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DiI细胞膜荧光探针橙红色

发布时间:2022-01-02     作者:德尔塔   分享到:

【产品介绍】:

品牌:德尔塔 产品简介:DiI 即 DiIC18(3),全称为 1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'tetramethylindocarbocyanine perchlorate,是最常用的细胞膜荧光探针之一,呈现橙红色荧光。染料 DiI, DiD, DiO 和 DiR 是一类亲脂性荧光染料家族,用于标记细胞膜和疏水性组织。这是一类环境敏感型荧光染料,当它们与膜结合或者与亲脂性生物分子(例如蛋白质,虽然在水中其荧光强度很弱)结合时,其荧光强度显著增强。它们具有很高的淬灭系数,偏光依赖性和很短的激发寿命。一旦应用于细胞中,这种染料会在细胞内质膜中逐步扩散,导致在其最佳浓度条件下,将整个细胞膜染色。它们不同的荧光颜色:DiI(橙红色荧光)、DiO(绿色荧光)、DiD(红色荧光)、DiR(深红色荧光),为活细胞多色彩荧光成像分析和流式细胞术提供了一种便捷的工具。DiI可以用标准的 TRITC 滤光片检测。 DiI 通常不会影响细胞的生存力因此被广泛用于正向或逆向,活的或固定的神经等细胞或组织的示踪剂或长期示踪剂 (long-term tracer)。被 DiI 标记的神经细胞在体外培养的条件下可以存活长达 4 周,在体内可以长达一年。DiI 在被固定的神经元细胞膜上的迁移速率为0.2-0.6 mm/day,在活的神经元细胞膜上的的迁移速率为 6mm/day。 DiI 除了用于细胞膜荧光标记外,还可用于检测细胞的融合和粘附,检测发育或移植过程中细胞的迁移,通过FRAP (Fluorescence Recovery After Photobleaching) 检测脂在细胞膜上的扩散,检测细胞毒性和标记脂蛋白等。 基本信息: 规格 10mg 产品形式 粉末 Ex (nm) 550 Em (nm) 567 分子量 933.88 溶剂 无水乙醇、DMSO 和 DMF 产品应用标准实测:(由美仑细胞生物学项目组独立完成) 本品配成 5mM 溶液后为紫粉色液体,溶液澄清度且颜色检测无可见异物;然后进行荧光染色检测:工作条件:荧光显微镜,C6 细胞,400×,工作浓度 5μM。 结果:经细胞膜荧光染色,在40倍物镜下可看到清晰荧光。此浓度下在荧光显微镜下看到的荧光亮度亦足以用于共聚焦检测。  储存条件:-20℃,避光防潮密闭干燥 运输条件:2~8℃运输 操作说明(仅供参考)  染色液制备 (1)配置DMSO或EtOH 储存液:储存液用 DMSO或EtOH配置浓度1~5 mM。 【注】未使用的储存液分装储存在-20℃,避免反复冻融。 (2)工作液制备:用合适的缓冲液(如:无血清培养基,HBSS或PBS)稀释储存液,配制浓度为1~5 μM的工作液。 【注】工作液最终浓度建议根据不同细胞系和实验体系来优化。建议从推荐浓度的10倍范围内开始最优浓度的摸索。 悬浮细胞染色 (1)加入适当体积的染色工作液重悬细胞,使其密度为1×106/mL。 (2)37 ℃孵育细胞 2~20min,不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间,之后优化体系以得到均一的标记结果。 (3)孵育结束,按1000~1500 rpm离心5min。 (4)倾倒上清液,再次缓慢加入37℃预热的生长培养液重悬细胞。 (5)重复(3),(4)步骤两次以上。 3. 贴壁细胞的染色  (1)将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。 (2)从培养基中移走盖玻片,吸走过量培养液,将盖玻片放在潮湿的环境中。 (3)在盖玻片的一角加入100μL的染料工作液,轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。 (4)37 ℃孵育细胞 2~20min,不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间,之后优化体系以得到均一的标记结果。 (5)吸干染料工作液,用培养液洗盖玻片2~3次,每次用预温的培养基覆盖所有细胞,孵育5~10min,然后吸干培养基。 4. 显微镜检测 DiI,DiD,DiO,DiR滤光器的选择参见表1。 DiD染色可见红色荧光。 5.流式细胞仪检测 经DiI,DiD,DiO,DiR染色的细胞可分别用流式细胞仪的FL1,FL2,FL3或FL4通道检测。 表1. 细胞膜荧光探针相关产品 货号 产品名称 分子量 Ex/Em 推荐滤光器 MB4240 DiI细胞膜荧光探针橙红色 933.87 550/567 nm XF32-Omega, 31002-Chroma MB6190 DiD 细胞膜荧光探针红色 959.91 644/663 nm XF47-Omega, 31023-Chroma MB4239 DiO细胞膜荧光探针绿色 881.7 484/501 nm XF23-Omega, 31001-Chroma MB12482 DiR细胞膜荧光探针深红色;DiR碘化物 1013.39 748/780 nm XF112-Omega,41009-Chroma 我司所售出产品仅供于科研研究用途(非临床科研研究),每次销售产品行为都适用于我司网上所列明的通用销售条款。 AS 号:41085-99-8 英文名字:Dii perchlorate 质量标准:>95% 分子式:C59H97ClN2O4 · 2020-Biomaterials-IF(12.47)An exosome-like programmable-bioactivating paclitaxel prodrug nanoplatform for enhanced br... pdf下载 >>