德尔塔
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小动物学习记忆行为检测技术--避暗法

小动物学习记忆行为检测技术--避暗法

作者:德尔塔 日期:2022-04-27

一、实验目的  1、学习小白鼠学习记忆行为检测方法  2、学习小鼠避暗自动测试仪的使用方法。  3. 了解影响学习记忆功能的一些因素。  二、实验原理  啮齿类动物系夜行性动物,喜欢黑暗的地方,而回避光亮之地。它将设法逃向暗处,此时在暗处给予其电刺激,小鼠会被迫逃回明亮处,并获得记忆。根据此原理设计的实验为一次性被动回避反应实验。  被动回避反应(Passive Avoidance Response)为二十世纪60年代后期发展起来的、普遍用于检测小动物学习记忆能力的一种动物模型。反应特征:动物必须学会躲避可怕的事件,而抑制其天然本性。被动回避反应有:避暗法(又称步入法step-through test)、跳台法(又称步下法step-down test)等。  三、实验器材  小白鼠常用手术器械、亚硝酸钠、东莨菪碱(scopolamine,Scop.)、生理盐水、35 %酒精。  四、实验步骤  1. 实验仪器小动物学习记忆行为检测技术--避暗法  小鼠避暗自动测试仪由控制器和活动箱两部分组成,可同时对6只小鼠进行实验。明暗实验箱之间有一小门供动物进出,当动物进入暗室被电击时,它可自动记录小鼠第一次从明室进入暗室的潜伏期和受到电击的次数,还可通过按键灵活地选择刺激电压和设置实验时间。  2. 实验程序:  2.1适应:将动物头朝室壁放入明室,两室之间的门洞敞开,让动物在两室内自由活动2-3分钟,取出后放回饲养笼。  2.2训练:第二天, 将动物放入明室, 它很快钻入暗室, 连接两室的门洞关闭,同时启动电刺激器, 动物足部受电击。如果动物在第一次训练时超过100秒不进暗室, 淘汰之或用手把它轻轻赶进暗室。  记录指标:  (1)记录动物自明室进入暗室的潜伏期,可作为判断给药后动物行为是否有变的一个指标。若药物致使动物镇静,则潜伏期显著长于对照组。  (2)记录动物受到电击后的反应,如剧烈嘶叫并跳跃,评为A级反应;微弱尖叫,评为B级反应;不叫,评为C级反应。受到电击后动物一般均跳跃。C级反应常伴动物跳跃,动物虽不尖叫,但正常动物均能

神经干细胞移植对缺氧缺血新生大鼠感觉运动机能的影响

神经干细胞移植对缺氧缺血新生大鼠感觉运动机能的影响

作者:德尔塔 日期:2022-04-27

【摘要】 目的 研究神经干细胞 (NSCs)移植对改善新生大鼠缺氧缺血性脑损伤 (H I BD)后感觉运动障碍的作用。  方法 7d龄新生SD大鼠,随机分为假手术组, HIBD组和脑内移植组 ,后两组 H I BD损伤后3 d分别在左侧感觉运动皮质区植入BrdU标记的 NSCs或培养基作为对照 ,观察植入 4周后大鼠感觉运动功能的变化和移植细胞在脑内的存活和分化情况。结果 与 H I BD组比较 ,移植组在 T迷宫和四项感觉运动功能测试中,表现出明显的改善。在T迷宫中,自发改变率(69.23±13.34) % vs (45.00±27.27)%] (P右侧,差异有显著性意义(P< 0.05)。21T迷宫强迫改变:随天数的增加,Sham组与NSCs组的正确率日渐增加,而HIBD组的正确率上升不明显 ,说明学习能力较差。NSCs组的正确率较HIBD组有明显增高 ,差异有显著性意义 ( P < 0 . 05)。3 .感觉运动功能测试: NSCs组的握持牵引时间较HIBD组延长( P

限制热能摄入对大鼠行为和认知的影响

限制热能摄入对大鼠行为和认知的影响

作者:德尔塔 日期:2022-04-27

摘要: 目的  研究限制热能摄入(限食)对生长期大鼠行为和认知的影响。  方法  断乳SD大鼠(雌雄各半)随机分为3组:自由摄食组,限食20 %组(20 % CR) ,限食 35 %组(35 % CR)。实验3个月和 6 个月 ,采用旷场试验和Y2迷宫法检测大鼠的行为和认知能力。6个月后,处死大鼠 ,荧光分光光度法测定脑干、端脑的多巴胺(DA)、52羟色胺(52HT)、去甲肾上腺素(NE)含量 ,测定皮层、海马、小脑一氧化氮合酶(NOS)活性。  结果  限食组雌、雄性大鼠体重明显低于对照组。雄鼠限食3个月,20%CR组移动格子数显著少于对照组和35%CR组;限食6个月,35%CR组移动格子数显著高于对照组和20%CR组。限食对雌鼠旷场试验未见明显影响。限食6个月对大鼠学习记忆成绩无明显影响。限食6个月,脑DA、 52HT、NE含量及NOS活性3组间未见显著性差异。  结论   限食对生长期大鼠探索活动影响具有性别差异性 ,限食延缓雄鼠短时活动量的减少 ,对雌鼠未见影响。限食6个月对大鼠学习记忆成绩无显著影响。  关键词:限食,认知,行为,大鼠  大量研究表明限食可延长多种动物的寿命[1 ],延缓或减少退行性疾病包括癌症、糖尿病和神经障碍等的发生[2 ,3 ]。限食还可以减缓啮齿类动物学习记忆和运动功能的衰退 ,改善具有神经变性疾病实验动物模型的行为[4 ,5 ]。但这些研究大多集中于老年动物 ,关注限食的有益作用 ,从而忽视了限食对生长发育期动物的不利影响 ,尤其是对其行为和认知功能的影响。因此 ,本研究以断乳 SD大鼠为实验对象 ,观察限食 3个月和6个月对雌、雄大鼠认知和行为的影响。  1  材料与方法  1.1 实验动物  清洁级断乳SD大鼠 ,雌雄各半,上海西普尔2必凯实验动物有限公司提供。适应 3 天 ,随机分成 3 组:自由摄食组(control) ;限食20 %组(20 % CR) ,能量摄入是对照组的 80 %;限食35 %组(35 % CR) ,能量摄入为对照组的 65 %。每组雄鼠15只、雌鼠16只。用人工配制饲料(表 1)单笼喂养 ,自由摄水。每天上午8 :00开始喂饲料 ,并称量自由摄食组实际摄入饲料量

冰片对长时连续作业大鼠觉醒能力及认知功能的影响

冰片对长时连续作业大鼠觉醒能力及认知功能的影响

作者:德尔塔 日期:2022-04-27

摘要 目的: 探讨冰片对长时连续作业大鼠觉醒能力和认知功能损害的干预作用。方法: 首先采取跑台作业方法建立大鼠长时连续作业模型, 将模型大鼠分为跑台冰片组和跑台对照组, 另设未跑台对照组。随后观察冰片对长时连续作业大鼠活动- 静止行为、 觉醒时间以及穿梭箱主动回避反应的影响。 结果: 3 组纳入测试的大鼠各为 6 只。 结果显示给予 0.4 g /kg 冰片(经胃灌饲)可增加大鼠长时连续作业后的自主活动量(每分钟活动次数未跑台对照组为 54.1± 5.4, 跑台对照组为 15.5± 8.3, 跑台冰片组为 26.8± 7.8, 3 组之间两两比较, P 均

和血益智方对VD大鼠学习记忆和海马的影响

和血益智方对VD大鼠学习记忆和海马的影响

作者:德尔塔 日期:2022-04-27

目的 观察和血益智方对VD大鼠行为学和形态学的影响。  方法 动物随机分为假手术组和模型组。VD模型制作成功后随机分为和血益智方小剂量组和大剂量组、思尔明组、生理盐水(NS)组。用穿梭箱和水迷宫检测大鼠行为学并作海马 常规染色,光镜观察。 和血益智方、思尔明均能缩短VD大鼠穿梭箱实验主动逃避时间和遭受电击时间,减少遭受电击次数;能缩短VD大鼠水迷宫实验时定位航行潜伏期、游泳的路径,增加大鼠空间探索实验中穿越原目标的次数。NS组海马细胞体积变大、核变小、有核仁消失和核固缩;除假手术组正常外,其余各组海马细胞层次有减少,但细胞排列比较密集、细胞形态尚可。  结论 和血益智方可改善VD大鼠的学习记忆能力。  〔关键词〕血管性痴呆;MORRIS水迷宫;学习记忆;海马  血管性痴呆(vascular dementia,VD)是老年人多发痴呆之一,系继发于脑血管病变后的缓慢性、渐进性智能障碍。它不仅给患者带来躯体上的痛苦,也带来精神上的巨大负担。中医学院名老中医教授用和血益智方**VD有较好的临床疗效。本实验从行为学和形态学方面研究了和血益智方抗大鼠VD的作用,现报道如下。  1材料和方法  1.1动物及分组  经穿梭箱实验筛选的健康正常SD大鼠,体重220~250 g 10,雄性,随机分为假手术组(10只)和模型组。将造模成功的VD大鼠40只随机分为HXYZ组1(和血益智方小剂量)、HXYZ组2(和血益智方大剂量)、思尔明(Sermion)组、生理盐水(NS)组,每组各10只。各组大鼠均常规饲养。  1.2试剂及器材  Sermion、染发剂  和血益智方含当归、川芎、白芍、生地、黄芪、旱莲草、女贞子、益智仁等。所有药材一次性水煎浓缩为水煎液,用无菌玻璃瓶分装、密封,经Co60照射后 4℃ 保存。给药前在40℃ 恒温水温箱中加热备用。  Morris水迷宫、穿梭箱实验系统、电热恒温水温箱。切片机、显微镜、显微摄像系统。  1.3 方法  1.3.1 模型制作及给药  VD模型制作及术后处理按参考文献[1]进行,夹闭大鼠双侧的颈总动脉5

成瘾药物心理依赖及复发的脑机制研究

成瘾药物心理依赖及复发的脑机制研究

作者:德尔塔 日期:2022-04-27

摘 要 围绕学习、记忆、情绪及应激等心理因素与复发的关系,应用阿片类物质心理依赖研究条件性位置偏爱,条件性位置厌恶,Morris 水迷宫量化觅药动机模型,行为及条件性行为敏感化等多种动物行为模型,从情绪相关学习、记忆在成瘾行为中的作用,不同神经核团与神经递质系统活动性的改变,应激相关因素易化的成瘾易感性,自然奖赏与成瘾药物奖赏相关记忆的比较研究等方面,对应激与记忆相关的药物心理依赖及复发的脑机制进行了系列研究。  关键词 学习记忆,应激,心理依赖,成瘾易感性,觅药动机,自然奖赏。  随着对成瘾行为生物基础认识的逐渐深入,药物成瘾相关的渴求和复吸行为等心理依赖问题,受到了越来越多的重视。在成瘾药物作用下,神经系统发生长时程适应性改变,这种长时程的神经适应性改变,成为以强迫性觅药和复吸为核心特征的依赖行为的物质基础。特别是异常学习记忆的快速形成、长久保持和高度唤醒,与成瘾行为的发生与发展有着重要关系。这种联系体现在行为、细胞分子及基因表达与调控等不同方面。本课题围绕学习、记忆、情绪及应激等心理因素与复发的关系,建立了阿片类物质心理依赖的多种动物行为模型。在此基础上,从情绪相关学习、记忆在成瘾行为中的作用,不同神经核团与神经递质系统活动性的改变,应激相关因素易化的成瘾易感性,自然奖赏与成瘾药物奖赏相关记忆的比较研究等方面,对应激与记忆相关的药物心理依赖及复发的脑机制进行了系列研究。研究内容主要包括如下几个方面: 1)空间及正负性情绪相关学习记忆与成瘾行为获得、保持及受环境调控的复发动机的关系;2)习惯化学习与习惯形成与阿片类物质心理依赖的关系;3)环境应激对成瘾行为获得、保持的影响及其中枢机制;4)成瘾易感性的行为遗传学基础及其与后天环境因素的交互作用;5)学习记忆活动与药物心理依赖关系大鼠及小鸡模型的比较研究;6)人类成瘾患者情绪异常激活的功能影像学研究等。探索环境记忆或应激事件与心瘾产生,激活

大鼠实验跑台概述

大鼠实验跑台概述

作者:德尔塔 日期:2022-04-27

一、实验概述 众实实验跑台主要用于大白鼠、兔等小动物做跑台运动训练,可取代传统的游泳训练,使训练量化更加明确,是研究体能、耐力、运动损伤、营养、药物、运动生理和病理及兴奋剂检测等实验的必要手段。段氏实验跑台已荣获国家科技进步奖、奥林匹克萨马兰奇奖等论文达数十篇。  从1986年开发生产,经国家体科所鉴定,已用于北京体育大学、国家体科所、国家兴奋剂检测中心、北京航天医学工程研究所、解放军全军训练伤防治中心、内蒙古体科所、北京中医药大学、上海中医药大学、上海体育学院、香港中文大学、香港理工大学、陕西师范大学等大专院校、医院及科研单位,受到专家和用户的一致好评,为解放军全军军事训练医学研究指定产品,各项技术指标已达到和超过国外同类产品。  二、实验仪器跑台结构由机架、行走皮带、电机、电气控制、有机玻璃罩、光控发声、发光、电刺激等部分组成。  三、技术参数  大白鼠跑台技术参数:  1、共五条跑道,每条长550毫米,宽85毫米,高120毫米。  2、跑道速度无级可调,范围在0-70米/分。  3、计长、速度采用数码管显示,计长最大9999米,速度最大0-70米/分。  4、电刺激开关控制,刺激电流0-2ma可调,(电压230v)  5、红外线控制发光、发声。  6、使用电压220V单相,频率50Hz,总功率200W。  7、尺寸:长850毫米,宽560毫米,高350毫米,重约35公斤。  兔子跑台参数:  1、共两条跑道,每条长1200毫米,宽220毫米,高230毫米。  2、跑道速度无级可调,范围在0-80米/分。  3、计长、速度采用数码管显示,计长最大9999米,速度最大0-80米/分。  4、红外线控制发光、发声。  5、使用电压220V单相,频率50Hz,总功率300W。  6、尺寸:长1500毫米,宽560毫米,高400毫米,重约40公斤。  四、实验方法及应用在运动训练的过程中,密切观察大鼠的运动表现和运动能力的变化,避免运动性过度疲劳的发生。在实验的过程中,每天给大鼠加料、换水、打扫清洁,每周称体重和称量大鼠的饮食量

分析低温恒温槽6种常见故障

分析低温恒温槽6种常见故障

作者:德尔塔 日期:2022-04-27

作为国内最专业制造低温恒温设备生产厂家。公司拥有多名专业技术人才及先进生产设备,国内用户数量已超过千家,被清华大学,中科院,浙江大学,江南大学,华南理工大学, 武汉大学,华中科技大学,东南大学,湖南大学,四川大学,通用电气,光明乳业,喜之郎,香港科技大学等国内知名高校企业采用。 低温恒温槽整机符合欧盟标准,是自带制冷和加热的高精度恒温源,可在机内水槽进行恒温实验,或通过软管与其他设备相连,作为恒温源配套使用。泛用于石油、化工、电子仪表、物理、化学、生物工程、医药卫生、生命科学、轻工食品、物性测试及化学分析等研究部门,高等院校,企业质检及生产部门,为用户工作时提供一个热冷受控,温度均匀恒定的场源,对试验样品或生产的产品进行恒定温度试验或测试,也可直接加热或制冷和辅助加热或制冷的热源或冷源。完善的售后服务,有力的保证了客户的权益。 总结低温恒温槽常见故障有以下6点: 故障1、低温恒温槽运转中高压过高: 原因分析:运转中高压过高通常是由于a冷却水流量过少或水温过高,只要加大冷却水流量或降低水温就好了;b冷凝器铜管/翅片积垢多,换热效果差,这时需要清洗低温恒温槽的换热器c冷媒过多,冷媒过多时需要往外排放部分冷媒d膨胀阀开启度过小,只需要适当调整膨胀阀开启度; 故障2、低温恒温槽启动不了或启动后立即停机: 原因分析:该故障通常是由于a电源断电或电压过低,只要排除电路故障按低温恒温槽要求供电即可;b温控器调设不当,使触头常开,只需重新调整温控设定值;c冷却水未开,联锁电路断开,这时只需要打开冷却时系统,接通连锁电路即可d保护器件作用后未复位,按一次停机按钮后再开机 故障3、低温恒温槽运转时低压过低: 原因分析:出现低压过低是主要是由以下几个原因引起,a.冷媒不足只需要补漏,补充冷媒或调整膨胀阀,b.过滤器堵塞这时需要清洗或更换过滤器c.膨胀阀开启度过小,适当调整膨胀阀开启度 d.低温恒温槽毛细管堵塞只要清洗或更

惠合啤酒锥形罐发酵异常情况的解决措施

惠合啤酒锥形罐发酵异常情况的解决措施

作者:德尔塔 日期:2022-04-27

圆柱锥形发酵罐是目前世界通用的发酵罐,该发酵罐设备主体呈圆柱形,罐顶为圆弧状,底部为圆锥形,具有相当的高度(高度大于直径),罐体设有冷却和保温装置,为全封闭发酵罐。锥形罐发酵几种异常现象及处理方法为: 发酵液“翻腾”现象 产生的原因:主要是由于冷却夹套开启不当,造成上部温度与工艺曲线偏差大,罐中部温度更高,引起发酵液强烈对流。另外,压力不稳,急剧升降也会造成发酵液翻腾。 解决办法:检查仪表是否正常;严格控制冷却温度,避免上部酒液温度过高;保持罐内压力稳定。 不锈钢发酵罐结冰 当罐的下部温度与工艺曲线偏差2℃左右,会使贮酒期罐内温度达到啤酒的冰点(-2.3℃—-1.8℃),可能导致冷却带附近结冰。 结冰的原因:仪表失灵、温度参数选择不当、热电阻安装位置深度不合适、仪表精度差、操作不当等。 解决办法:检查测温元件及仪表误差,特别要检查铂电阻是否泄漏,若泄漏应烘烤后石蜡密封或更换;选择恰当的测温点位置和热电阻插入深度;加强工艺管理,及时排放酵母;冷媒液温度应控制在-4℃—- 2.5 ℃,不能采用-8℃以下的冷媒液。 酵母自溶 原因:当不锈钢容器下部温度与中、下部温度差1.5℃—5℃以上时,会造成酵母沉降困难和酵母自溶现象。罐底酵母泥温度过高(16℃—18℃)、维持时间过长,也会造成酵母自溶,产生酵母味,有时会出现啤酒杀菌后混浊。 解决办法:检查仪表是否正常;及时排放酵母泥;冷媒温度保持为-4℃,贮酒期上、中、下温度保持在-1℃—1℃之间。 饮用啤酒后“上头”现象 原因:一般啤酒中高级醇含量超过120mg/L,异丁醇超过10mg/L,异戊醇含量超过50mg/L,会造成饮后“上头”现象。 解决办法:选用高级醇产生量低的酵母菌种;适当提高酵母添加量,减少酵母的增殖量,酵母细胞数以15×106个/ml为宜;控制为12°P麦汁α-氨基氮含量在180mg/L±200mg/L左右;控制麦汁中溶解氧含量在8mg/L—10mg/L;控制好发酵温度和罐压。 双乙酰还原困难 发酵结束后双乙酰含量一直偏高达不到要求

morris水迷宫实验准则(1)

morris水迷宫实验准则(1)

作者:德尔塔 日期:2022-04-27

实验准则(1) 实验原理(水迷宫的发展史,以及简单的实验原理和应用领域,以及在我国的发展情况和国内外的主要厂家) Morris水迷宫的组成(主要分为硬件和图像采集,软件) 硬件准则(国内外文献提及到的硬件准则,我们主要针对国内文献提及到的) 实验流程准则(实验细节) 统计方法学准则(遵循统计学原理) 评价指标的准则(实验数据的解释) 实验适用范围准则(实验适用四个领域,与水迷宫的10个优点)  一、实验原理 20世纪80年代初,英国的心理学家Morris和他的同事利用大鼠在盛有水和牛奶混合物的不透明水池中搜索目标物的方法,研究大鼠的海马等脑区受到损害后的学习、记忆和空间定向以及认知能力时取得了令人瞩目的结果。这种装置不但构思新颖、实验设计合理以及方法简便和实用,而且便于观察和记录动物入水后搜索藏在水下平台所需的时间、采用的策略和它们的游泳轨迹,从而可分析和推断动物的学习、记忆和空间认知等方面的能力。虽然起初的实验对象为大鼠,但此后该迷宫系统成为评估啮齿类动物空间学习和记忆能力的经典程序,广泛运用于神经生物学、药理学等领域的基础和应用研究中。它能较客观地衡量动物空间记忆、工作记忆以及空间辨别能力的改变。因此,这种研究方法很快就引起各国神经科学家的关注,并将此法称为Morris水迷宫法。并于90年代初建立了Morris水迷宫图像自动采集和处国外有许多生产Morris水迷宫的公司,比如说德国的TSE公司,美国的Sandiegoinstruments公司等等;20世纪80年代末,中理系统。国内随后出现了许多生产厂家,比如说有北京众实迪创科技等,但是从国际到国内,Morris水迷宫的硬件设备,软件系统,实验方法,以及实验数据的处理方法都不尽相同,因此,从Morris水迷宫法的发明到现在已有20余年的历史了,应该制定一套比较标准的实验准则了。 二、Morris水迷宫的组成 Morris实验系统由水迷宫装置、水迷宫图像自动采集和软件分析系统组成。 1、Morris水迷宫装置:主要由盛水的水池和一个

morris水迷宫实验准则(2)

morris水迷宫实验准则(2)

作者:德尔塔 日期:2022-04-27

Morris水迷宫硬件准则要求 1、水池和站台:对于水池的大小,存在一个人为选择的问题,看起来应该统一标准,其实并不容易。但是有个原则就是水池不能太小,站台也不能太大。Morris最初(1981年)用于大鼠的水池是直径1.32米、高为0.6米,水池的水深为0.40米;但后来(1984年)改为直径2.14米、高0.4米,水池的水深为0.25米。对于小鼠的实验水池,文献中介绍的迷宫直径差异巨大,小到0.6米, 大到2.0米。一般而言,过小的水池使小鼠爬上平台的偶然性增加,任务难度减小。过大的水池会使小鼠游泳路径延长,体力消耗过大,爬上站台的机率减少。现在国内文献中所用水迷宫水池大多数为大鼠1.6m或1.8m居多,而小鼠一般为1m或1.2m,高0.5m。站台一般为圆形,直径可分为大鼠12cm,小鼠6cm,表面粗糙,高度一般为30cm。国外文献中所用水迷宫水池大多数为大鼠1.8m或2.0m居多,高0.6m,站台直径10cm;而小鼠一般为1m到1.5m,高0.3m站台直径5cm。 2、水温:水的温度要求实验过程中恒温。大鼠温度范围一般为25± 1℃,小鼠可能低些在18~22℃。有文献报道,对小鼠进行了水温对迷宫成绩影响的观察,结果发现27~28℃组的小鼠成绩最差,而17~18℃组和21~22℃组小鼠的学习成绩没有区别,所以,我们推荐小鼠水迷宫的实验用21~22℃水。水温对潜伏期影响很大,特别是大鼠,如果温度过高,大鼠在游几次后渐渐适应了迷宫环境,它就会把迷宫当“浴盆”了,放进去以后,就漂浮不动;如果水温过低,大鼠体温下降很快,体力也会耗散太多,大鼠游泳能力不能坚持很久,就会出现游几次潜伏期突然增大的现象。甚至有些老鼠会出现较明显的应激反应,比如说会出现抽筋,腹泻现象。水温一般保持25度左右,另外气温也会导致水温偏差过大,应人为的调节水温。所以就要求在水池的底部装有可以恒定保持水温的加热棒或者其他加热装置了。 3、光源:要保证水池水面上没有光影,主要是要避免光线在水面的反射问题,以免留在水面的光照影子被软件的采集系统将光影和鼠的影子混淆

morris水迷宫实验准则(3)

morris水迷宫实验准则(3)

作者:德尔塔 日期:2022-04-27

实验流程准则 Morris水迷宫实验主要测定空间学习记忆能力,主要的实验内容有隐蔽站台试验、空间探索试验、反向试验和可视站台试验等。在这里主要介绍下文献里面主要做的隐蔽站台试验和空间探索试验的流程准则。 隐蔽站台试验: 啮齿类动物第一次游泳时,一般不会找到藏于水面下的不可见的站台。若动物在入水游泳60~90s以内仍未能找到水池中的站台或未能爬上站台时,实验人员可将动物引导置于站台上站立10~30s,使动物体会站在站台上的感觉,这样从第二次开始,学习成绩就能迅速提高。动物爬上站台后,让动物在站台上站立5~10s。将大鼠从站台上拿下来,休息30~60s以后再进行下一次训练。在一般情况下,正常大鼠在经过4~6个实验日训练后,很快就学会以最快最佳的轨迹搜索到站台的确切位置。 每天开始时,将鼠任意从四个象限(东北、西北、东南、西南)之一面向池壁放入水中,站台放置于东南象限, 每次实验鼠共游泳60~90s来寻找隐藏的站台。如果成功地找到站台,鼠可以得到在站台上的10~30s休息时间;如果60~90s内未能成功的找到站台,就由实验人员将鼠人工置于站台上,且同样给予10~30s的休息时间。有时鼠可能会在10~30s间隔时间到达之前从站台上掉下或跳入水中继续游泳。一旦这种情况发生,则将鼠重新放回站台,并重新计时,使时间间隔到达(10~30s)。这样可以确保每只鼠在每次实验后有相等的时间来观察和获取空间信息。 空间探索试验:                        隐蔽站台试验结束24h后,撤除站台。然后任选一相同入水点将鼠放入水中,记录鼠在60s或120s内的游泳路径,记录鼠在原站台象限的停留时间和穿越原站台次数,观察受试鼠的空间定位能力,及在空间探索过程中的变化规律。在电脑屏幕上用圆形环标记出站台原所在位置,这样可以记录穿越原站台所在位置的次数。 morris水迷宫实验准则(3): 1、实验时间:隐蔽站台试验一般设计天数为4天或者6天,如果是年老体弱鼠可以将天数设计为4天。训练时间一般为60s或90s,也有

Morris水迷宫实验准则(4)

Morris水迷宫实验准则(4)

作者:德尔塔 日期:2022-04-27

-----统计方法学准则 潜伏期时间为计量资料,可用方差分析,但需按方差分析的程序先进行方差齐性检验,方差齐,计算F值,用多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计;对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换,待满足正态或方差齐要求后,用转换后的数据进行统计;若变量转换后仍未达到正态或方差齐的目的,改用秩和检验进行统计。计数资料,比如说穿越站台的次数,可用X2检验,四格表总例数小于40,或总例数等于或大于40但出现理论数等于或小于1时,应改用确切概率法。 的实验数据较为复杂,其统计分析难度也较大,尤其是对大鼠在寻找隐蔽站台试验中所测得的逃避潜伏期如何进行统计学分析既往存在的问题较多。在过去的研究中,国内文献中有的直接计算每天的平均逃避潜伏期后再进行t检验或方差分析,或根据大鼠的逃避潜伏期在定位航行试验后3d趋于稳定的情况,仅对后3d的平均逃避潜伏期进行t检验或方差分析。有的研究则就1~5d的逃避潜伏期进行单因素方差分析。我们认为以上统计方法均不正确。一个较明显的错误是,以趋于平稳的后3d的平均逃避潜伏期代表记忆水平,首先遇到的问题是仅在生理状态下的大鼠才表现如此,而实验记忆损伤组大鼠往往后3d的逃避潜伏期仍然持续下降。正常青年组和初老年组大鼠的逃避潜伏期在后3d趋于平稳,但实验损伤组大鼠的逃避潜伏期由于学习记忆损伤后其基线较高,第3~5天逃避潜伏期仍然呈下降的趋势,并不象正常对照组一样趋于稳定。不仅如此,还存在上述统计方法对隐蔽站台试验中测得的逃避潜伏期数据统计学特征的认识错误。隐蔽站台试验中的逃避潜伏期具有以下特点:①系重复测量设计,Morris水迷宫实验准则(4)即在给予某种处理后,在不同的时间点上从同一受试对象上重复测量获得的数据(逃避潜伏期);②影响逃避潜伏期(自变量)统计分析结果的至少有动物组别、检测时点等多个效应因子,效应因子之间存在交互影响效应;③同一受试动物的不同时间点所测得的逃避潜伏期存在高度

morris水迷宫实验准则(5)

morris水迷宫实验准则(5)

作者:德尔塔 日期:2022-04-27

-----实验适用范围准则 与其他方法相比,在判定啮齿类动物认知功能中具有很多优点: (1)它不需要实验前训练阶段,而且可以在短时间内完成相对大量的动物。 (2)由于对年龄相关性空间记忆损害有可靠的敏感性,Morris水迷宫是判断老年鼠空间学习记忆能力的特别有用的工具。通过探测和转移位置实验的训练,学习和回忆过程可以被记录分析,也可以在各组之间比较。 (3)虽然对于鼠类来说浸入水中是令其厌恶的,驱动动物逃避的是水刺激,而不需要食物剥夺和电击,因此,避免了剥夺食物给实验动物带来的新陈代谢和电击休克方面的问题,而这方面问题对某些品系的动物来说可能是危险的。 (4)气味或痕迹等干扰可以被去除。 (5)将实验动物的学习记忆障碍和感觉、运动缺陷等分离开来,减少它们对学习记忆过程检测的干扰。可见站台实验,可以识别可能影响实验结果的动物视觉缺陷,修正标准Morris水迷宫实验中得到的结果。 (6)通过改变站台的位置,可以完成学习和再学习实验,相应的,在同组动物中也可以测量不同用药量的效果。 (7)既可以检测空间参考记忆又可以检测空间工作记忆。在用固定平台测试小鼠的空间参考记忆后再将平台的位置改为不固定,就可检测它们的工作记忆能力 (8)通过使用窗帘、划分区域等,可以减少实验人员和实验以外的物体对视频跟踪系统记录的干扰。 (9)能提供较多的实验参数,系统全面地考察实验动物空间认知加工的过程,客观地反映其认知水平,显然,寻找不固定平台的认知过程要复杂一些,需要动物对时间和空间上的分离信息加以整合和判断。 (10)操作简便,数据误差较小。 1、Morris水迷宫实验在神经退行性疾病如阿尔茨海默症(AD)和帕金森症(PD)以及血管性痴呆(VD)等的研究方面是非常有效的:这些疾病的最大特征是认知功能的减退。经典的Morris水迷宫所检测的是大鼠在多次的训练中,学会寻找固定位置的隐蔽平台,形成稳定的空间位置认知,这种空间认知是加工空间信息(外部线索)形成的

神经功能行为、放射学及病理结果的变化

神经功能行为、放射学及病理结果的变化

作者:德尔塔 日期:2022-04-27

一种慢性颈段脊髓压迫的大鼠模型的建立:神经功能行为、放射学及病理结果的变化  摘要:  颈髓病是由于脊柱退行变造成的脊髓的慢性部分受压所致。不管怎么样,慢性颈髓受压的确切机制还没有完全清楚。本研究的目的旨在建立一种有效的新的没有锥板切除的慢性脊髓压迫动物模型,来复制临床过程。系在一块塑料板上的聚乙烯线,用来绑在一个月大的大鼠的C4椎体上,缠绕三圈。术后,随着椎管和椎体的生长,聚乙烯线逐渐长入椎管背侧的骨头里,而产生脊髓渐进性的压缩。结果表明:在形成颈椎管狭窄9个月后,颈椎管狭窄模型的大鼠出现运动障碍和感觉障碍;然而,直到6个月才出现临床症状。12个月后,70%的颈椎管狭窄模型大鼠出现了脊髓内高信号。在病理切片,在形成颈椎管狭窄12个月后脊髓整个周围压缩。运动神经元数目减少,白质显示华勒氏变性。本模型也许能够复制临床慢性颈髓压迫的特征性临床特点,包括在潜伏期和隐形神经云减少后出现,进行性运动和感觉功能,以及代表了人类慢性颈髓压迫。  关键字:动物研究;行为评估;核磁共振;神经元死亡;脊髓损伤。  引言:  一般认为,慢性压迫脊髓病的病因与颈椎的病理特点相关,例如椎关节硬化,韧带骨化,椎管狭窄,以及椎间盘突出,或许由机械性压迫和血管病变两种因素引起所致。慢性压迫性脊髓病隐匿性地和进展性地损伤运动和感觉动能。很多病人数年没有临床症状,尽管这个时期内存在脊髓压迫和缺陷,一旦本疾病出现临床症状,神功功能障碍进行性加重,很少有逆转。随机选择的有症状队列的颈部核磁共振检查的一项研究表明大于64岁的受试者26%出现脊髓损伤,45-64岁受试者16%出现脊髓损伤。临床上,即使那些由神经影像学确诊的严重,检查经常显示不可预料的非重要性神经功能发现,和手术减压后的可观的神经恢复也许是可以预料到。因此,慢性脊髓压迫的一个急性脊髓损伤没有的特点就是脊髓的可塑性。到目前为止,临床上慢性颈髓术后效果在持续提高。不管怎样,仍有一些不满意