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DAPI溶液配制与使用方法

DAPI溶液配制与使用方法

作者:德尔塔 日期:2022-02-18

DAPI溶液用ddH2O配制而成,浓度为5 mg/ml。推荐工作浓度为0.5-10μg/ml。 DAPI,也称DAPI dihydrochloride,是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,和双链DNA结合后可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光。和EB(ethidium bromide)相比,对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。因为DAPI是含有特定AT序列DNA的一种嵌入剂,它能像Hoechst染料一样粘附在DNA双螺旋的小沟区。 尽管DAPI不能通过活细胞膜,但却能穿透扰乱的细胞膜而对核染色。DAPI具有很高的光漂白承受水平,能用来检测酵母线粒体DNA,叶绿体DNA,病毒DNA,microplasm DNA以及染色体DNA。DAPI-DNA复合物的激发和发射波长分别为360nm和460nm。 DAPI染色常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。 DAPI溶液使用过程 1、用1mLddH2O将DAPI溶解,制得2.9mM的DAPI溶液(1mgDAPI/1mL H2O)。  注:DAPI不能直接用PBS等缓冲溶液溶解,需要先用水将其溶解。  2、取适量DAPI水溶液加到PBS中,制备成10~50µM的DAPI溶液。 推荐以下PBS的配制方法: 将8.00g NaCl、0.20g KCl、2.9g Na2HPO4·12H2O、0.2g KH2PO4溶解于1L纯水中。  3、将1/10培养基体积的DAPI溶液加入到细胞培养基中。也可以1/10浓度的DAPI缓冲液代替培养基。 4、在37℃培养细胞10~20分钟。 5、用PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。 6、用带有360nm激发波长,460nm发射波长的滤光片的荧光显微镜观察细胞。 注意事项 1、DAPI对人体有一定刺激性,请注意适当防护。 2、荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。 3、为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。 4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 上海吉至生化科技有限公司

培养基的配制

培养基的配制

作者:德尔塔 日期:2022-02-18

培养基、指供给微生物、植物或者动物(组织)生长繁殖的,由不同营养物质组合配制而成的营养基质。一般含有碳水化合物、氮物质、无机盐(包括微量元素)、维生素和水等几大类物质。培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质, 也是细胞生长和繁殖的生存环境。培养基种类很多、根据配制原料的来源可分为。 自然培养基、合成培养基、半合成培养基,根据物理状态可分为固体培养基、液体培养基、半固体培养基。根据培养基功能可分为基础培养基、选择培养基、加富培养基、鉴别培养基等。根据使用范围可分为细菌培养液、放线菌培养基、酵母菌培养基、真菌培养基等。培养基配置好后一般需要测试调节PH,还需要进行灭菌,通常使用高温和过滤灭菌。培养基由富含营养物质,容易被污染或变质,配好后不宜久放,**现配现用。 培养基配置操作步骤: 1、配料: 配方换算→在容器中加入少量水(蒸馏水,自然水)→按照配方称取各种药品(依次加入)→加足所需水量。 2、溶解: 淀粉溶解:少量冷水调成糊状。加热溶解,边加热边搅拌以防止烧焦。 3、调PH: 用1N的盐酸或1N的NaOH把培养基调节到所要求的值。 4、过滤: 滤纸或棉花进行过滤。 5、分装: 一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。 6、包扎: 分装好后,塞上棉塞,在用牛皮纸将棉塞包裹好,防止灭菌时水份进入把棉塞弄湿。 7、灭菌: 按配方上要求的温度、压力进行高压蒸汽灭菌。如果灭菌的温度太高,营养成分会被破坏。 8、贮存: 培养基在30℃下放置一天,无污染的即可使用。一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用。

台盼蓝染色液实验使用步骤

台盼蓝染色液实验使用步骤

作者:德尔塔 日期:2022-02-18

台盼蓝染液是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性。细胞损伤或死亡时,台盼蓝可穿透变性的细胞膜,与解体的DNA结合,使其着色。而活细胞能阻止染料进入细胞内。故可以检测细胞是否存活。 台盼蓝染色法的原理 正常的活细胞,胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;而丧失活性或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色。通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡,这与中性红作用相反。 因此,借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞。台盼蓝是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。  注意凋亡小体也有台盼蓝拒染现象。台盼蓝染色后,通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数,就可以对细胞存活率进行比较精确的定量。 实验步骤: 1. 用Hanks液配制0.1%台盼蓝溶液; 2. 用0.5%胰蛋白酶:0.2%EDTA=1:1混合液来消化培养的贴壁细胞; 3. 再加入适量Hanks液制成细胞悬液; 4. 将待染色细胞稀释至所需浓度(方法及浓度范围与细胞计数相同); 5. 每0.1ml细胞悬液约加新鲜配制的染液一小滴,室温下染3—5min; 6. 染色过的细胞材料,取一滴细胞悬液置玻片上,加盖玻片后放高倍镜下观察; 7. 死亡的细胞着浅蓝色并膨大,无光泽。活细胞不着色并保持正常形态,有光泽; 8. 计数1000个细胞中的活细胞和死细胞数目; 9. 统计未染色细胞。可按公式计算出细胞活率。 细胞活率(%)=未染色的细胞数/观察的细胞总数×100。 MTT染色原理,与台盼蓝染色原理有类似之处    活细胞中的某些物质(线粒体中的琥珀酸脱氢酶)能够和MTT反应,使MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(图1)并沉积在细胞中,而死细胞没有此功能。DMSO(二甲基亚砜)能够将此结晶(蓝紫色甲瓒)溶解,在酶联免疫检测仪490nm波长处测定其吸光值,能够间接的反应活细胞的数量。一定范围内,蓝紫色结晶沉淀的数量与细胞数成正比。目前MTT法因其灵敏度高,经济快速等优势被广泛的运用于细胞毒性试

碱性磷酸酶提取分离纯化

碱性磷酸酶提取分离纯化

作者:德尔塔 日期:2022-02-18

碱性磷酸酶、广泛存在于微生物界和动物界,碱性磷酸酶几乎能催化所有磷酸单酯的水解反应,产生无机磷酸和相应的醇、酚或糖。他也可以催化磷酸基团的转移反应。磷酸基团从磷酸酯转移到醇、酚或糖等磷酸受体上。    碱性磷酸酶(AKP或ALP)是一种底物特异性较低,在碱性条件下能水解多重磷酸单酯化合物的酶,需要镁和锰离子为激活剂,AKP具有磷酸基团转移活性能将底物中的磷酸基团转移到另一个含有氢基的接受体上,如磷酸基团的接受体是水,则其作用就是水解。•KP最适合PH范围为8.6-10,动物中AKP主要存在于小肠粘膜、肾、骨骼、肝脏和胎盘等组织的细胞膜上。血清AKP主要来自肝,小部分来自骨骼。    AKP可从组织中分离纯化,也可以采用基因工程表达的方式获得:将碱性磷酸酶基因克隆到重组载体,转入宿主菌中进行重组表达,从表达菌提取,并进行动力学分析。 分离纯化: 1、取1g新鲜的兔肝至于70℃冰箱内进行预先冷冻处理后取出,至于玻璃匀浆器内。加入0.01mo1/L醋酸镁、0.01mo1/L醋酸钠混合溶液3mL,充分研磨至糊状。 2、将匀浆液倒入刻度离心管中,使用4ml、0.01mo1/L醋酸镁、0.01mo1/L醋酸钠混合溶液冲洗研磨器具,将冲洗液一并转入离心管内,离心管一定要置于冰块保护下,以后各个步骤也要注意保持低温。 3、加1mL正丁醇与匀浆原液中,使用玻璃棒充分搅匀,放置冰浴中2min。使用滤纸过滤,过滤置于另一支刻度离心管中,过滤液也需要冰块保护。 4、滤液中加入等体积的冷丙酮,立即混匀后离心、2000r/min5min,弃去上清液,在沉淀中加入0.5mol/L醋酸镁2mL用玻璃棒充分搅拌使其溶解。 5、向沉淀中加入4.0mL0.5mol/L醋酸镁溶液,充分搅拌使其溶解。同时记录悬液体积向上清液中加入95%冷乙醇,使乙醇浓度到达60%,混匀后立刻离心5min(2500r/min),弃上清液。 向沉淀中加入4.0ml 0.01mol/L醋酸镁一0.01mol/L酸钠溶液,充分搅拌,使其溶解。向上余悬液中逐滴加入冷丙酮,使丙酮浓度33%,混匀后离心5min(2000r/min),弃去沉

MS培养基配置操作步骤

MS培养基配置操作步骤

作者:德尔塔 日期:2022-02-18

MS培养基是目前使用普遍的培养基、具有较高无机盐浓度,能够保证组织生长所需的矿质营养还能加速愈伤组织的生长。由于配方中的离子浓度高,在配制、贮存和消毒等过程中,即使有些成分略有出入,也不会影响离子间的平衡。 MS固体培养基可用于诱导愈伤组织,也可用于胚、茎段、茎尖及花药的培养,液体培养基用于细胞悬浮培养时能获得明显的成功。 MS培养基的无机养分的数量和比例比较合适,足以满足植物细胞在营养上和生理上的需要。因此,一般情况下,不用再添加氨基酸、酪蛋白水解物、酵母提取物及椰子汁等有机附加成分。和其它培养基的基本成分相比,MS培养基中的硝酸盐、钾和铵的含量高,这是它的显著特点。 培养基配置步骤: 1、融化琼脂用粗天平分别称取琼脂9g蒸糖30g,放入1000ml的搪瓷量杯中,再加入蒸馏水750mL用电炉加热边加热边用玻璃棒搅拌,直到液体呈半透明状。然后在将配好的混合培养液加入到煮沸的琼脂中,最后加蒸馏水定容至1000mL搅拌均匀, 2、在加热琼脂、制备培养基的过程中,操作者千万不能离开,否则沸腾的琼脂外溢,就需要重新称量、制备。此外、如果没有搪瓷量杯,可使用大烧杯代替。但要注意大烧杯底外表面不能沾水,否则加热时烧杯容易炸裂,使溶液外溢,造成烫伤。 3、PH用滴管吸取物质的量浓度为1mol/L的NaOH溶液,逐滴滴入融化的培养基中,边滴边搅拌,直到培养基PH为5.8。 4、培养基的分装、融化的培养基应趁热分装,分装时、现将培养基倒入烧杯中,然后将烧杯中的培养基倒入锥形(50mL或100mL)瓶中。注意不要让培养基沾到瓶口和瓶壁上,锥形瓶中培养基的量约为锥形瓶容量的1/5-1/4.每1000mL培养基可分装25-30瓶。

4-乙基苯酚制备

4-乙基苯酚制备

作者:德尔塔 日期:2022-02-18

制备方法: 一、钯系催化剂催化热解、生物质制备4-乙基苯酚的方法。 生物物质为原料,将生物质和钯系催化剂按照质量比为(10∶1)~(1∶3)进行机械混合,在无氧条件下于250~380℃进行快速热解,对热解气进行冷凝后即可得到富含4-乙基苯酚的液体产物。 称取一定质量的硝酸钯溶于去离子水中,完全溶解后,向溶液中加入一定量的催化剂载体,搅拌的条件下缓慢滴入氨水,直到pH值达到9~10,在室温下搅拌12h后过滤,滤饼于100℃下干燥,最后将干燥后得到的固体、保持一定还原温度的氢气气氛下还原,即得负载钯的固体催化剂。 二、活性炭催化热解甘蔗渣制备4-:乙基苯酚的方法。 甘蔗渣为原料,活性炭为催化剂,将甘蔗渣与活性炭催化剂按照质量比为(10:1)~(1:5)进行机械混合,然后在氢气氛围下于240~410℃下进行快速热解,热解反应的时间少于50s,对热解气进行冷凝后即可得到富含4-乙基苯酚的液体产物。活性炭催化剂为生物质通过水蒸气活化法制备获得的活性炭。 制备方法:生物质原料经破碎至粒径1mm之下,在惰性氛围下首先炭化并冷却;将炭化后的物 料在水蒸气氛围下活化;冷却后即得到活性炭。以生物质基水蒸气活化活性炭为催化剂,通过在氢气氛围下对甘蔗渣催化热解,制备富含4-乙基苯酚的液体产物。 采用其他活化方法获得的活性炭(例如ZnCl2、 H3PO4和KOH等化学法活化获得的活性炭、采用CO2等物理活化法获得的活性炭)并不具备该催化效果,仅仅只有采用水蒸气活化法获得的活性炭才具备该催化效果。仅仅依靠活性炭催化热解甘蔗渣,4-乙基苯酚的产率和选择性很有限。最大的有益效果还在于使用氢气作为反应气,依靠其和活性炭催化剂的协同作用,大幅提供4-乙基苯酚的产率和选择性。 氢气作为一种氢源,在活性炭的催化作用下能够作为有效的供氢体和4-乙烯基苯酚及其前驱体发生反应,选择性生成4-乙基苯酚。单独采用活性炭催化剂,由于热解体系中缺乏足够有效的供氢体,限制了4-乙基苯酚的生成;单独采用氢气,在热解体系中无法和4-

血蓝蛋白介绍及提取方法

血蓝蛋白介绍及提取方法

作者:德尔塔 日期:2022-02-18

~血蓝蛋白是在某些软体动物、节肢动物、血淋巴中发现的一种游离的蓝色呼吸色素。血蓝蛋白含两个直接连接多肽链的铜离子,与含铁的血红蛋白类似,它易于氧结合,也易与氧解离,是已知的惟一可与氧可逆结合的铜蛋白,氧化时呈青绿色,还原时呈白色。 分子量450 000~1300 000。节肢动物的血蓝蛋白一条多肽链与一分子氧结合,含铜量0.17%;软体动物的血蓝蛋白一条多肽链则与6分子氧结合,含铜量0.025%。铜以二价形式与蛋白直接结合。血蓝蛋白有多种催化作用,特别是变性后,在特定条件下具有多酚氧化酶、过氧化氢酶和脂氧化酶等活性。 无脊椎动物中,多数动物的血液不含血红蛋白,如软体动物(以及节肢动物所含的是血蓝蛋白(亦称为血蓝素)。 血蓝蛋白是节肢动物和软体动物血淋巴中的含铜呼吸蛋白,脱氧状态为无色,结合氧状态为蓝色。分子质量一般为50 ku~75 ku,由7个或8个功能单位组成圆柱形结构。组成血蓝蛋白的亚单位数目较多,每个亚单位都含有2个Cu(Ⅰ)离子。不同蛋白质所含亚单位数目不同,有些血蓝蛋白的分子质量可达9×103 ku。软体血蓝蛋白是圆柱状分子,含有10个~20个亚单位,每个亚单位(分子质量为350 ku~450 ku)有7个~8个功能单元(氧分子结合部位)。节肢动物血蓝蛋白由六聚体或多个六聚体组成,分子质量约为3.5×103 ku,每个亚单位(分子质量为7.5 ku)含有一个氧合中心。血蓝蛋白的主要生物学功能与机体内的输氧有关,它与血红蛋白和蚯蚓血红蛋白并称为动物界中的3种呼吸蛋白。但近年的研究表明,血蓝蛋白是一种多功能蛋白,它不仅具有输氧功能,而且还与能量的贮存、渗透压的维持及蜕皮过程的调节有关。特别引起学术界重视的是,血蓝蛋白还具有酚氧化物酶活性和抗菌功能,被认为是节肢动物和软体动物中的一种重要的免疫分子。 从河蚌中提取,纯化,以及冷冻干燥血蓝蛋白的工艺。 (1)河蚌样本在45℃(±5℃)温水中预处理,剥离甲壳; (2)注射器中加入抗凝剂,抽取心脏血; (3)血液透析后低温离心

丙烯腈制备安全

丙烯腈制备安全

作者:德尔塔 日期:2022-02-18

丙烯腈是一种无色的有刺激性气味液体,易燃,其蒸气与空气可形成爆炸性混合物。遇明火、高热易引起燃烧,并放出有毒气体。与氧化剂、强酸、强碱、胺类、溴反应剧烈。 丙烯腈制备法: 氰乙醇法:环氧乙烷和氢氰酸在水和三甲胺的存在下反应得氰乙醇,然后以碳酸镁为催化剂,于200-280℃脱水制得丙烯腈,收率约75%。此法生产的丙烯腈纯度较高,但氢氰酸毒性大,成本较高。 乙炔法:乙炔和氢氰酸在氯化亚铜-氯化钾-氯化钠稀盐酸溶液的催化作用下在80-90℃反应得丙烯腈此法生产过程简单,收率良好,以氢氰酸计可达97%。副反应多,产物精制较难,毒性也大,且原料乙炔价格高于丙烯,在技术和经济上落后于丙烯氨氧化法。 丙烯氨氧化法:以丙烯、氨、空气和水为原料,按其一定量配比进入沸腾床或固定床反应器,以硅胶作载体的磷钼铋系或锑铁系催化剂作用下,在400-500℃温度和常压下,生成丙烯腈。经中和塔用稀硫酸除去未反应的氨,再经吸收塔用水吸收丙烯腈等气体,形成水溶液,使该水溶液经萃取塔分离乙腈,在脱氢氰酸塔除去氢氰酸,经脱水、精馏而得丙烯腈产品,其收率可达75%,副产品有乙腈、氢氰酸和硫酸铵。是工业最有生产价值的生产方法。 丙烯腈对人体危害 丙烯腈在体内析出氰根,抑制呼吸酶;对呼吸中枢有直接麻醉作用。急性中毒表现与氢氰酸相似。 急性中毒:以中枢神经系统症状为主,伴有上呼吸道和眼部刺激症状。轻度中毒有头晕、头痛、乏力、上腹部不适、恶心、呕吐、胸闷、手足麻木、意识蒙胧及口唇紫绀等。眼结膜及鼻、咽部充血。重者除上述症状加重外,出现四肢阵发性强直抽搐、昏迷。液体污染皮肤,可致皮炎,局部出现红斑、丘疹或水疱。 慢性中毒:长期接触,部分工人出现神衰综合征,低血压等。 泄漏处理 丙烯腈泄漏、需迅速撤离泄漏污染区人员至安全区,并进行隔离,严格限制出入。切断火源。建议应急处理人员戴自给正压式呼吸器,穿防毒服。尽可能切断泄漏源。防止流入下水道、排洪沟等限制性空间。

叶黄素的提取

叶黄素的提取

作者:德尔塔 日期:2022-02-18

~叶黄素,别名类胡萝卜素、胡萝卜醇、植物黄体素、核黄体、万寿菊花素及植物叶黄素等,英文名为Lutein,分子式为C40H56O2,相对分子量为568.85。橙黄色粉末,浆状或液体,不溶于水,溶于己烷等有机溶剂。 叶黄素一般在绿叶的蔬菜中可以找得到。叶黄素本身是一种抗氧化物,并可以吸收蓝光等有害光线。 干燥法提取叶黄素 用干燥和捶击金盏花或者万寿菊花瓣,可以从中提取叶黄素。当捶击比率不同时,捶击效率就在70%~90%之间波动。叶黄素的多少决定于干燥时间长度。但在相同的干燥时间里,70℃下干燥提取的叶黄素含量比60℃下提取的叶黄素含量要少。 液相色谱分析法提取 二氯甲烷(22.5ml)+乙腈(9.5ml)+甲醇(67.5ml)+水(0.5ml)为流动相,流量为1.0ml/min。使用光度检测器(波长为450nm)检测分离后的类胡萝卜素和叶绿素。样品进样体积为20μl。在此条件下,叶黄素、叶绿素b、叶绿素a、番茄红素(lycopene)、α-胡萝卜素和β-胡萝卜素的保留时间分别为3.0、4.9、6.6、12.1、14.6和15.3min。取螺旋藻的培养液(通过测定光密度(560nm)得出培养液中螺旋藻干重于离心管中,离心后弃去溶液,加水洗涤后,加入2ml体积分数为90%丙酮水溶液,置于超声波发生器水浴上,使螺旋藻破碎。离心后取上层提取液用高效液相色谱法测定叶黄素/玉米黄质、β-胡萝卜素及叶绿素a的含量,其最高含量分别为:1.65μg/mg,2.15μg/mg和21.4μg/mg。 色谱分析法 该方法选用两种流动相A液和B液,采用线性梯度洗脱分离色素组分。用改良的高效色谱分析法分析叶黄素循环组分,具有快速、准确、分离度好以及重复稳定等优点。 玉米黄浆水中提取玉米黄色素 用己烷质量分数高达74%~80%的抽提溶剂油,根据液一固萃取原理,通过液固二相存在浓度差时的分子扩散作用,利用泵循环施以外力时的对流扩散作用,达到色素浸出的目的。再通过真空浓缩精制获得液态色素产品,或者添加辅料获得固态色素产品。 大豆中叶黄素的解析 在酸和碱性稻壳灰中大豆油色素(叶黄素)解析

细胞色素C提取过程

细胞色素C提取过程

作者:德尔塔 日期:2022-02-18

本品为生物氧化过程中的电子传递体。其作用原理为在酶存在的情况下,对组织的氧化、还原有迅速的促酶作用。通常外源性细胞色素C不能进入健康细胞,但在缺氧时,细胞膜的通透性增加,细胞色素C便有可能进入细胞及线粒体内,增强细胞氧化,能提高氧的利用。 三羧酸循环中产生的琥珀酸辅酶A,其肽链仅有104个氨基酸,体内大量存在,无需外源补充;且外源补充与体内含量相比甚微。细胞色素C是生物氧化的一个非常重要的电子传递体,在线粒体嵴上与其它氧化酶排列成呼吸链,参与细胞呼吸过程。 合成方法 1.将新鲜或冷冻猪心,洗净,去血块、脂肪和肌腱等,切条,用绞肉机绞碎。然后加入1.5倍的水,用1mol/L的硫酸调节pH值为4左右,常温下搅拌,浸提2h,压滤。滤液用1mol/L的氨水中和至pH=6.2,离心分离取清液。 2.残渣再用等量水重复提取一次,合并两次提取液。提取液用2mol/L氨水调pH值为7.5,静止沉淀杂蛋白,离心,吸取上层清液。然后按每升提取液加入10g沸石,在不断搅拌下充分吸附40min,静置,弃去上层清液。用蒸馏水洗涤吸附有细胞色素C的沸石3次,用0.2%的氯化钠洗涤4次,再用蒸馏水洗至洗涤液澄清。 3.过滤沸石,抽干,装入色谱柱中,并用25%的硫酸铵溶液洗脱,收集洗脱液。洗脱液中加入固体硫酸铵使浓度达45%,杂蛋白完全析出,过滤。滤液中缓慢加入三氯乙酸(20%)溶液,边加边搅拌,待细胞色素C沉淀完全析出后,离心收集沉淀。将沉淀溶于蒸馏水,用水透析至无硫酸根离子。 4.将透析后溶液通过已处理好的Amberlite IRC50(NH+4)树脂柱吸附,用水洗涤至澄清,再用磷酸氢二钠(0.6mol/L)和氯化钠(0.4mol/L)混合液洗脱,洗脱速要慢,一般流速为2ml/min。洗脱液再用蒸馏水透析至无氯离子为止,可得细胞色素C精品溶液。收率为100~150mg/kg,含量大于20mg/ml。

活性炭制备方法

活性炭制备方法

作者:德尔塔 日期:2022-02-18

活性炭作为一种固体吸附剂,在实际生活比较容易得到,应用广泛。 活性炭是用含碳为主的物质,如煤、木屑、果壳以及含碱的有机废渣等作为原料,经过高温碳化和火化制得到疏水性吸附剂。 制作大概过程: 1、干燥、原料在120-130℃脱水。 2、碳化、加热温度170℃以上时,原料中有机物开始分解,加热温度到400-600℃时谈话分解。 3、活化、原料中的有机物碳化后,残留在碳微孔中,时微孔堵塞。在高温条件下通入活化气,在缺氧情况下使残留碳发生水煤气反应,使微孔扩大,得到多孔结构的活性碳。 活性炭种类很多,由于使用原材料、制造方法、外观形状以及使用场合等不同所以分类也不同。 根据使用原材料和制作方法介绍几种常用制取分类。 使用材料不同可分为: 木质活性碳:木质活性炭是指由木材、农作物秸秆。竹子以及果壳等为原料。 兽骨血活性碳:利用兽骨、血为原料按照一定的方法制成炭,也是具有不差的吸附性。 以及其他活性炭等等。 制作方法不同可分为: 化学法活性炭、将含碳原料与某些化学品混合后进行热处理,制成活性炭的方法交化学法。 物理法活性炭、用水蒸汽、二氧化碳、空气或者它们的混合物为活介质,在高温600-1000℃下进行活化制取活性炭的方法叫物理法。 上海吉至生化科技有限公司是一家致力于生化试剂与生命科学领域产品的研发与销售的综合性试剂公司。 活性炭  CAS:7440-44-0    产品编号:A51684

钙黄绿素活体染色细胞

钙黄绿素活体染色细胞

作者:德尔塔 日期:2022-02-18

亮黄色粉末,溶于乙醇和碱,微溶于水;其钠盐为橙红色结晶,溶于水,呈黄色而有绿色荧光,不溶于无水乙醇和乙醚。熔点大于300℃ 钙黄绿素Calcein活细胞染色是指一个活的动物或植物的细胞或组织被染色。活体染色分为体内染色和体外染色。 体外活体染色是指活的动物或植物分离出来的一部分细胞或一部分组织被一种活体染色剂染色而不影响细胞或组织的生命。 体内活体染色与体外活体染色的主要区别在于体内活体染色是在有机体内部,因此不在空气中而是在还原的环境中进行的,至于体外活体染色是在空气中,在氧化的环境中进行的。 活体染色剂就是在一种生物的活细胞的某种构造的染料,但对于细胞、对于组织和对于生命本身不发生任何有害的作用。 1、活细胞的检测1:台酚蓝排除法取一滴细胞悬液,与一滴2%台酚蓝溶液混合,放盖玻片,静置3分钟,显微镜下观察染色状况。活细胞不着色,死细胞呈蓝色。 2、活细胞的检测2:中性红法在小离心管中,用Hanks液对1%中性红水溶液作10倍稀释,1500rpm离心7分钟,取上清液置另一干净的离心管中作为染色液。2)将细胞悬液与染液4:1混合,混匀后加盖玻片静置15-20分钟。 3、显微镜观察染色状况。死细胞不着色,活细胞可吸收中性红溶液而呈红色。

剥离硅烷的使用

剥离硅烷的使用

作者:德尔塔 日期:2022-02-18

制备聚丙烯酰胺凝胶时,常使用亲和硅烷处理长玻璃板,使凝胶与之粘贴。用剥离硅烷处理短玻璃板,使凝胶易于分离。 本品为剥离硅烷,组分主要为4%的二氯二甲基硅烷。 使用步骤 制备聚丙烯酰胺凝胶时,先将长、短玻璃板用1M的NaOH浸泡一段时间,并用洗涤剂清洗一遍,之后用水洗掉洗涤剂,再用去离子水冲洗干净。最后用乙醇擦拭玻璃板。  长玻璃板的处理 每次铺胶前均需用亲和硅烷对长玻璃板进行处理。 1.用镜头纸蘸取少许亲和硅烷溶液(1ml左右,视玻璃板大小而定)涂在长玻璃板上,自上而下涂一次,从左至右涂一次,将整块玻璃板涂满,涂匀。 2.5-10分钟后,用干净的镜头纸轻轻擦拭玻璃板以除去多余的亲和硅烷。 或用95%的乙醇清洗长玻璃板3次,以去除多余的亲和硅烷。2短玻璃板的处理 每次铺胶前均需用剥离硅烷对短玻璃板进行硅化处理。 1.处理短玻璃板前必需更换手套,以防手套上的亲和硅烷污染短玻璃板,使短玻璃板也粘胶。 2.用镜头纸蘸取适量剥离硅烷溶液(1.5ml左右,视玻璃板大小而定)涂在短玻璃板上,自上而下涂一次,从左至右涂一次,将整块玻璃板涂满,涂匀。 3.5-10分钟后,用干净的镜头纸轻轻擦拭玻璃板以除去多余的剥离硅烷。

过硫酸铵储存以及运输注意事项

过硫酸铵储存以及运输注意事项

作者:德尔塔 日期:2022-02-18

硫酸铵作为氧化剂和漂白剂,广泛用于蓄电池工业;还用作聚合的引发剂、纤维工业的脱浆剂, 并可用作金属及半导体材料表面处理剂、印刷线路的刻蚀剂, 还被用于石油开采的油层压裂, 面粉和淀粉加工业、油脂工业, 在照相行业用来除去海波。 过硫酸铵属于非易燃品,但是能释放氧而有助燃作用,必须在一定环境下储存。 首先存放在干燥、密闭的容器中,其次避免阳光直射、热源、潮湿等不利因素。 其次,避免和一些杂物脏物、铁锈、金属以及还原剂存放在一起以免引起过硫酸铵的分解,存放和使用过程中也必须注意。 由于潮湿的过硫酸铵粉末及水溶液,有漂白和轻微的腐蚀作用,因此使用过程中应避免眼睛、皮肤和衣物直接与其接触。 操作注意事项:密闭操作,局部排风。操作人员必须经过专门培训,严格遵守操作规程。建议操作人员佩戴头罩型电动送风过滤式防尘呼吸器,穿聚乙烯防毒服,戴橡胶手套。远离火种、热源,工作场所严禁吸烟。避免产生粉尘。 避免与还原剂、活性金属粉末接触。搬运时要轻装轻卸,防止包装及容器损坏。禁止震动、撞击和摩擦。配备相应品种和数量的消防器材及泄漏应急处理设备。倒空的容器可能残留有害物。 储存注意事项:储存于阴凉、干燥、通风良好的库房。远离火种、热源。包装必须密封,防止受潮。应与还原剂、活性金属粉末等分开存放,切忌混储。储区应备有合适的材料收容泄漏物。 包装要求:塑料袋或二层牛皮纸袋外全开口或中开口钢桶;塑料袋或二层牛皮纸袋外普通木箱;螺纹口玻璃瓶、铁盖压口玻璃瓶、塑料瓶或金属桶(罐)外普通木箱。 运输注意事项:铁路运输时应严格按照铁道部《危险货物运输规则》中的危险货物配装表进行配装。运输时单独装运,运输过程中要确保容器不泄漏、不倒塌、不坠落、不损坏。运输时运输车辆应配备相应品种和数量的消防器材。严禁与酸类、易燃物、有机物、还原剂、自燃物品、遇湿易燃物品等并车混运。运输时车速不宜过快,不得强行超车。运输车辆装卸前后,均应彻底清

营养琼脂培养基的配置

营养琼脂培养基的配置

作者:德尔塔 日期:2022-02-18

营养琼脂培养基其实就是一种选择性较低的营养成分的固体培养基,主要用于细菌菌落计数,也可以用于细菌的传代和増菌,但是一般不用于细菌鉴定(除非该细菌菌落有比较特殊的形态)只适合营养要求不高的细菌生长。 营养琼脂 成分: 牛肉膏 3g 氯化钠 5g 蛋白胨 10g 琼脂   15-20g 蒸馏水  1000ml 制备步骤 : 检查所用物品级别和洁净程度合格. 戴上手套. 开启天平,放上一张称量纸,调零. 称取蛋白胨 g,置一玻璃容器中. 称取牛肉浸出粉 g,置同一玻璃容器中. 称取氯化钠 g,置同一玻璃容器中. 称取琼脂 g 关闭天平. 取1000ml蒸馏水倒入上述烧杯内,用玻璃棒搅拌. 放入水浴锅内微温溶解调节pH为弱碱性. 加入琼脂,调节pH值使灭菌后为7.2±0.2. 分装,121℃高压灭菌15min.