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现代实验室设计建设的基本概念-实验室家具
作者:德尔塔 日期:2022-04-26
现代实验室规划设计及建设主要根据GLP中文译为(优良实验室规范)的要求来进行设计规划。应满足企业用户进行ISO质量管理体系认证和GMP质量体系认证的要求。其设计建设理念表现如下: 1、合理利用实验室内空间进行设计和布局 2、结合人体工程学原理设计实验室的工作环境。 3、满足实验室的安全环保要求。 具体要求及规范为以下几点: 一、实验室家具规划设计对空间布局的基本要求 1、单人单面的实验边台工作空间:过道间距约为120cm左右;实验台宽度75cm;实验台高度约为80cm-85cm; 2、双人双面的实验边台工作空间:过道间距约为150cm左右;实验台宽度75cm;实验台高度约为80cm-85cm; 3、实验台与高柜之间过道的最小距离为150cm 4、实验台与实验仪器的过道间距约为180cm。 5、实验仪器台的过道间距约为180cm。 6、通风柜面对墙时的走道为180cm 7、通风柜与实验台对放的最小距离为180cm 8、两台通风柜对放的建议间距为300cm 二、实验室规划设计对实验室家具设备的基本要求 1、实验室设备应该考虑具备相应的安全设计,能有效预防责任事故的产生;如台面的使用、柜体的材质选用、五金配件的选用等等。从而有 效的避免了事故的发生。 2、实验室规划设计应该人性化,一切以人为本。合理的实验室设备配置和空间的优化组合是实现人性化的最基本因素。 3、实验室规划设计出的产品应该具有实用性。供应商提供的产品满足实验室实验需要是最现实的要素。 4、要帮客户想没想到的,做客户没做完的,这是专业实验室设备企业所必须具有的。现代实验室处于不断发展变化之中,想客户之未想,做客户之未尽事宜是专业实验室设备生产企业应有的素质之一。 三、实验室装修对自身房体建造及水电通风的基本要求: 1、实验室的采光:一般来说,理化实验室应该朝向东南向,便于采光;仪器室应该朝向西北向,便于恒温恒湿控制。 2、实验室走廊及门窗的尺寸要求:实验室走廊宽度约150cm,实验室门框宽*高约为90cm *200
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衡量离心分离机分离性能的重要指标
作者:德尔塔 日期:2022-04-26
衡量离心分离机分离性能的重要指标 衡量离心分离机分离性能的重要指标是分离因数。它表示被分离物料在转鼓内所受的离心力与其重力的比值,分离因数越大,通常分离也越迅速,分离效果越好。工业用离心分离机的分离因数一般为100~20000,超速管式分离机的分离因数可高达62000,分析用超速分离机的分离因数最高达610000。决定离心分离机处理能力的另一因素是转鼓的工作面积,工作面积大处理能力也大。 过滤离心机和沉降离心机,主要依靠加大转鼓直径来扩大转鼓圆周上的工作面;分离机除转鼓圆周壁外,还有附加工作面,如碟式分离机的碟片和室式分离机的内筒,显著增大了沉降工作面。 此外,悬浮液中固体颗粒越细则分离越困难,滤液或分离液中带走的细颗粒会增加,在这种情况下,离心分离机需要有较高的分离因数才能有效地分离;悬浮液中液体粘度大时,分离速度减慢;悬浮液或乳浊液各组分的密度差大,对离心沉降有利,而悬浮液离心过滤则不要求各组分有密度差。 选择离心分离机须根据悬浮液(或乳浊液)中固体颗粒的大小和浓度、固体与液体(或两种液体)的密度差、液体粘度、滤渣(或沉渣)的特性,以及分离的要求等进行综合分析,满足对滤渣(沉渣)含湿量和滤液(分离液)澄清度的要求,初步选择采用哪一类离心分离机。然后按处理量和对操作的自动化要求,确定离心机的类型和规格,最后经实际试验验证。 通常,对于含有粒度大于0.01毫米颗粒的悬浮液,可选用过滤离心机;对于悬浮液中颗粒细小或可压缩变形的,则宜选用沉降离心机;对于悬浮液含固体量低、颗粒微小和对液体澄清度要求高时,应选用分离机。 离心分离机未来的发展趋势将是强化分离性能、发展大型的离心分离机、改进卸渣机构、增加专用和组合转鼓离心机、加强分离理论研究和研究离心分离过程最佳化控制技术等。 强化分离性能包括提高转鼓转速;在离心分离过程中增加新的推动力;加快推渣速度;增大转鼓长度使离心沉降分离的时间延长等。发展大型的离心分离机,
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全温恒温振荡器的故障检测维修
作者:德尔塔 日期:2022-04-26
落地冷冻摇床的故障检测维修 近年来在学校、化工、生物、科研等部门的应用十分的广泛,是储藏菌种、生物培养的必备设备之一。 在长时间使用或操作不当的情况下我们时常会遇到设备的一些故障问题,那么当我们遇到这些问题时我们如何处理和解决呢?下面我就简单的来说一下。 首先我们要会用观察法,利用视觉、嗅觉、触觉。在某些时候,损坏了的元件会变色、起泡或出现烧焦的斑点;烧坏的器件会产生一些特殊的气味;短路的芯片会发烫;用肉眼也能观察到虚焊或脱焊处。 还有就是要会用排除法,比如通过拔插机内一些插件板、器件来判断故障原因的方法。当拔除某一插件板或器件后仪表恢复正常,就说明故障发生在那里。 再就是对比法,此种方法我们必须拥有两台同型号的设备,并有一台是正常运行的。使用这种方法还要具备必要的设备,例如,万用表、示波器等。按比较的性质分有:电压比较、波形比较、静态阻抗比较、输出结果比较、电流比较等。具体方法是:让有故障的仪表和正常仪表在相同情况下运行,而后检测一些点的信号再比较所测的两组信号,若有不同,则可以断定故障出在这里。这种方法要求维修人员具有相当的知识和技能。 如果没有同型号的两台全温恒温振荡则可以采用故障隔离法,这种方法也相对安全可靠,它是根据故障检测流程图,分割包围逐步缩小故障搜索范围,再配合信号对比、部件交换等方法,一般会很快查到故障之所在。 有些故障其实非常简单,只需要我们的举手之劳,所以我们要善于运用简单的技术去发现问题,解决问题以此来提高我们的工作效率。 了解更多信息您还可以访问:
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麻醉学研究中最常用的动物
作者:德尔塔 日期:2022-04-26
可用于麻醉学研究的动物种类很多,有关实验动物学的专著中都有较详细的叙述。本节仅就麻醉学研究中最常用的动物做简单的介绍。 一、大鼠 大鼠遇惊扰时常试图撕咬,处理不当会咬人致伤。同类间好斗,**不同笼饲养。大鼠寿命在2-3年之间,约90天进入成年期。成年大鼠体重在200-400g,总血量为体重的6-8%。大鼠有尾静脉3条,背侧1条、腹侧2条,均可供静脉穿刺。大鼠实验常用有机玻璃筒完成,简便易行。一般体重在200-300g的大鼠,圆筒的内径为6cm左右,使之在内无法转身。头尾端均盖口径合适的橡胶塞,既可用于通气,也可用于穿过鼠尾。大鼠麻醉的判断标准有:前爪直立位消失、前爪翻正反射消失、夹尾无体动反应。 二、小鼠 小鼠性情温和。寿命2-3年,约80天进入成年期。成年小鼠体重30-50g。总血量为体重的6-7%。小鼠实验给药多为腹腔注射,但也可尾静脉穿刺注射给药。小鼠尾静脉解剖与大鼠相同。 三、家兔 性情温顺,便于饲养。依种类不同,成年兔体重在1.5-8kg。寿命7-10年,8个月进入成年期。总血量约为体重的5-8%。家兔耳缘静脉清晰、固定,易行静脉穿刺。按压静脉近心端,使静脉膨胀,常可穿刺成功。家兔声门较高,对成年家兔用小号直喉镜多可在明视下插入3.5F气管插管。现有国产小动物呼吸机,可经气管插管以30-50ml潮气量、25-30次/分钟呼吸频率行机械通气,同时实施吸入麻醉。 四、狗 狗的品种很多,体型悬殊。寿命约为15年。2岁进入成年期。总血量占体重的7%。在药代动力学研究中,狗的麻醉常选用硫喷妥钠,一次静脉注射 25mg/kg维持麻醉45分钟。吸入麻醉剂维持适当的麻醉深度。狗口腔明视气管插管较容易,麻醉后置于仰卧位,头后仰,颈部伸直。可使口腔与喉头气管成直线。将狗舌拉出,置入喉镜可见会厌。向上挑起,暴露声门,插入气管导管。
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PCR 引物设计黄金法则
作者:德尔塔 日期:2022-04-26
1.引物**在模板cDNA 的保守区内设计。 DNA 序列的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的。在NCBI 上搜索不同物种的同一基因,通过序列分析软件(比如DNAman)比对(Alignment),各基因相同的序列就是该基因的保守区。 2.引物长度一般在15~30 碱基之间。 引物长度(primer length)常用的是18-27 bp,但不应大于38,因为过长会导致其延伸温度大于74℃,不适于Taq DNA 聚合酶进行反应。 3.引物GC 含量在40%~60%之间,Tm 值**接近72℃。 GC 含量(composition)过高或过低都不利于引发反应。上下游引物的GC 含量不能相差太大。另外,上下游引物的Tm 值(melting temperature)是寡核苷酸的解链温度,即在一定盐浓度条件下,50%寡核苷酸双链解链的温度。有效启动温度,一般高于Tm 值5~10℃。若按公式Tm= 4(G+C)+2(A+T)估计引物的Tm 值,则有效引物的Tm 为55~80℃,其Tm 值**接近72℃以使复性条件最佳。 4.引物3′端要避开密码子的第3 位。 如扩增编码区域,引物3′端不要终止于密码子的第3 位,因密码子的第3 位易发生简并,会影响扩增的特异性与效率。 5.引物3′端不能选择A,**选择T。 引物3′端错配时,不同碱基引发效率存在着很大的差异,当末位的碱基为A 时,即使在错配的情况下,也能有引发链的合成,而当末位链为T 时,错配的引发效率大大降低,G、C 错配的引发效率介于A、T 之间,所以3′端**选择T。 6. 碱基要随机分布。 引物序列在模板内应当没有相似性较高,尤其是3’端相似性较高的序列,否则容易导致错误引发(False priming)。降低引物与模板相似性的一种方法是,引物中四种碱基的分布**是随机的,不要有聚嘌呤或聚嘧啶的存在。尤其3′端不应超过3 个连续的G 或C,因这样会使引物在GC 富集序列区错误引发。 7. 引物自身及引物之间不应存在互补序列。 引物自身不应存在互补序列,否则引物自身会折叠成发夹结构(Hairpin)使引物本身复性
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动物麻醉机有关麻醉小知识
作者:德尔塔 日期:2022-04-26
动物麻醉机使用麻醉时,经静脉、腹腔或肌肉注射而产生全身麻醉的药物种类繁多,以下都是使用方便、经济安全,应用最为广泛的几种。 (1)水合氯醛:属镇静催眠药,可用于静脉注射麻醉,但其具有较大的抑制呼吸和心肌收缩等副作用。与硫酸镁、戊巴比妥钠和酒精复合使用则可以明显减少副作用,提高安全保障。 (2)巴比妥类:包括戊巴比妥钠、硫贲妥钠、苯巴比妥钠等。这类药物既可以单独静脉或腹腔注射,也可以与其他麻醉的药物复合使用,以减轻各种药物在单独使用时的副作用。 (3)化学纯酒精:静脉注射可以产生全身麻醉,但麻醉的效果较弱,达到使犬昏睡所需剂量大、时间长,而且从昏睡期进入全身麻痹期则所需时间短且不易控制,所以单独使用不甚安全,一般与其它麻醉的药物合用。临床上极少使用。 (4)“846”合剂:又名速眠新,由几种镇静剂和麻醉剂混合而成,含有保定宁、氟哌啶醇等成分,是—种安全范围较宽的麻醉复合制剂。具有中枢性镇痛、镇静和肌肉松弛作用。单独进行肌肉、腹腔或静脉注射可取得满意的麻醉效果。
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动物的麻醉方法及麻醉剂量
作者:德尔塔 日期:2022-04-26
1、全身麻醉 (1)吸入法 用一块圆玻璃板和一个钟罩或一个密闭的玻璃箱作为挥发性麻醉剂的容器,多选用乙醚作麻药。麻醉时用几个棉球,将乙醚倒可其中,迅速转入钟罩或箱内,让其挥发,然后把待麻醉动物投入,约隔4~6分钟即可麻醉,麻醉后应立即取出,并准备一个蘸有乙醚的棉球小烧杯,在动物麻醚变浅时给套在鼻上使其补吸麻药。本法最适于大、小鼠的短期操作性实验的麻醉,当然也可用于较大的动物只是要求有麻醉口罩或较大的玻璃箱罢了。由于乙醚燃点很低,遇火极易燃烧,所以在使用时,一定要远离炎源。 (2)腹腔和静脉给药麻醉法 非挥发性和中药麻醉剂均可用作腹腔和静脉注射麻醉,操作简便,是实验室最常采用的方法之一。腹腔给药麻醉多用于大小鼠和豚鼠,较大的动物如兔、狗等则多用静脉给药进行麻醉。由于各麻醉剂的作用长短以及毒性的差别。所以在腹腔和静脉麻醉时,一定控制药物的浓度和注射量。 常用麻醉剂的用法及剂量 (1)戊巴比妥纳:2~4小时中途加上1/5量,可维持1小时以上,麻醉力强,易抑制呼吸。 ① 狗、兔:静脉注射,30 mg/kg,3%;腹腔注射,40~50mg/kg,3%; ②大、小鼠、豚鼠:腹腔注射,40~50mg/kg,2%; (2)硫喷妥纳:15~30分钟,麻醉力强,宜缓慢注射。 ①大白鼠:腹腔注射,40 mg/kg,1%; ②小白鼠:腹腔注射,15~20mg/kg,1%; ③狗、兔:静脉注射,15~20mg/kg,2%; (3)氯醛糖:3~4小时,诱导期不明显 ①兔:静脉注射,80~100mg/kg,2%; ②大白鼠:腹腔注射,50mg/kg,2%; (4)乌拉坦:2~4小时,毒性小,主要适用小动物的麻醉。 ①兔:静脉注射,750~1000mg/kg,30%; ②大、小白鼠:皮下或肌肉注射,800~1000mg/kg,30%; ③蛙:淋巴囊注射,0.1ml/100g,20~25%; ④蟾蜍:淋巴囊注射,1ml/100g,10%。 2、局部麻醉 ⑴猫的局部麻醉一般应用0.5~1.0%盐酸普鲁卡因注射。粘膜表面麻醉宜用2%盐酸可卡因。 ⑵兔在眼球手术时,可于结膜囊滴入0.02%盐酸可卡因溶液,数秒
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转基因大米中Bt基因的检测方法
作者:德尔塔 日期:2022-04-26
2014 年 7 月,央视日前报道了湖南、湖北、安徽、福建等4省存在转基因大米的新闻,引发社会极大关注。记者在武汉市一家大型超市,随机购买5种大米。经检测后发现,这 5 种大米中,有 3 种含转基因成分:Bt63。Bt63 是一种抗虫害的基因,它是苏云金芽孢杆菌基因中的杀虫晶体蛋白基因,可以有效防止鳞翅目等多种有害昆虫。 近年来转基因事件层出不穷,时有耳闻。那什么是转基因呢?转基因技术是提取特定生物体基因组中所需要的目的基因或者人工合成指定序列的DNA 片段,将该基因片段转入特定生物中,与其本身的基因组进行重组,获得具有稳定表现特定的遗传性状的个体。农作物转基因通常是为了获得抗病毒、抗虫、抗寒、抗旱、抗涝、抗盐碱、抗除草剂等特性。 中国目前并未批准转基因水稻的商业化生产。欧盟委员会决议:中国大米产品必须凭不含转基因Bt63大米成分的证书才能进入欧盟市场。其解释为:“转基因作物只有经过全面科学的评估和批准,才能允许投放入欧洲市场。”这一决定目的在于防止未被批准的转基因Bt63大米被欧洲消费者购买和食用。可见大米中Bt基因的鉴别十分关键。检测大米中Bt基因有较多方法,RephiLe 以《农业部 953 号公告-6-2007_转基因植物及其产品成分检测抗虫转 Bt 基因水稻定性 PCR 方法》 为基础,推出大米 Bt 基因检测解决方案,具体如下: 一、实验原理 根据转基因大米特异性序列设计引物,对试样进行 PCR 扩增。对 PCR 结 果进行检测,确定是否含有转基因片段。 二、仪器和试剂 PCR 仪 MyCycler (biorad,USA) 台式微量冷冻离心机 Microfuge 22R (BeckmanCounter ,USA) 凝胶成像系统 Gel DocTM XR(biorad,USA) 紫外检测仪 NanoDrop1000 (eppendorf,German) 核酸电泳仪 EPS100 (上海天能) 超纯水仪 Direct-Pure UP(RephiLe) 恒温水浴 HH.S.21.8 (上海跃进医疗器械厂) 三、试验方法 1、试样预处理 将大米粉碎,制成待测样品。 2、基因组提取 使用 Axygen 基因组 DNA 小量试剂盒,按照
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土壤温湿度记录仪分析播种措施对于温湿度影响
作者:德尔塔 日期:2022-04-26
干旱是制约我国西北干旱、半干旱地区农业生产的关键因素之一,水分胁迫是限制旱地农业生产的严重问题,提高水分利用是喊去作物稳产高产的根本途径。相关实验证明通过覆盖植物等能够提升土壤的温湿度,提高水分的利用率,小麦是半干旱以及干旱区域的主要粮食作物,全膜覆土穴播免耕多茬种植技术是一项以集雨、抑制土壤水分蒸发、节本增效、免耕、多茬种植为一体的高效旱作农业新技术,使小麦产量得到大幅度提高,增收增产效果显著,本文通过使用土壤温湿度记录仪行追踪土壤温湿度变化,进一步了解不同播种形式对温湿度的影响。 设5个处理,即全膜覆土穴播(T1)、全膜不覆土穴播(T2)、小垄沟播(T3)、露地穴播(T4)和露地条播(T5)(CK),借助土壤墒情与旱情监测系统进行检测。 土壤温度的变化:通过对冬小麦生育期土壤温度的测定,各处理土壤温度日变化趋势相同,即平均地温均呈现先增高再降低的趋势。从8∶00开始,各处理地温逐渐增高,12∶00后增温迅速,其中全膜覆土穴播和全膜不覆土穴播至15∶00达到最高,露地穴播和小垄沟播在17∶00达到最高,随后均呈现缓慢降低趋势。土壤水分的变化过程苗期由于植株生长的消耗各处理间土壤含水量有明显分异,其中全膜覆土穴播处理土壤含水量相对较高,且在不同土层之间变化较小。随着冬小麦生育进程的推进开花期各处理土壤含水量急剧下降,各处理0~60cm土层的土壤含水量在各层次之间有较为明显的变化,全膜不覆土穴播处理的土壤含水量最高,但在不同土层之间变化较大,在60cm以下土层含水量显著下降,即全膜覆土穴播处。 理能对深层土壤水分有效利用;全膜覆土穴播处理的土壤含水量在0~60cm较低,说明其在开花期对水分的利用较多。
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学做实验的方法初步入门-迷你离心机技术文章
作者:德尔塔 日期:2022-04-26
学做实验的方法初步入门-迷你离心机技术文章 实验方法:学做实验两者方法有所不同,大概分为两种方法:向别人学习和自学。下面分别介绍一下吧 基本操作和基础知识 在开始学做实验的时候,**有人指导。做实验的内容,大概分为基本操作和具体实验的操作。基本操作是具体实验的基础,例如:怎样量取容积,怎样测量和调节PH值,怎样清洗实验室器皿,无菌操作技术,怎样使用pipette,怎样配置溶液,怎样autoclave(高压蒸汽灭菌)等。学做实验的时候,应该先学最基本的操作,再学具体的实验。这些基本操作具有至关重要的作用,它直接决定了实验的成功率。 可以推荐几本基本关于实验操作的书。第一本书是《分子生物学实验室工作手册》(英文名At the bench: a laboratory navigator)。这本书是生物医学研究生的入门书籍,建议精读三遍以上。本书中译本大约300多页,相对于将要介绍的其它几本书籍要薄很多。它介绍了怎样在实验室与他人相处,怎样建立实验室,怎样写实验记录,实验室的基本操作如试剂的配置、储藏和处理,无菌技术,细胞培养,离心,测PH值,电泳,显微镜的使用等。总而言之,本书基本上囊括了生物医学实验室日常遇到的问题和所有的基本操作,是生物医学研究生**的入门书籍。 第二本书是《分子克隆》(英文名Molecular cloning: a laboratory manual),本书被誉为分子生物学的圣经,几乎每一个生物实验室都有一本。本书介绍了分子生物学常用实验技术的基本原理和许多protocol。目前已经出版到第三版。第一版出版于 1982年,第二版出版于1989年,第三版出版于2001年。书中提供的protocol很经典,但是有些目前已经改进了。这本书很厚,第三版英文版有2000多页,所以几乎不可能也没有必要精读所有章节,只要阅读自己正在做的实验的相关内容就可以了。 《Current Protocols in Essential Laboratory Techniques》这本书从怎样量取体积,称取重量,测量PH值,测量浓度等最基本的操作说起,讲到配置溶液,细胞
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真空抽滤泵R300与传统实验室真空泵的比较
作者:德尔塔 日期:2022-04-26
真空抽滤泵是实验室用户经常使用、用于搭配各种试验用真空过滤装置进行减压抽滤的真空泵。圣斯特sciencetool品牌旗下的R300小型无油真空抽滤泵是专为实验室用户设计,与传统实验室油泵、水循环泵相比更加符合实验室过滤的需要,主要有以下区别: 1.R300实验室真空抽滤泵采用无油干式设计,在使用时不需要连接水源或添加泵油,只需要插上电源即可使用。而水循环泵则需要连接水源,油泵需要添加并定期更换泵油。这使得R300免除了平时维护保养的麻烦(不需要定期换泵油),同时也不会产生泵油或水倒吸的问题。 2.由于采用了无油式的设计,省去了油舱和水箱的部件,这使得R300真空抽滤泵的体积变得非常小巧,其外形尺寸仅为272×121×164mm,任何一面的表面积均小于一张A4纸的尺寸。这样节省了实验室的台面空间,同时也方便携带外出使用。 3.由于是专为实验室抽滤设计的小型无油真空泵,所以真空度和抽气速度的与其他实验室真空泵相比更腐蚀过滤试验的需要,同时标配了真空调节阀和真空表,方便用户观测真空度,并根据具体需要调节抽速和真空度。 4.与一般实验室真空泵相比,该款抽滤泵标配的缓冲杯可以用于防止真空过滤时滤液倒吸损坏真空泵。 详细产品信息可浏览上海领德仪器有限公司网站。(圣斯特Sciencetool实验室真空泵及过滤产品在中国大陆地区授权代理商)
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医用离心机停机不转或转速慢故障解析
作者:德尔塔 日期:2022-04-26
医用离心机停机不转或转速慢故障解析 是常用来分离血清,血浆,沉淀蛋白质或作尿沉渣检查的仪器设备。利用医用离心机可使混合液中的悬浮微粒快速沉淀,借以分离比重不同的各种物质成分。在实际工作中,由于医用离心机开启、停止频繁使用时间相对集中,电机与机械磨损、消耗大,如果不能按时定期做好维修保养工作,极易发生停机不转或转速慢的故障,直接影响检验工作的正常开展。下面对医用离心机停机不转或转慢故障进行详细分析: 当医用离心机出现停机不转或转速慢的故障时,首先要排除供电电源部分故障。如电源线断脱,插头、插座接触不良,轴承损坏或定子、转子线圈短路或断路以及烧毁等。其次就是由于电刷开路,即转子上整流子与电刷之间不相吻合,接触不良造成的。因为医用离心机上使用的电动机一般都是串激式电动机。它是由定子和转子两部分组成。定子是由铁芯及磁场线圈构成集中式的固定磁极。转子是由铁芯及转子线圈和整流子组成。电刷的作用是把定子线圈经整流子联接转子线圈的关键器件。串激式电动机的电路工作原理是电流从电源经定子磁场线圈、电刷、经整流子流入转子线圈,再由电刷、定子磁场线圈回到电源,从而构成回路。磁场线圈和转子线圈是由整流子经电刷串联的。线路各处的电流相等,所以只有保证串联电路畅通无阻,电动机才能按要求的转速正常工作。由此可见,电刷的工作状况直接影响电动机的正常运转,但是由于电刷在与整流子之间的接触中,磨损、消耗或者弹簧失效等原因,容易造成电刷开路与整流子脱离接触,是造成离心机停机或转速慢故障的主要原因。 解决方法是对医用离心机电刷盒进行清洁处理,检查电刷磨损情况。当电刷磨损后的长度小于10mm时,应更换同规格的电刷。更换电刷的方法是:旋开电刷盒盖,取出旧电刷。如果旧电刷上的弹簧完好,可将它取下,重新接在新电刷上。若弹簧失效或损坏,则应同时更换弹簧,然后对正方向,按原样装回盒内,使电刷在盒内自由落下,松紧合适,再将盒盖旋紧。卸下转盘,将电动机的转速调至最大,
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微生物学技术:微生物的分离纯化及稀释平板菌落计数
作者:德尔塔 日期:2022-04-26
实验原理 稀释平板测数是根据微生物在高度稀释条件下固体培养基上所形成的单个菌落是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法,即一个菌落代表一个单细胞。计数时,首先将待测样品制成均匀的繁殖稀释液,尽量使样品中的微生物细胞分散开,使其成单个细胞存在,否则一个菌落就不只是代表一个细胞,再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中,使其均匀分布于平板中的培养基内。经培养后,由单个细胞生长繁殖形成菌落,统计菌落数目,即可计算出样品中的含菌数。此记数方法所计算的菌数是培养基上长出来的菌落数,故又称活菌计数。一般用于某些产品检定,如根瘤菌剂等产品检定,生物制品检验,土壤含菌量测定及食品、水源的污染程度的检验。 自然条件下,微生物常以群落状态存在,这种群落往往是不同种类微生物的混合体。为了研究某种微生物的特性或者要大量培养和使用某种微生物,必须从这些混杂的微生物群落中获得纯培养,这种获得纯培养的方法称为微生物的分离与纯化。 在自然界中,土壤是微生物生活的良好环境,其中生活的微生物数量和种类都是极其丰富的,因此土壤是人类开发利用微生物资源的重要基地。土壤中的微生物数量、种类与土壤肥力有关,肥沃的土壤中多,贫瘠土壤中少。其生理类群则与土壤的其它理化性质,如通气、pH有关,例如在通气良好的菜园土中,好气性微生物占有绝对优势。本实验以菜园土为材料分离土壤中的好气性细菌,并进行数量测定。 分离微生物时,一般是根据该微生物对营养、pH、氧气等要求的不同,供给它们适宜的生活条件,或加入某种抑制剂造成只利于该菌种生长,不利于其它菌种生长的环境,从而淘汰不需要的菌种。分离微生物常用的方法有稀释平板分离法和划线分离法,根据不同的材料,可以采用不同方法,其最终目的是要在培养基上出现欲分离微生物的单个菌落,必要时再对单个菌落进一步分离纯化。在用稀释平板分离微生物时,还可以同时测定待分离的微生物的数量。 放线菌与细菌
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微生物学技术:微生物鉴定中常用的生化反应
作者:德尔塔 日期:2022-04-26
实验原理 有些细菌具有合成淀粉酶的能力,可以分泌胞外淀粉酶。淀粉酶可以使淀粉水解为麦芽糖和葡萄糖,淀粉水解后遇碘不再变蓝色。 细菌产生的脂肪酶能分解培养基中的脂肪生成甘油及脂肪酸。脂肪酸可以使培养基pH下降,可通过在油脂培养基中加入中性红做指示剂进行测试。中性红指示范围为pH6.8(红)~8.0(黄)。当细菌分解脂肪产生脂肪酸时,则菌落周围培养基中出现红色斑点。 某些细菌分泌蛋白酶分解明胶,产生小分子物质。如果细菌具有分解明胶的能力,则培养基可由原来固体状态变成液体状态。 牛乳中主要含有乳糖、酪蛋白等成分。细菌对牛乳的利用主要是指对乳糖及酪蛋白的分解和利用。牛乳中常加入石蕊作为酸碱指示剂和氧化还原指示剂。石蕊中性时呈淡紫色,酸性时呈红色,碱性时呈蓝色,还原时则部分或全部脱色。细菌对牛乳的利用可分三种情况: (1)酸凝固作用:细菌发酵乳糖后,产生许多酸,使石蕊牛乳变红,当酸度很高时,可使牛乳凝固,此称为酸凝固。 (2)凝乳酶凝固作用:某些细菌能分泌凝乳酶,使牛乳中的酪蛋白凝固,这种凝固在中性环境中发生。通常这种细菌还具有水解蛋白质的能力,因而产生氨等碱性物质,使石蕊变蓝。 (3)胨化作用:酪蛋白被水解,使牛乳变成清亮透明的液体。胨化作用可以在酸性条件下或碱性条件下进行,一般石蕊色素被还原褪色。 实验材料 1、活材料:大肠杆菌(E. coli)、枯草杆菌(Bacillus subtilis)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、产气肠杆菌(Enterobacter aerogenes)、黏乳产碱杆菌(Alcaligenes viscolactis)、铜绿假单胞菌(Psudomonas aeruginosa)、普通变形杆菌(Proteus vularis )。 2、培养基:淀粉培养基:牛肉膏蛋白胨培养基加0.2%的可溶性淀粉;油脂培养基:牛肉膏蛋白胨培养基加花生油10mL、0.6%中性红水溶液1mL;明胶液化培养基:蛋白胨5g,明胶100~150g,水1000mL, pH7.2~7.4,115℃灭菌20min。石蕊牛乳培养基:牛奶粉100g、石
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微生物学技术:微生物的接种、分离和培养
作者:德尔塔 日期:2022-04-26
一、目的要求 1、掌握各种分离、接种方法。 2、掌握无菌操作基本环节。 二、实验说明 微生物在自然界中呈混杂状态存在,要获得所需菌种,必需从中把它们分离出来。在保存菌种时不慎受到到污染也需予以分纯。微生物分离和纯化的方法很多,但基本原理却是相似的,即将待分离的样品进行一定的稀释,并使微生物的细胞(或孢子)尽量以分散状态存在,然后使其长成一个个纯种单菌落。然而上述工作又离不开接种,即将一种微生物移到另一灭过菌的培养基上的过程。 三、实验材料 1、恒温培养箱。 2、接种环、玻璃棒、吸管、酒精灯。 3、培养基(上次实验配制的)。 4、大肠杆菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球菌、酵母菌。 四、方法步骤 (一)接种的操作 1、斜面接种(接金黄葡萄球菌) (1)操作前,先用75%酒精擦手,待酒精挥发后点燃酒精灯。 (2)将菌种管和斜面握在左手大姆指和其它四指之间,使斜面和有菌种的一面向上,并处于水平位置。 (3)先将菌种和斜面的棉塞旋转一下,以便接种时便于拔出。 (4)左手拿接种环(如握钢笔一样),以火焰上先将环端烧红灭菌,然后将有可能伸入试管其余部位也过火灭菌。 (5)用右手的无名指、小指和手掌将菌种管和待接斜面试管的棉花塞或试管帽同时拔出,然后让试管口缓缓过火灭菌(切勿烧过烫)。 (6)将灼烧过的接种环伸入菌种管内,接种环在试管内壁或未长菌苔的培养基上接触一下,让其充分冷却,然后轻轻刮取少许菌苔,再从菌种管内抽出接种环。 (7)迅速将沾有菌种的接种环伸入另一支待接斜面试管。从斜面底部向上作“Z”形来回密集划线。有时也可用接种针仅在培养基的中央拉一条线来作斜面接种,以便观察菌种的生长特点。。 (7)迅速将沾有菌种的接种环伸入另一支待接斜面试管。从斜面底部向上作“Z”形来回密集划线。有时也可用接种针仅在培养基的中央拉一条线来作斜面接种,以便观察菌种的生长特点。 (8)接种完毕后抽出接种环灼烧管口,塞上棉塞。 (9)将接