染色液：称取氨基黑（C22H13O12N6S3Na3）10B 0.1g,溶于20ml无水乙醇中，加冰醋酸5ml,使其溶解。另取磺基水杨酸2.5g，溶于少量的蒸馏水中，加入前液将两液混合摇匀，再以蒸馏水补足至100ml。称取丽春红S0.4克及三氯醋酸6克；用蒸馏水溶解，并稀释至100毫升。 3．漂洗液。 （1）3％（V／V）醋酸溶液：适用于丽春红S染色的漂洗。 （2）甲醇45ml、冰醋酸5ml、蒸馏水50ml混匀，适用于氨基黑10B染色的漂洗。 4．透明液 取无水乙醇75毫升和冰醋酸25毫升混匀备用。 5． 洗
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洗瓶机与传统清洗方式的比较分析
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
喜瓶者——“科学是我评判的唯一标准” 在近两年有一档热播的综艺节目--“最强大脑”,而我们也经常能够听到魏坤琳教授说的一句话“科学是我评判的唯一标准”，让我们觉得科学是那么的神圣严谨，不可侵犯。 在最强大脑让科学越来越流行起来，让人们更加关注科学、关注科学实验研究的今天；在现在这样一个经济蓬勃发展，人们对生活品质的要求越来越高的今天，化学实验研究的准确性正面临着越来越高的要求。“科学是我评判的唯一标准”，而让我们走近科学的唯一标准就是实验数据的精确性。而实验数据的精确性在需要精确娴熟的实验操作的同时，往往更需要的是实验耗材极高的清洁度。而使用一次性耗材对于实验室研究来说基本不可能实现，一者是成本太大，再者则是完全不符合现代社会所提倡的绿色环保。因此洗瓶机也就成了生产、研究中必不可少的器材。 洗瓶机用于实验室玻璃、陶瓷、金属或塑料等材料器皿的清洗及烘干，同时可以清洗容量瓶、进样小瓶、广口瓶、三角瓶、量筒、鸡心瓶、比色管、培养皿、移液管、圆底平底烧杯等。 清洗实验室器皿最重要的方面是最终玻璃器皿完全没有任何残余物。 这意味着：一、没有试验后残余物；二、没有清洗剂的残余物；三、漂洗过程中水的质量。 然而传统的实验室清洗则很难达到较高的器皿清洁度要求。在传统的实验室清洗中，清洗者是实验员或清洁工，清洗方法是手洗或者超声波清洗，清洗用品则是肥皂、洗衣粉、洗洁精或者配置的酸碱清洗剂等。这样的传统实验室清洗现状可能会对实验室的竞争性造成灾难性影响： 1、带有清洗剂残余物，从而导致不正确的分析结果；2、高度敏感的分析方法要求彻底清洁实验室玻璃器皿；3、来自清洗过程的表面活化剂的残余物影响；4、交叉污染。 因此，正确清洗，摆脱繁琐、低效的传统实验室清洗方式在现代实验研究中显得尤为重要和紧迫。 洗瓶机对比传统清洗方式有以下优势： 1、 高标准的洁净度。能够实现彻底清洗无残留，通过水软化装置改善水质 从而保证清洗效
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ELISPOT（酶联免疫斑点法）技术简介
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
EliSpot（酶联免疫斑点法）技术简介 酶联免疫斑点技术(Enzyme Linked Immunospot Assay, ELISPOT)是细胞免疫学研究中最敏感的检测方法之一，可以在单细胞水平对抗体分泌细胞(ASC)及细胞因子(CK) 分泌细胞进行检测。由于是单细胞水平检测，ELISPOT比ELISA 和有限稀释法等具有更高的灵敏性，能从20万-30万细胞中检出1个分泌该蛋白的细胞。并且该方法能够对抗原刺激后的活细胞进行功能性检测，具有较高的特异性、直观可信度高，并且易操作，已被广泛用于分泌CK细胞检测或ASC测定中，在国内外免疫学界获得了广泛的应用。 ELISPOT Principle原理： 细胞受到刺激后产生细胞因子，此细胞因子被ELISPOT板底PVDF膜上的特异单克隆抗体捕获。除去细胞后，被捕获的细胞因子与生物素标记的二抗结合，其后再与碱性磷酸酶或辣根过氧化物酶标记的亲和素结合。底物孵育后， PVDF 孔板出现紫色或红褐色的斑点表明细胞产生了细胞因子，通过AID ELISPOT 分析仪（酶联斑点分析系统）对斑点的进行自动化成像、计数和分析。 ELISPOT Protocol方法步骤: 为什么选择ELISPOT assay? • 高灵敏度：百万分之一阳性细胞检测率, 200x vs ELISA, ~RT-PCR • 活细胞功能检测：检测到的细胞因子不是已存在的，而是在检测过程中，被加入的刺激物刺激而分泌出来的。 • 直观、可信度高：一个阳性细胞一个斑点，斑点数量代表分泌细胞因子的细胞数量多少，斑点大小代表该细胞分泌细胞因子水平的多少 • 经过冻存复苏的细胞并不丧失免疫功能：这一点对临床试验非常重要，**前和**后的样本可以并排进行测试，结果可以重复； • 高通量检测：科研工作者每天可检测数百个样品；只需少量细胞如45毫升血液就足以用于测试600种不同抗原/肽类物质的反应。 在您的免疫学科研中，ELISPOT作为一种有效的研究工具，可以检测抗原特异性的T细胞分泌的细胞因子或者B细胞分泌的抗体，从而进行T、B细胞功能研究。如需了解更多有关ELISPOT实验和技
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细胞外囊泡（细胞微粒、外泌体）检测新趋势
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
细胞外囊泡 细胞外囊泡（Extracellular Vesicles, EVs）是指从细胞膜上脱落或者由细胞分泌的双层膜结构的囊泡状小体，直径从40nm到1000nm不等。胞外囊泡主要由微囊泡（Microvesicles, MVs）和外泌体（Exosomes, Exs）组成，微囊泡是细胞激活、损伤或凋亡后从细胞膜脱落的小囊泡，直径约为100nm – 1000nm； 外泌体由细胞内的多泡小体（multivesicular bodies）与细胞膜融合后以外分泌的形式释放到细胞外，直径约为40nm - 100nm。细胞外囊泡广泛存在于细胞培养上清以及各种体液（血液、淋巴液、唾液、尿液、精液、乳汁）中，携带有细胞来源相关的多种蛋白质、脂类、DNA、mRNA、miRNA等，参与细胞间通讯、细胞迁移、血管新生和免疫调节等过程。在糖尿病、心血管疾病、艾滋病、慢性炎症疾病以及癌症中都发现细胞外囊泡水平的升高，它们很有可能成为这类疾病的诊断标志物，因此，对细胞外囊泡进行准确的定性和定量研究显得尤为重要。 细胞外囊泡的检测方法 目前细胞外囊泡（EVs）的检测方法主要有扫描电子显微镜、原子力显微镜、动态光散射技术、纳米微粒追踪分析术（NTA）、流式细胞仪和ELISA等，由于通量高、用时短、操作简单，ELISA和流式细胞仪是比较常用的方法。ELISA方法容易受其他可溶性抗原的干扰，而且无法知道囊泡的大小、数量等信息；流式细胞仪不仅可以检测囊泡的大小、数量，而且通过细胞特异的标记物染色可以检测囊泡的来源，将囊泡进行分类，因此，流式细胞仪理论上是进行囊泡快速、高通量、多参数检测的最优选择。然而，传统流式细胞仪针对的样本主要是细胞，散射光的检测极限通常是300-500nm，而大多数细胞外囊泡的直径都在300nm以下，由于无法与背景噪音区分，直径小于300nm的细胞外囊泡很难被检测到，因此，囊泡数量往往被低估，检测结果自然也不准确[1]。 Apogee流式细胞仪的三大优势 （1）最灵敏的散射光分辨率 英国Apogee公司的A50-Micro突破传统流式细胞仪的检测极限，优化的光学模块和优异的
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PCR新手指南：PCR仪的三种控温模式介绍
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
PCR新手指南：PCR仪的三种控温模式 在进行PCR仪中控温模式设定时，一般有三个选项：Block、Tube及Probe。下面就这三种模式种简单的介绍： PCR仪的温度传感器一般是在模块下面的，也就是说仪器实际能够控制的是模块的温度，Block模式指的就是仪器以控制Block的温度为目的，也就是说你输入95度5分钟，则模块的温度达到95度后开始计时，5分钟后完成。这是最基本的控温模式。 但是，实际上我们输入95度5分钟是希望PCR管内的温度达到95后开始计时5分钟。PCR仪器开发人员可以先将模块温度控制到97度（比如而已，如果不超过95度，管内温度可以很长时间才能达到95度或根本达不到），过几秒钟后，等到管内温度达到95度，再将模块温度降到95度。这样做既达到了管内温度到95度，且速度较快。但过冲的温度量与时间及PCR管的导热系数、PCR反应液的体积都有关系。这就是各个PCR仪厂家的核心技术了。这种控温方式就称为Tube模式。 如果直接将一个温度传感器加入PCR管中，直接测量PCR管内的温度不是也可以吗？这就是Probe模式，也就是在一个不进行PCR反应的管内放入一个温度探头，仪器根据温度探头测到的温度来控制PCR管内的温度。但传感器的数据检测、分析及反馈是需要时间的，这种控制模式不一定比Tube模式好，而且如果反应体积发生变化时，就比较麻烦了。 因此，如今的PCR仪就都是Block和Tube两种模式了。如果是正常的PCR反应，一般选Tube模式。如果是长时间保温且对温度过冲要求很高，则可以考虑用Block模式。 如果还有疑问，可以前往东胜创新百度贴吧提出疑问，将为您详细解答。或者关注我的官方微信“eastwin_long”或者“eastwin_mi”。
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PCR新手指南：PCR仪维修对仪器性能的影响
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
PCR仪是一种在实验室使用频率非常高的仪器，因此故障率也是比较高的。PCR仪的故障主要有以下几类： 1、制冷半导体故障 2、温度传感器故障 3、控制板故障 4、电源板故障 5、热盖故障 6、软件故障 7、其他故障 下面针对这些故障的维修对仪器性能的影响做简单介绍 1、制冷半导体故障 由于制冷半导体是半手工生产的，每一片制冷半导体的性能都不一样。用于PCR仪生产的制冷半导体都是需要配对的。一般大的生产商会通过较大量的制冷半导体的性能测试后选择性能非常接近的组成一组（每台PCR仪用几片制冷半导体就是几片一组），如东胜龙811PCR仪就是三片一组。 也就是说制冷半导体故障后应该一组全部更换。但大多数维修都是只更换其中一片，这样会造成温度的不均一（如像2720一样有四片制冷半导体却只有一个传感器）或是温度升降温的不均一（如像东胜龙811PCR仪一样有三片制冷半导体有三个传感器）。 三片制冷半导体的更换还涉及到整个控温模块的组装，这是一个技术活。要保证仪器的温度性能，组装的工艺要求是很高的，有些还需要特殊的工具或夹具。组装不好会影响温度均一性、升降温速率甚至仪器的使用寿命（内部可能会过温、进水等）。这也是为什么PCR仪的生产商都要求返厂维修的原因。东胜龙也是如此。 2、温度传感器故障 温度传感器一般通过导热硅脂或导热固化胶与模块实现高导热。更换至少需要注意以下几点：同一品牌同一类型的温度传感器；与原厂同样的导热材料（硅脂或固化胶）以保证传热效率相同；与厂家同样或类似的测温与校准方式。同时更换温度传感器时，大多仪器都要拆开整个控温模块，因此由生产商来完成组装为**。 3、控制板故障 控制板维修主要是要注意用与原厂相同的类型的元器件。如果维修涉及到与温度传感器相关的电路，需要进行温度校准。 4、电源板故障 电源板维修也是主要要注意用与原厂相同的类型的元器件。维修不好与仪器温度性能关系不大，但与仪器的使用寿命有关。 5、热盖故障 热盖故障一般为加热器件
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上海比朗喷雾干燥机工作原理介绍
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
喷雾干燥机工作原理： 喷雾干燥机有三种:压力喷雾干燥机,离心喷雾干燥机,气流喷雾干燥机. 喷雾干燥机原理: 喷雾干燥是采用雾化器将原料液分散为雾滴，并用热气体(空气、氮气或过热水蒸气)干燥雾滴而获得产品的一种干燥方法。喷雾干燥的原料液可以是溶液、乳浊液、悬浮液，也可以是熔融液或膏糊液。干燥产品根据需要可制成粉状、颗粒状、空心球或团粒状。液体的雾化 将料液分散为雾滴的雾化器是喷雾干燥的关键部件. 压力喷雾干燥机原理: 采用压力式雾化器:用高压泵使液体获得高压，高压液体通过喷嘴时，将压力能转变为动能而高速喷出时分散为雾滴。 气流喷雾干燥机原理: 采用气流式雾化器:采用压缩空气或蒸汽以很高的速度(≥300 m/s)从喷嘴喷出，靠气液两相间的速度差所产生的摩擦力，使料液分裂为雾滴。 离心喷雾干燥机原理: 采用旋转式雾化器 :料液在高速转盘(圆周速度90-160 /ms中受离心力作用从盘边缘甩出而雾化。
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多通道气液界面细胞直接暴露染毒技术-CultexRFS Compact
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
多通道气液界面细胞直接暴露染毒技术-CultexRFS Compact，细胞气液界面的直接暴露。在过去的几十年里，大气污染表现出惊人的速度，特别是今年中国雾霾的污染。空气中颗粒物浓度的急剧增加导致了呼吸道急性或慢性疾病的影响。在传统研究中，是通过动物的吸入暴露实验，确定可吸入物质对健康的影响。到目前为止，用于探讨替代动物实验的研究方法，还比较少。 一种在气-液界面，空气与细胞直接接触的实验方法，由Cultex公司Aufderheide教授提出。细胞顶部表面直接暴露于一个恒流的大气环境中，底部有培养基供给，并有恒定温度及CO2环境。2009年，Cultex公司提出了经典的辐射流气道设计（Radial Flow System -Cultex® RFS)，Cultex RFS被誉为细胞体外暴露方法中最成功的技术。 2014年，Cultex公司推出第三代细胞暴露染毒系统Cultex RFS Compact，细胞气液界面的直接暴露。在RFS技术基础上，compact增加了细胞培养暴露腔室数量，共计6个cell culture inserts，并分为两组，可对其中一组（三个cell culture inserts）进行雾霾颗粒物暴露，另一组进行清洁空气暴露的对比实验，或6个腔室全部进行受试物/洁净空气的暴露实验。 系统内6腔室径向分布，保证颗粒物均匀的分布到每个腔室。电加热系统为细胞体外培养提供最佳温度条件，专门的CO2接入单元保证细胞进行更长时间的体外暴露。系统集成到一个带有紧锁装置的支架中，保证系统的气密性。Cultex RFS Compact经过Cultex实验室对不同受试物质气溶胶的剂量反应（dose-response），及不同暴露时间对受试物质细胞毒性的剂量依赖（dose-dependent）进行实验验证，验证实验表明其具有高度的实验重复性及可靠性。 材料和方法 1、 Cultex RFS Compact 2、 6.5mm或12mm的细胞培养小室（cell culture inserts） 3、 Bronkhorst高精度MFC 4、 培养基灌注系统 5、 细胞株（ATCC：ccl-185）和分离的原代正常人支气管上皮细胞（NHBE） 图 1: 两种气路分布的CULTEX® RFS Compact 左
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