【产品介绍】：

ReadiLink BSA偶联试剂盒 货号                             5501                              存储条件                                   r/l                                规格 1 kit 价格 Ex (nm) Em (nm) 分子量 溶剂 产品详细介绍 样品实验方案 简要概述 1.准备蛋白质溶液 2.准备半抗原解决方案 3.将蛋白质与半抗原混合到EDC中 4.在室温下孵育反应2小时 5.通过脱盐来纯化缀合物 操作步骤 1.准备BSA-Hepten共轭： 1.1将200μLDdH2 O加入到BSA（组分A）的小瓶中以制备10mg / mL溶液。 1.2在450μL缀合缓冲液（组分B）中溶解*多2mg半抗原。注意：一些半抗原可能具有有限的溶解度，使用DMSO（在*终的缀合溶液中<30％）首先溶解它。较高浓度的DMSO可能使载体蛋白不可逆地变性。 1.3将450μL半抗原溶液加入200μLBSA溶液中，得到Hapten-BSA混合溶液。 1.4将Hapten-BSA溶液加入一小瓶EDC（10mg）（组分C）中，通过温和混合溶解。在室温下孵育2小时。 1.5通过脱盐纯化缀合物以除去未反应的交联剂和蛋白质防腐剂（例如叠氮化钠）。 2.纯化BSA-Hepten结合物： 2.1使用前将1瓶纯化缓冲液（组分D）解冻至室温。未使用的缓冲液可以在4°C下储存1周。 2.2拧下脱盐柱（组件E）的底部盖子并松开盖子。将色谱柱放入收集管中。 2.3将柱以1,000g离心2分钟以除去储存溶液。 2.4取下盖子，慢慢地向柱子中加入1 mL纯化缓冲液。以1,000g离心2分钟，取出缓冲液。再重复此步骤3次，从收集管中丢弃缓冲液。 2.5将色谱柱放入新的收集管中，轻轻地将样品放入紧凑树脂床的中心。 2.6将柱以1,000g离心2分钟以收集样品。 2.7现在可以将Hapten-BSA缀合物用于**。如果要将Hapten-BSA缀合物储存超过几天，则对缀合物进行无菌过滤，并在4°C或-20°C下储存。注意：如果在一周内使用缀合物，可以使用PBS进行纯化。如果要冷冻缀合物，使用纯化缓冲盐（组分D）进行纯化。如果在缀合中使用DMSO，则制备具有相同百分比的用于缀合的DMSO的纯化缓冲盐。这将使脱盐期间塔中的沉淀*小化。如果在缀合过程中形成沉淀，则将沉淀的材料离心，收集上清液并保存沉淀物。净化上清液。将沉淀物与纯化的缀合物合并。 数据分析 图1.EDC与载体蛋白BSA或KLH（由红球代表）的羧基反应，形成胺反应性O-酰基异脲中间体（中心分子）。 O-酰基异脲中间体与由较小的蓝色球代表的抗原分子上的胺基反应，产生通过稳定的酰胺键连接的两个分子的缀合物[请注意O-酰基异脲中间体也易于水解]。 产品留言 标题 联系人 联系电话 内容 验证码 点击换一张 注：1.可以使用快捷键Alt+S或Ctrl+Enter发送信息!2.如有必要,请您留下您的详细联系方式!美国AAT Bioquest Inc是生物光谱领域的全球***，AAT 产品帮助全世界的科学家和生物医药研究者更好的了解生物化学，**学，细胞生物学和分子生物学，更高效的筛选新药。