【产品介绍】：

过氧化物酶(Peroxidase，POD)试剂盒的正确使用！产品名称：过氧化物酶(Peroxidase，POD)试剂盒试剂的组成：试剂的组成：提取液：液体60mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体60mL×1瓶，4℃保存；试剂二：液体×2瓶，4℃保存；用时每瓶加入5mL试剂一，现配现用；试剂三：液体10 mL×1瓶，4℃保存。POD（EC 1.11.1.7）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，可催化过氧化氢氧化酚类和胺类化合物，具有消除过氧化氢和酚类、胺类毒性的双重作用。检测原理：POD催化H2O2氧化特定底物，在470nm有特征光吸收。实验所需用品：可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水操作步骤：粗酶液提取：1、细菌、细胞或组织样品的制备收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照每200万细菌或细胞加入400μL提取液，超声波破碎细菌或细胞（功率20％，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。称取约0.1g组织，加入1mL提取液进行冰浴匀浆；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。2、血清（浆）样品：直接检测。加样表： 试剂名称（µL） 测定孔 试剂一 520 试剂二 130 试剂三 135 蒸馏水 270 样本 15 测定前将试剂一、二和三37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）放置10min。在1mL玻璃比色皿中按顺序加入上述试剂，加入样本后立即混匀并计时，记录470nm下30s时的吸光值A1和1min30s后的吸光值A2。计算ΔA＝A2-A1。POD活性计算：1、血清（浆）POD活性单位的定义：每mL血清（浆）在反应体系中每分钟A470变化0.01定义为一个酶活力单位。计算公式： POD（U/mL）＝反应总体积（1070μL）÷样本体积（15μL）÷0.01×ΔA =7133×ΔA2、组织POD活性(1) 按样本蛋白浓度计算单位的定义：每mg组织蛋白在反应体系中每分钟A470变化0.01定义为一个酶活力单位。POD（U/mg prot）＝反应总体积（1070μL）÷样本体积（15μL）÷0.01×ΔA测定÷蛋白质浓度（mg/mL）=7133×ΔA÷蛋白质浓度（mg/mL）（2）按样本鲜重计算单位的定义：每g组织在反应体系中每分钟A470变化0.01定义为一个酶活力单位。POD（U/g 鲜重）＝反应总体积（1070μL）÷样本体积（15μL）÷0.01×ΔA÷样品质量（g/mL）=7133×ΔA÷样品质量（g/mL）本产品只供科研实验用，不做其它用途！现货供应，欢迎广大用户前来咨询！ 原创作者：德尔塔