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原代培养经验分享

发布时间:2022-04-02     作者:德尔塔   分享到:

【产品介绍】:

经验分享: 1.原代细胞铺満瓶底后弃原液,PBS冲洗2次。 2.加入0.25%Trypsin-0.02%EDTA,量覆盖瓶底即可,室温作用,镜下观察至组织块周围的细胞回缩,立体感增强。 3.弃去消化液,PBS轻漂一遍(目的是除去EDTA,它对脆弱的原代细胞很不好)但不要用力摇晃,以免部分消化稍过的细胞流失。 4.加入培养液吹打,不要产生气泡,对细胞有损。 5.吸出2/3的悬液传入新瓶。 6.向原瓶中余下的1/3细胞悬液中补加2/3的新培养液,与未消化的组织块继续培养。 7. 24小时内新的细胞又从组织块中爬出啦,等铺满后再如上所述做一次吧。   注: 1.只有当原代培养时组织块较多时才这样做,否则得不偿失。 2.保留1/3的细胞是为了让余下的组织块在细胞间作用下迅速健康的生长。 3.一瓶细胞以此法处理不要超过3次。