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如何用间充质干细胞无血清培养基培养间充质干细胞
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
如何用间充质干细胞无血清培养基培养间充质干细胞 间充质干细胞无血清培养基,货号NC0103,英文名称:Mesenchymal Stem Cell Serum-free Medium。 【间充质干细胞无血清培养基 用途与描述】 间充质干细胞无血清培养基可用于多种来源的人类间充质干细胞的原代细胞分离及细胞传代,同时还能保持其多向分化的潜能,如骨髓(BM-hMSC)、脂肪组织(AT-hMSC)、脐带(UCM-hMSC)。使用本产品无需添加血清或血清替代物。 间充质干细胞无血清培养基化学成分明确、无血清、无动物源成分。产品批间差异小,所有原料符合GMP标准。更适合临床研究用途。 【间充质干细胞无血清培养基 规格与保存】 产品货号 产品名称 包装规格 保存条件 保存期限 NC0103 间充质干细胞无血清培养基 500mL/瓶 2-8℃,避光保存 12个月 NC0103.S 间充质干细胞无血清培养基添加剂 5mL/瓶 -20℃,避光保存 12个月 NC1003 胰蛋白酶抑制剂 500mL/瓶 2-8℃,避光保存 12个月 * 胰蛋白酶抑制剂,并不用于间充质干细胞的培养。仅单独用于细胞消化时终止细胞消化进程。 由于间充质干细胞无血清培养基中没有添加胰酶抑制剂,因此不可用间充质干细胞无血清培养基终止细胞消化。仅可用胰蛋白酶抑制剂终止细胞消化。 【间充质干细胞无血清培养基 使用方法】 1. 间充质干细胞完全培养基准备 将间充质干细胞无血清培养基添加剂在2-8℃过夜融化,按1:100比例加入培养基基础中即成为间充质干细胞完全培养基。 特别提醒:间充质干细胞完全培养基2-8℃避光可保存30天。 科研用途小量、多次使用,建议采用分装培养基添加剂后以-20℃保存的形式,可避免培养基的浪费。 2. 间充质干细胞复苏(以T-75瓶为例) 1)从冰箱中取出完全培养基,在生物安全柜或超净台中吸取适量(如T-75瓶:10-15mL)完全培养基沿上表面加入间充质干细胞培养瓶中, 切勿冲到培养瓶底面(细胞生长面)。然后慢慢将培养瓶放平,在生物安全柜或超净台中室温放置5-10分钟后使用。 特
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食品安全解释
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
食品安全解释 食品安全(foodsafety):食品供给能够保证人类的生存和健康。 具体含义 食品安全的含义有三个层次: 食品安全 *层 食品数量安全:即一个国家或地区能够生产民族基本生存所需的膳食需要。要求人们既能买得到又能买得起生存生活所需要的基本食品。 第二层 食品质量安全:指提供的食品在营养,卫生方面满足和保障人群的健康需要,食品质量安全涉及食物的污染、是否有毒,添加剂是否违规超标、标签是否规范等问题,需要在食品受到污染界限之前采取措施,预防食品的污染和遭遇主要危害因素侵袭。 第三层 食品可持续安全:这是从发展角度要求食品的获取需要注重生态环境的良好保护和资源利用的可持续。 2 安全标准 编辑 (一)食品相关产品的致病性微生物、农药残留、兽药残留、重金属、污染物质以及其他危害人体健康物质的限量规定。 (二)食品添加剂的品种、使用范围、用量。 (三)婴幼儿的主辅食品的营养成分要求。 (四)对于营养有关的标签、标识、说明书的要求。 (五)与食品安全有关的质量要求。 (六)食品检验方法与规程。 (七)其他需要制定为食品安全标准的内容。 (八)食品中所有的添加剂必须详细列出。 (九)食品中禁止使用的非法添加的化学物质。 3 安全检验 编辑 AB SCIEX的"从农田到餐桌"食品检测解决方案作为在食品和农业领域采用的食品安全检测手段,覆盖了从原材料和加工过程控制,到成品检验及产品销售的全过程。致力于: 1、检验食品和饮料的营养成分 2、应对致癌物非法掺杂 3、筛查食品中不明污染物 4、达到或超过农残分析的新兴监管要求 5、帮助食品生产者或监管者检测痕量水平的过敏原建立在业界的技术基础之上的3200系列串联质谱仪和 Eksigent ekspert ultraLC100 液相色谱仪的组合是灵敏的、可靠的、耐用的技术平台。设计紧凑且性能极高的API 3200?系统专为进行小分子定量分析的高通量实验室而设计,满足环境、食品安全、临床医学、药物开发等领域中所有类型及不同浓度的样品测定
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双抗体夹心法的一些疑问
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
双抗体夹心法的一些疑问: 1.双抗原夹心法的原理: 固相抗原吸附载体 + 血清(抗体)+ 酶结合物(抗原) = 抗原*抗体*抗原复合物; 抗原*抗体*抗原复合物 + 辣根过物氧化酶 《过氧化氢催化》 = 蓝色络合物。 2.双抗体夹心ELISA如何筛选抗体zui适的包被浓度: 采用棋盘滴定法,选择一个阳性标本和一个阴性标本,两者的差异性zui大,且阴性标本吸光值小于0.1-0.2,阳性标本控制在1左右。 3.ELISA中,若在96孔板包被抗体,抗体是被吸附在孔的底部还是内壁? 洗涤时候不会被甩出去。因为在放水浴箱里孵育的那段时间里,血清已经跟杯子里的化学试剂起了反应,粘附在里面了,洗涤甩干只是洗去多余的液体而已。 4.加一抗前要不要洗板? 一般的ELISA实验中封闭液同时也是一抗稀释液,这时就没必要洗板了。但是如果一抗稀释液同封闭液成分不同,则应该洗板,去除封闭液的游离成分。 5.为什么双抗体夹心法是检测抗原zui常用的方法? 1)将特异性抗体与固相载体联结,形成固相抗体。洗涤除去未结合的抗体及杂质。 2) 加受检标本,保温反应。标本中的抗原与固相抗体结合,形成固相抗原抗体复合物。 洗涤除去其他未结合物质。 3) 加酶标抗体,保温反应。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合 的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检抗原的量相关。 4) 加底物显色。固相上的酶催化底物成为有色产物。通过比色,测知标本中抗原的量。 双抗体夹心法适用于测定二价或二价以上的大分子抗原,但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原,因其不能形成两位点夹心。
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如何对付抗蛇毒血清不良反应
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
抗蛇毒血清是目前西医**毒蛇咬伤*的**方法 。如诊断明确 ,能在早期应用相应的抗蛇毒血清 ,疗效是可靠的。⒈ 血清过敏反应:可出现荨麻疹、气喘、血管性水肿等症状。注射前必须先做过敏试验并详细询问既往过敏史。遇有血清过敏反应,采用抗过敏**。即肌内注射扑尔敏。必要时,应用地塞米松5毫克加入25%(或50%)葡萄糖注射液20毫升中静脉注射;也可用氢化可*松琥珀酸钠135毫克或氢化可*松100毫克加入25%(或50%)葡萄糖注射液40毫升中静脉注射,亦可静脉滴注。⒉ 过敏性休克:可在注射中或注射后数分钟至数十分钟内突然发生。轻者注射肾上腺素后即可缓解;重者需输液输氧,使用升压药维持血压,并使用抗过敏药物及肾上腺皮质激素等进行抢救。如在用药过程中发生过敏性休克反应,速用0.1%肾上腺素0.5毫升皮下注射及地塞米松5~10毫克静脉注射。同時准备好气管插管等急救裝备,以便及時急救。⒊ 血清病:主要症状为荨麻疹、发热、淋巴结肿大、局部浮肿,偶有蛋白尿、呕吐、关节痛,注射部位可出现红斑、瘙痒及水肿。一般系在注射后7~14天发病,称为延缓型;亦有在注射后2~4天发病,称为加速型。可使用钙剂或抗组织胺药物来**,一般数日至十数日即可*。
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关于血清保存冻融要点
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
血清是血液凝固析出的淡黄色透明液体。如将血液自血管内抽出,放入试管中,不加抗凝剂,则凝血反应被激活,血液迅速凝固,形成胶冻。关于血清保存冻融有以下几点: 1、需要长期保存的血清必须储存于-20℃冰箱。 2、4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月。 3、由于血清结冰时体积会增加约10%,血清在冻入低温冰箱前必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。 4、血清一般为无菌,因此不用再过滤除菌。 5、如发现血清有悬浮物,可将血清加入培养液内一起过滤,不能直接过滤血清。 6、血清解冻时需采用逐步解冻法,从低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天,然后移入室温待全部溶解后再分装。 7、在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀,注意不要产生气泡,不要产生沉淀。 8、不能直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大容易造成蛋白质凝集而出现沉淀。 9、血清灭活是指56℃加热 30分钟处理已完全解冻的血清,加热过程中应该摇晃均匀,使血清中的补体成分灭活。 10、除非必须,商品化血清不需要灭活处理,热处理会造成血清沉淀物显著增多。 11、不能将血清在37℃放置超过2天,血清会变得浑浊,同时降解血清中的有效成分。 12、血清中的沉淀絮状物主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清质量,3000rpm离心 5分钟即可去除。 13、显微镜下小黑点是由于经过热处理过的血清,沉淀物的形成会显著增多,有些沉淀物在显微镜呈现为黑点,常误认为血清受污染。 14、通常,黑点不多时不会影响细胞生长。
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生产牛血清的方法
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
牛血清是一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已为人所知,但还有一部分尚不清楚,而且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。1. 牛血清的来源:健康的不受感染的牛群及新生牛出生后及时采血,这是制备新牛血清的首要保证。 2. 采血要求:采血技术人员须经专业培训:采血所需的工艺、设备能保障牛血不受外源性污染;严格无菌的采血操作规范;洁净的采血环境,这是使采集的血液不受污染的必要保证。 3. 加工工艺与设备:符合GMP要求的洁净车间;精密的过滤系统;独特的制备工艺;严格的血清加工操作规范,这是生产牛血清的关键所在。 4. 质量检验:高等专业技术人员;先进的检验设备;完善的检验指标与检测方法,这是确保牛血清质量的重要保证。 5. 产品监制:中国药品生物制品检定所对本公司牛血清产品进行监制;每年按生产批数的一定比例进行抽检,这是牛血清质量的zui终保障。
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到底是进口ELISA试剂盒好还是国产ELISA试剂盒好呢?
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
规格:96T/48T 包装:盒装 到底是进口试剂盒好还是国产试剂盒好? 目前国内的的试剂盒质量已经很成熟了,进口原装的试剂盒的价格是国产试剂盒的好几倍,国内的技术水平还是比较的。 二、测试注意事项: 1、实验严格按照说明书的操作进行,实验结果判定必须以酶标仪读数为准。 2、酶标包被板开封后如未用完,应立即装入密封袋中加干燥剂保存。 3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测,取平均值,以减小实验误差。 4、试剂盒保质期内使用,不同批号的试剂不得混用。 elisa试剂盒质量保证是一个复杂的过程,许多重要的环节都影响到检测的质量: 三、标本复查 ELISA手工检测过程复杂,影响因素较多,即使室内质控在控,也可能因孔间差异而造成结果的差异,因此加大复查力度是保证结果准确性的可靠方法,比如对HBsAg、HBeAg、HCV-Ab、HIV-Ab、TP-Ab等项目的可疑、弱阳性标本及少见模式的检测结果进行复查。 四、结果判断和报告 常用下列几种方法表示结果: 1.定性测定 2.半定量测定结果一般以滴度表示。 3.定量测定即用已知量的标准品作一系列稀释后进行ELISA测定,绘制标准曲线,结果以量或单位表示。在ELISA定量检测中每一块反应板都必须绘制相应的标准曲线。 4.结果报告以上作为参考.
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ELISA原理与分类
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
一、ELISA的原理 ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。 二、ELISA的类型 ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。在这种测定方法中有三个必要的试剂:(1)固相的抗菌素原或抗体,即"免疫吸附剂"(immunosorbent);(2)酶标记的抗原或抗体,称为"结合物"(conjugate);(3)酶反应的底物。根据试剂的来源和标本的情况以及检测的具体条件,可设计出各种不同类型的检测方法。用于临床检验的ELISA主要有以下几种类型: 1.双抗体夹心法测抗原 双抗体夹心法是检测抗原zui常用的方法,操作步骤如下: 1)将特异性抗体与固相载体联结,形成固相抗体。洗涤除去未结合的抗体及杂质。 2)加受检标本,保温反应。标本中的抗原与固相抗体结合,形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去其他未结合物质。 3)加酶标抗体,保温反应。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检抗原的量相关。 4)加底物显色。固相上的酶催化底物成为有色产物。通过比色,测知标本中抗原的量。 在临床检验中,此法适用于检验各种蛋白质等大分子抗原,例如HBsAg、HBeAg、AFP、hCG等。只要获得针对受检抗原的异性抗体,就可用于包被固相载体和制备酶结合物而建立此法。
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金秋时分,分享操作ELISA试剂盒的实验重要点
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
ELISA试剂盒应严格遵照规则操作,必能得出的成果。首先应选取的试剂,杰出的仪器和正确的操作是确保ELISA实验成果牢靠的必要条件。所以ELISA试剂盒的购买试剂质量的确保以及实验前实验仪器的查看都是很重要的。一、标本的收集及保存1、血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应防止重复冻融。2、血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本收集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应防止重复冻融。3、细胞培养物上清或其它生物标本:请1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应防止重复冻融。4、样本处理:血清或血浆标本推荐稀释10,000倍。注:以上标本置4℃保存应小于1周,-20℃或-80℃均应密封保存,-20℃不该超越1个月,-80℃不该超越2个月;标本溶血会影响终究检测成果,因而溶血标本不宜进行此项检测。二、试剂的预备 按试剂盒说明书的要求预备实验中需用的试剂. ELISA试剂盒中用的蒸馏水或去离子水,包括用于洗刷的,应为新鲜的和高质量的.自配的缓冲液运用pH计丈量较正.从冰箱中取出的试 验用试剂应待温度与室温平衡后运用.试剂盒中本次实验不需用的部分应及时放回冰箱保存。 三、加样:别离设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其他各步操作相同)、规范孔、待测样品孔。在酶标包被板上规范品加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品终究稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,悄悄晃动混匀。四、温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。五、洗刷:当心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗刷液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。六、显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,悄悄震动混匀,37℃避光显色15分钟.七、测定:以空白空调零,450nm波长依序丈量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加停止液后
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迎国庆特别篇之ELISA试剂盒实验思路分析
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
今天是新的一周开始。迎国庆,上海劲马公司为您带来了迎国庆特别篇之ELISA试剂盒实验思路分析。 我公司当下客户来自*,也有不少是实验新手,甚至是学生。根据客户的地域、时间、实验方法的不同要求,我公司专业的技术人员会积极调整,配合客户。 近年来,科研市场上各种迎合消费趋势的产品层出,但是据有关调查统计,在这些纷繁复杂的试剂产品背后,却体现的是产品质量的问题。 在产品就是实力的科研市场上,无论是品牌建设还是渠道拓宽,的产品都是非常重要的。上海劲马不光强调形式,还非常注重本质的发展模式。 对于ELISA的实验思路,我公司技术员对实验的可验证性做出一番讲说:现代科研的基本模式是假说驱动的,无法验证的假说难以进入科研活动过程,当然从大的历史条件下,如果只是因为技术上的困难而无法实现的假说另当别论。但是即使是这样,假说也必须具有理论上的可验证性。在科学发展的相对低级阶段,可验证性更为必要,尤其是作为普通科研人员,没有可验证性的思路往往难以产生发展的动力,更不要说有效的推广和应用。 ELISA试剂盒主要影响免疫测定技术的基础在于抗原抗体之间的特异结合反应,所以任何的诊断试剂离不开的原料,以前用于免疫测定的抗原通常为各种纯化抗原,而抗体则为纯化抗原免疫动物后获得的多克隆抗体和使用杂交瘤技术得到的单克隆抗体,而抗原或抗体的标记物如酶标结合物则通过各种化学合成方法制备。 曾经有过日本小保方STAP细胞论文被撤回的事件,仔细考虑就属于这种问题。其实这个想法具有新奇性,甚至具有逻辑合理性,但是缺乏可验证性,至少现在看是这样的。如果她足够威武,能给大家一个流畅的验证方案,拿出铁的证据证明其思路的正确性,仍然属于一个好思路,好研究,甚至可引起一场干细胞研究的革命。 在【ELISA试剂盒实验思路】中,具体正确性也需要更多研究来验证的。而ELISA实验的技巧、经验、步骤方法等可验证性也是非常重要的,
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胎牛血清解决方案
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
胎牛血清解决方案 1、 如何储存和解冻血清才不会使产品质量受损? 将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。 长时间储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。因此,推荐在-20℃以下储存血清,并避免反复冻融。 我们建议血清应保存在-2O℃。若存放于4℃时,请勿超过一个月。若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。 2、血清中包含絮状沉淀,它们是什么,怎么处理? 沉淀包含纤维蛋白和脂蛋白。这是正常特性,不会影响产品性质。要除去沉淀,离心血清(400g,1-2分钟)或者简单的让其沉淀在瓶子底部,将血清小心的转移到另一个无菌瓶里(一般不建议采用过滤的方法除去沉淀,因为沉淀会堵塞滤膜而无法过滤)。大多情况轻轻摇动沉淀并加热至37℃就会再溶解。所以,使用产品时要摇动并加热血清至37℃,沉淀会自然消失。 3、实验室如何选择适合的血清? 国内一致认为HYCLONE的血清是的,但是根据我在北美的经历,国外一般认为GIBCO比HYCLONE好,所以并不是价格决定质量,但是总的来说这两种价格普遍偏贵,一般不是太娇气的细胞,国产的就够用了。此外,由于国内HYCLONE,GIBCO并没有生产线,我们只能从代理商那里买,而代理商又鱼龙混杂,所以买到假货的可能性也很大。所以,我一般会从直销员那里买血清,有的国外生物公司由于刚刚进入中国,度不高,但是其实在国外已经做得很不错了,如Wisent等,他们在国内有办事处,我会从那里拿,血清的品质和HYCLONE不相上下,但价格相对优惠很多。 胎牛血清解决方案 4、 如何避免血清中产生沉淀? 按如下操作可避免沉淀的产生: (1)解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。 (2) 血清分装冻存时,须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一。 (3) 勿直接由-20℃
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标准新生牛血清解决方案
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
标准新生牛血清解决方案 1、 如何储存和解冻血清才不会使产品质量受损? 将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。 长时间储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。因此,推荐在-20℃以下储存血清,并避免反复冻融。 我们建议血清应保存在-2O℃。若存放于4℃时,请勿超过一个月。若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。 2、血清中包含絮状沉淀,它们是什么,怎么处理? 沉淀包含纤维蛋白和脂蛋白。这是正常特性,不会影响产品性质。要除去沉淀,离心血清(400g,1-2分钟)或者简单的让其沉淀在瓶子底部,将血清小心的转移到另一个无菌瓶里(一般不建议采用过滤的方法除去沉淀,因为沉淀会堵塞滤膜而无法过滤)。大多情况轻轻摇动沉淀并加热至37℃就会再溶解。所以,使用产品时要摇动并加热血清至37℃,沉淀会自然消失。 3、实验室如何选择适合的血清? 国内一致认为HYCLONE的血清是的,但是根据我在北美的经历,国外一般认为GIBCO比HYCLONE好,所以并不是价格决定质量,但是总的来说这两种价格普遍偏贵,一般不是太娇气的细胞,国产的就够用了。此外,由于国内HYCLONE,GIBCO并没有生产线,我们只能从代理商那里买,而代理商又鱼龙混杂,所以买到假货的可能性也很大。所以,我一般会从直销员那里买血清,有的国外生物公司由于刚刚进入中国,度不高,但是其实在国外已经做得很不错了,如Wisent等,他们在国内有办事处,我会从那里拿,血清的品质和HYCLONE不相上下,但价格相对优惠很多。 标准新生牛血清解决方案 4、 如何避免血清中产生沉淀? 按如下操作可避免沉淀的产生: (1)解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。 (2) 血清分装冻存时,须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一。 (3)
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亮发光杆菌低温冷冻保藏技术
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
1、 亮发光杆菌安瓿管或冻存管的准备 用圆底硼硅玻璃制品的安瓿管,或螺旋口的塑料冻存管。注意玻璃管不能有裂纹。将冻存管或安瓿管清洗干净, 121℃下高压灭菌15-20分钟,备用。 2、 保护剂的准备 保护剂种类要根据微生物类别选择。配制保护剂时,应注意其浓度,一般采用10-20%甘油。 3、 微生物保藏物的准备 微生物不同的生理状态对存活率有影响,一般使用静止期或成熟期培养物。 分装时注意应在无菌条件下操作。 菌种的准备可采用下列几种方法: 刮取培养物斜面上的孢子或菌体,与保护剂混匀后加入冻存管内; 接种液体培养基,振荡培养后取菌悬液与保护剂混合分装于冻存管内; 将培养物在平皿培养,形成菌落后,用无菌打孔器从平板上切取一些大小均匀的小块(直径约5-10毫米),真菌取菌落边缘的菌块,与保护剂混匀后加入冻存管内; 在小安瓿管中装1.2-2毫升的琼脂培养基,接种菌种,培养2-10天后,加入保护剂,待保藏。 4、 预冻 预冻时一般冷冻速度控制在以每分钟下降1℃为好、使样品冻结到-35℃。 目前常用的有三种控温方法: —— 程序控温降温法,应用电子计算机程序控制降温装置,可以稳定连续降温,能很好地控制降温速率。 —— 分段降温法:将菌体在不同温级的冰箱或液氮罐口分段降温冷却,或悬挂于冰的气雾中逐渐降温。一般采用二步控温,将安瓿管或塑料小管,先放-20℃至-40℃冰箱中1-2小时,然后取出放入液氮罐中快速冷冻。这样冷冻速率大约每分钟下降1-1.5℃。 —— 对耐低温的微生物、可以直接放入气相或液相氮中。 5、 保藏 将安瓿管或塑料冻存管置于液氮罐中保藏。一般气相中温度为-150℃,液相中温度为-196℃。 6、 亮发光杆菌保藏周期 一般10年以上。 7、复苏方法 从液氮罐中取出安瓿管或塑料冻存管,应立即放置在38℃-40℃水浴中快速复苏并适当摇动。直到内部结冰全部溶解为止,一般约需50秒-100秒。开启安瓿管或塑料冻存管,将内容物移至适宜的培养基上进行培养。 Panaxtriol 含量: 进口/国产 人
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别告诉我血清和血浆您还分不清?
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
很多的科研朋友认为血清和血浆没有区别,针对这个问题,我司钱在询问技术部后,为您带来的简单分析。 其实血清和血浆是有很大的区别的,血浆里含有纤维蛋白原,血清中没有。血液凝固后1~2小时,血凝块会发生回缩,并释出淡黄色的液体,称为血清。血浆是血液除去血细胞后的成分。其组成绝大部分是水,其次是各种血浆蛋白。血清与血浆的区别,在于前者缺乏参与凝血过程被消耗掉的一些凝血因子和纤维蛋白,但增添了少量血液凝固时由血管内皮细胞和血小板释放出来的化学物质,血清不可以再凝。 血浆:离开血管的全血经抗凝处理后,通过离心沉淀,所获得的不含细胞成分的液体,即血浆。 血清:离体的血液凝固之后,血凝块聚缩释出的液体,即血清。 其实粗略的说,血清与血浆的区别,主要在于血清不含纤维蛋白元。纤维蛋白原能转换成纤维蛋白,具有凝血作用血浆一般是大面积烧伤的病人使用,而血清可以用来检验血型。 我司是一家专业从事“产品研发生产、市场销售、技术服务”为一体的高科技生物技术公司,公司生产的产品质量有保证,含量高,能够给实验带来准确的结果。同时试剂随货附带质检报告和图谱,能为用户更好的解决各种疑难问题。如有需要可我司销售人员,我们将竭诚为您服务。
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如何为即用型平板培养基灭菌
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
我公司即用型平板培养基的三大优势: 1. 快速、简便、节省时间; 2. 结果直观,一目了然(根据颜色判定结果)。 3. 灵敏度高、特异性强,大大减少了后续的鉴定步骤(确证试验)。 如何为培养基灭菌? 在加热灭菌前,成分应边搅拌边溶解于水中。高压灭菌的时间取决于培养基中微生物的含量,容器的大小,每个容器中物质的体积和灭菌锅内容器的空间。 在制备时,由于污染的微生物的含量通常很低,所以影响高压时间的主要变量取决于上述其他的几个因素。灭菌时间通常要在121℃下保持15~20min,这个时间从中心温度达到121℃开始计算。可以将热电偶放人灭菌锅内部中心进行测定。 lOOmL的瓶子或烧杯单独放在髙压锅中达到121℃大约需要10min,如果多个瓶子紧挨着放满灭菌锅内的丝悬筐中,瓶子中的物质需要 20min才能达到121℃如果培养基或稀释液的体积很大时,则需要更长的时间;例如单独使用1L的瓶子温度达到121℃时需要20min,如果许多这样的瓶子紧挨着放满灭菌锅内的丝悬筐中,则中心温度要达到121℃需要30mm或更长的时间。为了达到灭菌的目的,它和稀释液进行高压灭菌时,即用型平板培养基惟一正确的方法是将热电偶放入灭菌锅中测定。 分装在大的容器中时,可能会因为延长灭菌加热时间而造成 热降解。因此在高压灭菌前,先将培养基成分溶解后分装到较小的容器中。 由于配制的原料不同,使用要求不同,而贮存保管方面也稍有不同。一般在受热、吸潮后,易被细菌污染或分解变质,因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。一些需严格灭菌的需要较长时间的贮存,必须放在2~6℃的冰箱内。 Chrysin 含量: 进口/国产 白杨素 20mg/支 英文名称 HPLC≥98% 规格: 含量: 进口/国产 白杨素-6-C-葡萄糖基-8-C-阿拉伯糖甙 20mg/支 英文名称 HPLC≥98% 规格: Camptothecine 含量: 进口/国产 喜树碱 20mg/支 英文名称 HPLC≥98% 规格: Euhorbiasteroid 含量