-
STELLARIS白激光技术的原理与应用优势
作者：德尔塔 日期：2022-04-14
STELLARIS新一代白激光 STELLARIS新一代白激光（WLL，White Light Laser）与Leica Power HyD系列检测器结合，使您可自由选择所有光谱，并准确组合适当的探针来解答您的实验问题。 白激光与声光分束器（AOBS）的结合，可最多同时使用8条独立的激发谱线。您可以调整每条激发线和检测范围，使其与样本中染料的激发谱精准匹配；可选择440nm到790nm之间的任何一个波长，匹配激发样本中的每一个荧光团，这意味着可以最大程度提高激发效率、减少交叉激发和样本损伤，并在实验中加入新型染料。 什么是白激光？ 超连续白激光可将单色激光转变为连续波长的激光，后者跨越了可见光光谱中的很大一部分。从这个“激光彩虹”中，您几乎可以选择任何一种波长和光强度来激发样本。 传统激光器通常是单色的，或者一次仅发射几条离散的激光线，而白激光与此不同，白激光与AOBS结合能够同时提供多条激发线（最多8条）。我们的高效脉冲白激光、AOBS和光谱探测系统三者的独特组合，是让您能够完全自由地选择波长所必不可少的架构。徕卡显微系统将这些技术与业界领先的探测技术相结合的强大实力树立起共聚焦成像的新标准。 选择一种颜色，任何一种颜色！ 使用白激光可极大地扩展您的多色共聚焦成像能力。研究人员几乎可以使用可见光范围内能够想到的任何一种颜色激发样本。STELLARIS 5和STELLARIS 8上具备的最新白激光配置能够将可使用的荧光团的范围扩展到近红外一区（NIR），为您提供更全面的光谱宽度。 STELLARIS 8还可将此范围扩展到蓝色光谱，提供从440nm到790nm的范围。研究人员可以在STELLARIS 5和STELLARIS 8相应激发范围内的任何一点上选择确定的激发波长。这种革命性的成果让您对荧光团的选择摆脱传统固定谱线激光共聚焦系统的限制，让STELLARIS精准适配您的样本。 COS7有丝分裂细胞。染色质（青色，mCherry），有丝分裂纺锤体（黄色，EGFP），高尔基体（红色，Atto647N），线粒体（绿色，AF532），肌动蛋白丝（紫色，SiR700
-
细胞培养之秘密花园篇
作者：德尔塔 日期：2022-04-14
众所周知，细胞培养中最常见的组合就是基础培养基+血清了。随着科研的深入，无血清细胞培养基应运而生，它添加了血清的主要成分：粘附因子、生长因子、必需的营养物质和激素等，能减少血清带来的不利因素，使细胞培养的条件更稳定。然而在细胞培养中，常常被大家所忽视的细胞培养辅助试剂也发挥着举足轻重的作用。今天小编就带您来探索一下细胞培养的秘密花园——细胞培养辅助试剂。 秘密花园之胰酶篇 使用胰酶，你必须要注意的事情 ❤ 胰酶的作用原理是什么呢？ 胰酶是一种蛋白酶，酶切位点是肽链的Lys或Arg两个残基的羧基端肽链，通过在特定位置上降解蛋白，使细胞膜上和培养皿结合处蛋白降解，从而使两者分离。这时细胞在自身内部细胞骨架的张力以及培养液表面张力的作用下成为球形。 ❤ 使用胰酶时需注意哪些细节问题？ 在使用胰酶（Trypsins）细胞消化液的过程中要特别注意避免消化液被细菌污染。胰酶细胞消化液消化细胞时间不宜过长，否则细胞铺板后生长状况会较差，做流式时的CD Marker也可能会下降。胰酶进行分装时尽量分装成多瓶，并遵守3次左右用完和只装2/3体积的原则。因为冷冻保存时液体体积会膨胀，多次使用同一瓶胰酶反复冻融会降低消化效果并可能造成污染。胰酶适用于消化细胞间质较少的软组织和传代细胞，如胚胎、上皮、肝、肾等组织，但对于纤维性组织和较硬的癌组织效果较差。胰酶消化效果主要与pH值、温度、胰酶浓度、组织块大小和硬度有关。 注意：不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才表示消化好了。 一般肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙状移动就可以了，这时就应该停止消化。 ❤ 如何选择正确的细胞消化试剂？ BI提供动物来源的传统胰酶及基因工程生产的重组胰蛋白酶。 动物胰酶普遍用于血清培养，不同的细胞加入胰酶的成分和浓度不一样。贴壁不牢和半贴壁细胞尽量使用浓度0.05%不含EDTA的胰酶且不需要放在培养箱孵育，这样易于控制，对细胞的伤害也降到最低。对于难消化的细胞就需
-
积木式显微镜结构设计的是与非
作者：德尔塔 日期：2022-04-14
对现代显微镜而言，基本功能可以拆解成三块：光学成像、图像采集、图像处理与分享。 所谓光学成像，即尽量还原镜下样品的形态，色彩等信息；图像采集即将镜下观察结果转换为照片或视频；图像处理与分享，即对样品进行标注，测量并分享。 现代显微镜生产商根据以上三功能，进行产品设计与研发： 各厂商针对三功能进行再次拆解，开发部件： 根据观察样本和应用方向的不同，各厂商开发了针对性的部件来满足用户要求，不同样本需要各个部件完美配合才能得到好的成像效果，以常见的免疫荧光观察为例，一套专业免疫荧光显微镜的构成，为荧光光源+萤石物镜+荧光激发块+高速高灵敏相机+荧光分析处理工作站，部件种类繁多，配置复杂，如果用户对显微镜不够了解，很容易配错。 当前显微镜观察方式基本分为7种，各厂商针对性开发了不同部件，并且不约而同采用了模块化，积木式设计。 模块化设计顾名思义，用户可以通过更换不同部件，来得到不同的功能，积木式设计则是为模块化设计提供一个基本光学显微底座，通过外接方式来实现功能扩展。 如上图，积木式显微镜结构设计带来的好处是显而易见的。它可以用一个基本框架，实现尽可能多的功能，但是凡事都有两面性，积木式设计也有如下几个问题： 1. 系统复杂，不易学习掌握 。 2. 外置部件设计使系统庞大，接线多，占地空间大 。 3. 搬运困难，需要专业人员拆卸装箱后才能搬运，搬运后还需要专业人员再次安装调试。 我们可以参考一下，照相工具的演化如图：我们常用的照相工具，这些年来经历了三步演化，专业单反-微单-智能手机。 对显微镜的未来而言，积木式设计肯定不会消亡，它服务于专精市场，同时集成式设计会是显微镜未来的一个主要方向，通过集成式设计，突出常用功能，简化机械与人机界面，实时数据分享，让显微镜变得易学好用，无缝实时传输图像。 一体化极简设计： 高清成像： 实时图像分享： 我们相信，集成化，极简化，网络化是显微
-
MSC细胞培养流程与操作步骤详解
作者：德尔塔 日期：2022-04-14
MSC培养方法 前段时间我们了解了全能“女神”MSC，那么今天我们将了解，如何进行培养，培养的过程中需要注意哪些事项？ 接下来跟随我们一起做实验吧~ 实验目的 利用间充质干细胞无血清培养基培养分离脐带间充质干细胞。 实验材料 新生儿脐带 实验主要仪器 医用手术器械，生物安全柜，CO2培养箱，6孔培养板，T25培养瓶 实验试剂 表. MSC NutriStem®XF Medium 用途 品牌 货号 名称 规格 保存条件 MSC培养基 BI 05-200-1A MSC NutriStem® XF Basal Medium MSC无血清基础培养基 500ml 4℃ BI 05-201-1U MSC NutriStem® XF Supplement MSC无血清添加剂 3ml -20℃ 细胞贴壁 BI 05-752-1H MSC Attachment solution (100X) MSC贴壁试剂 1 ml 4℃ BI 05-760-1-15 NutriCoat™ Attachment solution (500X) NutriCoat™贴壁试剂 1.5 ml RT BI PLTGOLD010R PLTGold® Human Platelet Lysate 血小板裂解物** 10ml -20℃ **已知血小板裂解物含有大量的外泌体，用户可依照实验目的选用合适的贴壁试剂。 细胞传代 BI 03-079-1A Recombinant Trypsin-EDTA Solution 重组胰酶-EDTA 500ml RT BI 03-048-1C Soybean Trypsin Inhibitor (50X) 大豆胰酶抑制剂 20 ml -20℃ BI 02-023-1A
-
点突变疾病研究的基本套路
作者：德尔塔 日期：2022-04-14
在过去的几十年里，基因**在**遗传性疾病方面取得了重大进展。以基因组学或蛋白组学的方式找到致病基因，再结合细胞水平或动物水平验证，用这种模式产出的高质量文章层出不穷。今天，小赛就借一篇文献和大家聊聊点突变疾病研究的基本套路。 文章梗概 法洛四联症（TOF）是最常见的紫绀型先天性心脏病，通常被认为是遗传和环境因素相互作用的结果。患者直系亲属和后代的先天性心脏病风险增加，说明了遗传因素的贡献。然而，对大多数患者而言，遗传因素仍然难以捉摸。 人们之前发现，血管内皮生长因子（VEGF）信号传导的失调与法洛四联症的发病机制有关，并发现一些患者编码血管内皮生长因子受体2的基因（KDR）存在罕见变异。不过，他们并不清楚KDR变异在法洛四联症发病机制中的作用。 荷兰阿姆斯特丹大学医学中心领导的一个国际研究团队近日在《Genetics in Medicine》杂志上发表文章，报道了KDR基因变异在法洛四联症发病中的作用。他们发现，罕见的KDR变异，特别是蛋白截短变异，与法洛四联症密切相关。未来在临床诊断中可以考虑对法洛四联症患者进行KDR筛查。 获得候选突变基因 在这项研究中，研究人员首先对一个摩洛哥血统的家族进行了外显子组测序，该家族有两个孩子患有严重的法洛四联症（图1）。测序结果显示两名患者携带85个非同义或剪接位点变异，而且没有一个是纯和的。由于该家族疑似隐性遗传，研究人员优先考虑双等位基因变异。两个基因包含多个罕见的变异。在对亲本中的变异进行测试后，仅剩下一组经 Sanger 测序验证的 KDR 复合杂合变异：KDR-p.(Gly345Trp)和KDR-p.(Gly537Arg)。另一个未患病的姐妹没有携带任何KDR变异。 图1. 家族谱系。两个受影响的孩子用黑色符号标记，未受影响的父母和兄弟姐妹用白色符号标记。 KDR基因编码了血管内皮生长因子受体2（VEGFR2）。此次发现的这两个变异位于VEGFR2的胞外免疫球蛋白样结构域4和5中，并且受影响的残基在进化上是保守的。此外，他们还在其他生
-
DMD基因敲除小鼠助力杜氏肌营养不良症的研究
作者：德尔塔 日期：2022-04-14
想调整研究方向，获得学术研究突破口？想获得论文选题思路，提高发文命中率？你需要了解学科发展态势和未来走向！赛业生物专栏《Gene of the Week》每周会根据热点研究领域介绍一个基因，详细为您介绍基因基本信息、研究概况和应用背景等，助您保持学术研究敏锐度，提高科学研究效率，期待您的持续关注哦。今天我们要讲的主角是DMD及其突变导致的遗传性疾病——杜氏肌营养不良症。 DMD基因简介 DMD基因，负责编码Dystrophin蛋白，中文名称为肌营养不良蛋白或抗肌萎缩蛋白。DMD蛋白是肌膜稳定所必需的，因为它提供了肌膜上肌萎缩蛋白相关蛋白复合体(DAPC)和肌动蛋白细胞骨架之间的重要联系。该蛋白起缓冲连接的作用，将肌肉细胞锚定在周围的结构上，DMD蛋白的缺乏会导致DAPC的分解和肌动蛋白与细胞外基质之间相互作用的丧失，从而导致肌纤维容易受到机械损伤[1]。DMD基因位于人类的X号染色体上，基因全长约2.2Mb，共有89个外显子，氨基酸数量为3685个。该基因的突变与杜氏肌营养不良症（Duchenne muscular dystrophy，DMD）相关。 图1. 肌营养不良蛋白作为内部细胞骨架和细胞外基质之间的重要纽带[1] 表1. DMD的基本信息 备注：标有√的意为赛业红鼠资源库有该种保存状态的小鼠 杜氏肌营养不良症 杜氏肌营养不良症（Duchenne muscular dystrophy，DMD）是一种严重的X染色体隐性遗传疾病，该疾病是由DMD基因的突变引起的，这种突变会阻断肌肉中DMD蛋白的产生，从而导致肌肉萎缩并引发多种并发症。贝克尔肌营养不良症（Becker muscular dystrophy, BMD）和DMD一样，是由DMD基因中的突变引起的，但由于突变位点的不同，仍能产生部分具备功能性的DMD蛋白，因此BMD患者症状相较于DMD患者要轻。 图2. 健康骨骼肌横截面染色（a-d）和来自DMD患者的骨骼肌横截面染色（e-h）[2] DMD主要发生于男性，全球平均每5000个男婴就有一人患此疾病。患者在2-3岁左右会出现运动困难等早期症状，大多数患者在10-12岁左右开
-
血清培养中出现小黑点原因与预防方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-14
血清在培养基中扮演着这么多的人物，那么它在培养的进程中也会出现一些的问题，比如说：在培养进程中会出现一个个“小黑点”的现象，这是怎样一回事呢？ 我们一旦发现培养基中有黑点，我们先不要着急，也不要慌张，要搞清楚这个黑点是什么？什么构成的？ 首要，要肉眼查询培养基是否混浊，然后，在镜下查询培养细胞生长的状况，黑点是否游动等。如果细胞被污染，微生物则会很多繁衍，培养基就会敏捷变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。如果在镜下查询细胞，生长状况出色，与黑点出现前比较，没有任何改变，那么，黑点的出现或许与以下几种状况有关： 首要或许是细胞生长过老，破碎的细胞残骸；再有或许便是血清质量欠好，重复冻融的效果；然后或许是制作培养基的pH值偏高，不宜细胞生长；其次或许是亦有或许是制作培养基的水质、容器不合格（可应用离心、过滤的方法去除这些黑点）；或许是培养的原代细胞中出现小黑点（或许是原代组织中的杂质，屡次传代能够消除）。 那么我们怎样防止黑点生成呢？经过研究表明至少要做到以下几点： （1）尽或许地减少血清冻融次数； （2）培养基无需37℃水浴； （3）培养基保持PH值7.0- 7.2； （4）严格控制制作培养基的水质，容器定时冲刷； （5）掌握细胞传代的机会，细胞切勿生长过老。 选择血清时要结合专业知识，尽可能选用客观性强的指标，在仪器和试剂允许的条件下，选用特异性强、ELISA试剂盒灵敏度高、准确可靠的客观指标，一定要事先规定读取数值的严格标准，只有这样才能准确地分析自己的实验结果，从而也大大提高了自己实验结果的可信度。
-
各类抗体的保存办法小结
作者：德尔塔 日期：2022-04-14
抗体(英语:antibody)，(免疫球蛋白不仅仅只是抗体)是一种由浆细胞(效应B细胞)分泌，被免疫系统用来鉴别与中和外来物质如细菌、病毒等的大型Y形蛋白质，仅被发现存在于脊椎动物的血液等体液中，及其B细胞的细胞膜表面。抗体能识别特定外来物的一个独特特征，该外来目标被称为抗原。 抗体的保存是否得当，会直接影响抗体的活性和运用作用，那针对不同类的抗体我们应怎样保存呢？下面本司教您各类抗体的保存办法。 1、抗体浓度 抗体浓度过低（
-
预防细胞培育基污染的四大方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-14
细胞培养基既是培养细胞中供给细胞营养和促使细胞生殖增殖的基础物质，也是培养细胞生长和繁殖的生存环境。细胞培育基受各种霉菌、细菌和支原体污染后，一般都较难扫除或杀灭，其间以支原体更难扫除，因此从预防着眼为上。那细胞培育基预防污染的四大方法如下： 一、抗生素除菌法：用BM－1（截耳素衍生物）和BM－2（四环素衍生物）抑制支原体。 1．抗生素制备：均可用PBS配成250×浓缩液－20℃备用。 2．处理：取受支原体污染的细胞，吸除培育液，参加含BM-1的1640培育液培育3天后，吸除培育液，再参加含BM-2的1640培育液培育4天，如此连续三个轮回。 3．检测：用33258荧光染色镜检（每个轮回末应检测一次）。 4．培育：铲除支原体后的细胞，在不加上述抗生素的培育基液中，再传代培育3～4次。 5．镜检：如铲除不完全可再进行处理至纯洁停止（一般3个轮回即能被完全消除），即先用含BIP培育液培育12天后，再按上述方法处理。 二、加温除菌法 把受污染的细胞置41℃中作用5～10小时。 三、动物体内接种除菌法 把受支原体污染的肿瘤细胞接种在同种动物皮下或腹腔中，借动物免疫系统消除支原体，而肿瘤细胞却能在体内持续成长，待一定时间后，从体内取出细胞培育基再进行培育繁衍。 四、巨噬细胞吞噬法 从动物腹腔采取巨噬细胞，为扫除其它细胞成分，可先进行纯化，然后再参加被支原体污染的细胞培育液中混合培育。在培育过程中，为查看支原体是否已被消除洁净，可利用支持物培育法验证，取出支持物逐日染色、镜检调查，至支原体已被消除洁净停止。
-
慢病毒（LV）包装的常见问题及解答
作者：德尔塔 日期：2022-04-14
慢病毒（Lentivirus，LV）是由人类免疫缺陷病毒（HIV）改造而来的一种病毒载体，属于逆转录病毒。慢病毒可将特定基因片段随机、稳定地整合到宿主细胞的基因组中，实现目的基因的持续稳定的表达目的产物，因此，目前慢病毒载体已经广泛地应用于基因的表达调控如过表达，干扰和基因敲除。 然而，在做病毒包装实验中，科研工作者常遇到一些问题，比如为何我的LV包装出毒量很低？包装出来的LV感染细胞效率低？感染细胞后生长状态差等，下面就由赛业生物细胞生物学产品经理为大家解答这些常见的问题。 为何我的LV包装出毒量很低？ 为什么都是采用同样的慢病毒包装系统，别人次次成功，我的不是滴度低就是稳定性差？这是因为除了包装系统本身，LV的包装还与下列几个因素密切相关： 1) 细胞状态：LV的包装一般使用293T细胞，293T细胞的活力、生长状态，是否处于对数生长期、铺板是否均匀等对病毒的产量影响很大，并控制转染前密度为50~60%。 2) 目的基因：目的基因的大小、序列及翻译的蛋白是否含有毒性均会影响包装效果；例如，若目的片段较大（＞2.5k），则可能会导致包装滴度下降，甚至无法包装。某些过表达会产生细胞毒性的蛋白，可能会导致细胞异常从而出毒量低（可考虑更换为腺病毒）。 3) 质粒质量：做好阴性对照（GFP组），确保包装目的基因的载体构建的完整性，并做好纯化。 4) 收毒时机：转染后24、48h观察细胞生长状态及荧光状态，生长状态良好一般于48h第一次收集病毒上清，换液后于72h再次收集病毒上清。 包装出来的LV感染细胞效率低？ 理论上LV感染细胞的能力很强，而且能感染分裂和非分裂期的细胞，但为什么我的感染效果总是不理想？影响LV感染效果的因素有哪些？ 1) 细胞类型：有些细胞本身就较难被感染，如某些原代细胞，可考虑加大病毒量或采用浓缩病毒进行感染。 2) 细胞生长状态：感染细胞前，需要保证细胞处于良好的生长状态，以及合适的生长密度，细胞膜的流动性、与细胞表面的接触面积及表面受体
-
对医疗器械进行手动目视检查的挑战与解决方案（上）
作者：德尔塔 日期：2022-04-14
如何借助数字化增强解决方案克服这一挑战（上） 本文旨在对医疗器械行业中普遍存在的手动目视检查是如何导致不一致结果这一问题进行讨论。此外，本文还讨论了质量经理和操作员在进行手动检查时所面临的挑战，以及他们是如何使用数字化增强检查解决方案来克服这些挑战的。手动检查导致出现不一致现象的原因是多方面的。主要原因在于，很难保证进行检查的多名操作员都遵循标准规程，因为检查过程中存在很多手动步骤，如数据传输和纸质文档，而非数字文档。相反，数字化增强解决方案可以实现更一致、更有效的检查。为了帮助用户实现这一目标，用于可追溯显微镜检查的智能设备Exalta可为所有进行检查和缺陷分析的操作员提供逐步作业指导，使用易于显示的参考图像并进行叠加以便进行比较，将结果与既定规格进行比较，并能实现数据的自动化存储及数字报告生成。 引言 在医疗器械行业，我们经常对产品部件进行手动目视检查，以便进行产品质量保证和质量控制（QA/ QC），尽管手动目视检查可能会导致出现结果不一致的情况。手动检查之所以如此困难且可靠度不高，其原因是多方面的。而手动检查所面临的挑战，以及数字化增强检查解决方案如何能够克服这些挑战也一直是人们讨论的话题。借助Leica Microsystems制造的用于可追溯显微镜检查的智能设备Exalta，医疗器械行业的质量经理和操作员可以采用这样一种数字化检查方式。与通常使用的手动解决方案相比，该设备有助于客户进行更快捷的分析，并为客户带来更加一致、可靠的检查结果。 数字化与手动检查对比优势 1. 所有操作员都遵循标准操作规程（SOP） 2. 所有操作员进行一致检查 3. 自动化生成报告及处理 使用显微镜进行手动目视检查 在许多情况下，使用显微镜进行手动目视检查会导致效率低下，检查结果不可靠。之所以会存在这种缺点，可能是由于整个检查流程中多个步骤的不一致性所导致的——从标准规程的定义和执行，到设备的实际检查和结果报告生成。典型的手动检查
-
流式细胞术的基本原理和常见应用
作者：德尔塔 日期：2022-04-14
流式细胞术（Flow Cytometry，FCM）从字面意义理解，Flow——Fluid、Cyto——Cell、Metry——Measurement，流式细胞术指的就是检测流动细胞的一种技术，能在细胞流动的状态下，快速检测细胞或颗粒物的特异性指标。它是一种在功能水平上对单细胞或其他生物粒子进行定量分析和分选的检测手段，具有速度快、精度高、准确性好等优点，成为当代最先进的细胞定量分析技术。 基本原理 流式细胞术用到的仪器叫流式细胞仪（Flow cytometer ），是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量，并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来。目前广泛应用于外周血细胞的免疫表型分析、凋亡分析和细胞因子的检测。 在一定的压力下，鞘液带着细胞或者微粒通过喷嘴中心进入到流式照射室，在流式照射室的分析点，激光照射细胞并发生散射和折射，发射出散射光，同时被荧光标记的颗粒发射出荧光。散射光和荧光分别被不同的检测器接收，通过光电倍增管将检测到的荧光信号转换成电信号，这些电信号放大后再经过数据化处理输入电脑，供我们进行分析。 流式细胞仪工作原理 流式通道 流式通道主要可以分为散射光通道和荧光通道。 流式细胞仪中能测定两种方向的散射光信号，即FSC（前向角散射）和SSC（侧向角散射）。 FSC的值代表细胞的大小：细胞体积越大，其FSC值就越大。所以可以利用细胞的FSC值初步比较细胞的大小，利用FSC值对细胞进行分群和分类。 SSC的值代表细胞的颗粒度：细胞越不规则，细胞表面的突起越多，细胞内能够引起激光散射的细胞器或者颗粒性物质越多，其SSC值就越
-
药用注射级胆固醇的提取方法及作用效果
作者：德尔塔 日期：2022-04-14
在脂质体制备过程中为何都要使用胆固醇？药用注射级胆固醇有何效果是如何被提取出来的？本篇文章就让AVT小编带大家了解一下药用注射级胆固醇吧！ 胆固醇有药用的用途，临床使用的很多激素都是用胆固醇来合成，另外，胆固醇还是一些先进药物载体的添加剂，说到作用原理，小伙伴们应该知道，胆固醇可调节磷脂双分子层膜的流动性，使膜通透性降低，减少药物渗漏。同时可使脂膜维持一定柔韧性，增强脂质体囊泡抗击外部条件变化的能力，并对磷脂的氧化有一定保护作用。 制备普通载药脂质体，胆固醇是必须的添加物，用量一般为CHO:PC=0.3~1（摩尔比）。因PC和药物的不同，存在胆固醇的zui佳用量。在一定范围内，脂质体的粒径、氧化稳定性、物理稳定性与胆固醇添加量成正相关，超出范围时，超过膜负荷，会造成部分脂质体破裂。另外，胆固醇的添加会对膜相变温度有一定影响，临界值以内使相变温度降低，临界值以上，使相变温度升高。 温敏脂质体有特殊的动力学特征，为了降低相变温度时的稳定性，迅速释放药物，可不添加胆固醇。 | 中文名称：胆固醇（供注射用） | 商品名：CHO-HP | 英文名称：Cholesterol (for injection) | 化学名称：胆甾-5-烯-3β-醇 | 英文化学名称：Cholest-5-en-3β-ol | 分子式： C27H46O | 生产商：日本精化株式会社 | CAS号：57-88-5 | DMF号：024780 | EINECS号：200-353-2 | 备案登记号：F20170000106 | 级别：药用注射级 | 执行标准：USP、EP、CP | 用途：脂质体膜材、乳化剂 | 溶解性：易溶于甲醇、乙醇、氯仿，不溶于水 | 分子量：386.7 | 保存条件：常温 | 注意事项：避免强酸、强碱、强氧化性物质 | 货号：001001 药用的胆固醇每年需求量很大，但是，因为是多手性物质，合成困难，目前还是采取动物组织提取及羊毛脂提取两种方式获得。 动物组织提取 动物组织提取法是以新鲜动物内脏、骨髓及脑为原料，工艺为bin酮提取→乙醇精制→硫酸水解→低温结
-
药物稳定性研究的实验原理和注意事项
作者：德尔塔 日期：2022-04-14
药品的稳定性是指其保持理化性质和生物学特性不变的能力。若药品的稳定性差，发生降解而引起质量变化，则不仅可能使药效降低，而且生成的杂质还有可能有明显的毒副作用，影响药品使用的安全性与有效性。 稳定性试验的目的是考察原料药或药物制剂在温度、湿度、光线的影响下随时间变化的规律，为药品的生产、包装、贮存、运输条件提供科学依据，同时通过试验建立药品的有效期，保证用药安全。 一、稳定性试验基本要求 要求1: 影响因素试验用1批供试品进行（原料药或制剂）。加速试验与长期试验要求用3批供试品进行。 要求2: 原料药供试品应是达到一定规模生产的产品。供试品量相当于制剂稳定性试验所要求的批量;原料 药合成工艺路线、方法、步骤应与大生产一致。 要求3: 药物制剂供试品应是放大试验的产品，其处方和工艺与大生产一致。药物制剂，如片剂或胶囊剂，每批放大试验的规模，至少应为10000片或粒。大体积包装的制剂，如静脉注射液等，每批放大规模的数量至少应为各项试验所需总量的10倍。特殊品种、特殊剂型所需数量，根据具体情况另定。 要求4: 供试品的质量标准应与临床前研究及临床试验和规模生产所使用的供试品质童标准一致。 要求5: 加速试验与长期试验所用供试品的包装应与上市产品一致。原料药所用包装应采用模拟小桶，但所用材料与封装条件应与大桶一致。实验室规模的产品仅可用作辅助性稳定性预试验。 要求6: 研究药物稳定性，要采用专属性强、准确、精密、灵敏的药物分析方法与有关物质(含降解产物及其他变化所生成的产物)的检查方法，并对方法进行验证，以保证药物稳定性结果的可靠性。在稳定性试验中，应重视有关物质，特别是降解产物的检查和鉴定。 要求7: 由于放大试验比规模生产的数量要小，故药品注册申请人应在获得批准后，从放大试验转人规模生产时，对最初通过生产验证的3批规模生产的产品仍需进行加速与长期稳定性试验。 二、原料药物与
-
伊尼霍夫氏碱法与盖勃法(酸法)两种乳脂快速检测方法介绍
作者：德尔塔 日期：2022-04-14
牛乳脂肪作为一项国家检测牛乳质量的重要指标之一，已被广大生产厂家和消费者所重视。牛奶脂肪含量的测定方法有重量法和容积法，容积法较重量法测定速度快、省时、省力。常用的一些方法有罗兹—哥特里法、伊尼霍夫氏碱法、盖勃法等。在我国最常用的乳脂测定方法，分别是伊尼霍夫氏碱法与盖勃法(酸法)。 牛乳脂 牛乳的脂肪以微细的球状呈乳浊液分散在乳中，是牛乳的主要成分之一。 牛乳中的脂肪含量随乳中的品种及其他条件而异，质量分数一般为３％～５％之间。 由于乳脂肪的乳浊液相当稳定，所以测定乳脂肪时，借助醇、酸、碱等化学处理的方法来达到破坏脂肪球膜， 结合成脂肪层的目的。 伊尼霍夫氏碱法 所需材料 盖勃乳脂计、恒温水浴锅（也可采用铝锅加水在电炉上加热）、试剂 方法流程 碱试剂：在第１个烧杯中加人３０gＮａＯＨ，用３００ｍｌ蒸馏水溶解； 在第１个烧杯中加入４０gＮａ。Ｃ０３，用３００ｍｌ蒸馏水溶解；在第３个烧杯中用水将７５gＮａＣＬ加热到６５～７０℃使其溶解；然后将①②③溶液混合在一起，注入容积为１０００ｍｌ的容量瓶中，用水加至刻度， 用脱脂棉滤入试剂瓶中，塞紧备用。 异戊醇一乙醇混合液：将１３０ｍｌ的异戊醇于２１０ｍｌ的９６０乙醇混合，加入试剂瓶中，塞紧备用。 将盖勃乳脂计置于试管架上， 用吸管吸取１０ｍｌ碱试剂， 注人乳脂计内， 再用另一只牛奶吸管吸取摇匀的牛乳样品１０ｍｌ，注入碱试剂中，然后再加入异戊醇一乙醇混合液ｌｍｌ，用橡皮塞将乳脂计塞紧，将内容物小心混合（振荡）， 直至出现泡沫使牛乳凝块溶解为止。 江牛乳乳脂计放入７０～７３℃水浴锅内保持１０min，约５分钟振荡一次，水温勿降至７０℃一下。然后将乳脂计倒置，是橡皮塞向下，再置７０～７3℃水浴锅内保持ｌＯ～１５min（时间长短取决于泡沫消失程度），直脂肪柱不含泡沫时取出，读数，即为脂肪的百分率。 盖勃氏法(酸法) 所需材料 盖勃氏乳脂计、硫酸、异戊醇、刻度吸管、乳脂离心机
咨询热线
18133906270
德尔塔官方微信