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ATCC细胞株解冻和培养操作推荐
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
冻存的ATCC细胞株和杂交腐细胞株在运送过程中使用干冰保持低温。收到细胞后，可以立即解冻复苏，去除二甲基亚砜（DSMO0）后进行细胞培养。如果不立即复苏培养细胞，必须将细胞冻存管放置于液氮罐气相层储存。请不要将细胞存储在-130℃以上的温度。如果温度不够低，达不到-130℃，细胞活力会立即下降。ATCC细胞株产品附带一份产品资料单，其中包含细胞株的信息和详细的操作指南。细胞株的所有详细介绍可以在ATCC找到 ，产品资料单也可以在ATCC下载。此外产品还附带细胞株具体生产批次的检测报告，其中包含批次的特定信息，如每只冻存管中细胞的数量，无微生物污染的检测结果等。操作推荐ATCC推荐在操作冻存的ATCC细胞株时使用手套，工作服和防护面具以避免任何事故发生。检查包装，查看是否有任何事破绽或渗漏。东侧的ATCC细胞株应处于固体状。将冻存的ATCC细胞株从有干冰的包装中取出，理解复苏培养，或迅速转移放置在液氧罐气相层在——130°C以下的度存储。1、 先准备好细胞培养皿或细胞株培养瓶，及产品说明推荐的相应细胞培养基。并在37°c水浴中预先温热细胞培养基2、小心取出装有细胞的冻存管，保持管盖拧紧，将冻存管盖一下的部分置于37°C水浴中并轻微的搅拌以帮助解冻。解冻过程应该尽快，大约短于2分钟或待zui后一块小冰晶体刚融化，就应该将细胞冻存管取出水浴。3、在从水浴中取出的细胞冻存管表面喷洒70%乙醇配制的消毒剂，用于菌纸巾或纱布试干。之后的操作步骤都应该遵循在无菌条件下生物安全柜中严格操作。4、小心拧干冻存管的顶部，将管内容物用1MI移枪转移到9毫升培养基的无菌离心管中。离心5到7分钟（125*g）.小心吸去上清液以去除抗冻剂（二甲基亚砜），避免丢失细胞沉淀。将细胞沉淀重悬于配好的完全培养基中。将细胞悬液转移到培养容器，轻轻摇晃使细胞均匀的分布。生长较慢的细胞株可重悬于5——8mI培养基并转移到T125培养瓶。生长较快的细胞株可重悬于12——20mI培养基并转移到T75培养瓶。5、将细胞培养容器
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ELISA试剂盒样本处理方法汇总表及计算解析
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
样本处理方法汇总表 一、液体样本 液体样本处理原则：所有的液体样本，用无菌管收集，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），如果以后碰到其他的液体样本，也按这个方法，纳入汇总表。 1、血清：用无菌管收集，室温血液自然凝固10-20分钟，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。 2、血浆：应根据标本的要求选择EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。 3、尿液：用无菌管收集，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。 4、胸腹水：用无菌管收集，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。 5、脑脊液：用无菌管收集，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。 6、唾液：用无菌管收集，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。 7、细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。 8、牛奶：用无菌管收集，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。 9、蜂蜜：用无菌管收集，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。 10、全血：用含有抗凝剂的无菌管收集，立即轻轻摇动，来回轻轻颠倒数次，使血液和抗凝剂混匀，以防血液凝固。 二、固体样本 固体样本处理原则：称取1g的固体样本，用9g的合适缓冲液溶解，分泌蛋白可以直接离心取上清检测，细胞内的蛋白，要先
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萍乡*除垢剂厂家
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
萍乡*除垢剂厂家 总：颜 廊坊市蓝星化工有限公司生产销售、供应、 锅炉防垢剂，锅炉清灰剂，锅炉除渣剂，锅炉阻垢剂，锅炉除垢剂，锅炉保养剂，锅炉除氧剂，锅炉清洗剂，循环水药剂，缓蚀阻垢剂，杀菌灭藻剂，粘泥剥离剂，阻垢缓蚀剂，锅炉臭味剂，锅炉助燃剂，循环水除垢剂，循环水阻垢剂，冷凝器除垢剂，冷凝器清洗剂，*空调清洗剂，钢厂设备清洗剂，电厂锅炉除焦剂，阳离子交换树脂，阴离子交换树脂，絮凝剂，液体除垢剂，固体除垢剂，*除垢剂，不锈钢除垢剂，反渗透阻垢剂，阻垢分散剂，钝化预膜剂，锅炉软化水阻垢剂，变色臭味剂，大蒜味锅炉臭味剂，锅炉软水剂，管道缓蚀剂，管道除垢剂，管道清洗剂，冷却水阻垢剂，水质稳定剂，工业循环冷却水阻垢剂，循环冷却水除垢剂，循环水杀菌灭藻剂，循环水杀菌剂，固体氯杀菌灭藻剂，非氧化杀菌灭藻剂，钢铁厂缓蚀阻垢剂，电厂缓蚀阻垢剂，反渗透膜阻垢剂，锅炉缓蚀阻垢剂，液态锅炉除焦剂，空调清洗剂，空调除垢剂，阳离子交换树脂，阴离子交换树脂。 *除垢剂用量应根据水垢多少确定。一般每公斤水垢需要1公斤除垢剂清除。也可按公式计算：用药量（公斤）=1.5结垢厚度（毫米）×热交换面积（米2），配制的清洗液浓度一般不超过10%。也可采取多次投药的方法，随时观察反应情况，pH值1-1.5时水垢除尽为止。除垢的方法可采用浸泡或强制循环法。除垢剂的温度应控制在40℃-60℃左右为宜，温度低反应速度慢，清洗时间长；温度提高，反应速度加快，清洗时间缩短，但温度过高，超过60℃，会使除垢剂中有效成分分解，失去除垢能力，因此以控制在60℃左右。清洗时间一般8小时即可，水垢较厚的锅炉，可适当延长至24小时，浸泡完毕，升温煮沸，1-2小时即可排放掉。为了防止锅炉锈蚀，应加1%的磷酸三钠水溶液中和纯化锅炉排放掉钝化液，再用清水冲洗。锅炉可投入运行，或进行保养以备使用。除垢剂用量应根据水垢多少确定。一般每公斤水垢需要1公斤除垢剂清除。也可按公式计算：用
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为你讲解原装ELISA试剂盒应用范围
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
ELISA试剂盒单倍体胚胎干细胞同时具有单倍体细胞和胚胎干细胞的特性，由于其只含有一套染色体，不存在等位基因在基因功能上的补偿作用，因此是研究隐性基因功能的理想模型。同时，其胚胎干细胞的特性又可以将基因修饰直接遗传给后代，从而避免了其他转基因方法种系嵌合等方面的要求，可以极大提高基因修饰的效率及应用范围。 ELISA试剂盒利用基因定点修饰技术CRISPR-Cas系统，可快速地在单倍体干细胞上进行定位的基因修饰或敲除，并且处理后的细胞仍能维持单倍体和多能性状态。尤为重要的是，该工作证明了大鼠单倍体胚胎干细胞同样具有替代精子与卵母细胞“受精”并产生健康大鼠的能力。 ELISA试剂盒通过种系嵌合和替代精子进行卵胞质注射两种途径，该团队都成功获得了健康的携带基因修饰的大鼠，从而证明大鼠孤雄单倍体胚胎干细胞可以将基因修饰快速地遗传给后代，为研究基因功能提供了便利。 ELISA试剂盒具有发育功能的单倍体胚胎干细胞系，而且利用CRISPR-Cas技术完成对大鼠单倍体胚胎干细胞的多基因敲除，为建立用于大规模基因筛选的纯合的基因突变细胞库打下基础。鉴于大鼠在生理上比小鼠更类似于人类，这一工作将对人类疾病模型研发和开展基因功能研究起到重要的推动作用。
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研域ELISA试剂盒告诉你姜黄素的用途
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
研域ELISA试剂盒告诉你，姜黄素可以防止关节肿大、关节炎，对心血管疾病、癌症等又有效，是从姜科植物姜黄中提取的一种色素，也存在其它姜科植物中。现代研究发现姜黄素可以抑制炎症反应、抗氧化、抗类风湿的作用。姜黄素的主要药理作用有抗氧化、抗炎、抗凝、降脂、抗动脉粥样硬化、抗衰老消除自由基及抑制肿瘤生长等。 姜黄素具体作用：1、降血脂、抗氧化、抗发炎、抗动脉粥样硬化等。2、2004年时发现姜黄素能抑制HIV-1整合酶活性。3、抗癌是姜黄素的主要药理活性之一，其抑制肿瘤的作用已在许多动物实验中得到反复证实，其具体抗癌机制已成为研究热点。4、2006年，新加坡国立大学研究人员发现，咖喱中的姜黄素含抗氧化作用，可抑制类淀粉斑块在脑部形成，从而减低患老年痴呆症的机会。这或可解释为何印度人患老年痴呆症的比率较西方低。5、2012年8月，美国乔治梅森大学研究人员发现，姜黄素是一种广谱的阻止一系列病毒感染健康细胞的抑制剂。姜黄素采用MTT法测定姜黄素在不同浓度、不同时间对QGY的抑制作用,流式细胞仪分析细胞周期分布,透射电镜观察细胞的超微结构变化.结果姜黄素可抑制QGY细胞的生长,其抑瘤率与药物浓度和作用时间呈依赖关系,72 h的中效浓度(IC50)为49.50μmol/L,流式细胞仪分析证实姜黄素能使QGY细胞聚积在S期,电镜观察发现姜黄素可导致细胞变性、坏死,诱导细胞凋亡.上海研域生物ELISA试剂盒是专业从事生化试剂生产与销售的厂家，备有各种生化试剂产品，被各大高校和科研所所青睐，欢迎大家！
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硫酸铁铵的原理
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
中文名称：硫酸铁铵英文名称：ammonium ferric sulfate性状：纯品是无色的，但一般的是淡紫色八面晶体。用途：用作分析试剂和媒染剂，也用作制造药物等的原料。原理： 硫酸铁铵指示剂法应在稀硝酸溶液中进行，因铁离子在中性或碱性介质中能形成氢氧化铁沉淀。为防止沉淀转化（AgCl＋SCN-→←AgSCN＋Cl-），硫酸铁铵指示剂法加硝酸银滴定液沉淀后，应加入5ml邻苯二甲酸二丁酯或1～3ml硝基苯，并强力振摇后再加入指示液，用硫氰酸铵滴定液滴定。滴定应在室温进行，温度高，红色络合物易褪色。滴定时需用力振摇，避免沉淀吸附银离子，过早到达终点。但滴定接近终点时，要轻轻振摇，减少氯化银与SCN-接触，以免沉淀转化。
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ELISA试剂盒利益表现
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
ELISA试剂盒利益首要表现：特异性高：进行了广泛的非特异性排查，避免了由于交叉反应和烦扰致使的试验数据误差。 精 度 高：通过加标回收率和线性稀释试验，保证样本值的准确性，度高于同类商品。重复性好：lot-to-lot查看保证zui小的批间差异。 可靠性强：经优化的试剂盒组分可有用的阻遏假阳性和假阴性试验成果。 标准曲线：在保证数据的前提下供应较宽的查看规划，以满足需求。 报价低价：*RD试剂，国内分装配备，大大减少了客户由于报价高而有必要收购国产试剂盒的忌惮。
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细胞冻存你知道多少?
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
细胞冻存是细胞保存的主要方法之一。利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存，可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来，这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。而且适度地保存一定量的细胞，可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种，起到了细胞保种的作用。因此及时进行细胞冻存十分必要。细胞冷冻储存在-70℃冰箱中可以保存一年之久；细胞储存在液氮中，温度达-196℃，理论上储存时间是无限的。原理 细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融，实验证明这样可以zui大限度的保存细胞活力。目前细胞冻存多采用甘油或二甲基亚砜作保护剂，这两种物质能提高细胞膜对水的通透性，加上缓慢冷冻可使细胞内的水分渗出细胞外，减少细胞内冰晶的形成，从而减少由于冰晶形成造成的细胞损伤。复苏细胞应采用快速融化的方法，这样可以保证细胞外结晶在很短的时间内即融化，避免由于缓慢融化使水分渗入细胞内形成胞内再结晶对细胞造成损伤。注意事项 1．从增殖期到形成致密的单层细胞以前的培养细胞都可以用于冻存，但为对数生长期细胞。在冻存前一天换一次培养液； 2．将冻存管放入液氮容器或从中取出时，要做好防护工作，以免冻伤； 3．冻存和复苏用新配制的培养液。
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细胞株培养时消毒灭菌的方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
细胞株严格的消毒灭菌对保证细胞培养的成功是极为重要的，其方法分为物理法和化学法两类。前者包括干热、湿热、滤过、紫外线及射线等，后者主要指使用化学消毒剂等。①热灭菌：玻璃器皿，160~170℃，90~120min或180℃45~60min。②蒸气灭菌：用于玻璃器皿、滤器橡胶塞、解剖用具、耐热塑料器具、受热不变性的溶液等，不同物品其有效灭菌压力和时间不同，如培养用液、橡胶制品、塑料器皿等用68kPa(115℃)高压灭菌10min;布类、玻璃制品、金属器械等用103kPa(121.3℃)高压灭菌15~20min。③滤过除菌：适于含有不耐热成分的培养基和试剂的除菌，用孔径为0.22μm微孔滤膜可除去细菌和霉菌等，用此滤膜过滤两次，细胞株可使支原体达到某种程度的去除，但不能除去病毒。④紫外线：紫外线的波长为200~300nm，zui强是在254 nm，6~15平方米zui少一只紫外灯，高度要在2.5m以下，湿度45%~60%，杆菌效果好，球菌次之，霉菌、酵母菌zui差，实验前应不低于30分钟的照射时间。⑤熏蒸消毒：当遇有细胞培养出现多次污染，或实验室两个月一次的常规消毒，均可用高锰酸钾5~7.5g，加甲醛(40%)10~15ml，混合放入一开放容器内，立即可见白色甲醛烟雾，消毒房间需封闭24小时，致少4小时以上。⑥煮沸消毒：紧密情况时使用，金属器械和胶蹇在水中煮20~30分钟，趁热倾去水分即可使用。⑦化学消毒：化学药品消毒灭菌法是应用能杀死微生物的化学制进行消毒灭菌的方法。实验室桌面、用具及洗手用的溶液均常用化学药品进行消毒杀菌。细胞株常用的有：2%煤酚皂溶液(来苏尔)、0.25%新洁尔灭、3~5%甲醛溶液、75%酒精。
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转化细胞实验室*仪器简单介绍
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
一、CO2培养箱 CO2培养箱是转化细胞培养的*仪器，它为细胞提供了一个体外培养的舒适环境，如适宜的温度、湿度、酸碱度、O2浓度等。细胞在体外培养时很容易受到各种细菌、微生物的感染，因此，CO2培养箱的灭菌和抑菌能力就显得尤为重要。 二、纯水系统 细胞培养用水一般要求双蒸水(0.8MΩ以上)，实际上普通蒸馏水经玻璃器皿中按标准方法蒸馏二次得到的双蒸水是不能满足要求的，而且水中的内毒素直接参与细胞凋亡，血清中内毒素含量越低，对细胞毒性越小，越利于细胞的生长和传代;内毒素含量过高，会直接导致细胞提前老化。因此建议配置正式的水纯化系统。 三、超净工作台/生物安全柜 细胞培养对无菌环境要求很高，在细胞操作时，一般需要在100级空气质量条件下进行，因此超净工作台或生物安全柜就必须配备。 四、液氮罐 为了保存细胞，特别是不易获得的突变型细胞或细胞株，要将细胞冻存。冻存的温度一般为液氮温度-196℃，因此，需要液氮罐。在此环境中，一般细胞可以保存十年具有活性。 五、超低温冰箱 转化细胞的冻存过程需要一系列程序降温，一般4℃下存放30 min，转放-20℃ 1 hour，再转入-70至-80℃过夜，之后才可以转移到液氮内(-196℃)，这时就必须配备一台-86℃超低温冰箱。一般超低温冰箱保存细胞可达数月，对于不需要长期冻存的细胞，可暂时放于超低温冰箱保存。 六、恒温水浴 从液氮或超低温冰箱中取出细胞冻存管需要立即放于37℃水浴中快速复苏之后才传代培养，因此，恒温水浴也是细胞实验室*仪器。 七、离心机 细胞培养需要离心收集传代细胞，所以需要配置低速的常温离心机，对于后期细胞内容物的分离则需要高速冷冻离心机。 八、移液器和细胞培养的大量耗材 细胞实验中有大量频繁的移液操作，因此各种微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是*的。各类细胞培养板、细胞培养瓶、移液管等耗材更是不可或缺的，而且一次性，用量极大。 除上述仪器外，高压灭菌锅、倒置显微镜也是细胞培养的*仪器，发酵
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SPF巴马小型猪的培育及应用
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
小型猪在体型、大小、生理学及疾病发展等方面与人有较大的相似性，是理想的实验动物模型，在探索人的生命活动规律以及研究人类疾病的致病机制**、预防、药物筛选等方面均显示出独特的优势。美国在50年代初开始了小型猪的培育开发研究，我国对小型猪的研究开始于20世纪80年代初，虽然起步较晚，但是我国小型猪原始资源十分丰富，目前我国的小型猪品种主要有：五指山小型猪贵州小型香猪，藏猪版纳微型猪，广西巴马小型猪等；其中，广西巴马小型猪则具有国内其他品种小型猪的绝大部分优点。我国目前缺少病原微生物学和寄生虫学质量控制、遗传学背景清晰的SPF猪种群，缺少质量控制标准。巴马小型猪在分类学上与普通家猪相同，属于哺乳纲，偶蹄目，野猪科，猪属动物。小型猪由于它体型矮小、性成熟早、遗传性稳定、繁殖性能强、性情温驯、部分生理生化指标与人类相似等这些特有的生物学特性，易于实验操作，适合实验动物模型的建立。作为实验动物，巴马小型猪在人用猪源生物活性材料生产以及胚胎移植等研究中起着重要作用，实验用巴马小型猪有望取代猴、犬等成为被大量使用的新型实验动物。微生物学质量控制是实验动物标准化的重要内容之一，由于微生物感染实验动物可不同程度地干扰试验结果，污染试验材料，影响实验动物生产，甚至威胁人类健康。巴马小型猪的微生物学质量在一定程度上限制了其推广应用，培育SPF巴马小型猪基础群及核心群已迫在眉睫。因此，本项目开展了SPF 巴马小型猪的培育及应用研究，解决实验用猪瓶颈问题，提升我国动物疫病防控能力，实现种质资源共享利用。
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细胞传代密度及时间的确定
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
细胞传代密度及时间的确定1）细胞在扩增传代时，传代时的密度以及传代后的密度是通过什么方法确定的？是选取不同的密度传代对比生长曲线与活率曲线，还是在复苏后直接看其生长曲线？确定的标准是什么，我现在的想法是传代密度（复苏后直接看其生长曲线）到细胞缺糖与乳酸浓度较高时，接种后密度的确定为其进入对数期时的起点密度。（2）接种密度的确定，我们现在做的接种密度与传代密度是一致的。是不是正常接种密度与传代密度都一样？我们做了几个密度的Batch,对比了一下产量与质量，确实还是存在差异。传代与接种密度的确定主要是为了保证培养工艺的简单可重复，一般低密度如果不影响生长，工艺更简便，为了保证可操作性一般密度都规定一个范围。批次实验中不同接种密度对表达影响应该很小，但密度高必然培养时间段。质量这块的话，如果密度影响都这么大，那么将来工艺中加入其它条件，恐怕还会有影响，还是好好研究下产品本身，如果不稳定，将来会很难做。
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大肠杆菌培养基的制作流程
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
大肠杆菌培养基的制作流程： 1、加热,将琼脂融化 2、如果是要做试管,就加分装3ml培养基到试管,塞上试管塞,如果是做平板,就将培养基倒入锥形瓶中 3、按照培养基规定的灭菌方式灭菌 4、如果是斜面,则将灭菌后的试管放成一个梯度,是培养基形成一个斜面,如果是平板,就趁培养基凝固前将其倒入平板中,每个大约25ml,平板放置5min左右凝固后即可。 Baird-Parker琼脂平板（9cm） 10个/包 用于金黄色葡萄球菌的选择性分离培养 大肠杆菌培养基 Baird-Parker Agar Base 孟加拉红培养基平板（9cm） 10个/包 用于食品中霉菌及酵母菌总数测定 Rose Bengal Medium 牛津琼脂（OXA）平板（9cm） 10个/包 用于单增李氏菌的选择性分离 Oxford Agar Base PALCAM琼脂平板（9cm） 10个/包 用于单增李氏菌选择性分离 PALCAM Agar MRS琼脂平板（9cm） 10个/包 用于食品中乳酸菌总数测定 MRS Agar TCBS琼脂平板（9cm） 10个/包 用于致病性弧菌的选择性分离 Thiosulfate Citrate Bile Salts Sucrose Agar 玫瑰红钠琼脂平板（9cm） 10个/包 用于霉菌、酵母菌计数 Rose Bengal Medium 庆大霉素琼脂平板（9cm） 10个/包 用于霍乱弧菌的分离培养 Gentamycin Agar BCYE琼脂平板（9cm） 10个/包 用于军团菌的选择性分离培养 BCYE Agar Base GVPC琼脂平板（9cm） 10个/包 用于军团菌的选择性分离培养 GVPC Agar Base 大肠杆菌培养基
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大肠菌群实验的检测步骤
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
微生物菌种实验原理 所谓大肠菌群，是指在37℃培养24h 内能发酵乳糖产酸、产气的兼性厌氧的革蓝氏阴性无芽孢杆菌的总称。主要由肠杆菌科中四个属内的细菌组成，即埃希氏杆菌属、柠檬酸杆菌属、克雷伯氏菌属和肠杆菌属。 水的大肠菌群数是指100 mL水检样内含有的大肠菌群实际数值，以大肠菌群zui近似数(MPN)表示。在正常情况下，肠道中主要有大肠菌群、粪链球菌和厌氧芽孢杆菌等多种细菌。这些细菌都可以随人畜排泄物进入水源，由于大肠菌群在肠道内数量多，所以，水源中大肠菌群的数量，是直接反映水源被人畜排泄物污染的一项重要指标。目前，上已公认大肠菌群是粪便污染的指标。因而对饮用水必须进行大肠菌群的检查。 水中大肠菌群的检测方法，常用多管发酵法和滤膜法。多管发酵法可适用于各种水样的检验，但操作繁琐，需要的时间较长。滤膜法仅适用于自来水和深井水，操作简单、快速，但不适用于杂质较多、易于堵塞滤孔的水样。 材料与器皿 (—)培养基 1、普通乳糖蛋白胨培养液 蛋白胨 10g，乳糖5g，氯化钠 5g，1.6%溴甲酚紫乙醇液 1.0mL，蒸馏水 1000mL，pH 7.2~7.4。 将蛋白胨、乳糖、氯化钠加热溶解于1000mL蒸馏水中，调节pH为7.2~7.4，再加入1.6%溴甲酚紫乙醇液1.0mL，充分混匀，分装于有杜汉氏小管的试管中，每管10mL，115℃灭菌20min。 2、三倍浓缩乳糖蛋白胨培养液 按上述普通乳糖蛋白胨培养液浓缩三倍配制，分装于有杜汉氏小管的试管中，每管5mL。 1、 品红亚硫酸钠培养基(供平板分离用) 蛋白胨 10g， 乳糖 10g，K2HPO4 3.5g，琼脂 15～20g，蒸馏水1000mL，无水亚硫酸钠 5g，5%的碱性品红乙醇溶液 20mL，pH 7.2~7.4。 4、伊红美蓝培养基(EMB培养基)(供发酵法平板分离用，3和4可任选一种) 蛋白胨10g，乳糖10g，K2HPO4 2.0g，琼脂20g，蒸馏水1000mL，2%伊红(曙红)水溶液 20mL，5%美蓝(亚甲蓝)水溶液13mL，pH 7.2~7.4。 (二)灭菌移液管、灭菌稀释水、试管、杜汉氏小管、革兰氏染色液、灭菌培养皿。
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elisa酶联免疫试剂盒说明书实验中出现的意外状况解决方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
elisa酶联免疫试剂盒说明书运用校对过的微量移液器，打扫天然差错。移液器准确与否对定量查看尤为主要。仔细阅读说明书严厉按照说明书恳求进行规范化操作。不一样批号的试剂不可混用。值得改进的本地，重复实验断定树立后才华改进。洗刷彻底洗板不彻底，酶联络物本底显色会出现假阳性。洗刷液要新鲜，现用现配，陈腐的洗刷液会出现本底增高现象，也或许出现假阳性。严控反响时间反响时间过长，酶失活；反响时间过短，酶联络物不能与血清中的微生物抗原抗体充分联络，生成物结构懈怠不健壮，简单洗掉，都或许构成假阴性。过保存期的elisa酶联免疫试剂盒说明书不能运用留意ELISA试剂盒保存期，过保存期的试剂不能运用。评估试剂的实用性试剂的稳定与否，对准确率的高低到头主要。在试剂启用前，应进行阴、阳对照及样品重复比照实验。显色时间过短，参与中止液反响中止后，底物联络物的量过少，易出现假阴性。逾越显色恳求时间后显色，应判为假阳性，这或许与试剂本身有关。elisa酶联免疫试剂盒说明书加显色剂后当即显色，不可报阳性，这或许是本底显色的效果。
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