小鼠肾上腺素(EPI)ELISA检测试剂盒检测原理!
【产品介绍】:
小鼠肾上腺素(EPI)ELISA检测试剂盒检测原理! 检测原理: 试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被小鼠肾上腺素(EPI)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并撤底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠肾上腺素(EPI)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。 自备物品: 1.酶标仪(450nm) 2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL 37℃恒温箱 实验步骤(仅供参考) 1. 从室温平衡60min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。 2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL; 3. 待测样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL; 4. 随后标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。 5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。 6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。 7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。 注意事项: 1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡60分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶玩全溶解后再使用。样本在使用前也要在室温平衡60分钟。 2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。 3. 预处理后的样本无需稀释,直接取10μL加样即可。 4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。 5. 所有液体组分使用前充分摇匀。 6.本产品仅供科研实验用,不做其它用途! 原创作者:德尔塔