谷草转氨酶(AST/GOT)检测试剂盒检测原理及注意事项!
【产品介绍】:
谷草转氨酶(AST/GOT)检测试剂盒检测原理及注意事项! 产品名称:谷草转氨酶(AST/GOT)检测试剂盒 (微板法) 产品规格:96T 储存条件:4-8℃ 有效期:6个月 检测原理: AST/GOT能使a-酮戊二酸和天门冬氨酸移换氨基和酮基,生成谷氨酸和草酰乙酸。草酰乙酸在反应过程中可自行脱羧成丙酮酸。丙酮酸与2,4二硝基苯进反应生成2,4二硝基苯腙,在碱性溶液中显红棕色。比色后,查标准曲线,可求得酶的活力单位。 检测范围: 本试剂盒可以测定各类动物血清(浆)、组织及培养细胞、细胞培养液等样本中谷草转氨酶活力(AST)。 注意事项: 1.比色法中常用的有赖氏(Reitman-Frankel)法及金氏法(King)法。赖氏法标准曲线所定单位数,是用实验方法和卡门氏反光光度法(速率法)作对比测定求得的。以卡门氏单位报告结果比较准确。 卡门氏单位定义:1ml液体,反应液总容量3ml,波长340nm,1cm光径,25℃,1min内所生成的丙酮酸,使NADH氧化成NAD+而引起吸光度每下降0.001为一个单位(1卡门氏单位=0.482U/L,25℃) 2.一般血清标本内源性酮酸很少,血清对照孔吸光度值接近试剂空白孔(以双蒸水代替血清,其他和对照孔同样操作)。所以成批标本测定时,一般不需要每一标本都作本身血清对照孔,以试剂空白孔代替即可,但对严重脂血、黄疸或溶血血清,每份标本应做对照孔。 3.标本酶活力超过150卡门氏单位时,用生理盐水稀释血清后重测。 4.加入2,4-二硝基苯肼溶液后,应充分混匀,使反应wan全,加氢氧化钠溶液的方法要一致,不同方法会导致吸光度读数的差异。 5.血清中AST在室温(25℃)可保存2天,在0--4℃可保存一周,在-25℃可保存1个月。 原创作者:德尔塔