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PCR产物纯化磁珠试剂盒

发布时间:2023-02-01

产品简述:

货号 规格 数量 价格
Q-0084824 100mg
1
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Q-0084824 250mg
1
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Q-0084824 500mg
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Q-0084824 1g
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Q-0084824 5g
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魏经理销售经理

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产品介绍

本试剂盒采用具有独特分离作用的磁珠和缓冲液系统,从样品中分离纯化高质量基因组DNA。经过特殊包被的磁珠,在一定条件下对目的DNA具有很强的亲和力,而当条件改变时,磁珠释放吸附的DNA,能够达到快速分离纯化DNA的目的。整个过程不涉及有毒试剂,安全、便捷且提取的DNA纯度高。使用本试剂盒纯化的基因组DNA在A260/A280的紫外吸收均在1.7~2.0之间,可以应用到各类下游分子生物学实验。
适用范围
从PCR产物中提取基因组DNA,适用于核酸自动化提取平台。注意事项

1、 磁珠使用前一定要充分混匀。

2、如果下游实验对RNA 污染比较敏感,可在裂解时加1μl RNaseA(10mg/ml)。

3、如果是组织难以消化,适当延长裂解时间或将组织碾磨后裂解。

4、如果同等取样量下欲得到更多DNA 可以增加洗脱次数(洗脱次数**不要超过3 次),也可以适当延长裂解时间。

5、取材量参照下面表格


操作步骤

1、裂解

取PCR产物100uL加入480μl 裂解液S1、120μl 裂解液S2、20μl 蛋白酶 K(客户自备),研磨均匀,然后转移至1.5ml EP 管中,吹打或点阵混合均匀。然后把EP管置于恒温水箱中65℃温育15~30min。

2.结合

将EP管从温育设备中取出,12000rpm 离心10min。取500 μl 上清,加入振荡混匀的磁珠30μl、500μl 结合液,颠倒混匀2min,时文静置1min。将EP 管置于磁力架上进行磁分离,吸弃废液(注意吸净管盖及管底残液)。

3.洗涤

⑴ 加入600μl 70% 乙醇,吸打或点振5~10 次,然后磁分离,注意吸净管盖及管底的残液;

⑵ 重复步骤⑴一次,室温下开盖干燥10-20min或恒温箱(不高于55℃)内开盖干燥5min,注意防止污染。

4.洗脱

加入100μl 洗脱液,缓慢抽吸混匀,65℃温浴10min。每隔2~3min 轻摇EP管几下混匀。然后磁分离,小心吸取上清液至新的EP管中,即可进行下游实验。

 

常见问题及参考意见

得率低

(1)样品提取前可能已经降解,建议使用合理的保存条件;

(2)结合不充分;

结合过程中要使磁珠一直处于悬浮状态,并且充分颠倒混匀;

(3)取样量大于说明书给出量;

取样量请严格按照说明书操作。

条带弥散

(1)样品不新鲜或反复冻融多次:尽量用新鲜样品进行试验,如果样品需要保存,可根据试验,分装保存样品,尽量避免反复冻融;

(2)研磨时间太长,造成核酸降解:请研磨尽量迅速,防止DNA 降解;

(3)环境温度太高:可以将研钵置于-20℃预冷或置于液氮保存后再进行研磨,如果所提取材料基因组极易降解,可用液氮研磨;

(4)裂解时间太长:裂解时间不要超过60min;

(5)提取后模板DNA 放置时间太长:提取后如有需要,请尽量及时进行电泳试验。短期内可置于4℃保存,长期请置于-20℃保存(尽量注意避免反复冻融)。

DNA液有颜色

(1)洗涤过程不充分:如果结合后磁珠呈团状、丝状或颗粒状,要增加点震力度及次数,充分吹打混匀。

(2)裂解不充分:将组织充分研磨、适当增加裂解液S1和S2用量,也可以延长裂解时间。

(3)样品用量大于说明书给出量而其他试剂用量没有相应调整:严格按照说明书操作,如果需要增大样本量,可以等比例增大裂解液S1、S2、蛋白酶 K以及磁珠用量,其他试剂用量可不改变。

DNA样品不纯,干扰后续实验

(1)DNA液有乙醇残留:洗涤时,请注意吸净管盖及管底的残液。此外,磁珠应完全干燥,保证无乙醇残留。

(2)磁珠洗涤不充分:加入70% 乙醇时,请吸打或点振混匀。如有必要,可增加一次洗涤步骤。

(3)DNA液中吸入磁珠:如果不小心吸入磁珠,请将上清液返回原管,待磁珠完全吸附至管壁后重新吸取上清。或者将吸取的上清液10,000rpm离心2min,再取上清。

(4)DNA液中含有蛋白质等杂质:建议适当减少样品用量。

(5)DNA液中含有轻微盐离子等杂质,此为TE保存液正常现象,不影响下游实验。如有特殊需要,可使用等量的经高压灭菌的去离子水作为洗脱液。为方便实验,可将获得的DNA液置于-20℃环境分装保存。

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参数信息
外观状态: 固体或粉末
质量指标: 95%+
溶解条件: 有机溶剂/水
CAS号: N/A
分子量: N/A
储存条件: -20℃避光保存
储存时间: 1年
运输条件: 室温2周
生产厂家: 德尔塔(Delta)

【运输说明】:

极低温产品:极低温产品运输过程中加装干冰运输。

低温产品:低温产品运输过程中加装冰袋运输。

常温产品:常温产品运输过程中无需加冰或者特殊包装。

【温馨提示】:

德尔塔(Delta)供应的产品仅用于科研,不能用于人体治疗、药物开发、和其他商业用途,如有购买方或第三方采购我公司的产品用于治疗、药物开发或商业用途,购买方或第三方将承担所有法律责任,我公司也将追究其法律责任。以上产品均可定购。

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